CN107557321A - 源自枣树链霉菌属jl‑1、其活性物及制备方法和应用 - Google Patents
源自枣树链霉菌属jl‑1、其活性物及制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了源自枣树链霉菌属JL‑1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M2017509；本发明还提供了链霉菌属JL‑1活性物以及该活性物的制备方法；本发明中的活性物能有效抑制细菌，且能用于制备抗菌药物和烯脂酰ACP还原酶抑制剂。
Description
技术领域
本发明属于农业微生物技术领域，具体涉及源自枣树链霉菌属 JL-1、其活性物及制备方法和应用。
背景技术
由于一些细菌会对现有的抗生素产生耐药性，并且还存在令全球恐慌的超级耐药细菌，因而严重威胁人类的健康。自上世纪60年代以来，虽然科研工作者在长期的探索研究中努力寻找作用于新靶位点的新型抗生素，但是其研究成果依然是有限的。
目前，尽管数以百计的细菌必需蛋白已经被鉴定可作为潜在药物作用靶点，但其中仅有少数细菌能作为临床治疗药物的靶点。研究者们通过对已有抗生素的骨架进行化学修饰来提高其活性，采用这种方法已经开发出了一些有效的抗生素。然而，通过化学修饰法却很难开发出更为有效的抗生素。为了适应临床医学的需要，尤其是克服细菌耐药性现象的出现，开发具有新的作用方式的抗生素化学骨架对于挽救生命是至关重要的。
由于II型脂肪酸合成是细菌细胞生存的必需品，因而它是新抗生素的潜在靶点。细菌脂肪酸合成途径与哺乳动物的相比，虽然生化反应过程相似，但是二者在参与催化反应的酶结构和氨基酸序列上没有同源性，属不同的脂肪酸合成酶系。细菌和哺乳动物之间脂肪酸合成系统的显著差异以及脂肪酸在细胞中所扮演的特殊的角色，使该系统成为非常有吸引力的药物筛选靶点。脂肪酸合成途径中执行循环反应第四步的烯脂酰ACP还原酶是细菌脂肪酸合成所必需的，也是筛选抗菌药物的重要靶点。烯脂酰ACP还原酶催化Ⅱ型脂肪酸合成循环反应的最后一个限速步骤反-2-烯脂酰ACP的还原。在不同细菌中，已经发现了4种不同烯脂酰ACP还原酶，FabI、FabL、FabK和FabV，如表1所示。
表1细菌烯脂酰ACP还原酶的多样性
| 种类 | 辅因子 | 活性中心序列 | SDRs | 三氯生作用 | 分布 |
| FabI | NAD(P)H | Tyr-(Xaa)6-Lys | 是 | 敏感 | 大多数细菌 |
| FabL | NADPH | Tyr-(Xaa)6-Lys | 是 | 不敏感 | 枯草芽孢杆菌 |
| FabK | NADH | FMN结合序列 | 否 | 不敏感 | 肺炎链球菌、粪肠球菌等 |
| FabV | NADH | Tyr-(Xaa)8-Lys | 是 | 不敏感 | 霍乱弧菌、绿脓杆菌等 |
注：SDRs为短碳链醇脱氢酶/还原酶超家族成员。
烯脂酰ACP还原酶已被证明是在市场上销售的抗菌剂三氯生 (triclosan)和异烟肼(isoniazid)的作用靶点。虽然烯脂酰ACP还原酶的许多其它抑制剂已经被报道，但是到目前为止市场上还没有出现以烯脂酰ACP还原酶为药物靶点的新的已商品化的抗菌剂。
目前，从微生物中已经发现了22500种生物活性物质，其中70％的物种都是由放线菌产生。放线菌是抗生素的主要来源，且60％的抗生素都是由放线菌产生，其中主要为链霉菌属，如链霉素、金霉素、四环素、巴龙霉素、丝裂霉素等重要抗生素。链霉菌一直被认为是产生各种抗生素的主要来源。根据遗传多样性分析表明，链霉菌属能产生上万种抗生素，但是，目前已经发现的抗生素种类比较少。随着微生物功能基因组学的深入研究，越来越多的新型药物靶点将被鉴定并建立相应药物筛选模型，因此，将会发现更多的产自链霉菌属的抗生素。
发明内容
本发明的第一目的是提供源自枣树链霉菌属JL-1，用于分离抗生素。
本发明的第二目的是提供该链霉菌属JL-1活性物。
本发明的第三目的在于提供上述链霉菌属JL-1活性物的制备方法。
本发明的第四目的是提供该活性物在抗菌药物和烯脂酰ACP还原酶抑制剂中的应用。
本发明所采用的第一种技术方案是，源自枣树链霉菌属JL-1保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编 430072，保藏编号：CCTCC No：M2017509，保藏日期：2017.9.14。
本发明所采用的第二种技术方案是，该链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1，种子液的制备；
将链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1菌株接入种子培养基中，在 25℃～30℃、150r/min～210r/min振荡条件下培养3d～4d，得到种子液；
步骤2，发酵培养；
将步骤1得到的种子液接入发酵培养基中，接种量为5％～10％，在25℃～30℃、150r/min～210r/min振荡条件下培养20d～25d，得到发酵液；
步骤3，活性物的制备；
步骤3.1、将步骤2中得到的发酵液超声破碎后，过滤除去菌体，用乙酸乙酯萃取发酵滤液，浓缩挥干后，得到浸膏A；
步骤3.2、将步骤3.1中过滤除去的菌体进行冷冻干燥，之后放入甲醇溶液中浸泡、过滤后除去菌体，将滤液浓缩挥干后，加入水溶液，用乙酸乙酯萃取滤液，浓缩挥干后，得到浸膏B；
步骤3.3、将步骤3.1中的浸膏A和步骤3.2中的浸膏B混合，即为活性物。
本发明第二种技术方案的特点还在于，
步骤1中，种子培养基由以下重量配比的物质组成：可溶性淀粉 20g/L～40g/L，硝酸钾1.0g/L～1.5g/L，氯化钠0.5g/L～1.0g/L，七水硫酸镁0.5g/L～1.0g/L，三水磷酸氢二钾0.5g/L～1.0g/L，七水硫酸亚铁0.01g/L～0.05g/L，pH为7.1～7.3，溶剂为水。
步骤2中，发酵培养基由以下重量配比的物质组成：碳源2.5g/L～ 5.0g/L，丙酮酸钠2g/L～4g/L，硝酸钾0.25g/L～1g/L，脯氨酸1g/L～ 2g/L，七水硫酸镁0.2g/L～0.4g/L，三水磷酸氢二钾0.2g/L～0.4g/L，无水氯化钙0.5g/L～1.0g/L，七水硫酸亚铁0.01g/L～0.05g/L，pH为 7.1～7.3，溶剂为水；
步骤2中，碳源为燕麦粉、黄豆饼粉、大米粉或纤维素中的任意一种。
本发明所采用的第三种技术方案是，该活性物在抗菌药物和烯脂酰ACP还原酶抑制剂中的应用。
本发明的有益效果是：提供了一株作用靶标为烯脂酰ACP还原酶FabI的具有抗细菌作用的放线菌，还提供了利用该菌株发酵生产抗菌活性物质的方法，为新药研发奠定了基础。
附图说明
图1是本发明链霉菌属JL-1在高氏I号固体培养基上的菌落照片；
图2是本发明链霉菌属JL-1在胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)固体培养基上的菌落照片；
图3是本发明链霉菌属JL-1活性物抑制细菌FabI效果图。
图中，1.携带空质粒pHSG575的大肠杆菌野生菌MG1655，2. 携带重组质粒pHSG575-SpfabK的大肠杆菌野生菌MG1655(该菌异源表达肺炎链球菌的fabK)，3.大肠杆菌野生菌MG1655 (pHSG575-SpfabK)，并在平板中添加3μg/mL的三氯生抗菌剂，4.携带重组质粒pHSG575-PafabV的大肠杆菌野生菌MG1655(该菌异源表达铜绿假单胞菌的fabV)，5.大肠杆菌野生菌MG1655 (pHSG575-PafabV)，并在平板中添加3μg/mL的三氯生抗菌剂，6.铜绿假单胞菌野生菌PAO1，7.敲除铜绿假单胞菌野生菌PAO1的fabI 基因的突变株PAO-I，8.敲除铜绿假单胞菌野生菌PAO1的fabV基因的突变株PAO-V。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
本发明源自枣树链霉菌属JL-1的筛选分离过程为：
链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1是从陕北地区的枣树中分离得到；将采集到的枣树枝条在120℃下加热1h后，剪碎，接种在含有 775μg/mL重铬酸钾和2μg/mL青霉素的100mL筛选平板上，倒置，在28℃下恒温培养，待菌落长出后，经过三次划线后，分离出单菌落，将得到的纯菌株接种到斜面筛选培养基上，即为链霉菌属JL-1；其中筛选培养基由以下重量配比的物质组成：纤维素2.5g/L，丙酮酸钠2g/L，硝酸钾0.25g/L，脯氨酸1g/L，七水硫酸镁0.2g/L，三水磷酸氢二钾0.2g/L，无水氯化钙0.5g/L，七水硫酸亚铁0.01g/L，琼脂粉12g/L，pH为7.2，溶剂为水。
本发明链霉菌属JL-1的特征为：
(1)形态特征：
链霉菌属JL-1在高氏I号固体培养基上的菌落密集成褶皱，如图 1所示，起初呈白色，后变为灰色，绒毛状；链霉菌属JL-1在胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)固体培养基上的菌落，如图2所示，较小而不蔓延，起初呈圆形、光平、白色，后变为黄色、密集成褶皱，表面呈紧密的绒毛状、坚实、干燥，质地致密而不易挑起；其中，图1和图2 本为彩色图，为了专利申报，将其改为灰度图。
(2)16S rDNA序列鉴定：
用于扩增细菌16S rDNA的引物分别为：
27F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'；
1492R：5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'；
PCR扩增反应条件为：94℃预变性4min，94℃30s，55℃1min、 72℃90s，30个循环；72℃延伸10min；PCR扩增结束后，将PCR 产物进行0.8％琼脂糖凝胶电泳分析；将经胶回收柱纯化约1500bp左右的PCR产物与载体pMD19-T连接后转化大肠杆菌DH5a感受态细胞；挑取阳性转化子送至上海生工测定；获得的16S rDNA序列。
通过GenBank的Blast程序进行相似性比对分析，发现与链霉菌属(Streptomycessp.)菌株的同源性最高，相似性均大于99％，因此本发明菌株鉴定为链霉菌属，并命名为链霉菌(Streptomyces sp.) JL-1。
实施例2
该链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1，种子液的制备；
将链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1菌株接入种子培养基中，在 28℃、210r/min振荡条件下培养3d，得到种子液；其中，该种子培养基由以下重量配比的物质组成：可溶性淀粉20.0g/L，硝酸钾1g/L，氯化钠0.5g/L，七水硫酸镁0.5g/L，三水磷酸氢二钾0.5g/L，七水硫酸亚铁0.01g/L，pH为7.2，溶剂为水；
步骤2，发酵培养；
将步骤1得到的种子液接入发酵培养基中，接种量为7％，在 28℃、180r/min振荡条件下培养20d，得到发酵液；其中，发酵培养基由以下重量配比的物质组成：纤维素2.5g/L，丙酮酸钠2g/L，硝酸钾0.25g/L，脯氨酸1g/L，七水硫酸镁0.2g/L，三水磷酸氢二钾0.2g/L，无水氯化钙0.5g/L，七水硫酸亚铁0.01g/L，pH为7.2，溶剂为水；
步骤3，活性物的制备；
步骤3.1、将步骤2中得到的发酵液超声破碎后，过滤除去菌体，用乙酸乙酯萃取发酵滤液，浓缩挥干后，得到浸膏A；
步骤3.2、将步骤3.1中过滤除去的菌体进行冷冻干燥，之后放入甲醇溶液中浸泡、过滤后除去菌体，将滤液浓缩挥干，加入水溶液，用乙酸乙酯萃取滤液，浓缩挥干后，得到浸膏B；
步骤3.3、将步骤3.1中的浸膏A和步骤3.2中的浸膏B混合，即为活性物。
实施例3
该链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1，种子液的制备；
将链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1菌株接入种子培养基中，在 25℃、150r/min振荡条件下培养4d，得到种子液；其中，该种子培养基由以下重量配比的物质组成：可溶性淀粉40g/L，硝酸钾1.5g/L，氯化钠1.0g/L，七水硫酸镁1.0g/L，三水磷酸氢二钾1.0g/L，七水硫酸亚铁0.05g/L，pH为7.3，溶剂为水；
步骤2，发酵培养：
将步骤1得到的种子液接入发酵培养基中，接种量为7％，在 30℃、150r/min振荡条件下培养25d，得到发酵液；其中，发酵培养基由以下重量配比的物质组成：大米粉2.5g/L，丙酮酸钠4g/L，硝酸钾1g/L，脯氨酸2g/L，七水硫酸镁0.4g/L，三水磷酸氢二钾0.4g/L，无水氯化钙1.0g/L，七水硫酸亚铁0.05g/L，pH为7.3，溶剂为水；
步骤3，活性物的制备；
步骤3.1、将步骤2中得到的发酵液超声破碎后，过滤除去菌体，用乙酸乙酯萃取发酵滤液，浓缩挥干后，得到浸膏A；
步骤3.2、将步骤3.1中过滤除去的菌体进行冷冻干燥，之后放入甲醇溶液中浸泡、过滤后除去菌体，将滤液浓缩挥干，加入水溶液，用乙酸乙酯萃取滤液，浓缩挥干后，得到浸膏B；
步骤3.3、将步骤3.1中的浸膏A和步骤3.2中的浸膏B混合，即为活性物。
实施例4
链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物对细菌中烯脂酰ACP 还原酶的抑制作用检测，采用平板敏感差异法和IC50测定法。
方法一，平板敏感差异法，该方法可参照中国专利CN 201410051932.9(细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的筛选方法)。
取八种含不同试验菌的LB平板，分别为：含大肠杆菌野生菌MG1655(pHSG575)的LB平板、含大肠杆菌野生菌MG1655 (pHSG575-SpfabK)的LB平板、含大肠杆菌野生菌MG1655(pHSG575-SpfabK)和三氯生抗菌剂的LB平板、含大肠杆菌野生菌 MG1655(pHSG575-PafabV)的LB平板、含大肠杆菌野生菌MG1655 (pHSG575-PafabV)和三氯生抗菌剂的LB平板、含铜绿假单胞菌野生菌PAO1的LB平板、含铜绿假单胞菌突变株PAO-I(即敲除铜绿假单胞菌野生菌PAO1的fabI基因)的LB平板及含铜绿假单胞菌突变株PAO-V(即敲除铜绿假单胞菌野生菌PAO1的fabV基因)的LB 平板。
将链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1菌株的活性物用甲醇溶解，采用纸片法，以上述的检定平板进行抑菌活性分析结果，如图3所示，仅含大肠杆菌野生菌MG1655(pHSG575)和含铜绿假单胞菌突变株 PAO-V(即敲除铜绿假单胞菌野生菌PAO1的fabV基因)的LB平板上出现抑菌圈，而其他平板上均没有抑菌现象，由此可知，链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1菌株的活性物通过特异抑制烯脂酰ACP还原酶FabI而显示出抗菌活性。
方法二，链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物的IC50测定：
该实验在96孔板中进行，链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物用DMSO进行溶解，以豆蔻酰-CoA为底物，添加一定量的酶蛋白、NADH和活性物，体外重建烯脂酰ACP还原酶催化的还原反应，如表1及表2所示，用酶标仪测量反应过程中NADH的吸光度OD340的变化，每10sec读数一次，记录数据，每组数据重复3次，以时间为横坐标，OD340为纵坐标，绘制曲线，拟合出线性回归方程，计算斜率。
活性物对烯脂酰ACP还原酶的抑制活性(％)＝100×[1-(添加发酵液提取物的斜率/空白对照的斜率)]。IC50则表示抑制了烯脂酰ACP 还原酶50％活性时活性物的浓度。以活性物的浓度为横坐标，抑制活性为纵坐标绘制曲线，通过该曲线可求得IC50。
表1烯脂酰ACP还原酶FabI或FabV的酶活体系
表2烯脂酰ACP还原酶FabK的酶活体系
如表3所示，链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活取物对铜绿假单胞菌FabI的半抑制率浓度IC50为2.3μg/mL，而同样条件下使用最高的测试浓度，该活性物也对铜绿假单胞菌FabV和肺炎链球菌的 FabK没有明显的抑制作用(IC50值>500μg/mL)；这表明链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物仅是选择性的抑制烯脂酰ACP还原酶FabI，而对另外两种烯脂酰ACP还原酶FabV和FabK无效；该测试结果与平板敏感差异法的测试结果是一致的。
表3活性物对烯脂酰ACP还原酶酶活的抑制作用(IC50，μg/mL)
注：PaFabI：铜绿假单胞菌FabI，PaFabV：铜绿假单胞菌FabV，SpFabK：肺炎链球菌FabK。
以上实验结果表明，链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物对细菌中烯脂酰ACP还原酶FabI有抑制作用，可用于制备烯脂酰ACP 还原酶FabI抑制剂。
实施例5
链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物的抗菌试验测试：
将链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物用甲醇溶解，采用纸片法，以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌PAO-V、铜绿假单胞菌PAO-I、肺炎链球菌和酿酒酵母为指示菌，进行抑菌活性分析。
如表4所示，链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物对细胞中仅存在的烯脂酰ACP还原酶FabI的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌和铜绿假单胞菌PAO-V等均具有很强的抑菌活性，而对酿酒酵母和细胞中存在其他烯脂酰ACP还原酶的铜绿假单胞菌PAO-I(存在FabV)、肺炎链球菌(存在FabK)无抑菌效果，该测试结果表明链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物的抗菌范围仅限于细胞中存在的烯脂酰ACP还原酶FabI的细菌，而细胞中存在的多数细菌都属于这一类。
以上实验结果表明，链霉菌属(Streptomyces sp.)JL-1活性物可用于制备抗菌药物，如可制备治疗病原细菌感染的医药或兽药等。
表4活性物对三种指示菌的抑制作用
注：+++表示有很强抑菌活性，-表示无抑菌活性。
序列表（SEQUENCE LISTING）
<110> 延安大学
<120> 源自枣树链霉菌属JL-1、其活性物及制备方法和应用
<130> 2017.09.11
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1486
<212> DNA
<213> Streptomyces sp. JL-1
<400> 1
gagtttgatc ctggctcagg acgaacgctg gcggcgtgct taacacatgc aagtcgaacg 60
atgaagcctt tcggggtgga ttagtggcga acgggtgagt aacacgtggg caatctgccc 120
ttcactctgg gacaagccct ggaaacgggg tctaataccg gataacactc tgtcccgcat 180
ggggcggggt taaaagctcc ggcggtgaag gatgagcccg cggcctatca gcttgttggt 240
ggggtaatgg cctaccaagg cgacgacggg tagccggcct gagagggcga ccggccacac 300
tgggactgag acacggccca gactcctacg ggaggcagca gtggggaata ttgcacaatg 360
ggcgaaagcc tgatgcagcg acgccgcgtg agggatgacg gccttcgggt tgtaaacctc 420
tttcagcagg gaagaagcga aagtgacggt acctgcagaa gaagcgccgg ctaactacgt 480
gccagcagcc gcggtaatac gtagggcgca agcgttgtcc ggaattattg ggcgtaaaga 540
gctcgtaggc ggcttgtcac gtcggatgtg aaagcccggg gcttaacccc gggtctgcat 600
tcgatacggg ctagctagag tgtggtaggg gagatcggaa ttcctggtgt agcggtgaaa 660
tgcgcagata tcaggaggaa caccggtggc gaaggcggat ctctgggcca ttactgacgc 720
tgaggagcga aagcgtgggg agcgaacagg attagatacc ctggtagtcc acgccgtaaa 780
cgttgggaac taggtgttgg cgacattcca cgtcgtcggt gccgcagcta acgcattaag 840
ttccccgcct ggggagtacg gccgcaaggc taaaactcaa aggaattgac gggggcccgc 900
acaagcagcg gagcatgtgg cttaattcga cgcaacgcga agaaccttac caaggcttga 960
catataccgg aaagcatcag agatggtgcc ccccttgtgg tcggtataca ggtggtgcat 1020
ggctgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaaccctt 1080
gttctgtgtt gccagcatgc ccttcggggt gatggggact cacaggagac tgccggggtc 1140
aactcggagg aaggtgggga cgacgtcaag tcatcatgcc ccttatgtct tgggctgcac 1200
acgtgctaca atggccggta caatgagctg cgatgccgcg aggcggagcg aatctcaaaa 1260
agccggtctc agttcggatt ggggtctgca actcgacccc atgaagtcgg agttgctagt 1320
aatcgcagat cagcattgct gcggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc 1380
acgtcacgaa agtcggtaac acccgaagcc ggtggcccaa ccccttgtgg gagggagctg 1440
tcgaaggtgg gactggcgat tgggacgaag tcgtaacaag gtaacc 1486
Claims (7)
1.源自枣树链霉菌属JL-1保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M2017509。
2.一种活性物，其特征在于，该活性物是在权利要求1所述的链霉菌属JL-1中提取。
3.一种如权利要求2所述的活性物的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
步骤1，种子液的制备；
将链霉菌属JL-1菌株接入种子培养基中，在25℃～30℃、150r/min～210r/min振荡条件下培养3d～4d，得到种子液；
步骤2，发酵培养：
将步骤1得到的种子液接入发酵培养基中，接种量为5％～10％，在25℃～30℃、150r/min～210r/min振荡条件下培养20d～25d，得到发酵液；
步骤3，活性物的制备；
步骤3.1、将步骤2中得到的发酵液超声破碎后，过滤除去菌体，用乙酸乙酯萃取发酵滤液，浓缩挥干后，得到浸膏A；
步骤3.2、将步骤3.1中过滤除去的菌体进行冷冻干燥，之后放入甲醇溶液中浸泡、过滤后除去菌体，将滤液浓缩挥干后，加入水溶液，用乙酸乙酯萃取滤液，浓缩挥干后，得到浸膏B；
步骤3.3、将步骤3.1中的浸膏A和步骤3.2中的浸膏B混合，即为活性物。
4.根据权利要求3所述的一种活性物的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，种子培养基由以下重量配比的物质组成：可溶性淀粉20g/L～40g/L，硝酸钾1.0g/L～1.5g/L，氯化钠0.5g/L～1.0g/L，七水硫酸镁0.5g/L～1.0g/L，三水磷酸氢二钾0.5g/L～1.0g/L，七水硫酸亚铁0.01g/L～0.05g/L，pH为7.1～7.3，溶剂为水。
5.根据权利要求3所述的一种活性物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，发酵培养基由以下重量配比的物质组成：碳源2.5g/L～5.0g/L，丙酮酸钠2g/L～4g/L，硝酸钾0.25g/L～1g/L，脯氨酸1g/L～2g/L，七水硫酸镁0.2g/L～0.4g/L，三水磷酸氢二钾0.2g/L～0.4g/L，无水氯化钙0.5g/L～1.0g/L，七水硫酸亚铁0.01g/L～0.05g/L，pH为7.1～7.3，溶剂为水。
6.根据权利要求5所述的一种活性物的制备方法，其特征在于，所述碳源为燕麦粉、黄豆饼粉、大米粉或纤维素中的任意一种。
7.一种如权利要求2所述的活性物，其特征在于，该活性物在抗菌药物和烯脂酰ACP还原酶抑制剂中的应用。
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