CN107412779A - 一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法。将抗肿瘤药溶液与壳聚糖溶液混合搅拌，将上述混合溶液滴加到透明质酸钠和三聚磷酸钠的混合溶液中，搅拌，固化，得到粒径均一的载药凝胶球。以药物体外释放为指标，考察各物质浓度、含量比以及固化时间在不同pH值缓冲液中的释药行为。本发明原料具有生物相容性，制备方法简单，可一次性大量制备；制备得到的载药凝胶球具有pH敏感性，有效控制抗肿瘤药物在pH1.5环境下的释放，6小时最高释放率达到100％，在pH6.8环境下少量释放，释放率不足15％。

Description

一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法
技术领域
本发明属于软物质材料和药物制剂领域，涉及一种pH敏感性凝胶球的制备方法。
背景技术
近年来，靶向给药载体系统成为许多学者研究的热点，将不同的抗肿瘤药物与药物载体相结合成为复合物，从而具有一定的靶向功能。抗肿瘤药物的靶向载体系统有脂质体载体系统、纳米粒载体系统及磁性制剂载体系统等。脂质体载体系统是脂质体将药物包封于脂质双分子层形成的薄膜中间，具有亲水的内部囊腔及亲脂性磷脂夹层结构，其主要成分是磷脂和胆固醇。传统脂质体的一些缺点限制了其广泛应用，如靶向性只集中在网状内皮细胞丰富的器官，对其他器官则靶向性不明显；用常规方法制得的脂质体易聚集，有效期太短等。纳米粒载体系统中纳米粒是由高分子材料组成的骨架实体，粒径在10～100nm范围内，药物溶解、包裹于其中或者吸附在实体上。但是制备方法的工业化还有一定困难，纳米粒的长期稳定性、有效性和安全性有待考虑。磁性制剂载体系统，由超顺磁性的纳米材料、抗肿瘤药物和其他成分共同包埋于高分子聚合物载体材料中而构成。该载体依靠其磁性性质，限制了在空间上的利用，难以标准化。
智能高分子材料在生物医药领域有着广泛的应用，更被看作是一种具有良好应用前景的药物可控释放载体，由于pH敏感的材料可利用消化道的pH差异实现药物的可控释放，因此，利用智能高分子材料制备一种安全、具有良好生物相容性同时具有pH靶向性抗肿瘤药物载体十分重要。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供一种物理靶向性抗肿瘤药物载体的制备方法。该制备方法能够制备生物相容性好、具有pH敏感性的靶向凝胶球载体，制备方法简单、可一次性大量制备。采用该方法制备得到的抗肿瘤药物载体，能够增强药物靶向性，减少药物副作用。
为了达到上述目的，本发明的技术方案为：
一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法，包括以下步骤：
第一步，制备抗肿瘤药物溶液与壳聚糖溶液的混合溶液A
1.1)将壳聚糖粉末溶解于酸性溶液中，室温下，磁力搅拌至少2个小时至溶液澄清，得到浓度为0.5～30mg/mL的壳聚糖溶液。所述的酸性溶液包括稀盐酸、乙酸、丙酮酸、磷酸、丙酸中的一种或两种以上混合物。
1.2)将抗肿瘤药物溶解于溶液中，得到浓度为0.5～6mg/mL的抗肿瘤药物溶液。抗肿瘤药物包括柔红霉素、阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、泰索帝、替加氟、鬼臼碱类、高三尖杉酯碱、氨鲁米特、姜黄素、兰特隆、来曲唑、瑞宁德中的一种或两种以上混合物。
1.3)将步骤1.2)得到的抗肿瘤药物溶液与步骤1.1)得到的壳聚糖溶液混合，磁力搅拌至少30分钟，使其混合均匀，真空脱泡至少30分钟后得到混合溶液A。所述的抗肿瘤药物溶液与壳聚糖溶液的体积比为1:1～5。
第二步，制备透明质酸钠和三聚磷酸钠的混合溶液B
2.1)将透明质酸钠粉末溶解于去离子水中，室温下，搅拌至少1小时至溶液透明，真空脱泡至少30分钟，得到浓度为0.5～20mg/mL的透明质酸钠溶液。
2.2)将三聚磷酸钠颗粒溶解于去离子水中，磁力搅拌至少30分钟，得到浓度为0.1～15mg/mL的三聚磷酸钠溶液。
2.3)将步骤2.1)得到的透明质酸钠溶液和步骤2.2)得到的三聚磷酸钠溶液混合，磁力搅拌均匀后，真空脱泡得到混合溶液B。所述的透明质酸钠溶液与三聚磷酸钠溶液的体积比为1:1～4。
第三步，将混合溶液A滴加到混合溶液B中，搅拌后，室温条件下，固化20～90分钟，去离子水清洗后得到pH敏感性凝胶球，即为具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体。
将制得的pH敏感性凝胶球平均分成两份，分别放入pH1.5和pH6.8的缓冲液中，观察其释放情况，每隔一段时间取样，取样的同时加入等量的缓冲液。采用紫外分光光度计(Lambda 750s)测量样品的吸光值，对照标准曲线计算得到药物释放量。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明制备的包载抗肿瘤药物的凝胶球具有pH敏感性，在pH1.5环境下6小时最高累计释放率可达到100％，在pH6.8环境下12小时累计释放率不足15％。本发明所涉及的方法中反应条件温和、仪器设备要求简单、制备过程简单可控、易规模化。药物载体材料为可降解生物材料，具有较高的生物相容性，在抗肿瘤药物担载方面有着广阔的市场前景。
附图说明
图1为本发明中包载抗肿瘤药物凝胶球在不同pH环境下随时间变化的释放情况图。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明作进一步的详细说明，有助于进一步理解，并非限制本发明。
实施例1
包载抗肿瘤药物凝胶球的制备方法：
壳聚糖溶解于2％乙酸溶液中，室温，磁力搅拌2小时，至溶液澄清，得到20mL浓度为20mg/mL的壳聚糖溶液，加入10mL溶解于去离子水的阿霉素溶液(2mg/mL)继续搅拌30分钟，至溶液混合均匀，放置于真空干燥箱中真空脱泡30分钟，除去溶液中的气泡，得到混合溶液A。
透明质酸钠粉末溶解于去离子水中，室温，磁力搅拌1小时，至溶液透明，得到浓度为20mg/mL的透明质酸钠溶液，放置于真空干燥箱中真空脱泡30分钟，除去溶液中的气泡。三聚磷酸钠溶解于去离子水中，室温，磁力搅拌30分钟，得到浓度为5mg/mL的三聚磷酸钠溶液。
将20mL浓度为20mg/mL的透明质酸钠溶液与30mL浓度为5mg/mL的三聚磷酸钠溶液混合，磁力搅拌10分钟，真空脱泡得到混合溶液B。
将混合溶液A逐滴加入混合溶液B中，得到载药凝胶球，磁力搅拌固化20分钟，去离子水清洗3次，备用。得到的包载抗肿瘤药物凝胶球形貌均一，粒径约为3.3mm。
包载抗肿瘤药物凝胶球的药物释放性能测试：
将包载抗肿瘤药物凝胶球平均分成两份，分别放入pH1.5和pH6.8的缓冲液中，观察其释放情况，每隔一段时间取样，取样的同时加入等量的缓冲液。
随着时间的增加，pH6.8缓冲液中的凝胶球，基本保持原样，有很少部分药物释放，pH1.5缓冲液中的凝胶球有溶胀行为，药物逐渐释放。
采用紫外分光光度计(Lambda 750s)测量样品的吸光值，对照标准曲线计算得到药物释放量。
包载抗肿瘤药物凝胶球在不同pH环境下随时间变化的释放情况如图1所示，可以得到，在pH1.5环境下6小时累计释放率达到100％，在pH6.8环境下12小时累计释放率不足15％。
实施例2
包载抗肿瘤药物凝胶球的制备方法：
壳聚糖溶解于1％稀盐酸溶液中，室温，磁力搅拌2小时，至溶液澄清，得到15mL浓度为1mg/mL的壳聚糖溶液，加入15mL溶解于乙酸的姜黄素溶液(0.5mg/mL)继续搅拌30分钟，至溶液混合均匀，放置于真空干燥箱中真空脱泡30分钟，除去溶液中的气泡，得到混合溶液A。
透明质酸钠粉末溶解于去离子水中，室温，磁力搅拌1小时，至溶液透明，得到浓度为0.5mg/mL的透明质酸钠溶液，放置于真空干燥箱中真空脱泡30分钟，除去溶液中的气泡。三聚磷酸钠溶解于去离子水中，室温，磁力搅拌30分钟，得到浓度为1mg/mL的三聚磷酸钠溶液。
将10mL浓度为0.5mg/mL的透明质酸钠溶液与40mL浓度为1mg/mL的三聚磷酸钠溶液混合，磁力搅拌10分钟，真空脱泡得到混合溶液B。
将混合溶液A逐滴加入混合溶液B中，得到载药凝胶球，磁力搅拌固化40分钟，去离子水清洗3次，备用。
包载抗肿瘤药物凝胶球的药物释放性能测试：
将包载抗肿瘤药物凝胶球平均分成两份，分别放入pH1.5和pH6.8的缓冲液中，观察其释放情况，每隔一段时间取样，取样的同时加入等量的缓冲液。
采用紫外分光光度计(Lambda 750s)测量样品的吸光值，对照标准曲线计算得到药物释放量。
实施例3
包载抗肿瘤药物凝胶球的制备方法：
壳聚糖溶解于0.5％磷酸溶液中，室温，磁力搅拌2小时，至溶液澄清，得到25mL浓度为30mg/mL的壳聚糖溶液，加入5mL溶解于乙醇的替加氟溶液(6mg/mL)继续搅拌30分钟，至溶液混合均匀，放置于真空干燥箱中真空脱泡30分钟，除去溶液中的气泡，得到混合溶液A。
透明质酸钠粉末溶解于去离子水中，室温，磁力搅拌1小时，至溶液透明，得到浓度为5mg/mL的透明质酸钠溶液，放置于真空干燥箱中真空脱泡30分钟，除去溶液中的气泡。三聚磷酸钠溶解于去离子水中，室温，磁力搅拌30分钟，得到浓度为15mg/mL的三聚磷酸钠溶液。
将25mL浓度为5mg/mL的透明质酸钠溶液与25mL浓度为15mg/mL的三聚磷酸钠溶液混合，磁力搅拌10分钟，真空脱泡得到混合溶液B。
将混合溶液A逐滴加入混合溶液B中，得到载药凝胶球，磁力搅拌固化60分钟，去离子水清洗3次，备用。
包载抗肿瘤药物凝胶球的药物释放性能测试：
将包载抗肿瘤药物凝胶球平均分成两份，分别放入pH1.5和pH6.8的缓冲液中，观察其释放情况，每隔一段时间取样，取样的同时加入等量的缓冲液。
采用紫外分光光度计(Lambda 750s)测量样品的吸光值，对照标准曲线计算得到药物释放量。

Claims (5)

1.一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于以下步骤：
第一步，制备抗肿瘤药物溶液与壳聚糖溶液的混合溶液A
1.1)将壳聚糖粉末溶解于酸性溶液中，室温下磁力搅拌至溶液澄清，得到浓度为0.5～30mg/mL的壳聚糖溶液；
1.2)将抗肿瘤药物溶解于溶液中，得到浓度为0.5～6mg/mL的抗肿瘤药物溶液；
1.3)将抗肿瘤药物溶液与壳聚糖溶液混合，磁力搅拌至混合均匀，真空脱泡后得到混合溶液A；所述的抗肿瘤药物溶液与壳聚糖溶液的体积比为1:1～5；
第二步，制备透明质酸钠和三聚磷酸钠的混合溶液B
2.1)将透明质酸钠粉末溶解于去离子水中，室温下搅拌至溶液透明，真空脱泡至少30分钟，得到浓度为0.5～20mg/mL的透明质酸钠溶液；
2.2)将三聚磷酸钠颗粒溶解于去离子水中，磁力搅拌至少30分钟，得到浓度为0.1～15mg/mL的三聚磷酸钠溶液；
2.3)将步骤2.1)得到的透明质酸钠溶液和步骤2.2)得到的三聚磷酸钠溶液混合，磁力搅拌均匀后，真空脱泡得到混合溶液B；所述的透明质酸钠溶液与三聚磷酸钠溶液的体积比为1:1～4；
第三步，将混合溶液A滴加到混合溶液B中，搅拌后，室温条件下，固化20～90分钟，去离子水清洗后得到pH敏感性凝胶球，即为具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体。
2.根据权利要求1所述的一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，步骤1.1)中所述的酸性溶液包括稀盐酸、乙酸、丙酮酸、磷酸、丙酸中的一种或两种以上混合物。
3.根据权利要求1或2所述的一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，步骤1.2)中所述的抗肿瘤药物包括柔红霉素、阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、泰索帝、替加氟、鬼臼碱类、高三尖杉酯碱、氨鲁米特、姜黄素、兰特隆、来曲唑、瑞宁德中的一种或两种以上混合物。
4.根据权利要求1或2所述的一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，步骤1.3)中真空脱泡时间至少30分钟。
5.根据权利要求3所述的一种具有物理靶向性的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，步骤1.3)中真空脱泡时间至少30分钟。
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