CN107532200B - 用于对pkd1基因及pkd2基因的外显子进行扩增的引物组及方法 - Google Patents

用于对pkd1基因及pkd2基因的外显子进行扩增的引物组及方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供高效地扩增PKD1基因及PKD2基因的外显子的手段。本发明还提供能够在单一的PCR循环条件下对PKD1基因及PKD2基因的全部外显子进行扩增的引物组。

Description

用于对PKD1基因及PKD2基因的外显子进行扩增的引物组及 方法
技术领域
本发明涉及用于对PKD1基因及PKD2基因的外显子进行扩增的引物组(primerset)及方法等。
背景技术
多囊肾病(Polycystic Kidney Disease；PKD)是由于在肾脏产生多个囊肿而引起肾体积的增加及肾功能的下降、最终导致需要进行透析的肾功能衰竭的疾病。PKD是高频率的遗传性疾病，可分为常染色体显性多囊肾病(Autosomal Dominant PKD；ADPKD)和常染色体隐性多囊肾病(Autosomal Recessive PKD；ARPKD)，但ARPKD非常罕见。有报道称在每300人至500人中就有1人是罹患ADPKD的病人(非专利文献1)，而也有报道称，在医疗机构接受治疗的ADPKD患者人数在每2,000人至4,000人中为1人以下(非专利文献2及3)。一生中对自身罹患ADPKD的情况毫不知情、未能接受适宜治疗的患者众多(非专利文献3)，因此，期望更合适的诊断能得到普及。
作为ADPKD的致病基因，鉴定出了PKD1基因(非专利文献4)及PKD2基因(非专利文献5)这2种基因，并报道了由PKD1基因突变所致的患者为85％～90％，由PKD2突变所致的患者为10％～15％(非专利文献6)。PKD1基因存在异常的患者的情况下，转向透析的年龄平均为53岁，PKD2基因存在异常的患者的情况下为63岁，相比之下，PKD1基因存在异常的患者的病情发展更快(非专利文献7)。PKD1基因及PKD2基因中存在的致病突变的种类及位置极为复杂，在各家系中均存在特征性致病突变(非专利文献8)。
目前，在对ADPKD的确诊中，实施了使用CT、MRI、超声波断层成像的图像诊断，根据能够在肾脏内确认的囊肿的数量而进行诊断。然而，该方法中，若未产生囊肿则无法诊断，因此，在形成多个囊肿之前，无法发现PKD基因突变携带者。认为若通过技术革新而营造出更容易利用PKD基因诊断的环境，则能够实现对尚未发病的PKD突变携带者的确诊辅助、通过鉴定发生突变的基因及区域来了解病情发展速度的不同。
作为对PKD1及PKD2基因的突变进行检测的方法，报道了下述方法：(1)使用了双脱氧链终止法(Sanger法)的突变检测(非专利文献9)；(2)使用了DHPLC(变性高效液相色谱)法的突变检测(非专利文献10)；(3)使用了核酸内切酶和DHPLC的突变检测(非专利文献11)；(4)使用了下一代测序仪(Next Generation Sequencer)的突变检测(非专利文献12)等。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1：Adult polycystic kidney disease in Ho ng Ko ng Chinese：anautopsy study.Chan KW.Pathology.，Vol.25，pp.229-232，1993.
非专利文献2：Polycystic kidney disease re-evaluated：a population-basedstudy.Davies F et al.Q J Med.Vol.79.pp.477-485.1991.
非专利文献3：Prevalence and renal prognosis of diagnosed autosomaldominant polycystic kidney disease in Japan.Higashihara E etal.Nephron.Vol.80.pp.421-427，1998.
非专利文献4：The polycystic kidney disease 1gene encodes a 14kbtranscript and lies within a duplicated region on chromosome 16.The EuropeanPolycystic Kidney Disease Consortium.Cell.Vol.77，pp.881-94，1994.
非专利文献5：PKD2，a gene for polycystic kidney disease that encodes anintegral membrane protein.Mochizuki T et al.Science.Vol.272，pp.1339-42，1996.
非专利文献6：The polycystic kidney disease 1(PKD1)gene encodes a novelprotein with multiple cell recognition domains.Hughes J et al.NatGenet.Vol.10.pp.151-160.1995.
非专利文献7：Linkage，clinical features，and prognosis of autosomaldominant polycystic kidney disease types 1 and 2.Torra R et al.J Am SocNephrol.Vol.7.pp.2142-2151.1996.
非专利文献8：A Complete mutation screen of the ADPKD genes byDHPLC.Rossetti S et al.Kidney International.Vol.61，pp.1588-1599，2002.
非专利文献9：Mutation analysis of the entire PKD1 gene：Genetic anddiagnostic implications.Rossetti S et al.The American Journal of HumanGenetics.Vol.68，pp.46-63，2001.
非专利文献10：Novel method for genomic analysis of PKD1 andPKD2mutations in autosomal dominant polycystic kidney disease.YC Tan etal.Human Mutation.Vol.30，p.264-273，2009.
非专利文献11：Identification of gene mutations in autosomal dominantpolycystic kidney disease through targeted resequenci ng.Rossetti S et al.JAm Soc Nephrol 23：915-933，2012.
非专利文献12：Genes homologous to the autosomal dominant polycystickidney disease genes(PKD1 and PKD2).Barbera Veldhuisen et al.European Journalof Human Genetics.Vol.7，p.860-872，June1999.
非专利文献13：A novel lo ng-ra nge PCR sequenci ng method for geneticanalysis of the entire PKD1 gene.Ying-Cai Tan et al.Journal of MolecularDiagnostics.Vol.14，No.4，July 2012.
发明内容
发明所要解决的课题
PKD1基因及PKD2基因均较长且庞大，分别存在46个外显子及15个外显子。另外，对于PKD1基因而言，存在6种与其序列的同源性极高的伪基因，因此，为了对PKD1基因及PKD2基因的外显子进行扩增，需要避开伪基因。此外，PKD1基因中存在GC含有率极高的区域。由于上述理由，迄今为止所报道的使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增的方法需要在多个不同的PCR条件下实施多个(例如，9个)独立的PCR(非专利文献13)。因此，获得全部外显子的扩增产物需要花费大量时间。因此，本发明的主要目的在于提供更高效地扩增PKD1基因及PKD2基因的外显子的手段。
用于解决课题的手段
为了解决上述课题，本申请的发明人反复进行了锐意研究，结果发现，通过以PKD1基因及PKD2基因的特定区域作为靶标来设计引物、并组合利用这些引物，可飞跃性地提高获得PKD1基因及PKD2基因的全部外显子的扩增产物的效率。基于上述见解及进一步的研究和改良，提供了以下内容所代表的发明。
项1.
引物组，其用于在单一的PCR循环条件下使PKD1基因及PDK2基因的全部外显子扩增。
项2.
如项1所述的引物组，其包括以下表1所示的引物对1～18。
[表1]
Figure BDA0001353572590000051
项3.
如项1或2所述的引物组，其中，各引物具有15～40个碱基的长度。
项4.
如项2或3所述的引物组，其中，
1F引物具有序列号1所示碱基序列的至少第15位～第29位的碱基序列，
1R引物具有序列号2所示碱基序列的至少第16位～第30位的碱基序列，
2F引物具有序列号3所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
2R引物具有序列号4所示碱基序列的至少第13位～第27位的碱基序列，
3F引物具有序列号5所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
3R引物具有序列号6所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
4F引物具有序列号7所示碱基序列的至少第6位～第20位的碱基序列，
4R引物具有序列号8所示碱基序列的至少第8位～第22位的碱基序列，
5F引物具有序列号9所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
5R引物具有序列号10所示碱基序列的至少第10位～第24位的碱基序列，
6F引物具有序列号11所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，
6R引物具有序列号12所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，
7F引物具有序列号13所示碱基序列的至少第21位～第35位的碱基序列，
7R引物具有序列号14所示碱基序列的至少第20位～第34位的碱基序列，
8F引物具有序列号15所示碱基序列的至少第16位～第30位的碱基序列，
8R引物具有序列号16所示碱基序列的至少第13位～第27位的碱基序列，
9F引物具有序列号17所示碱基序列的至少第21位～第35位的碱基序列，
9R引物具有序列号18所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
10F引物具有序列号19所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
10R引物具有序列号20所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
11F引物具有序列号21所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
11R引物具有序列号22所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
12F引物具有序列号23所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
12R引物具有序列号24所示碱基序列的至少第17位～第31位的碱基序列，
13F引物具有序列号25所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
13R引物具有序列号26所示碱基序列的至少第16位～第30位的碱基序列，
14F引物具有序列号27所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
14R引物具有序列号28所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，
15F引物具有序列号29所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
15R引物具有序列号30所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
16F引物具有序列号31所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
16R引物具有序列号32所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
17F引物具有序列号33所示碱基序列的至少第16位～第30位的碱基序列，
17R引物具有序列号34所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，
18F引物具有序列号35所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，及/或
18R引物具有序列号36所示碱基序列的至少第13位～第27位的碱基序列。
项5.
如项1～4中任一项所述的引物组，其中，各引物已经过冷冻干燥。
项6.
如项1～4中任一项所述的引物组，其中，各引物被包含于适合在PCR中使用的溶液中。
项7.
如项1～6中任一项所述的引物组，其中，单一的PCR循环条件包括62～80℃的退火温度及延伸反应温度。
项8.
试剂盒，其包含项1～7中任一项所述的引物组，所述试剂盒用于在单一的PCR循环条件下使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增。
项9.
在单一的PCR循环条件下使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增的方法，所述方法包括下述步骤：使用项1～7中任一项所述的引物组，以从被检体得到的基因组DNA作为模板，实施PCR。
项10.
如项9所述的方法，其中，所述PCR包含多个独立的PCR。
项11.
如项10所述的方法，其中，同时实施所述多个独立的PCR中的全部PCR。
项12.
测定被检体的PKD1基因及/或PKD2基因中有无突变的方法，所述方法包括对利用项9～11中任一项所述的方法得到的扩增产物的碱基序列进行确定的步骤。
项13.
对被检体有无多囊肾病发病风险或是否罹患多囊肾病进行判定的方法，所述方法基于利用项12所述的方法测得的PKD1基因及/或PKD2基因中有无突变而实施判定。
项E1.
项1～6中任一项所述的引物组的用途，其用于在单一的PCR循环条件下使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增。
项E2.
包含项1～6中任一项所述的引物组的试剂盒的用途，其用于在单一的PCR循环条件下使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增。
发明的效果
根据本发明，能够高效地使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增。优选地，能够在单一(或变化少)的PCR循环条件下使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子。例如，根据本发明，能够在一台PCR装置(热循环仪)中同时使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增。另外，根据本发明的优选实施方式，能够在单一的反应容器内同时实施使用了多个引物对的PCR，因此，能够更加高效且经济地使PKD1基因及PKD基因的外显子中必需的外显子扩增。此外，根据本发明，能够在避免伪基因的扩增的同时，进行PKD1基因及PKD2基因的外显子的扩增。因此，通过利用本发明，能够检测受试者的PKD1基因及PKD2基因中的突变的存在，及/或，基于该检测，高效地进行多囊肾病的发病的判断、或其风险的预测。
附图说明
图1是表示实施例的“多重PCR”项中采用的PCR循环条件的图。
图2示出了使用1％琼脂糖凝胶对通过多重PCR得到的扩增产物实施电泳而得到的电泳照片。对于使用引物混合物A、B、及C而得到的扩增产物，确认到2条条带。对于使用引物混合物E而得到的扩增产物，确认到3条条带。对于使用引物混合物D、F、及G而得到的扩增产物，由于包含2种大小相近的扩增产物，因此观察到2条条带。
图3-1是表示使用双脱氧链终止法确定出的区域1的部分序列与对应的伪基因序列的对比结果的图。所谓区域1，是指表3所示的引物对1所扩增的区域(Region)。序列从上方起依次为：针对通过多重PCR得到的扩增产物使用双脱氧链终止法而确定出的序列(外显子.1(R))、PKD1基因的参考序列(PKD1(R))、及3种PKD1伪基因的序列(PKD1P3(R)、PKD1P5(R)、PKD1P6(R))。(R)表示序列以反向排列。黑色箭头示出PKD1特异性碱基存在的位置。
图3-2是表示使用双脱氧链终止法确定出的区域2的部分序列与对应的伪基因序列的对比结果的图。所谓区域2，是指表3所示的引物对2所扩增的区域。序列从上方起依次为：针对通过多重PCR得到的扩增产物使用双脱氧链终止法而确定出的序列(外显子.6(R))、PKD1基因的参考序列(PKD1(R))、及6种PKD1伪基因的序列(PKD1P1(R)～PKD1P6(R))。(R)表示序列以反向排列。黑色箭头示出PKD1特异性碱基存在的位置。
图3-3是表示使用双脱氧链终止法确定出的区域3的部分序列与对应的伪基因序列的对比结果的图。所谓区域3，是指表3所示的引物对3所扩增的区域。序列从上方起依次为：针对通过多重PCR得到的扩增产物使用双脱氧链终止法而确定出的序列(外显子11A(R))、PKD1基因的参考序列(PKD1(R))、及5种PKD1伪基因的序列(PKD1P1(R)～PKD1P5(R))。(R)表示序列以反向排列。黑色箭头示出PKD1特异性碱基存在的位置。
图3-4是表示使用双脱氧链终止法确定出的区域4的部分序列与对应的伪基因序列的对比结果的图。所谓区域4，是指表3所示的引物对4所扩增的区域。序列从上方起依次为：针对通过多重PCR得到的扩增产物使用双脱氧链终止法而确定出的序列(外显子15A(F))、PKD1基因的参考序列(PKD1(F))、及5种PKD1伪基因的序列(PKD1P1(F)～PKD1P5(F))。(F)表示序列以正向排列。黑色箭头示出PKD1特异性碱基存在的位置。
图3-5是表示使用双脱氧链终止法确定出的区域5的部分序列与对应的伪基因序列的对比结果的图。所谓区域5，是指表3所示的引物对5所扩增的区域。序列从上方起依次为：针对通过多重PCR得到的扩增产物使用双脱氧链终止法而确定出的序列(外显子21(F))、PKD1基因的参考序列(PKD1(F))、及6种PKD1伪基因的序列(PKD1P1(F)～PKD1P6(F))。(F)表示序列以正向排列。黑色箭头示出PKD1特异性碱基存在的位置。
图3-6是表示使用双脱氧链终止法确定出的区域6的部分序列与对应的伪基因序列的对比结果的图。所谓区域6，是指表3所示的引物对6所扩增的区域。序列从上方起依次为：针对通过多重PCR得到的扩增产物使用双脱氧链终止法而确定出的序列(外显子26(R))、PKD1基因的参考序列(PKD1(R))、及6种PKD1伪基因的序列(PKD1P1(R)～PKD1P6(R))。(R)表示序列以反向排列。黑色箭头示出PKD1特异性碱基存在的位置。
图3-7是表示使用双脱氧链终止法确定出的区域7的部分序列与对应的伪基因序列的对比结果的图。所谓区域7，是指表3所示的引物对7所扩增的区域。序列从上方起依次为：针对通过多重PCR得到的扩增产物使用双脱氧链终止法而确定出的序列(外显子30(F))、PKD1基因的参考序列(PKD1(F))、及6种PKD1伪基因的序列(PKD1P1(F)～PKD1P6(F))。(F)表示序列以正向排列。黑色箭头示出PKD1特异性碱基存在的位置。
具体实施方式
1.引物、引物对、及引物组
本发明提供能够在单一的PCR循环条件下对PKD1基因及PKD2基因的全部外显子进行扩增的引物组。通过组合使用上述表1所示的18个引物对，能够在不扩增PKD1基因的伪基因的情况下，使包含PKD1基因及PKD2基因的全部外显子的区域扩增。在一个优选实施方式中，通过使用18个引物对的组(set)，能够在单一的PCR循环条件下使包含PKD1基因及PKD2基因的全部外显子的区域扩增。
对于表1而言，其表示左侧的“引物对”栏所示的引物对包含中央的“引物”栏所示的2种引物(正向及反向)。另外，对于表1而言，其表示“引物”栏所示的引物与其右侧的“特异性识别区域”栏中记载的区域特异性结合。对于本说明书中使用“～”表示的数值范围而言，除了另行进行表示的情况以外，其表示包括“～”前后记载的数值(分别作为最小值及最大值)的范围。
序列号37的碱基序列是在美国国立生物技术信息中心(NCBI)以登记号NC_000016(版本：NC_000016.9)而被登记的、存在于人第16号染色体中的PKD1基因的碱基序列。序列号38的碱基序列是在NCBI以登记号NC_000004(版本：NC_000004.11)而被登记的、存在于第4号染色体中的PKD2基因的碱基序列。
所谓特异性识别是指，以人的基因组DNA作为模板实施PCR时，引物不与其特异性识别区域以外的区域结合、实质上仅与特异性识别区域结合。更优选是指：在后述的实施PCR时的条件下、以人的基因组DNA作为模板实施PCR时，仅与特异性识别区域结合。
引物对1包含的正向引物(1F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第48916位～第48930位的区域，更优选为第48916位～第48931位的区域，更优选为第48916位～第48932位的区域，更优选为第48916位～第48933位的区域，更优选为第48916位～第48934位的区域，更优选为第48916位～第48935位的区域，更优选为第48916位～第48936位的区域，更优选为第48916位～第48937位的区域，更优选为第48916位～第48938位的区域，更优选为第48916位～第48939位的区域，更优选为第48916位～第48940位的区域，更优选为第48916位～第48941位的区域，更优选为第48916位～第48942位的区域，更优选为第48916位～第48943位的区域，更优选为第48916位～第48944位的区域。
作为具体的1F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号1的第15位～第29位的碱基序列，优选为第14位～第29位的碱基序列，更优选为第13位～第29位的碱基序列，更优选为第12位～第29位的碱基序列，更优选为第11位～第29位的碱基序列，更优选为第10位～第29位的碱基序列，优选为第9位～第29位的碱基序列，更优选为第8位～第29位的碱基序列，更优选为第7位～第29位的碱基序列，更优选为第6位～第29位的碱基序列，更优选为第5位～第29位的碱基序列，更优选为第4位～第29位的碱基序列，更优选为第3位～第29位的碱基序列，更优选为第2位～第29位的碱基序列，更优选为第1位～第29位的碱基序列。需要说明的是，对于序列表中所示的各碱基序列而言，5’端的碱基为第1位的碱基。
引物对1包含的反向引物(1R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第46427位～第46413位的互补区域，更优选为第46427位～第46412位的互补区域，更优选为第46427位～第46411位的互补区域，更优选为第46427位～第46410位的互补区域，更优选为第46427位～第46409位的互补区域，更优选为第46427位～第46408位的互补区域，更优选为第46427位～第46407位的互补区域，更优选为第46427位～第46406位的互补区域，更优选为第46427位～第46405位的互补区域，更优选为第46427位～第46404位的互补区域，更优选为第46427位～第46403位的互补区域，更优选为第46427位～第46402位的互补区域，更优选为第46427位～第46401位的互补区域，更优选为第46427位～第46400位的互补区域，更优选为第46427位～第46399位的互补区域，更优选为第46427位～第46398位的互补区域。
作为具体的1R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号2的第16位～30位的碱基序列，优选为第15位～第30位的碱基序列，更优选为第14位～第30位的碱基序列，更优选为第13位～第30位的碱基序列，更优选为第12位～第30位的碱基序列，更优选为第11位～第30位的碱基序列，更优选为第10位～第30位的碱基序列，更优选为第9位～第30位的碱基序列，更优选为第8位～第30位的碱基序列，更优选为第7位～第30位的碱基序列，更优选为第6位～第30位的碱基序列，更优选为第5位～第30位的碱基序列，更优选为第4位～第30位的碱基序列，更优选为第3位～第30位的碱基序列，更优选为第2位～第30位的碱基序列，更优选为第1位～第30位的碱基序列。
引物对2包含的正向引物(2F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第31431位～第31445位的区域，更优选为第31431位～第31446位的区域，更优选为第31431位～第31447位的区域，更优选为第31431位～第31448位的区域，更优选为第31431位～第31449位的区域，更优选为第31431位～第31450位的区域，更优选为第31431位～第31451位的区域，更优选为第31431位～第31452位的区域，更优选为第31431位～第31453位的区域，更优选为第31431位～第31454位的区域，更优选为第31431位～第31455位的区域，更优选为第31431位～第31456位的区域，更优选为第31431位～第31457位的区域，更优选为第31431位～第31458位的区域。
作为具体的2F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号3的第14位～第28位的碱基序列，优选为第13位～第28位的碱基序列，更优选为第12位～第28位的碱基序列，更优选为第11位～第28位的碱基序列，更优选为第10位～第28位的碱基序列，更优选为第9位～第28位的碱基序列，更优选为第8位～第28位的碱基序列，更优选为第7位～第28位的碱基序列，更优选为第6位～第28位的碱基序列，更优选为第5位～第28位的碱基序列，更优选为第4位～第28位的碱基序列，更优选为第3位～第28位的碱基序列，更优选为第2位～第28位的碱基序列，更优选为第1位～第28位的碱基序列。
引物对2包含的反向引物(2R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第27875位～第27861位的互补区域，更优选为第27875位～第27860位的互补区域，更优选为第27875位～第27859位的互补区域，更优选为第27875位～第27858位的互补区域，更优选为第27875位～第27857位的互补区域，更优选为第27875位～第27856位的互补区域，更优选为第27875位～第27855位的互补区域，更优选为第27875位～第27854位的互补区域，更优选为第27875位～第27853位的互补区域，更优选为第27875位～第27852位的互补区域，更优选为第27875位～第27851位的互补区域，更优选为第27875位～第27850位的互补区域，更优选为第27875位～第27849位的互补区域。
作为具体的2R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号4的第13位～第27位的碱基序列，优选为第12位～第27位的碱基序列，更优选为第11位～第27位的碱基序列，更优选为第10位～第27位的碱基序列，更优选为第9位～第27位的碱基序列，更优选为第8位～第27位的碱基序列，更优选为第7位～第27位的碱基序列，更优选为第6位～第27位的碱基序列，更优选为第5位～第27位的碱基序列，更优选为第4位～第27位的碱基序列，更优选为第3位～第27位的碱基序列，更优选为第2位～第27位的碱基序列，更优选为第1位～第27位的碱基序列。
引物对3包含的正向引物(3F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第27875位～第27889位的区域，更优选为第27875位～第27890位的区域，更优选为第27875位～第27891位的区域，更优选为第27875位～第27892位的区域，更优选为第27875位～第27893位的区域，更优选为第27875位～第27894位的区域，更优选为第27875位～第27895位的区域，更优选为第27875位～第27896位的区域，更优选为第27875位～第27897位的区域，更优选为第27875位～第27898位的区域，更优选为第27875位～第27899位的区域，更优选为第27875位～第27900位的区域，更优选为第27875位～第27901位的区域，更优选为第27875位～第27902位的区域。
作为具体的3F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号5的第14位～第28位的碱基序列，优选为第13位～第28位的碱基序列，更优选为第12位～第28位的碱基序列，更优选为第11位～第28位的碱基序列，更优选为第10位～第28位的碱基序列，更优选为第9位～第28位的碱基序列，更优选为第8位～第28位的碱基序列，更优选为第7位～第28位的碱基序列，更优选为第6位～第28位的碱基序列，更优选为第5位～第28位的碱基序列，更优选为第4位～第28位的碱基序列，更优选为第3位～第28位的碱基序列，更优选为第2位～第28位的碱基序列，更优选为第1位～第28位的碱基序列。
引物对3包含的反向引物(3R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第24227位～第24213位的互补区域，更优选为第24227位～第24212位的互补区域，更优选为第24227位～第24211位的互补区域，更优选为第24227位～第24210位的互补区域，更优选为第24227位～第24209位的互补区域，更优选为第24227位～第24208位的互补区域，更优选为第24227位～第24207位的互补区域，更优选为第24227位～第24206位的互补区域，更优选为第24227位～第24205位的互补区域，更优选为第24227位～第24204位的互补区域，更优选为第24227位～第24203位的互补区域，更优选为第24227位～第24202位的互补区域，更优选为第24227位～第24201位的互补区域，更优选为第24227位～第24200位的互补区域。
作为具体的3R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号6的第14位～第28位的碱基序列，优选为第13位～第28位的碱基序列，更优选为第12位～第28位的碱基序列，更优选为第11位～第28位的碱基序列，更优选为第10位～第28位的碱基序列，更优选为第9位～第28位的碱基序列，更优选为第8位～第28位的碱基序列，更优选为第7位～第28位的碱基序列，更优选为第6位～第28位的碱基序列，更优选为第5位～第28位的碱基序列，更优选为第4位～第28位的碱基序列，更优选为第3位～第28位的碱基序列，更优选为第2位～第28位的碱基序列，更优选为第1位～第28位的碱基序列。
引物对4包含的正向引物(4F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第24247位～第24261位的区域，更优选为第24247位～第24262位的区域，更优选为第24247位～第24263位的区域，更优选为第24247位～第24264位的区域，更优选为第24247位～第24265位的区域，更优选为第24247位～第24266位的区域的区域。
作为具体的4F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号7的第6位～第20位的碱基序列，优选为第5位～第20位的碱基序列，更优选为第4位～第20位的碱基序列，更优选为第3位～第20位的碱基序列，更优选为第2位～第20位的碱基序列，更优选为第1位～第20位的碱基序列。
引物对4包含的反向引物(4R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第18933位～第18919位的互补区域，更优选为第18933位～第18918位的互补区域，更优选为第18933位～第18917位的互补区域，更优选为第18933位～第18916位的互补区域，更优选为第18933位～第18915位的互补区域，更优选为第18933位～第18914位的互补区域，更优选为第18933位～第18913位的互补区域，更优选为第18933位～第18912位的互补区域。
作为具体的4R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号8的第8位～第22位的碱基序列，优选为第7位～第22位的碱基序列，更优选为第6位～第22位的碱基序列，更优选为第5位～第22位的碱基序列，更优选为第4位～第22位的碱基序列，更优选为第3位～第22位的碱基序列，更优选为第2位～第22位的碱基序列，更优选为第1位～第22位的碱基序列。
引物对5包含的正向引物(5F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第19226位～第19240位的区域，更优选为第19226位～第19241位的区域，更优选为第19226位～第19242位的区域，更优选为第19226位～第19243位的区域，更优选为第19226位～第19244位的区域，更优选为第19226位～第19245位的区域，更优选为第19226位～第19246位的区域，更优选为第19226位～第19247位的区域，更优选为第19226位～第19248位的区域，更优选为第19226位～第19249位的区域，更优选为第19226位～第19250位的区域，更优选为第19226位～第19251位的区域，更优选为第19226位～第19252位的区域，更优选为第19226位～第19253位的区域。
作为具体的5F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号9的第14位～第28位的碱基序列，优选为第13位～第28位的碱基序列，更优选为第12位～第28位的碱基序列，更优选为第11位～第28位的碱基序列，更优选为第10位～第28位的碱基序列，更优选为第9位～第28位的碱基序列，更优选为第8位～第28位的碱基序列，更优选为第7位～第28位的碱基序列，更优选为第6位～第28位的碱基序列，更优选为第5位～第28位的碱基序列，更优选为第4位～第28位的碱基序列，更优选为第3位～第28位的碱基序列，更优选为第2位～第28位的碱基序列，更优选为第1位～第28位的碱基序列。
引物对5包含的反向引物(5R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第16698位～第16684位的互补区域，更优选为第16698位～第16683位的互补区域，更优选为第16698位～第16682位的互补区域，更优选为第16698位～第16681位的互补区域，更优选为第16698位～第16680位的互补区域，更优选为第16698位～第16679位的互补区域，更优选为第16698位～第16678位的互补区域，更优选为第16698位～第16677位的互补区域，更优选为第16698位～第16676位的互补区域，更优选为第16698位～第16675位的互补区域。
作为具体的5R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号10的第10位～第24位的碱基序列，优选为第9位～第24位的碱基序列，更优选为第8位～第24位的碱基序列，更优选为第7位～第24位的碱基序列，更优选为第6位～第24位的碱基序列，更优选为第5位～第24位的碱基序列，更优选为第4位～第24位的碱基序列，更优选为第3位～第24位的碱基序列，更优选为第2位～第24位的碱基序列，更优选为第1位～第24位的碱基序列。
引物对6包含的正向引物(6F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第16393位～第16407位的区域，更优选为第16393位～第16408位的区域，更优选为第16393位～第16409位的区域，更优选为第16393位～第16410位的区域，更优选为第16393位～第16411位的区域，更优选为第16393位～第16412位的区域，更优选为第16393位～第16413位的区域，更优选为第16393位～第16414位的区域，更优选为第16393位～第16415位的区域，更优选为第16393位～第16416位的区域，更优选为第16393位～第16417位的区域，更优选为第16393位～第16418位的区域。
作为具体的6F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号11的第12位～第26位的碱基序列，优选为第11位～第26位的碱基序列，更优选为第10位～第26位的碱基序列，更优选为第9位～第26位的碱基序列，更优选为第8位～第26位的碱基序列，更优选为第7位～第26位的碱基序列，更优选为第6位～第26位的碱基序列，更优选为第5位～第26位的碱基序列，更优选为第4位～第26位的碱基序列，更优选为第3位～第26位的碱基序列，更优选为第2位～第26位的碱基序列，更优选为第1位～第26位的碱基序列。
引物对6包含的反向引物(6R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第12889位～第12875位的互补区域，更优选为第12889位～第12874位的互补区域，更优选为第12889位～第12873位的互补区域，更优选为第12889位～第12872位的互补区域，更优选为第12889位～第12871位的互补区域，更优选为第12889位～第12870位的互补区域，更优选为第12889位～第12869位的互补区域，更优选为第12889位～第12868位的互补区域，更优选为第12889位～第12867位的互补区域，更优选为第12889位～第12866位的互补区域，更优选为第12889位～第12865位的互补区域，更优选为第12889位～第12864位的互补区域。
作为具体的6R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号12的第12位～第26位的碱基序列，优选为第11位～第26位的碱基序列，更优选为第10位～第26位的碱基序列，更优选为第9位～第26位的碱基序列，更优选为第8位～第26位的碱基序列，更优选为第7位～第26位的碱基序列，更优选为第6位～第26位的碱基序列，更优选为第5位～第26位的碱基序列，更优选为第4位～第26位的碱基序列，更优选为第3位～第26位的碱基序列，更优选为第2位～第26位的碱基序列，更优选为第1位～第26位的碱基序列。
引物对7包含的正向引物(7F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第12193位～第12207位的区域，更优选为第12193位～第12208位的区域，更优选为第12193位～第12209位的区域，更优选为第12193位～第12210位的区域，更优选为第12193位～第12211位的区域，更优选为第12193位～第12212位的区域，更优选为第12193位～第12213位的区域，更优选为第12193位～第12214位的区域，更优选为第12193位～第12215位的区域，更优选为第12193位～第12216位的区域，更优选为第12193位～第12217位的区域，更优选为第12193位～第12218位的区域，更优选为第12193位～第12219位的区域，更优选为第12193位～第12220位的区域，更优选为第12193位～第12221位的区域，更优选为第12193位～第12222位的区域，更优选为第12193位～第12223位的区域，更优选为第12193位～第12224位的区域，更优选为第12193位～第12225位的区域，更优选为第12193位～第12226位的区域，更优选为第12193位～第12227位的区域。
作为具体的7F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号13的第21位～35位的碱基序列，优选为第20位～第35位的碱基序列，更优选为第19位～第35位的碱基序列，更优选为第18位～第35位的碱基序列，更优选为第17位～第35位的碱基序列，更优选为第16位～第35位的碱基序列，更优选为第15位～第35位的碱基序列，更优选为第14位～第35位的碱基序列，更优选为第13位～第35位的碱基序列，更优选为第12位～第35位的碱基序列，更优选为第11位～第35位的碱基序列，更优选为第10位～第35位的碱基序列，更优选为第9位～第35位的碱基序列，更优选为第8位～第35位的碱基序列，更优选为第7位～第35位的碱基序列，更优选为第6位～第35位的碱基序列，更优选为第5位～第35位的碱基序列，更优选为第4位～第35位的碱基序列，更优选为第3位～第35位的碱基序列，更优选为第2位～第35位的碱基序列，更优选为第1位～第35位的碱基序列。
引物对7包含的反向引物(7R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第8534位～第8520位的互补区域，更优选为第8534位～第8519位的互补区域，更优选为第8534位～第8518位的互补区域，更优选为第8534位～第8517位的互补区域，更优选为第8534位～第8516位的互补区域，更优选为第8534位～第8515位的互补区域，更优选为第8534位～第8514位的互补区域，更优选为第8534位～第8513位的互补区域，更优选为第8534位～第8512位的互补区域，更优选为第8534位～第8511位的互补区域，更优选为第8534位～第8510位的互补区域，更优选为第8534位～第8509位的互补区域，更优选为第8534位～第8508位的互补区域，更优选为第8534位～第8507位的互补区域，更优选为第8534位～第8506位的互补区域，更优选为第8534位～第8505位的互补区域，更优选为第8534位～第8504位的互补区域，更优选为第8534位～第8503位的互补区域，更优选为第8534位～第8502位的互补区域，更优选为第8534位～第8501位的互补区域。
作为具体的7R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号14的第20位～34位的碱基序列，优选为第19位～第34位的碱基序列，更优选为第18位～第34位的碱基序列，更优选为第17位～第34位的碱基序列，更优选为第16位～第34位的碱基序列，更优选为第15位～第34位的碱基序列，更优选为第14位～第34位的碱基序列，更优选为第13位～第34位的碱基序列，更优选为第12位～第34位的碱基序列，更优选为第11位～第34位的碱基序列，更优选为第10位～第34位的碱基序列，更优选为第9位～第34位的碱基序列，更优选为第8位～第34位的碱基序列，更优选为第7位～第34位的碱基序列，更优选为第6位～第34位的碱基序列，更优选为第5位～第34位的碱基序列，更优选为第4位～第34位的碱基序列，更优选为第3位～第34位的碱基序列，更优选为第2位～第34位的碱基序列，更优选为第1位～第34位的碱基序列。
引物对8包含的正向引物(8F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第6284位～第6298位的区域，更优选为第6284位～第6299位的区域，更优选为第6284位～第6300位的区域，更优选为第6284位～第6301位的区域，更优选为第6284位～第6302位的区域，更优选为第6284位～第6303位的区域，更优选为第6284位～第6304位的区域，更优选为第6284位～第6305位的区域，更优选为第6284位～第6306位的区域，更优选为第6284位～第6307位的区域，更优选为第6284位～第6308位的区域，更优选为第6284位～第6309位的区域，更优选为第6284位～第6310位的区域，更优选为第6284位～第6311位的区域，更优选为第6284位～第6312位的区域，更优选为第6284位～第6313位的区域。
作为具体的8F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号15的第16位～30位的碱基序列，优选为第15位～第30位的碱基序列，更优选为第14位～第30位的碱基序列，更优选为第13位～第30位的碱基序列，更优选为第12位～第30位的碱基序列，更优选为第11位～第30位的碱基序列，更优选为第10位～第30位的碱基序列，更优选为第9位～第30位的碱基序列，更优选为第8位～第30位的碱基序列，更优选为第7位～第30位的碱基序列，更优选为第6位～第30位的碱基序列，更优选为第5位～第30位的碱基序列，更优选为第4位～第30位的碱基序列，更优选为第3位～第30位的碱基序列，更优选为第2位～第30位的碱基序列，更优选为第1位～第30位的碱基序列。
引物对8包含的反向引物(8R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第3261位～第3247位的互补区域，更优选为第3261位～第3246位的互补区域，更优选为第3261位～第3245位的互补区域，更优选为第3261位～第3244位的互补区域，更优选为第3261位～第3243位的互补区域，更优选为第3261位～第3242位的互补区域，更优选为第3261位～第3241位的互补区域，更优选为第3261位～第3240位的互补区域，更优选为第3261位～第3239位的互补区域，更优选为第3261位～第3238位的互补区域，更优选为第3261位～第3237位的互补区域，更优选为第3261位～第3236位的互补区域，更优选为第3261位～第3235位的区域。
作为具体的8R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号16的第13位～第27位的碱基序列，优选为第12位～第27位的碱基序列，更优选为第11位～第27位的碱基序列，更优选为第10位～第27位的碱基序列，更优选为第9位～第27位的碱基序列，更优选为第8位～第27位的碱基序列，更优选为第7位～第27位的碱基序列，更优选为第6位～第27位的碱基序列，更优选为第5位～第27位的碱基序列，更优选为第4位～第27位的碱基序列，更优选为第3位～第27位的碱基序列，更优选为第2位～第27位的碱基序列，更优选为第1位～第27位的碱基序列的碱基序列。
引物对9包含的正向引物(9F)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第3525位～第3539位的区域，更优选为第3525位～第3540位的区域，更优选为第3525位～第3541位的区域，更优选为第3525位～第3542位的区域，更优选为第3525位～第3543位的区域，更优选为第3525位～第3544位的区域，更优选为第3525位～第3545位的区域，更优选为第3525位～第3546位的区域，更优选为第3525位～第3547位的区域，更优选为第3525位～第3548位的区域，更优选为第3525位～第3549位的区域，更优选为第3525位～第3550位的区域，更优选为第3525位～第3551位的区域，更优选为第3525位～第3552位的区域，更优选为第3525位～第3553位的区域，更优选为第3525位～第3554位的区域，更优选为第3525位～第3555位的区域，更优选为第3525位～第3556位的区域，更优选为第3525位～第3557位的区域，更优选为第3525位～第3558位的区域，更优选为第3525位～第3559位的区域。
作为具体的9F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号17的第21位～35位的碱基序列，优选为第20位～第35位的碱基序列，更优选为第19位～第35位的碱基序列，更优选为第18位～第35位的碱基序列，更优选为第17位～第35位的碱基序列，更优选为第16位～第35位的碱基序列，更优选为第15位～第35位的碱基序列，更优选为第14位～第35位的碱基序列，更优选为第13位～第35位的碱基序列，更优选为第12位～第35位的碱基序列，更优选为第11位～第35位的碱基序列，更优选为第10位～第35位的碱基序列，更优选为第9位～第35位的碱基序列，更优选为第8位～第35位的碱基序列，更优选为第7位～第35位的碱基序列，更优选为第6位～第35位的碱基序列，更优选为第5位～第35位的碱基序列，更优选为第4位～第35位的碱基序列，更优选为第3位～第35位的碱基序列，更优选为第2位～第35位的碱基序列，更优选为第1位～第35位的碱基序列。
引物对9包含的反向引物(9R)特异性识别的碱基序列优选为序列号37的第28位～第14位的互补区域，更优选为第28位～第13位的互补区域，更优选为第28位～第12位的互补区域，更优选为第28位～第11位的互补区域，更优选为第28位～第10位的互补区域，更优选为第28位～第9位的互补区域，更优选为第28位～第8位的互补区域，更优选为第28位～第7位的互补区域，更优选为第28位～第6位的互补区域，更优选为第28位～第5位的互补区域，更优选为第28位～第4位的互补区域，更优选为第28位～第3位的互补区域，更优选为第28位～第2位的区域，更优选为第28位～第1位的互补区域。
作为具体的9R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号18的第14位～第28位的碱基序列，优选为第13位～第28位的碱基序列，更优选为第12位～第28位的碱基序列，更优选为第11位～第28位的碱基序列，更优选为第10位～第28位的碱基序列，更优选为第9位～第28位的碱基序列，更优选为第8位～第28位的碱基序列，更优选为第7位～第28位的碱基序列，更优选为第6位～第28位的碱基序列，更优选为第5位～第28位的碱基序列，更优选为第4位～第28位的碱基序列，更优选为第3位～第28位的碱基序列，更优选为第2位～第28位的碱基序列，更优选为第1位～第28位的碱基序列。
引物对10包含的正向引物(10F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第25位～第11位的互补区域，更优选为第25位～第10位的互补区域，更优选为第25位～第9位的互补区域，更优选为第25位～第8位的互补区域，更优选为第25位～第7位的互补区域，更优选为第25位～第6位的互补区域，更优选为第25位～第5位的互补区域，更优选为第25位～第4位的互补区域，更优选为第25位～第3位的互补区域，更优选为第25位～第2位的互补区域，更优选为第25位～第1位的互补区域。
作为具体的10F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号19的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对10包含的反向引物(10R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第1537位～第1551位的区域，更优选为第1537位～第1552位的区域，更优选为第1537位～第1553位的区域，更优选为第1537位～第1554位的区域，更优选为第1537位～第1555位的区域，更优选为第1537位～第1556位的区域，更优选为第1537位～第1557位的区域，更优选为第1537位～第1558位的区域，更优选为第1537位～第1559位的区域，更优选为第1537位～第1560位的区域，更优选为第1537位～第1561位的区域。
作为具体的10R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号20的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对11包含的正向引物(11F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第11432位～第11418位的互补区域，更优选为第11432位～第11417位的互补区域，更优选为第11432位～第11416位的互补区域，更优选为第11432位～第11415位的互补区域，更优选为第11432位～第11414位的互补区域，更优选为第11432位～第11413位的互补区域，更优选为第11432位～第11412位的互补区域，更优选为第11432位～第11411位的互补区域，更优选为第11432位～第11410位的互补区域，更优选为第11432位～第11409位的互补区域，更优选为第11432位～第11408位的互补区域。
作为具体的11F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号21的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对11包含的反向引物(11R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第12623位～第12637位的区域，更优选为第12623位～第12638位的区域，更优选为第12623位～第12639位的区域，更优选为第12623位～第12640位的区域，更优选为第12623位～第12641位的区域，更优选为第12623位～第12642位的区域，更优选为第12623位～第12643位的区域，更优选为第12623位～第12644位的区域，更优选为第12623位～第12645位的区域，更优选为第12623位～第12646位的区域，更优选为第12623位～第12647位的区域。
作为具体的11R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号22的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对12包含的正向引物(12F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第28901位～第28887位的互补区域，更优选为第28901位～第28886位的互补区域，更优选为第28901位～第28885位的互补区域，更优选为第28901位～第28884位的互补区域，更优选为第28901位～第28883位的互补区域，更优选为第28901位～第28882位的互补区域，更优选为第28901位～第28881位的互补区域，更优选为第28901位～第28880位的互补区域，更优选为第28901位～第28879位的互补区域，更优选为第28901位～第28878位的互补区域，更优选为第28901位～第28877位的互补区域。
作为具体的12F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号23的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对12包含的反向引物(12R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第31264位～第31278位的区域，更优选为第31264位～第31279位的区域，更优选为第31264位～第31280位的区域，更优选为第31264位～第31281位的区域，更优选为第31264位～第31282位的区域，更优选为第31264位～第31283位的区域，更优选为第31264位～第31284位的区域，更优选为第31264位～第31285位的区域，更优选为第31264位～第31286位的区域，更优选为第31264位～第31287位的区域，更优选为第31264位～第31288位的区域，更优选为第31264位～第31289位的区域，更优选为第31264位～第31290位的区域，更优选为第31264位～第31291位的区域，更优选为第31264位～第31292位的区域，更优选为第31264位～第31293位的区域，更优选为第31264位～第31294位的区域。
作为具体的12R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号24的第17位～31位的碱基序列，优选为第16位～第31位的碱基序列，更优选为第15位～第31位的碱基序列，更优选为第14位～第31位的碱基序列，更优选为第13位～第31位的碱基序列，更优选为第12位～第31位的碱基序列，更优选为第11位～第31位的碱基序列，更优选为第10位～第31位的碱基序列，更优选为第9位～第31位的碱基序列，更优选为第8位～第31位的碱基序列，更优选为第7位～第31位的碱基序列，更优选为第6位～第31位的碱基序列，更优选为第5位～第31位的碱基序列，更优选为第4位～第31位的碱基序列，更优选为第3位～第31位的碱基序列，更优选为第2位～第31位的碱基序列，更优选为第1位～第31位的碱基序列。
引物对13包含的正向引物(13F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第35718位～第35704位的互补区域，更优选为第35718位～第35703位的互补区域，更优选为第35718位～第35702位的互补区域，更优选为第35718位～第35701位的互补区域，更优选为第35718位～第35700位的互补区域，更优选为第35718位～第35699位的互补区域，更优选为第35718位～第35698位的互补区域，更优选为第35718位～第35697位的互补区域，更优选为第35718位～第35696位的互补区域，更优选为第35718位～第35695位的互补区域，更优选为第35718位～第35694位的互补区域。
作为具体的13F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号25的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对13包含的反向引物(13R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第39836位～第39850位的区域，更优选为第39836位～第39851位的区域，更优选为第39836位～第39852位的区域，更优选为第39836位～第39853位的区域，更优选为第39836位～第39854位的区域，更优选为第39836位～第39855位的区域，更优选为第39836位～第39856位的区域，更优选为第39836位～第39857位的区域，更优选为第39836位～第39858位的区域，更优选为第39836位～第39859位的区域，更优选为第39836位～第39860位的区域，更优选为第39836位～第39861位的区域，更优选为第39836位～第39862位的区域，更优选为第39836位～第39863位的区域，更优选为第39836位～第39864位的区域，更优选为第39836位～第39865位的区域。
作为具体的13R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号26的第16位～30位的碱基序列，优选为第15位～第30位的碱基序列，更优选为第14位～第30位的碱基序列，更优选为第13位～第30位的碱基序列，更优选为第12位～第30位的碱基序列，更优选为第11位～第30位的碱基序列，更优选为第10位～第30位的碱基序列，更优选为第9位～第30位的碱基序列，更优选为第8位～第30位的碱基序列，更优选为第7位～第30位的碱基序列，更优选为第6位～第30位的碱基序列，更优选为第5位～第30位的碱基序列，更优选为第4位～第30位的碱基序列，更优选为第3位～第30位的碱基序列，更优选为第2位～第30位的碱基序列，更优选为第1位～第30位的碱基序列。
引物对14包含的正向引物(14F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第44259位～第44245位的互补区域，更优选为第44259位～第44244位的互补区域，更优选为第44259位～第44243位的互补区域，更优选为第44259位～第44242位的互补区域，更优选为第44259位～第44241位的互补区域，更优选为第44259位～第44240位的互补区域，更优选为第44259位～第44239位的互补区域，更优选为第44259位～第44238位的互补区域，更优选为第44259位～第44237位的互补区域，更优选为第44259位～第44236位的互补区域，更优选为第44259位～第44235位的互补区域。
作为具体的14F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号27的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对14包含的反向引物(14R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第45415位～第45429位的区域，更优选为第45415位～第45430位位的区域，更优选为第45415位～第45431位的区域，更优选为第45415位～第45432位的区域，更优选为第45415位～第45433位的区域，更优选为第45415位～第45434位的区域，更优选为第45415位～第45435位的区域，更优选为第45415位～第45436位的区域，更优选为第45415位～第45437位的区域，更优选为第45415位～第45438位的区域，更优选为第45415位～第45439位的区域，更优选为第45415位～第45440位的区域。
作为具体的14R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号28的第12位～第26位的碱基序列，优选为第11位～第26位的碱基序列，更优选为第10位～第26位的碱基序列，更优选为第9位～第26位的碱基序列，更优选为第8位～第26位的碱基序列，更优选为第7位～第26位的碱基序列，更优选为第6位～第26位的碱基序列，更优选为第5位～第26位的碱基序列，更优选为第4位～第26位的碱基序列，更优选为第3位～第26位的碱基序列，更优选为第2位～第26位的碱基序列，更优选为第1位～第26位的碱基序列。
引物对15包含的正向引物(15F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第47754位～第47740位的互补区域，更优选为第47754位～第47739位的互补区域，更优选为第47754位～第47738位的互补区域，更优选为第47754位～第47737位的互补区域，更优选为第47754位～第47736位的互补区域，更优选为第47754位～第47735位的互补区域，更优选为第47754位～第47734位的互补区域，更优选为第47754位～第47733位的互补区域，更优选为第47754位～第47732位的互补区域，更优选为第47754位～第47731位的互补区域，更优选为第47754位～第47730位的互补区域。
作为具体的15F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号29的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对15包含的反向引物(15R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第52221位～第52235位的区域，更优选为第52221位～第52236位的区域，更优选为第52221位～第52237位的区域，更优选为第52221位～第52238位的区域，更优选为第52221位～第52239位的区域，更优选为第52221位～第52240位的区域，更优选为第52221位～第52241位的区域，更优选为第52221位～第52242位的区域，更优选为第52221位～第52243位的区域，更优选为第52221位～第52244位的区域，更优选为第52221位～第52245位的区域。
作为具体的15R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号30的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对16包含的正向引物(16F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第53806位～第53792位的互补区域，更优选为第53806位～第53791位的互补区域，更优选为第53806位～第53790位的互补区域，更优选为第53806位～第53789位的互补区域，更优选为第53806位～第53788位的互补区域，更优选为第53806位～第53787位的互补区域，更优选为第53806位～第53786位的互补区域，更优选为第53806位～第53785位的互补区域，更优选为第53806位～第53784位的互补区域，更优选为第53806位～第53783位的互补区域，更优选为第53806位～第53782位的互补区域，更优选为第53806位～第53781位的互补区域，更优选为第53806位～第53780位的互补区域，更优选为第53806位～第53779位的互补区域。
作为具体的16F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号31的第14位～第28位的碱基序列，优选为第13位～第28位的碱基序列，更优选为第12位～第28位的碱基序列，更优选为第11位～第28位的碱基序列，更优选为第10位～第28位的碱基序列，更优选为第9位～第28位的碱基序列，更优选为第8位～第28位的碱基序列，更优选为第7位～第28位的碱基序列，更优选为第6位～第28位的碱基序列，更优选为第5位～第28位的碱基序列，更优选为第4位～第28位的碱基序列，更优选为第3位～第28位的碱基序列，更优选为第2位～第28位的碱基序列，更优选为第1位～第28位的碱基序列。
引物对16包含的反向引物(16R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第55288位～第55302位的区域，更优选为第55288位～第55303位的区域，更优选为第55288位～第55304位的区域，更优选为第55288位～第55305位的区域，更优选为第55288位～第55306位的区域，更优选为第55288位～第55307位的区域，更优选为第55288位～第55308位的区域，更优选为第55288位～第55309位的区域，更优选为第55288位～第553010位的区域，更优选为第55288位～第55311位的区域，更优选为第55288位～第55312位的区域。
作为具体的16R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号32的第11位～第25位的碱基序列，优选为第10位～第25位的碱基序列，更优选为第9位～第25位的碱基序列，更优选为第8位～第25位的碱基序列，更优选为第7位～第25位的碱基序列，更优选为第6位～第25位的碱基序列，更优选为第5位～第25位的碱基序列，更优选为第4位～第25位的碱基序列，更优选为第3位～第25位的碱基序列，更优选为第2位～第25位的碱基序列，更优选为第1位～第25位的碱基序列。
引物对17包含的正向引物(17F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第57914位～第57900位的互补区域，更优选为第57914位～第57899位的互补区域，更优选为第57914位～第57898位的互补区域，更优选为第57914位～第57897位的互补区域，更优选为第57914位～第57896位的互补区域，更优选为第57914位～第57895位的互补区域，更优选为第57914位～第57894位的互补区域，更优选为第57914位～第57893位的互补区域，更优选为第57914位～第57892位的互补区域，更优选为第57914位～第57891位的互补区域，更优选为第57914位～第57890位的互补区域，更优选为第57914位～第57889位的互补区域，更优选为第57914位～第57888位的互补区域，更优选为第57914位～第57887位的互补区域，更优选为第57914位～第57886位的互补区域，更优选为第57914位～第57885位的互补区域。
作为具体的17F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号33的第16位～30位的碱基序列，优选为第15位～第30位的碱基序列，更优选为第14位～第30位的碱基序列，更优选为第13位～第30位的碱基序列，更优选为第12位～第30位的碱基序列，更优选为第11位～第30位的碱基序列，更优选为第10位～第30位的碱基序列，更优选为第9位～第30位的碱基序列，更优选为第8位～第30位的碱基序列，更优选为第7位～第30位的碱基序列，更优选为第6位～第30位的碱基序列，更优选为第5位～第30位的碱基序列，更优选为第4位～第30位的碱基序列，更优选为第3位～第30位的碱基序列，更优选为第2位～第30位的碱基序列，更优选为第1位～第30位的碱基序列。
引物对17包含的反向引物(17R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第60808位～第60822位的区域，更优选为第60808位～第60823位的区域，更优选为第60808位～第60824位的区域，更优选为第60808位～第60825位的区域，更优选为第60808位～第60826位的区域，更优选为第60808位～第60827位的区域，更优选为第60808位～第60828位的区域，更优选为第60808位～第60829位的区域，更优选为第60808位～第60830位的区域，更优选为第60808位～第60831位的区域，更优选为第60808位～第60832位的区域，更优选为第60808位～第60833位的区域。
作为具体的17R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号34的第12位～第26位的碱基序列，优选为第11位～第26位的碱基序列，更优选为第10位～第26位的碱基序列，更优选为第9位～第26位的碱基序列，更优选为第8位～第26位的碱基序列，更优选为第7位～第26位的碱基序列，更优选为第6位～第26位的碱基序列，更优选为第5位～第26位的碱基序列，更优选为第4位～第26位的碱基序列，更优选为第3位～第26位的碱基序列，更优选为第2位～第26位的碱基序列，更优选为第1位～第26位的碱基序列。
引物对18包含的正向引物(18F)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第67328位～第67314位的互补区域，更优选为第67328位～第67313位的互补区域，更优选为第67328位～第67312位的互补区域，更优选为第67328位～第67311位的互补区域，更优选为第67328位～第67310位的互补区域，更优选为第67328位～第67309位的互补区域，更优选为第67328位～第67308位的互补区域，更优选为第67328位～第67307位的互补区域，更优选为第67328位～第67306位的互补区域，更优选为第67328位～第67305位的互补区域，更优选为第67328位～第67304位的互补区域，更优选为第67328位～第67303位的互补区域。
作为具体的18F引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号35的第12位～第26位的碱基序列，优选为第11位～第26位的碱基序列，更优选为第10位～第26位的碱基序列，更优选为第9位～第26位的碱基序列，更优选为第8位～第26位的碱基序列，更优选为第7位～第26位的碱基序列，更优选为第6位～第26位的碱基序列，更优选为第5位～第26位的碱基序列，更优选为第4位～第26位的碱基序列，更优选为第3位～第26位的碱基序列，更优选为第2位～第26位的碱基序列，更优选为第1位～第26位的碱基序列。
引物对18包含的反向引物(18R)特异性识别的碱基序列优选为序列号38的第68792位～第68806位的区域，更优选为第68792位～第68807位的区域，更优选为第68792位～第68808位的区域，更优选为第68792位～第68809位的区域，更优选为第68792位～第68810位的区域，更优选为第68792位～第68811位的区域，更优选为第68792位～第68812位的区域，更优选为第68792位～第68813位的区域，更优选为第68792位～第68814位的区域，更优选为第68792位～第68815位的区域，更优选为第68792位～第68816位的区域，更优选为第68792位～第68817位的区域，更优选为第68792位～第68818位的区域。
作为具体的18R引物，是具有下述碱基序列的寡核苷酸：序列号36的第13位～第27位的碱基序列，优选为第12位～第27位的碱基序列，更优选为第11位～第27位的碱基序列，更优选为第10位～第27位的碱基序列，更优选为第9位～第27位的碱基序列，更优选为第8位～第27位的碱基序列，更优选为第7位～第27位的碱基序列，更优选为第6位～第27位的碱基序列，更优选为第5位～第27位的碱基序列，更优选为第4位～第27位的碱基序列，更优选为第3位～第27位的碱基序列，更优选为第2位～第27位的碱基序列，更优选为第1位～第27位的碱基序列的碱基序列。
对于上述例示的1F引物～18R引物具有的具体碱基序列而言，只要能够在PCR实施条件下特异性地识别各自的特异性识别区域(优选在单一的反应容器内使用的引物之间不发生退火及自退火)，则可以使1个或多个碱基为其他碱基，也可在3’端或5’端添加1个或多个碱基。此处，所谓多个，例如为2～3个。向引物添加1个或多个碱基的情况下，优选向引物的5’端添加。在一个优选实施方式中，优选的是，1F引物～18R引物具有上文中针对它们各自记载的具体的碱基序列作为3’端序列。
将上述例示的1F引物～18R引物具有的具体的碱基序列中的1个或多个碱基取代为其他碱基而得到的碱基序列、与被取代前的碱基序列(即，序列号所示碱基序列)的同一性优选为70％以上，更优选为75％以上，更优选为80％以上，更优选为85％以上，更优选为90％以上，更优选为95％以上。
将上述1F引物～18R引物具有的具体的碱基序列中的1个或多个碱基序列取代为其他碱基的情况下，优选不对以下碱基进行取代：序列号4所示碱基序列中的第27位及第23位的碱基(2R引物)、序列号5所示碱基序列中的第28位及9位的碱基(3F引物)、序列号7所示碱基序列的第20位的碱基(4F引物)、序列号8所示碱基序列的第22位的碱基(4R引物)、序列号10所示碱基序列的第24位的碱基(5R引物)、序列号12所示碱基序列的第26位、第23位、第11位及第2位的碱基(6R引物)、以及序列号13所示碱基序列的第35位及34位的碱基(7F引物)。
对于各引物的长度而言，只要能够特异性地识别对应的特异性识别区域、且引物之间不发生杂交即可，没有特别限制，优选为15个碱基以上且40个碱基以下。更优选的是，引物的长度的下限为16个碱基以上，进一步优选为17个碱基以上，进一步优选为18个碱基以上。更优选的是，引物的长度的上限为39个碱基以下，进一步优选为38个碱基以下，进一步优选为37个碱基以下。
从在单一的PCR循环条件下使全部的必需的PKD1基因及PKD2基因的外显子全部扩增的观点考虑，对于引物组中包含的引物而言，优选它们的Tm值之差小。例如，引物组中包含的引物的Tm值之差优选为5℃以内，更优选为4℃以内，进一步优选为3.6℃以内。
上述1F引物～18R引物优选根据各引物特异性识别的区域的碱基序列进行设计。例如，优选以下述方式进行设计：各引物的GC含量为约40～75％，且在单一的反应容器内使用的各引物之间不发生退火(例如，在3’端不具有3个碱基以上的互补序列)，及/或不含有自身互补序列。
利用引物对1而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子1。利用引物对2而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子2～8。利用引物对3而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子9～13。利用引物对4而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子14～16。利用引物对5而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子17～21。利用引物对6而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子22～26。利用引物对7而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子27～34。利用引物对8而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子35～41。利用引物对9而扩增的区域中包含PKD1基因的外显子41～46。
利用引物对10而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子1。利用引物对11而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子2。利用引物对12而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子3及4。利用引物对13而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子5及6。利用引物对14而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子7。利用引物对15而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子8及9。利用引物对16而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子10。利用引物对17而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子11～13。利用引物对18而扩增的区域中包含PKD2基因的外显子14及15。
因此，为了使PKD1基因的全部外显子扩增，可利用包含引物对1～9的引物组。另外，在不需要扩增PKD1基因的全部外显子的情况下，可仅选择对于目标外显子的扩增而言必需的引物对，将其组合使用。同样地，为了使PKD2基因的全部外显子扩增，可利用包含引物对10～18的引物组。另外，在不需要扩增PKD2基因的全部外显子的情况下，可仅选择对于目标外显子的扩增而言必需的引物对，将其组合使用。由此，可设想根据目的将引物对1～18任意组合而得到的引物组。此外，在设想实施后述那样的追加PCR的情况下，引物对的组合可还含有用于追加PCR的引物对。
用作引物的寡核苷酸可进行化学合成，例如，可使用通用的DNA合成装置高效地合成。1F引物～18R引物可在任意的状态下保存。例如，1F引物～18R引物可在经过干燥或冷冻干燥的状态下、或者在适合用于PCR的溶液(例如，缓冲液)中保存。对于含有引物的溶液而言，也可根据需要而含有引物的稳定剂等。
可以将1F引物～18R引物或它们的任意组合、与用于PCR的试剂及/或容器等进行组合，从而提供试剂盒。例如，可提供将耐热性DNA聚合酶、脱氧核糖核苷酸、镁及PCR用缓冲液、以及能够适宜保持它们的品质的保存容器等进行组合而得到的试剂盒。对于试剂盒中包含的引物而言，可以按照每个引物而容纳于独立的容器中，也可按照每个引物对而容纳于独立的容器中，还可按照后述的每个引物对的组合而容纳于独立的容器中。另外，设想实施后述那样的追加PCR的情况下，试剂盒也可还包含用于追加PCR的引物对。
2.PKD1基因及/或PKD2基因的外显子的扩增方法
通过使用引物对1～18中的任一者或它们的任意组合来实施PCR，能够对PKD1基因及/或PKD2基因的目标外显子进行扩增。PCR可以按照常规方法来实施，例如，可使用市售的PCR装置及长片段(Long range)PCR用试剂盒等，按照其手册实施。具体而言，PCR可包括以下的步骤(1)～(5)中的任一步骤、它们的任意组合或全部。以下的步骤(3)及(4)可在相同的温度条件下实施，在一个实施方式中，在相同的温度条件下同时地(连续地)实施步骤(3)及(4)是优选的。
(1)配制反应液的步骤，所述反应液含有模板DNA、引物对、耐热性DNA聚合酶、以及包括腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶及胞嘧啶的核苷酸；
(2)热变性步骤，将反应液加热至规定的温度，使双链的模板DNA解旋为2条单链；
(3)退火步骤，将反应液冷却至规定的温度，使构成引物对的各引物与单链模板DNA中的各特异性识别区域结合；
(4)延伸步骤，将反应液维持于规定的温度，使耐热性DNA聚合酶以引物为起点合成与模板DNA互补的DNA；及/或
(5)重复实施步骤(2)～(4)、直至得到规定量的扩增产物(相当于目标外显子的DNA)为止的步骤。
模板DNA优选使用人基因组DNA。对于人基因组DNA而言，可使用市售的DNA提取试剂盒等，利用从被检体采集的血液或其他任意的组织而容易地获得。被检体没有特别限制，可优选地举出疑似多囊肾病发病的人、或者认为PKD1基因或PKD2基因中遗传性地存在突变的可能性比较高的人。
PCR用的反应液、耐热性DNA聚合酶是任选的，可使用市售的PCR用试剂盒中包含的物质。作为反应液，可使用已知通常用于PCR用途的任选的缓冲液，例如，可举出Tris-盐酸缓冲液、Tris-硫酸缓冲液、及Tricine缓冲液等。作为耐热性聚合酶，例如，可使用Taq DNA聚合酶(例如，FastStart Taq DNA聚合酶(Roche)、Ex Taq(注册商标)(Takara)、Z-Taq、AccuPrime Taq DNA聚合酶、M-PCR试剂盒(QIAGEN)等)或KOD DNA聚合酶等。
使用的引物及模板DNA等的量可根据使用的PCR试剂盒及装置而进行调节。引物通常以PCR反应溶液中的浓度为0.1～0.5μM的量被添加。对于成为模板的人基因组DNA而言，例如，在50μl反应溶液中添加25～150ng左右。
对于PCR循环条件而言，只要能够实现作为目标的PKD1基因及PKD2基因的外显子的扩增即可，没有特别限制。例如，可将热变性的温度设定为92～100℃，优选为94～98℃。对于热变性时间而言，例如，可设定为5～180秒，优选为10～130秒。对于使引物杂交的退火温度而言，例如，可设定为62～80℃，优选为64～78℃。对于退火时间而言，可设定为例如10～60秒，优选为20～30秒。对于延伸反应的温度而言，例如，可设定为62～80℃，优选为64～78℃。对于延伸反应的温度而言，例如，可设定为4～15分钟，优选为4～10分钟。退火及延伸反应可在相同的条件下进行。将组合了热变性、退火及延伸反应的操作作为1个循环，可反复进行该循环，直至得到需要的量的扩增产物为止。例如，可将循环数设定为30～40次，优选为30～35次左右。
本说明书中，“PCR循环条件”包括与PCR的热变性、退火、及延伸反应的温度及时间有关的条件以及循环数中的任一项、任意的组合、或全部。对于PCR循环条件的设定，如后文实施例中所示，从抑制非特异性扩增的观点考虑，利用降落PCR(touchdown PCR)法也是优选的。所谓降落PCR，是指下述方法：将最初的退火温度设定得较高，按照每1个循环而一点点降低退火温度，从中途开始与常规的PCR同样地进行。另外，从抑制非特异性扩增的观点考虑，利用二温式PCR(shuttle PCR)也是优选的。所谓二温式PCR，是指于相同温度进行退火反应和延伸反应的PCR。
对于PCR循环条件而言，可根据各个引物对而设定不同的条件，但从操作性及效率性的观点考虑，优选的是，以能够在不同的引物对之间使用相同的PCR循环条件的方式进行设计，并以得使用于得到必需的扩增产物的PCR循环条件的变化尽可能少的方式设定PCR循环条件。PCR循环条件的变化优选为5种以下，更优选为4种以下，进一步优选为3种以下，进一步优选为2种以下，进一步优选为1种。通过减少为了得到必需的全部扩增产物而需要的PCR循环条件的变化，能够在一台PCR装置中同时实施使用相同的PCR循环条件的PCR，因此，能够使用更少的资源而在短时间内得到目标扩增产物。
对于PCR而言，可根据每个引物对而在独立的反应容器内实施，但从操作性及效率性的观点考虑，优选在单一的反应容器内实施使用了多个不同的引物对的PCR(多重PCR)。在单一的反应容器内实施使用了不同的引物对的PCR的情况下，优选注意使引物之间不发生退火。从这样的观点考虑，作为优选在单一的反应容器内使用的引物对的组合，可举出以下(A)～(G)。
组合(A)：引物对2及12
组合(B)：引物对4及17
组合(C)：引物对6及15
组合(D)：引物对1、5及/或9
组合(E)：引物对3、8及/或18
组合(F)：引物对7、13及/或16
组合(G)：引物对10、11及/或14
组合(D)为引物对1、5及/或9，优选为引物对1、5、及9。组合(F)为引物对7、13及/或17，优选为引物对7、13及17。组合(G)为引物对10、11及/或14，优选为引物对10、11及14。
对于上述的组合(A)～(G)而言，不需要采用全部，可以根据目的而适宜选择。例如，可采用选自由组合(A)～(G)组成的组中的1种以上，优选为2种以上，更优选为3种以上，更优选为4种以上，更优选为5种以上，更优选为6种以上，更优选可采用全部。按照全部引物对而分别准备独立的PCR反应容器(例如，管)的情况下，需要18个PCR反应容器，但若采用组合(A)～(G)中的全部组合，则能够将必需的反应容器减少至7个。减少必需的反应容器的数量不仅具有经济性，还可增加一次能够扩增的检体数量，故而优选。
使用引物对1～18，以人基因组DNA作为模板实施PCR，由此，能够使包含PKD1基因及PKD2基因的全部外显子的区域扩增，但也可根据需要而进一步组合PCR。例如，根据用于PCR的DNA聚合酶、PCR装置、扩增区域中含有的GC含有率、扩增区域的大小、及PCR循环条件等，存在无法均等地获得足够量的扩增产物的情况。在这样的情况下，根据使用的扩增产物的分析手段，有时期望进一步的扩增，可根据需要而实施追加的PCR。
例如，由于利用引物对1扩增的区域的GC含有率较高，因此，若在与其他引物对相同的PCR循环条件下同时实施PCR，则利用引物对1而得到的扩增产物的量可能会相对较少。在这样的情况下，优选的是，根据用于序列分析的下一代测序仪的种类，以利用引物对1得到的扩增产物作为模板，进一步实施PCR，从而调节扩增产物的量。以利用引物对1得到的扩增产物作为模板实施PCR时所使用的引物不受特别限制，可任意地进行设计。
追加的PCR可使用市售的PCR装置及PCR试剂等实施。追加的PCR的PCR循环条件是任选的，可根据扩增的区域、使用的引物、及试剂等的种类根据而适宜设定。例如，可设定与使用上述引物对1～19的情况下的PCR循环条件相同的条件、对其进行了改良的条件。
通过对利用PCR而得到的扩增产物的碱基序列进行分析，能够确定被检体的PKD1基因及PKD2基因中是否存在突变(基因多态性)。碱基序列的分析可使用已知的测序技术实施。例如，双脱氧链终止法、DHPLC(变性高效液相色谱)法、将核酸内切酶和DHPLC组合的突变检测法、及使用了下一代测序仪的PKD1基因及PKD2基因的突变检测方法是已知的，因此，可利用这些方法检测突变的存在。在碱基序列的分析之前，也可根据需要而将扩增产物浓缩。对于扩增而言，例如，可将扩增产物片段化，调节文库(library)，利用乳化PCR(emulsion PCR)实施。另外，对于扩增产物的浓缩而言，例如，可使用被称为固相扩增(桥式扩增)的方法实施。
对于碱基序列分析的结果而言，在检测到基因多态性的情况下，可判断为该被检体的多囊肾病发病风险高。另外，对于疑似多囊肾病已经发病的被检体，基因多态性的存在可有助于诊断出多囊肾病已发病。此外，确认到PKD1基因中存在基因多态性的情况下，可有助于判断出多囊肾病的发展速度(已发病的情况下)较快。判断为多囊肾病已经发病、或其风险高的情况下，可实施合适的治疗或处理从而延迟症状的恶化或发病。
实施例
以下，通过实施例对本发明进行详细说明，但本发明不限于这些实施例。
1.检体
使用从通过超声波检查未在肾脏中确认到囊肿、可靠地否定了PKD病因的35岁以上的健康成人(男女不限)采集的140例检体进行试验。本说明书中，作为代表例，示出了对于140例中的6个检体的分析结果。DNA检体按照以下步骤进行采集。从健康成人采集7mL末梢血至真空采血管中，轻轻地颠倒混合2～3次后，冷冻保存于采血实施设施的冷冻库内。使用QIAamp DNA Blood Maxi试剂盒(QIAGEN公司)，从冷冻保存的血液中提取基因组DNA，将其作为检体DNA。
2.引物的设计及混合
设计并合成了具有以下表2及3所示的碱基序列的、PKD1基因扩增用引物(9对)及PKD2基因扩增用引物(9对)。
Figure BDA0001353572590000451
Figure BDA0001353572590000461
表2及3中，“开始”栏所示的数字表示各引物的5’端碱基所杂交的染色体DNA(表2的情况下为序列号37所示的碱基序列，表3的情况下为序列号38所示的碱基序列)的碱基的位置。同样地，“结束”栏所示的数字表示各引物的3’端的碱基所杂交的染色体DNA的碱基的位置。“外显子”栏所示的数字表示利用各引物对扩增的区域中包含的外显子的编号。“大小”栏所示的数字表示被扩增区域的大小(碱基数)。“始”栏所示的数字表示被扩增区域的5’端的碱基所对应的染色体DNA的碱基的位置。“终”栏所示的数字表示被扩增区域的3’端的碱基所对应的染色体DNA的碱基的位置。
配制各自以30μM的浓度含有表2及3所示的各引物的溶液，将其以下表4所示的组合进行混合，配制用于多重PCR的引物混合物。
[表4]
Figure BDA0001353572590000471
3.多重PCR
对于上述1中从健康成人采集的10种检体DNA，使用上述2中配制的引物混合物及多重PCR用试剂(含dNTP的SequalPrep Long PCR试剂盒，Life Technologies公司)，在热循环仪(Veriti 96孔热循环仪，Life Technologies公司)中实施多重PCR。具体而言，按照以下步骤进行。向反应容器内添加缓冲液、DMSO、增强剂(enhancer)、DNA合成酶、无菌水、引物混合物、模板DNA(检体DNA)。引物混合物有7种(A～G)，因此，每1个检体使用7个孔，向各孔中添加任一种引物混合物。向各孔中添加100ng模板DNA，以使每1个孔中的反应液总量为50μl的方式进行配制。反应液的组成如以下表5所示。
[表5]
试剂 最终浓度
10×反应缓冲液 1×
DMSO 2％
10×增强剂A 0.5×
长片段聚合酶 1U
引物混合物 0.2μM
dH<sub>2</sub>O 适量
在图1所示的条件下实施PCR。即，使用热循环仪于94℃加热2分钟，使双链的模板DNA热变性。接着，于98℃实施10秒热变性后，于74℃进行5分钟的退火反应及延伸反应。将该操作进一步重复2次，每次分别使退火温度降低2℃。然后，于98℃实施10秒热变性后，于68℃反应5分钟，将该循环反应实施30个循环，最后于68℃反应7分钟，结束全部反应。通过使用了1％琼脂糖凝胶的电泳对得到的扩增产物的存在及大小进行确认(图2)。电泳中，将λ/HindIII digest用作分子标记。另外，使用磁珠纯化试剂(Agencourt AmpureXP，BeckmanCoulter)对各扩增产物进行纯化，溶解于40uL的纯化水中，使用超微量紫外·可视分光光度计(Nanodrop，Thermo Scientific)测定浓度。对于测得的浓度而言，最小的扩增产物为21.7ng/μl，最大为92.1ng/μl。
4.文库的制备
通过上述3.的多重PCR，每1个检体得到了7种扩增产物混合物。分别分取3μl各扩增产物，合并至1个管中。对于像这样按照每个检体分别进行合并而得到的试样，使用柱进行扩增产物的纯化。之后，进行浓度测定，以使其成为0.2ng/μl的方式进行配制。对于经过浓度配制的试样，使用DNA片段文库制备试剂盒(Nextera XT DNA Sample Prep Kit，Illumina)实施试样的片段化及标签序列(barcode sequence)的添加，使试样间的浓度变得均等。
5.使用了下一代测序仪的分析
对于完成了文库制备的试样，使用测序试剂盒(MiSeq Reagent Kit v2 2×150bp，Illumina)进行前处理，使用下一代测序仪(MiSeq，Illumina)实施测序。基于得到的序列数据进行突变的检测。结果，对于各检体而言，确认到存在11至25个多态突变。由此，确认到能够利用通过使用了上述引物的多重PCR法而制备的文库来检测PKD基因中的多态性突变(SNP、插入及缺失)。
6.定位(mapping)结果
将由下一代测序仪输出的由数百个碱基的长度构成的约数十万个DNA片段(read)对照参考序列进行定位，使用浏览器软件(Integrative Genomics Viewer：IGV)，将整体情况可视化。结果，被定位的位置仅为PKD1及PKD2基因中的实施了多重PCR的区域，由此可知，并未受到伪基因的影响。
7.与使用双脱氧链终止法而得到的PKD1基因序列的比较
将通过上述3的多重PCR得到的扩增产物进行纯化，使用双脱氧链终止法进行序列分析。在存在6种伪基因的PKD1基因中，存在多个对于PKD1具有特异性的部位，且其他所有伪基因均在所述部位具有不同的碱基。对于可能会扩增伪基因的7个区域的扩增产物，重点确认了这样的部位，结果，判明了所有扩增产物的序列均与真正的PKD1基因的序列一致(图3)。根据以上结果确认到，通过使用上述的引物组，能够在不扩增伪基因的情况下、高效地扩增PKD1基因及PKD2基因的全部外显子区域。
序列表
<110> 大塚制药株式会社
<120> 用于对PKD1基因及PKD2基因的外显子进行扩增的引物组及方法
<130> P15-138
<150> JP 2014-235066
<151> 2014-11-19
<160> 38
<170> PatentIn version 3.4
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<220> GenBank 登记号 NC_000016.9
<223> 人第16号染色体上的PKD1基因组序列
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61 acagactcca gccgagccca cacctggcta tgaggtgggc cagcggaagc gcctcatctc
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1801 ctccccccca ctgggccgta cccacctcct tgaccttgct gaggcccatc cagaggcgca
1861 gcctgcgcag gaacaactcc accatctcgt agtcctgggg ctcccaggcc ggccggtaca
1921 gctctccacg caaggcgtgg tagcgccagc ggagaataac agcccccagc cgtagggcgc
1981 cccacagccg cagtgcccag agccccacac acagcagggg tgacaggtgc caggactcgg
2041 caggacacag ggtagagagc ccagtcccag ggcacagcac caacagggcc tgggccacgc
2101 tccagaggga gtccacacag gaagacacga gctgcgggga aggcgacacc agtgagggcg
2161 tacagctgag ctgagctgag ctaagacgcc ctccccggcc gcgcagtcac ctaccaggat
2221 ggccagctgg gcgtaggcta ccccgagcac caccaggccc aaggtgaccc ccaggagctc
2281 tggcagagct cggcataatg tcttgccaaa gacggaccac tggcgcacga agcgtagctg
2341 ctgggcagcc tgcggacgag aaatctgtct gcttgcagcc ctggggtgtg cgcccagccc
2401 cgcgcccacc ggcccagccc tcaccttgac caaaagcagg aagagcagcg aggccgccag
2461 gccacgggct gcggagctca gctgcgccac ctggtcgaag ctagtgaagc ggcgcgggcg
2521 gccgcgcacg aaacgggtcc actggcggtc agcggcaccc agctgggcga ggcgtaccag
2581 tgccgtggcc gccgtcagcg ccaccagcag ccaccgcgcc caggctccga gccgcagcac
2641 gcgccagcgc ccttccctgt gccaagtacg ggcctcggcc acggcgaagt gcacggcgaa
2701 cagcagcagg cacacctgtg gggggcgcgg tcaggagggc gggagggacg ctgccggggc
2761 ggggccctgc gagggggcgg gacgctgccg gggcggggcc ctacgagggg gcgggacgct
2821 gccggggcgg ggccctgcga gggggcggga cgctgcgagg gggcggggcg ctgcgagggg
2881 tgagacgctg ccggggcggg gccccgcgag ggggcgggac gctgccggtg ggaggcgcgg
2941 ggtctggccg gggacgggcg taccgaggtg agcagaggca gcgagaggcc cgcgctgagg
3001 cggcgcagcg caaaggggcg gacgctgagg gcggccaggg cgcggccggc cgccgggaac
3061 tcgaggcgca gcgtgacggc ggcgtgcagc cccacggccg ggctgtagcg cgtgagctcc
3121 aggaacacag cgcggctcct gcgcagaggg tgcgggtcag taggagcggg tggcagggcg
3181 ggagctgcgg ggaccgcgca gtgcaggcgt ggctgagggg ctgtggaagc cgcctaggcc
3241 agcgggggcc ggaggagtga gggtgggctc ctggctggtg actgcggcca ccccggagag
3301 ggcaggggag ggagctccca cctgttgtcc agccagttgt gcagctgcag gaagcgcagc
3361 cggtcgcggc tctcctccag gctcaggccc agctcctgca cgtagccccc gctgtcatac
3421 acggcacagg agccccagga ccatgccctg ccggagaggg gtggcgtggg tgccgcaccc
3481 cagcccttcc ggcaccccgg agccaggctg gtcaggaggc cgcggcactc ctggagaact
3541 actcccttgt ccttggcgta gacgcccggg gccctcgctc tgctcacccc agcagatccg
3601 gcgctgaata ggcccacgtc cccgagccat tgtgaggact ctcccagcca acgtcgtaat
3661 cgctggtgct gaagcctcct gcggccgagc acgtgtggac cctggggccg ggagggtctg
3721 ggtagagtgc tgaaacacac agagccccag gccggggcca gggcctcatc aaaacccaac
3781 aggagtgttt cctgctggcc agctcgcctg agctctggtt cggcgccacc ccagggaacc
3841 ctcccagcag ccatcaatta gacaacgtta ccatctctca tatacagaga aggaaacggc
3901 ggtgttaaga gggcaaaggt cacacagcta gggagcaggg ctgatgccag agctccgcta
3961 aaggctgctc tctcaacaag aggaacgatt taagtcttgg ggcacgccct gccagctcac
4021 cttcctgcag ccgcacctgc cgcagccgtg ggggccccag ctctgggctg gactggttcc
4081 cgtggacgta gggcagcagc acgtgggcca tccatggcca gagctcctca gacctgccac
4141 agcatcagtc acacgctcca gcccctactg ccccatgccc gcctcgagtg agcggccacc
4201 agagacccag ggaacatggc tcccactgcc ctgctggcca cggctagacc tgggcttctc
4261 agccttatcc tggggatgtt ctggggcaga cagttgtctg tcatgggccc gtcctgtgca
4321 ctgcaagaca cggacctgtg tccctcccct ctgcctactg atgccagcag cacctacctc
4381 cagttctagc agccacaaag gtatctacac atgtccacat gtcccctagg gtctggctgg
4441 actaaaggca aaactaaagc ccagaagaca gaccagtgca ccggatgccc gtaccgcgtg
4501 atggccagga aggcccggct gtgcagctcc tgcttgatgg cgctttgcag acggtaggcg
4561 tgcccatggc atgaggcatc cccatagctg gccagcaggg tcaccagcag aaaaagcatg
4621 tacaccagga ggctctggtg gacggggggg ccctgtggtc agcctggccc cagcccacag
4681 tgacagcagg gctttggcaa cggctggagc catggctgcg gcaggtgtgg ctgcaggaag
4741 gtgagctggc agggggcgcc ccaagactct acctggccag ggtaatggca gcacacaccc
4801 tgcccggaac cccacctggg ggcagacaca caggccactg cagtggtgct taggggcctt
4861 cagggccagg caggagtggg cattggagct gggccctggc agggactggg gcagcaagtg
4921 gggggcgtgg ggtaggaggg agaccgggca aaggctgcag agcattgaac ccctaagggc
4981 cttctgaggt gaggaaaggg ggacaggagt gtcctgcgtg catgggtggg aggtgggaga
5041 caagagacgg aggtggcagg ggcacaggcc gcacccaggc tcacccgcag catgccatgt
5101 agcctcttga ccttgcgggc ttcttccttg gccaggaaga gtgcaaagcc gtggggtggc
5161 cgtacgcggg gcacacgtgc gctcacaggc gtcacagccg ggctctctac cagggtgtca
5221 tcttcatccg ggtgcagccg cttggccacc agtgagaagt acagggcttc cagcaagacc
5281 tggggagggg gtggcttcag aggggtcccc cgtgatggag gcctgtagcc tacccctggc
5341 agccccctca ccttcagtgg ctcccagccg aggaatgagg ccaggaagct ggcgctgctg
5401 gacaggagcc acgcaacact cacgcccggg gggaagctcg cacccaccca ccctgagaca
5461 gccacagcca cagccaccag gagcaggctg agcccgtggg ccagggaggc acaccaggcc
5521 ggcagcaggc gcttccgcag accctccacc agtcctgggg aagcagagac agacctgtga
5581 gaggcagctc acagggaggg gctaggggca tcccggggct acgcaagcac acctgtcctg
5641 gacagcctcg ctgcctgggg ctgttcccag ttcaggcctg ggctgggtgg ccccagctcc
5701 cccagcctct gcagcgccag cgtctctgtc ttctccccag gagtgctgga cctgagggac
5761 atggtaggct gtgaattcat cccggcctcc aggaggcagt tgcagccaag cccatgttaa
5821 cctgggcggg cagtttcttg agcctcttgg gtcacagggt ccccccgaca aaaagccgga
5881 agaccctacc ccaaacgaga gtgggagtgg tgctgggagc cagggaacca agagccactc
5941 caggcaccga agtcaggcgt ccgcctgcgt ccctctcccg cccgcttgct gctgataaac
6001 ccatcgccca cagcctgacc agctgccctt acagcagtgc acagtctctc agggtgcaat
6061 gagcccccct tcaaccctgc aaactatgat tgggtctcaa ccatccaaca agcatctcta
6121 caatctagag acgccagtgt gtctgtccca tgcaggttta tggcctaaaa ttaacttctg
6181 gacaaggaaa catatgaatg cctttcaaat cccaacagtg tgtagggctc cctgaggcca
6241 gagatctgct tgtgtctcca ggagccagtg accaccgagg ctgtgccact gcatcgggcc
6301 accatgctga tatgcccggt cccagagctg ctagagaaga ggtacagagg cagcgaagac
6361 acgttgaggg ggaggacgag accaactgcg agacgccgag tcccgggctc tcaggacgct
6421 ctcccgtacc tgcgccctcg tcagcccatc accgaaagaa cggcctgacc cagggtcaca
6481 ctgcactgaa tgcttcctgt tttgctgtct ctcggaggat aaaagacact cttggctggg
6541 cgcagtgtct caagcctgta atcccagcac ttcaggaggc tgaggcagga ggatcacttg
6601 agctcaggag ttggagacag tgagaccctg tctttacaaa aaattaaaaa atgacctagc
6661 ctcaacttgg tcaggcgtgg tggctcacgc ctgtaatctc agcattttgg gaggctgaga
6721 tgggtggatc acgaggtcag gagttcaaga ccagcctggc taagatggtg aaacctcctc
6781 tctactaaaa cacacacaca aaaaattagc cggctgtggc ggcgggcgcc tgtaatctta
6841 gctacttggg aggctgaggc agataactgc ttgaacgtgg gaggcagact ttgcagtgag
6901 ccgagatcat gcgactgcac tccagtctgg gcaacagaga ctccatctca aaaaaataaa
6961 taaaaataaa aaataaccca gcctcaacta ttcctttata gcaacacaaa tgactcaggg
7021 tctgactcag ggagcaggct ctcgctggca gagacggaga atggccaata gggaggcatg
7081 gagtggcagg gaatgccagg gcagaggcgc cgccaggacg gagggtgcag gctcaggcgc
7141 agggaaggcc gtgctctgcg ttgggaaagg agccacggga cgcgctggag gctgcagtga
7201 ggaaggacgc agaggggtcc aggacaaacc caagcctccg acctggtcag cccgaagcac
7261 tgtccgagca agggacggcc aagggttgag gaagccggga gggtgagggc cacgcgctct
7321 gtgtggatgc ggagtctgag ctgccgtcag aaatccccgc ggaagcactg aatctggatt
7381 tcacagagct ttgggccgga gatacctggg gctggtcagc atgtagtgac tacccctgga
7441 tttccccata ctctgtattt ttaaaaccaa ccagcaattt attcataaag atgccctcat
7501 gtgatggtta tctgcctttt gtaaatcagg aagttttcct ttttgtttga gtccaggggc
7561 agttcatacc tctttagttc ttggttgctt aacaatgaga agcactcaaa ggaataacac
7621 acaaatcaaa ctagatgtgg atgcaaaagc agcagtcacg caccacttag tgccagggat
7681 gtgttctgag aaatgcgtca ttaggtaatt ctgttgctgt gcaaatgtca cagggcgtag
7741 ttacccaaac ccagacaccg cagcccctgt gcatgcaggc cctgtggtgt ggcctgtggc
7801 tccggggcac cgcacctgca ctgcatgcca ctgcactgaa tcctgcaggc agctgcagtg
7861 caacggcagg gccgtgtgga cctcagcaca cctgagcata ggagggcatg gcagagcccg
7921 gggtcacacg cgtgggaaca cgccgtgggt gcgctccgcc gccggctgcc atgtgcgtga
7981 ctatgtgcgt gactacatac aaggtaacct ctatatgacc atttgttgat aagttacaaa
8041 acaaccaaga aattgaggaa tttttttgtt tttgagacgg agtttcgctc ttgttgccca
8101 ggctggagtg cagtggcgcg atctcggctc actacaacct tcacctacca ggttcaatcg
8161 attctcctac ctcagtctcc cgagtaactg ggactacagg cgcctgccag catgcccggc
8221 taattttttg tatttttagt agagacgggg tttcgccatg ttggccaggc tggtctcgaa
8281 ctgctgacct caggtcatct gcccacctcg gcctcccaaa gtgctgggat tacacgtgtg
8341 agccaccgcg cccggccaaa aatggggtat ttaaaaaccc gcccataatt tctcactgct
8401 ctgagaccaa gataaaaacg tggccccggc cagcctcaca caggagcctt tctgctccta
8461 caaagcccca tgagcctgct ccctccctag agggaaggtt ctggggccct ggggatccca
8521 tgaggctctt tccacagaca acagaggttc agagaagtga agtggtgcag ccacagccct
8581 gccctggcac cccaccccac cctaccccag gcgggaacca cggctgcctg gcctgagtcc
8641 cggcccctcc tctggcaatc ccccctcccc cgagagccgg acactcacag gctgctgagc
8701 aggtccgttt ccatgtgggt gtcttgggta ggggctgggc tgctgacccc ctcggcaagg
8761 acctgctgga tcaggtcttc atctagaggt acaggaggca tagggtgggc ccagctgcaa
8821 gggtgagctt cagagccccc tcctctcacc ccagctcacc tgatgctgag aaggatttgg
8881 caggcgagta ggggctggcc agggagaagc cgtcctcctc tgggcccagc ccatggcccg
8941 cctggccccg tgccagctgc cgcagattgc tacccacaat ggacgggtca ctgagcaggt
9001 ccggccaact gagcgttccc tcgccggagg gccagcacac cagactgcag gtggcgcggg
9061 tcagcaaggt accaggggat gtgtcacaca cacagcccac ccccgtccag tcacgcacgg
9121 acaccctggg cttccgagca aacctgctcc cgggtggtgt gaccacatgg agccacagac
9181 acccagcaag gacacgcagc ccgcacaccc ccggcacccc agacacagtg acctgcacca
9241 gggctcgagg tttctctagg gaacccacct cttagaatca tccagaaaca agtcactctt
9301 catctgtcca acaaaggcct gctgagaggt gcacagtgtc ttgagtccaa gctgcgccaa
9361 ggcggcagga cccccagccc agcccaggac ccccagtaga gtcctcacct cagcgtggag
9421 gcctgagaac gtgaggaagg agctgtccag cacggacgag tccaggcagc tgtcgatgtc
9481 cagcacctgc tgcccggcag gtgtggggct cgggctccca gccacctgca ggacgagggc
9541 agtggtcagc gggcggcagc tcagacctgc tcaggacagg gatgagaagc cacctcctca
9601 gcagacagga cagagcccgg tgccatctga cagaatgtcc tagaatgctg gatatatggg
9661 acatctgcac cgtccgtgat ggcagcccct cgcgacgtgt gccactgaac acttgacagc
9721 agactggtgc agctaaggaa cagagtttta aatttcatat tttctttttt agatggagtc
9781 tcgctgtcac ccaggctgga gtgcaatggc gcaatctcag ctcactgcaa cctccacctc
9841 ccgcgttcag gcgattgtcc tggctcagcc tcctgagtag ctgggattac aggtgcctgc
9901 caccatgccc agctaatttt ttgtattttt agtagagacg gggtttcact gtgttggcca
9961 ggctggtctt ggaactcctg acctcaagtg atctgcccgc ctccgcctcc caaagtgctg
10021 ggattacagg tgtgagccac cacacccggc catcgttcca ttttaattaa cttaaatacg
10081 agcagccaca tgtggcctct ggttcctgcc acggactcgg gagcaacccc tcctggtcgc
10141 ggcttatgcg ccttctctgt gtgctgctgg ggttagtttg catgtaacct cttgaggacc
10201 ccacgtgtgc attcctaagg ggtgcggcct cccgtttccg tatgaatggg aagcgttccc
10261 acctgctgta ttcttggaaa gagtctgtga aggattggtg ttaattcttc cttaactgct
10321 tagaaaaatt ctatcgtgaa ggctctgagc ctgagctttt ctttgtggga tttttttttt
10381 ttttttttgg agatggagtc ttgctccgtt gcccaggatg gagtgcagtg gcgcaatctc
10441 ggctcactgc aagctccgcc tcctgggttc atgccattct cctgcctcag cctctcgagt
10501 agctgggact acaggcgccc gccaccatgc ccagctaagt ttttgtattt gtagtagagt
10561 cggggtttca ttgtgttggc caggctggtc tcgaactcct gacctcaagt gatctgcccg
10621 cctcggcctc ccaaagtgct gggattacag gcgtgagcca ccgcgcctgg ccctttttaa
10681 tgttttatat agatggggtc ttgctatgtt gcccaggctg gtctcaaact cctggactca
10741 gatccgccca cctcggccac ctgaagtgtt gggattacag gcgtgagcca ccacacccgg
10801 cccggccact gggacgtttc taagggacta actcagcctc ttcacttcct atagatgtac
10861 tgagattttc ttctggagtg catttcggaa gcgtgcacag ccgcgtgctt gcttcttctg
10921 agttatctgg cgtgctgctg tgcagtcgtc cgtggcgtct gcttagcaaa gtgccctcgt
10981 tctttcacca ttctggcttc tgagtcttct ctctttctcc ctggtcagtc tagctaaggc
11041 tgctcaagtg tgttgaccct tcccgagcag cctttggtgg acgcctttcc ctctggctgc
11101 agcactggaa agtggcggcc ctaggcatgg tgccgaggcc caggctccat tcccagtact
11161 cccgggtccc cagccccagc ccaccttgct ccgggacatc cggaagagaa aaaggatggc
11221 caggtagacg ggatagacaa ccacgctgga caccaggcca acagcgactg tgtcgacgct
11281 cagcgggctc agcctggaca catgccccgt gctgtgtgga ggagaggagg ccacacaggt
11341 gaggctgagg ggcaggaagg gctgggcagg aagaggctgc cccgacccct acggcaccca
11401 cctgtaggca gagtcgccaa cagccccgta ccacacggcg ttggcgccca ggaagaggca
11461 gatgaggaga acgcagcagg tggccctctg gatgcgagtg aaacggctac gaggcggccg
11521 gtcccatatg gagagccaga tgtgcttgtc aaagaagcca cgctgcagct cagccaccag
11581 caggcgccgg aagcgcaaaa gggctgcgtc gcctagaagg cagggagggc cgcactgcag
11641 gaggccacgg ggcaggacca ccctgcccaa cctcccacgg agtgggaaca tggaacgagg
11701 ccttactcgc ggccagcacc tccttctcca ccaggccccc gttggcctcc gtctccaccg
11761 aaagccagtc attgaccagg aagaaggcgc tgcgtgccgt ctgcaggtcc ctgacgatga
11821 cgtgctgcag gaaccaggca gggctgagcc ctgcagaggc gcaggaggga ggtcaggctc
11881 gcagggcgcc ccaatgcggg ggcagagggg cagagcttgg cagggtccgc acaaaccttt
11941 gttgtcgtgc cacactcgga tcttccacac gctacccagg ctgtgcgggg tggcgatccg
12001 gaagatgtcc aggctgttgc ggtggaaggc tctgtcgccg tccaggtgcc ggtggccgct
12061 ccggctgtcc accccataca gcatgatgcc cacgtgggcc gtggtacctg ggaggcaaga
12121 gggaggggtg ggaggctcgg tctgctgccc aacacgtgtg gcatcccagg caagtcatct
12181 cagctttggc ctgtgcgcac tcaaggagcc acacaggcag tcccggcttt gcacggctct
12241 gccatacaca aggagctgcg gttactgcaa tttgtccaat taacagcagg acctcaagga
12301 catgattaag ttacatggaa agaactgtaa cttgtgacat gcaaacatgg ctgcacacgc
12361 ctcagtccac accacaacca gtgacccgca ctgcacacct gtccacgcct cagtcatgcc
12421 acaaccggtg acccgcacca cacacccgtc cctcagttca tgcacagact gcaaagcgtg
12481 aagctgtgtc acctcctctc ccagtgacag acccaggtga cagtattttt tttctttttt
12541 ttttgagatg gagtcttgct gtgtcaccca ggctggagtg cagtggcgca atctcagctc
12601 actgcaagct ccgcctcccg ggttcacgcc attctcctgc ctcagtctcc caaggagctg
12661 ggactacagg cgcctgccac tacgccgggc taattttttt gtacttttta ttagagacag
12721 ggtttcaccg ttagccagga tggtctcgat ctcctgaccc cgtgatttgc ctgcctggcc
12781 tcccaaagtg ctcggattac aggtgtgagc caccgcgccc ggccgacagt ttttaaaagt
12841 aggtaatcaa aagaaagaac tgggcaatga agaggaaagc agcacagaga taaaaaatgg
12901 gaacacagcc aggtgtggtg gctcacacct gtcatcccag cactctggca ggccgaggca
12961 ggcggatcac ctgaggtcag gagttcgcct ggctgacatg gtgaaaaatt aactgggtgt
13021 ggtggtgtgc acctgtactc ccagctactc aggagaatcg cttaagggga atggcttaaa
13081 cccgggagct ggaagttgct gtgagccaag atcatgccat tgcactccag cctgggcaac
13141 agagtgagac tccgtctcta aaaaaagaaa aacgaaaaca aaaagggaat gccagaaggg
13201 caattccaat gaaaggaaaa tggaggtact gaagaaacag ccacggggag ggtgctggcg
13261 cctccgtctg agagacgagc tatgcagtca ggatcgcggg tggatgcaca gtctcccaca
13321 gtggtagcga tgctcacgtc acttgtgggg ccacgctact gtgcagaacg tgggctgccc
13381 accctgactg actggcacct acttccagct aggagctgtc ctagtcctca gggacagtga
13441 gtgctcacga ggtcattccc aggatgaaca cacgagccct tcacacagca ctgcaaaaac
13501 tgccttgttc tgacgcctgc gacgagactc actcccagag ggtgcaacca gcacagccag
13561 tgagagcagg ggaggccctg ccaccccgct gcgcccctca cctgagcccc ggccccagcc
13621 tgtcttgacg aggatctcgt acttgaagcg gccccgctgc ccacagaaag ggatggcgcg
13681 gccccggctg gcatccaact ggtccagctt gtgcaggatg gcggccatga ccatgtaggt
13741 caccaggcac acagcacatg tcagcatgac gatgtagttt acatccgctg tcggctcctg
13801 tgaggacaca gccgccgggc ccaggaggtc acgtgcaagc tgtgccttct caggatagag
13861 ccgagcccac ccaggccctc ctcgactctg cagaggctcc caggagcaca gggtcactca
13921 caggaaacac aaagcggaca tggcttgggg gcacgaagag gctggcgccg aaggcggtga
13981 ggtggcgggt gaggcagacg gcctggcggg gcgaggtctc ctccaggggc agcagcccct
14041 ctgtccgcca caccatgtcc tcctcgctga agtactggca cagggacgtg tacaggccca
14101 cggacacctg cagcgccgac cagcggaagt ggctggagag gttcagatgg taactccccg
14161 ctgggtctct gctcctgggc agggaagggg tagcggacgt gagcccaggc tccgccaggt
14221 tggatgtcgc agtctcagag cccatacccg gtccagtccc ctcgctgcct gccgtcccca
14281 tggggccagt aacccaggca atgctgaccc atgatgccct gccctgccct gccaggctgg
14341 cccgcagagc tcaccccggg gaaatgaaga aggtgtaggg ccggtggtca gcaccctgga
14401 gtgactctgg gcggatcctc ctgctagccg agcagttgtg ctcattgggc cggggctccg
14461 agtgtaggta gactgccagg tagggctcag gttcctcaga caggtagtgg cctggggcag
14521 aacgcgcagg tcacacgcct gccgggaagc tcaaccaccc gggggacacc cacgatggcc
14581 ctcctgagcc caccctctgc cacgggcctg aaaggccata ggagcctctg caccagagct
14641 ggcacctgct tctccgtggc ccccagctcc tctctggcca ggcccccagc agcccatgaa
14701 acagaaagca aatttcacca gagacaccca tggaagccct acgagaaacg ccttcccccc
14761 aagaacaagg ccagggggcc gcgtgtgccc cacccgctgc acgcaccgtc cagcagcgta
14821 tagttgagct gcagatgcag cccggccgca gggttgctgc tgtccagggt gaccacagca
14881 ccgacggagg cctggggctg gaccacaacg gagttggcgg agttggcgga gctgcggtgg
14941 ccccgggcag cccagtccga gttgttgggc accttcacgg tgatggcgcg ctctgaggcc
15001 agccgctcga tggggatctg ggcgccggcc tgtgtctgga atgccatcga ggccaccttg
15061 gtggagacgg tgtagttgct gatatagcca aagggaaagg gattggagtc caccagaaag
15121 atgagctgca ccacgtcact gaggttggcc agggccccgc tgaaagcctc ggggatggag
15181 aagtggcagc caggccctgg ggcgccgcca tagcacagca ggctccgcgg gtccgagcgc
15241 ttgccctggg ccacgatctc ctcgcccgcc agcgtcaggg gctcctcgtt gagcacgcgg
15301 gagcgcatga ggatgcgcat gagggcagag gtcaggttgt aggcctggga cgccaccatc
15361 cgagatggtg actcggctcc cagctctgag ggctgtggtg cccgcacgtc cgagctggcc
15421 aggtggatga ggtctcctgc agacatgcgt gaggtcagtg cagagacagg gaggtagagg
15481 gagggtgggg gcaggcaaaa agggggagcc ggagggtggg ggctgggaga aagggggaac
15541 ctgagggggc agagagcgag gtgcaggcag aaggaagggg gaagctggag agagagtggt
15601 ggagggggga gggggaaggt gatggggatg aggacgaaga tgagggggat gatggggaga
15661 gggaggaaaa aggaaggaaa agggtagaga aaagagaagg gagaagaaga ggagcagggg
15721 gaaagggagg ggaaggggga taagggaggg gaagggggat gagggggatg aggaagatga
15781 ggggaatgga caaaaggacg gggaggacgg ggggggaaat ggagaaaagg ggagagagat
15841 ggagaaaagg gatggtaata gggaaggggg agggggagga gaatgggaat tgggggaggg
15901 ggatgaggat gggaattggg gggaggggag ggggacgaag atgggatggg gcaaaggcga
15961 cgcggttggg gggaggaggg aggcagagga aagggccgca cggggcgggc gggtggcatg
16021 gggcacgggc cgcggcacct gtgatgttga ggatgctgtc tccgatggcg gtgggcgtca
16081 cggtgcccgc ggtggtctct gcctgcagga tgagcatcat ggcctccagc ttgtgcagcg
16141 tctgcttcag gcacgagcgg catacgagct ccctgctggg cccctgtgtg gagccagcag
16201 tgtccagccc cgctcctggc cccactcctt gcacacgccc tcctctctac acgggtcctc
16261 acctggctcc cacccccagc cctgcagctg gagagcccac ttgactggac ccccacagcc
16321 tcctcactaa gcattttctg tggctctgca tgacccaggg cctccacctg gggaccacgt
16381 gatgcagccc accgaccaca caaggcacct cttcacatga gagcggagga ggaggggaga
16441 gaggagaggg gagtggagaa aaaggggagg ggaggagggg aagggctggg ggggaagaag
16501 ggaaagggct aggggagggg aggaggggaa gggctagggg aggggaggag gggaggggct
16561 aggggaggga agggggaggg gaggggaggg gagagtggag ggcacagagc agcatcttct
16621 tagtccctcc ccacatctgg gcccctcttt acaccctggg tcccccgaga ggcaccctgc
16681 gttcacacag gacagaacgg ctgaggctac tgaagcaggt cagagaccga ggaacgccat
16741 ggcaggaagg agcccaggct ggaggctcag ctcctcggcc aagctgcccg tctgccctgg
16801 ggggctgaac ccagtgccct ggcaggcatg cggggcaggg tgagcaggtg gggccatcct
16861 accatgcact gggccagcgc agcagcgatc tgctggatgt catccacagt gtggaccctc
16921 agggacacca gagtctccgt gatgttcttg cgtatctggg ctcggtgctg ccgctcgtgc
16981 ttgggctctg ccgccacgtc cagggcccgc tcgtactggg gcaggcaggg ggcacagcaa
17041 gctgtcagca gcgcaggagg ccggcaggag gccagcagat gcccacgact cccggggtgc
17101 agttacgtgc tagacgctgt gtgatgcggg cactgaccca caacactgag ctgtttcttc
17161 atgggcaaaa cagggtaagc acatgggccc tcctgggcgg gggctgcatt gtggaaagca
17221 gacgccggag agggcccggt gggtgtggct gctgggagcg gaaggtcggg gtgctgcttc
17281 agggtcactg ggatttatct ctggggcccg ggatgagccc tctgcaaagc tccaggcagg
17341 ggtacaggtc ttggtcccaa gcacgcatgc agcagatgtg acgtcccctc ccaggctgca
17401 ctcacctcgt tcagcacggt gaccagggcc aacgagtact cgatgacgtg ctggggatcg
17461 gcctgccgca gcagccctgg gagcacacta gcggtgagcc cgtgcagcca gactgtgagc
17521 cccgttgcgc tgccgttggg ctctgggagg gtgatggcca aagacctacg agcagagggg
17581 ggtggtgagc aggtggcagt ctcgggggcg ccctcccacg gcctggctca cctgttgagg
17641 gcgaccacag cggctcccag ctggtcctgc accaccacgg ccaggcccac ctcgaagtgt
17701 ggcctgaaac ccgggggcag cacggctccg tagctggaga ggctgccctt gtagacacag
17761 aactcctcgc agtggccctg gcgacagcgc cgcagcagca gggcgtacac cagcggggcg
17821 ccagcatcct ccgcgtcatg ccagcctgag ggacggtccc cacggcatca cgggagggct
17881 ccgtgacgtc acagagtcgg gggatcccgc tgctcccccc acgcaggcct gcactcaccc
17941 gtgcattcga agtgcacctt ggtggtgagg gcgtgcacag cgcccagtgg gaagaggcgg
18001 caagagcccc ccagcggcgg gcggttgggg gacaggcgga tggaggcgca gccctcctcc
18061 tcgccagagc ggcccagcac cgtgagcgtg aaggtgtatc cctcgccgtc ccgcagcacg
18121 ccccgccgca gcaccagtcg catgcctgca ctgcccgtgg atgtggtggt ctcatccagc
18181 accagcgtct tgttgctgaa cgtacgtgca gcccaccgct gcaggcagaa ggggtggtga
18241 gggggcgcaa ccctctgccc tgtcagcccc acttctgcct gcaggccccg tcccctcggc
18301 catgggaccc atccccagcc cgcccacacc ccgctcaaca ctcacccctc gcttggagcc
18361 gctgctgcaa ttgaggcagc ggccctccaa gtacacgtag gagctgcggc tcacttcgta
18421 cacggcctgt gccttgcagg acacacactc caaggacaca atgggcaccc ggccactccg
18481 gatcagcacc tggcgtggga gtggggttac ctccaacaca ggtctatttg gcctgctgga
18541 aggactgggg gacccatgga ggatgctgct cccaaactcc aggtttccca ggggcctggc
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18661 gacggcggaa gggcatacac agggcagagg acactggagt gtgcgttctg gtgtactgga
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19021 caggagcagc caccacgggc tcagggtcac caagcctcct ggccggtcca gagaggggag
19081 cgtgagggtg agaaccggcc caccacatcc agcaacaggg acatgggctg gggacagtgg
19141 ctacctctgg ggtgggaagg ggctcttcct cactgttggt attgctaggg gactgtgtag
19201 cttttgccac tagagcatat gtggcttgaa gactgtacgt ggaactgtgg caggtttgga
19261 aggaagcaaa gctgaagcag gctgtcgtgt tacatagaat ttgcatcaga aacagagagg
19321 ggagagcgtg cggcctccac cagcactaaa acacggaaaa cagtagatga ccagggaggc
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19501 gccgctcccg tggaatggtg accgtgctgc tcccgcgggg cccaaagttc agcgcacacc
19561 cgccagcctc cctctgcagg ccgagaacaa ggggcgacgt ggcctgagag ccccatccag
19621 ttttaaagca gagcccggcc caggagacag cgcgggagac cccctcccca tgctgggacg
19681 gggcccacca ggcactgagg acgggccagc cctggtggca agctgggtgt tctctgggct
19741 catgggtgtg gacgggtgag gggcatggag gacggccctg ccacgcactg acctgtgtcg
19801 aagccacaca ggcccagtgg aaactgagcg gcgtctggtc gccgtcctcc aggttggggt
19861 cgtaggactc gctcccatcc agcaccaggt cccgtgtgtc tgaccacacg cggtatgagc
19921 caccctcaat gatgggcacc aggcgctcgg gggccaccgt cacattggcc tggatgctct
19981 gtgtcagtgg cgtgtcccca aatgacacga caaacacaaa gcagtagtgc cccacaggca
20041 gcgccagccg cggcagcacc agccgaggcc ggctcacgtc cacgccgggc agggccacac
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20281 cctggacggt caccgtggcc tgcgccacga agaagctcac caggttggag gcgttcacct
20341 gcacgcggta gtccccaggc ctcaggtagg agtgctcggc cctgggctca tctgtgtcct
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21721 agacgttggt gccatcccta accacggcct gcagctgtac cgtgtggttg gtggggaagt
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22141 agtcacctgt gctgttgtaa gcgtgggtga cctccggacc ctcgagccac ccaccgtccc
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28441 gggcccgagc cggacgcagt gctcggctgt ggctgggtgt ggctccccgg gcagccagtt
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29401 ggatgctgag gtcgaggctc tcgtcactct gcaccgagga cgggcacacg agctccaggg
29461 cggcaggtgc cgcttccacc tgcacgtctg tccccagcag ggctgagccg gcccccaggg
29521 ccagcacggc cgtcacgtga tagcgcccag gcagcacata gcgatgcgag gcagccggcc
29581 cagcggcatc cacctcggcg gagccgtctc cgaagtccca gcgtgtggca gtgacaggga
29641 gcggggcagc gatgtggaag gctgctagct ggccagaggc cagaggtccg tggggcccca
29701 ccagggtggc ccctggggag gcagggaaga cgtgctggag gagggtgggg cccctacagg
29761 tgggggcagg aggtggcggg gggccggagc agagggacag gcaggcaaag gaggcactgg
29821 agggctgggc cgccccacac aggcaccagc cctgctccga gagggctgcg aggccctggc
29881 cggtggagaa gcagaaggcg ctgcaggcct ctggctgaag caggccttcg tgggcagctg
29941 aaaaggacac tgctgccacg gtgcctgagc tgttgtcagg gaggcaggcg acatactcct
30001 cacctagaag aggcagccac tggaccccgg gttctgctcc tcctggctcc accccacgcc
30061 cccacatccg cccgccgcac tcacaggctc ccatgctgtt cccttggccc ggaggccccc
30121 cccagagagg ccttcctgag ccctgcccag tgtctgcagg gcccaggtcc cacctggctg
30181 ggaaggacag agctggcccc acccaccggc actcaccaca gccactgtcc agcaagggga
30241 tgccaagcag aggctggcca gccagggagc caggcccagc acacgtggct gcctcgggct
30301 gcaccacccg cacctgctgc tcctccgccc atcgcggcag ccacgccagg ccacagtcac
30361 actcaaacgg gttcccactc aggtttctgc agggcagggg caggtgttgg ggaccaggtc
30421 tggtgggaag ggtctatgcc agccccccac tggcaaccag gccctggagc caccctgaca
30481 gcaccgcctc ccctgcccca accaagccgg cactgggggg ctccaagcag gcagtgaact
30541 gcccccagga tctggtctca agcctggaag gggacacgga ccaactggga gggcagaagg
30601 gatattgggg gcctggggtc cagccaggac cccacccaaa gaaccacaac ttacatttca
30661 cttaaattaa ataaattagc aaatattcct tcttctaacg tagaaatctt gttgttgctt
30721 atatccctgg aagagacggg ggattcggca aagctgatgg aagcccccac agctgagcag
30781 caagaggcgg tgccgccagc ccacccggag tgagccccgc atgctggcac gactggggga
30841 cactcacagc tctgccagcg ccgagaggtt cgccaggagc ccaacgtcca gcgcccggag
30901 caggttgtgg gagacgtctc tgaggagtga gtggccgtgg gtcagggcca gagcccctag
30961 taggccagag gccatccctg ggcccatccc acacattgcc agcatcccca agctatggcc
31021 tcccaccctt gagctcccca ctcccagagg tcaggagggg actttctgat ggaagaccca
31081 aatgaacact catctgggga aaccaagcca ggagaggcct gggggcctca gccctctgca
31141 cccatctcag ccctatgccg agtgccacat ggacctgtcc acccagggcc aggaagggca
31201 cggaccccca acccatccca cgcagggcca aggcccccca tcccctgtcc acagtccccc
31261 acagagccaa ggtctcccaa ccctgtccac agcccccaca cagactcgag gggcccccat
31321 ctcctgttct gaacccaaca gggtggtccc actgtgggac cacaaccagg tatgactgtg
31381 tgagaagcag gctcactacc aggctaccag ggagcacagg ggagcaggcg ccacctcgag
31441 gcataaaccc agagaaacaa gacctccaag acggccaggc actggggcac acgccggtaa
31501 cacagcaccg tgggagctga gacggaagga tcgcctgggc ccaggatttt gaaaccaccc
31561 tgggcaacac agtgagaccc cgtatctaca aaaaatacac attagccagg catggcggca
31621 tgcgcctggg gtcccaagta ctcgggaggt agaggagaga aaaatcactt gagcccagag
31681 aggtcaaggc tacagggagc tgagatcgca tcactgtact ccagcctggg tgaaacggcg
31741 agactctacc tcaaaaataa ataaatacat acataattaa taaataaaac atcaaagacc
31801 agccgaccta actccatcta aaatacacaa cttctacgca aaatataaat aaaattagaa
31861 aacaaactac aatctcagaa aagcactagc aacttacacg acatactaaa ggccaaaaat
31921 accctcctga cacacagcta ataaagaaaa cgtcaactat tccagttaaa aagaagaaaa
31981 ggaaactggg tgtggtggct tatgcctgta aacccagtgc tttgggaagg ccaggagttt
32041 gagaccagga tggacagcat agcaagaccc catctctaca aggaaaaaaa gaatcagcca
32101 ggcatggtag tgtgtaactg tagttccagc tactcggggg gctgaggagg aaggatcgct
32161 tgagccaggg aagtcgaggc tgcagtgagc tatgattgtg ccactgcagt ccagcctggg
32221 cgacagagca agacccggtc tcgaaagaaa acaaagagaa agcaaggaaa gaaagatggc
32281 cgggcacggt ggctcactcc tgtaatgcca gaactttggg aggccaaggt gggtggatca
32341 tgagatcaag agatcgagac catcctggcc aacagggtga aaccctgtct ctactaaaaa
32401 tgcaaaaatt agccgggcat ggcggcggga gcctgtagtg ccagccactc aggaggctga
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32641 tcctgcctgt aatcccagca ctttgggagg ctgaggcggg cgcatcacct gaggtcagga
32701 gttcaagacc agaccgacca acacggagac accctgtctc taccaaaact acagaattag
32761 tcgggcgtgg tggcaagcac ctgtaattcc agctactcag gaggcttagg caggagaatc
32821 acttgaaccc gcgaggcaga ggttgcagtg agctgagatc gcacccctgc actccagcac
32881 cccatcctgc aagagtgaag ctccatctca aaaaataaaa ataaaaaaaa aaaggatgga
32941 gggtgagagg gagggaggaa agaaagagaa aactccaaaa acaaaaaaag aaaaaccagg
33001 caattagaag aagcacaatt ggtcacagcc gtaggaaaaa catcccatgt cagtagtcag
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33121 agttacaaac caggtcctgg agctggtgat gcggaggtga gtagacagag agctggggca
33181 aaccgagaac tccacctccc ctcggcctca agcacctcgg gggtcactct gccgcccacc
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35461 gcaggacggt gccccagccc cgggacacaa ggggtcccca gcgccgagcg tccgatctgg
35521 aaggcgggag gagttaggac catcctagcg tgggacccag cgggctcctt agcggctgct
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36121 aatggcccca gacaaaccag acctgcctca gagtctcaca ctcagagctg agtgccccag
36181 gcgcccactc cccagaccag atgctgagtg gggtctgggg gccggacgga gcccccaaag
36241 aaacatctgc acattccaga cacgtgtggt cagcagcggg tgtgcgccag gcccggcacc
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36361 cctgcggagc ttatgtaacc gctcctccct cggcaggggc aggacaggac gccagaccca
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37441 caaggggccc tcctcctccc ccaacaccat cccccaaaca cctccccggg cagccagcag
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38461 ttggcagcgg tgcccggcca ctgtcaccag atggtggcca gcgcatcacc cactcatggg
38521 ccaggatggc agaggagatc cacagagacg gctccagcag gaggccctca tagagatgcc
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38701 cacctaacag caagaatgca gcggggtccg cacatcaggg cgggcactga gcggaactca
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39121 gcatggagga caggggaatg ggcccccgga acccctgagg gaaccgacag agctacttta
39181 acaaggtatg attgttgggg ctgccagtgg ctgagccagg tcactgctac actgccctgc
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39901 cagcacccaa gcagctgcac ctgggcgcag ggcccctcag cccctcgggg agtgcaagca
39961 catcgcagcc cgactcggaa gcgccactgc cacctctgtc tgtctataaa ccagggcact
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42061 gggtggccct ccttctgctg agggctcatg gaggccttgg tgacaatccc tagtcctcgc
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42301 ccctacactc tcccacactc tcctgtcatt cagggatgca ggtgggaaag ggcaaggccc
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42421 agtcctggac cccagcattt gcgagacagc agcagaccca ggtgaccccc agccagggtg
42481 agtggcaacc agcaccagaa gtggccttta gagcaggggg ccctgagctg atgacatcta
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42601 caatttacaa gaaacacaaa gcacacactc acagcaccac ggaggtgaca ccatggaggt
42661 ggcaccccca agacacagcg agaaatccag gctgcaggag ccagtttctt caacaaattg
42721 cacaaggaaa aagagaggaa gggaagctcc tagacatcat cggacattta aaagacaggc
42781 ggtggctcaa gcctgtaatc ccagcacttt gggaggctga ggcgggagga tcacgaggtc
42841 aggagatcca gaccatcctg gctaacacgg tgaaaccccg tctctactaa aaatacaaaa
42901 aattagctgg gcatggtggc gggcaccagt ccaggctact caggaggctg aggcaggaga
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43081 taaaatacat cactcacacc tgtaatccca gcactttggg aggccgaggc aagcagatca
43141 cctaaggcca agagttcaag accagcctga ccaacatggt gaaaccccat ctctactaaa
43201 aatattttta aaaattagcc gggcgtggtg gcgcgcgcct ctaatcccag ctactcagga
43261 ggctgaggca ggagaatcgc ttgaacccgg gagatggagg ctgcagtgag ccgagatcac
43321 accattgtcc tccagcctgg gtgacagagc cagactccgt ctcaaacaaa acaaaacaaa
43381 agacatcagc tagctggtcc aagcacagtg gtgttcacaa cgaattgatc acagccaggt
43441 agaattcttc attctttctc cagtcctact gctttgcttg accagcctta aagacacaca
43501 tatatttttg tctgggcgcg ttggctcaca cctgtaatcc caacactttg ggaggccaag
43561 gcaggcggat cacctgaggt caggagtttg agaccagcct gaccaacgtg gagaaacccc
43621 gtctctccta aaaatacaaa attagccagg catggtggca catgcctgta atcccagcta
43681 ctggagaggc tgaggcagga gaatcacttg aacccgggag gcggaggttg ccgtgaggtg
43741 agatcgcgcc actgcactcc agcctgggca acaagagcga aactccgtct caaaaaaaaa
43801 aaaaaagtat atatttttaa aagacattgg ccgggtgcgg tggctcacgc ctgtaatccc
43861 agcactttgg gaggccgagg tgggcagatc acgaggtcag gagatcgaga ccatcctggc
43921 caacacagta aaaccccgtc tctactaaaa atacaaaaat tagctgggca cggtggtgca
43981 tgcctgtaaa cccagctacc aggtactcgg gaggctgagg caggagaatc gcttgaacca
44041 gggagtcgga ggttgcggtg agctgagatc atgccactgc actgcggcct ggagacaaga
44101 gcaagactcc gtctcaaaaa aaaaaaaaaa aagaaaaaaa aaaagacatc aactaattgc
44161 agtgtgtgga ccttatttgg ctcttaattc aaactattaa accaaaaatg tgaacacacc
44221 aggccttcgg tggcatgaag gaactgtctg ttgtgttagg tgggtctgca gtattgcgat
44281 gccctccaaa atgcttgcag ataaaagggt ggctggaatt tggttcaaaa catgggtcag
44341 ggctgggcgt ggtggctcat gcctgtaatc ccagcacttt gggaggccga ggcgggcgga
44401 tcatctgagg tcaggagttc aagaccagcc tgaccaatat ggagaaaccc tgtctctact
44461 aaaaatacaa aattagccag gcatggtggt gcacgcctgt aatcccagct actcgggagg
44521 ctgaggcagg aaaaagcgct tgaacccagg aggcggaggt tgccatgagc cgagatcgtg
44581 ccattgcact ccagccttgg caacaagagt gaactctgtc tcaaaaaaaa aaaaaaaaaa
44641 aaaaaacaca tgggtcagga gggagaaggg tcggggcagg gagggcaggg caggctctgg
44701 ggtggggggt ctgtgagtca gccacggctc tgcccacgtc tccccacgaa gcttcgagcc
44761 acgcagagca gcacgttttg cagtacgcca tcttttccaa aagccaccac ctctcggcag
44821 catcattaac ccaaggcagg ctgtggcctc agaagccccg gctgtcctcc acctggaact
44881 ggacacagct gtccctgctg agcttcagca gccagggagc cacaagtgga gaggcacctg
44941 cgtgagcccc ccaggaaggc tactggtgac acccagacag caacgctctt ggacccttga
45001 acacctgcca gcagctgtga tctgtgtcct tcacctctcc cagcttgacc cctcttccct
45061 ggggaaaacc cagccgtctc cccgaggagg agtttgcagg gtagacagca aaatggctgg
45121 gctgccccac agcacagagg gtggcctggg gggccagcca gggccttcac atccttccta
45181 aggccctagt ttgccatggg tcccctcacc ccaccttcca gaactctccc agcggcggcc
45241 ccaggtgtgt acagaacagc acccacctgc ccacatgagg tcaccctgtg ccctgttgca
45301 cacttggggg gcctggcatt cggaatcttg ccagctcagg ctgggacagg ccaccaactc
45361 ccagggtccc cctcctccaa accccaggac cagagcctaa gaggacaaca caaggcaggg
45421 gcgggggctc cactgctgtg ccaagggcct ggagaacacg ggccttgctc tccgctcagc
45481 agccaccagc gcccttctct cccggacagc tcctgagggg ctgctctcat ggacaccatc
45541 aggtgctggg aagcaggaac caccaggccc tggacagagt ccccagtgac cggcctggca
45601 gacagaggag ccctcagcta cagcatcaca aacaacgggt ggggtaggtc tgatgcaatt
45661 ctgtgggtgc tgttgccagg caggaggagg ccatctccac agagacagcc gcgagacaca
45721 cgcgtccgca gtcagggagc gcaggagcaa tgtggccccg aggggcacgg gctccattgg
45781 tccaggagaa cccattcttc tcccaccctc gagaccaccc agcaaagccc caaggacaca
45841 cggctcccct aaggaagggt ggccacaggc gggagtgacc cagaaacgtt acaaaaccaa
45901 atgccagaac ccacccaatg tttagcaagc ctggggatgt gccacgtccc ccagggatcc
45961 agcacgcacc caaggagaca ctgtcccggc gaggagcctg gagcctggga aatacaaggc
46021 atcagactgg tcccaagact ctccccagcg ctggggacaa ctgtctgctt atcttagtcc
46081 cctccgccct tttcaatcca accctgggtc ctgggcacct catagttcca aacccctgct
46141 atgcacatcc cggctgtgat gcctgggaca ggtcgtgtca cctctccaaa cctgtttcct
46201 catctgtgaa atgcaaatct ccacggtccc tatgcctcgg atggtcagag tcaggattcc
46261 gcatgacgac ccccaacagg agcctggcac agacctggct ctgggcagcg tctccataaa
46321 ggccacctgt tgtttttatc tcccgaaagc gaacatgaca aggctttaac cccccacggc
46381 aatcccccct cacccctgtt ctcaggatag ccttggaacc caatagcaga gcgcctgagg
46441 cccttcatga ccccagccca cccgcgagcc cacctcccac cctgccccta cccctcacac
46501 ctcccgtggc cagcctccag cctcacggtc tttgctcaca ccgttcaccc cccttcttct
46561 ggacccacct catcgcccct tcctaagcat cagcccaatt cttgcacatc catcaaatcc
46621 ttttccagac acctcctgga actcttccct gccgccccct acagccatcc ccacctctcc
46681 gggtaccccg cagccccagg ccgcatccca attcctctcc aattagcgac tgtttgtcct
46741 cccagctgag cgcggcctcc gcgccccgcc cccgctggcg tctgcagagc ccccgggtgg
46801 gacgtctgtc tccagacccg gggtttttcg gctccccggg gccgtgccaa ccgcggctcc
46861 aggcgttcct tatttagcag ggccgccgtg ccgcgccgga gcctcgccct gggagcgtcc
46921 tggcccgcgt cctgcttccc gtcccgggcc agggaacgcg cccacgcccg cccgtcccgc
46981 ggcctctccc gggtgccgct gggcccgcta ctcacagcgc tgtggcgtcc gcggggatgc
47041 gcagcgcggg accgagcgtc cgcagcccgc ggcccgagca gttgacgcgg caggcggcgc
47101 cgggcgctgg gccgcagagg caggggggct cgcagggccc gcagccgcgc ccggggcccc
47161 ccgccagcgc cccgagccac aggcccaggc ccagggccag cgccaggcgg gcgggcgcgg
47221 cgggcggcat cgttagggca gcgcgcgcat ggccccgccg tccccaggcc cgcccgcgcg
47281 cggaggccgc agctcaggcg gggcccgcgg acggcatggc gggcgcgggg ctggatgggg
47341 ctgcggccgc gacctgctgc tgagcgacgc ccgctcgggg ctcggggcca ggccgctccg
47401 ggagctcggc cgcccgctcg gacgctggcg ctgcagtgcg ggccccgccg cggctcctcc
47461 tcctcctccc cgcgcggcgc ggggcggacg gggcgagggg gggcggggcg ggtgcaggct
47521 ccgccccctt cgccacagcg cgaccgggcc agcgatgagg gactggcatc cggaggcttc
47581 accctccgct ccacagggtc ggcagcaggg cggggcctcc ggaagctccg ccccacgcgt
47641 tcccggggcg catgcgacgt ggggcggagc gtctggaagc tccgcccgtc gcactgcaga
47701 gtcggccgag gcgcacgagc tatttttcac gctccgcccc gctgcaggct aaagtgcgtg
47761 ggcgggaagc ggtgggcagg gtgccatctg gctccgccct tctcctgtgg tgtgggccag
47821 gcggcgggtt cctcctcctg cagcagccac aggctccacc ctgatccttc ttccgcggtg
47881 tggatccttc tcccgcaatc tccgtgcgcg gcccgagtca gtacccgcag cctcccgacg
47941 cacccgctgg ctccaagcct ccctacccca ggtttcctgg ctgagagaga gacagaggga
48001 gagaggggga agagagagaa caggcaatgg gaggttgatg gtgagagctt attgaaagac
48061 aagagggagg aaacccacat ccttcattcc ccatccattc atttattgcc ttatttattc
48121 cattgaatct tcacagctct agaaaaagtg tgctacaatt attcccttta ttaaatgagg
48181 tcactgaggc acagacagtt taagaaattt gccagcaggg cacagtggct cactccggta
48241 atcccagaac tttgagaggg ggaggaaggt ggatcccttg agtccaggag ttggagacca
48301 gcctggccaa catggcgaga ccccgtttct acaaaaatta gccaaaatta gccaaactgg
48361 ctcacgcttg tagtcccagg tactcgagag gctgaggccg gaggagcgtg tgagcccagt
48421 aggcagtggc tgcgctgagc cgtgattgtg ccactgcact cccgcctggg caaaagagta
48481 agatcctgtc tcgaaaaaaa aaaaaatgga aaaaagaaaa aaagaactgg ctgggagtgg
48541 tggctcatgc ctgtaatccc agcactttgg gaggccgagg cgggcagatc acaagatcag
48601 aagttcgaga ccagcctagc caacatggtg aaacctcatc tctactaaaa atacaaaaat
48661 cagctgggca tggtggcagg cacctataat cccagctact agggagcctg aggcaataga
48721 atcgcttgaa cctgggaggc agaggttgtg ccactgcact ccagcctggg caacagagca
48781 agactccgtc tcaaaaaaaa aaaaagaaat ttaccaggtc acacagcagg tggatggtaa
48841 ggctgcgatt gtattccaaa cccagctttt aattgcagtc aaatgacaga cttaagattc
48901 aaggactcca gtggagggaa gaaacagcca caagaaactg ctgc
<210> 38
<211> 88928441 - 88997258 (68818)
<212> DNA
<213> 人工
<220> GenBank 登记号 NC_000004.11
<223> 人第4号染色体上的PKD2基因组序列
<400> 38
1 aagtggctgg tggataactg ggacccaaga gttatctcag cgtcgggcag gcatcgacag
61 ctccaggagc cctttccctg caggcgggct ggcgggtgag cgattccctc ccttcccagg
121 ccttcccggg aatggaacgt gggcgcccgc gcccgggctc cggttccact tggaacgcgg
181 actcgggagc cgccgggcga gcgcgcagac cgcgggggcg gctccctcgc acctccccgc
241 tcagcgcgcc gcggcggatg ggcgaggcgg ggcgaggcca gagggaggcg ggccaaaggg
301 gcgggcgaga ggacgcggga ccgcggggag gtcgggggcg gggagcaggc ggcggcgggc
361 gccgggaaga aaggaacatg gctcctgagg cgcacagcgc cgagcgcggc gccgcgcacc
421 cgcgcgccgg acgccagtga ccgcgatggt gaactccagt cgcgtgcagc ctcagcagcc
481 cggggacgcc aagcggccgc ccgcgccccg cgcgccggac ccgggccggc tgatggctgg
541 ctgcgcggcc gtgggcgcca gcctcgccgc cccgggcggc ctctgcgagc agcggggcct
601 ggagatcgag atgcagcgca tccggcaggc ggccgcgcgg gaccccccgg ccggagccgc
661 ggcctcccct tctcctccgc tctcgtcgtg ctcccggcag gcgtggagcc gcgataaccc
721 cggcttcgag gccgaggagg aggaggagga ggtggaaggg gaagaaggcg gaatggtggt
781 ggagatggac gtagagtggc gcccgggcag ccggaggtcg gccgcctcct cggccgtgag
841 ctccgtgggc gcgcggagcc gggggcttgg gggctaccac ggcgcgggcc acccgagcgg
901 gaggcggcgc cggcgagagg accagggccc gccgtgcccc agcccagtcg gcggcgggga
961 cccgctgcat cgccacctcc ccctggaagg gcagccgccc cgagtggcct gggcggagag
1021 gctggttcgc gggctgcgag gtaagagcgc gcgacccgca gcggcagatg cacgaaccag
1081 aacggccggc gccggccggg gccatcgccc gctgcggcag ctccccgggc tccatctcgc
1141 atcccctctg cgttccgcct cccttggaag cgcattcccc acctccgcta gtgctgccct
1201 atttccggta cccagcgcgg aattccactg ctcttttgtt ggtgcatatt tattggatac
1261 ctccttcttc aggatatgtc accatagtct tttttactga aaattagtga aagcctaatt
1321 agagtgaaag agtacatctg ggttttgttt ttttttttct tgtagaggaa aaaatgaaca
1381 ttacttgtgt aactgatggt agttgcaact gcatatttgc caatgtcaca aaatctaaag
1441 gaaaatgtta tagtcacccg tggtttcctt cttgcctgga cactccattg tcccgggctg
1501 aaaagggtag cagtacagtg catataatgt caagttgtgg gaggagtgtg gcagattgtc
1561 attggtgcat ttttttggtg atgtgtgtgg ttgttttgag gagtgggagc tgttaagaac
1621 accacaaata gaataaaata atatcgtgaa gttatttggc cgtttctaat tctagacatt
1681 tttctaaaaa cagttgcaaa ggaaagatta cattgtttta aaaaaatttg aagtatgttt
1741 ttaaataact aaattaatgt tctttgaaat tccaccaaaa tgatgaagtc accagatagc
1801 agctgataaa tgtgtctgag cccagtgcgc ccagctctac aaaaggcaga agaggaattt
1861 tcaaatttgc cagtgcccag taagaggaca tgaattttct agtaccagag gaaattctct
1921 ttttacaaat tttgtcagag gtatccttgg gaaagtattt catttgcttt taccctccaa
1981 attattttaa tctatatttt taagagtttc cattctcagt tgagtttttc ttgttcttct
2041 ccttctgtca gttttgaaag tcttgcacaa aaacaatcca ggtgttgtta cagcagtgtg
2101 attaaaacca ggtcaggcct acactgaaat cccagttcca ccactcatta gctgtacgac
2161 cttgagcaag ttacttatcc tctctgatac ccaatttttg gatttttttt ttttttaaag
2221 agatgatcat aacgcttagg acttgactct ttgggagaat taagtgagtt aagacataaa
2281 atgtgcagca tgtatttgtc atgttattag cgcttcagaa atataaatgt aaacattttg
2341 gtacttcgtt tatggagatt cttatactag ttaattttat taaaagcatg atggggaaca
2401 gaagatcctt ttcggataac ctgtgtgagt aaattaataa aacactaaca ctttttaaga
2461 ttcaaaactg gattaattat gttattttac accatttaaa atgtgcattt aaaaaatatt
2521 cactgaagtg agagagaagt tccttttaag ttaataaata atggtaagtt gcatgatcct
2581 tttaactcag tttaagcatt tgataacacc cctaaccttg tttgaataaa ctcaataaca
2641 gaatatagag aaataaaata tatatttcat atgagtatgt atgtaaattt atttctttta
2701 aaggaaaatt tcaggaaaca aaatgaataa gctcatagtc ataaaacctc tagccaaagt
2761 gtgtcaatgg tctgatttgt aggagagcag actcaggaat cgggaatttt tttttttttt
2821 ttaagagtcg gggtttcact ctgtcactga ggctggagtg cggggaagca aacgtagctc
2881 actgcggcct caaactcctg ggctcaagct gccctcccac ctcagcttcc caagtagttg
2941 ggattacagg tgcaagctgc tgctcctagc tgaaaagttt taattatata aaatgtttaa
3001 ataaattgtt attcctttct tttatgaaga aatataattg atattcttgt cacttattaa
3061 ataagcaaca ttttaaaatg tttagcacct actgtgaaga tagcactgtg ctagctgcta
3121 tgaataaact agaatagcat atcactgttt tcctatggac aaaaacccag aaatgtaaaa
3181 taaatagcca tgaatgggtt gagattcccc ctgccccctt tggatactga tgacagaaat
3241 cttatatgca ctatgtaagc agtgccctag gatcagaaca gaaagtaact tgcaattttt
3301 aaaggtggga gaaatgactg aagtttggag tggtcaggag tttccctgga agtctcttgc
3361 ctttgtgact ttgtatagct ccctcaaact acctgagcct gagctcctca tttataaaat
3421 ggaagaattg aacctagctt ccaaggtcct ttctagcttc accatgctct ggtctgttgt
3481 ttaatgacat gaatccaaga tggacaacaa atggtcgatt ttgctccttc tacagtaaat
3541 agatctatct tcttagcaga agtaaaatag taaagaaaga agacatgttt gaggcctgtt
3601 gaggcctgtt tgctgtatgc attgtatcta atcaaggaat tgagaatgta gccctaaata
3661 ttaggaagga gttgaaagtt tctgagcagg aacagaacat gctgaaagga aattgtgtca
3721 gcagcatggt gtacaggaga gcttggcaga gagaaaggag gcaagaagac ctgtgggagg
3781 cagccagtaa ggaggtgaag agggcctgga ccaaaggaag ccaaggatga ccgaaagatt
3841 taaagatgaa gcccagattt aaaagtatcc tcaagtattt gtttattctt ttcttagcaa
3901 attcttttta gtacaaagat aaaatatggc actctgagtc ataaaatttt ctgaatttca
3961 gaagttgaat gtttttctga atgtatcaac ctgttaaagt cagttcctgt ttgttatttt
4021 aggcgtatat tcttgggctt tttttttttt ttcctagaga aactatgaag tactagctgt
4081 gcaagtcagg gtgggctaag ctgctaaaac agatacctcc ctccccttca ataccctgaa
4141 gaacaagaag ttaatttttt gctcgtgtaa cattttagag agggtattcc aggttgaata
4201 cctggaataa tgaatgaaat aataagtcga ctcttatttc tcctaaaata attggatctt
4261 gacattgaaa ttggtgtgct gattgtattt aataagtgac ctccaatgca gttatttcat
4321 tttgccatac tttatgtaat ttttattttt tctgccttcc ctttcgatgt ctaaagggaa
4381 gcataattag ttattggaaa ggttattgag acttaaaaaa agatttgaac atggctttgg
4441 ttgatgctac cacacagaaa ctgcaaacat ccaactcacc gctcttagtt gctgttcatg
4501 atagtctatg cacagtgact gatgaattta gcctgtcttg aggcttcaga acttagtctt
4561 atgtcatcac gagcagagct ttatcctaaa ttacaggttt tcaatggggg ggggggggag
4621 gggcagtttt gcccctcagg ggacatttgg caatctctgg agacattttt gattgtcata
4681 cctgggggga tgcccctggc atctcctggg ttgaggttaa ggatgctgct aatctacaat
4741 gcacagtaca gccaccccac acacacacac tacaaagcat tctcccaccc aaattgccag
4801 gagtgaggac tttgagaaac cctgccctag actgttaaat tcaaaaggaa ataatggttt
4861 attgctcaca gtgtgccagg cactgtgtta aactccttat attcatagtt ttgtttttat
4921 cctcacaaca acctgtgaag aaagaactct catccgtcac cactttactg ttgagggcac
4981 taagccttct aaaggttaaa tgacttgccc agggccgcaa ctattagatg ttgcagtcag
5041 gatttaattc caggcacttt gtgttcaaag tgtttctcat ccactgtgct atatgccagt
5101 agtgcccaaa cctaacttta gccagcaatt gtctgcatct cttcagttta tgaacattta
5161 tttattagga catgcaggat aatcatacca acacagtccg tgtatccaga attctaattg
5221 atctagggag tgggagagcc tgcctctcta ttttttttaa attggtgtga aatatacata
5281 acataaaatt ggccatttta accattttaa gtatataatt gagtgacatt aggtagattt
5341 attatattat gtaaatggac ttaacacaat ttatttccag aactttttta tcatcccaaa
5401 cagaaactct gtactcatta aacagtaact ccctgtttcc ccactccccc ttgccccaga
5461 cgctagtaac ctccattcta cttccccttt ctgtgagtct ccctgttgta gctacctgat
5521 gtaagtgaaa tcagaccatg tttgatcttt tgtgtctggc ttattcactt agcatagtat
5581 tttcaaggtt tatccatgcg tgcaaattcc cttctttttt atgacgaaat actatttaat
5641 tgtgtgtgta catgtgcaca cacaatgaaa tactatttca tcataaaaag gaagtttgta
5701 cacatatata cacacacacc aaattttgtt tatccattca tcagttcatg ggcatttgcg
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5821 catcacttcc tccctttcct tttttattcg caccataatt ttgaacaagc agactttgta
5881 ttttcattac tctggggatt tttttgaggg aggcttgcta ccctttgggg ttgtggtaag
5941 gttgtgccag taacagaatt catgcagtaa aaaacattca tgggactttc ttttgtgata
6001 ggtactaggg atgcagagat gaataataca aggtctcgac cttcaaggag ctcagggttt
6061 agtagggaaa acagaggtat aagtaagtca ttgcaatgcc aggtcccaga tatgggagga
6121 ttccagcaaa gagaggataa ggccaggcac agccgctcat gcctatagtc ccaacacttt
6181 gggaagctga gatgggagga tcacttaagc ccagcagttc aaggctaccc tgggcaacat
6241 agtgagtggc aaaaaataca aaaattagcc aggcagggtg gcacatgcct gtggtcccag
6301 ttatttggga gtttgaggtg ggagaatcac ctgagcctgg gagattgagg ctgcagtgag
6361 ctgtgatcac gccactgcac tccagcctgg gtgacacagt gagaggtgag agcctgtatc
6421 taaaaaaaaa aaaaagagag gatcagattt acctggagag gtcagagaag gtttccagag
6481 ggagtaaaac ttgagcttca ttttgaagaa tgagagggga atacaaggag ggaaaaataa
6541 taggaacaag acctgttcct gttacagcaa acctgtaact cccaccatgg aatgggcacg
6601 ttttcctgta gacatttgga gccagtgtgg gcttcaagcc tagggggctg atatgatcat
6661 ttgtcaatct gaagatgact cttggaacaa cgtagaggat agggtgaggt gggtaggctg
6721 gtggctgaca gactaggtca ggagagggct gaccaagagg aggaggggtg acgagggctg
6781 gaactaaggc atatgagctg ggatggaaag aagctagata gaaaggaaac aaaaaccatc
6841 agaactgtgg aaccaactcc atgggaggga taagaagagg gcctattcta gggtgaaacc
6901 caaatttctg gcatggtacc attaacccaa acagaaagag gagatttcca gagaaagaaa
6961 agcaaatttt gcgggaggtg agtgtgagct gtctagagaa tatgcaggta gaactacatg
7021 ttaactgtaa catatacttg tctgcacctc aggagatggc tgattaagaa ttcaggattc
7081 aggccaggca cggtggcaca cgcctttaat cccagctgct taagagactg gggcgggagg
7141 attgcttgag cctgggaatc cgagatcagc ctgggcaaca tagcaagaca ctgtctctaa
7201 aaaaaaaaaa aaattcaaga ttctggagtc aatattactt aaggtagcaa ctgtctattc
7261 tatagaaaat ggacaaatat agataaaaag ccacttccct ttctaaaagt gtccctgcaa
7321 ttcaagtgaa tactaggaag gattgtgttc attcttctaa acaagactca catgtatctt
7381 agcacaaaaa gaggattctt ttatgataca aatgcactga gaatttggtc aggctatcac
7441 aatgaactga tagttcagat ggatttgagt ctttatacca ctctggaatc tggaccaact
7501 gggcctccta aggccatttt gcagatctgg gcttgtttct gaagctacag acaggcctct
7561 tccaagcact ctaagtgctc cacaaataat atttctgttt cccagaacaa ccccacaaaa
7621 aggtactctt actccatttt tagatgagga agtggaggct catgatgtca ggtaagcttt
7681 ctcagctccc aagtggttaa gccctcagtt taatgtcatt tgactccaga gccctatgtt
7741 gcaccatgcc ttgataatag gccatatggg tttcatgtat ttcagatggg gaaggttagt
7801 gtgaggtgaa agatacacaa ttaacctttt aaccatggaa ctgaaatatt tacagatgaa
7861 gtgatacaat agctggaatt aattccaaaa taattggggt ggtactggtc catggcctgt
7921 taggaactgg gccgcagagc aggaggtgag cagcaggcta gtgagcattg ctacccccta
7981 tcatatcagc agtggcatca gatgggtgag gatgtaaatg aactaggatt ggcattgagt
8041 tgatattgtt ggatctaggt gatagattta tcattataat attctctctt tgtgatattt
8101 ctgatatttt ctaaaataaa aagttgtagt tatttattta tttagacgga gtttcactct
8161 tttgcccagg ttggagtgca gtggtgtgat ctcggctcac tgtagcctcc gcctcccggg
8221 ttcaagcgat tctcctgcct cagcctcccg agtagctggg actacagcct cccgagtagc
8281 tcaccaccac acccagctaa cttttgtatt tttagtagag aggaggtttc accatgttag
8341 ataggctggt ctcaaactcc tgacctcagg tgatccaccc acctcggcct cccagagtgc
8401 tgggattaca ggcgtgagcc agtgtgccca gccaataaaa agtttttgaa aggatttaga
8461 taaaatagtt ggggaaatgg catttttgtt caaagccaat tatttatgtt tggaatatct
8521 tttgtgcttg gagttctcca ttacagagtt ccccagtgtt cctattaata agtaacattg
8581 agcagaggaa tgcactgttt agatcagcag tccccaacct ttttggcacc agggaccggc
8641 ttcatggaag acaatttttc cacagacctg gggtaggaag tgtttgggga tgaaactgtt
8701 ccacctcaga tcatcaggca ttagtgagat tctcataagg agcaggcaat ctagattctt
8761 cacatgcgca gttcacaata gggttctcac tcctgtgaga atctaatgcc acccctgatc
8821 tgacaggagg cggagctcgg gcggtaatgc tcacttgcct gcggctcacc tcctgctgtg
8881 gggcccggtt cctaacaggc catggaccag tacccgtctg cagcctgggg actggggacc
8941 ctgctttaga tgatgtactc tggctttgca ttctggcatt agctaagcac cctcttaaag
9001 gaaattgggt ctatactctc agtccgtgtt ctccctaaca cctggaaaca ttgaatacct
9061 tcaatgctgg gaagttaact cccaccacaa ctagaacagc tatgggaaag acaacagttg
9121 attttgaaga gtgtcaccaa tttgcacatg attccatcct taaccattct tatcctatca
9181 gctctgccaa acatggagaa tagttggctg caggacagct atttttccta cttgtagatg
9241 caactatttc tcacccacca ggatgtaaaa ggtccctgta ccctaagatt ggtcctacat
9301 acacacccaa tgggaaaatg agatgaaaaa tttaaagcag taaatatttg aggaagtaga
9361 tagagtaatt tagaaaaaga aaatacacag ggccaagcac agtggctcac atctgtaatc
9421 ccagcacttt gagaggccaa ggtgagagga ttgcttgagc tcaggagttt gaggccagcc
9481 taggcaatgt agtgagaccc cacctctaca aaaaattaaa aacttagttg ggcttggtag
9541 tatgtacctg tagtttaaga aacttgggag gctgagctga ggcaggagga ttgtttgagc
9601 ccgggtggtc aaggctgcag tgggccatga ttgtgccaga gtactccagc ctgggtgata
9661 gagtgagact ctgtctcaaa caaaaaaaaa aacagagaca gaaaaaaaga aagaaaatat
9721 atggatgtat atcatataaa aatataaata agggaggcca agtgcagtgg catgcctgta
9781 atcccagcac tttgggaggc tgaagcagga ggatcacttg aggccgagaa ttcgagacca
9841 gcctgggcaa cgtattgaga cctcatctct gcaaaaaatc aaaaaatgag gcggaaggat
9901 ggcttgagcc caggagatca agccttcagt gagctgtgat cgtaccacta cactccaggc
9961 tgggtaacag agagagaccc tgcctcaaga taaataaatt catacataca tacatacata
10021 cgtacataca tacatacata agaagacttg tttctttcca tttgcaatgt ttcattcaaa
10081 ggctagaatt aaattgccgt aggccatcac aagtttagct tgaatattat tattttttca
10141 agatggagtc tcactctgtc acccaggctg gagtgcagtg gtgtgatttt ggctcactgc
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10261 acaggcgccc gccaccacac ctggctaagt tttgtatttt tagtagagac agggtttcac
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10381 caaagtgctg ggattatagg cttgagccac tgcacccagc ctagcttgaa gaaaatttga
10441 taggagtttg tttttttcta tttataggcc aagcaatacc acgtataaat attaagaatc
10501 atggctgttc cttagtgcct agttgtttat aaaccatggg aaagaatgaa atcattgacc
10561 aaatgagaca gggtaacagt cttccctggg agtaaagaga ctagcagtct ctattgacat
10621 atattttagg cctggcctcc aaaataaatt tacccaaaga agtgatgtat ttgtgtccag
10681 ggctaccgag cctaatcttt ggctgcctct gtgttattct aagttgtaat tttccatgtc
10741 atctaaattt gtaataattc tttaatatga tagtgtttca gtgaacaaac attctgcttg
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10861 tggtcataag ttatgctcca ctctcagtgc tggtgaaacg tatgatgcgt aacacagtgt
10921 ttttgaattc agtgctgatt ttcctaaagg acatttggaa ggaaaaaaga aaaggaaagg
10981 aaatacccaa attcaggaat agaacttaca tattattata agacttaaaa aatacatgaa
11041 cactaatgat gaactcattt cttcgaagta aaaggcctta tgctattttt tcccatttcc
11101 ctatgtggct tgattgtggc gaaagtggct gtgtgagttt ccattattga aggagttaag
11161 gtctgtggaa tcaaagcatg agacaacatg caaggaccag gttggtttcc atttaacagc
11221 caacctaatc taactgaaag gattgagagg tttgtctttt ttggaaagtg ttaaggttct
11281 tccaagtaac cagcaatgtg actttaccac actgttcatt aacggggctt tggatggcca
11341 ccatgtctgc tgctggctga gtccaaaact gcggtcactc tctccagcaa gctcatggag
11401 ggttacgtca tcttcactca gccagcccaa cgctttttcc atctgctaaa atgtagaaca
11461 tggttgttga ttctactctt tctacaaaga aagagaggga acatggatga gttgctgctt
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11581 atcagtcacc atggagtttt ttaataggac agcttctgct cttacagagc agagttttta
11641 tgccagtagg ttagaagcat aacatgtttc tatattgaag tgattctcca acaaggactt
11701 cttttcatca ggggtgacct aaaagttatt acttgaaata taattacatc atgttcttaa
11761 ctgggtttag tagtaggata attacaaggt tgtatccacc tcaaatagga agaactgata
11821 agttttgcac aattatttaa ctcctctgtt aggccttcct tatttcctgt tctcttttta
11881 aaatttgact aagatattgc taatgggctt gggagcctat aaaatgatca gaattgttgc
11941 cttatgtttt gcatgtttgg ggtaacattg gagccagatg tactcttaaa taaaaggtag
12001 gcctacaaaa ccagtttctc agttgcattc aaaatgtgat taaaaaaaaa aaaaggagaa
12061 tctcccttat aggtgaactt tttaatttgt gctttatttt cccttttgcc attcatgaga
12121 tttcttaaat aaaatgatat cttttctttt cttcattatt attttaaagg tctctgggga
12181 acaagactca tggaggaaag cagcactaac cgagagaaat accttaaaag tgttttacgg
12241 gaactggtca catacctcct ttttctcata gtcttgtgca tctgtaagta gaatatttcc
12301 ttgcactaat gggaaagttt tgaaaagatt tgacctatcc aaatcataat taaaaggaag
12361 tgtgtatgca ccagaggggc aactgggaag ttaccttctt acctttgttt ttaattctaa
12421 tatttttatt tgggcatttg tttattgact atcttcctat ggtagaatgc aagctttata
12481 agagaaggga cgtgatttgt tctctgctgt acccccattt cccaaaactg cagatggcaa
12541 cagaaggctc tgaaaaatat ataagaaaga atttttctaa ttgtgactaa attgtgacca
12601 aatgctaagt gactgtggac ttgcgtttaa cacaggacgg gagaggcaaa gagttcaatt
12661 ccaatttaga atttggtcaa gttctcttct gcactctggt aaacattaat taaaaatcag
12721 cattatctga ccagccagtt catcgtcagt ggtggtgatt ttcactatga gatacgcgtg
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12961 aggaaataca aataatgcta ctaatattgc ttttattggc gtatacatgt aatatcccct
13021 tcttttggat ttggatatgt tgtgtcattg cctcatttta attcattatt tcttctcaat
13081 ctttaataat tgctggactt ttactccaca agaaacttgc tataggccca tctctttcgt
13141 cttctttcct tctttcagtt cgtcttccca tcctctggta gggggagggg agggatgcct
13201 gagcgagaga ctagctgtag gaaccatttg tctcaaagtc cagaaagcca caggtgatgg
13261 atttgtcctc tgaatcaaag ggcgttcgat gatggatttc tgtcatgtct catctaaagt
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13381 tgagaaaagg tttccttttt tttttttttt tttaaattag agacagagtc ttgatctgtt
13441 tcacaggccg gagtgcagtg gcacaatcat agctcactgc agcctcgagc tcctaggctt
13501 cagtgatcct cccacctcag tcacccacgt agctgggact acagctgcac accaccatgc
13561 ccagctaact tttaaaacat ttttgtagag gtggggtctc actttgctgc ctatactggt
13621 ctccagctcc tagcttcaag tgatcctcct gccttggaag ttctgggatt ataggcatga
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13741 ttgagattga gtttgctgcc tgcattaaaa tgatgcttaa acattaaact gcagtggcct
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13861 aatttcttat gcaaaataga aggtaacccc tgtacgtaag tctagaattt cagcagtccc
13921 caaaactgac tgagcattag aatcactctg attttaaaat acatatgtgg ttttccgaga
13981 tctactaaca gagcctccat aatgtagcct agagaaacga gttttcagat gtagtgataa
14041 atttggaagg taagtcagag aagtaagctg aagacagagt tttaggaaat atgcctaaag
14101 tcacataatg aattggtttt cttgtttatt tgagaatatt gtcgcttttt gttctttttc
14161 atgcaaatca cattttattt cttatgtgag tagctatata tttaaaaatt ttgtttttgg
14221 aatattgtag aatctctact taagaaagta tcttagcagt catatggtct gacctcactg
14281 aatgctaaat tctctttaaa acatccgtct cagatggtta ctcatactgc ctctgattga
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14401 ctatgttaga aagttcgtcc ttagcagtga agccagagtc tatctcttat aacttctacc
14461 cagttgcacc ctccaagcct acctatacca agtatctttt ttccacgttg cttttccaat
14521 tcagctcttc gcaagtttgg agacaaatac ctaatctcct ctaagccttc tccaggttaa
14581 gcctttccag ttcatccagc tgttgattat gtgattggag acacaagttt gagtaactcc
14641 catgatggaa agtccctctg gtgaatgttc tgttcatcag agtccctaag aaagcacatg
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14821 cttcaccaaa aactgtgaag cactgtgtcc cccagctgta tgtgagctag cctgggacca
14881 tagtggagga ctcctctttc aaccctgtta aatttcatct tgttaggatc tgcccatttt
14941 tccattctgt tgaaattatc ttggaactgg attcattcat ctcacatcag ctactccccg
15001 aagcctcaca gtatcagcag agttattatc tctatccata tccttgtaaa ttattaaact
15061 aaaaaagatt ggtctaagaa catcagtcca ttaatcaagg ctctttggtt ggagttcact
15121 tcattatatt atcatccagc tcagagtgtt cataaacaag atgataggaa agacttttcc
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15421 gatagtgtac ttacccctat ggcttaagta ttaggctgtt cttgcattgc cctaaatacc
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15541 tctcagcact ttgtcaggct gaagcaggtg taatggtgag ccaagagttc aaacttagcc
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15661 catgcacctg tagtcccagc cacccaggag gctgaggtgg gaaaattgtt tgaagctggg
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15841 agaaaagaaa aagaaagaaa agagatttat ttgcctcatg gttctgcagg ctgtaaggga
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16081 aggacagtac caagaggatg gtactaaatt cctgagaaat ccacccccat gatctgatca
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16201 ggacaacatc caaactatat caccttgcat agtaggtagg gttttaaaaa gcagtttggc
16261 acagtaagaa aagtacagat tttttttgca tcagacagac ctgagttaaa atcccagctt
16321 cactgctaac atgctaggta aatgtgggca agttaattaa catttctaag cctttgtttc
16381 ctcactggta aaacaagtat ttggaaatat cattgtgaag attagaaata atacatgaaa
16441 agatcctagg atgctgtctg tcatacagta gtagtagtaa gaagttattc ttgccaaaga
16501 ttgttgagaa tggcagaatt atctcagttc taagagctat agtttctaat tatttgagcc
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16801 aatagcaata gtattgctat tgtgtgagtt aggtgttgaa gttcaagaaa ggaataaaga
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17161 tctgtctcga aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaagaaaga aagaaggaag gaaggaaaga
17221 aaaaaaaagg aaaaaatgca aggaaggtat ttggtgaatc tataataata aaaatgtatt
17281 tgtcatttcc tttttctgtg ctctcattct ataaaattga gtaaaaaatc tatatatagt
17341 ttaaacacat taatagaaat cacaaaagtt agctgagtca acattgtaga aacataatat
17401 ttctgtatgt caaagaaata gacaacatta aaaagcagaa agcaattaca aagaatgatt
17461 ataagaaaca tcacaaaggg ttaatatttt aacacatttg aaactcaaaa atcactgaga
17521 aaagcagtag acttccataa atattttata gagtagaaaa aataggccaa gcacagtggc
17581 tcatgcctgt aattccagca ctttgggagg ccgaggaggg tggatcacga ggtcaggagt
17641 tcaagaccag cccggccaag atggtgaaac cccatctcta ctaaaaatac aaaaactagc
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18001 ctctattaaa aattttaaaa ttagccaggc atggtgacgc acacctgtag tcccaattac
18061 ttgggagcct gaggcaggag aactgcttga ggctgcagtg agctatgatt agaccactgc
18121 actccagcct gagctacaca gtgagacctt gtgtcaaaaa agtaaaaaaa taaaaattag
18181 ccaggcatgg tggcacatgc ctgtagtccc agctactcag gaggctgagg caagaggatg
18241 acttgagtct ggaagatgga gactgcagtg agctgtggtc atgccactgc actccagcct
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18361 aaaatttatt caaatacaaa agtgatgtgg tttgactctg tgttgccacc cagatctcat
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20461 atcatagggg cagtttcccc catgctgttt gcatgatagt gagggagttc tcatgagatc
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21361 tttatttacc cttgctattg tgtggctgag cttactgcca ctgcccagca ttgcaagggc
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21481 ctactgaatg cttatcactt ttgcaccatt ttaaagtaaa aaaatcagta agttgaacca
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21841 ttcagcctct tcctggcatt tggtccagtg gcatttggca ttctaggact tccctctttg
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22321 tgtccctatt ttaatcctaa tcatctattt cctgacttat tcattcctta agttggtcag
22381 taatttaatt aaaaacagat ttaggccctg accttaaatg tgataagtga tatgaaagga
22441 gatgactggg gaaaaggatt tccctcaagg aaggcctctg tgaagcctga agcaagaatg
22501 aaaacgagtc agacgaagag agaattgtat gaatgaaggc tctgaggcag gaaaacactc
22561 agatcattcc agaatcactt agaagccaag tgaagccagt tcctggagag cagatcatca
22621 aatgaagatg gaaaggtgac caggggccag acctgtagtt ttggtgggcc ttggtgaggg
22681 atttacagta ggacacccca tggtttaagt atgaaagtga caagattcct ttaagtttta
22741 agaggcctcg aaatatgaac cacagattag atggaagcta ctctccctgt gtctggactt
22801 tttagaattt ccaagagctg ctgtttctgg aaccagatta atacaagtca gtcttccatt
22861 tatttattta tgtatttatt tgagacaggg tctcactctg tcacccaggc tggggtgcag
22921 tggcatgaac acagctcact gcagcttggg ggctcaagag atcctcctgc ctcagcctcc
22981 catgtagttg ggaccacagg cacctaccac ccagctaatt ttatttgttg tagaaatgag
23041 gtctcatttt gctgcccagg ctgttcttga actcttgggc tcaagcgatc ctcctgcaac
23101 atcttcccaa agtgctggga tcactcttcc atttaacatg ctatctcaac gtcaagataa
23161 actttaaaat ctttagataa taggctggca ttttacttaa acgatcttta cttcttcaga
23221 actgccattc cctataaata tctggttctt caaccacatc aaaccacttg tgatctcaaa
23281 aagcctcagc gtacactgtc ctttctgtca ttctaattcc tcctcatcct tcaaaatcaa
23341 ctcaaggacc agatccaggg agaagcttag tggtgcccac ccgaaccggc cccctccttc
23401 gagttgtgct gccattcggg cccacctctt cacacagggt tgtcagacca gaccagctca
23461 tgcgttcacc gcccttgcag ggatgggatg cagctgtgca cctctcagtg ccgacacctg
23521 gagagtctca cgaaatgttg acaacatggc ctgtttccat ttcttgttca ctaggacttc
23581 tcatttacta acacacagaa tttcctgtag tatgtccact taatcagttc aagcctaata
23641 attccttgat ttgggtatag tgctttgcat ttatatactg atggtcccca acttacgatg
23701 gttcgattta tgatttttca acttcatggt gatgtgaaag tgatacacat tctatagaaa
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23941 aggccaggct aagctgtgtt gctcattcag taggttaggt atattaaatg cattttcaac
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24061 tcatcttgta tagcactttt aatttataga gtcccttcaa atgtttgttt gtattttatt
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24301 tctttggccc aagggttatt aagagaggga aaaaatttaa tttcttaaca gatatatata
24361 tctatgtcaa gtcatatatt taattcaaac ccttaatatt cctaggtaat ttttgtctac
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24481 ggtaattgtt ttattactaa caggtattgc tctgtatatt ttgatgttct gttattcaat
24541 acataagaat tcattacagt tgaatcatca tgtatagtat aatttaccaa tgtaaaataa
24601 cctttttatc aaactgagta ttcaccttat aatgtcctct gtcagaggat tataatacca
24661 cttaaaacct tttaaaaaat attttgttcc tgataatttt agctttgagt ggttttctta
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24781 aagagtctaa accattcaca gttcatgctt ttttgtcaaa tttctattat ttagtatttt
24841 cctctctttt atattttcct gttattttcc atttctattc ttttgttaga ctggaaattt
24901 tttctttgct ttcttttatc ctagtgattt gaaatttatg taatatatac tattctacaa
24961 taccctttat ttgttttcaa tatttgaacc tatatttttc aacattatta agaataaaat
25021 agtatttgtt gctattttga aatgatagac catgttttta aggcaggttg gtggttgtta
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25501 cagatgtctt cacatatatt tccccatttg agctttacaa aagcccttag tattattctc
25561 attgtctaga ttccaaaatc aggcttagag gagttaaata gttgtccagg atctcaagat
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25741 ggtgtagctg accaccagag tttgtagagc tgtcattcag gtgtgccatg gactttcctg
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25861 gggcgcggtg gctcacgacc gtaatcccag cactttggga ggccgagcag ggaggatcac
25921 ttgagctcac aagtttgaga ccagcctggg cagcatggcg aaaccccgtc tctacaaaaa
25981 atttgaaaat tagctggcca tggtgatgca tgcctgtagt cccaggtact caggaagctg
26041 aggtgggagg atcacatgag cccatgagat tgaagctgca gtgagctgag atggtgccac
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26161 aataatcttc ccttcaaagc tggaaggcat tatttacctg tctgtccagc agatggtgct
26221 acataaccaa gggaatctgt tgcttgccct tggtgaagct attaaagcca atacagatct
26281 tgagaatttc aaaagcaaaa atcaatactg gattatgagt gctctaggaa aataaagaga
26341 taaattttca atttacatac ttatatatag ttataccata tttgtaaata aaaatatata
26401 aataatttat caaaattcct ttttaacagc aacaaccaca gtaaacccac aggttaaaaa
26461 ctccacaaca gtctatatta atcagtcaat gcaaagtaca ttccaattcc aagttaactg
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26761 taccttgttc cataaatatg aatggattag aattctaaac tcttaactct gccccaagac
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27061 taatcttaat ttcctatgat gcttgaaagg gaaagagggg ccaggtgtgg tggttcacac
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27181 gaccaacctg accaacatgg tgaaaccctg tctctactaa aaataaaaaa tcagctgggc
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27361 caacagtgaa actccgtctc aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa ggcagagtgg ggaagagagc
27421 tgcatgaagg agagatttac taaatagtac ttaatcccaa aataatttct ataggtttga
27481 atatgatccc tgaaatttat tataggttca ggtaagtatt aatcacgggt attcagaact
27541 gtggtttaaa aaatgtatag aacatgtttc cttccccttg aaacttttta tcagctaatt
27601 ataggaatta tattatacct gcaatcatta aagtccagaa tgagacagta cttggtaaag
27661 tgctgaaatt tataataaat gcattatagc aatccagtta aggaggaaga gccaccatta
27721 ttgaacattt gttaagtgtc agccattgta ctagataaat tttagttatt atttttattt
27781 aggcaccaaa aaatccatgg gatagttggt tatccccatc ttactgaaga ggaaactgaa
27841 gctcagaaag tttaagcaac ttgcacaggt cacatagcaa gtaaggagca tggccaggaa
27901 tcagaccctg atctcctttg gtctactaag cttgcaaagg atcttcccgc ctccttccaa
27961 gaccattcaa tattatcagt aaatgtccat ggcaaggatg tagttcgagt tatagggttc
28021 cattcaagat atgattggta ggtgggaagc agatatgtct gtgtcaatca gtatcctgga
28081 agaaggagat gatgaactca agtggtgatt aagggaagtt taatgaaggg actatttaca
28141 gagatgtggt ggggttaaga gaaccaacaa ggggaagtga tgcactcaaa aagttactac
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29401 ggctagggaa caagaaaaat tgattttttt ctagcctgac agctacttca tcctagtttg
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30061 agtataccaa tgagtgatac cacaggaaaa atattaaact gatctgaggg atatggggct
30121 tggaatctaa gaaaattgga agggaaattg aaaaggaaat tattatttct ccttggggag
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30301 tataatatga atctttcacc atctgagtag ggcaaatcag tctatctctg ttgatcatct
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31621 agttatttaa tgtgtaagct tgtgaggcaa ttttttgtta ggtttaaagc ccattttgtt
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32161 gaggtcagga gttcaagacc agcctagcca acatggtgaa accctgactc tactaaaaat
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36421 aacctttcca gaaaaagtat tgtgtttttc taacatctgt ctttacccat tataaggatg
36481 gttagtgcca catgttccat caccaagtcc cccggccatc aaatcttgac tcatttcctg
36541 gagtttctca ctctcagatg agcctctgct attagcacac aagcacagta accggagtgc
36601 ttgtaggatg ctcagtagga tacccaggtt acctgctcgt gctcagggct accaaaggca
36661 cgtaaagttc cttccacaga tcctgggatg ttgccatgat gacccctctg tgagatagta
36721 acaaaaatga caaagattcc actggcttgt ctgggactct tcttcattca tttattcagc
36781 aaacattcat tggacactta atatgggcta ggcattgttc tcggctcttg ggacatgtca
36841 gcaaacaaaa taaagatccg caccttggca gagcttgcat ccaaccagga ggagactaga
36901 gaataaacat taaacaatac aaataaatag tatagtatat tagaaggtaa taggtactat
36961 taaaaagaaa gaaaaagcag agcaagagga agtcagagtt cacccacttt aatcttcctg
37021 gtgagcatgt cagcaacacc caaacatcac taacatggat tattgcatgt atatttacac
37081 ataagataag aagtgtttat tctcataata gtctttgtca tcattcttga ggttaagttc
37141 aattctgctt tatgtggctt gttggattgt cccagtcctt gtatttaaca acatttgcag
37201 aaaatagtac cacattaaat caattataga ttatccctta tccaaaatgc ttaagaccag
37261 aatgtttgag atttaagaaa tttttcaggt tttggaatgt ctgcatatat ataatgagat
37321 atcttgggga tgggacccaa gtctaaacac aaaattcatt tatgtttcat aaatgaaact
37381 taatgcacat agcctgaagg aaattttatt tttcccttag ggatgttgaa tcaactgttg
37441 tgtgccagca tgttgacaat gacctgtcac atgaagtcgg gtgtggaatt ttccacttgt
37501 gcgttcatgg cggtgctcag aaagtttggg attttgaagc attttatatt tcagattttc
37561 acattagaaa tactcaagct gtccttgctc acagtggcca aaaaaaaaga aagaaagaaa
37621 agaaatactc aaccagtagt ccagtagtag ttatcactag aaatgaatga aaatctattg
37681 cagtattatt gagtttttcc taattattcc agtgcagata aaaagaaaag aataaaaagg
37741 aagagaataa aaacagagag gcaactctga tattttagta aattctattt atagaaggtc
37801 ttgagtattt cttctgcttc ctcccttact ttaaggatga acattgttaa gacaactgct
37861 tcatttctct atactgtttt tctaagtttc tggaagtggt tgactactgc agggccagaa
37921 tgggccagag aaatgacttg acacttgaag gccacttcct tcccttttga gttcccaatg
37981 aagctgtcac atacaaggct cttggcttca gagttgctct cctgagtttt tgattctcac
38041 ccctactctc taacacatca aataggaaag aaagaacagg agaactgaca atgaaaagga
38101 aggaaaattt tcacacttct ctgaccagtt ctaatttacc atagtcctgt ttttacttga
38161 ttattgctca tgcatgtgtc ctgtatgctc aggttccagg tgcggctacc tgtcctgtaa
38221 tggcagagat agtgatggct agtagctgac taaagggctt ttaaatgtct caaaatgaag
38281 cagctagaga ttctatttct agttagaaaa gaagtctgta tcattaactg aatcacccag
38341 ctttctcagt gtgacaccta caaaatgggc atttgacaag aaaaaaaccc tcagtccagt
38401 tatggtaaag cagtaaagat cagagccatc agtatggatg taaaatagtg tatgttttag
38461 acaatcagac atctattgag tacccaccta ttaactataa ggctctggga agaagagaga
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38581 ctcagttcct atctttatat atgtacaaaa tatatcctac ttctcaacca gattacacat
38641 gttttgagtg gatggtttat atttctttat attcttcatg ttgcctagta gaaggacttg
38701 aatttaatag aagtcctagg gccaggcatg gtggctcctt cctgtaattc cagcactctg
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38941 gcagtgagct atgattgcaa cactgcactc cagcctgggc aacaaagcga gtccctgtct
39001 cttaaaaaaa taataacaga agtcctagaa aagtttgtgt gttgatttac ttttacatta
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39301 tgtattcatg tgttgttgtt gttattgttt taattgttct tatttacatg caggttattg
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39601 ccaaatttcc tattctattc tacaagcatg ttaactagag tctttgatct cctcagcatt
39661 gtggatcttg atattcccaa aaaagaatct aaaagtcccc ctcaattata tcaacttctg
39721 ttactaatta ttttctcatt ttgcatgagt aactttgctg agtatgaagt ggagaggtat
39781 ttacagtatg ctctcagcca cgctaataac aagagtatct cagtaattca tatttggctt
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39901 taatgatatt tttcttcaac tgctggtaaa aatcaattta tattttcctg cacatgtgtg
39961 aagttacagc aataaaaaaa cttgtcggcc aggtgtggta gctcatgcct gtaatcccag
40021 cacttgggga ggccaaggca ggaggatcac ttaagcccca gagttcaagc ccagccaggg
40081 taacatagtg agaccctgtc tttacaaaaa aaaaaaaatt taattagtca ggcatggtgg
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40321 agagaaaact ttctgcagtt taaaattttc tgcaaatagt ctgcagagta caaatgtaag
40381 ttatattcat caaagttttc tgtatgaggt ataagaaatc aaaggcaggc catgcacagt
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40561 aaataaatca aaggcagagt cataatcaag accatgacac catgtaaatt ctgtgtctgc
40621 tcttgactct attataactt ctaagatttt tttcaagatg ttttcccttc atccttatca
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40861 gtattattct atgtctttcc ttcccactgt cctatgatag ccattacctt ctgaaatctc
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41101 ttattcatat gtgagtgaaa gaacacttaa agcataaaaa agaactacat ggccatatat
41161 tgcatggcaa taactatatt agcagcaata ataattgtaa tagtaataat aataatggct
41221 aacactttag aagcttctgt gttaggcatt tccgggtgct tttcatggta cagaagctca
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41701 atttatgttt aggccattga aataatggta gaaaggtaag tatgatatgc taattaagaa
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41941 acatacacat acatagaatt ttaaagattg gaataaaagt taatacaaat agaattccaa
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42121 ttggctcaac agccacagca ttttgcaagt gtttctttga aaacttgctt cactgtgttt
42181 ttcaattttt tttttaaaca acacttaata ctgccagaca acaattcaga cagtgtgctt
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42601 aattacttga aaaaaagaag actattaagg aatttaaact caaataattt attgaccact
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45301 taaactattg agactcatgt gatcattcct ctcactgtca atgacatact tctgctatct
45361 gaattagtgc aagatcagtc cctataggtt ttgtttaaca aatgcagtaa gaggcctttc
45421 agtgtgttag ctgggcctgg ggccccaggc tgctaacaga tgagatgaac aggtgaagga
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45781 cattcggtca ccagcacagg ctctgattgt gctgtccaga cagtaagtac tagccacatg
45841 tgcctattta aattcaaatt taaattagtt aagcttaaat acaattaaaa acgcagttcc
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50221 cactgcaacc tctgcctccc gggttcaagc gattctcctg cctcagcctc ccgaatagct
50281 gagattatgg gcgcacgcca ccaagcccag ctaatttttg tatttttagt agagacgggg
50341 tttcactata ttggccaggc tgttctcgaa ctcctgacct cgtgatccgc ccgcctcggc
50401 ctcccaaagt gctgggatta cagacgtgat ccaccgtgcc cagcttgtgt tttcttttta
50461 accaaatgga aataacctct gtagcatgaa agcattttat tattattgca gaaggcttta
50521 attgctgata caagtagcaa gactttgtaa atgggattga caattttctg ttattcggca
50581 gctacctata ctgctaaaag gtccaaaaat aatgaaatca tctttaagaa atgttgcatc
50641 aactagtgga cattctttgt ttttgtattg tggtgttttg ttttattttt atagcttcac
50701 tcaattccgt atcattttgg gcgatatcaa ctttgcagag attgaggaag ctaatcgagt
50761 tttgggacca atttatttca ctacatttgt gttctttatg ttcttcattc ttttggtatg
50821 tacattttta tttatagtga ggttcaattt aaacttcgta aatccttgtc ttctcttttc
50881 tctcacactt tatgtcctat caattttaaa taaagaccca ggaagtagaa aaaagtgtgg
50941 atgttggaaa acttattttc cttttattaa ttcacagttt tgagactcat atcaaatgtc
51001 ttttctgtgg tctttcattg atccatgtat atgtgtctat tcaatgcaaa aaaaattaga
51061 tctcttccat ggtctttcat ttctctctct atatatgtat ctattccatg caaaaaagaa
51121 attagatcaa gtacaaattt ataaagatac ctaaaatagt gctttgccta aaaagtagaa
51181 tatgcttaca tgctttttaa actcatatgt cagcactttc gtagtcactt gctagcatga
51241 cttttctctc tttcttcttt tctttttaaa aaataagaac ggaaaagcaa gctagatcta
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51421 aaaactaaat gtaacaatga atggaaattg cattaaaatt attttcaaaa ataatttttt
51481 tattctcttg atttggtaca aatgaacatt tttaatgttt ttgccctaag tcaattaagt
51541 ttttttaagg tgttttgttc tttttcttaa catttatata ttcaattgtc tactgagaag
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51901 tgttccctag ctgtacttta acaggactga aaaggtcagg aatatcattc aagttcatat
51961 gtatcttgct gtatgcatgg tttatggctc atttttaaac ttacacctct taagcttctt
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52861 taaggtattg gcaggcatta gttaacagcc acttggaagc aaaaatagaa cattagatcc
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52981 ttgagcattt agtcaaaaac ttatatgtat tctatattct attctcattt ctgctacaga
53041 attgtaaaca atattcttcc ttaatacaga aattcatagc ccactaaaat aagagcgttc
53101 tcatttgttc atttctcaat catttaataa gtatttacta agccactata tccatatata
53161 tatatatatc atatatactg tataatacac actgtagtgt tttttgtgga ttgtgtacta
53221 tgaggtagta tgttagatac tgccagtact ggggtaagga aaacagcctg attaggccct
53281 tacgaagatt cctcagactt gtggggaaaa cagacattat caaatagaaa tacttgcaaa
53341 ccacagttat gtgttaaaaa ggaaaaacaa agtaaaaaaa aagttggtgg gggggaacct
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53701 ctaggactga aatccaagtt tgcttgactc caaagtctat ctctcttcca gaaacttttt
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53881 aattctactt atctgtgtta actgttgaaa tttgaagagc tttttggaat tctataccct
53941 tcagtagtgt atgtaaaagt ttctaaatat agagaacata gataagcaaa aataatatta
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54361 aattgcttga acccaggagg cagaggttgc agtaagctga ggtcgcgccc ctgcactcca
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55501 gaaaacttaa gcctcttaaa acaaagtcct tgggatggga cctaagattc acattatctt
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56101 agtgtggcga cagatgcctg taatcccagc tactggggag gctgaggcag gagaatcgct
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56221 taacaagagc gaaactccgt ctcaaaaaaa aaaaagaaaa gaaaagaaaa gaaaaagaga
56281 atgggctagc aaagaaatga aaaatggtaa cactggaagt gaaaatcaaa acagagtaat
56341 ggatttatag aagaaatagc tgagtgaaga agaaatagga gtgttgacac tgcgatcatt
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64201 ttgtcttttt ttttttcttc ttgtgtatgg gaacattttc ctgttttttt gttttgtttt
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64561 agttattaca tttcattgtt tactgattgg tctattgttt tccagaatgc cttgggatgt
64621 aatttgctcc acagtctgat ccacttaaat tcaggcctct ttgcagggct agttttagag
64681 gccagtcttt tttttttttt tttttttttt ttgagacaga gtctcactct gttgcccagg
64741 ccggaatgta gtggtgcagt ctcagctcac tgcagcctca atctctcagg ctcaagcaat
64801 cttcccacct cagcttctca agtagctagg actacaggtg cacgccacca tgcctggtta
64861 atttttgcat tttttataga gatggggttt taccatgttg ccccggctgg tctcaaactc
64921 ctgagttcaa gcaatccacc cacctcagcc tcacaaaagg ccgggattac agatatgcac
64981 caccacgcct ggcccctgag gccagtcttt aactgtcttc ttagctgtct ctttccctgg
65041 ttctctctgg tgaactagct ggtaatttgt ttatctcata aggctaccag attccttgta
65101 aatgcttatc cccacaatct ccattgtttt caagagcatc gttagtcttt aatttcctca
65161 cgcttcattc caaataaagt ccattcactt gagaagagtt ctatattcct atgacctgtg
65221 tctccccatg agcaaaactg ctactgcttt acagagccag ggacagtggc ccacctctct
65281 gtggcatcct gctttatgaa caagtcactg ggctcagatg gcagtctctg attttctcac
65341 cttgcttctt ctggcatgga aactccaccc tacaagtggg aactgagtgg aagaagagag
65401 ccccattccc cttagccact cttaacagga ttagaacctc tgcaacatgc atttaagaat
65461 gggaacaggc tgggcacagt ggctcacgcc tgtaatccta gcactttggg aggtcaaggc
65521 aggaggattg cttgagccag gagttcagga ccagcctgtg caacatggtg agaccctcat
65581 ctctacaaga aatagaaaaa ttaactggtg ggttgtgtat acctgtaatc ccagctactc
65641 gggagcctga agtgggagga ttgcttgaac ctggaggcag aggttgcagt gagtcaagat
65701 tacaccattg cacgccagcc tgggcaacag agtgagactc tgtctcaaaa aaaaaaaaaa
65761 aaaaagagta ggaacattga ggctgggcat ggtggctcat gcctgtaatc ctagcactat
65821 gggaggccaa ggcaggagta tcacttgacg ctaggagttc aagaccaacc tgggtaacat
65881 agcgagactt tgtctctatt aaaaaaaaaa aaaaaaaagg tgtaaaaaac ttttgtaaca
65941 agagtgggaa agccgggcac agtggctcac acctgtaatc ccagcacttt ggaaggccaa
66001 ggcaggcagg cggatcacct gaggtcagga gtttgagacc agcctggcca acgtggtgaa
66061 accccatctc tactaaaaaa tagaaaaatt atctgggcat ggtggtgcac acctgtagtc
66121 ccagctactc gggaggctga ggcaggagaa tcacttgaac ctacgaggca gaagttgcag
66181 taagccaaga tcacgccact gcactccagc ctgggcgaca gagcaagact ctgtctcaaa
66241 aaaaaaaaaa gagtggaaat gttaggatga gaaatgctgg cagcctgccc ctccctggga
66301 gatactgtag ccctagactg gaagttgggg gaggagggag ccctgtgctc ttagctgcac
66361 ccatgtgaag ttgtgcttct atcacatgag ctggggacag gagagaaggc tcagattatg
66421 gcttcagtgc cacagaatct cttcatacta aaatttagta gattttcttg aataaatgct
66481 ttttcatttg ctgtacaccc ttaaaagttt ctagaaattt ttaatatttg agttttaaaa
66541 aataattttc aacagttaca gttatttcac taaagagaga gtctacagaa ccctcttgcc
66601 accattgcag aggttgtctt tggcttacga gtttttaaag tatttgtata cattttttaa
66661 gttcaaaata atagaattgt aagtgaacat gctgttttca tactgttttt caagctttat
66721 ttaatatatt gtaaatctaa ttctatttta ttaaatagtc tgccacagta taatgtctga
66781 tgtctcctta gaattttatt gtatggatga acaatgatta tttaatttcc taccaattgt
66841 tgggtgtttt ttgtttgttt gtttgttttt gagactgggt ctcactctgt cacccaggct
66901 ggagtgcagg agtgcggtgg aatgatcacg gctcactgca gcctcaacat cccaaggctc
66961 aggtgatcct tccacctcag cctcgcaagt agctgggagt acaggcacat gccaccatgc
67021 ccacctattt tttagagatg aagttttgcc atcctgccca ggctggctcg aactcctggc
67081 ctcaagcgat ctgcacactt ccgcctccca aaatgccagg attacaggcg tgagccatca
67141 tgccctaccc ccccatcaat tgtttgatgt agccattttt caatgatccg cgattaagaa
67201 gcagcactct tttatagcca aaaattacac atatataaaa ttttccttta gaaaatgttc
67261 taaaaatgga atgtctaact aaagggttag gcatacattc ttaagacttc tgatacgcgc
67321 tgacttgcag gaaagttgtt tcagttaaca ctcctaccag cggcatccga gagttaatct
67381 gtaaagcttg agacaactta gaaagtgttt caaatgattg tgttgcttaa gaaaaaaatc
67441 ttagcacttc cttttgaaaa gccagtgggg ctgaaaagac aatgacaagc actttgtccc
67501 tctgtactgt gttttccttg cagcctggtg agacgagtgg accggatgga gcattccatc
67561 ggcagcatag tgtccaagat tgacgccgtg atcgtgaagc tagagattat ggagcgagcc
67621 aaactgaaga ggagggaggt gctgggaagg ctgttggatg gggtggccga ggtcagtagt
67681 catgagctga aaacaccgct gctgagcatg gtgttattaa tgaaaatata tgttgctgac
67741 agttgtattt gaagtattga agaagagtaa aaaaaattta cgtttataga aattcacaat
67801 gatgtttcca tttactctca ttttcagatt tttttctctg aaacagaaac actctttcta
67861 taaaatctct tgctataaaa catcaatgta gtcatattgt ctaaccctta ggctgagatg
67921 tttatctttc tccataacta cagataaaat tataatctgg aggtgttact ttcttaatac
67981 tccatatgct aatggtcctg ccttcactgc agggtagaat taagtgaaaa attactccag
68041 caactctgag atttgctatt atatgctgta aatctccagc cttaccaaac tacagattat
68101 ttggtccctg gacttcctaa ggcatttcct tctactgccc ccaacaccag tttctttttc
68161 cctttttagg atgaaaggct gggtcgtgac agtgaaatcc atagggaaca gatggaacgg
68221 ctagtacgtg aagagttgga acgctgggaa tccgatgatg cagcttccca gatcagtcat
68281 ggtttaggca cgccagtggg actaaatggt caacctcgcc ccagaagctc ccgcccatct
68341 tcctcccaat ctacagaagg catggaaggt gcaggtggaa atgggagttc taatgtccac
68401 gtatgatatg tgtgtttcag tatgtgtgtt tctaataagt gaggaagtgg ctgtcctgaa
68461 ttgctgtaac aagcacacta tttatatgcc ctgaccacca taggatgcta gtctttgtga
68521 ccgattgcta atcttctgca ctttaattta ttttatataa actttaccca tggttcaaag
68581 attttttttt ctttttctca tataagaaat ctaggtgtaa atattgagta cagaaaaaaa
68641 atcttcatga tgtgtattga gcggtacgcc cagttgccac catgactgag tcttctcagt
68701 tgacaatgaa gtagcctttt aaagctagaa aactgtcaaa gggcttctga gtttcatttc
68761 cagtcacaaa aatcagtatt gttatttttt tccaagagtg tgaaggaaaa tggggcat

Claims (12)

1.引物组，其用于在单一的PCR循环条件下使PKD1基因及PDK2基因的全部外显子扩增；
其中，所述引物组包含以下表1所示的引物对1～18，
[表1]
Figure FDA0002720988230000011
2.如权利要求1所述的引物组，其中，各引物具有15～40个碱基的长度。
3.如权利要求2所述的引物组，其中，
1F引物具有序列号1所示碱基序列的至少第15位～第29位的碱基序列，
1R引物具有序列号2所示碱基序列的至少第16位～第30位的碱基序列，
2F引物具有序列号3所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
2R引物具有序列号4所示碱基序列的至少第13位～第27位的碱基序列，
3F引物具有序列号5所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
3R引物具有序列号6所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
4F引物具有序列号7所示碱基序列的至少第6位～第20位的碱基序列，
4R引物具有序列号8所示碱基序列的至少第8位～第22位的碱基序列，
5F引物具有序列号9所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
5R引物具有序列号10所示碱基序列的至少第10位～第24位的碱基序列，
6F引物具有序列号11所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，
6R引物具有序列号12所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，
7F引物具有序列号13所示碱基序列的至少第21位～第35位的碱基序列，
7R引物具有序列号14所示碱基序列的至少第20位～第34位的碱基序列，
8F引物具有序列号15所示碱基序列的至少第16位～第30位的碱基序列，
8R引物具有序列号16所示碱基序列的至少第13位～第27位的碱基序列，
9F引物具有序列号17所示碱基序列的至少第21位～第35位的碱基序列，
9R引物具有序列号18所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
10F引物具有序列号19所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
10R引物具有序列号20所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
11F引物具有序列号21所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
11R引物具有序列号22所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
12F引物具有序列号23所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
12R引物具有序列号24所示碱基序列的至少第17位～第31位的碱基序列，
13F引物具有序列号25所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
13R引物具有序列号26所示碱基序列的至少第16位～第30位的碱基序列，
14F引物具有序列号27所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
14R引物具有序列号28所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，
15F引物具有序列号29所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
15R引物具有序列号30所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
16F引物具有序列号31所示碱基序列的至少第14位～第28位的碱基序列，
16R引物具有序列号32所示碱基序列的至少第11位～第25位的碱基序列，
17F引物具有序列号33所示碱基序列的至少第16位～第30位的碱基序列，
17R引物具有序列号34所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，
18F引物具有序列号35所示碱基序列的至少第12位～第26位的碱基序列，及/或
18R引物具有序列号36所示碱基序列的至少第13位～第27位的碱基序列。
4.如权利要求1～3中任一项所述的引物组，其中，各引物已经过冷冻干燥。
5.如权利要求1～3中任一项所述的引物组，其中，各引物被包含于适合在PCR中使用的溶液中。
6.如权利要求1～3中任一项所述的引物组，其中，单一的PCR循环条件包括62～80℃的退火温度及延伸反应温度。
7.如权利要求4所述的引物组，其中，单一的PCR循环条件包括62～80℃的退火温度及延伸反应温度。
8.如权利要求5所述的引物组，其中，单一的PCR循环条件包括62～80℃的退火温度及延伸反应温度。
9.试剂盒，其包含权利要求1～8中任一项所述的引物组，所述试剂盒用于在单一的PCR循环条件下使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增。
10.在单一的PCR循环条件下使PKD1基因及PKD2基因的全部外显子扩增的方法，所述方法包括使用权利要求1～8中任一项所述的引物组实施PCR的步骤。
11.如权利要求10所述的方法，其中，所述PCR包含多个独立的PCR。
12.如权利要求11所述的方法，其中，同时实施所述多个独立的PCR中的全部PCR。
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