CN107568056A - 一种快速选育苹果早花早果砧木的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于植物育种领域，具体涉及一种苹果早花早果砧木的快速选育方法，包括：(1)杂交育种后代的获得；(2)苹果早花早果砧木的初选(3)苹果早花早果砧木的区域试验。利用该方法极大缩短育种周期3‑5年。

Description

一种快速选育苹果早花早果砧木的方法

技术领域

本发明属于植物育种领域，具体涉及一种苹果早花早果砧木的快速选育方法。

背景技术

优良的苹果砧木是苹果优质高产的基础。苹果砧木的育种周期很长，需要在保存该杂交后代母体的前提下，以压条、扦插手段观察其生根性，易生根这者方可进入下一阶段的早花早果性的区域试验，只这一初选过程至少需要3年时间。在完成生根性初步筛选后，要继续繁殖易生根者，每个后代的数量50以上，方可继续下阶段的区域试验，这一繁殖过程至少3年时间。同时，一个普通的杂交后代群体是非常庞大的，要对每个后代完成生根性的观察试验，需要占用大片的土地资源，耗费大量的人力物力。杂交后代个体的生根性观察和繁殖问题是苹果早花早果砧木育种的关键难题，亟需一种快速选育苹果早花早果优良砧木的方法。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种快速选育苹果早花早果优良砧木的方法，包括如下步骤：

(1)杂交育种后代的获得

1)父本花粉的收集：在苹果初花期，采摘父本铃铛花，于室内收集花药，平铺于报纸室内阴凉无风处自然干燥，待花药干燥，花粉爆出后，小心收集花粉于干燥青霉素瓶中，并密封防止返潮；

2)杂交授粉：在晴朗无风天气，将母本铃铛花人工去雄后，以毛笔蘸取的方式将父本花粉授于母本柱头，套纸袋密封，3-5d后摘袋；

3)杂交种子的收集与播种：当年秋，采摘母本树上授粉果实，人工剥出种子，洗净自然晾干，12月底露天播种，自然条件层积；

4)定植：第2年春，待小苗地上部分生长至15-20cm，将其移栽定植，密度为0.5m*0.2m，统一肥水管理；

(2)苹果早花早果砧木的初选

定植当年秋，选取富士生长旺盛、粗壮无病害枝条作为接穗，以芽接的方式分别嫁接至各苹果砧木杂交后代；来年春，观察嫁接亲和性和富士的开花结果情况；

(3)苹果早花早果砧木区域试验

在嫁接富士后的第二年春，对所有砧木的根部萌孽或萌发侧枝保留，待观察至早花早果现象时，当即取萌蘖或侧枝新稍，置于冰盒带回实验室，建立高效快繁体系，生根定植后统一肥水管理，3个月后即可获得一批早花早果砧木，嫁接相应品种后进行区域试验。

优选地，步骤(3)中所述的快繁体系的具体建立方法为：在超净工作台上将体外消毒得到的新梢接种到接种培养基中，3d后，选取无褐变、无污染、生长势较强的无菌苗转移至新鲜接种培养基中，每20d继代一次，继代3次后，获得足够多的砧木组培苗，将上述组培苗采用解剖镜下剥取生长点的方式脱毒，并将剥取的生长点转接至上述接种培养基中继代培养，10代后即可获得大量的砧木脱毒苗，将继代生长20d的砧木脱毒苗，剪取5cm左右的茎尖，置于生根培养基中诱导生根，后驯化移栽到苗床。

优选地，所述接种培养基为：MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L，所述生根培养基为：MS+NAA 0.5mg/L。

优选地，所述驯化移栽到苗床的具体步骤为：生根培养15d后将生根苗移栽至72孔穴盘，基质为体积比草炭∶蛭石∶珍珠岩＝4∶4∶2，并覆膜遮阴，20d后逐渐增加光照和通风时间，直至完全适应外界环境。

优选地，驯化移栽到苗床后还包括肥水管理的步骤，所述肥水管理具体为：1)定植：待驯化移栽苗长出1-2片新叶后，大水漫灌一次，2-3d后，将苗带土球从穴盘中取出，移栽至大田，定苗距离为10-15cm，移栽选择在阴天或者傍晚进行，栽后立即灌水；2)水分管理以干透浇透为主，结合浇水，将尿素、磷酸二氢钾、硫酸铵按照质量比2∶1∶1的比例均匀施于地面，每亩施用20-25kg，每月施用一次。

本发明的有益效果是：极大的缩短苹果早花早果优良砧木选育周期，为苹果产业体系的快速成果转化作出贡献。

附图说明

图1：定植图

具体实施方式

下面更详细地描述本发明的具体实施例。应当理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本发明，并且能够将本发明的范围完整的传达给本领域的技术人员。

如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本发明的较佳实施方式，然所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本发明的范围。本发明的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。

实施例1：

一种苹果早花早果砧木快速投入生产的栽培方法，包括如下步骤：

(1)杂交育种后代的获得

1)父本花粉的收集：2000年春，在苹果初花期，采摘圆叶海棠铃铛花，于室内收集花药，平铺于报纸室内阴凉无风处自然干燥，待花药干燥，花粉爆出后，小心收集花粉于干燥青霉素瓶中，并密封防止返潮；

2)杂交授粉：同年，在晴朗无风天气，将海红铃铛花人工去雄后，以毛笔蘸取的方式将父本花粉授于母本海红铃铛花柱头，套纸袋密封，3-5d后摘袋；

3)杂交种子的收集与播种：当年秋，采摘母本树上授粉果实，人工剥出种子，洗净自然晾干，12月底露天播种，自然条件层积；

4)定植：2001年，待小苗地上部分生长至15-20cm，将其移栽定植，密度为0.5m*0.2m，统一肥水管理；

(2)早花早果苹果砧木的初选

2001年秋，选取富士生长旺盛、粗壮无病害枝条作为接穗，以芽接的方式分别嫁接至各苹果砧木杂交后代；2002春，观察富士的开花结果；

(3)苹果早花早果砧木区域试验

2002年春，对所有砧木的根部萌孽或萌发侧枝保留，待观察至早花早果现象时，当即取萌蘖或侧枝新稍，置于冰盒带回实验室，建立高效快繁体系，生根定植后统一肥水管理，3个月后即可投入生产使用，并进行区域试验(2002-2004)。

所述快繁体系的具体建立方法为：在超净工作台上将体外消毒得到的新梢接种到接种培养基中，3d后，选取无褐变、无污染、生长势较强的无菌苗转移至新鲜接种培养基中，每20d继代一次，继代3次后，获得足够多的砧木组培苗，将上述组培苗采用解剖镜下剥取生长点的方式脱毒，并将剥取的生长点转接至上述接种培养基中继代培养，10代后即可获得大量的砧木脱毒苗，将继代生长20d的砧木脱毒苗，剪取5cm左右的茎尖，置于生根培养基中诱导生根，后驯化移栽到苗床。

所述接种培养基为：MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L，所述生根培养基为：MS+NAA0.5mg/L。

所述驯化移栽到苗床的具体步骤为：生根培养15d后将生根苗移栽至72孔穴盘，基质为体积比草炭∶蛭石∶珍珠岩＝4∶4∶2，并覆膜遮阴，20d后逐渐增加光照和通风时间，直至完全适应外界环境。

驯化移栽到苗床后还包括肥水管理的步骤，所述肥水管理具体为：1)定植：待驯化移栽苗长出1-2片新叶后，大水漫灌一次，2-3d后，将苗带土球从穴盘中取出，移栽至大田，定苗距离为10-15cm，移栽选择在阴天或者傍晚进行，栽后立即灌水；2)水分管理以干透浇透为主，结合浇水，将尿素、磷酸二氢钾、硫酸铵按照质量比2∶1∶1的比例均匀施于地面，每亩施用20-25kg，每月施用一次。

传统选育方法：2001年秋，分别取各杂交后代(编号)的一年生健壮无病害接穗，以芽接的方式统一嫁接至平邑甜茶，每个编号重复数量为20。2002年秋末冬初，苹果枝叶正常生长落叶后，从各编号树上剪取一年生壮枝条，枝条粗细在1cm左右，沙藏。2003年惊蛰开春(天暖)后，把沙藏的苹果枝条取出，用果树修剪成含有4-5个芽，长度为10-15cm(厘米)的短枝条，扦插至土壤中，株距为15cm。统一水肥管理，观察其生根性。因该方法影响因素过多，至少需连续观察3年(2005)。

将初步筛选的生根性良好的编号，再次完成扦插繁殖(2005-2008)，使得各编号数量达50以上，统一嫁接相应品种进行区域试验(2008-2010)，如表1所示。

表1不同苹果早花早果选育方法的比较

因此，传统苹果早花早果优良砧木的育种技术，杂交后，需在保存杂种个体的前提下，花费3-5年通过扦插、压条等无性繁殖方式获得该杂种个体，分别嫁接富士品种后鉴定该个体的早花早果性，入选后再次花费3-5年时间繁殖该个体到相当数量进行区域试验选种，极大的浪费土地资源和育种时间，是阻碍苹果体系成果转化的一大难题。本申请与现阶段技术相比，在实生杂种定植第2年即可完成嫁接富士品种早花早果性验证，同时在组培快繁技术的辅助下，3个月后即可获得相当数量该杂种砧木，第二年即可进行大量的区域试验，极大的缩短了育种周期和生产投入周期，为加快苹果产业体系的成果转化作出巨大贡献。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (5)

1.一种苹果早花早果砧木的快速选育方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)杂交育种后代的获得：

1)父本花粉的收集：在苹果初花期，采摘父本铃铛花，于室内收集花药，平铺于报纸室内阴凉无风处自然干燥，待花药干燥，花粉爆出后，小心收集花粉于干燥青霉素瓶中，并密封防止返潮；

2)杂交授粉：在晴朗无风天气，将母本铃铛花人工去雄后，以毛笔蘸取的方式将父本花粉授于母本柱头，套纸袋密封，3-5d后摘袋；

3)杂交种子的收集与播种：当年秋，采摘母本树上授粉果实，人工剥出种子，洗净自然晾干，12月底露天播种，自然条件层积；

4)定植：第2年春即整个育种过程的第2年，待小苗地上部分生长至15-20cm，将其移栽定植，密度为0.5m*0.2m，统一肥水管理；

(2)苹果早花早果苹果砧木的初选：

定植当年秋，选取富士生长旺盛、粗壮无病害枝条作为接穗，以芽接的方式分别嫁接至各苹果砧木杂交后代；来年春，观察富士的开花结果情况；

(3)苹果早花早果砧木区域试验：

在嫁接富士后的第2年春即整个育种过程的第3年，对所有砧木的根部萌孽或萌发侧枝保留，待观察至该砧木上嫁接的富士接穗有早花早果现象时，当即取该砧木的萌蘖或侧枝新稍，置于冰盒带回实验室，建立高效快繁体系，生根定植后统一肥水管理，第2年即整个育种过程的第4年即可嫁接其它苹果品种，进行区域试验。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的快繁体系的具体建立方法为：在超净工作台上将体外消毒得到的新梢接种到接种培养基中，3d后，选取无褐变、无污染、生长势较强的无菌苗转移至新鲜接种培养基中，每20d继代一次，继代3次后，获得足够多的砧木组培苗，将上述组培苗采用解剖镜下剥取生长点的方式脱毒，并将剥取的生长点转接至上述接种培养基中继代培养，10代后即可获得大量的砧木脱毒苗，将继代生长20d的砧木脱毒苗，剪取5cm左右的茎尖，置于生根培养基中诱导生根，后驯化移栽到苗床。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述接种培养基为：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L，所述生根培养基为：MS+NAA 0.5mg/L。

4.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述驯化移栽到苗床的具体步骤为：生根培养15d后将生根苗移栽至72孔穴盘，基质为体积比草炭∶蛭石∶珍珠岩＝4∶4∶2，并覆膜遮阴，20d后逐渐增加光照和通风时间，直至完全适应外界环境。

5.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，驯化移栽到苗床后还包括肥水管理的步骤，所述肥水管理具体为：1)定植：待驯化移栽苗长出1-2片新叶后，大水漫灌一次，2-3d后，将苗带土球从穴盘中取出，移栽至大田，定苗距离为10-15cm，移栽选择在阴天或者傍晚进行，栽后立即灌水；2)水分管理以干透浇透为主，结合浇水，将尿素、磷酸二氢钾、硫酸铵按照质量比2∶1∶1的比例均匀施于地面，每亩施用20-25kg，每月施用一次。