CN107261304A - 一种奶牛的布鲁氏菌病免疫试剂盒及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种奶牛的布鲁氏菌病免疫试剂盒及其应用，本发明提供了试剂盒，其包括布鲁氏菌病活疫苗和阴道喷注器；所述阴道喷注器包括喷注器、针头和可拆卸套管；所述针头与所述喷注器的注药管前部可拆卸连接，所述可拆卸套管设于所述针头上，且所述可拆卸套管通过其端部设置的软塞与所述针头的尖端部配合。本发明的试验证明，本发明用阴道喷注器将布鲁氏菌病疫苗进行奶牛阴道免疫，提高了免疫的安全性和生物利用度，而且免疫抗体的消长规律与其他黏膜免疫途径一致，有利于监测等布鲁氏菌病综合防控措施的开展，是一种良好的奶牛布鲁氏菌病黏膜免疫新方法。

Description

一种奶牛的布鲁氏菌病免疫试剂盒及其应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种奶牛的布鲁氏菌病免疫试剂盒及其应用。
背景技术
布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的人兽共患慢性传染病。布鲁氏菌病在世界各地均有分布，每年因此造成的经济损失高达数亿美元，并且还对人类健康造成严重威胁。迄今为止，只有少数几个国家基本上控制了本病的流行。由于该病可通过未经消毒的牛奶、奶制品等感染人类，不仅会造成严重的经济损失，更会导致严重的社会公共卫生问题。因此，奶牛场布鲁氏菌病的防控显得尤为迫切和重要。
疫苗免疫是预防和控制布鲁氏菌病的重要措施之一，选择和使用有效的布鲁氏菌病疫苗关系到布鲁氏菌病防控的成效。传统奶牛布鲁氏菌病免疫以注射免疫为主，但是注射免疫对怀孕牲畜不安全，且免疫抗体在体内存在的时间可长达18个月。
黏膜免疫是近年国际上布鲁氏菌病免疫研究的一个焦点，黏膜免疫的优点是免疫抗体持续时间短，利于布病监测等综合防控措施的开展，并且对怀孕牲畜的安全性也更高。另一方面黏膜免疫能够有效模拟布鲁氏菌入侵机体的方式。在奶牛布鲁氏菌病免疫方面，世界各国都在采用点眼、口服、滴鼻等黏膜途径免疫，而且以点眼免疫为多见。但是，由于上述黏膜部位或者是体表暴露部位，或者是易于与外界相通部位，存在免疫后疫苗活菌易于污染周边环境、感染操作人员问题,且同时还存在有效成分流失的问题，尤其是奶牛点眼免疫由于眼睛部位的结构特点，疫苗成分流失尤其严重。
发明内容
本发明一个目的是提供一种用于布鲁氏菌病疫苗免疫动物的试剂盒。
本发明提供的试剂盒，其包括布鲁氏菌病活疫苗和阴道喷注器；
所述阴道喷注器包括喷注器、针头和可拆卸套管；所述针头与所述喷注器的注药管前部可拆卸连接，所述可拆卸套管套设于所述针头上，且所述可拆卸套管通过其端部设置的软塞与所述针头的尖端部配合。
上述试剂盒中，所述套管近针头端为圆头。
上述试剂盒中，所述软塞为梯形软塞。
上述试剂盒中，所述针头的长为5-10cm。
上述试剂盒中，所述喷注器包括依次连接的注药管、注射腔、活塞、活塞杆和推手；
所述注药管的侧壁上设有两端开口的针状刺头和单向进气阀，且所述针状刺头通过单向进气阀与所述注药管连通，所述注药管的后部连接注射腔的前部；
所述注射腔内设有活塞，所述活塞通过活塞杆与所述推手连接，所述活塞杆上设有弹簧，所述弹簧上设有调节螺母，所述推手通过固定螺母与所述活塞杆固定连接，所述推手与所述固定螺母连接的杆体上设有相对位置的钩环和手柄。
上述试剂盒中，所述试剂盒还包括记载有免疫方式的载体；所述免疫方式为动物阴道免疫，且免疫的深度为动物阴道口内5-10cm处。
上述试剂盒中，所述布鲁氏菌病活疫苗为布鲁氏菌病活疫苗A19。
上述试剂盒中，所述动物为家畜；
或所述动物为家畜，所述家畜为奶牛；
或所述动物为家畜，所述家畜为奶牛，所述免疫的深度为动物阴道口内5-10cm。
上述的试剂盒中的所述布鲁氏菌病活疫苗和所述阴道喷注器在布鲁氏菌病疫苗免疫动物中的应用也是本发明保护的范围。
上述应用中，所述动物为家畜；
或所述动物为家畜，所述家畜为奶牛。
本发明的试验证明，本发明将布鲁氏菌病疫苗进行奶牛阴道免疫，阴道不属于体表暴露部位,疫苗不易流失,生物利用度高,且同时提高了免疫的安全性。由于奶牛阴道口是闭合的，当在阴道口内免疫后，布鲁氏菌病疫苗不会流出阴道，能被阴道黏膜全部有效吸收而产生良好免疫效果，提高了免疫的安全性和生物利用度，而且免疫抗体的消长规律与其他黏膜免疫途径一致，有利于监测等布鲁氏菌病综合防控措施的开展，是一种良好的奶牛布鲁氏菌病黏膜免疫新方法。因而，奶牛阴道免疫作为布鲁氏菌病疫苗黏膜免疫的一种途径，既有黏膜免疫的效果，又避免了其它黏膜途径呈现的扩散至周边环境的可能性和有效成分流失的问题，是一种较为理想的黏膜免疫途径。
附图说明
图1为本发明专用阴道喷注器结构图；
1、梯形软塞；2、一次性套管；3、针头；4、注药管；5、针状刺头；6、单向进气阀；7、注射腔；8、活塞；9、弹簧；10、活塞杆11、调节螺母；12、固定螺母；13、钩环；14、手柄；15、推手。
图2为使用A19疫苗对奶牛进行阴道免疫、口腔喷注、点眼、注射免疫后在免疫后7天、15天、30天、60天、90天奶牛抗体效价变化规律。
具体实施方式
下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下面结合具体实施方式对本发明做进一步详细说明。
实施例1、专用阴道喷注器
一、专用阴道喷注器的结构
如图1所示，阴道喷注器包括喷注器、针头3和可拆卸套管2；针头与喷注器的注药管前部可拆卸连接，可拆卸套管套(圆头一次性套管)设于针头上，且可拆卸套管通过其端部设置的软塞1(保护针头)与针头的尖端部配合。套管近针头端为圆头。软塞为梯形软塞。针头的长为10cm直径1um，可拆卸套管的长度为长为10cm直径4um。
上述喷注器采用公开号为105213064A的专利申请公开的喷注器主体部分，具体如下：
喷注器包括依次连接的注药管4、注射腔7、活塞8、活塞杆10和推手15；
注药管4的前部连接可拆卸针头3，注药管4的侧壁上设有两端开口的针状刺头5和单向进气阀6，且针状刺头通过单向进气阀与注药管连通；注药管4的后部连接注射腔7的前部，注射腔内设有活塞8，活塞8通过活塞杆10与推手15连接，活塞杆10上设有弹簧9，弹簧与调节螺母11(控制注射量)相连，推手15通过固定螺母12与活塞杆10固定连接，推手15与固定螺母12连接的杆体上设有相对位置的钩环13和手柄14，方便着力。
实施例2、奶牛的布鲁氏菌病免疫
使用布鲁氏菌病活疫苗A19(购自中牧股份有限公司，批号1602001)对奶牛按下述方法进行免疫
免疫组设定：设四个试验组，A组(点眼组)、B组(口腔喷注组)、C组(肌肉注射组)、D组(阴道免疫组)，每组各20头奶牛。设一个阴性对照组：四种免疫方式各5头，共20头，使用生理盐水替代疫苗作为阴性对照。
免疫剂量：所有途径的疫苗免疫剂量均为疫苗使用剂量一头份(600亿)，1mL/头份。
免疫方法：
1.点眼方法：按常规方法进行。即用无针头的注射器在奶牛眼部滴注一头份疫苗。
2.口腔喷注方法：按常规方法进行。即用无针头的注射器在奶牛口腔内喷注一头份疫苗。
3.阴道免疫方法：用实施例1的阴道喷注器在奶牛阴道口内10cm免疫一头份疫苗，具体免疫方法如下：
先用调节螺母调节好推注的疫苗剂量1ml,然后将稀释好的疫苗瓶倒插入针状刺头，准备完成后,右手食指勾住钩环,中指以下勾住手柄,手掌推动活塞杆,使活塞在注射腔内向前移动,将药液通过注药管到达一次性套管保护的针头喷注到母牛的阴道内，当一次推药后,受弹簧的作用推手自动回位,在回位的同时,又在注药腔内吸入定量的药液,待下次喷注。免疫一次更换一个可拆卸套管
试验过程：按照上述免疫方式对各组奶牛进行免疫，于免疫后的7天、15天、30天、60天、90天对奶牛进行采血，离心取血清，使用微量试管凝集试验测定效价，实验结果如图2和表1所示：
表1
由上图2可知阴道免疫组相对于点眼和口腔喷注组的抗体效价上升较快且比较均匀，相对于注射组来讲奶牛抗体在90天的时候基本上消失，抗体存在时间较注射免疫短。
因此，可以将布鲁氏菌病疫苗株、奶牛阴道免疫专用阴道喷注器以及本发明所述阴道免疫方法作为试剂盒组分。

Claims (10)

1.一种用于布鲁氏菌病疫苗免疫动物的试剂盒，其包括布鲁氏菌病活疫苗和阴道喷注器；
所述阴道喷注器包括喷注器、针头和可拆卸套管；所述针头与所述喷注器的注药管前部可拆卸连接，所述可拆卸套管套设于所述针头上，且所述可拆卸套管通过其端部设置的软塞与所述针头的尖端部配合。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述套管近针头端为圆头。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述软塞为梯形软塞。
4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述针头的长为5-10cm。
5.根据权利要求1-4中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述喷注器包括依次连接的注药管、注射腔、活塞、活塞杆和推手；
所述注药管的侧壁上设有两端开口的针状刺头和单向进气阀，且所述针状刺头通过单向进气阀与所述注药管连通，注药管的后部连接注射腔的前部；
所述注射腔内设有活塞，所述活塞通过活塞杆与所述推手连接，所述活塞杆上设有弹簧，所述弹簧上设有调节螺母，所述推手通过固定螺母与所述活塞杆固定连接，所述推手与所述固定螺母连接的杆体上设有相对位置的钩环和手柄。
6.根据权利要求1-5中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括记载有免疫方式的可读载体；所述免疫方式为动物阴道免疫，且免疫的深度为动物阴道口内5-10cm处。
7.根据权利要求1-6中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述布鲁氏菌病活疫苗为布鲁氏菌病活疫苗A19。
8.根据权利要求1-7中任一所述的试剂盒，其特征在于：
所述动物为家畜；
或所述动物为家畜，所述家畜为奶牛；
或所述动物为家畜，所述家畜为奶牛，所述免疫的深度为动物阴道口内5-10cm。
9.权利要求1-8中任一所述的试剂盒中的所述布鲁氏菌病活疫苗和所述阴道喷注器在布鲁氏菌病疫苗免疫动物中的应用。
10.权利要求1-8中任一所述的试剂盒中的所述阴道喷注器。
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