CN107362175B - 一种自体动脉血提纯液态注射制剂及其制备与应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种自体动脉血提纯液态注射制剂及其制备与应用，制备方法包括血液处理装置以及血液处理的方法，血液处理方法包括：S1：设置离心装置的参数；S2：取动脉血；S3：将离心管放置于离心装置中，0～10℃下，立即在500‑2000g下离心3‑7分钟；S4：离心以后，取上清部分，得到液态注射制剂。其可应用治疗脱发、膝关节、骨骼骨膜、生殖器官类疾病等多种疾病。该液态注射制剂实现了通过体内注射来治疗疾病或保健的目的，治疗效果显著，且大大扩展了应用范围，具有极其重要的意义和价值。

Description

一种自体动脉血提纯液态注射制剂及其制备与应用

技术领域

本发明涉及医疗技术领域，具体涉及一种自体动脉血提纯液态注射制剂及其制备与应用。

背景技术

PRP(Platelet Rich Plasma)是富含血小板血浆或富含生长因子的血液。PRP技术是指利用自身的血液，并加入添加剂，然后提取出富含高浓度血小板和各种自身生长因子的血浆。这些因子对促进创伤的愈合和细胞的增殖与分化及组织的形成有着极其重要的作用。以前PRP主要应用于外科手术、心脏手术和烧伤科，治愈以前无法医治的大面积烧伤，慢性溃疡和肢体溃烂等疾病。PRP技术最先由Dr.Robert Marx于1998年应用研究于口腔外科手术，为最早有记录之医学文献。PRP属于一代产品。

PRF即富血小板纤维蛋白，是继PRP之后的第二代产品。PRF是一种从血液中提取的胶冻状物质，含有血液中除去红细胞以外的所有血液成分，在临床被制成颗粒和膜片应用于骨科、口腔、皮肤等，被证明具有促进组织修复和再生的作用。由于其为胶冻状产品，因此所记载的应用只是应用于外伤，如烧伤、跌打损伤等开放性的伤口，则其应用范围受到了极大的限制。

目前，对PRF的研究仅为胶冻状产品，或由胶冻状产品外延出的冻干产品，如专利号为201310180284.2的专利公开了一种新的冻干富血小板纤维蛋白及其制备和应用，其应用范围仍然较小。

本申请人在第二代产品PRF之上，研究了第三代产品，即本发明所述的纯液态的富血小板纤维蛋白。目前为止，本领域还没有人从液态的富血小板纤维蛋白方面入手研究，这是因为：其一：就目前的研究高度而言，想要液态，必须加入氯化钙和凝血酶等化学物质，而加入了化学物质以后会有一定的毒副作用，并且这种提取方法通常会改变血液的物理化学性质，导致再次注入人体的富血小板血浆纤维具有一定的副作用，无法实现体内应用或体内应用受到极大的限制。其二：由于在不添加任何添加剂的情况下，离体的血液极易凝固，通常离心还没开始就凝固了，即使没有完全凝固，在离心过程中也会凝固，而且无法实现完好的离心分层去除红细胞的操作，且即使分离了，后期注射过程中也需要较长时间，也会进行凝固。因此，理论上，根本无法实现不加入添加剂便可获得纯液态的自体血PRF注射制剂，并用注射器完成注射。因此，根本没有研究者从这一死胡同的方向去考虑研究方向。其实，大部分的研究者是从现有的制备技术中进行各种方式的医学试验，并通过大量研究文献证明其效果的有效性。而本发明从制备工艺上进行改良和创新，且在不用任何添加成分基础上得到自体动脉血的液态可注射的PRP或PRF在国内外尚属首例。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种自体动脉血提纯注射制剂及其制备与应用，解决了现有技术中存在的不足。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现：

一种自体动脉血注射制剂的制备方法，包括采用血液处理装置进行血液处理的方法；

所述血液处理装置包括离心装置以及能够为所述离心装置降温的制冷装置；

所述血液处理方法包括以下步骤：

S1：设置离心装置的温度、转速和离心时间；

S2：取动脉血并盛装在离心管中；

S3：将离心管放置于离心装置中，0～10℃下，立即在500-2000g下离心3-7分钟；

S4：离心以后，离心管中的动脉血分层，取上清部分，得到液态注射制剂。

进一步地，步骤S2中，所述动脉血在离开人体至放入血液处理装置之前需要以20-100次/分钟的频率晃动盛装动脉血的离心管。

进一步地，步骤S3中，具体的离心过程为：首先在4～6℃下，并在转速为1500～2500g下离心2～4min，记为第一次离心；然后再在6～10℃下，以转速为800～1200g离心1～3min，记为第二次离心。

进一步地，所述离心装置的制冷装置包括冷藏箱体，该冷藏箱体包括含有制冷系统的壳体、由壳体围绕成的冷藏腔以及设置于壳体顶部开口处的隔热顶盖。

进一步地，所述离心装置设置于所述冷藏腔内。

进一步地，所述离心装置上连接有能够为离心装置提供振荡频率的振荡器。

进一步地，所述振荡器的震荡频率为1～20Hz。

进一步地，在步骤S3的离心过程中，同时开启振荡器，从离心开始时至第一次离心结束之前，所述振荡器的震荡频率调整为2.5～4Hz，第二次离心过程中，将振荡器的频率调整为1～2Hz，离心结束时关闭振荡器。

进一步地，所述液态注射制剂在离开所述离心装置以后的1000秒以内进行注射使用。

进一步地，步骤S4中，离心以后，离心管中的动脉血分层，取红细胞层上方3毫米以上部分。

进一步地，所述冷藏腔内悬设有托架，该托架的上端与所述壳体的上端连接，所述离心装置放置于所述托架内，且所述离心装置能够在托架内进行晃动，所述振荡器设置于离心装置的外壁上。

进一步地，所述离心装置的制冷装置还包括与所述冷藏箱体连接的储藏箱体，所述储藏箱体包括相互连接的冷冻箱体以及冷藏储藏箱体，所述冷冻箱体的上设有带有制冷系统的冷冻外壳以及由冷冻外壳围绕形成的冷冻腔，所述冷藏储藏箱体上设有带有制冷系统的冷藏外壳和由冷藏外壳围绕形成的冷藏储藏腔。

进一步地，所述壳体外设置有能够调节冷藏箱体和储藏箱体的温度调节装置。

进一步地，所述冷藏腔内和冷藏储藏腔内的温度变化范围为：-5～20℃，所述冷冻腔内的温度变化范围为：-20～20℃。

进一步地，所述离心装置包括离心机本体以及设置于离心机本体中央的功能性组件，所述功能性组件包括设置于顶部的水平转子以及与转子连接并能够驱动转子转动的驱动装置，所述水平转子上设有多个放置离心管的孔洞。

进一步地，所述离心机本体的上端面上还设有多个能够放置离心管的冷藏孔。

一种采用所述的自体动脉血液态注射制剂的制备方法所制备的液态注射制剂。

一种自体动脉血液态注射制剂的应用，所述液态注射制剂能够注射于头部皮肤内用于脱发治疗、注射于膝盖内用于膝关节疾病治疗、注射于骨骼骨膜上用于骨骼萎缩治疗、注射于颌骨骨面用于牙龈萎缩的治疗以及用于肩周炎、脊柱韧带类疾病、生殖器官类疾病、肘关节类疾病、骨头坏死类疾病等的治疗。

本发明至少具有以下有益效果：

本发明通过本发明血液处理装置以及处理方法所得到的液态注射制剂为纯液态，实现了通过体内注射来治疗疾病或保健，其在本领域中，具有里程碑的意义。

具体地，①本发明在不添加任何防凝制剂或添加剂的情况下，也不会进行凝固；其分层显著，分离简单，动脉血使用量低，分离后预留的注射时间充分，整体成本低；②且由于其为纯液态，用带有极细针头的注射器注射至人体内部，实现众多疾病的治疗，如用31g针头注射，患者的痛感大大减少，使痛感极弱，大大降低患者的心理防线，使其应用更普遍；③而且其不含有任何添加剂，又是取自人体用于人体，使其不含有任何副作用，且适用于任何年龄层；④由于其可取自自身又用于自身，不存在交叉污染或疾病的传染或感染等情况，且其成本大大降低；⑤动脉血的使用大大增加了应用效果，也是其应用范围更广；⑥可实现体内注射，则大大扩展了其应用范围，就本发明人在有限的研究期间内发现，其对日常的常见疾病或亚健康情况也能实现效果极好的治疗，如治疗脱发、膝关节类疾病、骨骼萎缩、牙龈萎缩、改善皮肤、生殖器官类疾病、肩周炎、脊柱韧带类疾病、肘关节类疾病、骨头坏死类疾病等等的治疗。

本发明的方法以及所得到的制剂在医学等技术领域中，其发展具有质的飞跃，具有里程碑式的意义和价值。

附图说明

图1是本发明实施例所述的血液处理装置的结构示意图；

图2是本发明另一个实施例所述的血液处理装置的结构示意图；

图3是本发明另一个实施例所述的血液处理装置的整体结构示意图；

图4是图3中A处的放大结构示意图；

图5是本发明实施例所述的患病和正常膝关节在红外下的示意图；

图6是本发明实施例所述的患病和正常膝关节在红外下的示意图以及温度对比情况；

图7是本发明实施例所述的患者注射液态注射制剂前后头发密度对比示意图；

图8是本发明实施例所述的患者注射液态注射制剂前后头发情况对比示意图；

图9是本发明实施例所述的患者注射液态注射制剂前后头发情况对比示意图；

图10是本发明实施例所述的患者注射液态注射制剂前后头发情况对比示意图。

1、冷藏箱体，2、壳体，3、冷藏腔，4、隔热顶盖，5、离心装置，6、振荡器，7、托架，8、梯面，9、延伸边，10、储藏箱体，11、冷冻外壳，12、冷冻腔，13、冷藏外壳，14、冷藏储藏腔，15、线孔，16、控制面板，17、离心机本体，18、功能性组件，19、冷藏孔，20、抽屉，21、孔洞。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。以下提供的本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通方法人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

如图1～4所示，一种血液处理装置，所述血液处理装置包括离心装置5以及能够为所述离心装置5降温的制冷装置。所述离心装置5的制冷装置包括冷藏箱体1，该冷藏箱体1包括含有制冷系统的壳体2、由壳体2围绕成的冷藏腔3以及设置于壳体2顶部开口处的隔热顶盖4；所述离心装置5可拆装的设置于所述冷藏腔3内，如放置在冷藏腔3内。

所述离心装置5上连接有能够为离心装置5提供振荡频率的振荡器6，使离心管在离心的同时，振荡器6会给一个外加的震荡频率，能够提高低温下的离心效果。该振荡器6的振荡频率范围为：1HZ～20HZ。

所述冷藏腔3内悬设有托架7，该托架7的上端与所述壳体2的上端连接，所述离心装置5放置于所述托架7内，且所述离心装置5能够在托架7内进行晃动，所述振荡器6设置于离心装置5的外壁上，则通过托架7的悬设、离心装置可以在托架7内进行一定的晃动等以及振荡器6的设置使得离心装置能够在振荡器6的作用下进行一定频率的振动，促进液态注射剂成品的制备。

所述壳体2外设置有能够调节冷藏箱体1和储藏箱体10的温度调节装置。

作为进一步优选的实施方式，所述离心装置的制冷装置还包括与所述冷藏箱体1连接的储藏箱体10，所述储藏箱体10包括相互连接的冷冻箱体以及冷藏储藏箱体10，所述冷冻箱体的上设有带有制冷系统的冷冻外壳11以及由冷冻外壳11围绕形成的冷冻腔12，所述冷藏储藏箱体10上设有带有制冷系统的冷藏外壳13和由冷藏外壳13围绕形成的冷藏储藏腔14；所述冷冻外壳11和冷藏外壳上均设有相应的门或抽屉20，以使放置东西时更方便。

作为进一步优选的实施方式，所述离心装置包括离心机本体17以及设置于离心机本体17中央的功能性组件18，所述功能性组件18包括设置于顶部的水平转子以及与转子连接并能够驱动转子转动的驱动装置，所述水平转子上设有多个放置离心管的孔洞21。

所述离心机本体17的上端面上还设有多个能够放置离心管的冷藏孔19，该冷藏孔19可在离心前或离心后短暂的放置离心管，以确保液态注射剂的成型。

所述冷藏腔3内和冷藏储藏腔14内的温度变化范围为：-5～20℃，所述冷冻腔12内的温度变化范围为：-20～20℃。

作为进一步优选的实施方式，所述托架7优选网状托架7，托架7与壳体2的连接方式可以为：所述壳体2的顶部内侧设有向内缩的梯面8，所述托架7顶端边缘设有向外垂直弯折并延伸的延伸边9，则所述延伸边9恰好能够搭在所述梯面8上，实现了托架7于冷藏箱体1的可拆卸连接。

作为进一步优选的实施方式，托架7的底面和四周均与冷藏腔3有一定空隙。

作为进一步优选的实施方式，所述冷藏箱体1和储藏箱体10的侧壁上均设有用于穿过电连接线或通信线路等的线孔15，以实现各部件的供电或信号传输等，所述冷藏箱体1的外侧面还设有能够控制离心装置的开闭以及参数的控制面板16。

所述离心机本体17的上端面还设置有振动器的开关。

作为进一步优选的实施方式，所述血液处理装置的底部设置有滚轮，可以人工推动所述血液处理装置移动。

作为进一步优选的实施方式，打开隔热顶盖4以后，所述离心机本体17的上端面与所述冷藏箱体1的上表面齐平或略低于冷藏箱体1的上表面。

在本实施例中，托架与壳体2的连接方式、托架的底面和四周均与冷藏腔3有一定空隙、可拆卸连接，离心装置与托架可拆卸连接，则生产方便、组装方便、维修与更换均非常方便。

另外，冷藏箱体1和储藏箱体可参见冰箱的制冷体系，具体地，壳体2、第一外壳、第二外壳等均可采用冰箱原理制备或采用冰箱替代。离心装置中的功能性组件可采用现有技术中的离心机相应的组件来替代，如可采用湘仪L600离心机的相应结构来替代。

实施例2

一种液态注射制剂的制备方法，包括血液处理装置以及采用该装置进行血液处理的方法，所述血液处理装置的结构如实施例1所述。

所述血液处理方法包括以下步骤：

S1：设置离心装置的温度4℃、转速1500g和离心时间5min；

S2：取动脉血并盛装在离心管中,所述动脉血在离开人体至放入血液处理装置之前需要以30次/分钟的频率晃动盛装动脉血的离心管；

S3：将离心管放置于离心装置中，具体的离心过程为：首先，在4℃下，并在转速为1500g下离心5min；然后再在7℃下，以转速为1000g离心3min。

S4：离心以后，采用注射器去除底部的红细胞层，得到液态PRF注射制剂。

本实施例中所得到的液态注射制剂优选在离开所述离心装置以后的1000秒以内进行注射使用。使用时，用注射器直接注射到病患部位内部。

实施例3

一种液态注射制剂的制备方法，包括血液处理装置以及采用该装置进行血液处理的方法，所述血液处理装置的结构如实施例1所述。

所述血液处理方法包括以下步骤：

S1：设置离心装置的温度5℃、转速2000g和离心时间3min；并设置振荡器的震荡频率为3；

S2：取20ml动脉血并盛装在2支15ml离心管中,所述动脉血在离开人体至放入血液处理装置之前需要以50次/分钟的频率晃动盛装动脉血的离心管；

S3：将离心管放置于离心装置中，立马打开离心装置，具体的离心过程为：首先，在5℃下，并在转速为2000g下离心3min，记为第一次离心；然后再在8℃下，以转速为1000g离心2min，记为第二次离心；

在开启离心装置的同时开启振荡器，从离心开始时至第一次离心结束之前，所述振荡器的震荡频率调整为3Hz，第二次离心过程中，将振荡器的频率调整为1.5Hz，离心结束时关闭振荡器；

S4：离心以后，离心管中的动脉血分层，采用注射器取红细胞层上方3mm以上部分便可，即为液态注射制剂或液态PRF注射制剂。

本实施例中所得到的液态注射制剂优选在离开所述离心装置以后的1000秒以内进行注射使用。使用时，用注射器直接注射到病患部位内部。

实施例4

一种采用实施例3所述的制备方法所制备的液态注射制剂，该液态注射制剂为动脉血离心去掉底层红细胞以外的成分，或离心后所取的上清血浆层，采用本发明方法制备，能够得到纯液态的制剂，且不添加任何添加剂。

实施例5

从手腕等部位采动脉血，可用离心管作为盛血容器，抽血时需要20-100次/分钟的频率晃动离心管，若连接采血针和离心管之间的采血管较长，则需要同时晃动采血管；抽出血液后便震荡便立即将离心管放置于血液处理装置的孔洞中，采用实施例3或4所述的制备方法离心并制取本发明所述的液态注射制剂。

为了确保血液不会凝固，在晃动采血管和离心管时，可用冰袋接触晃动，也可以将采血管或离心管放置于冰袋上。

所述液态注射制剂能够注射于头部皮肤内用于脱发治疗、注射于膝盖内用于膝关节疾病治疗、注射于骨骼骨膜上用于骨骼萎缩治疗、注射于颌骨骨面用于牙龈萎缩的治疗、注射于皮肤内用于改善皮肤的一些缺陷以及用于肩周炎、脊柱韧带类疾病、生殖器官类疾病、肘关节类疾病、骨头坏死类疾病等的治疗。

实施例6

实验组：实施例3所得到的液态注射制剂。

对比组1：晃动且震动，并改变参数；具体地，取动脉血,在离开人体至放入血液处理装置之前需要以50次/分钟的频率晃动离心管；打开离心装置，并15℃下，立即在3000g下离心7min；在开启离心装置的同时开启振荡器，所述振荡器的震荡频率调整为1Hz；

对比组2：不晃动，震动，并改变参数；具体地，取动脉血放入离心管；打开离心装置，并15℃下，立即在3000g下离心7min；在开启离心装置的同时开启振荡器，所述振荡器的震荡频率调整为1Hz；

对比组3：晃动，不震动，其他操作和条件均与实验组一致。

对比组4：不晃动，不震动，并改变参数；具体地，取动脉血放入离心管；打开离心装置，并15℃下，立即在3000g下离心7min；

对比组5：常温下采用普通离心机离心所得的制剂。

上述晃动指动脉血在放入血液处理装置中进行离心之前的晃动，震动指打开振荡器进行高频率的震荡。

结果如下所示。

表1中，分层效果指离心后血液的分层情况；整体凝固率即其整体的粘稠度，

凝固率越高粘稠度越高，反之亦然；针头规格指所需要的针头型号，若基本无凝固情况则使用极细的针头便可，粘稠度高则只能使用粗针头；注射时间指血液离心分离完毕可维持的时间，即给注射的准备时间；注射时疼痛度：针头外径越粗、注射制剂粘稠度越大，注射时越痛。

实验组：①分层效果非常好，各层之间界限非常清晰，相邻两层之间的混合部分仅有1mm以内，即界限高度1mm以内；则上清可95％以上得到分离，可有效利用所抽取的动脉血，动脉血需要量少，使用时，只需要用注射器抽取上清便能够达到使用注射量，无需进行精确分离红细胞层，从而使分离时间只用几秒便可，不会造成离心后的二次凝固，且动脉血需要量少，对被抽取者健康无损害；②所得到的液态注射制剂没有发现凝固现象，属于纯的液态，则只需要31g左右的细针头便可极好的实现体内注射；31g针头的外径约0.27mm左右，内径约0.12mm左右；③完成分离以后需要在1000秒以内进行注射，注射时间达到15～17分钟，无论多针注射还是有其他的准备工作，时间上均非常充足，具有极好的应用前提条件；④由于采用31g针头便能完成体内注射，其外径只有0.27mm左右，故注射时，人体的疼痛感知度极弱，不会造成使用者的心理恐惧；且使得应用人群更广泛。总之，实验组具有非常好的临床应用前提条件。

对比组1和对比组3：①分层效果明显，各层之间界限较为清晰，相邻两层之间的混合部分约2～3mm，即界限高度约2～3mm；则上清可85％左右得到分离，动脉血需要量较实验组明显增加，使用时，需要较为彻底的对下层红细胞进行分离，方可满足注射需要量，则分离时间明显增长，造成血液进行一定程度的再次凝固，当然，若原料动脉血准备的足够多，也可以不必精确分离，然而，众所周知，动脉血很宝贵，且优选现取现用，若抽取量大，会对被抽取者健康造成损害，使得其不适应临床应用；②所得到的液态注射制剂有15～20％左右的凝固现象，使所制备的注射制剂不属于纯液态，其有一定的粘稠度，则需要增加注射针头的规格，通常需要用21～22g左右的针头可较好的完成体内注射；21g针头的外径约0.81mm左右，内径约0.51mm左右，22g的外径约0.71mm左右，内径约0.41mm左右，则其外径明显比实验组粗很多，故痛感较强；③完成分离以后需要在500～600秒以内进行注射，注射时间为8～10分钟，对于多针注射的情况，时间上较紧凑，需要较为熟练的医师操作，临床应用具有一定程度的限制；④由于采用21～22g针头才能完成体内注射，其外径只有0.8mm左右，较粗，故注射时，人体的疼痛感较强，通常会造成使用者或患者的心理恐惧感，一定程度上限制了一部分人群的使用。总之，对比组1和对比组3相较于实验组，其临床应用条件受到一定的限制。且综合所有条件而言，对比组1的效果略高于对比组3。

对比组2：①分层效果不理想，但有显著分层现象，只是相邻两层之间的混合部分较多，约3～5mm，即界限高度约3～5mm；则上清只能65～70％左右得到分离，成品率低，动脉血需要量较多，对宝贵的动脉血浪费量较大；使用时，需要较为彻底的对下层红细胞进行分离，且通常不好满足注射需要量，且彻底分离的难度大，分离时间增长，造成血液分离时的再次凝固，动脉血很宝贵，若抽取量大，会对被抽取者健康造成损害，使得其不适应临床应用；②所得到的液态注射制剂有30％左右的凝固现象，使所制备的注射制剂不属于纯液态，粘稠度较高，则需要用19g左右的针头方可完成体内注射；19g针头的外径约1.06mm左右，内径约0.7mm左右，则其外径远远高于实验组，故痛极强；③完成分离以后需要在200秒以内进行注射，注射时间为3～4分钟，时间紧张，无法完成多针注射，对注射医师要求高，临床应用受到限制；④由于采用19g针头才能完成体内注射，其外径只有1.06mm左右，较粗，会对患者造成二次伤害，故注射时，人体的痛感强烈，会造成使用者或患者的心理恐惧感，使用受到限制，综上，该对比组2不适宜注射，或注射前最好预先麻醉，且其治疗成本大大增加。其整体效果远远低于实验组，且明显低于对比组1和对比组3。

对比组4：分层不明显，相邻两层之间的混合部分较多，约5～10mm，即界限高度约5～10mm；则上清只能20～30％左右得到分离，成品率极低，动脉血需要量非常多，浪费量非常大，动脉血源无法实现供给；且对上清的分离难度大、分离时间长，造成血液分离时的再次凝固，整体凝固率能够达到40～60％，粘稠度非常高，若注射，至少需要14～15g左右的针头，外径约1.06mm左右，内径约0.7mm左右，较粗，会对患者造成二次伤害，故注射时，人体的痛感极其强烈，而且分离以后30～60秒左右便凝固，无法实现注射。因此，无论从哪一点来说，对比组4都无法制作成体内注射的注射制剂。

对比组5不会有分层等现象，无法制作本发明的液态注射制剂。

总之，对于体内注射来治疗疾病而言，只有实验组的方法适宜临床应用，各个对比组均受到较大限制。

实施例7：脱发治疗

治疗方法：提取物直接注射到脱发部位，每点0.1-1.0毫升，行间距0.5-2.0厘米网状范围注射，每次注射间隔时间15天。

效果：第一次注射后15天，通过同一部位的显微镜拍照会明显观察到治疗者的头发根部有变粗，白发的根部有黑发生长，同一观测点的毛发密度明显增加；第二次注射后在同一观测点有了更加明确的效果，同时从肉眼远看对比即可非常明显看到头发的生长效果。同时，采用此技术和植发的更加显著区别在于后续不需要涂抹任何药品，通过自身的组织再生没有任何副作用。

图7是患者车某某(46岁，男)2017年3月11日注射本发明的液态注射制剂之前拍摄的图片以及2017年3月26日注射15天后拍摄的图片，由图对比，肉眼可明显看到头发密度显著增加。

图8是王某(58岁，男)2017年5月1日注射本发明的液态注射制剂之前拍摄的图片以及2017年5月16日注射15天后拍摄的图片，由图对比，肉眼可明显看到头发密度显著增加，并且注射以后白头发明显减少。

图9是宋某某(35岁，男)2016年11月8日注射本发明的液态注射制剂之前、2016年11月23日注射15天后以及2016年12月8日注射30天后拍摄的图片，由图可知，头发密度显著增加。

图10是霍某某(51岁，男)2016年11月15日注射本发明的液态注射制剂之前、2016年11月30日注射15天后以及2016年12月15日注射30天后拍摄的图片，由图可知，头发密度显著增加；并且未注射时，白头发至少有40～50根，注射30天后，白头发的量不到10根，疗效显著。

附图中的雪丹血浆即为本发明所述的液态注射制剂。

实施例7：膝关节KOA治疗

提取物围绕膝关节髌骨注射，每点0.3-0.6毫升，注射8-16个点，注射胫骨内侧1-2个点，每点1毫升，膝关节腔内注射1-2毫升，无需抽积液。

效果：通过对数百例KOA患者的对比观测，在一次治疗后即止疼，三到四次治疗后关节炎得到了根治。案例采取对患者的正面双腿全长片的拍片观测对比、国际通行的疼痛量表进行测试，所有KOA患者均取得了非常好的疗效。

在对KOA患者进行治疗数据搜集的同时，对正常膝关节进行单腿测试(测试前测试者已签订详细告知及同意书)，对注射后的单腿通过红外观测其血液循环更好，如图5所示。将注射本发明的液态注射制剂的膝关节称作患病膝关节，另一个膝关节称为正常膝关节。通过对众多病例患者的测试发现：在测试前患病膝关节的温度比正常膝关节平均低1℃左右，而注射完成10分钟后进行测试显示，患病膝关节比正常膝关节的温度平均高出了2.1℃。在注射完成30日后回访，患病膝关节温度依然比正常膝关节高出1.3℃，图6为其中一个患者在注射30日以后测得的温度情况，即患病膝关节的温度比正常膝关节温度高出1.2℃。

本发明的液态注射制剂极大的改善了膝盖部位血液循环及血运状况，且无任何不良反应。

实施例8：骨骼萎缩治疗

骨骼萎缩治疗，骨骼骨膜上注射，31g针头，直达骨膜表面，每点注射1-2毫升，间隔10mm。

效果：三到四次的治疗后骨骼萎缩的情况得到了明显的缓解和改善。

对87岁老人注射动脉血提纯液态PRF，原骨骼萎缩导致行走困难，注射一周后积液消失、疼痛感明显减轻，骨骼症状得到极大缓解，可以无需搀扶自行独立行走。

实施例9：牙龈萎缩治疗

牙龈萎缩注射，上颌骨下颌骨骨面注射，每点1毫升左右，上下颌骨各注射5-10毫升雪丹prf

效果：对牙齿松动、牙疼等状况，都有非常明显改善。

实施例10：皮肤PRF治疗

皮肤，皮肤使用多针头注射系统，每点10u-30u，深度1-2.mm,印章式注射。

效果：对身体各个部位皮肤进行了测试，都能有效改善皮肤状况，恢复皮肤的弹性和活力。

实施例11：生殖系统疾病

男性生殖器注射：阴茎海绵体内注射，每侧均匀4个点，每点1毫升。效果：增强性功能，恢复海绵体弹性和身体机能。

在本发明中，要想获得真正的纯液态注射制剂，其对操作以及流程中的参数要求较为严格。对于本发明中的制备方法以及其应用，本发明人进行了长期的摸索，包括进行了反复多次的设备的一步步改进、方法上的一逐步改进以及方法和设备的有机融合等。本发明人通过多年的研究发现，即使在本发明特制的血液处理装置中进行进行离心分离，本发明对操作以及参数也非常敏感，获得不会凝固并能有一定注射时间的液态注射制剂难度非常大，因此，本发明人研究了多年才获得了本发明的制剂，并通过三年左右的效果研究，才获得了本发明的完整方案，当然，本发明所得的三代产品液态注射制剂的应用领域远不止本发明提到的，其可能还能够应用于众多其他的疾病或保健领域，对此，本申请人还会继续研究。

在本发明中，所述的“采用注射器取红细胞层上方3mm以上部分”为：例如红细胞层高度为20mm，红细胞以上的高度为35mm，则优选取23mm以上的部分，即23mm以上的所有液体部分，基本为血浆部分。

以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，对于本领域技术人员而言，本发明可以有各种改动和变化。凡在本发明的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种自体动脉血提纯液态注射制剂的制备方法，包括采用血液处理装置进行血液处理的方法，其特征在于：

所述血液处理装置包括离心装置以及能够为所述离心装置降温的制冷装置；

所述血液处理方法包括以下步骤：

S1：设置离心装置的温度、转速和离心时间；

S2：取动脉血并盛装在离心管中；

S3：将离心管放置于离心装置中，0～10℃下，立即在500-2000g下离心3-7分钟；

S4：离心以后，离心管中的动脉血分层，去除底部的红细胞层，即保留红细胞层以上的部分，即得到液态注射制剂；

其中，步骤 S2中，所述动脉血在离开人体至放入血液处理装置之前需要以20-100次/分钟的频率晃动盛装动脉血的离心管；

步骤 S3中，具体的离心过程为：首先在4～6℃下，并在转速为1500～2500g下离心2～4min，记为第一次离心；然后再在6～10℃下，以转速为800～1200g离心1～3min，记为第二次离心；

所述离心装置上连接有能够为离心装置提供振荡频率的振荡器，所述振荡器的震荡频率为1～20Hz；

在步骤S3的离心过程中，同时开启振荡器，从离心开始时至第一次离心结束之前，所述振荡器的震荡频率调整为2.5～4Hz，第二次离心过程中，将振荡器的频率调整为1～2Hz，离心结束时关闭振荡器。

2.根据权利要求1所述的自体动脉血提纯液态注射制剂的制备方法，其特征在于：所述离心装置的制冷装置包括冷藏箱体，该冷藏箱体包括含有制冷系统的壳体、由壳体围绕成的冷藏腔以及设置于壳体顶部开口处的隔热顶盖；

所述离心装置设置于所述冷藏腔内。

3.根据权利要求1所述的自体动脉血提纯液态注射制剂的制备方法，其特征在于：

所述液态注射制剂在离开所述离心装置以后的1000秒以内进行注射使用；

步骤S4中，离心以后，离心管中的动脉血分层，取红细胞层上方3毫米以上部分。

4.根据权利要求2所述的自体动脉血提纯液态注射制剂的制备方法，其特征在于：所述冷藏腔内悬设有托架，该托架的上端与所述壳体的上端连接，所述离心装置放置于所述托架内，且所述离心装置能够在托架内进行晃动，所述振荡器设置于离心装置的外壁上；

所述离心装置的制冷装置还包括与所述冷藏箱体连接的储藏箱体，所述储藏箱体包括相互连接的冷冻箱体以及冷藏储藏箱体，所述冷冻箱体上设有带有制冷系统的冷冻外壳以及由冷冻外壳围绕形成的冷冻腔，所述冷藏储藏箱体上设有带有制冷系统的冷藏外壳和由冷藏外壳围绕形成的冷藏储藏腔；

所述壳体外设置有温度调节装置。

5.根据权利要求4所述的自体动脉血提纯液态注射制剂的制备方法，其特征在于：所述离心装置包括离心机本体以及设置于离心机本体中央的功能性组件，所述功能性组件包括设置于顶部的水平转子以及与转子连接并能够驱动转子转动的驱动装置，所述水平转子上设有多个放置离心管的孔洞；

所述离心机本体的上端面上还设有多个能够放置离心管的冷藏孔；

所述冷藏腔内和冷藏储藏腔内的温度变化范围为：-5～20℃，所述冷冻腔内的温度变化范围为：-20～20℃。

6.一种采用权利要求1～5中任一项所述的自体动脉血提纯液态注射制剂的制备方法所制备的液态注射制剂。

7.一种如权利要求6所述的液态注射制剂在制备药物中的应用，其特征在于，所述药物注射于头部皮肤内用于脱发治疗、注射于膝盖内用于膝关节疾病治疗、注射于骨骼骨膜上用于骨骼萎缩治疗、注射于颌骨骨面用于牙龈萎缩的治疗以及用于肩周炎、脊柱韧带类疾病、生殖器官类疾病、肘关节类疾病、骨头坏死类疾病的治疗。

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