CN107231808A - 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用 - Google Patents

使植物的生物质增加的新基因及对其的利用 Download PDF

Info

Publication number
CN107231808A
CN107231808A CN201580055075.2A CN201580055075A CN107231808A CN 107231808 A CN107231808 A CN 107231808A CN 201580055075 A CN201580055075 A CN 201580055075A CN 107231808 A CN107231808 A CN 107231808A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ser
pro
ala
xaa
thr
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201580055075.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107231808B (zh
Inventor
中野雄司
浅见忠男
宫地朋子
山上步美
石川典子
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Original Assignee
Japan Tobacco Inc
RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Japan Tobacco Inc, RIKEN Institute of Physical and Chemical Research filed Critical Japan Tobacco Inc
Priority to CN202110189952.2A priority Critical patent/CN112980872A/zh
Publication of CN107231808A publication Critical patent/CN107231808A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107231808B publication Critical patent/CN107231808B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8201Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation
    • C12N15/8209Selection, visualisation of transformants, reporter constructs, e.g. antibiotic resistance markers
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8216Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
    • C12N15/8222Developmentally regulated expression systems, tissue, organ specific, temporal or spatial regulation
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/04Plant cells or tissues
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C12N5/12Fused cells, e.g. hybridomas
    • C12N5/14Plant cells
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/13Plant traits
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/146Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明的目的在于,对使植物的生物质有效地增加的新基因进行鉴定,并且提供该基因及利用该基因的技术。本发明提供一种编码蛋白质的核酸及其利用技术,所述蛋白质包含序列号1所示的氨基酸序列、以及与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。

Description

使植物的生物质增加的新基因及对其的利用
技术领域
本发明涉及使植物的生物质增加的新基因,更详细而言,涉及导入了该基因的植物、使用该基因使植物的生物质增加的方法、以及使用该基因制备增加了生物质的植物的方法等。
背景技术
生物质通常被理解为以物质的量(质量)的形式表示特定时刻某个空间中存在的生物(bio)的量的概念。生物质在日语中有时使用“生物体量”或“生物量”这样的用语,在生态学中也被称为“现存量(standing crop)”。生物质的数值化通常以质量或能量来进行,也以每单位面积的相应生物的干重来表示。在多数情况下植物在生物质方面被利用,增加植物的生物质不仅提供生物燃料、可再生能源,而且从使农作物的产量增高的观点考虑对稳定食物供给也是有用的。
关于植物生物质的增加,为了开发在工业上有用的植物新品种,以往应用了使植物彼此杂交并挑选后代的杂交育种法、对植物诱发突变的突变育种法等。另外,近年来也开发了将有用基因导入植物并使其功能表达的基因重组植物。现状是,虽然在这样的新品种的开发中,累积能够赋予优异性质的基因的方法是有效的,但仍希望进一步提高作物的生产性,可利用的基因种类仍然少,特别是希望能够对与高产性状等生物质的增加相关的基因进行鉴定。
在促进植物的繁殖中,多数情况下植物激素会造成影响,已知其中之一为油菜素类固醇。油菜素类固醇是一组具有甾体骨架的化合物,代表性的油菜素类固醇有油菜素内酯。关于植物的繁殖,油菜素类固醇具有以下作用:(i)促进茎、叶及根的伸长生长、(ii)促进细胞分裂、(iii)促进从叶肉细胞向导管或管胞的分化、(iv)促进乙烯合成、(v)促进种子的发芽、以及(vi)赋予对环境胁迫的耐性等。尝试进行了利用这样的油菜素类固醇的生理活性,将油菜素类固醇生物合成基因导入稻中,使其产量增加(非专利文献1)。但是,该效果并不一定足够。另外,虽然鉴定了若干与油菜素类固醇的合成、信息传递相关的基因,但尚未对充分实现植物的生物质增加的基因进行鉴定。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1:Chuan-yin Wu et al.The Plant Cell,2008,20(8):2130-2145
发明的内容
发明要解决的课题
如上所述,对使植物的生物质增加的基因、特别是使种子产量提高的基因的探索尚不充分。因此,强烈地要求发现有效增加植物的生物质的新基因,并开发利用该基因的技术,例如,开发利用该基因使生物质增加的植物体等。
本发明是鉴于上述问题而完成的,其目的在于鉴定有效增加植物的生物质的新基因,同时提供该基因及利用该基因的技术。
解决课题的方法
本发明人等将在作为油菜素类固醇生物合成抑制剂的芸苔素唑(brassinazole)(Brz)的存在下、且在暗处发芽的胚轴形态作为选择基准,尝试进行了拟南芥(Arabidopsisthaliana)突变体的筛选及相关基因的分离。具体而言,使用基于FOX追寻系统(huntingsystem)(全长cDNA过表达基因追寻系统)的方法进行突变体的筛选,研究了相关基因。其结果是发现了芸苔素唑耐性极强的突变体,在进一步进行基因分析时发现bil7(Brz-insensitive-long-hypocotyl 7)基因与该突变相关。
本发明人等制备了表达bil7基因的构建体,并将其导入植物,制备了过表达该基因的转化体。然后,在对该转化体的形态进行研究时发现,与野生体相比,在花序长度等各个方面促进了繁殖。基于这些见解,本发明人等完成了本发明。
本发明优选通过以下所述的方式进行,但并不限定于此。
[方式1]
一种导入了编码蛋白质的核酸的植物,其中,
该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。
[方式2]
根据方式1的植物,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
[方式3]
根据方式1或2的植物,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
[方式4]
根据方式1~3中的任一种植物,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
[方式5]
一种使植物的生物质增加的方法,该方法包括向植物导入编码蛋白质的核酸的工序,其中,
该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。
[方式6]
根据方式5的方法,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
[方式7]
根据方式5或6的方法,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
[方式8]
根据方式5~7中的任一方法,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
[方式9]
一种增加了生物质的植物的制备方法,该方法包括向植物导入编码蛋白质的核酸的工序,其中,
该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。
[方式10]
根据方式9的方法,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
[方式11]
根据方式9或10的方法,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
[方式12]
根据方式9~11中的任一方法,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
[方式13]
一种包含编码蛋白质的核酸及启动子的构建体,其中,
该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。
[方式14]
根据方式13的构建体,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
[方式15]
根据方式13或14的构建体,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
[方式16]
一种载体,其包含方式13~15中的任一构建体。
[方式17]
一种宿主细胞,其包含方式16的载体。
[方式18]
一种植物,其导入了方式17的载体。
[方式19]
根据方式18的植物,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
[方式20]
一种增加了生物质的植物的筛选方法,该方法包括:
(1)在受试植物及野生型植物中,对蛋白质或编码该蛋白质的核酸的表达量进行测定的工序,该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性,
(2)对由工序(1)得到的表达量进行比较的工序,以及
(3)选择比野生型植物中的表达量显示出更高表达量的受试植物的工序。
[方式21]
根据方式20的方法,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
[方式22]
根据方式20或21的方法,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
[方式23]
根据方式20~22中的任一方法,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
[方式24]
一种对增加了生物质的植物进行判定的方法,该方法包括:
(1)在受试植物及野生型植物中,对蛋白质或编码该蛋白质的核酸的表达量进行测定的工序,该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性,
(2)对由工序(1)得到的表达量进行比较的工序,以及
(3)确认受试植物中的表达量高于野生型植物中的表达量的工序。
[方式25]
根据方式24的方法,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
[方式26]
根据方式24或25的方法,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
[方式27]
根据方式24~26中的任一方法,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
发明的效果
根据本发明,能够有效地使植物的生物质增加。另外,通过使用本发明,可以提供有效地增加了生物质的植物及其制备方法,还可以提供对于增加了生物质的植物的筛选有用的方法、以及使植物的生物质增加的物质的筛选方法。
附图说明
图1是示出在暗条件下bil7-1D显示出芸苔素唑(Brz)耐性的图。根据图1可知,bil7-1D在暗处发芽中显示出Brz耐性。A表示暗处第7天的Brz 0、0.3、1、3μM条件下的胚轴伸长的情况。B表示暗处第7天的Brz 0、0.3、1、3μM条件下的胚轴的伸长长度。C表示暗处第7天的Brz 0、0.3、1、3μM条件下的胚轴的伸长率。比例尺=3mm、误差棒=S.D.、n=30、***:P<0.001、相对于Brz 0μM的Student t检验。
图2是示出bil7-1D的形态学特征的图。根据图2可知,bil7-1D显示出促进繁殖的形态。A表示第60天的植物的情况(比例尺=10cm)。B表示第40天的植物体的莲座叶(rosette leaf)的形态(比例尺=1cm)。C表示第70天的植物体的花葶长度(n=12)。D表示第70天的植物体的花葶数(n=12)。E表示第70天的植物体的二次花葶数(n=12)。误差棒=S.D.、***:P<0.001、相对于WT的Student t检验。
图3是示出bil7-1D的花瓣、长角果(silique)及种子的形态学特征的图。根据图3可知,bil7-1D的种子重量增加。A表示bil7-1D的正常开花(左)和异常开花(右)(比例尺=1mm)。B表示bil7-1D的正常开花的长角果(左)和异常开花的长角果(右)(比例尺=5mm)。C表示野生型的种子(左)和bil7-1D的种子(右)(比例尺=0.5mm)。D表示第70天的植物体的花数(n=12)。E表示第70天的植物体的正常长角果数(n=12)。F表示每1个长角果的种子数(n=12)。G表示100粒种子的重量(n=5)。误差棒=S.D.、*:P<0.1、**:P<0.01、***:P<0.001、相对于WT的Student t检验。
图4是示出bil7-1D的花葶伸长期间及开花期间的图。A表示开花期的莲座叶的片数(n=5)。B表示至开花所需的天数(n=5)。C表示花葶长度的经时变化及开花期间(n=24)。误差棒=S.D.、*:P<0.1、***:P<0.001、相对于WT的Student t检验。
图5是示出暗处第7天的bil7-1D中的BIL7候选基因的表达量的图。根据图5可知,能够确认在bil7-1D中BIL7候选基因高表达。
图6是示出暗条件下的BIL7高表达转化体(BIL7-OX)及BIL7表达抑制转化体(BIL7-RNAi)的Brz耐性及BIL7表达量的图。根据图6可知,BIL7表达量越高的品系在暗处Brz条件下的发芽中越显示出胚轴伸长。A表示暗处第7天的Brz 3μM条件下的胚轴(比例尺=3mm)。B表示暗处第7天的Brz3μM条件下的胚轴长度(误差棒=S.D.、n=50、***:P<0.001、相对于WT的Student t检验)。C表示第27天的植物体的各品系的BIL7表达量(误差棒=S.D.)。WT:野生型、BIL7-OX1、2:35S::BIL7过表达者(overexpressor)1、2、BIL7-RNAi:BIL7-RNAi抑制者(suppressor)。
图7是示出BIL7-OX及BIL7-RNAi的形态学特征的图。根据图7可知,BIL7表达量越高的品系在成熟时越显示出花序伸长形态。A表示第63天的植物的情况(比例尺=10cm)。B表示第86天的植物体的花序长度(n=10、误差棒=S.D.、*:P<0.1、***:P<0.001、相对于WT的Student t检验)。WT:野生型、BIL7-OX1、2:35S::BIL7过表达者1、2、BIL7-RNAi:BIL7-RNAi抑制者。
图8是示出BIL7-OX及BIL7-RNAi的形态学特征的图。根据图8可知,BIL7-OX显示出二次花序数及种子重量增加的倾向。A表示第72天的植物体的莲座叶的形态(比例尺=5cm)。B表示各品系的种子(比例尺=1mm)。C表示第86天的植物体的花序数(n=10)。D表示第86天的植物体的二次花序长度(n=10)。E表示第86天的植物体的正常长角果数(n=10)。F表示100粒种子的重量(n=5)。误差棒=S.D.、*:P<0.1、**:P<0.01、***:P<0.001、相对于WT的Student t检验、WT:野生型、BIL7-OX1、2:35S::BIL7过表达者1、2、BIL7-RNAi:BIL7-RNAi抑制者。
图9是示出OsBIL7高表达转化体(OsBIL7-OX)中的生物质增加的图。A表示T1的结果。根据A可知,在使稻中的BIL7同源基因OsBIL7高表达化的稻-OsBIL7-OX株(T1)中,能够确认每1株植物体的总重量、分蘖数、稻谷数、结实种子数(150%)的增加。B表示T2的结果。根据B可知,在使稻中的BIL7同源基因OsBIL7高表达化的稻-OsBIL7-OX株(T2)中,能够确认每1株的分蘖数、稻谷数、结实种子数(140%)的增加。
图10是示出OsBIL7稻转化体移植到盆中17天后的植物姿态的图。在稻(品种:Yukihikari)中,可以观察到转化后的OsBIL7重组体(左)比对照用载体的重组体(右)略微生长茂盛的情况。
图11是示出OsBIL7稻转化体的成熟期的植物姿态的图。在稻(品种:Yukihikari)中,可以观察到转化后的OsBIL7重组体(左)比对照用载体的重组体(右)生长茂盛的情况。
图12是示出BIL7稻转化体移植到盆中17天后的植物姿态的图。在稻(品种:Yukihikari)中,可以观察到转化后的BIL7重组体(左)比对照用载体的重组体(右)生长茂盛的情况。
图13是示出BIL7稻转化体的成熟期的植物姿态的图。在稻(品种:Yukihikari)中,可以观察到转化后的BIL7重组体(右)比对照用载体的重组体(左)生长茂盛的情况。
具体实施方式
(1)核酸及蛋白质
在本发明中,使用bil7(Brz不敏感性长胚轴7,Brz-insensitive-long-hypocotyl7)基因作为有助于植物生物质的增加的核酸。bil7基因是与油菜素类固醇信号转导相关的基因,其是从在作为油菜素类固醇生物合成抑制剂的芸苔素唑(Brz)的存在下也能够观察到胚轴徒长的突变体中发现的,能够在各种植物中见到。bil7基因的核苷酸序列及该基因所编码的蛋白质(即,BIL7蛋白质)的氨基酸序列随各种植物而有所不同,但本发明的蛋白质具有下述序列号1所示的氨基酸序列的共同基序。
序列号1:
Ala-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-Ala-Ser-X1-X2-X3-Ser-X4-X5-X6-Ser-X7-X8-X9-X10-Pro-X11-Gly-Pro-Tyr-Ala-X12-Glu-X13-X14-X15-Val-X16-Pro-Pro-Val-Phe-Ser-X17-X18-X19-Thr-X20-Pro-Ser-X21-Ala-Pro-X22-Thr-Pro-Pro-X23-Pro-Ser-Ser-Pro-X24-Val-Pro-X25-Ala-X26-Pro-X27-Ser-Pro-X28-Ser-Pro
(式中,X1表示Phe或Tyr,X2表示Phe、Leu、Thr或Ala,X3表示Gln、Pro、His或Asn,X4表示Glu、Gly、Asp、Ala或Met,X5表示Pro、Gly、Leu或Ala,X6表示Pro、Ala、Thr或Ser,X7表示Ala、Ile、Val、Ser、或Thr,X8表示Thr、Val、Ser或Ala,X9表示Gln或His,X10表示Ser或Thr,X11表示15~30个氨基酸残基,X12表示His或Asn,X13表示Thr或Pro,X14表示Gln或Ala,X15表示Leu或Pro,X16表示Ser或Thr,X17表示Thr或Ala,X18表示Tyr或Phe,X19表示Thr、Ile或Pro,X20表示Glu或Ala,X21表示Ser或Thr,X22表示Ile、Val、Tyr或Phe,X23表示3~15个氨基酸残基,X24表示Glu或Asp,X25表示Phe或Tyr,X26表示20~50个氨基酸残基,X27表示Gly、Glu或Asp,X28表示5或6个氨基酸残基。)
在上述氨基酸序列中,X11优选为17~29个氨基酸残基,更优选为20~26个氨基酸残基,X23优选为3~12个氨基酸残基,更优选为8~12个氨基酸残基,X26优选为23~49个氨基酸残基,更优选为23~30个氨基酸残基,X28优选为5个氨基酸残基。
作为具有包含上述共同基序的BIL7蛋白质的植物,没有特别限定,可以列举例如:拟南芥(Arabidopsis thaliana)、大豆(Glycine max)、稻(Oryza sativa)、玉米(Zeamays)、萝卜(Raphanus sativus)、杨(Populus trichocarpa)、葡萄(Vitis vinifera)、小立碗藓(Physcomitrella patens)等。各植物的编码BIL7蛋白质的mRNA(及cDNA)的核苷酸序列及BIL7蛋白质的氨基酸序列已经鉴定,如下表所述注册了Genbank收录号。
表1
另外,在具有上述共同基序的BIL7蛋白质中包含各植物的BIL7蛋白质的同源物(homolog)。例如,在拟南芥BIL7中存在3种同源物蛋白质,对于其mRNA(及cDNA)的核苷酸序列及氨基酸序列,如下表所述注册了Genbank收录号。
表2
另外,本发明的蛋白质的特征在于,除了包含上述共同基序以外,还包含以拟南芥或稻的BIL7蛋白质作为基准、与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列。在本发明中,上述共同基序(即,序列号1所示的氨基酸序列)包含在与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列中(换言之,上述共同基序(即,序列号1所示的氨基酸序列)作为与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列的一部分而包含(存在))。
在本说明书中,氨基酸序列的同一性是指成为对象的2个蛋白质之间的氨基酸序列的同一性,其通过氨基酸残基的比例(%)来表示,所述氨基酸残基的比例是在使用该技术领域中公知的数学算法而形成的氨基酸序列的最优排列中一致的氨基酸残基的比例。氨基酸序列的同一性可以通过目测及数学计算来确定,可以使用本领域技术人员公知的同源性检索程序(例如,BLAST、FASTA)、序列排列程序(例如,ClustalW))或遗传信息处理软件(例如,GENETYX[注册商标])等来计算。具体而言,本说明书中的氨基酸序列的同一性可以使用DDBJ(DNA Data Bank of Japan)的网站上公开的系统分析程序ClustalW(http://clustalw.ddbj.nig.ac.jp/index.php?lang=ja)在初始设定的条件(Version 2.1、Alignment type:slow、DNA Weight Matrix:Gonnet、GAP OPEN:10、GAP EXTENSION:0.1)下求出。
本发明的蛋白质可以包含与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上、30%以上、40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上、98%以上或99%以上的同一性的氨基酸序列。
拟南芥的BIL7蛋白质与其同源物之间的同一性分别为41%(同源物1)、43%(同源物2)及28%(同源物3)。因此,作为优选的一个方式,本发明的蛋白质包含与序列号7所示的氨基酸序列具有25%以上、30%以上或40%以上的同一性的氨基酸序列。拟南芥的BIL7蛋白质与大豆、稻及玉米的BIL7蛋白质之间的同一性分别为44%(大豆BIL7)、41%(稻BIL7)及40%(玉米BIL7)。因此,作为优选的一个方式,本发明的蛋白质包含与序列号7所示的氨基酸序列具有40%以上的同一性的氨基酸序列。稻的BIL7蛋白质与大豆及玉米的BIL7蛋白质之间的同一性分别为42%(大豆BIL7)及85%(玉米BIL7)。因此,作为优选的一个方式,本发明的蛋白质包含与序列号11所示的氨基酸序列具有40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上或85%以上的同一性的氨基酸序列。
本说明书中的氨基酸序列的相似性是指成为对象的2个蛋白质之间的氨基酸序列的相似性,其通过在使用该技术领域中公知的数学算法而形成的氨基酸序列的最优排列中一致的氨基酸残基及表示相似性的氨基酸残基的比例(%)来表示。氨基酸残基的相似性可以通过物理化学性质相互类似的氨基酸残基的关系来表示,例如,在芳香族氨基酸(Phe、Tyr、Trp)、疏水性氨基酸(Asp、Glu)、脂肪族氨基酸(Ala、Leu、Ile、Val)、极性氨基酸(Asn、Gln)、碱性氨基酸(Lys、Arg、His)、酸性氨基酸(Asp、Glu)、含羟基氨基酸(Ser、Thr)、支链小的氨基酸(Gly、Ala、Ser、Thr、Met)等的组中,属于同一组的氨基酸之间可以被认为是相互类似的氨基酸残基。可以预测,显示出这样的相似性的氨基酸残基不对蛋白质的表型造成影响。氨基酸序列的相似性可以与同一性同样地通过目测及数学计算来确定,可以使用本领域技术人员公知的序列相似性检索程序(例如,BLAST、PSI-BLAST、HMMER)、遗传信息处理软件(例如,GENETYX[注册商标])等来计算。具体而言,本说明书中的氨基酸序列的相似性可以使用GENETYX[注册商标]网络版ver.11.1.3(GENETYX公司)在初始设定的条件(将Unitsize to compare设定为2)下求出蛋白质与蛋白质全局同源性。
本发明的蛋白质可以包含与序列号7或11所示的氨基酸序列具有75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、91%以上、92%以上、93%以上、94%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上或99%以上的相似性的氨基酸序列。
拟南芥的BIL7蛋白质与大豆、稻及玉米的BIL7蛋白质之间的相似性分别为76%(大豆BIL7)、76%(稻BIL7)及75%(玉米BIL7)。因此,作为优选的一个方式,本发明的蛋白质包含与序列号7所示的氨基酸序列具有75%以上的相似性的氨基酸序列。稻的BIL7蛋白质与大豆及玉米的BIL7蛋白质之间的相似性分别为83%(大豆BIL7)及97%(玉米BIL7)。因此,作为优选的一个方式,本发明的蛋白质包含与序列号11所示的氨基酸序列具有75%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、97%以上的相似性的氨基酸序列。
本发明的蛋白质的特征在于,包含上述共同基序,且包含与序列号7或11所示的氨基酸序列具有给定的同一性或相似性的氨基酸序列,并且还具有使植物的生物质增加的活性。
在本说明书中,植物的生物质是指植物个体的整体、一部分、个别器官或其组合的量。作为植物个体的整体、一部分或个别器官,可以列举例如:整体、地上部分、根、茎、叶、果实、种子、胚、胚珠、子房、苗端(shoot apex)、花药、花粉或穗等。其中,优选为果实、种子、穗、根、茎、叶或花药。另外,作为量,可以列举例如:数量、大小、长度、宽度、重量、面积或体积等。因此,作为生物质的例子,可以列举:整体重量、地上部分重量(例如,地上部分干重)、产量、茎径、茎数、秆(culm)长、株高、叶面积、叶数、旗叶长度、叶片长度、叶片宽度、稻谷数、稻谷重量(例如,1000粒稻谷重量、全部稻谷重量)、种子数、分蘖数、穗数、单穗粒数、单穗结实粒数、结实率、穗长、最大穗长、单穗重或总穗重等,但并不限定于此。另外,“增加”可以是上述例示出的植物生物质中的任一者单独增加,或是多者组合增加。
对于使植物的生物质增加的活性而言,例如,可以使用对照(亲本植株、非转化体、野生型等)的生物质作为增加的指标,通过在植物的成熟体中与该对照比较来进行评价。在通过与对照的比较能够观察到增加的情况下,可以判定具有使植物的生物质增加的活性,在能够将该生物质数值化时,在比较数值的基础上,例如在能够观察到1%以上、3%以上、5%以上、10%以上、15%以上、20%以上、25%以上、30%以上、40%以上、50%以上、60%以上或70%以上的增加的情况下,可以判定具有使植物的生物质增加的活性。
在本发明中,序列号1所示的氨基酸序列可以为下述序列号2所示的氨基酸序列。作为具有包含序列号2所示的氨基酸序列作为共同基序的蛋白质的植物,可以列举例如:拟南芥、大豆、稻、玉米等。另外,这些植物的BIL7蛋白质的同源物(例如,拟南芥BIL7的同源物蛋白质)也包含于具有序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质中。
序列号2:
Ala-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-Ala-Ser-Phe-X29-X30-Ser-X31-X32-X33-Ser-X34-X35-X36-X37-Pro-X38-Ser-X39-X40-X41-X42-Gly-Pro-Tyr-Ala-X43-Glu-Thr-Gln-X44-Val-X45-Pro-Pro-Val-Phe-Ser-X46-X47-X48-Thr-Glu-Pro-Ser-X49-Ala-Pro-X50-Thr-Pro-Pro-X51-Pro-Ser-Ser-Pro-X52-Val-Pro-X53-Ala-X54-Pro-X55-Ser-Pro-X56-Leu-X57-Ser-Pro
(式中,X29表示Phe、Leu或Thr,X30表示Gln、His、Pro或Asn,X31表示Glu、Gly、Asp或Ala,X32表示Pro、Gly或Leu,X33表示Pro、Ala、Thr或Ser,X34表示Ala、Val、Ile或Thr,X35表示Thr、Ala、Val或Ser,X36表示Gln或His,X37表示Ser或Thr,X38表示10~25个氨基酸残基,X39表示Ile、Val、Ala或Met,X40表示Phe或Tyr,X41表示Ala或Thr,X42表示Ile、Val或Thr,X43表示His或Asn,X44表示Leu或Pro,X45表示Ser或Thr,X46表示Thr或Ala,X47表示Tyr或Phe,X48表示Thr或Ile,X49表示Ser或Thr,X50表示Ile、Phe或Tyr,X51表示3~15个氨基酸残基,X52表示Glu或Asp,X53表示Phe或Tyr,X54表示20~35个氨基酸残基,X55表示Gly、Glu或Asp,X56表示3~5个氨基酸残基,X57表示Ile或Arg。)
在上述氨基酸序列中,X38优选为12~21个氨基酸残基,更优选为15~21个氨基酸残基,X51优选为3~12个氨基酸残基,更优选为8~12个氨基酸残基,X54优选为23~35个氨基酸残基,更优选为23~30个氨基酸残基,X56优选为3或4个氨基酸残基,更优选为3个氨基酸残基。
另外,本发明的蛋白质可以包含下述序列号3所示的氨基酸序列。序列号3所示的氨基酸序列中包含上述序列号1或2所示的氨基酸序列(换言之,序列号1或2所示的氨基酸序列作为序列号3所示的氨基酸序列的一部分而包含(存在))。另外,与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列中包含序列号3所示的氨基酸序列(换言之,序列号3所示的氨基酸序列作为与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列的一部分而包含(存在))。作为包含序列号3所示的氨基酸序列作为共同基序的蛋白质的植物,可以列举例如:拟南芥、稻等。
序列号3:
Met-X58-Ser-Gly-X59-Asn-X60-X61-Asp-Thr-X62-Asn-Ala-Ala-Ala-X63-Ala-Ile-X64-X65-X66-X67-X68-Arg-X69-Arg-Lys-Trp-X70-X71-X72-X73-Ser-X74-X75-X76-Cys-Phe-Gly-Ser-X77-X78-X79-X80-X81-Arg-Ile-X82-X83-X84-Val-Leu-Val-Pro-Glu-Pro-X85-Pro-Phe-X86-Ala-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-Ala-Ser-Phe-X87-Gln-Ser-X88-X89-X90-Ser-X91-X92-Gln-Ser-Pro-Val-Gly-X93-X94-Ser-Phe-Ser-Pro-Leu-X95-X96-Asn-X97-Pro-Ser-Ile-Phe-Ala-Ile-Gly-Pro-Tyr-Ala-His-Glu-Thr-Gln-Leu-Val-Ser-Pro-Pro-Val-Phe-Ser-X98-X99-Thr-Thr-Glu-Pro-Ser-X100-Ala-Pro-X101-Thr-Pro-Pro-X102-Ser-X103-X104-Leu-Thr-Thr-X105-Pro-Ser-Ser-Pro-Glu-Val-Pro-X106-Ala-X107-Leu-X108-X109-Ser-X110-Glu-X111-Gln-X112-Tyr-Gln-X113-X114-Pro-X115-Ser-Pro-X116-Gly-X117-Leu-Ile-Ser-Pro-Ser-X118-Ser-Gly-X119-X120-Ser-Pro-Phe-Pro-Asp-X121-Ser-X122-Phe-Pro-X123-Phe-X124-Val-X125-X126-Pro-Pro-Lys-X127-Leu-X128-Gly-X129-His-X130-Val-Ser-Phe-X131-Leu-X132-X133-X134-X135-Val-X136-Arg-Cys-X137-X138-X139-Lys-X140-Pro-X141-X142-Ser-X143-Asp-X144-Ser-Leu-X145-X146-X147-Lys-Glu-Phe-X148-Phe-X149-Val-X150-X151-X152-X153-X154-Ala-X155-X156-Lys-X157-Trp-Ser-Phe-Phe-Pro-Val-X158-Gln-X159-Gly
(式中,X58表示Arg或Gln,X59表示3~10个氨基酸残基,X60表示Val或Ser,X61表示Phe或Val,X62表示Ile或Val,X63表示Ser或Val,X64表示Ala或Val,X65表示Ser或Thr,X66表示Ser或Ala,X67表示Asp或Glu,X68表示Asp或Ser,X69表示5~10个氨基酸残基,X70表示Trp或Ala,X71表示Asn或Asp,X72表示Arg或Trp,X73表示Trp或Leu,X74表示Leu或Val,X75表示Leu或Tyr,X76表示Lys或Phe,X77表示Ser或Gln,X78表示Arg或Lys,X79表示Gln或Asn,X80表示Arg或Gly,X81表示Lys或Arg,X82表示Gly或Ser,X83表示Asn或His,X84表示Ser或Ala,X85表示20~25个氨基酸残基,X86表示Ile或Val,X87表示Phe或Leu,X88表示Glu或Gly,X89表示Pro或Gly,X90表示Pro或Ala,X91表示Ala或Ile,X92表示Thr或Val,X93表示Ile或Ala,X94表示Leu或Pro,X95表示Pro或Ser,X96表示Cys或Pro,X97表示1~10个氨基酸残基,X98表示Thr或Ala,X99表示Tyr或Phe,X100表示Ser或Thr,X101表示Ile或Phe,X102表示1~5个氨基酸残基,X103表示Ile或Val,X104表示Tyr或His,X105表示0~5个氨基酸残基,X106表示Phe或Tyr,X107表示Gln或Lys,X108表示Phe或Leu,X109表示Asn或Thr,X110表示10~20个氨基酸残基,X111表示Phe或Leu,X112表示Phe或Ser,X113表示Leu或Ile,X114表示Pro或Tyr,X115表示Gly或Glu,X116表示Leu或Ile,X117表示Gln或Arg,X118表示1~5个氨基酸残基,X119表示Pro或Thr,X120表示Thr或Cys,X121表示1~10个氨基酸残基,X122表示Leu或Thr,X123表示His或Ser,X124表示Gln或Pro,X125表示Ser或Arg,X126表示Asp或Glu,X127表示Leu或Ile,X128表示3~20个氨基酸残基,X129表示10~30个氨基酸残基,X130表示1~5个氨基酸残基,X131表示Asp或Glu,X132表示Asp或Thr,X133表示Ala或Val,X134表示Asp或Glu,X135表示His或Asp,X136表示Ile或Ala,X137表示Val或Leu,X138表示Asp或Glu,X139表示Gln或Lys,X140表示3~25个氨基酸残基,X141表示Glu或Arg,X142表示Ala或Glu,X143表示Ser或Asn,X144表示5~25个氨基酸残基,X145表示Gly或Arg,X146表示Ser或Lys,X147表示Asn或Ala,X148表示Asn或Lys,X149表示5~15个氨基酸残基,X150表示Asp或Gly,X151表示Glu或Ser,X152表示His或Asp,X153表示Arg或Trp,X154表示Ser或Trp,X155表示Ser或Asn,X156表示Pro或Glu,X157表示5~15个氨基酸残基,X158表示Met或Ala,X159表示Ser或Pro。)
在上述氨基酸序列中,X59优选为4~7个氨基酸残基,X69优选为8~10个氨基酸残基,X85优选为21~22个氨基酸残基,X97优选为2~7个氨基酸残基,X102优选为2~4个氨基酸残基,X105优选为0~2个氨基酸残基,X110优选为10~17个氨基酸残基,X118优选为2~3个氨基酸残基,X121优选为3~8个氨基酸残基,X128优选为5~18个氨基酸残基,X129优选为13~28个氨基酸残基,X130优选为1~2个氨基酸残基,X140优选为5~24个氨基酸残基,X144优选为7~22个氨基酸残基,X149优选为8~11个氨基酸残基,X157优选为4~11个氨基酸残基。
另外,本发明的蛋白质可以包含下述序列号4所示的氨基酸序列。序列号4所示的氨基酸序列包含上述序列号1或2所示的氨基酸序列(换言之,序列号1或2所示的氨基酸序列作为序列号4所示的氨基酸序列的一部分而包含(存在))。另外,与序列号7或11所示的氨基酸序列具有75%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列中包含序列号4所示的氨基酸序列(换言之,序列号4所示的氨基酸序列作为与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列的一部分而包含(存在))。作为包含序列号4所示的氨基酸序列作为共同基序的蛋白质的植物,可以列举例如:拟南芥、大豆等。
序列号4:
Met-Arg-X160-Gly-Ala-Asn-Gly-X161-Asn-Asn-X162-X163-X164-Thr-Ile-Asn-Ala-Ala-Ala-X165-X166-Ile-Ala-Ser-X167-X168-X169-Arg-Leu-X170-Gln-X171-X172-Pro-X173-X174-X175-Lys-X176-X177-Trp-X178-Asn-X179-X180-Ser-X181-X182-X183-Cys-Phe-Gly-X184-X185-X186-X187-Arg-X188-Arg-Ile-Gly-X189-X190-Val-Leu-Val-Pro-Glu-X191-X192-X193-X194-X195-X196-X197-Asn-X198-Thr-X199-Ile-X200-X201-X202-X203-Phe-X204-Ala-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-Ala-Ser-Phe-X205-X206-Ser-Glu-Pro-Pro-Ser-X207-X208-Gln-Ser-Pro-X209-X210-Ile-Leu-Ser-X211-X212-Pro-X213-Ser-Ile-Phe-Ala-Ile-Gly-Pro-Tyr-Ala-His-Glu-Thr-Gln-Leu-Val-Ser-Pro-Pro-Val-Phe-Ser-Thr-X214-Thr-Thr-Glu-Pro-Ser-X215-Ala-Pro-X216-Thr-Pro-Pro-X217-Thr-Thr-Pro-Ser-Ser-Pro-Glu-Val-Pro-Phe-Ala-Gln-Leu-X218-X219-X220-Asn-X221-X222-X223-X224-X225-X226-X227-X228-X229-Phe-X230-Tyr-X231-Phe-X232-X233-Tyr-Gln-Leu-X234-Pro-Gly-Ser-Pro-X235-Gly-Gln-Leu-Ile-Ser-Pro-X236-Ser-X237-X238-X239-Ser-Pro-Phe-Pro-Asp-X240-Ser-Leu-X241-X242-X243-Phe-Gln-X244-X245-Asp-X246-Ser-X247-X248-X249-X250-Gly-X251-X252-Thr-Pro-X253-Gln-X254-X255-X256-X257-Pro-X258-X259-X260-Val-Ser-X261-X262-X263-X264-Ala-X265-X266-Val-X267-X268-Cys-Val-X269-Lys-Leu-X270-Thr-X271-X272-Pro-X273-Glu-X274-X275-Ser-Asp-X276-Glu-X277-X278-X279-His-X280-Lys-Glu-Phe-Asn-Phe-X281-X282-X283-Glu-X284-Leu-X285-X286-Asp-X287-Ala-Ser-X288-Ser-Asn-X289-Trp-Ser-Phe-Phe-Pro-X290-X291-X292-X293-Gly
(式中,X160表示0~3个氨基酸残基,X161表示0~5个氨基酸残基,X162表示Val或Thr,X163表示Phe或Leu,X164表示Asp或Glu,X165表示Ser或Thr,X166表示Ala或Val,X167表示Ser或Val,X168表示Asp或Glu,X169表示Asp或Asn,X170表示His或Asp,X171表示Ser或Pro,X172表示Ser或His,X173表示Ile或His,X174表示His或Val,X175表示Lys或Gln,X176表示Arg或Lys,X177表示Lys或Ser,X178表示Trp或Gly,X179表示Arg或Trp,X180表示Trp或Leu,X181表示Leu或Ile,X182表示Leu或Tyr,X183表示Lys或Trp,X184表示Ser或His,X185表示Ser或Arg,X186表示Arg或Lys,X187表示Gln或Asn,X188表示Lys或Gln,X189表示Asn或His,X190表示Ser或Ala,X191表示Pro或Arg,X192表示Val或Ile,X193表示Ser或Pro,X194表示Met或Ser,X195表示Ser或Gly,X196表示Ser或Thr,X197表示Ser或Asp,X198表示Ser或Ala,X199表示5~15个氨基酸残基,X200表示Thr或Ile,X201表示Thr或Pro,X202表示Leu或Phe,X203表示Pro或His,X204表示Ile或Val,X205表示Phe或Leu,X206表示Gln或His,X207表示Ala或Val,X208表示Thr或Ala,X209表示Val或Ser,X210表示Gly或Ala,X211表示Phe或Leu,X212表示Ser或Thr,X213表示1~10个氨基酸残基,X214表示Tyr或Phe,X215表示Ser或Thr,X216表示Ile或Phe,X217表示3~15个氨基酸残基,X218表示Phe或Leu,X219表示Asn或Asp,X220表示Ser或Pro,X221表示His或Asn,X222表示Gln或Lys,X223表示Thr或Asn,X224表示Gly或Ser,X225表示Ser或Glu,X226表示Tyr或Thr,X227表示Gly或Tyr,X228表示Tyr或Gln,X229表示Lys或Arg,X230表示3~7个氨基酸残基,X231表示Glu或Asp,X232表示Gln或His,X233表示Phe或Ser,X234表示Pro或His,X235表示Leu或Val,X236表示1~10个氨基酸残基,X237表示Gly或Ser,X238表示Pro或Thr,X239表示Thr或Ser,X240表示1~10个氨基酸残基,X241表示Phe或Leu,X242表示Pro或Leu,X243表示His或Asn,X244表示Val或Thr,X245表示Ser或Asp,X246表示3~10个氨基酸残基,X247表示Pro或His,X248表示Lys或Gln,X249表示Thr或Gly,X250表示Ala或Ser,X251表示Val或Ser,X252表示Thr或Leu,X253表示1~10个氨基酸残基,X254表示Lys或Ala,X255表示Ile或Ser,X256表示Val或Phe,X257表示Pro或Leu,X258表示His或Ser,X259表示Lys或His,X260表示Pro或Trp,X261表示Phe或Ile,X262表示Asp或Glu,X263表示Leu或Val,X264表示Asp或Ser,X265表示Asp或Gln,X266表示His或Glu,X267表示Ile或Phe,X268表示Arg或Asn,X269表示1~15个氨基酸残基,X270表示Arg或Lys,X271表示Thr或Asp,X272表示Phe或Ala,X273表示0~15个氨基酸残基,X274表示Ala或Thr,X275表示Ser或Pro,X276表示1~15个氨基酸残基,X277表示Ser或Arg,X278表示Met或Val,X279表示Asn或His,X280表示5~10个氨基酸残基,X281表示Gly或Asp,X282表示Thr或Asn,X283表示Asp或Ala,X284表示1~10个氨基酸残基,X285表示Thr或Val,X286表示Val或Ala,X287表示1~10个氨基酸残基,X288表示1~7个氨基酸残基,X289表示Asp或Asn,X290表示Val或Met,X291表示Met或Ile,X292表示Gln或Arg,X293表示Ser或Pro。)
在上述氨基酸序列中,X160优选为0~1个氨基酸残基,X161优选为0~3个氨基酸残基,X199优选为7~9个氨基酸残基,X213优选为4~7个氨基酸残基,X217优选为6~10个氨基酸残基,X230优选为4~5个氨基酸残基,X236优选为3~6个氨基酸残基,X240优选为3~9个氨基酸残基,X246优选为5~9个氨基酸残基,X253优选为3~7个氨基酸残基,X269优选为2~12个氨基酸残基,X273优选为0~11个氨基酸残基,X276优选为1~11个氨基酸残基,X280优选为6~10个氨基酸残基,X284优选为2~8个氨基酸残基,X287优选为4~7个氨基酸残基,X288优选为3~5个氨基酸残基。
另外,本发明的蛋白质可以包含下述序列号5所示的氨基酸序列。序列号5所示的氨基酸序列中包含上述序列号1或2所示的氨基酸序列(换言之,序列号1或2所示的氨基酸序列作为序列号5所示的氨基酸序列的一部分而包含(存在))。另外,与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列中包含序列号5所示的氨基酸序列(换言之,序列号5所示的氨基酸序列作为与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列的一部分而包含(存在))。作为包含序列号5所示的氨基酸序列作为共同基序的蛋白质的植物,可以列举例如:稻、玉米等。
序列号5:
Met-Gln-Ser-Gly-X294-X295-Met-Arg-Pro-Val-His-Asn-Ser-Val-Asp-Thr-Val-Asn-Ala-Ala-Ala-Val-Ala-Ile-Val-Thr-Ala-Glu-Ser-Arg-Thr-Gln-Pro-X296-Ala-Glu-X297-Arg-Arg-Lys-Trp-Ala-Asp-X298-Leu-Ser-Val-Tyr-Phe-Cys-Phe-Gly-Ser-Gln-Lys-Asn-Gly-Arg-X299-Arg-X300-X301-His-Ala-X302-Leu-Val-Pro-Glu-Pro-X303-Pro-X304-Arg-Thr-Asp-Ala-Pro-X305-X306-Glu-Ile-Pro-X307-His-Pro-Pro-Pro-Pro-Val-Phe-Pro-Phe-Val-Ala-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-Ala-Ser-Phe-Leu-Gln-Ser-X308-X309-X310-Ser-Ile-Val-Gln-Ser-Pro-X311-Gly-Ala-Pro-X312-Phe-Ser-Pro-Leu-Ser-Pro-Asn-Ser-X313-Ser-Pro-Thr-Gly-Pro-Pro-Ser-Ile-Phe-Ala-Ile-Gly-Pro-Tyr-Ala-His-Glu-Thr-Gln-Leu-Val-Ser-Pro-Pro-Val-Phe-Ser-Ala-Phe-Thr-Thr-Glu-Pro-Ser-Thr-Ala-Pro-Phe-Thr-Pro-Pro-Pro-Glu-Ser-Val-His-Leu-Thr-Thr-Pro-Ser-Ser-Pro-Glu-Val-Pro-Tyr-Ala-Lys-Leu-Leu-Thr-Ser-Ile-Asn-Asn-Ser-Lys-Asn-X314-Glu-X315-Gly-X316-Leu-Gln-Ser-Tyr-X317-X318-Tyr-Pro-X319-Ser-Pro-Ile-Gly-Arg-Leu-Ile-Ser-Pro-Ser-Ser-X320-Cys-Ser-Gly-Thr-X321-Ser-Pro-Phe-Pro-Asp-Pro-Glu-X322-Gln-X323-Ser-Ser-Arg-Ser-X324-X325-X326-X327-Phe-Pro-Val-Arg-Glu-Pro-Pro-Lys-Ile-Leu-Asp-Gly-Glu-Gly-X328-Ala-Thr-Gln-Lys-Leu-Ile-Pro-Arg-His-Met-Arg-Asn-Gly-Gly-Ser-Leu-Leu-Asp-Gly-X329-Ile-Ser-Ala-Ala-Val-Pro-Val-Val-Asp-Phe-Ser-Ala-Arg-Leu-Gln-X330-Asn-X331-His-Ala-Met-Asp-His-Arg-Val-Ser-Phe-Glu-Leu-Thr-Val-Glu-Asp-Val-Ala-Arg-Cys-Leu-Glu-Lys-Lys-Thr-X332-Ile-X333-Gly-X334-Ser-X335-X336-Ala-Ser-Phe-X337-Leu-X338-Pro-Thr-Gly-X339-Gly-Asp-X340-His-X341-Arg-Glu-Ser-Asn-X342-X343-Arg-Ala-Gly-Leu-X344-Val-Asp-Glu-X345-Tyr-His-Asp-Leu-Pro-Glu-Lys-Ala-Arg-Arg-Ser-Leu-Ser-Leu-Arg-X346-Ala-Lys-Glu-Phe-X347-Phe-Asn-Asn-Val-Asp-X348-X349-Ser-Val-Glu-Pro-Ser-Val-Gly-Ser-Asp-Trp-Trp-Ala-Asn-Glu-Lys-Val-Ala-Gly-X350-Thr-X351-Glu-Pro-X352-Lys-X353-Trp-Ser-Phe-X354-Pro-Val-X355-Gln-Pro-Gly-Val-Ser
(式中,X294表示Ser或Gly,X295表示Glu或Asp,X296表示Gln或Pro,X297表示Pro或Gln,X298表示Trp或Arg,X299表示0~5个氨基酸残基,X300表示Ile或Val,X301表示Ser或Asn,X302表示Val或Ala,X303表示Leu或Ala,X304表示Pro或Gln,X305表示Met或Ala,X306表示Pro或Ala,X307表示Ile或Asn,X308表示Gly或Glu,X309表示Gly或Pro,X310表示Ala或Thr,X311表示0~5个氨基酸残基,X312表示Ser或Ala,X313表示Pro或Gln,X314表示Ala或Gly,X315表示Thr或Ala,X316表示0~5个氨基酸残基,X317表示Gln或Pro,X318表示Ile或Asn,X319表示Glu或Asp,X320表示Ala或Gly,X321表示Cys或Ser,X322表示Val或Met,X323表示Thr或Ala,X324表示Thr或Ala,X325表示Phe或Leu,X326表示Pro或Arg,X327表示Ser或Leu,X328表示Ile或Val,X329表示His或Gln,X330表示Asn或Pro,X331表示Asp或Glu,X332表示Asn或Ala,X333表示Asn或Ser,X334表示Glu或Asp,X335表示Ala或Gly,X336表示Ala或Thr,X337表示Arg或His,X338表示Val或Ala,X339表示Asn或Ser,X340表示0~5个氨基酸残基,X341表示Pro或His,X342表示Asp或Glu,X343表示Thr或Ala,X344表示Cys或Tyr,X345表示Thr或Ser,X346表示Lys或Leu,X347表示Lys或Asn,X348表示Ala或Val,X349表示Pro或Gly,X350表示Ile或Met,X351表示Ser或Thr,X352表示Arg或Lys,X353表示Ser或Asn,X354表示Phe或His,X355表示Ala或Val。)
在上述氨基酸序列中,X299优选为0~2个氨基酸残基,X311优选为1~2个氨基酸残基,X316优选为1~2个氨基酸残基,X340优选为0~2个氨基酸残基。
在本发明中,可以使用编码上述蛋白质的核酸。在本说明书中,核酸是指由磷酸酯键连接核苷酸而形成的高分子,可以与多核苷酸及寡核苷酸这样的用语互换使用。核酸的结构没有特别限定,可以是单链和双链的任一种。核酸中包含脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)及它们的混合物(例如,DNA-RNA的杂交双链、DNA及RNA连接成单链的嵌合核酸(chimeric nucleic acid))。核酸的结构单元中主要包含腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)等嘌呤碱基及胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)、尿嘧啶(U)等嘧啶碱基,只要可以进行向对象蛋白质的翻译,也可以包含这些碱基的修饰物。本发明中使用的核酸优选为编码对象蛋白质的mRNA或cDNA。
本发明中的核酸及蛋白质只要能使植物的生物质增加即可,没有特别限定,优选源自于双子叶植物或单子叶植物。或者可以源自于小立碗藓。作为双子叶植物,可以列举例如:拟南芥、大豆、萝卜、杨、葡萄、棉、油菜、甜菜、烟草、番茄等,其中优选为拟南芥、大豆、萝卜,更优选为拟南芥、大豆,进一步优选为拟南芥。作为单子叶植物,可以列举:稻、玉米、小麦、大麦、高粱、甘蔗、洋葱等,其中优选为稻、玉米、小麦,更优选为稻、玉米。
作为本发明的蛋白质,可以利用源自各种植物的BIL7蛋白质,例如可以为源自拟南芥、大豆、稻、玉米、萝卜、杨、葡萄或小立碗藓的BIL7蛋白质(即,包含序列号7、9、11、13、15、17、19及21中任一者所示的氨基酸序列的蛋白质)。另外,本发明的蛋白质也可以利用源自各种植物的BIL7蛋白质的同源物,例如,可以使用拟南芥BIL7的同源物蛋白质(即,包含序列号23、25及27中任一者所示的氨基酸序列的蛋白质)。
另外,在本发明中,作为一个方式,在源自各种植物的BIL7蛋白质及其同源物的氨基酸序列(例如,序列号7、9、11、13、15、17、19、21、23、25及27中任一者所示的氨基酸序列)中,也包含由缺失、插入、取代或添加了1个或多个氨基酸的氨基酸序列构成、且具有使植物的生物质增加的活性的蛋白质。这里,作为多个氨基酸,例如是指2~40个、2~30个、2~20个、2~10个、2~7个、2~5个、5个、4个、3个、2个氨基酸的意思。氨基酸的缺失、插入、取代或添加可以使用该技术领域中公知的方法(例如,通过改变核酸)来进行。例如,这样的氨基酸序列优选包含序列号1所示的氨基酸序列。
向核酸导入突变可以通过Kunkel法或缺口双链体(Gapped duplex)法等、或者以此为基准的方法来进行,例如,可以使用利用了部位特异性突变诱发法的突变导入用试剂盒(例如,TransformerTM Site-Directed Mutagenesis Kit(Clontech Laboratories,Inc.)、或QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kit(Agilent Technologies)。另外,在向核酸导入突变中可以使用EMS(甲磺酸乙酯)、5-溴尿嘧啶、2-氨基嘌呤、羟胺、N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍、其它致癌性化合物这样的化学性突变剂,也可以使用X射线、α射线、β射线、γ射线、离子束等放射线或紫外线。
另外,在本发明中,作为一个方式,在源自各种植物的BIL7蛋白质及其同源物的氨基酸序列(例如,序列号7、9、11、13、15、17、19、21、23、25及27中任一者所示的氨基酸序列)中,也包含如下蛋白质,所述蛋白质具有25%以上、30%以上、40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上、99%以上的同一性、或者70%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上、99%以上的相似性,且具有使植物的生物质增加的活性。关于氨基酸序列的同一性及相似性,如上述说明所述。另外,这样的氨基酸序列优选包含序列号1所示的氨基酸序列。
作为本发明的蛋白质,在使用了源自拟南芥、大豆、稻、玉米、萝卜、杨、葡萄、或小立碗藓的BIL7蛋白质时,作为编码该蛋白质的核酸,主要使用包含序列号6、8、10、12、14、16、18及20中任一者所示的核苷酸序列的核酸。另外,在使用了拟南芥BIL7的3种同源物蛋白质时,作为编码该蛋白质的核酸,主要使用包含序列号22、24及26中任一者所示的核苷酸序列的核酸。
作为本发明的一个方式,还包括如下所述的核酸,所述核酸对于包含序列号6、8、10、12、14、16、18、20、22、24及26中任一者所示的核苷酸序列的核酸而言,在严格条件下与由与该核苷酸序列互补的核苷酸序列构成的核酸杂交,而且编码具有使植物的生物质增加的活性的蛋白质。
这里,“严格条件下”是指以中程度或高程度在严格条件下进行杂交。具体而言,对于中程度的严格条件而言,例如,具有通常技术的本领域技术人员可以基于核酸的长度而容易地确定。基本的条件示于Sambrook等,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第3版,第6章,Cold Spring Harbor Laboratory Press,2001,包含使用例如5×SSC、0.5%SDS、1.0mM EDTA(pH8.0)的预清洗溶液、约42℃下的、约50%甲酰胺、2×~6×SSC、优选为5×~6×SSC、0.5%SDS(或约42℃下的约50%甲酰胺中的、施托克溶液(Stark solution)等其它同样的杂交溶液)的杂交条件,以及例如约50℃~68℃、0.1×~6×SSC、0.1%SDS的清洗条件。中程度严格条件优选包含约50℃、6×SSC、0.5%SDS的杂交条件(及清洗条件)。
另外,对于高严格条件而言,例如,也可以由本领域技术人员基于核酸的长度而容易地确定。通常,这样的条件被定义为含有比中程度严格条件更高的温度和/或更低的盐浓度下的杂交(例如,约0.5%SDS,约65℃、6×SSC~0.2×SSC、优选为6×SSC、更优选为2×SSC、更优选为0.2×SSC、或0.1×SSC的杂交)和/或清洗,例如,如上所述的杂交条件、以及伴随有约65℃~68℃、0.2×~0.1×SSC、0.1%SDS的清洗。在杂交及清洗的缓冲液中,可以使用SSPE(1×SSPE为0.15M NaCl、10mM NaH2PO4及1.25mM EDTA、pH7.4)代替SSC(1×SSC为0.15M NaCl及15mM柠檬酸钠),清洗在杂交结束后进行15分钟~1小时左右。
另外,也可以使用在探针中不使用放射性物质的市售的杂交试剂盒。具体而言,可以列举使用了ECL直接标记和检测系统(direct labeling&detection system)(Amersham公司制造)的杂交等。作为严格的杂交,可以列举如下条件,例如,在试剂盒中的杂交缓冲液中加入封闭试剂5%(w/v),使得NaCl为0.5M,在42℃下进行4小时,并在0.4%SDS、0.5×SSC中于55℃下进行2次20分钟的清洗,在2×SSC中于室温下进行1次5分钟的清洗。
另外,在本发明中,作为一个方式,还包括如下所述的核酸,所述核酸与序列号6、8、10、12、14、16、18、20、22、24及26中任一者所示的核苷酸序列具有70%以上、80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上、99%以上的同一性,且编码具有使植物的生物质增加的活性的蛋白质。
2个核苷酸序列的同一性可以通过目测和数学计算来确定,或者更优选通过使用计算机程序比较序列信息来完成该比较。代表性的优选计算机程序是Genetics ComputerGroup(GCG;威斯康星州麦迪逊(Madison))的Wisconsin package,10.0版程序“GAP”(Devereux,et al.,1984,Nucl.Acids Res.,12:387)。通过使用该“GAP”程序,除了进行2个核苷酸序列的比较以外,还能够进行2个氨基酸序列的比较、核苷酸序列与氨基酸序列的比较。这里,在“GAP”程序的优选的默认参数中包含:(1)关于核苷酸的(关于相同物,含有1的值,关于非相同物含有0的值)一元(unary)比较矩阵的GCG实行、和在Schwartz及Dayhoff主编的“多肽的序列及结构的图谱(Atlas of Polypeptide Sequence and Structure)”国立生物医学研究财团、353-358页、1979所记载的、Gribskov及Burgess,Nucl.Acids Res.,14:6745,1986的加权氨基酸比较矩阵;或者其它能够进行比较的比较矩阵;(2)对氨基酸的各间隙进行30的补偿并对各间隙中的各符号追加1的补偿;或者对核苷酸序列的各间隙进行50的补偿并对各间隙中的各符号追加3的补偿;(3)对末端间隙无补偿:以及(4)对长间隙没有最大补偿。对于本领域技术人员使用的其它序列比较程序而言,例如,可以使用通过美国国立医学图书馆的网站:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/bl2seq/bls.html可以使用的BLASTN程序2.2.7版、或UW-BLAST 2.0algorithm。关于UW-BLAST2.0的标准默认参数的设定,记载于以下的互联网网站:http://blast.wustl.edu。另外,BLAST algorithm使用BLOSUM62氨基酸打分矩阵,可使用的选择参数如下所述:(A)包含用于屏蔽具有较低组成复杂性的检索序列的区段(根据Wootton及Federhen的SEG程序(Computers and Chemistry,1993)来确定;也希望参照Wootton及Federhen,1996“序列数据库中的组成偏离区域的分析(Analysis of compositionally biased regions in sequence databases)”MethodsEnzymol.,266:544-71)、或者由短周期性的内部重复构成的区段(根据Claverie及States(Computers and Chemistry,1993)的XNU程序来确定)的过滤器;以及(B)用于报告对数据库序列的匹配的有统计学上意义的阈值、或E-评分(根据Karlin及Altschul,1990)的统计学模型,单纯通过偶然而发现匹配的期望概率;在源于某种匹配的有统计学上意义的差大于E-评分阈值的情况下,不报告该匹配);优选的E-评分阈值的数值为0.5,或者按优选度增加的顺序为0.25、0.1、0.05、0.01、0.001、0.0001、1e-5、1e-10、1e-15、1e-20、1e-25、1e-30、1e-40、1e-50、1e-75或1e-100。
(2)构建体
本发明提供包含上述核酸及启动子的构建体。在本说明书中,构建体是指使多个核酸连接而成的接合物,在本发明中,作为其结构单元,包含上述核酸和启动子。本发明的核酸与启动子不需要直接连接,可以隔着其它种类的核酸间接地连接。启动子优选可发挥作用地连接于本发明的核酸。“可发挥作用地连接”是指启动子能够发挥其功能地连接,即,以能够进行对象核酸的转录的方式进行连接。
启动子只要能够在植物细胞内进行对象核酸的转录即可,没有特别限定。作为这样的启动子,可以列举例如:花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus)35S启动子(CaMV35S)、各种泛素启动子、各种肌动蛋白启动子、烟草PR1a基因启动子、胭脂碱合成酶基因启动子、油菜籽蛋白(napin)基因启动子、油质蛋白基因启动子等。
另外,在本发明中,也可以使用具有在植物中部位特异性表达的功能的启动子。作为这样的启动子,可以列举:叶部特异性表达核酸的启动子(例如,稻psb0基因启动子(日本特开2010-166924))、茎部特异性表达核酸的启动子(例如,拟南芥FA6启动子(Gupta etal.2012Plant Cell Rep.31:839-850.))、根部特异性表达核酸的启动子(例如,RCc3启动子(Xu et al.1995Plant Mol Biol 27:237-248))、主要在根、茎、叶等营养器官中表达的启动子(例如,拟南芥AS启动子:非专利文献1)等。
另外,在本发明中还可以使用诱导性启动子。作为这样的启动子,可以列举例如:已知因丝状真菌/细菌/病毒的感染或入侵、低温、高温、干燥、紫外线的照射、植物生长素或油菜素类固醇这样的激素等特定化合物的散布等的外因而表达的启动子等。作为这样的启动子,可以列举例如:因丝状真菌/细菌/病毒的感染、入侵而表达的稻壳多糖酶基因的启动子(Xu et al.1996Plant Mol.Biol.30:387)、烟草的PR蛋白质基因的启动子(Ohshima etal.1990Plant Cell 2:95),因低温而诱导的稻的“lip19”基因的启动子(Aguan etal.1993Mol.Gen.Genet.240:1),因高温而诱导的稻的“hsp80”基因和“hsp72”基因的启动子(Van Breusegem et al.1994Planta 193:57)、因干燥而诱导的拟南芥的“rab16”基因的启动子(Nundy et al.1990Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:1406)、因紫外线的照射而诱导的欧芹的查耳酮合成酶基因的启动子(Schulze-Lefert et al.1989EMBO J.8:651)、厌氧条件下诱导的玉米的醇脱氢酶基因的启动子(Walker et al.1987Proc.Natl.Acad.Sci.USA84:6624)、因盐胁迫而诱导的启动子(Shinozaki,K.and Yamaguchi-Shinozaki,K.,Curr.Opin.Plant Biol.3,217-223(2000))等。
(3)载体
本发明提供包含上述构建体的载体。即,在本发明中,可以提供包含能够发挥作用地连接的启动子和本发明的核酸的载体。
载体可以通过利用通常方法将希望的核酸连接于本领域能够获得的重组用载体而简便地制备。在使用本发明的核酸使植物的生物质增加时,植物转化用载体特别有用。本发明中使用的载体只要是为了在植物细胞中达到实现本发明的目的的效果而能够使用的载体即可,没有特别限定,可以使用例如:pBI系的载体、pBluescript系的载体、pUC系的载体等。作为pBI系的载体,可以列举例如:pBI121、pBI101、pBI101.2、pBI101.3、pBI221等。从能够经由土壤杆菌向植物导入目标核酸的观点考虑,优选pBI系的载体等双元载体。另外,作为pBluescript系的载体,可以列举例如:pBluescript SK(+)、pBluescript SK(-)、pBluescript II KS(+)、pBluescript II KS(-)、pBluescript II SK(+)、pBluescript IISK(-)等。作为pUC系的载体,可以列举例如:pUC19、pUC119等。从能够将核酸直接导入植物的观点考虑,优选pBluescript系的载体、pUC系的载体。另外,还可以优选使用pGreen系列(www.pgreen.ac.uk)、pCAMBIA系列(www.cambia.org)等双元载体、pSB11(Komari et al,1996,Plant J,10:165-174)、pSB200(Komori et al,2004,Plant J,37:315-325)等超级双元载体。
另外,上述载体优选包含转录终止子序列,所述转录终止子序列包含转录产物的稳定化所需要的聚腺苷酸化部位。本领域技术人员可以适当选择转录终止子序列。
转录终止子序列只要具有作为转录终止部位的功能即可,没有特别限定,可以是公知的转录终止子序列。转录终止子序列可以根据使用的启动子来选择,例如可以使用花椰菜花叶病毒35S的转录终止区域(CaMV35S终止子)、胭脂碱合成酶基因的转录终止区域(Nos终止子)等。在上述重组表达载体中,将转录终止子序列设置于适当的位置,由此可以在导入植物细胞后防止不必要地合成长转录物的现象的发生等。
另外,在上述重组表达载体中还可以含有其它核酸区段。该其它核酸区段没有特别限定,可以列举:转化体挑选标记、增强子、用于提高翻译效率的碱基序列等。另外,上述重组表达载体还可以具有T-DNA区域。特别是在使用土壤杆菌将上述重组表达载体导入植物体的情况下,T-DNA区域能够提高基因导入的效率。
作为转化体挑选标记,例如可以使用耐药性基因。作为所述耐药性基因的具体例子,可以列举例如:对潮霉素、博来霉素、卡那霉素、庆大霉素、氯霉素等的耐药性基因(对抗生素卡那霉素或庆大霉素有耐性的新霉素磷酸转移酶基因、对潮霉素有耐性的潮霉素磷酸转移酶基因)。另外,也可以利用对除草剂膦丝菌素(phosphinothricin)有耐性的膦丝菌素乙酰转移酶基因等。由此,可以通过在含有上述抗生物质、除草剂的培养基中生长繁殖的植物体来容易地挑选转化后的植物体。
作为用于提高翻译效率的核苷酸序列,可以列举例如:源自烟草花叶病毒的omega序列。可以通过使该omega序列设置于启动子的非翻译区域(5’UTR)来提高上述融合基因的翻译效率。
另外,作为增强子,可以列举包含CaMV35S启动子内的上游侧的序列的增强子区域。这样,上述重组表达载体中可以根据其目的而包含各种核酸区段。
对重组表达载体的构建方法没有特别限定,可以按照给定的顺序将本发明的核酸、启动子、及终止子序列、以及根据需要的其它DNA区段导入适当选择的作为母体的载体。向作为母体的载体中插入核酸可以按照通常方法进行,可以使用将纯化后的核酸用适当的限制酶切断并插入适当的载体的限制酶部位或多克隆位点的方法等(例如,MolecularCloning,5.61-5.63)。
对于本领域技术人员而言,可以根据通常的基因工程技术适当地制备具有希望基因的载体。通常可以通过利用市售的各种载体而容易地制备。
(4)宿主细胞
本发明提供包含上述载体的宿主细胞(换言之,导入了本发明的核酸的宿主细胞)。
本发明的宿主细胞没有特别限定,优选为植物细胞。该植物细胞包括各种形态的植物细胞,例如:悬浮培养细胞、原生质体、植物体中的细胞等。
植物细胞没有特别限定,可以使用源自双子叶植物或源自单子叶植物的细胞。作为双子叶植物,可以列举:拟南芥、大豆、棉、油菜、甜菜、烟草、番茄、萝卜、葡萄、杨等,其中优选为拟南芥、大豆、棉、油菜、烟草、番茄,进一步优选为拟南芥、大豆、棉、油菜。作为单子叶植物,可以列举:稻、玉米、小麦、大麦、高粱、甘蔗、洋葱等,其中优选为稻、玉米、小麦、高粱,更优选为稻、玉米。
本发明的核酸可以使用源自各种植物品种的核酸,在本发明中,核酸的来源植物品种与宿主细胞(植物细胞)的来源植物品种可以相同或不同。即,本发明可以提供:导入了源自与宿主细胞(植物细胞)的植物品种相同的植物品种的核酸或包含该核酸的载体的宿主细胞(植物细胞)、以及导入了源自与宿主细胞(植物细胞)的植物品种不同的植物品种的核酸或包含该核酸的载体的宿主细胞(植物细胞)中的任一者。另外,在本发明中,在核酸的来源植物为双子叶植物的情况下,可以选择双子叶植物的宿主细胞,另外,在核酸的来源植物为单子叶植物的情况下,可以选择单子叶植物的宿主细胞。
作为在宿主细胞内使对象核酸表达的方法,可以列举将该核酸插入适当的载体中,例如:聚乙二醇法、土壤杆菌法、脂质体法、阳离子脂质体法、磷酸钙沉淀法、电脉冲穿孔法(电穿孔)(Current protocols in Molecular Biology edit.Ausubel et al.(1987)Publish.John Wiley&Sons.Section 9.1-9.9)、脂质转染法(GIBCO-BRL公司制造)、显微注射法、基因枪法等通过本领域技术人员公知的方法导入生体内的方法。在本发明中,可以优选使用土壤杆菌法。在将核酸导入植物细胞内时,可以使用显微注射法、电穿孔法、聚乙二醇法等直接地导入核酸,也可以插入对植物导入基因用的质粒中,将其作为载体,经由具有植物感染能力的病毒或细菌间接地导入植物细胞。作为所述病毒,例如,作为代表性的病毒可以列举:花椰菜花叶病毒、烟草花叶病毒、双粒病毒组等,作为细菌,可以列举土壤杆菌等。在通过土壤杆菌法进行对植物的基因导入时,可以使用市售的质粒。
(5)转化植物
本发明提供导入了上述载体的植物(换言之,导入了本发明的核酸的植物)。在本发明的宿主细胞为植物细胞时,本发明的植物(转化植物)包含该植物细胞。本发明的植物不仅包括植物细胞,还包括植物体整体、植物器官(例如,根、茎、叶、花瓣、种子、果实、成熟胚、未成熟胚、胚珠、子房、苗端、花药、花粉等)、植物组织(例如,表皮、韧皮部、薄壁组织、木质部、维管束等)、它们的切片、愈伤组织、枝条原基(shoot primordia)、幼苗、丛生芽(multiple shoot)、毛状根及培养根等中的任一者。
本发明的植物为双子叶植物或单子叶植物。作为双子叶植物,可以列举:拟南芥、大豆、棉、油菜、甜菜、烟草、番茄、萝卜、葡萄、杨等,其中优选为拟南芥、大豆、棉、油菜、烟草、番茄,进一步优选为拟南芥、大豆、棉、油菜。作为单子叶植物,可以列举:稻、玉米、小麦、大麦、高粱、甘蔗、洋葱等,其中优选为稻、玉米、小麦、高粱,更优选为稻、玉米。
对于本发明的植物而言,其品种与上述宿主细胞同样地可以与导入的核酸的来源植物品种相同或不同。即,本发明可以提供:导入了源自同一品种植物的核酸或包含该核酸的载体的植物(导入了核酸或包含该核酸的载体的植物,且该植物的品种与该核酸的来源植物品种相同)、以及导入了源自不同种植物的核酸或包含该核酸的载体的植物(导入了核酸或包含该核酸的载体的植物,且该植物的品种与该核酸的来源植物品种不同)中的任一者。另外,在本发明中,在核酸的来源植物为双子叶植物时,导入目标植物可以为双子叶植物,另外,在核酸的来源植物为单子叶植物时,导入目标植物可以为单子叶植物。
本发明可以提供以下植物。
(i)导入了源自单子叶植物的核酸或包含该核酸的载体的单子叶植物。
(ii)导入了源自双子叶植物的核酸或包含该核酸的载体的单子叶植物。
(iii)导入了源自双子叶植物的核酸或包含该核酸的载体的双子叶植物。
(iv)导入了源自单子叶植物的核酸或包含该核酸的载体的双子叶植物。
其中,优选为:
(i)导入了源自单子叶植物的核酸或包含该核酸的载体是单子叶植物、
(ii)导入了源自双子叶植物的核酸或包含该核酸的载体的单子叶植物、以及
(iii)导入了源自双子叶植物的核酸或包含该核酸的载体的双子叶植物,
更优选为:
(i)导入了源自单子叶植物的核酸或包含该核酸的载体的单子叶植物、及
(ii)导入了源自双子叶植物的核酸或包含该核酸的载体的单子叶植物。
本发明的植物包括导入了本发明的核酸或包含该核酸的载体的植物细胞生长繁殖而得到的植物体、及该植物体的后代、作为后代或克隆的植物、以及它们的繁殖材料(例如,种子、果实、切穗、块茎、块根、原种(stock)、愈伤组织、原生质体等)。从转化植物细胞进行植物体的再生可以根据植物细胞的种类用本领域技术人员公知的方法来进行。上述技术已经确立,且在本发明的技术领域中广泛使用,在本发明中可以适当地使用上述方法。
使转化后的植物细胞再分化而使植物体再生的方法根据植物细胞的种类而不同,例如,在稻的情况下可以列举Fujimura等(Plant Tissue Culture Lett.2:74(1995))的方法,在玉米的情况下可以列举Shillito等(Bio/Technology 7:581(1989))的方法、Gorden-Kamm等(Plant Cell 2:603(1990))的方法。通过上述方法再生且栽培的转化植物体中导入的外来核酸的存在可以通过公知的PCR法、Southern杂交法、或者通过对植物体中的DNA碱基序列进行分析来确认。在该情况下,从转化植物体中提取DNA可以按照公知的J.Sambrook等的方法(Molecular Cloning、第2版、Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)来实施。
例如,在使用PCR法对再生后的植物体中存在的外来核酸进行分析的情况下,如上所述以从再生植物体中提取出的DNA作为模板进行扩增反应。另外,可以使用合成的寡核苷酸作为引物,并在混合了它们的反应液中进行扩增反应,所述合成的寡核苷酸具有根据本发明的核酸或修饰后的核酸的核苷酸序列适当选择的核苷酸序列。在扩增反应中,重复数十次DNA的变性、退火、延长反应时,可以得到包含对象核酸的核苷酸序列的DNA片段的扩增产物。将包含扩增产物的反应液进行例如琼脂糖电泳时,扩增后的各种DNA片段被分离,能够确认其DNA片段对应于本发明的基因。
一旦获得了在基因组内导入了对象核酸的转化植物体,就能够通过有性生殖或无性生殖从该植物体得到后代。另外,可以从该植物体、其后代或克隆获得繁殖材料,并以此为基础批量制备该植物体。本发明包括导入了本发明的核酸或包含该核酸的重组表达载体的植物细胞、包含该细胞的植物体、该植物体的后代及克隆、以及该植物体、其后代和克隆的繁殖材料。即,本发明包括作为实施了转化处理的再分化初代的“T0代”、作为T0代植物的种子的“T1代”等后代植物、以它们为一个亲体杂交而得到的杂种植物、其后代植物。
本发明的植物(转化植物)包含将天然启动子取代为上述各种启动子的所谓的“部位特异性转化体”,所述天然启动子控制野生型植物(包括未从外部导入本发明的核酸(例如bil7基因)的植物)所具有的bil7基因。这样的植物因取代的启动子而使该植物原本具有的bil7基因的表达增加,从而具有增加生物质这样的特性。本发明也包括从结果上看给定核酸(例如bil7基因)在植物内强表达(过表达)的植物作为一个方式,因此这样的部位特异性转化体也可以作为本发明的对象。作为制备这样的植物的方法,可以使用CRISPR法、ZFN法、TAL效应物核酸酶(TALEN)法等公知的基因组编辑技术。
与普通的植物相比,可以期待这样制备的转化植物具有生物质增加这样的有利特性。本发明中成为转化对象而使用的植物没有特别限定,可以根据本发明的方法制备生物质增加的各种转化植物。
(6)使植物的生物质增加的方法
本发明提供使植物的生物质增加的方法,该方法包括将上述核酸导入植物的工序。更具体而言,本发明的方法为使植物的生物质增加的方法,该方法包括:制备包含本发明的核酸及启动子的载体的工序,所述启动子与该核酸能够发挥作用地连接;将该载体导入宿主细胞(植物细胞)的工序;以及由导入了核酸的植物细胞再生植物体的工序。通过利用本发明的核酸编码的蛋白质所具有的使植物的生物质增加的活性,可以得到本发明的方法。
在本发明的方法中,不仅是上述核酸,还可以将包含该核酸的载体导入植物。将核酸或包含该核酸的载体导入植物的方法如上所述,可以通过导入宿主细胞(植物细胞)来向植物导入该核酸。另外,本发明的方法中成为对象的植物种类、与被导入的核酸的来源植物品种的关系等也如上所述,其它在该方法中应考虑的用语、材料、方法等也按照上述说明及定义等进行解释。
(7)增加了生物质的植物的制备方法
本发明提供增加了生物质的植物的制备方法,该方法包括将上述核酸导入植物的工序。更具体而言,本发明的方法为增加了生物质的植物的制备方法,该方法包括:制备包含本发明的核酸及启动子的载体的工序,所述启动子与该核酸能够发挥作用地连接;将该载体导入宿主细胞(植物细胞)的工序;以及由导入了核酸的植物细胞再生植物体的工序。通过利用本发明的核酸编码的蛋白质所具有的使植物的生物质增加的活性,可以得到本发明的方法。
在本发明的方法中,不仅是上述核酸,还可以将包含该核酸的载体导入植物。将核酸或包含该核酸的载体导入植物的方法如上所述,可以通过导入宿主细胞(植物细胞)来向植物导入该核酸。另外,本发明的方法中成为对象的植物种类、与被导入的核酸的来源植物品种的关系等也如上所述,其它在该方法中应考虑的用语、材料、方法等也按照上述说明及定义等进行解释。
(8)增加了生物质的植物的筛选方法
本发明提供利用了上述说明的蛋白质或核酸的增加了生物质的植物的筛选方法,该方法包括下述工序。
(1)在受试植物及野生型植物中,对本发明的蛋白质或编码该蛋白质的核酸的表达量进行测定的工序,
(2)对通过工序(1)而得到的表达量进行比较的工序,以及
(3)选择比野生型植物中的表达量显示出更高表达量的受试植物的工序。
在本发明的筛选方法中,作为对象植物的形态,与上述相同,不仅包括植物细胞,还包括植物体整体、植物器官(例如,根、茎、叶、花瓣、种子、果实、成熟胚、未成熟胚、胚珠、子房、苗端、花药、花粉等)、植物组织(例如,表皮、韧皮部、薄壁组织、木质部、维管束等)、它们的切片、愈伤组织、枝条原基、幼苗、丛生芽、毛状根及培养根等,从进行筛选的观点考虑,其中特别优选植物为成熟体前的状态或幼小的状态。因此,在本发明的筛选方法中,种子(成熟种子、未成熟种子)、成熟胚、未成熟胚、愈伤组织、枝条、幼苗等是特别优选的植物形态。
在本说明书中,野生型植物是对象植物中最经常发现的表型的系统或个体,主要是指未进行任何基因操作的植物品种。野生型植物的形态可以利用上述形态中的任一种,优选与受试植物的形态相同。
测定蛋白质或核酸的表达量的方法可以利用该技术领域中公知的方法。例如,对于蛋白质而言,从植物中提取蛋白质,制备或获得对本发明的蛋白质(例如,各种植物的BIL7蛋白质)的抗体,使用该抗体进行蛋白质印迹法(western blotting)、免疫测定(ELISA等)或基于它们的方法,由此可以测定其表达量。使用的抗体可以是单克隆抗体及多克隆抗体中的任一种,另外,该抗体可以是抗体分子本身,也可以是Fab、Fab’、或F(ab’)2等的片段。另外,抗体的标签可以使用本身公知的放射性同位素、酶、荧光物质、发光物质等。对于核酸的表达量而言,例如,从植物中提取RNA,制备或获得能够基于本发明的核酸(例如,各种植物的bil7基因)的核苷酸序列对该核酸进行特异性扩增的引物或能够特异性检测的探针,使用该引物或探针进行RT-PCR、RNA印迹法(Northern blotting)或基于它们的方法,由此能够测定其表达量。
蛋白质或核酸的表达量可以是定性的,也可以是定量的,优选以数值(测定值)的形式进行定量化。对由受试植物及野生型植物得到的表达量进行相互比较,在受试植物的表达量大于野生型植物的表达量的情况下,可以判定植物的生物质增加,通过选择这样的受试植物,可以进行增加了植物生物质的植物的筛选。
(9)对增加了生物质的植物进行判定的方法
本发明提供对增加了生物质的植物进行判定的方法,该方法利用了上述说明的蛋白质或核酸,该方法包括下述工序。
(1)在受试植物及野生型植物中,对本发明的蛋白质或编码该蛋白质的核酸的表达量进行测定的工序,
(2)对通过工序(1)而得到的表达量进行比较的工序,以及
(3)确认受试植物中的表达量高于野生型植物中的表达量的工序。
本发明的判定方法与使用本发明的蛋白质或核酸作为标记物(蛋白质标记物或核酸标记物)含义相同。即,在植物中检测出本发明的蛋白质或核酸、且其表达量高于野生型中的表达量的情况下,可以期待该植物的植物生物质增加。
在本发明的判定方法中,对象植物的形态与上述的筛选方法相同,包括上述例示出的所有部位等作为其形态,特别优选植物处于成熟体前的状态或幼小状态的形态。因此,在本发明的判定方法中,种子(成熟种子、未成熟种子)、成熟胚、未成熟胚、愈伤组织、枝条、幼苗等是特别优选的植物形态。
本发明的判定方法中的蛋白质或核酸的表达量测定方法可以利用该技术领域中公知的方法,其具体例子如上述筛选方法中所述。另外,在本发明中,蛋白质或核酸的表达量可以是定性的,也可以是定量的,优选以数值(测定值)的形式进行定量化。将由受试植物及野生型植物得到的表达量进行相互比较,确认受试植物中的表达量大于野生型植物中的表达量,由此可以判定植物的生物质增加。
实施例
以下,通过实施例对本发明具体地进行说明,但这些例子并不用于限定本发明的技术范围。本领域技术人员可以基于本说明书的记载而容易地对本发明进行修改/变更,这些修改/变更也包含在本发明的技术范围内。
实施例1 bil7突变体的挑选
FOX追寻系统(全长cDNA过表达基因追寻系统)是根据通过将全长cDNA导入植物并使其高表达所带来的性状变化来确定DNA的功能的方法(WO03/018808)。这里,从约8,800种拟南芥(arabidopsis)(拟南芥)FOX品系(Ichikawa et al.2006)中,在作为油菜素类固醇(BR)生物合成抑制剂的芸苔素唑(Brz)存在下于暗处进行了品系的挑选,挑选的品系与野生型拟南芥相比,显示出胚轴更加伸长的bil(Brz不敏感性长胚轴(Brz-insensitive-long-hypocothl))形态。在Brz存在下、暗处中显示出bil形态的植物体可以认为具有Brz耐性。挑选进行至二次挑选,对于挑选出的品系而言,确认了通过与野生型的回交(backcross)而制备的杂交F1代植物体在Brz存在的暗处下显示出bil形态,确认了bil突变为显性性状。由于FOX品系为功能获得型突变体,因此可以认为显性突变表示该突变原因来自于FOX。
首先,将20~40个FOX品系的种子混合,在暗处、Brz 3μM发芽条件下进行培育,对胚轴伸长品系进行了一次挑选。接着,对一次挑选的个体进行培育,将得到的种子再次在暗处、Brz 3μM发芽条件下进行培育,对胚轴伸长品系进行了二次挑选。需要说明的是,在二次挑选时,从分离成bil形态强的品系为1/4、bil形态中等程度的品系为2/4、与野生型同等的品系为1/4的情况也可以确认bil突变是显性性状。该挑选的结果是得到了比野生型Columbia-0(Col-0)明显显示出胚轴伸长的多个品系的候选突变体。其中,将显示出最长的胚轴伸长形态的No.72品系命名为bil7-1D(Brz不敏感性长胚轴7-1D,Brz-insensitive-long-hypocothl 7-1D),进行分析。bil7-1D在Brz 3μM存在的暗处下的胚轴伸长约为野生型的2.5倍,可以认为与BR信息转导的主转录因子(master transcription factor)BIL1/BZR1的功能获得型突变体bil1-1D/bzr1-1D(显示出耐Brz的阳性对照)具有同等强度的耐Brz突变性状(图1)。
为了分析bil7-1D的形态上的特征,进行了成熟时的形态观察。对于可以认为bil7-1D突变体基本上停止了生长的第60天的成熟个体进行了形态分析,结果表明,与野生型相比,bil7-1D的花序长度伸长至约1.5倍(图2A、C)。另外可知,与野生型相比,花序数基本上没有变化,但二次花序数增加至约2倍(图2D、E)。另外,与野生型相比,莲座叶具有圆弧,显示出与bil1-1D/bzr1-1D的莲座叶相似的形态(图2B)。
另外,对生殖器官进行了分析。对于bil7-1D而言,在花中未正常地发生花瓣的展开(图3A),因此,虽然没有在全部花中,但在约45%左右的花中观察到了即使存在花也未生长成正常的长角果的现象(图3B)。因此,对于bil7-1D而言,虽然与野生型相比花的数量有所增加,但正常的长角果的数量减少(图3D、E)。而且,由于每1个长角果的种子数也减少,因此总种子数减少(图3F)。种子与野生型相比增大(图3C),种子重量与野生型相比增加至约2倍(图3G)。
对bil7-1D的生长过程进行了分析,结果可以认为,虽然有些开花延迟(图4A)、生长延迟(图4B)的倾向,但考虑到报告了开花延迟型的bil1-1D/bzr1-1D(Zhang etal.2013)的值,并没有与野生型的较大差别。另外,在经时观察中,虽然bil7-1D的花序伸长速度与野生型基本没有变化,但与野生型在播种后约第45天开花期停止、且花序伸长也停止的情况相比,bil7-1D在约第60天为止仍继续开花期和花序伸长(图4C)。根据这些结果可知,bil7-1D在花序伸长方面显著地显示出促进生长的形态。
实施例2引起bil7-1D突变的基因的分离和鉴定
根据bil7-1D植物体的形态分析,可以推测引起突变的基因BIL7造成花序伸长等促进生长形态、BR信息转导的活性化。因此,分离引起bil7-1D突变的基因BIL7,进行了同源蛋白质的分析、功能域的研究。接着,制备BIL7高表达转化体(BIL7-OX),使BIL7候选基因高表达,由此确认bil7-1D形态重现的情况,进行了BIL7基因的确定。
2-1引起bil7-1D突变的基因的分离
关于bil7-1D突变体的导入cDNA,以突变体基因组作为模板,通过使用了对35SCaMV启动子和NOS终止子特异性的引物的PCR法和测序而得到了基因片段。
从bil7-1D突变体上采集莲座叶,使用Nucleon DNA Extraction Kit(Amersham),提取了基因组DNA。接着,对提取出的DNA进行了PCR。PCR反应液、反应条件、引物如下所述。
表3
表4
引物集:
对由此得到的PCR产物确定了碱基序列,结果是编码功能未知的新蛋白质的基因表示为BIL7候选基因。
利用实时RT-PCR对该BIL7候选基因的表达进行了分析。使用RNeasy Plant MiniKit(QIAGEN)从植物体中提取出Total RNA。接着,使用Takara PrimeScript RT regantKit(Perfect Realtime)制备反应液,利用cDNA反应(37℃15min、85℃5sec、4℃结束)合成了cDNA。以这样合成的cDNA作为模板,在以下条件下进行了实时PCR。
表5
表6
RT-PCR引物集:
其结果是,bil7-1D中的BIL7候选基因的表达量比野生型增加至约40倍以上(图5)。该结果与bil7-1D为显性突变体的事实一起暗示了BIL7候选基因的过表达是bil7-1D的原因。
2-2 BIL7基因的氨基酸序列的分析
BIL7候选基因编码了功能未知的蛋白质,因此,为了推测翻译产物的功能,以BIL7的氨基酸序列为基础,进行了基于PROSITE(http://prosite.expasy.org/)和PSORT(http://psort.hgc.jp/form.html)数据库的基序检索及基于GENETYX-MAC的疏水性分析。
其结果是,BIL7在其序列中存在N-十四烷酰化预测位点和N-糖基化预测位点。此外不存在能够预测功能的区域。从未发现跨膜区域,但存在核定位信号(NLS)的情况可以推测核定位。
BIL7同源蛋白质在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中存在3种。另外已知在其它种植物中,在萝卜(Raphanus sativus)、大豆(Glycine max)、杨(Populus trichocarpa)、葡萄(Vitis vinifera)、稻(Oryza sativa)、小立碗藓(Physcomitella patens)等广泛的植物品种中存在同源性高的蛋白质。这些均是没有报告例的功能未知的新蛋白质。另外,在这些同源蛋白质组中,确认到了保守性特别高的区域。以该区域为基础进一步进行了显示出同源性的氨基酸的检索,但不存在能够推测功能的蛋白质。另外,可以观察到十四烷酰化预测位点的序列部分在其它基因中比较保守,因此暗示了BIL7的功能可能与这些蛋白质中共同的功能相关。
2-3 BIL7高表达转化体(BIL7-OX)的制备及形态观察
将构建体转化至野生型拟南芥中制备BIL7高表达转化体(BIL7-OX),进行了形态的观察,所述构建体将BIL7基因连接于35S CaMV启动子的下游。
使用RNeasy Plant Mini Kit(QIAGEN)从野生型拟南芥的莲座叶提取了RNA。接着,使用“SuperScriptTM III First-Strand Synthesis System for RT-PCR”(Invitrogen),按照kit的技术方案合成了cDNA。以该cDNA作为模板,按照使用了以下引物的PCR法对BIL7进行了扩增。
表7
向入门载体(pENTR)克隆的引物
对于扩增后的BIL7而言,使用“pENTER/D TOPO cloning kit”(Invitrogen)进行了向入门载体(pENTR)的克隆。通过Gateway techonology使用“Gateway LR ClonaseIIenzyme mix(Invitrogen)”将制备的pENTR载体导入包含35S启动子的pGWB2及包含RNAi构建体的pGWB80,得到了插入了BIL7的转化用载体pGWB2-BIL7及pGWB80-BIL7-RNAi。
接着,将制备的载体导入土壤杆菌,利用flower dipping法进行了野生型拟南芥的转化。
相对于土壤杆菌感受态细胞50μl添加2μl制备的载体并混和,在冰上静置30分钟。在液氮中静置1分钟,然后在37℃下融化1分钟。加入YEP液体培养基250μl,在28℃下培养1小时,散布于包含卡那霉素和潮霉素50μg/ml、利福霉素(rifampycin)100μg/ml的YEP培养基中,利用菌落PCR确认了有无载体导入。
将导入了载体的土壤杆菌的菌落在YEP液体培养基中培养过夜,然后将培养液按比例放大至500ml,培养过夜。对培养液进行5000rpm、10分钟的离心,去除上清,然后悬浮于含有5%(w/v)蔗糖的MS培养基。通过浸花(flower dipping)法对去除了长角果的野生型进行了转化。在含有卡那霉素25μg/ml的MS培养基中对得到的T1种子进行了挑选,得到了BIL7高表达转化体(BIL7-OX)及BIL7表达抑制转化体(BIL7-RNAi)(图6)。
关于BIL7-OX品系,对实施例1中叙述的bil7-1D中观察到的形态特征进行了研究(图7、8)。其结果是,在BIL7表达量低的BIL7-OX1中未见到bil7-1D中观察到的莲座叶形态,而仅在BIL7表达量高的BIL7-OX2中确认到bil7-1D中观察到的莲座叶形态(图7A)。在花序长度和二次花序数方面显示出BIL7表达量越多的品系越得到促进的倾向(图7A、B、图8D)。另外,对于在bil7-1D中与野生型基本没有变化的花序数而言,观察到一些随BIL7表达增强而花序数减少的倾向(图8C)。在种子方面,虽然BIL7的表达越高,正常的长角果数越减少,但种子重量与bil7-1D同样地有所增加(图8B、E、F)。
如上所述,在bil7-1D中观察到的成熟形态全部在BIL7-OX品系中观察到了。与胚轴的Brz耐性形态中的观察结果组合可以认为,因BIL7候选基因的高表达重现了bil7-1D的形态。根据这些结果,可以确认该基因为引起bil7-1D的基因。
实施例3稻的BIL7同源基因OsBIL7向稻中的转化
关于稻中的BIL7同源基因OsBIL7,构建了连接于泛素启动子下游的载体,进行了向稻中的转化,所述泛素启动子是稻中的组成性表达启动子(constitutive expressionpromoter)。
首先进行了稻的BIL7同源基因OsBIL7的克隆。使用Qiagen的RNA easy plant试剂盒提取了日本晴(Nipponbare)稻野生型total RNA。接着,根据其使用Invitrogen的SuperScript II试剂盒合成了cDNA。以该cDNA为模板,用以下引物进行PCR扩增了OsBIL7。
表8
OsY72-GW-F1:CACCATGCAGAGTGGGAGCGAGAT(序列号44)
OsY72-GW-R1:TTAGCTGACCCCTGGCTGT(序列号45)
使用“pENTER/D TOPO克隆试剂盒(cloning kit)”(Invitrogen)对扩增后的OsBIL7进行了克隆。
接下来,使用制备的载体进行了向稻中的转化。稻的品种使用日本晴。使用土壤杆菌EHA105株通过高速转化法(Toki et al.Plant J.47:969-76,2006)对上述中构建的载体进行了转化。对得到的转化T1代、同源T2代进行了产量性状的研究。其结果是,在T1代、同源T2代中均确认到了分蘖数的增加、种子产量的增加等(图9A、B)。
由以上结果可以确认,对于稻而言,BIL7使产量提高。
实施例4使OsBIL7基因过表达的稻品种“Yukihikari”的转化体中的生物质评价
将实施例3中构建的载体经由土壤杆菌LBA4404株转化至稻(品种:Yukihikari)中。同时,以pSB4(komari et al.1996Plant J 10:165-174)作为对象进行转化。转化按照Hiei et al.(2008Plant J 6:271-282)的方法进行。将挑选培养基、再分化培养基及生根培养基中的潮霉素的浓度设为30μg/ml。在日本烟草产业株式会社植物创新中心的重组体专用温室中进行了得到的转化体的初代(T0代)的栽培评价。昼长设为14.5小时的长日照条件,温度设为昼温28℃、夜温21℃。从苗木箱移植至盆中18天后,选择生长良好的苗各36株,将每1株移植至塑料盆(直径12cm、容量:830cc)。为了研究有无导入基因,对OsBIL7基因及潮霉素抗性基因进行了PCR检测。其结果是确认了4个个体中的OsBIL7基因脱落。另一方面,对照用载体的全部36株中没有潮霉素抗性基因脱落的个体。因此,汇总了32株OsBIL7重组体及36株对照用载体重组体的数据。测定的性状为秆长、分蘖数、穗数、穗长、单穗粒数、单穗结实粒数、单穗重、总穗重、地上部分干重及全部稻谷重量。需要说明的是,秆长测定了最长的秆的长度。穗长、单穗粒数、单穗结实粒数、单穗重以测定了秆长的秆(=最长的秆)的穗作为测定对象。穗数研究了除去晚穗后的穗的数量。从早熟个体开始依次进行收获。性状研究结束后,汇总数据,进行了统计分析。作为其结果,将各种性状的平均值示于表9。另外,分别将即将移植至塑料盆之前的苗的生长状况示于图10,将成熟期的状况示于图11。
表9
可知,与对照用载体的重组体相比,OsBIL7重组体具有以下特性。秆长高14cm,穗长长4.6cm,单穗粒数多至23粒。由于种子能育性(fertility)相同,因此单穗结实粒数多至20粒。单穗重增加了0.66g(170%),总穗重增加了2.00g(135%)。最终,相当于种子产量的全部稻谷重量增加了1.80g(135%)。另外,地上部分干重增加了5.00g(140%)。
对以上结果进行总结可知,对于稻品种“Yukihikari”而言,在通过泛素启动子使OsBIL7基因过表达时,可在使稻的地上部分生物质增加的同时也使种子产量增加。
实施例5使拟南芥BIL7基因过表达的稻的转化体中的生物质评价
在使拟南芥BIL7基因在单子叶植物稻中过表达的情况下,对能否带来使稻产量增加的效果进行了研究。
通过PCR对实施例2中构建的BIL7基因cDNA克隆(pENTR入门载体)的BIL7基因编码区域进行扩增,并连接于实施例3中使用的稻转化用双元载体的泛素启动子下游。PCR中使用的引物如下所述。
表10
将得到的构建体Ubi-AtBIL7经由土壤杆菌LBA4404株转化至稻(品种:Yukihikari)中。同时,以作为pIG121Hm的修饰型的p121Hm载体(在T-DNA区域包含“CaMV35S启动子、潮霉素耐性基因、NOS终止子”盒)作为对照进行了转化。转化按照Hiei et al.(2008Plant J 6:271-282)的方法进行。将挑选培养基、再分化培养基及生根培养基的潮霉素的浓度设为30μg/ml。在日本烟草产业株式会社植物创新中心的重组体专用温室中进行了得到的转化体的初代(T0代)的栽培评价。昼长设为14.5小时的长日照条件,温度设为昼温28℃、夜温21℃。从苗木箱移植至盆中,选择20天后生长良好的苗各36株,将每1株移植至塑料盆(直径12cm、容量:830cc)。为了研究有无导入基因,对于包括对照在内的全部72个重组体,对BIL7基因及潮霉素抗性基因进行了PCR检测。测定的性状为移植至盆中5周后的株高、最长秆的旗叶长度、秆长、穗数、穗长、单穗粒数、单穗结实粒数、单穗结实粒重、单穗重、总穗重、地上部分干重、全部稻谷重量。需要说明的是,秆长测定了最长的秆的长度。穗长、单穗粒数、单穗结实粒数、单穗结实粒重、单穗重以测定了秆长的秆(=最长的秆)的穗作为测定对象。穗数研究了除去晚穗后的穗的数量。1000粒稻谷重量通过将单穗结实稻谷重除以单穗结实粒数而得到的值乘以1000来计算。
对栽培的36个BIL7重组体检测了有无BIL7基因。其结果是,在BIL7重组体中没有BIL7基因脱落的个体。另外,在对照用载体的全部36个个体中没有潮霉素抗性基因脱落的个体。因此,汇总了36个BIL7重组体及36个对照用载体的重组体的数据。作为其结果,将各种性状的平均值示于表11。另外,分别将即将移植至塑料盆之前的苗的生长状况示于图12,将成熟期的状况示于图13。
表11
可知,与对照用载体的重组体相比,BIL7重组体具有以下特性。播种5周后的株高高15cm,旗叶长度长9cm,秆长高13cm。穗长长4.2cm,单穗粒数多至14粒。由于种子能育性相同,单穗结实粒数多至13粒。1000粒稻谷重量重2.6g。单穗重增加了0.48g(146%)。总穗重增加了1.34g(120%),最终,相当于种子产量的全部稻谷重量增加了1.18g(120%)。另外,地上部分干重增加了3.77g(128%)。
对以上结果进行总结可知,对于稻品种“Yukihikari”而言,在通过泛素启动子使BIL7基因过表达时,可在使稻的地上部分生物质增加的同时也使种子产量增加。
实施例6使OsBIL7基因过表达的玉米的转化体中的生物质评价
按照Ishida et al.(2007)的方法将实施例3中构建的载体经由土壤杆菌LBA4404株转化至玉米(品种:A188)中。在日本烟草产业株式会社植物创新中心的重组体专用温室中进行了得到的转化体的栽培评价。昼长设为14.5小时,温度设为昼温28℃、夜温20℃。抽出的雄穗在开花前进行了切除。将从未转化的玉米(品种:A188)中采集的花粉与从雌穗中充分抽出的玉米穗丝(corn silk)杂交,得到了T1种子。使用该种子进行了生物质相关性状的评价试验。需要说明的是,在评价试验中,考虑到T0代中的OsBIL7基因及潮霉素抗性基因的PCR检测结果、植物姿态、种子数及种子重量,将被采集的25个个体中的6个个体供于试验。该评价试验分2次(第1次:3个系统、第2次:3个系统,总计6个系统)进行。在容量570ml的塑料盆中每1个系统播种1粒(1个系统25粒,总计25盆)。在播种后17~18天切下叶的一部分,浸渍于潮霉素溶液中,研究了潮霉素的抗性及敏感性。除去初期生长差的个体,将每1个系统16个个体移植至容量5100cc的塑料盆中继续进行栽培。测定的性状为穗丝抽出天数、总叶数、第9叶至第13叶的叶片长度及株高。需要说明的是,穗丝抽出天数是从播种至穗丝抽出日的天数,株高测定了播种后84天的最终株高。对各系统进行了潮霉素抗性个体(即,视为保有OsBIL7基因的个体)与潮霉素敏感性个体(即,视为OsBIL7基因脱落个体)的比较。将其结果示于表12。其结果是,在穗丝抽出天数及总叶数方面,在抗性个体与敏感性个体之间没有确认到差别。另一方面,在株高及第9叶至第13叶的叶片长度方面,抗性个体与敏感性个体相比有所增加(表12)。
对以上结果进行总结可知,对于玉米品种“A188”而言,在使OsBIL7基因过表达时,可使玉米的地上部分生物质增加。
表12
工业实用性
本发明在能够利用生物质的工业领域是有用的,例如在食品领域、能源领域、环境领域等是有用。通过使用本发明,能够使植物的生物质有效地增加。
序列表
<110> 日本烟草产业株式会社(JAPAN TOBACCO INC.)
国立研究开发法人理化学研究所(RIKEN)
<120> 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用
<130> FA0392-15166
<150> JP 2014-209154
<151> 2014-10-10
<160> 49
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 70
<212> PRT
<213> Unknown
<220>
<223> 共同基序
<220>
<221> 各种特征(MISC_FEATURE)
<222> (9)..(9)
<223> Xaa为Phe或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (10)..(10)
<223> Xaa为Phe, Leu, Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (11)..(11)
<223> Xaa为Gln, Pro, His或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (13)..(13)
<223> Xaa为Glu, Gly, Asp, Ala或Met.
<220>
<221> 各种特征
<222> (14)..(14)
<223> Xaa为Pro, Gly, Leu或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (15)..(15)
<223> Xaa为Pro, Ala, Thr或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (17)..(17)
<223> Xaa为Ala, Ile, Val, Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (18)..(18)
<223> Xaa为Thr, Val, Ser或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (19)..(19)
<223> Xaa为Gln或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (20)..(20)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (22)..(22)
<223> Xaa表示15-30个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (27)..(27)
<223> Xaa为His或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (29)..(29)
<223> Xaa为Thr或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (30)..(30)
<223> Xaa为Gln或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (31)..(31)
<223> Xaa为Leu或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (33)..(33)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (39)..(39)
<223> Xaa为Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (40)..(40)
<223> Xaa为Tyr或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (41)..(41)
<223> Xaa为Thr, Ile或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (43)..(43)
<223> Xaa为Glu或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (46)..(46)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (49)..(49)
<223> Xaa为Ile, Val, Tyr或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (53)..(53)
<223> Xaa表示3-15个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (58)..(58)
<223> Xaa为Glu或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (61)..(61)
<223> Xaa为Phe或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (63)..(63)
<223> Xaa表示20-50个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (65)..(65)
<223> Xaa为Gly, Glu或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (68)..(68)
<223> Xaa表示5或6个任意氨基酸残基。
<400> 1
Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Ser
1 5 10 15
Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Gly Pro Tyr Ala Xaa Glu Xaa Xaa Xaa Val
20 25 30
Xaa Pro Pro Val Phe Ser Xaa Xaa Xaa Thr Xaa Pro Ser Xaa Ala Pro
35 40 45
Xaa Thr Pro Pro Xaa Pro Ser Ser Pro Xaa Val Pro Xaa Ala Xaa Pro
50 55 60
Xaa Ser Pro Xaa Ser Pro
65 70
<210> 2
<211> 77
<212> PRT
<213> Unknown
<220>
<223> 共同基序
<220>
<221> 各种特征
<222> (10)..(10)
<223> Xaa为Phe, Leu或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (11)..(11)
<223> Xaa为Gln, His, Pro或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (13)..(13)
<223> Xaa为Glu, Gly, Asp或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (14)..(14)
<223> Xaa为Pro, Gly或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (15)..(15)
<223> Xaa为Pro, Ala, Thr或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (17)..(17)
<223> Xaa为Ala, Val, Ile或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (18)..(18)
<223> Xaa为Thr, Ala, Val或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (19)..(19)
<223> Xaa为Gln或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (20)..(20)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (22)..(22)
<223> Xaa表示10-25个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (24)..(24)
<223> Xaa为Ile, Val, Ala或Met.
<220>
<221> 各种特征
<222> (25)..(25)
<223> Xaa为Phe或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (26)..(26)
<223> Xaa为Ala或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (27)..(27)
<223> Xaa为Ile, Val或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (32)..(32)
<223> Xaa为His或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (36)..(36)
<223> Xaa为Leu或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (38)..(38)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (44)..(44)
<223> Xaa为Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (45)..(45)
<223> Xaa为Tyr或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (46)..(46)
<223> Xaa为Thr或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (51)..(51)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (54)..(54)
<223> Xaa为Ile, Phe或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (58)..(58)
<223> Xaa表示3~15个任意氨基酸残基.
<220>
<221> 各种特征
<222> (63)..(63)
<223> Xaa为Glu或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (66)..(66)
<223> Xaa为Phe或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (68)..(68)
<223> Xaa表示20-35个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (70)..(70)
<223> Xaa为Gly, Glu或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (73)..(73)
<223> Xaa表示3-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (75)..(75)
<223> Xaa为Ile或Arg.
<400> 2
Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Ser
1 5 10 15
Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Pro Tyr Ala Xaa
20 25 30
Glu Thr Gln Xaa Val Xaa Pro Pro Val Phe Ser Xaa Xaa Xaa Thr Glu
35 40 45
Pro Ser Xaa Ala Pro Xaa Thr Pro Pro Xaa Pro Ser Ser Pro Xaa Val
50 55 60
Pro Xaa Ala Xaa Pro Xaa Ser Pro Xaa Leu Xaa Ser Pro
65 70 75
<210> 3
<211> 261
<212> PRT
<213> Unknown
<220>
<223> 共同基序
<220>
<221> 各种特征
<222> (2)..(2)
<223> Xaa为Arg或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa表示3-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (7)..(7)
<223> Xaa为Val或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (8)..(8)
<223> Xaa为Phe或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (11)..(11)
<223> Xaa为Ile或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (16)..(16)
<223> Xaa为Ser或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (19)..(19)
<223> Xaa为Ala或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (20)..(20)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (21)..(21)
<223> Xaa为Ser或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (22)..(22)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (23)..(23)
<223> Xaa为Asp或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (25)..(25)
<223> Xaa表示5-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (29)..(29)
<223> Xaa为Trp或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (30)..(30)
<223> Xaa为Asn或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (31)..(31)
<223> Xaa为Arg或Trp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (32)..(32)
<223> Xaa为Trp或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (34)..(34)
<223> Xaa为Leu或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (35)..(35)
<223> Xaa为Leu或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (36)..(36)
<223> Xaa为Lys或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (41)..(41)
<223> Xaa为Ser或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (42)..(42)
<223> Xaa为Arg或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (43)..(43)
<223> Xaa为Gln或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (44)..(44)
<223> Xaa为Arg或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (45)..(45)
<223> Xaa为Lys或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (48)..(48)
<223> Xaa为Gly或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (49)..(49)
<223> Xaa为Asn或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (50)..(50)
<223> Xaa为Ser或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (57)..(57)
<223> Xaa表示20-25个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (60)..(60)
<223> Xaa为Ile或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (70)..(70)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (73)..(73)
<223> Xaa为Glu或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (74)..(74)
<223> Xaa为Pro或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (75)..(75)
<223> Xaa为Pro或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (77)..(77)
<223> Xaa为Ala或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (78)..(78)
<223> Xaa为Thr或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (84)..(84)
<223> Xaa为Ile或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (85)..(85)
<223> Xaa为Leu或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (91)..(91)
<223> Xaa为Pro或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (92)..(92)
<223> Xaa为Cys或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (94)..(94)
<223> Xaa表示1-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (117)..(117)
<223> Xaa为Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (118)..(118)
<223> Xaa为Tyr或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (124)..(124)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (127)..(127)
<223> Xaa为Ile或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (131)..(131)
<223> Xaa表示1-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (133)..(133)
<223> Xaa为Ile或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (134)..(134)
<223> Xaa为Tyr或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (138)..(138)
<223> Xaa表示0-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (146)..(146)
<223> Xaa为Phe或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (148)..(148)
<223> Xaa为Gln或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (150)..(150)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (151)..(151)
<223> Xaa为Asn或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (153)..(153)
<223> Xaa表示10-20个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (155)..(155)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (157)..(157)
<223> Xaa为Phe或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (160)..(160)
<223> Xaa为Leu或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (161)..(161)
<223> Xaa为Pro或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (163)..(163)
<223> Xaa为Gly或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (166)..(166)
<223> Xaa为Leu或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (168)..(168)
<223> Xaa为Gln或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (174)..(174)
<223> Xaa表示1-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (177)..(177)
<223> Xaa为Pro或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (178)..(178)
<223> Xaa为Thr或Cys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (184)..(184)
<223> Xaa表示1-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (186)..(186)
<223> Xaa为Leu或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (189)..(189)
<223> Xaa为His或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (191)..(191)
<223> Xaa为Gln或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (193)..(193)
<223> Xaa为Ser或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (194)..(194)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (198)..(198)
<223> Xaa为Leu或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (200)..(200)
<223> Xaa表示3-20个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (202)..(202)
<223> Xaa表示10-30个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (204)..(204)
<223> Xaa表示1-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (208)..(208)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (210)..(210)
<223> Xaa为Asp或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (211)..(211)
<223> Xaa为Ala或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (212)..(212)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (213)..(213)
<223> Xaa为His或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (215)..(215)
<223> Xaa为Ile或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (218)..(218)
<223> Xaa为Val或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (219)..(219)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (220)..(220)
<223> Xaa为Gln或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (222)..(222)
<223> Xaa表示3-25个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (224)..(224)
<223> Xaa为Glu或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (225)..(225)
<223> Xaa为Ala或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (227)..(227)
<223> Xaa为Ser或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (229)..(229)
<223> Xaa表示5-25个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (232)..(232)
<223> Xaa为Gly或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (233)..(233)
<223> Xaa为Ser或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (234)..(234)
<223> Xaa为Asn或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (238)..(238)
<223> Xaa为Asn或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (240)..(240)
<223> Xaa表示5-15个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (242)..(242)
<223> Xaa为Asp或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (243)..(243)
<223> Xaa为Glu或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (244)..(244)
<223> Xaa为His或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (245)..(245)
<223> Xaa为Arg或Trp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (246)..(246)
<223> Xaa为Ser或Trp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (248)..(248)
<223> Xaa为Ser或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (249)..(249)
<223> Xaa为Pro或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (251)..(251)
<223> Xaa表示5-15个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (258)..(258)
<223> Xaa为Met或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (260)..(260)
<223> Xaa为Ser或Pro.
<400> 3
Met Xaa Ser Gly Xaa Asn Xaa Xaa Asp Thr Xaa Asn Ala Ala Ala Xaa
1 5 10 15
Ala Ile Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Arg Lys Trp Xaa Xaa Xaa Xaa
20 25 30
Ser Xaa Xaa Xaa Cys Phe Gly Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Ile Xaa
35 40 45
Xaa Xaa Val Leu Val Pro Glu Pro Xaa Pro Phe Xaa Ala Pro Pro Ser
50 55 60
Ser Pro Ala Ser Phe Xaa Gln Ser Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Gln Ser
65 70 75 80
Pro Val Gly Xaa Xaa Ser Phe Ser Pro Leu Xaa Xaa Asn Xaa Pro Ser
85 90 95
Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro
100 105 110
Pro Val Phe Ser Xaa Xaa Thr Thr Glu Pro Ser Xaa Ala Pro Xaa Thr
115 120 125
Pro Pro Xaa Ser Xaa Xaa Leu Thr Thr Xaa Pro Ser Ser Pro Glu Val
130 135 140
Pro Xaa Ala Xaa Leu Xaa Xaa Ser Xaa Glu Xaa Gln Xaa Tyr Gln Xaa
145 150 155 160
Xaa Pro Xaa Ser Pro Xaa Gly Xaa Leu Ile Ser Pro Ser Xaa Ser Gly
165 170 175
Xaa Xaa Ser Pro Phe Pro Asp Xaa Ser Xaa Phe Pro Xaa Phe Xaa Val
180 185 190
Xaa Xaa Pro Pro Lys Xaa Leu Xaa Gly Xaa His Xaa Val Ser Phe Xaa
195 200 205
Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Val Xaa Arg Cys Xaa Xaa Xaa Lys Xaa Pro Xaa
210 215 220
Xaa Ser Xaa Asp Xaa Ser Leu Xaa Xaa Xaa Lys Glu Phe Xaa Phe Xaa
225 230 235 240
Val Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Xaa Xaa Lys Xaa Trp Ser Phe Phe Pro
245 250 255
Val Xaa Gln Xaa Gly
260
<210> 4
<211> 308
<212> PRT
<213> 未知
<220>
<223> 共同基序
<220>
<221> 各种特征
<222> (3)..(3)
<223> Xaa表示0-3个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (8)..(8)
<223> Xaa表示0-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (11)..(11)
<223> Xaa为Val或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (12)..(12)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (13)..(13)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (20)..(20)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (21)..(21)
<223> Xaa为Ala或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (25)..(25)
<223> Xaa为Ser或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (26)..(26)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (27)..(27)
<223> Xaa为Asp或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (30)..(30)
<223> Xaa为His或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (32)..(32)
<223> Xaa为Ser或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (33)..(33)
<223> Xaa为Ser或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (35)..(35)
<223> Xaa为Ile或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (36)..(36)
<223> Xaa为His或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (37)..(37)
<223> Xaa为Lys或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (39)..(39)
<223> Xaa为Arg或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (40)..(40)
<223> Xaa为Lys或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (42)..(42)
<223> Xaa为Trp或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (44)..(44)
<223> Xaa为Arg或Trp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (45)..(45)
<223> Xaa为Trp或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (47)..(47)
<223> Xaa为Leu或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (48)..(48)
<223> Xaa为Leu或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (49)..(49)
<223> Xaa为Lys或Trp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (53)..(53)
<223> Xaa为Ser或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (54)..(54)
<223> Xaa为Ser或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (55)..(55)
<223> Xaa为Arg或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (56)..(56)
<223> Xaa为Gln或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (58)..(58)
<223> Xaa为Lys或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (62)..(62)
<223> Xaa为Asn或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (63)..(63)
<223> Xaa为Ser或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (69)..(69)
<223> Xaa为Pro或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (70)..(70)
<223> Xaa为Val或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (71)..(71)
<223> Xaa为Ser或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (72)..(72)
<223> Xaa为Met或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (73)..(73)
<223> Xaa为Ser或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (74)..(74)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (75)..(75)
<223> Xaa为Ser或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (77)..(77)
<223> Xaa为Ser或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (79)..(79)
<223> Xaa表示5-15个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (81)..(81)
<223> Xaa为Thr或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (82)..(82)
<223> Xaa为Thr或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (83)..(83)
<223> Xaa为Leu或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (84)..(84)
<223> Xaa为Pro或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (86)..(86)
<223> Xaa为Ile或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (96)..(96)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (97)..(97)
<223> Xaa为Gln或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (103)..(103)
<223> Xaa为Ala或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (104)..(104)
<223> Xaa为Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (108)..(108)
<223> Xaa为Val或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (109)..(109)
<223> Xaa为Gly或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (113)..(113)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (114)..(114)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (116)..(116)
<223> Xaa表示1-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (139)..(139)
<223> Xaa为Tyr或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (145)..(145)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (148)..(148)
<223> Xaa为Ile或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (152)..(152)
<223> Xaa表示3~15个任意氨基酸残基.
<220>
<221> 各种特征
<222> (166)..(166)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (167)..(167)
<223> Xaa为Asn或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (168)..(168)
<223> Xaa为Ser或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (170)..(170)
<223> Xaa为His或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (171)..(171)
<223> Xaa为Gln或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (172)..(172)
<223> Xaa为Thr或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (173)..(173)
<223> Xaa为Gly或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (174)..(174)
<223> Xaa为Ser或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (175)..(175)
<223> Xaa为Tyr或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (176)..(176)
<223> Xaa为Gly或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (177)..(177)
<223> Xaa为Tyr或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (178)..(178)
<223> Xaa为Lys或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (180)..(180)
<223> Xaa表示3-7个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (182)..(182)
<223> Xaa为Glu或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (184)..(184)
<223> Xaa为Gln或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (185)..(185)
<223> Xaa为Phe或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (189)..(189)
<223> Xaa为Pro或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (194)..(194)
<223> Xaa为Leu或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (201)..(201)
<223> Xaa表示1-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (203)..(203)
<223> Xaa为Gly或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (204)..(204)
<223> Xaa为Pro或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (205)..(205)
<223> Xaa为Thr或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (211)..(211)
<223> Xaa表示1-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (214)..(214)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (215)..(215)
<223> Xaa为Pro或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (216)..(216)
<223> Xaa为His或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (219)..(219)
<223> Xaa为Val或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (220)..(220)
<223> Xaa为Ser或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (222)..(222)
<223> Xaa表示3-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (224)..(224)
<223> Xaa为Pro或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (225)..(225)
<223> Xaa为Lys或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (226)..(226)
<223> Xaa为Thr或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (227)..(227)
<223> Xaa为Ala或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (229)..(229)
<223> Xaa为Val或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (230)..(230)
<223> Xaa为Thr或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (233)..(233)
<223> Xaa表示1-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (235)..(235)
<223> Xaa为Lys或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (236)..(236)
<223> Xaa为Ile或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (237)..(237)
<223> Xaa为Val或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (238)..(238)
<223> Xaa为Pro或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (240)..(240)
<223> Xaa为His或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (241)..(241)
<223> Xaa为Lys或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (242)..(242)
<223> Xaa为Pro或Trp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (245)..(245)
<223> Xaa为Phe或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (246)..(246)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (247)..(247)
<223> Xaa为Leu或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (248)..(248)
<223> Xaa为Asp或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (250)..(250)
<223> Xaa为Asp或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (251)..(251)
<223> Xaa为His或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (253)..(253)
<223> Xaa为Ile或Phe.
<220>
<221> 各种特征
<222> (254)..(254)
<223> Xaa为Arg或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (257)..(257)
<223> Xaa表示1-15个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (260)..(260)
<223> Xaa为Arg或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (262)..(262)
<223> Xaa为Thr或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (263)..(263)
<223> Xaa为Phe或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (265)..(265)
<223> Xaa表示0-15个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (267)..(267)
<223> Xaa为Ala或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (268)..(268)
<223> Xaa为Ser或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (271)..(271)
<223> Xaa表示1-15个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (273)..(273)
<223> Xaa为Ser或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (274)..(274)
<223> Xaa为Met或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (275)..(275)
<223> Xaa为Asn或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (277)..(277)
<223> Xaa表示5-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (283)..(283)
<223> Xaa为Gly或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (284)..(284)
<223> Xaa为Thr或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (285)..(285)
<223> Xaa为Asp或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (287)..(287)
<223> Xaa表示1-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (289)..(289)
<223> Xaa为Thr或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (290)..(290)
<223> Xaa为Val或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (292)..(292)
<223> Xaa表示1-10个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (295)..(295)
<223> Xaa表示1-7个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (298)..(298)
<223> Xaa为Asp或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (304)..(304)
<223> Xaa为Val或Met.
<220>
<221> 各种特征
<222> (305)..(305)
<223> Xaa为Met或Ile.
<220>
<221> 各种特征
<222> (306)..(306)
<223> Xaa为Gln或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (307)..(307)
<223> Xaa为Ser或Pro.
<400> 4
Met Arg Xaa Gly Ala Asn Gly Xaa Asn Asn Xaa Xaa Xaa Thr Ile Asn
1 5 10 15
Ala Ala Ala Xaa Xaa Ile Ala Ser Xaa Xaa Xaa Arg Leu Xaa Gln Xaa
20 25 30
Xaa Pro Xaa Xaa Xaa Lys Xaa Xaa Trp Xaa Asn Xaa Xaa Ser Xaa Xaa
35 40 45
Xaa Cys Phe Gly Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Arg Ile Gly Xaa Xaa Val
50 55 60
Leu Val Pro Glu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Asn Xaa Thr Xaa Ile
65 70 75 80
Xaa Xaa Xaa Xaa Phe Xaa Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Xaa
85 90 95
Xaa Ser Glu Pro Pro Ser Xaa Xaa Gln Ser Pro Xaa Xaa Ile Leu Ser
100 105 110
Xaa Xaa Pro Xaa Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr
115 120 125
Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Thr Xaa Thr Thr Glu Pro Ser
130 135 140
Xaa Ala Pro Xaa Thr Pro Pro Xaa Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val
145 150 155 160
Pro Phe Ala Gln Leu Xaa Xaa Xaa Asn Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
165 170 175
Xaa Xaa Phe Xaa Tyr Xaa Phe Xaa Xaa Tyr Gln Leu Xaa Pro Gly Ser
180 185 190
Pro Xaa Gly Gln Leu Ile Ser Pro Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Ser Pro Phe
195 200 205
Pro Asp Xaa Ser Leu Xaa Xaa Xaa Phe Gln Xaa Xaa Asp Xaa Ser Xaa
210 215 220
Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa Thr Pro Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Xaa
225 230 235 240
Xaa Xaa Val Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Xaa Xaa Val Xaa Xaa Cys Val
245 250 255
Xaa Lys Leu Xaa Thr Xaa Xaa Pro Xaa Glu Xaa Xaa Ser Asp Xaa Glu
260 265 270
Xaa Xaa Xaa His Xaa Lys Glu Phe Asn Phe Xaa Xaa Xaa Glu Xaa Leu
275 280 285
Xaa Xaa Asp Xaa Ala Ser Xaa Ser Asn Xaa Trp Ser Phe Phe Pro Xaa
290 295 300
Xaa Xaa Xaa Gly
305
<210> 5
<211> 428
<212> PRT
<213> Unknown
<220>
<223> 共同基序
<220>
<221> 各种特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa为Ser或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (6)..(6)
<223> Xaa为Glu或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (34)..(34)
<223> Xaa为Gln或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (37)..(37)
<223> Xaa为Pro或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (44)..(44)
<223> Xaa为Trp或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (59)..(59)
<223> Xaa表示0-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (61)..(61)
<223> Xaa为Ile或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (62)..(62)
<223> Xaa为Ser或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (65)..(65)
<223> Xaa为Val或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (71)..(71)
<223> Xaa为Leu或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (73)..(73)
<223> Xaa为Pro或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (79)..(79)
<223> Xaa为Met或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (80)..(80)
<223> Xaa为Pro或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (84)..(84)
<223> Xaa为Ile或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (107)..(107)
<223> Xaa为Gly或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (108)..(108)
<223> Xaa为Gly或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (109)..(109)
<223> Xaa为Ala或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (116)..(116)
<223> Xaa表示0-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (120)..(120)
<223> Xaa为Ser或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (129)..(129)
<223> Xaa为Pro或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (199)..(199)
<223> Xaa为Ala或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (201)..(201)
<223> Xaa为Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (203)..(203)
<223> Xaa表示0-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (208)..(208)
<223> Xaa为Gln或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (209)..(209)
<223> Xaa为Ile或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (212)..(212)
<223> Xaa为Glu或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (224)..(224)
<223> Xaa为Ala或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (229)..(229)
<223> Xaa为Cys或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (237)..(237)
<223> Xaa为Val或Met.
<220>
<221> 各种特征
<222> (239)..(239)
<223> Xaa为Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (244)..(244)
<223> Xaa为Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (245)..(245)
<223> Xaa为Phe或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (246)..(246)
<223> Xaa为Pro或Arg.
<220>
<221> 各种特征
<222> (247)..(247)
<223> Xaa为Ser或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (262)..(262)
<223> Xaa为Ile或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (282)..(282)
<223> Xaa为His或Gln.
<220>
<221> 各种特征
<222> (298)..(298)
<223> Xaa为Asn或Pro.
<220>
<221> 各种特征
<222> (300)..(300)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (325)..(325)
<223> Xaa为Asn或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (327)..(327)
<223> Xaa为Asn或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (329)..(329)
<223> Xaa为Glu或Asp.
<220>
<221> 各种特征
<222> (331)..(331)
<223> Xaa为Ala或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (332)..(332)
<223> Xaa为Ala或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (336)..(336)
<223> Xaa为Arg或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (338)..(338)
<223> Xaa为Val或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (342)..(342)
<223> Xaa为Asn或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (345)..(345)
<223> Xaa表示0-5个任意氨基酸残基。
<220>
<221> 各种特征
<222> (347)..(347)
<223> Xaa为Pro或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (352)..(352)
<223> Xaa为Asp或Glu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (353)..(353)
<223> Xaa为Thr或Ala.
<220>
<221> 各种特征
<222> (358)..(358)
<223> Xaa为Cys或Tyr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (362)..(362)
<223> Xaa为Thr或Ser.
<220>
<221> 各种特征
<222> (378)..(378)
<223> Xaa为Lys或Leu.
<220>
<221> 各种特征
<222> (383)..(383)
<223> Xaa为Lys或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (389)..(389)
<223> Xaa为Ala或Val.
<220>
<221> 各种特征
<222> (390)..(390)
<223> Xaa为Pro或Gly.
<220>
<221> 各种特征
<222> (409)..(409)
<223> Xaa为Ile或Met.
<220>
<221> 各种特征
<222> (411)..(411)
<223> Xaa为Ser或Thr.
<220>
<221> 各种特征
<222> (414)..(414)
<223> Xaa为Arg或Lys.
<220>
<221> 各种特征
<222> (416)..(416)
<223> Xaa为Ser或Asn.
<220>
<221> 各种特征
<222> (420)..(420)
<223> Xaa为Phe或His.
<220>
<221> 各种特征
<222> (423)..(423)
<223> Xaa为Ala或Val.
<400> 5
Met Gln Ser Gly Xaa Xaa Met Arg Pro Val His Asn Ser Val Asp Thr
1 5 10 15
Val Asn Ala Ala Ala Val Ala Ile Val Thr Ala Glu Ser Arg Thr Gln
20 25 30
Pro Xaa Ala Glu Xaa Arg Arg Lys Trp Ala Asp Xaa Leu Ser Val Tyr
35 40 45
Phe Cys Phe Gly Ser Gln Lys Asn Gly Arg Xaa Arg Xaa Xaa His Ala
50 55 60
Xaa Leu Val Pro Glu Pro Xaa Pro Xaa Arg Thr Asp Ala Pro Xaa Xaa
65 70 75 80
Glu Ile Pro Xaa His Pro Pro Pro Pro Val Phe Pro Phe Val Ala Pro
85 90 95
Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu Gln Ser Xaa Xaa Xaa Ser Ile Val
100 105 110
Gln Ser Pro Xaa Gly Ala Pro Xaa Phe Ser Pro Leu Ser Pro Asn Ser
115 120 125
Xaa Ser Pro Thr Gly Pro Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala
130 135 140
His Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Ala Phe Thr Thr
145 150 155 160
Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Val His Leu
165 170 175
Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Tyr Ala Lys Leu Leu Thr Ser
180 185 190
Ile Asn Asn Ser Lys Asn Xaa Glu Xaa Gly Xaa Leu Gln Ser Tyr Xaa
195 200 205
Xaa Tyr Pro Xaa Ser Pro Ile Gly Arg Leu Ile Ser Pro Ser Ser Xaa
210 215 220
Cys Ser Gly Thr Xaa Ser Pro Phe Pro Asp Pro Glu Xaa Gln Xaa Ser
225 230 235 240
Ser Arg Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Phe Pro Val Arg Glu Pro Pro Lys Ile
245 250 255
Leu Asp Gly Glu Gly Xaa Ala Thr Gln Lys Leu Ile Pro Arg His Met
260 265 270
Arg Asn Gly Gly Ser Leu Leu Asp Gly Xaa Ile Ser Ala Ala Val Pro
275 280 285
Val Val Asp Phe Ser Ala Arg Leu Gln Xaa Asn Xaa His Ala Met Asp
290 295 300
His Arg Val Ser Phe Glu Leu Thr Val Glu Asp Val Ala Arg Cys Leu
305 310 315 320
Glu Lys Lys Thr Xaa Ile Xaa Gly Xaa Ser Xaa Xaa Ala Ser Phe Xaa
325 330 335
Leu Xaa Pro Thr Gly Xaa Gly Asp Xaa His Xaa Arg Glu Ser Asn Xaa
340 345 350
Xaa Arg Ala Gly Leu Xaa Val Asp Glu Xaa Tyr His Asp Leu Pro Glu
355 360 365
Lys Ala Arg Arg Ser Leu Ser Leu Arg Xaa Ala Lys Glu Phe Xaa Phe
370 375 380
Asn Asn Val Asp Xaa Xaa Ser Val Glu Pro Ser Val Gly Ser Asp Trp
385 390 395 400
Trp Ala Asn Glu Lys Val Ala Gly Xaa Thr Xaa Glu Pro Xaa Lys Xaa
405 410 415
Trp Ser Phe Xaa Pro Val Xaa Gln Pro Gly Val Ser
420 425
<210> 6
<211> 1524
<212> DNA
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<220>
<221> CDS
<222> (182)..(1258)
<400> 6
attcccagaa atttcggggt tacgtgtcgc tttatttgta aaacgatttt tcagattttg 60
attgttaaag aagctttctg tgtattattt ttgattttta ctagagaaaa actcgaatgc 120
tctgttttgt tctctcgaga aaattctcag actcagagaa aagtaaaaac agagaagaaa 180
g atg aga agc ggt gct aat gga aac aac gtt ttc gat act ata aac gca 229
Met Arg Ser Gly Ala Asn Gly Asn Asn Val Phe Asp Thr Ile Asn Ala
1 5 10 15
gct gct tct gct att gct tct tct gat gat cgt ctt cat caa tct tct 277
Ala Ala Ser Ala Ile Ala Ser Ser Asp Asp Arg Leu His Gln Ser Ser
20 25 30
ccg att cat aag aag aga aaa tgg tgg aat cga tgg agt ctg ttg aaa 325
Pro Ile His Lys Lys Arg Lys Trp Trp Asn Arg Trp Ser Leu Leu Lys
35 40 45
tgt ttc gga tct tca aga caa aga aaa cga ata gga aac tcg gtt ctt 373
Cys Phe Gly Ser Ser Arg Gln Arg Lys Arg Ile Gly Asn Ser Val Leu
50 55 60
gtt cct gaa ccg gta tca atg tct tct tca aat tca aca aca tca aat 421
Val Pro Glu Pro Val Ser Met Ser Ser Ser Asn Ser Thr Thr Ser Asn
65 70 75 80
tcc ggt tat cgt tcg gtt atc aca aca ctt cct ttt ata gct cca cct 469
Ser Gly Tyr Arg Ser Val Ile Thr Thr Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro
85 90 95
tca tct cca gct tca ttt ttc caa tca gag cca cct tct gct aca caa 517
Ser Ser Pro Ala Ser Phe Phe Gln Ser Glu Pro Pro Ser Ala Thr Gln
100 105 110
tca cct gtt gga atc ctc tct ttt agt cct ttg cct tgt aac aac cgt 565
Ser Pro Val Gly Ile Leu Ser Phe Ser Pro Leu Pro Cys Asn Asn Arg
115 120 125
cct tcc atc ttc gcc att gga cct tac gct cat gaa act caa ttg gta 613
Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val
130 135 140
tct cct ccg gtt ttc tca act tac act act gaa cca tct tca gct cca 661
Ser Pro Pro Val Phe Ser Thr Tyr Thr Thr Glu Pro Ser Ser Ala Pro
145 150 155 160
atc aca cct cct ctt gat gac tca tct atc tac tta acc acc aca aca 709
Ile Thr Pro Pro Leu Asp Asp Ser Ser Ile Tyr Leu Thr Thr Thr Thr
165 170 175
cct tct tca cct gaa gtg cct ttt gct cag ctc ttt aac tcg aac cat 757
Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala Gln Leu Phe Asn Ser Asn His
180 185 190
caa acc ggt agc tat ggt tat aag ttc cca atg tct tct agt tat gag 805
Gln Thr Gly Ser Tyr Gly Tyr Lys Phe Pro Met Ser Ser Ser Tyr Glu
195 200 205
ttt cag ttt tac caa ctt cct cct ggt agt cca ctt ggt cag ctt att 853
Phe Gln Phe Tyr Gln Leu Pro Pro Gly Ser Pro Leu Gly Gln Leu Ile
210 215 220
tcc ccg agc cct ggt tct ggt cca act tct cct ttt ccc gat gga gaa 901
Ser Pro Ser Pro Gly Ser Gly Pro Thr Ser Pro Phe Pro Asp Gly Glu
225 230 235 240
acc tcg ctg ttc cct cac ttt caa gtc tct gat cct cca aaa ctg ttg 949
Thr Ser Leu Phe Pro His Phe Gln Val Ser Asp Pro Pro Lys Leu Leu
245 250 255
agt cca aag act gct ggt gtt aca act cct tgt aaa gag cag aag att 997
Ser Pro Lys Thr Ala Gly Val Thr Thr Pro Cys Lys Glu Gln Lys Ile
260 265 270
gta aga ccg cat aaa ccg gtt tca ttc gat ctt gat gct gat cat gtc 1045
Val Arg Pro His Lys Pro Val Ser Phe Asp Leu Asp Ala Asp His Val
275 280 285
att aga tgc gtg gat cag aag cta aga aca acg ttc cct gaa gca tca 1093
Ile Arg Cys Val Asp Gln Lys Leu Arg Thr Thr Phe Pro Glu Ala Ser
290 295 300
tca gat caa gaa tca atg aat cat tcg tct ctc ggg tcc aat aag gaa 1141
Ser Asp Gln Glu Ser Met Asn His Ser Ser Leu Gly Ser Asn Lys Glu
305 310 315 320
ttc aat ttc ggc acg gat gag aaa cat ttg acc gtt gat gaa cat aga 1189
Phe Asn Phe Gly Thr Asp Glu Lys His Leu Thr Val Asp Glu His Arg
325 330 335
tca gct tcg ccg aag aac agc aat gat tgg tct ttt ttc cct gtg atg 1237
Ser Ala Ser Pro Lys Asn Ser Asn Asp Trp Ser Phe Phe Pro Val Met
340 345 350
cag tca ggt aca cta agc taa ccttcatcag aagaatagaa atctgaaatt 1288
Gln Ser Gly Thr Leu Ser
355
tagatatcga ttcggacaaa tatcttgttc aagattcaag aacaattata gaatttttag 1348
atgattctgt tcaggatctt aaggatattt tcttgtctct ctttttggtt ttgtaataaa 1408
tatttggcat cgttagttgt tgtatatggc tactctttat gtagtttttt gtttttgtga 1468
atacacattt gatcgcattt gtaaataaaa tttaatcagt ttcttcggag aaattc 1524
<210> 7
<211> 358
<212> PRT
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 7
Met Arg Ser Gly Ala Asn Gly Asn Asn Val Phe Asp Thr Ile Asn Ala
1 5 10 15
Ala Ala Ser Ala Ile Ala Ser Ser Asp Asp Arg Leu His Gln Ser Ser
20 25 30
Pro Ile His Lys Lys Arg Lys Trp Trp Asn Arg Trp Ser Leu Leu Lys
35 40 45
Cys Phe Gly Ser Ser Arg Gln Arg Lys Arg Ile Gly Asn Ser Val Leu
50 55 60
Val Pro Glu Pro Val Ser Met Ser Ser Ser Asn Ser Thr Thr Ser Asn
65 70 75 80
Ser Gly Tyr Arg Ser Val Ile Thr Thr Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro
85 90 95
Ser Ser Pro Ala Ser Phe Phe Gln Ser Glu Pro Pro Ser Ala Thr Gln
100 105 110
Ser Pro Val Gly Ile Leu Ser Phe Ser Pro Leu Pro Cys Asn Asn Arg
115 120 125
Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val
130 135 140
Ser Pro Pro Val Phe Ser Thr Tyr Thr Thr Glu Pro Ser Ser Ala Pro
145 150 155 160
Ile Thr Pro Pro Leu Asp Asp Ser Ser Ile Tyr Leu Thr Thr Thr Thr
165 170 175
Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala Gln Leu Phe Asn Ser Asn His
180 185 190
Gln Thr Gly Ser Tyr Gly Tyr Lys Phe Pro Met Ser Ser Ser Tyr Glu
195 200 205
Phe Gln Phe Tyr Gln Leu Pro Pro Gly Ser Pro Leu Gly Gln Leu Ile
210 215 220
Ser Pro Ser Pro Gly Ser Gly Pro Thr Ser Pro Phe Pro Asp Gly Glu
225 230 235 240
Thr Ser Leu Phe Pro His Phe Gln Val Ser Asp Pro Pro Lys Leu Leu
245 250 255
Ser Pro Lys Thr Ala Gly Val Thr Thr Pro Cys Lys Glu Gln Lys Ile
260 265 270
Val Arg Pro His Lys Pro Val Ser Phe Asp Leu Asp Ala Asp His Val
275 280 285
Ile Arg Cys Val Asp Gln Lys Leu Arg Thr Thr Phe Pro Glu Ala Ser
290 295 300
Ser Asp Gln Glu Ser Met Asn His Ser Ser Leu Gly Ser Asn Lys Glu
305 310 315 320
Phe Asn Phe Gly Thr Asp Glu Lys His Leu Thr Val Asp Glu His Arg
325 330 335
Ser Ala Ser Pro Lys Asn Ser Asn Asp Trp Ser Phe Phe Pro Val Met
340 345 350
Gln Ser Gly Thr Leu Ser
355
<210> 8
<211> 1909
<212> DNA
<213> 大豆(Glycine max)
<220>
<221> CDS
<222> (193)..(1431)
<400> 8
tatacacaac aagctcgtac cataggatat acaaactata cagagattga ttttattttc 60
aattgatctc ttagcaaaac aaacatttgt caagtatcaa ctttcacgcc tctacgattt 120
caagcttgtt tgtttttggg tatgtagtaa atctagaaaa atctgctttt gtaaagaaaa 180
aaggtactag ag atg aga ggt gct aat gga ggc gct gtg aac aac act ttg 231
Met Arg Gly Ala Asn Gly Gly Ala Val Asn Asn Thr Leu
1 5 10
gag act atc aac gct gct gca act gtc atc gct tcc gtc gag aat cgc 279
Glu Thr Ile Asn Ala Ala Ala Thr Val Ile Ala Ser Val Glu Asn Arg
15 20 25
ctt gat caa ccc cat cct cac gtc cag aag aaa agc tgg gga aac tgg 327
Leu Asp Gln Pro His Pro His Val Gln Lys Lys Ser Trp Gly Asn Trp
30 35 40 45
tta agc ata tat tgg tgt ttt gga cat cgc aaa aac cga cag cgc att 375
Leu Ser Ile Tyr Trp Cys Phe Gly His Arg Lys Asn Arg Gln Arg Ile
50 55 60
ggg cat gca gtc ctt gtt ccc gaa aga ata cct tct ggc aca gat aat 423
Gly His Ala Val Leu Val Pro Glu Arg Ile Pro Ser Gly Thr Asp Asn
65 70 75
gca aca gta aat tca aca caa gca cct att atc cca ttc cac ttc gtt 471
Ala Thr Val Asn Ser Thr Gln Ala Pro Ile Ile Pro Phe His Phe Val
80 85 90
gca cct ccc tca tct cct gca tct ttc ctt cac tca gaa cct cct tca 519
Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu His Ser Glu Pro Pro Ser
95 100 105
gtt gca caa tcc cca agt gct ata cta tct ctc act ccc ggt ggt cct 567
Val Ala Gln Ser Pro Ser Ala Ile Leu Ser Leu Thr Pro Gly Gly Pro
110 115 120 125
ttc tct atc ttt gcc att gga cct tat gcc cac gaa aca caa tta gtt 615
Phe Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val
130 135 140
tca cca cct gtt ttc tca aca ttc acc aca gaa cca tca acc gct cct 663
Ser Pro Pro Val Phe Ser Thr Phe Thr Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro
145 150 155
ttc act ccc cct cct gaa tct aac cac ttg act aca cct tct tca cct 711
Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Asn His Leu Thr Thr Pro Ser Ser Pro
160 165 170
gaa gtg cca ttt gct caa ctg ctt gac ccc aac aac aaa aat agt gaa 759
Glu Val Pro Phe Ala Gln Leu Leu Asp Pro Asn Asn Lys Asn Ser Glu
175 180 185
acc tat cag agg ttc caa ata cct cag tat gat ttc cac tct tat cag 807
Thr Tyr Gln Arg Phe Gln Ile Pro Gln Tyr Asp Phe His Ser Tyr Gln
190 195 200 205
ctt cat ccc gga agc ccg gtt ggt caa ctc att tca cca aga tct gct 855
Leu His Pro Gly Ser Pro Val Gly Gln Leu Ile Ser Pro Arg Ser Ala
210 215 220
ttc tca gct tct agc aca tca tct cct ttc cct gac act gac act gag 903
Phe Ser Ala Ser Ser Thr Ser Ser Pro Phe Pro Asp Thr Asp Thr Glu
225 230 235
ttt aat tct cgc gcc tcc ctc ctc ctt aac ttt caa aca gat gat aaa 951
Phe Asn Ser Arg Ala Ser Leu Leu Leu Asn Phe Gln Thr Asp Asp Lys
240 245 250
ctg tct act aat gaa aac cat aag tca cat caa ggt tct ggc tct cta 999
Leu Ser Thr Asn Glu Asn His Lys Ser His Gln Gly Ser Gly Ser Leu
255 260 265
acc cca gat tct ata aga tcc aca act caa gct agt ttt ctt cca agt 1047
Thr Pro Asp Ser Ile Arg Ser Thr Thr Gln Ala Ser Phe Leu Pro Ser
270 275 280 285
cac tgg gtc tct att gaa gtg tct gcc caa gaa gta ttc aat tgt gtg 1095
His Trp Val Ser Ile Glu Val Ser Ala Gln Glu Val Phe Asn Cys Val
290 295 300
gaa aac aag gca gtg gca tgg act aaa cca ctt tca aaa ctc aaa act 1143
Glu Asn Lys Ala Val Ala Trp Thr Lys Pro Leu Ser Lys Leu Lys Thr
305 310 315
gat gca ccg gga gaa gat aat tca aga gaa gtc ctt gtc atc gaa act 1191
Asp Ala Pro Gly Glu Asp Asn Ser Arg Glu Val Leu Val Ile Glu Thr
320 325 330
ccc agt gat gca cca caa cag acc gct gac gat gga gat gtg gaa aga 1239
Pro Ser Asp Ala Pro Gln Gln Thr Ala Asp Asp Gly Asp Val Glu Arg
335 340 345
gtt cat cat aag gat gaa tgt ata aca ttt tct gct gct aaa gaa ttc 1287
Val His His Lys Asp Glu Cys Ile Thr Phe Ser Ala Ala Lys Glu Phe
350 355 360 365
aac ttt gat aat gca gaa gga ggg gat tct cct act cct aat tta gtt 1335
Asn Phe Asp Asn Ala Glu Gly Gly Asp Ser Pro Thr Pro Asn Leu Val
370 375 380
gct gac tgg tgg gct aag gag aaa gtt gca agc aag gaa gga gga tcc 1383
Ala Asp Trp Trp Ala Lys Glu Lys Val Ala Ser Lys Glu Gly Gly Ser
385 390 395
tct aat aat tgg tct ttc ttc cca atg att cga ccc ggt gtt ggt taa 1431
Ser Asn Asn Trp Ser Phe Phe Pro Met Ile Arg Pro Gly Val Gly
400 405 410
tcgccaataa ggactcactt agtttagtga ctttcactta acatagcctt gctggaattt 1491
gacatttttt tttttttata aaaaaaattg tgcaattgtg tcacagcagc caacaccagt 1551
acaccacccc tgctaaattg aatcataggc aactaagaat tttacattgg tagatctaac 1611
aaatagaaag gtggagataa ttttgcagac tagctataaa ttttgcaggt aaacctactt 1671
tggattagga atggctttac atttataaca tctccattct ccacacccgt tctttatcct 1731
ttttgtttgt aagtgtaata cagttgtcat caacacattg gttaccaata accaatgatg 1791
attttgattt ttgactatga tgtgtttttt tattgcccct tgccttgact gtaattgtag 1851
gaatgcaatt gcagaacttg gagaagggga ggaaaccttg tgtgaaacat tttagcaa 1909
<210> 9
<211> 412
<212> PRT
<213> 大豆(Glycine max)
<400> 9
Met Arg Gly Ala Asn Gly Gly Ala Val Asn Asn Thr Leu Glu Thr Ile
1 5 10 15
Asn Ala Ala Ala Thr Val Ile Ala Ser Val Glu Asn Arg Leu Asp Gln
20 25 30
Pro His Pro His Val Gln Lys Lys Ser Trp Gly Asn Trp Leu Ser Ile
35 40 45
Tyr Trp Cys Phe Gly His Arg Lys Asn Arg Gln Arg Ile Gly His Ala
50 55 60
Val Leu Val Pro Glu Arg Ile Pro Ser Gly Thr Asp Asn Ala Thr Val
65 70 75 80
Asn Ser Thr Gln Ala Pro Ile Ile Pro Phe His Phe Val Ala Pro Pro
85 90 95
Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu His Ser Glu Pro Pro Ser Val Ala Gln
100 105 110
Ser Pro Ser Ala Ile Leu Ser Leu Thr Pro Gly Gly Pro Phe Ser Ile
115 120 125
Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro Pro
130 135 140
Val Phe Ser Thr Phe Thr Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro
145 150 155 160
Pro Pro Glu Ser Asn His Leu Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro
165 170 175
Phe Ala Gln Leu Leu Asp Pro Asn Asn Lys Asn Ser Glu Thr Tyr Gln
180 185 190
Arg Phe Gln Ile Pro Gln Tyr Asp Phe His Ser Tyr Gln Leu His Pro
195 200 205
Gly Ser Pro Val Gly Gln Leu Ile Ser Pro Arg Ser Ala Phe Ser Ala
210 215 220
Ser Ser Thr Ser Ser Pro Phe Pro Asp Thr Asp Thr Glu Phe Asn Ser
225 230 235 240
Arg Ala Ser Leu Leu Leu Asn Phe Gln Thr Asp Asp Lys Leu Ser Thr
245 250 255
Asn Glu Asn His Lys Ser His Gln Gly Ser Gly Ser Leu Thr Pro Asp
260 265 270
Ser Ile Arg Ser Thr Thr Gln Ala Ser Phe Leu Pro Ser His Trp Val
275 280 285
Ser Ile Glu Val Ser Ala Gln Glu Val Phe Asn Cys Val Glu Asn Lys
290 295 300
Ala Val Ala Trp Thr Lys Pro Leu Ser Lys Leu Lys Thr Asp Ala Pro
305 310 315 320
Gly Glu Asp Asn Ser Arg Glu Val Leu Val Ile Glu Thr Pro Ser Asp
325 330 335
Ala Pro Gln Gln Thr Ala Asp Asp Gly Asp Val Glu Arg Val His His
340 345 350
Lys Asp Glu Cys Ile Thr Phe Ser Ala Ala Lys Glu Phe Asn Phe Asp
355 360 365
Asn Ala Glu Gly Gly Asp Ser Pro Thr Pro Asn Leu Val Ala Asp Trp
370 375 380
Trp Ala Lys Glu Lys Val Ala Ser Lys Glu Gly Gly Ser Ser Asn Asn
385 390 395 400
Trp Ser Phe Phe Pro Met Ile Arg Pro Gly Val Gly
405 410
<210> 10
<211> 2049
<212> DNA
<213> 稻(Oryza sativa)
<220>
<221> CDS
<222> (416)..(1702)
<400> 10
gtcttgtgct tctctcttcc ccggcagcgc gtccatcgaa gtagtagcat actactctct 60
actcctctcc tctcctctcc tccgctttgg tttgctccga tctgcagcga gagcgggagg 120
tcgtcgccgg cgaggaggcg cggcggagga atcctctcct tcctcttctt ggtctgcgag 180
taaagctcgg ccgccgccgg cgacgaactg gtttggggag agccacgtac ggcgccgcct 240
cgaatcgaat cgaattggag gttgatttga ctcgttggtt ggagcgctcc atcgattaag 300
cagacggagt catgcttctt ctttgggtat aaaagtttgg atctcggagg ctcgattcaa 360
tctctggagt gggaacaatc gtttgctcgt ggtcgtggga tagctcctct gcgag atg 418
Met
1
cag agt ggg agc gag atg aga ccc gtg cac aac agt gtc gac acg gtg 466
Gln Ser Gly Ser Glu Met Arg Pro Val His Asn Ser Val Asp Thr Val
5 10 15
aac gcg gct gct gtt gcc att gtt aca gcc gag agc cgc acg caa cct 514
Asn Ala Ala Ala Val Ala Ile Val Thr Ala Glu Ser Arg Thr Gln Pro
20 25 30
cag gca gag ccg cga aga aaa tgg gct gat tgg ttg agt gtg tac ttc 562
Gln Ala Glu Pro Arg Arg Lys Trp Ala Asp Trp Leu Ser Val Tyr Phe
35 40 45
tgc ttt gga tca cag aaa aat ggc cga cgc atc agc cat gct gtt ctt 610
Cys Phe Gly Ser Gln Lys Asn Gly Arg Arg Ile Ser His Ala Val Leu
50 55 60 65
gtc cca gaa cct tta cct ccg agg aca gat gca cct atg cca gaa att 658
Val Pro Glu Pro Leu Pro Pro Arg Thr Asp Ala Pro Met Pro Glu Ile
70 75 80
cca atc cat ccg cca ccc ccg gta ttc ccc ttt gtc gca cct cca tcc 706
Pro Ile His Pro Pro Pro Pro Val Phe Pro Phe Val Ala Pro Pro Ser
85 90 95
tct cct gct tct ttt ctc caa tca gga ggt gca tct att gta caa tca 754
Ser Pro Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Gly Ala Ser Ile Val Gln Ser
100 105 110
cct gtt ggt gct cca tct ttt tcg cct ctc tcg cca aat tct cca tcc 802
Pro Val Gly Ala Pro Ser Phe Ser Pro Leu Ser Pro Asn Ser Pro Ser
115 120 125
ccc act ggg cca ccg tcc atc ttt gct atc gga cca tat gca cat gag 850
Pro Thr Gly Pro Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu
130 135 140 145
aca cag cta gtc tct cct cct gtc ttc tca gcc ttc aca act gaa cct 898
Thr Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Ala Phe Thr Thr Glu Pro
150 155 160
tca aca gct cct ttc act ccc cca cca gag tct gtg cat ctg aca acc 946
Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Val His Leu Thr Thr
165 170 175
cct tcc tca cca gag gtg cca tat gca aag cta ctt acc tca atc aac 994
Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Tyr Ala Lys Leu Leu Thr Ser Ile Asn
180 185 190
aac agc aaa aat gct gaa aca ggt gag ctt cag tca tac cag att tac 1042
Asn Ser Lys Asn Ala Glu Thr Gly Glu Leu Gln Ser Tyr Gln Ile Tyr
195 200 205
cct gag agc cca ata gga cgt ctg ata tct cca agc tca gct tgt tca 1090
Pro Glu Ser Pro Ile Gly Arg Leu Ile Ser Pro Ser Ser Ala Cys Ser
210 215 220 225
ggg act tgc tct cca ttt cct gac cct gag gtg cag act tcc tca cgt 1138
Gly Thr Cys Ser Pro Phe Pro Asp Pro Glu Val Gln Thr Ser Ser Arg
230 235 240
tcc aca ttc ccc tca ttc cca gtt cgt gag cct cca aag ata ctg gat 1186
Ser Thr Phe Pro Ser Phe Pro Val Arg Glu Pro Pro Lys Ile Leu Asp
245 250 255
ggc gag gga att gca aca cag aag ttg ata cct cgc cat atg cgc aat 1234
Gly Glu Gly Ile Ala Thr Gln Lys Leu Ile Pro Arg His Met Arg Asn
260 265 270
ggc ggt tct ctc ttg gat gga cat att tct gct gct gta cca gtc gta 1282
Gly Gly Ser Leu Leu Asp Gly His Ile Ser Ala Ala Val Pro Val Val
275 280 285
gac ttc tct gcc cga ctt caa aat aat gat cat gct atg gat cat cgg 1330
Asp Phe Ser Ala Arg Leu Gln Asn Asn Asp His Ala Met Asp His Arg
290 295 300 305
gtt tca ttt gag tta aca gta gaa gat gta gct cgc tgt ctt gag aag 1378
Val Ser Phe Glu Leu Thr Val Glu Asp Val Ala Arg Cys Leu Glu Lys
310 315 320
aaa acc aac att aat ggg gag tct gct gca gct tct ttt cgc ctt gtg 1426
Lys Thr Asn Ile Asn Gly Glu Ser Ala Ala Ala Ser Phe Arg Leu Val
325 330 335
ccc acc ggt aac gga gat cac att cat ccc aga gaa tcg aat gat aca 1474
Pro Thr Gly Asn Gly Asp His Ile His Pro Arg Glu Ser Asn Asp Thr
340 345 350
aga gca ggg cta tgt gtt gat gaa aca tac cat gat ctg cct gag aaa 1522
Arg Ala Gly Leu Cys Val Asp Glu Thr Tyr His Asp Leu Pro Glu Lys
355 360 365
gca cgg cgc tcc ttg tcc ctt cgt aag gct aaa gaa ttc aag ttc aac 1570
Ala Arg Arg Ser Leu Ser Leu Arg Lys Ala Lys Glu Phe Lys Phe Asn
370 375 380 385
aat gtt gat gct cct agt gtg gag ccg agc gtt gga tca gac tgg tgg 1618
Asn Val Asp Ala Pro Ser Val Glu Pro Ser Val Gly Ser Asp Trp Trp
390 395 400
gca aac gag aaa gtt gct ggg atc aca tca gag cca agg aaa agc tgg 1666
Ala Asn Glu Lys Val Ala Gly Ile Thr Ser Glu Pro Arg Lys Ser Trp
405 410 415
tcc ttc ttc cca gtg gca cag cca ggg gtc agc taa cagttgcact 1712
Ser Phe Phe Pro Val Ala Gln Pro Gly Val Ser
420 425
gaccataatc ttacaagatg aagaaataag cttctgtcat ttttgctcct gctgtttctc 1772
agttccccag ataccatcat cataactgca ggagatgcaa acttatgcaa aatattccag 1832
ttttagcggt aagttggagt tagttagtaa ctcagtgtcc agctaatatc atcataagat 1892
actaaaggtg atgcagattc tggaacctgt tgttataaaa ccataatact tccatggtgt 1952
agcgtctgtt gtatcctcct taactgactg gctgttctga tactgatgct gtttatgtac 2012
ataataaact agcgaaaaga gtagaactct tcctagc 2049
<210> 11
<211> 428
<212> PRT
<213> 稻(Oryza sativa)
<400> 11
Met Gln Ser Gly Ser Glu Met Arg Pro Val His Asn Ser Val Asp Thr
1 5 10 15
Val Asn Ala Ala Ala Val Ala Ile Val Thr Ala Glu Ser Arg Thr Gln
20 25 30
Pro Gln Ala Glu Pro Arg Arg Lys Trp Ala Asp Trp Leu Ser Val Tyr
35 40 45
Phe Cys Phe Gly Ser Gln Lys Asn Gly Arg Arg Ile Ser His Ala Val
50 55 60
Leu Val Pro Glu Pro Leu Pro Pro Arg Thr Asp Ala Pro Met Pro Glu
65 70 75 80
Ile Pro Ile His Pro Pro Pro Pro Val Phe Pro Phe Val Ala Pro Pro
85 90 95
Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu Gln Ser Gly Gly Ala Ser Ile Val Gln
100 105 110
Ser Pro Val Gly Ala Pro Ser Phe Ser Pro Leu Ser Pro Asn Ser Pro
115 120 125
Ser Pro Thr Gly Pro Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His
130 135 140
Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Ala Phe Thr Thr Glu
145 150 155 160
Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Val His Leu Thr
165 170 175
Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Tyr Ala Lys Leu Leu Thr Ser Ile
180 185 190
Asn Asn Ser Lys Asn Ala Glu Thr Gly Glu Leu Gln Ser Tyr Gln Ile
195 200 205
Tyr Pro Glu Ser Pro Ile Gly Arg Leu Ile Ser Pro Ser Ser Ala Cys
210 215 220
Ser Gly Thr Cys Ser Pro Phe Pro Asp Pro Glu Val Gln Thr Ser Ser
225 230 235 240
Arg Ser Thr Phe Pro Ser Phe Pro Val Arg Glu Pro Pro Lys Ile Leu
245 250 255
Asp Gly Glu Gly Ile Ala Thr Gln Lys Leu Ile Pro Arg His Met Arg
260 265 270
Asn Gly Gly Ser Leu Leu Asp Gly His Ile Ser Ala Ala Val Pro Val
275 280 285
Val Asp Phe Ser Ala Arg Leu Gln Asn Asn Asp His Ala Met Asp His
290 295 300
Arg Val Ser Phe Glu Leu Thr Val Glu Asp Val Ala Arg Cys Leu Glu
305 310 315 320
Lys Lys Thr Asn Ile Asn Gly Glu Ser Ala Ala Ala Ser Phe Arg Leu
325 330 335
Val Pro Thr Gly Asn Gly Asp His Ile His Pro Arg Glu Ser Asn Asp
340 345 350
Thr Arg Ala Gly Leu Cys Val Asp Glu Thr Tyr His Asp Leu Pro Glu
355 360 365
Lys Ala Arg Arg Ser Leu Ser Leu Arg Lys Ala Lys Glu Phe Lys Phe
370 375 380
Asn Asn Val Asp Ala Pro Ser Val Glu Pro Ser Val Gly Ser Asp Trp
385 390 395 400
Trp Ala Asn Glu Lys Val Ala Gly Ile Thr Ser Glu Pro Arg Lys Ser
405 410 415
Trp Ser Phe Phe Pro Val Ala Gln Pro Gly Val Ser
420 425
<210> 12
<211> 2131
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> CDS
<222> (359)..(1651)
<400> 12
gcactccctc cctgcccctg ttctctctct cgtggcgacg gcgacggcga cgactgggcg 60
gccgttgctg ccgccctact cgccaggcgc ccaggtattc ttcggcccct tcgccggcga 120
cgagtgtcac caggttcctc gtctccggaa cgcagtgcaa agcagatcga tctcggccca 180
gcaggggcct cacgacttga ctcccaaggg ctcccaacct tgcaggctga ctcgatctct 240
ttggtttcgt ggaccgtgat cagactccag ggctggatcg tgtttcttcc agtgtgcaag 300
cttggatctc gtaggtctgg tttagaaagg accgtgcttg ctctttgctg ccgcaatc 358
atg cag agt ggg ggc gac atg agg cct gtg cac aac agt gtc gat aca 406
Met Gln Ser Gly Gly Asp Met Arg Pro Val His Asn Ser Val Asp Thr
1 5 10 15
gtt aac gct gct gct gtt gcc atc gtc acc gcg gag agc cgc aca cag 454
Val Asn Ala Ala Ala Val Ala Ile Val Thr Ala Glu Ser Arg Thr Gln
20 25 30
cct cct gct gaa cag aga agg aaa tgg gct gac cgg ttg agc gtg tac 502
Pro Pro Ala Glu Gln Arg Arg Lys Trp Ala Asp Arg Leu Ser Val Tyr
35 40 45
ttc tgc ttt gga tca cag aag aat ggc cgg cgc atg cgt gtc aac cat 550
Phe Cys Phe Gly Ser Gln Lys Asn Gly Arg Arg Met Arg Val Asn His
50 55 60
gcc gca ctt gtc cca gaa cct gca cct caa agg aca gat gcg cct gca 598
Ala Ala Leu Val Pro Glu Pro Ala Pro Gln Arg Thr Asp Ala Pro Ala
65 70 75 80
gca gaa att cca aac cac cca ccg cct cct gtg ttc ccc ttt gtg gca 646
Ala Glu Ile Pro Asn His Pro Pro Pro Pro Val Phe Pro Phe Val Ala
85 90 95
ccg cca tcc tct cct gct tct ttc ctt caa tca gaa ccc aca tca atc 694
Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu Gln Ser Glu Pro Thr Ser Ile
100 105 110
gta caa tca cca agg gct gga gct cca gct ttt tcg ccc ctc tca cca 742
Val Gln Ser Pro Arg Ala Gly Ala Pro Ala Phe Ser Pro Leu Ser Pro
115 120 125
aat tcc caa tcc ccg acg ggg cca cca tcc atc ttt gct att ggg ccg 790
Asn Ser Gln Ser Pro Thr Gly Pro Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro
130 135 140
tat gca cat gag aca caa ctc gtc tcg cct cca gtg ttc tcg gcc ttc 838
Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Ala Phe
145 150 155 160
aca act gaa cca tca act gcc cct ttc act cct cct ccg gag tct gtc 886
Thr Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Val
165 170 175
cat ctg aca acc cct tcc tct cca gag gtc cca tat gca aag ctt ctg 934
His Leu Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Tyr Ala Lys Leu Leu
180 185 190
aca tcg atc aac aat agc aag aat ggt gaa gca ggg ggt gat ctc cag 982
Thr Ser Ile Asn Asn Ser Lys Asn Gly Glu Ala Gly Gly Asp Leu Gln
195 200 205
tcg tat cca aac tac cca gac agc cca att ggg cgc ctg ata tct cca 1030
Ser Tyr Pro Asn Tyr Pro Asp Ser Pro Ile Gly Arg Leu Ile Ser Pro
210 215 220
agc tcg ggc tgt tct ggc aca tcc tcc cca ttc cct gac cct gag atg 1078
Ser Ser Gly Cys Ser Gly Thr Ser Ser Pro Phe Pro Asp Pro Glu Met
225 230 235 240
cag gct tct tca cgc agc gct tta cgc ttg ttc cca gtt cgt gag ccc 1126
Gln Ala Ser Ser Arg Ser Ala Leu Arg Leu Phe Pro Val Arg Glu Pro
245 250 255
cct aag ata ttg gat ggc gag ggc gtt gcg aca cag aag ttg ata cct 1174
Pro Lys Ile Leu Asp Gly Glu Gly Val Ala Thr Gln Lys Leu Ile Pro
260 265 270
cgc cat atg cgc aac ggt ggg tcc ctc ttg gat ggc cag atc tca gca 1222
Arg His Met Arg Asn Gly Gly Ser Leu Leu Asp Gly Gln Ile Ser Ala
275 280 285
gct gta cca gtt gtg gac ttc tct gcc cga ctt caa ccc aac gag cac 1270
Ala Val Pro Val Val Asp Phe Ser Ala Arg Leu Gln Pro Asn Glu His
290 295 300
gca atg gat cac cgg gtg tca ttc gag ttg acc gtc gaa gat gtc gcg 1318
Ala Met Asp His Arg Val Ser Phe Glu Leu Thr Val Glu Asp Val Ala
305 310 315 320
cgc tgc ctt gag aag aag act gca atc tcc ggg gat tct ggc acg gca 1366
Arg Cys Leu Glu Lys Lys Thr Ala Ile Ser Gly Asp Ser Gly Thr Ala
325 330 335
tca ttc cac ctt gca ccg acc ggc agc ggc gac cac cac aga gaa tcc 1414
Ser Phe His Leu Ala Pro Thr Gly Ser Gly Asp His His Arg Glu Ser
340 345 350
aac gag gca agg gca ggg ctc tac gtc gac gaa tca tac cat gac ttg 1462
Asn Glu Ala Arg Ala Gly Leu Tyr Val Asp Glu Ser Tyr His Asp Leu
355 360 365
ccc gag aaa gcg agg cgg tcc ctg tcc ctg cgc ctg gcc aaa gag ttc 1510
Pro Glu Lys Ala Arg Arg Ser Leu Ser Leu Arg Leu Ala Lys Glu Phe
370 375 380
aat ttc aac aac gtc gac gtc ggt agc gtg gag ccg agc gtg gga tcc 1558
Asn Phe Asn Asn Val Asp Val Gly Ser Val Glu Pro Ser Val Gly Ser
385 390 395 400
gac tgg tgg gcg aac gag aaa gtc gcc ggg atg aca act gag cca aaa 1606
Asp Trp Trp Ala Asn Glu Lys Val Ala Gly Met Thr Thr Glu Pro Lys
405 410 415
aag aac tgg tct ttc cac ccg gtg gtg cag cct ggg gtc agc taa 1651
Lys Asn Trp Ser Phe His Pro Val Val Gln Pro Gly Val Ser
420 425 430
cctttgcact gaccataatg atcttataca gggatgaagg aattagcttc ttctgcttct 1711
gcttctgctt cagtggtcga ttccttaggg atgacttgcc agcttgttct aaacatgcag 1771
ctagtggtaa gttctggatt tagatagtaa taagtaatgg ggtgtccacc gtctaatatc 1831
gtcatgggat actaaaggtt tttattctgg gagatgtgac aaaccgcaaa ctctttggtt 1891
aggggtcggt cggaactgtc ctgttcgtct gttttatcct gataccggtg ctgtgttgtg 1951
tatgtacata atgaagtagt ttttttaaaa aaaagtcaat taaaagggta gaacagtttc 2011
cttcgataag ttgccagatg ctaccaaatt gcttgtgatt gttccctgcc cgttcatgat 2071
attgttatta cagaatttgt gagagaggaa acttctggga tttttctgaa aaaaaaaaaa 2131
<210> 13
<211> 430
<212> PRT
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 13
Met Gln Ser Gly Gly Asp Met Arg Pro Val His Asn Ser Val Asp Thr
1 5 10 15
Val Asn Ala Ala Ala Val Ala Ile Val Thr Ala Glu Ser Arg Thr Gln
20 25 30
Pro Pro Ala Glu Gln Arg Arg Lys Trp Ala Asp Arg Leu Ser Val Tyr
35 40 45
Phe Cys Phe Gly Ser Gln Lys Asn Gly Arg Arg Met Arg Val Asn His
50 55 60
Ala Ala Leu Val Pro Glu Pro Ala Pro Gln Arg Thr Asp Ala Pro Ala
65 70 75 80
Ala Glu Ile Pro Asn His Pro Pro Pro Pro Val Phe Pro Phe Val Ala
85 90 95
Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu Gln Ser Glu Pro Thr Ser Ile
100 105 110
Val Gln Ser Pro Arg Ala Gly Ala Pro Ala Phe Ser Pro Leu Ser Pro
115 120 125
Asn Ser Gln Ser Pro Thr Gly Pro Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro
130 135 140
Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Ala Phe
145 150 155 160
Thr Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Val
165 170 175
His Leu Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Tyr Ala Lys Leu Leu
180 185 190
Thr Ser Ile Asn Asn Ser Lys Asn Gly Glu Ala Gly Gly Asp Leu Gln
195 200 205
Ser Tyr Pro Asn Tyr Pro Asp Ser Pro Ile Gly Arg Leu Ile Ser Pro
210 215 220
Ser Ser Gly Cys Ser Gly Thr Ser Ser Pro Phe Pro Asp Pro Glu Met
225 230 235 240
Gln Ala Ser Ser Arg Ser Ala Leu Arg Leu Phe Pro Val Arg Glu Pro
245 250 255
Pro Lys Ile Leu Asp Gly Glu Gly Val Ala Thr Gln Lys Leu Ile Pro
260 265 270
Arg His Met Arg Asn Gly Gly Ser Leu Leu Asp Gly Gln Ile Ser Ala
275 280 285
Ala Val Pro Val Val Asp Phe Ser Ala Arg Leu Gln Pro Asn Glu His
290 295 300
Ala Met Asp His Arg Val Ser Phe Glu Leu Thr Val Glu Asp Val Ala
305 310 315 320
Arg Cys Leu Glu Lys Lys Thr Ala Ile Ser Gly Asp Ser Gly Thr Ala
325 330 335
Ser Phe His Leu Ala Pro Thr Gly Ser Gly Asp His His Arg Glu Ser
340 345 350
Asn Glu Ala Arg Ala Gly Leu Tyr Val Asp Glu Ser Tyr His Asp Leu
355 360 365
Pro Glu Lys Ala Arg Arg Ser Leu Ser Leu Arg Leu Ala Lys Glu Phe
370 375 380
Asn Phe Asn Asn Val Asp Val Gly Ser Val Glu Pro Ser Val Gly Ser
385 390 395 400
Asp Trp Trp Ala Asn Glu Lys Val Ala Gly Met Thr Thr Glu Pro Lys
405 410 415
Lys Asn Trp Ser Phe His Pro Val Val Gln Pro Gly Val Ser
420 425 430
<210> 14
<211> 1029
<212> DNA
<213> 萝卜(Raphanus sativus)
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1029)
<400> 14
atg aga ggc ggc gcg agt gga aac aac gtt ttg gag act ata aac gca 48
Met Arg Gly Gly Ala Ser Gly Asn Asn Val Leu Glu Thr Ile Asn Ala
1 5 10 15
gcc gct act gcg ttc gct tcc tct gat gat cgt gtt cat cac caa cct 96
Ala Ala Thr Ala Phe Ala Ser Ser Asp Asp Arg Val His His Gln Pro
20 25 30
tcc ccg att cat aga aga aaa cga atc ggg aaa gct gct ctt gct cct 144
Ser Pro Ile His Arg Arg Lys Arg Ile Gly Lys Ala Ala Leu Ala Pro
35 40 45
gaa ccg gtt cct acc gat tcc aca tcc aat tcc ggt tat cgt tcg gtt 192
Glu Pro Val Pro Thr Asp Ser Thr Ser Asn Ser Gly Tyr Arg Ser Val
50 55 60
atg acg gct ctt cct ttc ata gcc cca cct tcc tct cca gct tcc ttc 240
Met Thr Ala Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe
65 70 75 80
ttc caa tca gaa cct cct tcc gct aca cag tca cct gta ggg atc ctc 288
Phe Gln Ser Glu Pro Pro Ser Ala Thr Gln Ser Pro Val Gly Ile Leu
85 90 95
tcc ttt agt cct cta cct tct aac agc cac aac aac aac aac aac agc 336
Ser Phe Ser Pro Leu Pro Ser Asn Ser His Asn Asn Asn Asn Asn Ser
100 105 110
gaa gaa cgt cct tcg atc ttc gcc atc gga cct tac gct cac gaa cct 384
Glu Glu Arg Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Pro
115 120 125
cag ctg gtt tct cct ccg gtt ttc tct act tac aca acc gaa ccg tct 432
Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Thr Tyr Thr Thr Glu Pro Ser
130 135 140
tca gct ccg gtc acg ccg cct ctc gac gag tct ttc tac tta acc acc 480
Ser Ala Pro Val Thr Pro Pro Leu Asp Glu Ser Phe Tyr Leu Thr Thr
145 150 155 160
acc aca ccg tct tcg cct gaa gtc cct ttc gct cag ctc ttt aac tcc 528
Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala Gln Leu Phe Asn Ser
165 170 175
agc agt aac tac ggt gtc agg tct ccg gtg tct aac tac gag ttt cag 576
Ser Ser Asn Tyr Gly Val Arg Ser Pro Val Ser Asn Tyr Glu Phe Gln
180 185 190
ttt tac caa ctt cct ccc ggt agt cca ctc gct cag ctt atc tcc ccc 624
Phe Tyr Gln Leu Pro Pro Gly Ser Pro Leu Ala Gln Leu Ile Ser Pro
195 200 205
agc tcg gtt atg tcc ggt tct ggt gcg act tct ccg ttt cct gac gga 672
Ser Ser Val Met Ser Gly Ser Gly Ala Thr Ser Pro Phe Pro Asp Gly
210 215 220
ctc gct cag ttt caa gtc tct gat cca cca aag ctg ctg agc cct ggt 720
Leu Ala Gln Phe Gln Val Ser Asp Pro Pro Lys Leu Leu Ser Pro Gly
225 230 235 240
aaa ctg cgt tgc tcc aag tct gtt aca act cct aaa gag cag aac aag 768
Lys Leu Arg Cys Ser Lys Ser Val Thr Thr Pro Lys Glu Gln Asn Lys
245 250 255
att gtg aga ccg aac aaa ccg gtt tcg ttc gat ctt gat gcg gat cat 816
Ile Val Arg Pro Asn Lys Pro Val Ser Phe Asp Leu Asp Ala Asp His
260 265 270
ttc att aga tgc gtt gat aag aag ctg aga aca acg ttc cct gaa gcg 864
Phe Ile Arg Cys Val Asp Lys Lys Leu Arg Thr Thr Phe Pro Glu Ala
275 280 285
tct gat caa gaa gca gct caa cat tcc tcc tcc gga tcc aat aaa gaa 912
Ser Asp Gln Glu Ala Ala Gln His Ser Ser Ser Gly Ser Asn Lys Glu
290 295 300
ttc gat ttc ggc acc acc gat gag ata cat ttg acc ggt gat gat gag 960
Phe Asp Phe Gly Thr Thr Asp Glu Ile His Leu Thr Gly Asp Asp Glu
305 310 315 320
cat aga gat tcg acc aag aac agc agc gat tgg tcc ttc cct gtg atg 1008
His Arg Asp Ser Thr Lys Asn Ser Ser Asp Trp Ser Phe Pro Val Met
325 330 335
caa tca ggc aca ctt agc taa 1029
Gln Ser Gly Thr Leu Ser
340
<210> 15
<211> 342
<212> PRT
<213> 萝卜(Raphanus sativus)
<400> 15
Met Arg Gly Gly Ala Ser Gly Asn Asn Val Leu Glu Thr Ile Asn Ala
1 5 10 15
Ala Ala Thr Ala Phe Ala Ser Ser Asp Asp Arg Val His His Gln Pro
20 25 30
Ser Pro Ile His Arg Arg Lys Arg Ile Gly Lys Ala Ala Leu Ala Pro
35 40 45
Glu Pro Val Pro Thr Asp Ser Thr Ser Asn Ser Gly Tyr Arg Ser Val
50 55 60
Met Thr Ala Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe
65 70 75 80
Phe Gln Ser Glu Pro Pro Ser Ala Thr Gln Ser Pro Val Gly Ile Leu
85 90 95
Ser Phe Ser Pro Leu Pro Ser Asn Ser His Asn Asn Asn Asn Asn Ser
100 105 110
Glu Glu Arg Pro Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Pro
115 120 125
Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Thr Tyr Thr Thr Glu Pro Ser
130 135 140
Ser Ala Pro Val Thr Pro Pro Leu Asp Glu Ser Phe Tyr Leu Thr Thr
145 150 155 160
Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala Gln Leu Phe Asn Ser
165 170 175
Ser Ser Asn Tyr Gly Val Arg Ser Pro Val Ser Asn Tyr Glu Phe Gln
180 185 190
Phe Tyr Gln Leu Pro Pro Gly Ser Pro Leu Ala Gln Leu Ile Ser Pro
195 200 205
Ser Ser Val Met Ser Gly Ser Gly Ala Thr Ser Pro Phe Pro Asp Gly
210 215 220
Leu Ala Gln Phe Gln Val Ser Asp Pro Pro Lys Leu Leu Ser Pro Gly
225 230 235 240
Lys Leu Arg Cys Ser Lys Ser Val Thr Thr Pro Lys Glu Gln Asn Lys
245 250 255
Ile Val Arg Pro Asn Lys Pro Val Ser Phe Asp Leu Asp Ala Asp His
260 265 270
Phe Ile Arg Cys Val Asp Lys Lys Leu Arg Thr Thr Phe Pro Glu Ala
275 280 285
Ser Asp Gln Glu Ala Ala Gln His Ser Ser Ser Gly Ser Asn Lys Glu
290 295 300
Phe Asp Phe Gly Thr Thr Asp Glu Ile His Leu Thr Gly Asp Asp Glu
305 310 315 320
His Arg Asp Ser Thr Lys Asn Ser Ser Asp Trp Ser Phe Pro Val Met
325 330 335
Gln Ser Gly Thr Leu Ser
340
<210> 16
<211> 2350
<212> DNA
<213> 杨(Populus trichocarpa)
<220>
<221> CDS
<222> (298)..(1821)
<400> 16
ggaaaagagt taatgggatt aaaaacaaca aacaagagga taagaaccgt agagaagaga 60
gagtgtgcat gtttttcgtt ttcatgatct gaaaaaacag aacacaactc aacacttctc 120
ttctgttctg ttctgctgtc ttgttttttt tttgtttttt tttttaaaca aaaatctctt 180
cttttttcac ttcttttatc taagaaaaca gcagccctct ttggttttgg tatgaattta 240
attccctgca tgtgttttat gggtggtgat gtttgctgtt gttgttgtta atcaaag 297
atg aga agt gtc aat aat agc agc atc gaa acc gtt aac gcc gct gct 345
Met Arg Ser Val Asn Asn Ser Ser Ile Glu Thr Val Asn Ala Ala Ala
1 5 10 15
acc gcc atc gtc tcc gcc gag tct cgt gtc cag cca tcc tct tct tct 393
Thr Ala Ile Val Ser Ala Glu Ser Arg Val Gln Pro Ser Ser Ser Ser
20 25 30
gtt caa aaa aga agg tgg gga ggc tgc tgg agt ctc tac tgg tgt ttt 441
Val Gln Lys Arg Arg Trp Gly Gly Cys Trp Ser Leu Tyr Trp Cys Phe
35 40 45
ggt tct cac ggt tct cac aag aat agc aag cga att ggt cat gct gtc 489
Gly Ser His Gly Ser His Lys Asn Ser Lys Arg Ile Gly His Ala Val
50 55 60
ctt gtt cct gaa cca gaa gta cca gga gca gta tcc tct tca act gaa 537
Leu Val Pro Glu Pro Glu Val Pro Gly Ala Val Ser Ser Ser Thr Glu
65 70 75 80
aat cag act cag tca act ccc att ctg ctg ccc ttt att gct cct ccc 585
Asn Gln Thr Gln Ser Thr Pro Ile Leu Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro
85 90 95
tct tct cct gct tct ttc ctc cag tct gat ccc cct tcc tcc act caa 633
Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu Gln Ser Asp Pro Pro Ser Ser Thr Gln
100 105 110
tca cca gca gga ttg ctc tct ctc acg tcc ctc tcg gcg aat gct tat 681
Ser Pro Ala Gly Leu Leu Ser Leu Thr Ser Leu Ser Ala Asn Ala Tyr
115 120 125
tcc cca cgc gga cct gca tcc att ttt gcc ata ggc cct tat gca cat 729
Ser Pro Arg Gly Pro Ala Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His
130 135 140
gaa acc cag cta gtc aca cca cct gtg ttt tct gct ttc acc act gag 777
Glu Thr Gln Leu Val Thr Pro Pro Val Phe Ser Ala Phe Thr Thr Glu
145 150 155 160
cca tcc act gct cca ttc act ccc cct ccg gag tct gtt caa ctt act 825
Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Val Gln Leu Thr
165 170 175
aca cct tca tct cct gaa gtg cca ttt gct caa ctc ttg acg tcc tct 873
Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala Gln Leu Leu Thr Ser Ser
180 185 190
ctg gaa cgt gct cga aga aat agt ggc ccc aat caa aag ttt tcg tta 921
Leu Glu Arg Ala Arg Arg Asn Ser Gly Pro Asn Gln Lys Phe Ser Leu
195 200 205
tct cac tat gaa ttt cag tca tat cat ctg tac cca gga agc cca ggt 969
Ser His Tyr Glu Phe Gln Ser Tyr His Leu Tyr Pro Gly Ser Pro Gly
210 215 220
ggt caa atc atc tca cca gga tca gca atc tcg aat tca ggt acc tct 1017
Gly Gln Ile Ile Ser Pro Gly Ser Ala Ile Ser Asn Ser Gly Thr Ser
225 230 235 240
tct ccg ttc ccc gat aga cat cct atg ctt gag ttc cga atg ggt gag 1065
Ser Pro Phe Pro Asp Arg His Pro Met Leu Glu Phe Arg Met Gly Glu
245 250 255
gct ccc aag ctc ctg ggc ttc gaa cat ttt agt act cgt aaa tgg ggt 1113
Ala Pro Lys Leu Leu Gly Phe Glu His Phe Ser Thr Arg Lys Trp Gly
260 265 270
tca aga ttg ggt tct gga tct ttg aca ccg gat gcg act cca gat ggc 1161
Ser Arg Leu Gly Ser Gly Ser Leu Thr Pro Asp Ala Thr Pro Asp Gly
275 280 285
atg gga tta tcc agg ctc ggt tcc ggt acg gtg acc cca gat ggc atg 1209
Met Gly Leu Ser Arg Leu Gly Ser Gly Thr Val Thr Pro Asp Gly Met
290 295 300
ggg cta tcg agg ctc tgt tct gga act gcc act cca gat ggt gcg ggc 1257
Gly Leu Ser Arg Leu Cys Ser Gly Thr Ala Thr Pro Asp Gly Ala Gly
305 310 315 320
ctg cgt tca agg ctt ggc tca gga act ttg acc cct gat tgc ttc gtg 1305
Leu Arg Ser Arg Leu Gly Ser Gly Thr Leu Thr Pro Asp Cys Phe Val
325 330 335
cct gcc tcg caa att ggt ttc ctt ttg gag aac caa att tct gag gtt 1353
Pro Ala Ser Gln Ile Gly Phe Leu Leu Glu Asn Gln Ile Ser Glu Val
340 345 350
gca tca ctt acc aac tca gaa aat gga tca aaa acc gaa gaa aat gtg 1401
Ala Ser Leu Thr Asn Ser Glu Asn Gly Ser Lys Thr Glu Glu Asn Val
355 360 365
gtt cac cac aga gtc tcc ttt gag ttg agc ggt gaa gag gtt gcg cgt 1449
Val His His Arg Val Ser Phe Glu Leu Ser Gly Glu Glu Val Ala Arg
370 375 380
tgt ctt gaa att aag tca gtg gca tcc act aga act ttc cca gag tat 1497
Cys Leu Glu Ile Lys Ser Val Ala Ser Thr Arg Thr Phe Pro Glu Tyr
385 390 395 400
cca cag gac acc atg ccc gaa gac cca gtg aga ggt gat agg tta gca 1545
Pro Gln Asp Thr Met Pro Glu Asp Pro Val Arg Gly Asp Arg Leu Ala
405 410 415
atg aat ggt gaa cgt tgc tta caa aac ggg gaa gct tcc agt gaa atg 1593
Met Asn Gly Glu Arg Cys Leu Gln Asn Gly Glu Ala Ser Ser Glu Met
420 425 430
cct gag aaa aat tca gaa gaa aca gaa gag gat cac gtc tat aga aag 1641
Pro Glu Lys Asn Ser Glu Glu Thr Glu Glu Asp His Val Tyr Arg Lys
435 440 445
cat cga tcc atc act ctt ggg tca ata aaa gag ttt aac ttt gat aac 1689
His Arg Ser Ile Thr Leu Gly Ser Ile Lys Glu Phe Asn Phe Asp Asn
450 455 460
tct aaa gga gaa gtc tct gat aag cct gct atc agc tct gag tgg tgg 1737
Ser Lys Gly Glu Val Ser Asp Lys Pro Ala Ile Ser Ser Glu Trp Trp
465 470 475 480
gca aat gaa acg att gct ggg aag gaa gct aga cct gcc aac agc tgg 1785
Ala Asn Glu Thr Ile Ala Gly Lys Glu Ala Arg Pro Ala Asn Ser Trp
485 490 495
act ttc ttt cct ctg cta cag cca gag gtc agc tga cattacaatc 1831
Thr Phe Phe Pro Leu Leu Gln Pro Glu Val Ser
500 505
atgaaaaaaa gacctctctt ccatatttgg acagtgaagc aaatatgttg tattgaaagc 1891
tagcctgtga gatgcaagtc caaagccagc actgttttgg aaactctgat taccatagtc 1951
tgcaatcaca tgattgaagg atagatttca cagtactatt ttctcaagtg accaaaagca 2011
caaattctta gaggaagtag tttgtaggga tccttggtgt gggcactgat agatcattct 2071
tttttttatc ttttccttat tttagttaca caaaaatagc atttgcatat aggtattgta 2131
ctctggatat tttttttctt tcctttttcc ttttcatgtg taataataag agaatttggt 2191
ttccttcgac aggtgccctc actatagtga ttcggtgtct ctgtggctgt atatgcccct 2251
cctcgtcttg tttctgcagg ttctctcgtt atagaatcct gatgaattga ttatatatat 2311
tagaaagata agtttgatat tgatctatct acattttta 2350
<210> 17
<211> 507
<212> PRT
<213> 杨(Populus trichocarpa)
<400> 17
Met Arg Ser Val Asn Asn Ser Ser Ile Glu Thr Val Asn Ala Ala Ala
1 5 10 15
Thr Ala Ile Val Ser Ala Glu Ser Arg Val Gln Pro Ser Ser Ser Ser
20 25 30
Val Gln Lys Arg Arg Trp Gly Gly Cys Trp Ser Leu Tyr Trp Cys Phe
35 40 45
Gly Ser His Gly Ser His Lys Asn Ser Lys Arg Ile Gly His Ala Val
50 55 60
Leu Val Pro Glu Pro Glu Val Pro Gly Ala Val Ser Ser Ser Thr Glu
65 70 75 80
Asn Gln Thr Gln Ser Thr Pro Ile Leu Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro
85 90 95
Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu Gln Ser Asp Pro Pro Ser Ser Thr Gln
100 105 110
Ser Pro Ala Gly Leu Leu Ser Leu Thr Ser Leu Ser Ala Asn Ala Tyr
115 120 125
Ser Pro Arg Gly Pro Ala Ser Ile Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His
130 135 140
Glu Thr Gln Leu Val Thr Pro Pro Val Phe Ser Ala Phe Thr Thr Glu
145 150 155 160
Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Val Gln Leu Thr
165 170 175
Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala Gln Leu Leu Thr Ser Ser
180 185 190
Leu Glu Arg Ala Arg Arg Asn Ser Gly Pro Asn Gln Lys Phe Ser Leu
195 200 205
Ser His Tyr Glu Phe Gln Ser Tyr His Leu Tyr Pro Gly Ser Pro Gly
210 215 220
Gly Gln Ile Ile Ser Pro Gly Ser Ala Ile Ser Asn Ser Gly Thr Ser
225 230 235 240
Ser Pro Phe Pro Asp Arg His Pro Met Leu Glu Phe Arg Met Gly Glu
245 250 255
Ala Pro Lys Leu Leu Gly Phe Glu His Phe Ser Thr Arg Lys Trp Gly
260 265 270
Ser Arg Leu Gly Ser Gly Ser Leu Thr Pro Asp Ala Thr Pro Asp Gly
275 280 285
Met Gly Leu Ser Arg Leu Gly Ser Gly Thr Val Thr Pro Asp Gly Met
290 295 300
Gly Leu Ser Arg Leu Cys Ser Gly Thr Ala Thr Pro Asp Gly Ala Gly
305 310 315 320
Leu Arg Ser Arg Leu Gly Ser Gly Thr Leu Thr Pro Asp Cys Phe Val
325 330 335
Pro Ala Ser Gln Ile Gly Phe Leu Leu Glu Asn Gln Ile Ser Glu Val
340 345 350
Ala Ser Leu Thr Asn Ser Glu Asn Gly Ser Lys Thr Glu Glu Asn Val
355 360 365
Val His His Arg Val Ser Phe Glu Leu Ser Gly Glu Glu Val Ala Arg
370 375 380
Cys Leu Glu Ile Lys Ser Val Ala Ser Thr Arg Thr Phe Pro Glu Tyr
385 390 395 400
Pro Gln Asp Thr Met Pro Glu Asp Pro Val Arg Gly Asp Arg Leu Ala
405 410 415
Met Asn Gly Glu Arg Cys Leu Gln Asn Gly Glu Ala Ser Ser Glu Met
420 425 430
Pro Glu Lys Asn Ser Glu Glu Thr Glu Glu Asp His Val Tyr Arg Lys
435 440 445
His Arg Ser Ile Thr Leu Gly Ser Ile Lys Glu Phe Asn Phe Asp Asn
450 455 460
Ser Lys Gly Glu Val Ser Asp Lys Pro Ala Ile Ser Ser Glu Trp Trp
465 470 475 480
Ala Asn Glu Thr Ile Ala Gly Lys Glu Ala Arg Pro Ala Asn Ser Trp
485 490 495
Thr Phe Phe Pro Leu Leu Gln Pro Glu Val Ser
500 505
<210> 18
<211> 1523
<212> DNA
<213> 葡萄(Vitis vinifera)
<220>
<221> CDS
<222> (177)..(1523)
<400> 18
gaatctcgtg tgattttcgt tttcccgatc ggactcacag ctccatatcg gaatctcgcc 60
ggaaaacttg ctgtttctta tggtgaattt taagcacaca tagccggaat tagaagtttt 120
agttgtcgga ggaggtttga gttggaaata gggggatttt gtgatttata aggaag atg 179
Met
1
aga agt gtg aat aat agc gta gag act ata aac gcc gcg gcc act gcg 227
Arg Ser Val Asn Asn Ser Val Glu Thr Ile Asn Ala Ala Ala Thr Ala
5 10 15
atc gtc tcg gcc gag agt cga gtc cag ccg act acg gtt cag aag aga 275
Ile Val Ser Ala Glu Ser Arg Val Gln Pro Thr Thr Val Gln Lys Arg
20 25 30
aga tgg ggt agc tgc ttg agt tta tac tgg tgc ttt gga tct cat aga 323
Arg Trp Gly Ser Cys Leu Ser Leu Tyr Trp Cys Phe Gly Ser His Arg
35 40 45
cac agc aag cga ata ggt cat gct gtt ctt gtt cct gaa cca atg gtg 371
His Ser Lys Arg Ile Gly His Ala Val Leu Val Pro Glu Pro Met Val
50 55 60 65
cca gga gct gtc gct cct gct tct gaa aac ctg aac ctc tca acc agc 419
Pro Gly Ala Val Ala Pro Ala Ser Glu Asn Leu Asn Leu Ser Thr Ser
70 75 80
att gta ctg cct ttc att gca cct ccc tct tct cct gca tct ttc ctc 467
Ile Val Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu
85 90 95
caa tca gat cct ccg tcc tcc act cag tca cca gct gga ttt cta tcc 515
Gln Ser Asp Pro Pro Ser Ser Thr Gln Ser Pro Ala Gly Phe Leu Ser
100 105 110
ctc act gcc ctt tct gtc aat gcc tat tcc cca agt ggt cct gcc tcc 563
Leu Thr Ala Leu Ser Val Asn Ala Tyr Ser Pro Ser Gly Pro Ala Ser
115 120 125
atg ttt gcc att ggc cct tat gcc cat gaa act caa cta gtc tca cca 611
Met Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro
130 135 140 145
cct gta ttt tct acc ttc ccc aca gag cca tcg act gct cct ttt act 659
Pro Val Phe Ser Thr Phe Pro Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr
150 155 160
ccc cct cca gaa tct gtg caa tta act acg cct tca tca cct gaa gtt 707
Pro Pro Pro Glu Ser Val Gln Leu Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val
165 170 175
cca ttt gct cag ctg ctg aca tct tca ctg gac cgc tct cga agg aac 755
Pro Phe Ala Gln Leu Leu Thr Ser Ser Leu Asp Arg Ser Arg Arg Asn
180 185 190
agt gga acc aat cag aag ttg tca ctg tcc aat tat gaa ttc cag cct 803
Ser Gly Thr Asn Gln Lys Leu Ser Leu Ser Asn Tyr Glu Phe Gln Pro
195 200 205
tat cag cta tac cca gaa agc cca gtt ggc cac ctt ata tca cca ata 851
Tyr Gln Leu Tyr Pro Glu Ser Pro Val Gly His Leu Ile Ser Pro Ile
210 215 220 225
tca aat tct ggt acc tct tct cct ttc cca gat aga cgc cca att gta 899
Ser Asn Ser Gly Thr Ser Ser Pro Phe Pro Asp Arg Arg Pro Ile Val
230 235 240
gag gct ccc aag ctc ttg ggt ttt gaa cat ttt tcc acc cgc aga tgg 947
Glu Ala Pro Lys Leu Leu Gly Phe Glu His Phe Ser Thr Arg Arg Trp
245 250 255
ggt tca agg ctg ggt tct gga tct ttg aca cca gat ggt gca ggg cct 995
Gly Ser Arg Leu Gly Ser Gly Ser Leu Thr Pro Asp Gly Ala Gly Pro
260 265 270
gcc tcc cga gac agt ttc ctt ctg gag aac cag atc tct gag gtg gca 1043
Ala Ser Arg Asp Ser Phe Leu Leu Glu Asn Gln Ile Ser Glu Val Ala
275 280 285
tcc ctt gcc aac tct gag agt gga tct caa aat ggt gaa act gta atc 1091
Ser Leu Ala Asn Ser Glu Ser Gly Ser Gln Asn Gly Glu Thr Val Ile
290 295 300 305
gat cat agg gtc tca ttt gag ttg gct ggt gaa gat gtt gca gtt tgt 1139
Asp His Arg Val Ser Phe Glu Leu Ala Gly Glu Asp Val Ala Val Cys
310 315 320
gtt gaa aag aaa cca gtg gca tca gct gaa acc gtc caa aac act ctt 1187
Val Glu Lys Lys Pro Val Ala Ser Ala Glu Thr Val Gln Asn Thr Leu
325 330 335
cag gat ata gtt gaa gaa ggc gaa att gaa aga gaa aga gat ggg att 1235
Gln Asp Ile Val Glu Glu Gly Glu Ile Glu Arg Glu Arg Asp Gly Ile
340 345 350
tca gag agt aca gaa aat tgt tgt gag ttc tgt gtc gga gaa gct ctt 1283
Ser Glu Ser Thr Glu Asn Cys Cys Glu Phe Cys Val Gly Glu Ala Leu
355 360 365
aaa gct gcg tcc gag aaa gct tca gct gaa gga gag gaa gag cag tgc 1331
Lys Ala Ala Ser Glu Lys Ala Ser Ala Glu Gly Glu Glu Glu Gln Cys
370 375 380 385
cat aaa aag cat cct ccg atc aga cat ggt tca atc aaa gag ttc aat 1379
His Lys Lys His Pro Pro Ile Arg His Gly Ser Ile Lys Glu Phe Asn
390 395 400
ttt gac aac aca aag gga gaa gtc tca gcc aag ccg aac atc atc ggt 1427
Phe Asp Asn Thr Lys Gly Glu Val Ser Ala Lys Pro Asn Ile Ile Gly
405 410 415
tct gag tgg tgg gta aac gaa aag gtt gtc ggg aaa gga aca ggg ccc 1475
Ser Glu Trp Trp Val Asn Glu Lys Val Val Gly Lys Gly Thr Gly Pro
420 425 430
caa acc aac tgg act ttc ttc cca ttg ctg cag ccc gga atc agt tga 1523
Gln Thr Asn Trp Thr Phe Phe Pro Leu Leu Gln Pro Gly Ile Ser
435 440 445
<210> 19
<211> 448
<212> PRT
<213> 葡萄(Vitis vinifera)
<400> 19
Met Arg Ser Val Asn Asn Ser Val Glu Thr Ile Asn Ala Ala Ala Thr
1 5 10 15
Ala Ile Val Ser Ala Glu Ser Arg Val Gln Pro Thr Thr Val Gln Lys
20 25 30
Arg Arg Trp Gly Ser Cys Leu Ser Leu Tyr Trp Cys Phe Gly Ser His
35 40 45
Arg His Ser Lys Arg Ile Gly His Ala Val Leu Val Pro Glu Pro Met
50 55 60
Val Pro Gly Ala Val Ala Pro Ala Ser Glu Asn Leu Asn Leu Ser Thr
65 70 75 80
Ser Ile Val Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe
85 90 95
Leu Gln Ser Asp Pro Pro Ser Ser Thr Gln Ser Pro Ala Gly Phe Leu
100 105 110
Ser Leu Thr Ala Leu Ser Val Asn Ala Tyr Ser Pro Ser Gly Pro Ala
115 120 125
Ser Met Phe Ala Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val Ser
130 135 140
Pro Pro Val Phe Ser Thr Phe Pro Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe
145 150 155 160
Thr Pro Pro Pro Glu Ser Val Gln Leu Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu
165 170 175
Val Pro Phe Ala Gln Leu Leu Thr Ser Ser Leu Asp Arg Ser Arg Arg
180 185 190
Asn Ser Gly Thr Asn Gln Lys Leu Ser Leu Ser Asn Tyr Glu Phe Gln
195 200 205
Pro Tyr Gln Leu Tyr Pro Glu Ser Pro Val Gly His Leu Ile Ser Pro
210 215 220
Ile Ser Asn Ser Gly Thr Ser Ser Pro Phe Pro Asp Arg Arg Pro Ile
225 230 235 240
Val Glu Ala Pro Lys Leu Leu Gly Phe Glu His Phe Ser Thr Arg Arg
245 250 255
Trp Gly Ser Arg Leu Gly Ser Gly Ser Leu Thr Pro Asp Gly Ala Gly
260 265 270
Pro Ala Ser Arg Asp Ser Phe Leu Leu Glu Asn Gln Ile Ser Glu Val
275 280 285
Ala Ser Leu Ala Asn Ser Glu Ser Gly Ser Gln Asn Gly Glu Thr Val
290 295 300
Ile Asp His Arg Val Ser Phe Glu Leu Ala Gly Glu Asp Val Ala Val
305 310 315 320
Cys Val Glu Lys Lys Pro Val Ala Ser Ala Glu Thr Val Gln Asn Thr
325 330 335
Leu Gln Asp Ile Val Glu Glu Gly Glu Ile Glu Arg Glu Arg Asp Gly
340 345 350
Ile Ser Glu Ser Thr Glu Asn Cys Cys Glu Phe Cys Val Gly Glu Ala
355 360 365
Leu Lys Ala Ala Ser Glu Lys Ala Ser Ala Glu Gly Glu Glu Glu Gln
370 375 380
Cys His Lys Lys His Pro Pro Ile Arg His Gly Ser Ile Lys Glu Phe
385 390 395 400
Asn Phe Asp Asn Thr Lys Gly Glu Val Ser Ala Lys Pro Asn Ile Ile
405 410 415
Gly Ser Glu Trp Trp Val Asn Glu Lys Val Val Gly Lys Gly Thr Gly
420 425 430
Pro Gln Thr Asn Trp Thr Phe Phe Pro Leu Leu Gln Pro Gly Ile Ser
435 440 445
<210> 20
<211> 4092
<212> DNA
<213> 小立碗藓(Physcomitrella patens)
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(4092)
<400> 20
atg gtg ctg ctc atg aat agg aat gca ctc ggt atc cat ttc ggt gcc 48
Met Val Leu Leu Met Asn Arg Asn Ala Leu Gly Ile His Phe Gly Ala
1 5 10 15
cgg gcc agt ctg gca gtg atg gtg atc cat tgg tat ttg cgg cct ggc 96
Arg Ala Ser Leu Ala Val Met Val Ile His Trp Tyr Leu Arg Pro Gly
20 25 30
gag cta acc cca tgc tca ccc acg aat ggc cca tta tgg aaa tgg atg 144
Glu Leu Thr Pro Cys Ser Pro Thr Asn Gly Pro Leu Trp Lys Trp Met
35 40 45
aga aca atc tta cct ttt ccg gtg cct gta gat ttg aag agg gag gct 192
Arg Thr Ile Leu Pro Phe Pro Val Pro Val Asp Leu Lys Arg Glu Ala
50 55 60
gtt ctg gcc gga acg gtc gtc gtc tac agc gtt cta aag atg ccc gtg 240
Val Leu Ala Gly Thr Val Val Val Tyr Ser Val Leu Lys Met Pro Val
65 70 75 80
ctc tgg agc tct tcc ctc gac gcc gac gcc gac gca gca gcc act aat 288
Leu Trp Ser Ser Ser Leu Asp Ala Asp Ala Asp Ala Ala Ala Thr Asn
85 90 95
cga cat tca tca tca acg ttc gtt aga gat ggt tgg agg gca tta acg 336
Arg His Ser Ser Ser Thr Phe Val Arg Asp Gly Trp Arg Ala Leu Thr
100 105 110
ggt cgt ggc caa gga ccg aaa ttg cgg cgg gtg gag ggt atg gag act 384
Gly Arg Gly Gln Gly Pro Lys Leu Arg Arg Val Glu Gly Met Glu Thr
115 120 125
agg gta gtt tct gca gag gag ctt gtt tta cca atg gtt gcc cta gct 432
Arg Val Val Ser Ala Glu Glu Leu Val Leu Pro Met Val Ala Leu Ala
130 135 140
tgg gta gtg gta cat aag ttc ctg tgg gcg cta tgg aag cta tgg cgc 480
Trp Val Val Val His Lys Phe Leu Trp Ala Leu Trp Lys Leu Trp Arg
145 150 155 160
tct gcc gtt gat gac ata aac att gga agg acg aaa cgt ttg tgt cct 528
Ser Ala Val Asp Asp Ile Asn Ile Gly Arg Thr Lys Arg Leu Cys Pro
165 170 175
acc tct tct cag atg gca cga ggt gga tgc tgc tgg agt ggg cca ttt 576
Thr Ser Ser Gln Met Ala Arg Gly Gly Cys Cys Trp Ser Gly Pro Phe
180 185 190
tgt ctt ggc tca tta tcc cgc aag aac aag aag cga att gtt ccg gca 624
Cys Leu Gly Ser Leu Ser Arg Lys Asn Lys Lys Arg Ile Val Pro Ala
195 200 205
acc aga gtg cac gat gga act gca cag cca tct gac cct cag ggc cag 672
Thr Arg Val His Asp Gly Thr Ala Gln Pro Ser Asp Pro Gln Gly Gln
210 215 220
ttt gcc ttc cta ctt gca ccc cct tcg tct cct gct tcc tat gca aat 720
Phe Ala Phe Leu Leu Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Tyr Ala Asn
225 230 235 240
tct atg gca cct tcc tct gtt cag tcg ccc tac tac cct tca tcg tgt 768
Ser Met Ala Pro Ser Ser Val Gln Ser Pro Tyr Tyr Pro Ser Ser Cys
245 250 255
cct gtt cct cag ggt ggt ggg tct agg att cct cta gaa aca cag tct 816
Pro Val Pro Gln Gly Gly Gly Ser Arg Ile Pro Leu Glu Thr Gln Ser
260 265 270
aac atg ttc gct gta ggt ccg tat gca cat gaa acc gct cta gtc tct 864
Asn Met Phe Ala Val Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Ala Leu Val Ser
275 280 285
cca cca gtt ttt tct acg ttc aca act gct ccc tcc aca gct cct ttt 912
Pro Pro Val Phe Ser Thr Phe Thr Thr Ala Pro Ser Thr Ala Pro Phe
290 295 300
acg ccc cct cca gag ctt gca gcc cat ttc act acg cct tct tcc cct 960
Thr Pro Pro Pro Glu Leu Ala Ala His Phe Thr Thr Pro Ser Ser Pro
305 310 315 320
gat gtt cct ttc gca aag ctg tta gga tct tcg ttc tca gaa cag cga 1008
Asp Val Pro Phe Ala Lys Leu Leu Gly Ser Ser Phe Ser Glu Gln Arg
325 330 335
act acg aag cga gaa gcg gag cct cca tac tca gcc tct cca ttc gct 1056
Thr Thr Lys Arg Glu Ala Glu Pro Pro Tyr Ser Ala Ser Pro Phe Ala
340 345 350
tcc cca gat tac tat cag caa gat cac cat ccg cag gat gac ttg cag 1104
Ser Pro Asp Tyr Tyr Gln Gln Asp His His Pro Gln Asp Asp Leu Gln
355 360 365
gtt ggg tat cag tta tat cca gga agt ccg ctt ggt cgt tta att tct 1152
Val Gly Tyr Gln Leu Tyr Pro Gly Ser Pro Leu Gly Arg Leu Ile Ser
370 375 380
cct gca ggc acc acg ggc gcg tca act cct ttt gct gca ggt ggc act 1200
Pro Ala Gly Thr Thr Gly Ala Ser Thr Pro Phe Ala Ala Gly Gly Thr
385 390 395 400
act ggt act aat act cct cat gca gag agt gac aat cct act cca ctg 1248
Thr Gly Thr Asn Thr Pro His Ala Glu Ser Asp Asn Pro Thr Pro Leu
405 410 415
act gtc ctt cca gca gtg gta agc act tta cct aac ctt gag cac cag 1296
Thr Val Leu Pro Ala Val Val Ser Thr Leu Pro Asn Leu Glu His Gln
420 425 430
gtg gct gaa ggg ctt cat cag agg agt att ctt gat tct cag tgc ggg 1344
Val Ala Glu Gly Leu His Gln Arg Ser Ile Leu Asp Ser Gln Cys Gly
435 440 445
cca ggg gaa cct ctg agt gac agt ggt aga gag cgg cat ggg agc ttt 1392
Pro Gly Glu Pro Leu Ser Asp Ser Gly Arg Glu Arg His Gly Ser Phe
450 455 460
gac agt cac tcg cgg ttc atg gta gca atg ata cac gaa cgc gat gga 1440
Asp Ser His Ser Arg Phe Met Val Ala Met Ile His Glu Arg Asp Gly
465 470 475 480
tct gat tcc aac tca aat tcg tat gga cat gag cgg tac agc gga agt 1488
Ser Asp Ser Asn Ser Asn Ser Tyr Gly His Glu Arg Tyr Ser Gly Ser
485 490 495
ttg act ggg ctt aat gac gtc ttg gag gga cgg aac agg tat acg aag 1536
Leu Thr Gly Leu Asn Asp Val Leu Glu Gly Arg Asn Arg Tyr Thr Lys
500 505 510
ttg aag cag gac aag ggt cct cga tcc tct agt ctg aga tcc cat gag 1584
Leu Lys Gln Asp Lys Gly Pro Arg Ser Ser Ser Leu Arg Ser His Glu
515 520 525
aaa gag gat gat att cag gaa gag gac ttg ctt gaa ctt ccc atg cta 1632
Lys Glu Asp Asp Ile Gln Glu Glu Asp Leu Leu Glu Leu Pro Met Leu
530 535 540
tta ggc agt gag agt tct cat ggt ggt tcg aga gca tca cgg tct cca 1680
Leu Gly Ser Glu Ser Ser His Gly Gly Ser Arg Ala Ser Arg Ser Pro
545 550 555 560
agt agt aga agt aaa gtt cag agc aag gca ggg agc aga gta ggg agc 1728
Ser Ser Arg Ser Lys Val Gln Ser Lys Ala Gly Ser Arg Val Gly Ser
565 570 575
agg gta gaa agt aag gca gct agc agg gta ggg agt aag gct ggg tct 1776
Arg Val Glu Ser Lys Ala Ala Ser Arg Val Gly Ser Lys Ala Gly Ser
580 585 590
gat gcc ttg aaa gat tgg gat cac aac gag gat aac tta ttg gaa tat 1824
Asp Ala Leu Lys Asp Trp Asp His Asn Glu Asp Asn Leu Leu Glu Tyr
595 600 605
gca cta agc ttg ctt gaa gga act gat gga aaa aga ccc gga aca atc 1872
Ala Leu Ser Leu Leu Glu Gly Thr Asp Gly Lys Arg Pro Gly Thr Ile
610 615 620
ggg tgg gcg cca gtg gat acc tcg ctc cca cga gaa tct gaa ggt ccc 1920
Gly Trp Ala Pro Val Asp Thr Ser Leu Pro Arg Glu Ser Glu Gly Pro
625 630 635 640
att cag tca tcc tct acc acg aga aac gag acc gag gag aat gaa aag 1968
Ile Gln Ser Ser Ser Thr Thr Arg Asn Glu Thr Glu Glu Asn Glu Lys
645 650 655
gat act gtg tat aaa agt atc aag aat ggt aaa ggt agc gac aat gtg 2016
Asp Thr Val Tyr Lys Ser Ile Lys Asn Gly Lys Gly Ser Asp Asn Val
660 665 670
ccc cag caa gta gtg ggg gcg gga gca aag gag gtt tct gag gga acg 2064
Pro Gln Gln Val Val Gly Ala Gly Ala Lys Glu Val Ser Glu Gly Thr
675 680 685
att act ccg gtt gga cat cat ggt agt gca cct gat tgc tgt tcg aga 2112
Ile Thr Pro Val Gly His His Gly Ser Ala Pro Asp Cys Cys Ser Arg
690 695 700
tgc gaa tcg ctt gtc tct cag tgt gag cag cta tca gtg gct ttg aag 2160
Cys Glu Ser Leu Val Ser Gln Cys Glu Gln Leu Ser Val Ala Leu Lys
705 710 715 720
gag gct aga agg aaa caa caa gag aaa gat cga ctt gcg gag gaa aga 2208
Glu Ala Arg Arg Lys Gln Gln Glu Lys Asp Arg Leu Ala Glu Glu Arg
725 730 735
gaa aaa caa ata agg cac ctt aca cag cta ctg cag tca ggg gaa cag 2256
Glu Lys Gln Ile Arg His Leu Thr Gln Leu Leu Gln Ser Gly Glu Gln
740 745 750
ggc agt ttc tta caa gtc cta gat ctg ttg gac gag cac atg ccg gag 2304
Gly Ser Phe Leu Gln Val Leu Asp Leu Leu Asp Glu His Met Pro Glu
755 760 765
gaa tac ctg agt cga gca agc tta ttc tgc cct gtt tct gaa gaa ttc 2352
Glu Tyr Leu Ser Arg Ala Ser Leu Phe Cys Pro Val Ser Glu Glu Phe
770 775 780
aac ttc tcc gca gaa tct ttg ctg ggt ttt agt cat gag ttt aga ctt 2400
Asn Phe Ser Ala Glu Ser Leu Leu Gly Phe Ser His Glu Phe Arg Leu
785 790 795 800
gcc gaa tgg agc aaa ctt tgt ccg aat gat ttc gcg ctc aca ttg tgc 2448
Ala Glu Trp Ser Lys Leu Cys Pro Asn Asp Phe Ala Leu Thr Leu Cys
805 810 815
aac gaa tta cgt tgc aca ttt gct gat gat gag aac gcg ttc tgt tta 2496
Asn Glu Leu Arg Cys Thr Phe Ala Asp Asp Glu Asn Ala Phe Cys Leu
820 825 830
ggg gag ttt atg agc tac gat cct ggt tca caa gcc acc ggc aga gtg 2544
Gly Glu Phe Met Ser Tyr Asp Pro Gly Ser Gln Ala Thr Gly Arg Val
835 840 845
agg aag gtc gca atg agc gcc aac tat ggc aac ttg gac att cag aca 2592
Arg Lys Val Ala Met Ser Ala Asn Tyr Gly Asn Leu Asp Ile Gln Thr
850 855 860
atg ctt tgg tgt cga agt ctt cga aga acg cat gac gac aat atg aag 2640
Met Leu Trp Cys Arg Ser Leu Arg Arg Thr His Asp Asp Asn Met Lys
865 870 875 880
acg gtg aag aag ggg atg gag gta aag agg aag agt aga ttg agt aaa 2688
Thr Val Lys Lys Gly Met Glu Val Lys Arg Lys Ser Arg Leu Ser Lys
885 890 895
acc agc gct ctt caa aag aaa atg cct aac tca aat gta gag gct gct 2736
Thr Ser Ala Leu Gln Lys Lys Met Pro Asn Ser Asn Val Glu Ala Ala
900 905 910
aac tat cct cga tct gtt ttg caa act cgt tct cag gag act ccc tcg 2784
Asn Tyr Pro Arg Ser Val Leu Gln Thr Arg Ser Gln Glu Thr Pro Ser
915 920 925
gcg tca cct cga cta tca aga ccg aag agt gct cag gtc cag caa gct 2832
Ala Ser Pro Arg Leu Ser Arg Pro Lys Ser Ala Gln Val Gln Gln Ala
930 935 940
aag aag tta ctg aaa ata tta cgt cta gat cac atg ctt tct gat ggc 2880
Lys Lys Leu Leu Lys Ile Leu Arg Leu Asp His Met Leu Ser Asp Gly
945 950 955 960
gac gaa gag gaa gaa aca gag agg atg agc aag aag aaa ggg atc aaa 2928
Asp Glu Glu Glu Glu Thr Glu Arg Met Ser Lys Lys Lys Gly Ile Lys
965 970 975
gaa aag aag aag cgt tgt ccg tac agg ctg agg tcg acc tcg tcc aaa 2976
Glu Lys Lys Lys Arg Cys Pro Tyr Arg Leu Arg Ser Thr Ser Ser Lys
980 985 990
ata cct cta tcc agg gaa ggt tct ccc cgt cca gtt gag agg agt gta 3024
Ile Pro Leu Ser Arg Glu Gly Ser Pro Arg Pro Val Glu Arg Ser Val
995 1000 1005
tct cct ttg aca tct tgg aga atg gat gat gcc ggt atg cca gaa 3069
Ser Pro Leu Thr Ser Trp Arg Met Asp Asp Ala Gly Met Pro Glu
1010 1015 1020
cca ctg cgg gag aag ttg aat att ttt aag aaa gag cat gag acc 3114
Pro Leu Arg Glu Lys Leu Asn Ile Phe Lys Lys Glu His Glu Thr
1025 1030 1035
atg tca agt caa caa act tcg aaa gaa cca gtg cag ttg aat caa 3159
Met Ser Ser Gln Gln Thr Ser Lys Glu Pro Val Gln Leu Asn Gln
1040 1045 1050
ggt tcg gaa gaa gaa gag aat tat aac gac aca tct cat gct acg 3204
Gly Ser Glu Glu Glu Glu Asn Tyr Asn Asp Thr Ser His Ala Thr
1055 1060 1065
cag tgg aat cac aaa cct ttg cga gga caa gcg cgg ggg gaa tct 3249
Gln Trp Asn His Lys Pro Leu Arg Gly Gln Ala Arg Gly Glu Ser
1070 1075 1080
tgg caa gcc gat cac gta ggt ctc agt ctc aaa aag gag ccg cac 3294
Trp Gln Ala Asp His Val Gly Leu Ser Leu Lys Lys Glu Pro His
1085 1090 1095
aat ttt gaa cta gat aag tta aag aat ata gta gca aca atg cag 3339
Asn Phe Glu Leu Asp Lys Leu Lys Asn Ile Val Ala Thr Met Gln
1100 1105 1110
gag gag cac aga cag tgt att cgc agt atc gcg gag acc ctt gaa 3384
Glu Glu His Arg Gln Cys Ile Arg Ser Ile Ala Glu Thr Leu Glu
1115 1120 1125
cat cac agc cgg cag att gtt ctc ttg acg aag gca aac tct tcc 3429
His His Ser Arg Gln Ile Val Leu Leu Thr Lys Ala Asn Ser Ser
1130 1135 1140
ctg tcg aac cac gcg gat tcc tta gag aaa gag ctc atg gtg ttg 3474
Leu Ser Asn His Ala Asp Ser Leu Glu Lys Glu Leu Met Val Leu
1145 1150 1155
cga gct atg cac ata aaa tcc gaa agt ctc ttt aat gct gta aaa 3519
Arg Ala Met His Ile Lys Ser Glu Ser Leu Phe Asn Ala Val Lys
1160 1165 1170
ttg gcg gat tta aga gta gga tgt atc aag acc acc ttg tta aat 3564
Leu Ala Asp Leu Arg Val Gly Cys Ile Lys Thr Thr Leu Leu Asn
1175 1180 1185
gct ctc ttg ttc tgc cat ttg tgc gca gaa acg aaa ggc gga gtt 3609
Ala Leu Leu Phe Cys His Leu Cys Ala Glu Thr Lys Gly Gly Val
1190 1195 1200
ggg cat tat cga ggg aat agc ggt ctt ggc cga ata gac ctg gcg 3654
Gly His Tyr Arg Gly Asn Ser Gly Leu Gly Arg Ile Asp Leu Ala
1205 1210 1215
aga aac agt gaa ctc ctc gac ctg agg ttg gac gat ctt ggt gat 3699
Arg Asn Ser Glu Leu Leu Asp Leu Arg Leu Asp Asp Leu Gly Asp
1220 1225 1230
gag cgg caa gca aca aag gaa gat cga aga aaa caa agg ctc tcg 3744
Glu Arg Gln Ala Thr Lys Glu Asp Arg Arg Lys Gln Arg Leu Ser
1235 1240 1245
cct ccc tcg aat gtg aga gca aga cgt ggt agg gtc aca aag gga 3789
Pro Pro Ser Asn Val Arg Ala Arg Arg Gly Arg Val Thr Lys Gly
1250 1255 1260
gcg ggg cca agg ttc gag aaa gcc tta gcc aag caa gca aca tgg 3834
Ala Gly Pro Arg Phe Glu Lys Ala Leu Ala Lys Gln Ala Thr Trp
1265 1270 1275
cag cag ccg ata gca caa ctt ttg agg aac act gca ccg tca tca 3879
Gln Gln Pro Ile Ala Gln Leu Leu Arg Asn Thr Ala Pro Ser Ser
1280 1285 1290
ccg agc aga aaa ggg caa agg tcg atg tgc tca atc gcc tct gca 3924
Pro Ser Arg Lys Gly Gln Arg Ser Met Cys Ser Ile Ala Ser Ala
1295 1300 1305
agg ggg gag ttt ctg gat cga act tat cgg cgt caa agg aac ccc 3969
Arg Gly Glu Phe Leu Asp Arg Thr Tyr Arg Arg Gln Arg Asn Pro
1310 1315 1320
gcc gaa gct tcc tcc aac act gaa tgg gga gtc agg tgg cgt ttt 4014
Ala Glu Ala Ser Ser Asn Thr Glu Trp Gly Val Arg Trp Arg Phe
1325 1330 1335
atc ctt cgc gcc aaa aca ttc cag gtg gcg ttc cat agc aag cat 4059
Ile Leu Arg Ala Lys Thr Phe Gln Val Ala Phe His Ser Lys His
1340 1345 1350
ctt aaa att tgt gca aat aca tgc aag aat taa 4092
Leu Lys Ile Cys Ala Asn Thr Cys Lys Asn
1355 1360
<210> 21
<211> 1363
<212> PRT
<213> 小立碗藓(Physcomitella patens)
<400> 21
Met Val Leu Leu Met Asn Arg Asn Ala Leu Gly Ile His Phe Gly Ala
1 5 10 15
Arg Ala Ser Leu Ala Val Met Val Ile His Trp Tyr Leu Arg Pro Gly
20 25 30
Glu Leu Thr Pro Cys Ser Pro Thr Asn Gly Pro Leu Trp Lys Trp Met
35 40 45
Arg Thr Ile Leu Pro Phe Pro Val Pro Val Asp Leu Lys Arg Glu Ala
50 55 60
Val Leu Ala Gly Thr Val Val Val Tyr Ser Val Leu Lys Met Pro Val
65 70 75 80
Leu Trp Ser Ser Ser Leu Asp Ala Asp Ala Asp Ala Ala Ala Thr Asn
85 90 95
Arg His Ser Ser Ser Thr Phe Val Arg Asp Gly Trp Arg Ala Leu Thr
100 105 110
Gly Arg Gly Gln Gly Pro Lys Leu Arg Arg Val Glu Gly Met Glu Thr
115 120 125
Arg Val Val Ser Ala Glu Glu Leu Val Leu Pro Met Val Ala Leu Ala
130 135 140
Trp Val Val Val His Lys Phe Leu Trp Ala Leu Trp Lys Leu Trp Arg
145 150 155 160
Ser Ala Val Asp Asp Ile Asn Ile Gly Arg Thr Lys Arg Leu Cys Pro
165 170 175
Thr Ser Ser Gln Met Ala Arg Gly Gly Cys Cys Trp Ser Gly Pro Phe
180 185 190
Cys Leu Gly Ser Leu Ser Arg Lys Asn Lys Lys Arg Ile Val Pro Ala
195 200 205
Thr Arg Val His Asp Gly Thr Ala Gln Pro Ser Asp Pro Gln Gly Gln
210 215 220
Phe Ala Phe Leu Leu Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Tyr Ala Asn
225 230 235 240
Ser Met Ala Pro Ser Ser Val Gln Ser Pro Tyr Tyr Pro Ser Ser Cys
245 250 255
Pro Val Pro Gln Gly Gly Gly Ser Arg Ile Pro Leu Glu Thr Gln Ser
260 265 270
Asn Met Phe Ala Val Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Ala Leu Val Ser
275 280 285
Pro Pro Val Phe Ser Thr Phe Thr Thr Ala Pro Ser Thr Ala Pro Phe
290 295 300
Thr Pro Pro Pro Glu Leu Ala Ala His Phe Thr Thr Pro Ser Ser Pro
305 310 315 320
Asp Val Pro Phe Ala Lys Leu Leu Gly Ser Ser Phe Ser Glu Gln Arg
325 330 335
Thr Thr Lys Arg Glu Ala Glu Pro Pro Tyr Ser Ala Ser Pro Phe Ala
340 345 350
Ser Pro Asp Tyr Tyr Gln Gln Asp His His Pro Gln Asp Asp Leu Gln
355 360 365
Val Gly Tyr Gln Leu Tyr Pro Gly Ser Pro Leu Gly Arg Leu Ile Ser
370 375 380
Pro Ala Gly Thr Thr Gly Ala Ser Thr Pro Phe Ala Ala Gly Gly Thr
385 390 395 400
Thr Gly Thr Asn Thr Pro His Ala Glu Ser Asp Asn Pro Thr Pro Leu
405 410 415
Thr Val Leu Pro Ala Val Val Ser Thr Leu Pro Asn Leu Glu His Gln
420 425 430
Val Ala Glu Gly Leu His Gln Arg Ser Ile Leu Asp Ser Gln Cys Gly
435 440 445
Pro Gly Glu Pro Leu Ser Asp Ser Gly Arg Glu Arg His Gly Ser Phe
450 455 460
Asp Ser His Ser Arg Phe Met Val Ala Met Ile His Glu Arg Asp Gly
465 470 475 480
Ser Asp Ser Asn Ser Asn Ser Tyr Gly His Glu Arg Tyr Ser Gly Ser
485 490 495
Leu Thr Gly Leu Asn Asp Val Leu Glu Gly Arg Asn Arg Tyr Thr Lys
500 505 510
Leu Lys Gln Asp Lys Gly Pro Arg Ser Ser Ser Leu Arg Ser His Glu
515 520 525
Lys Glu Asp Asp Ile Gln Glu Glu Asp Leu Leu Glu Leu Pro Met Leu
530 535 540
Leu Gly Ser Glu Ser Ser His Gly Gly Ser Arg Ala Ser Arg Ser Pro
545 550 555 560
Ser Ser Arg Ser Lys Val Gln Ser Lys Ala Gly Ser Arg Val Gly Ser
565 570 575
Arg Val Glu Ser Lys Ala Ala Ser Arg Val Gly Ser Lys Ala Gly Ser
580 585 590
Asp Ala Leu Lys Asp Trp Asp His Asn Glu Asp Asn Leu Leu Glu Tyr
595 600 605
Ala Leu Ser Leu Leu Glu Gly Thr Asp Gly Lys Arg Pro Gly Thr Ile
610 615 620
Gly Trp Ala Pro Val Asp Thr Ser Leu Pro Arg Glu Ser Glu Gly Pro
625 630 635 640
Ile Gln Ser Ser Ser Thr Thr Arg Asn Glu Thr Glu Glu Asn Glu Lys
645 650 655
Asp Thr Val Tyr Lys Ser Ile Lys Asn Gly Lys Gly Ser Asp Asn Val
660 665 670
Pro Gln Gln Val Val Gly Ala Gly Ala Lys Glu Val Ser Glu Gly Thr
675 680 685
Ile Thr Pro Val Gly His His Gly Ser Ala Pro Asp Cys Cys Ser Arg
690 695 700
Cys Glu Ser Leu Val Ser Gln Cys Glu Gln Leu Ser Val Ala Leu Lys
705 710 715 720
Glu Ala Arg Arg Lys Gln Gln Glu Lys Asp Arg Leu Ala Glu Glu Arg
725 730 735
Glu Lys Gln Ile Arg His Leu Thr Gln Leu Leu Gln Ser Gly Glu Gln
740 745 750
Gly Ser Phe Leu Gln Val Leu Asp Leu Leu Asp Glu His Met Pro Glu
755 760 765
Glu Tyr Leu Ser Arg Ala Ser Leu Phe Cys Pro Val Ser Glu Glu Phe
770 775 780
Asn Phe Ser Ala Glu Ser Leu Leu Gly Phe Ser His Glu Phe Arg Leu
785 790 795 800
Ala Glu Trp Ser Lys Leu Cys Pro Asn Asp Phe Ala Leu Thr Leu Cys
805 810 815
Asn Glu Leu Arg Cys Thr Phe Ala Asp Asp Glu Asn Ala Phe Cys Leu
820 825 830
Gly Glu Phe Met Ser Tyr Asp Pro Gly Ser Gln Ala Thr Gly Arg Val
835 840 845
Arg Lys Val Ala Met Ser Ala Asn Tyr Gly Asn Leu Asp Ile Gln Thr
850 855 860
Met Leu Trp Cys Arg Ser Leu Arg Arg Thr His Asp Asp Asn Met Lys
865 870 875 880
Thr Val Lys Lys Gly Met Glu Val Lys Arg Lys Ser Arg Leu Ser Lys
885 890 895
Thr Ser Ala Leu Gln Lys Lys Met Pro Asn Ser Asn Val Glu Ala Ala
900 905 910
Asn Tyr Pro Arg Ser Val Leu Gln Thr Arg Ser Gln Glu Thr Pro Ser
915 920 925
Ala Ser Pro Arg Leu Ser Arg Pro Lys Ser Ala Gln Val Gln Gln Ala
930 935 940
Lys Lys Leu Leu Lys Ile Leu Arg Leu Asp His Met Leu Ser Asp Gly
945 950 955 960
Asp Glu Glu Glu Glu Thr Glu Arg Met Ser Lys Lys Lys Gly Ile Lys
965 970 975
Glu Lys Lys Lys Arg Cys Pro Tyr Arg Leu Arg Ser Thr Ser Ser Lys
980 985 990
Ile Pro Leu Ser Arg Glu Gly Ser Pro Arg Pro Val Glu Arg Ser Val
995 1000 1005
Ser Pro Leu Thr Ser Trp Arg Met Asp Asp Ala Gly Met Pro Glu
1010 1015 1020
Pro Leu Arg Glu Lys Leu Asn Ile Phe Lys Lys Glu His Glu Thr
1025 1030 1035
Met Ser Ser Gln Gln Thr Ser Lys Glu Pro Val Gln Leu Asn Gln
1040 1045 1050
Gly Ser Glu Glu Glu Glu Asn Tyr Asn Asp Thr Ser His Ala Thr
1055 1060 1065
Gln Trp Asn His Lys Pro Leu Arg Gly Gln Ala Arg Gly Glu Ser
1070 1075 1080
Trp Gln Ala Asp His Val Gly Leu Ser Leu Lys Lys Glu Pro His
1085 1090 1095
Asn Phe Glu Leu Asp Lys Leu Lys Asn Ile Val Ala Thr Met Gln
1100 1105 1110
Glu Glu His Arg Gln Cys Ile Arg Ser Ile Ala Glu Thr Leu Glu
1115 1120 1125
His His Ser Arg Gln Ile Val Leu Leu Thr Lys Ala Asn Ser Ser
1130 1135 1140
Leu Ser Asn His Ala Asp Ser Leu Glu Lys Glu Leu Met Val Leu
1145 1150 1155
Arg Ala Met His Ile Lys Ser Glu Ser Leu Phe Asn Ala Val Lys
1160 1165 1170
Leu Ala Asp Leu Arg Val Gly Cys Ile Lys Thr Thr Leu Leu Asn
1175 1180 1185
Ala Leu Leu Phe Cys His Leu Cys Ala Glu Thr Lys Gly Gly Val
1190 1195 1200
Gly His Tyr Arg Gly Asn Ser Gly Leu Gly Arg Ile Asp Leu Ala
1205 1210 1215
Arg Asn Ser Glu Leu Leu Asp Leu Arg Leu Asp Asp Leu Gly Asp
1220 1225 1230
Glu Arg Gln Ala Thr Lys Glu Asp Arg Arg Lys Gln Arg Leu Ser
1235 1240 1245
Pro Pro Ser Asn Val Arg Ala Arg Arg Gly Arg Val Thr Lys Gly
1250 1255 1260
Ala Gly Pro Arg Phe Glu Lys Ala Leu Ala Lys Gln Ala Thr Trp
1265 1270 1275
Gln Gln Pro Ile Ala Gln Leu Leu Arg Asn Thr Ala Pro Ser Ser
1280 1285 1290
Pro Ser Arg Lys Gly Gln Arg Ser Met Cys Ser Ile Ala Ser Ala
1295 1300 1305
Arg Gly Glu Phe Leu Asp Arg Thr Tyr Arg Arg Gln Arg Asn Pro
1310 1315 1320
Ala Glu Ala Ser Ser Asn Thr Glu Trp Gly Val Arg Trp Arg Phe
1325 1330 1335
Ile Leu Arg Ala Lys Thr Phe Gln Val Ala Phe His Ser Lys His
1340 1345 1350
Leu Lys Ile Cys Ala Asn Thr Cys Lys Asn
1355 1360
<210> 22
<211> 1886
<212> DNA
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<220>
<221> CDS
<222> (227)..(1543)
<400> 22
aagctggact agataacgac cggtgtgagt gagagagaga gagagagaat tcgatccatc 60
attatacaaa accttcttcg ctttttattt gatttattta tccttttctc atttgatttt 120
ctcgggaaaa tctctctgcg tagtagatcc aagtggtggt ttctgagtag tagtaagcaa 180
gcaaatctgg atgttattgt agtcggtgtg aatctgagtt cgaaag atg agg aac 235
Met Arg Asn
1
gtt gtt aat aac agc gtt gag act gtt aac gcc gcc gct acc gcc atc 283
Val Val Asn Asn Ser Val Glu Thr Val Asn Ala Ala Ala Thr Ala Ile
5 10 15
gtc acc gcc gag tct cga gta cag ccg tct tct tct cag aag gga aga 331
Val Thr Ala Glu Ser Arg Val Gln Pro Ser Ser Ser Gln Lys Gly Arg
20 25 30 35
tgg gga aaa tgt tgg agt tta tat tca tgt ttt gga act cag aag aac 379
Trp Gly Lys Cys Trp Ser Leu Tyr Ser Cys Phe Gly Thr Gln Lys Asn
40 45 50
aat aaa agg att ggt aat gct gtg ctt gta cct gaa ccg gtt aca tct 427
Asn Lys Arg Ile Gly Asn Ala Val Leu Val Pro Glu Pro Val Thr Ser
55 60 65
gga gtt ccg gta gtt act gtt caa aac tca gct act tca act act gtt 475
Gly Val Pro Val Val Thr Val Gln Asn Ser Ala Thr Ser Thr Thr Val
70 75 80
gtt ctt ccc ttt ata gct cct cct tca tct cca gct tcg ttt ttg caa 523
Val Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu Gln
85 90 95
tcg gat cct tca tcg gtt tct cac tcg cct gtt ggt cca ctt tct ctt 571
Ser Asp Pro Ser Ser Val Ser His Ser Pro Val Gly Pro Leu Ser Leu
100 105 110 115
act agc aat aca ttc tcg cct aag gag cct caa tct gtc ttt acc gtt 619
Thr Ser Asn Thr Phe Ser Pro Lys Glu Pro Gln Ser Val Phe Thr Val
120 125 130
gga cct tat gct aat gaa act caa cca gtc act cct ccg gtg ttc tct 667
Gly Pro Tyr Ala Asn Glu Thr Gln Pro Val Thr Pro Pro Val Phe Ser
135 140 145
gcg ttt ata act gag cca tct act gca ccg tat act cca cct cct gaa 715
Ala Phe Ile Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Tyr Thr Pro Pro Pro Glu
150 155 160
tca tca gtc cat ata act aca cct tct tca cct gaa gtg ccc ttt gct 763
Ser Ser Val His Ile Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala
165 170 175
cag ttg ctt act tct tcg ttg gag cta act cgg agg gat agt act agt 811
Gln Leu Leu Thr Ser Ser Leu Glu Leu Thr Arg Arg Asp Ser Thr Ser
180 185 190 195
ggg atg aat caa aag ttt tcg tct tcg cac tat gag ttt cgg tct aat 859
Gly Met Asn Gln Lys Phe Ser Ser Ser His Tyr Glu Phe Arg Ser Asn
200 205 210
cag gtg tgt ccg ggg agt cct ggt ggt ggt aat cta atc tct ccc ggg 907
Gln Val Cys Pro Gly Ser Pro Gly Gly Gly Asn Leu Ile Ser Pro Gly
215 220 225
tca gtg att tca aac tct ggt aca tct tct cct tac cct ggt aaa tca 955
Ser Val Ile Ser Asn Ser Gly Thr Ser Ser Pro Tyr Pro Gly Lys Ser
230 235 240
ccc atg gtt gag ttt cga ata ggc gag cct cca aag ttc ttg ggt ttt 1003
Pro Met Val Glu Phe Arg Ile Gly Glu Pro Pro Lys Phe Leu Gly Phe
245 250 255
gag cac ttt aca gct cgt aaa tgg gga tcg agg ttc ggt tct gga tcg 1051
Glu His Phe Thr Ala Arg Lys Trp Gly Ser Arg Phe Gly Ser Gly Ser
260 265 270 275
atc aca cct gtt ggg cat ggt tca ggt ttg gct tca ggc gct ctg aca 1099
Ile Thr Pro Val Gly His Gly Ser Gly Leu Ala Ser Gly Ala Leu Thr
280 285 290
cca aat ggt cca gag ata gta tct gga aac tta aca ccc aac aat acc 1147
Pro Asn Gly Pro Glu Ile Val Ser Gly Asn Leu Thr Pro Asn Asn Thr
295 300 305
aca tgg cct ctt caa aat cag atc tct gag gtc gct tca ctg gca aat 1195
Thr Trp Pro Leu Gln Asn Gln Ile Ser Glu Val Ala Ser Leu Ala Asn
310 315 320
tcg gat cat ggc tct gaa gtc atg gta gca gat cac aga gtt tcg ttt 1243
Ser Asp His Gly Ser Glu Val Met Val Ala Asp His Arg Val Ser Phe
325 330 335
gag tta aca ggt gaa gac gtt gca cgt tgt ctt gca agc aag cta aat 1291
Glu Leu Thr Gly Glu Asp Val Ala Arg Cys Leu Ala Ser Lys Leu Asn
340 345 350 355
cga tca cac gac aga atg aac aac aat gac cgg atc gaa aca gag gag 1339
Arg Ser His Asp Arg Met Asn Asn Asn Asp Arg Ile Glu Thr Glu Glu
360 365 370
agt tca tca aca gac ata aga aga aac ata gag aaa agg tca gga gac 1387
Ser Ser Ser Thr Asp Ile Arg Arg Asn Ile Glu Lys Arg Ser Gly Asp
375 380 385
aga gag aac gaa cag cat aga att cag aag ctg agt tcc tca tcg att 1435
Arg Glu Asn Glu Gln His Arg Ile Gln Lys Leu Ser Ser Ser Ser Ile
390 395 400
gga tct agc aaa gaa ttt aaa ttc gac aac acg aaa gac gag aat atc 1483
Gly Ser Ser Lys Glu Phe Lys Phe Asp Asn Thr Lys Asp Glu Asn Ile
405 410 415
gag aag gtt gca gga aac agc tgg agt ttc ttc ccg ggg tta cga tct 1531
Glu Lys Val Ala Gly Asn Ser Trp Ser Phe Phe Pro Gly Leu Arg Ser
420 425 430 435
gga gtc agc taa ccaaattaaa atgacatctc ttcttcttct tcctcattac 1583
Gly Val Ser
caaagacaga gatataaaac cctataagta acaaaccttg aacatggatc gtgaaaaaag 1643
gtaagagatt tgggttctaa caacttatac acactgaata aataagctta aagctttgat 1703
ttgcagttaa cttctgtact catgtagttg gaaactttgg aatattcttg gatcagctcc 1763
tacatctaat cttgttacat tgatataaat tgtttatttc ttgttttact gtttcataca 1823
aatatattgt ttgaactgag atcgtgaatg gtcttattct atatcattac taaaacattt 1883
tca 1886
<210> 23
<211> 438
<212> PRT
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 23
Met Arg Asn Val Val Asn Asn Ser Val Glu Thr Val Asn Ala Ala Ala
1 5 10 15
Thr Ala Ile Val Thr Ala Glu Ser Arg Val Gln Pro Ser Ser Ser Gln
20 25 30
Lys Gly Arg Trp Gly Lys Cys Trp Ser Leu Tyr Ser Cys Phe Gly Thr
35 40 45
Gln Lys Asn Asn Lys Arg Ile Gly Asn Ala Val Leu Val Pro Glu Pro
50 55 60
Val Thr Ser Gly Val Pro Val Val Thr Val Gln Asn Ser Ala Thr Ser
65 70 75 80
Thr Thr Val Val Leu Pro Phe Ile Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser
85 90 95
Phe Leu Gln Ser Asp Pro Ser Ser Val Ser His Ser Pro Val Gly Pro
100 105 110
Leu Ser Leu Thr Ser Asn Thr Phe Ser Pro Lys Glu Pro Gln Ser Val
115 120 125
Phe Thr Val Gly Pro Tyr Ala Asn Glu Thr Gln Pro Val Thr Pro Pro
130 135 140
Val Phe Ser Ala Phe Ile Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Tyr Thr Pro
145 150 155 160
Pro Pro Glu Ser Ser Val His Ile Thr Thr Pro Ser Ser Pro Glu Val
165 170 175
Pro Phe Ala Gln Leu Leu Thr Ser Ser Leu Glu Leu Thr Arg Arg Asp
180 185 190
Ser Thr Ser Gly Met Asn Gln Lys Phe Ser Ser Ser His Tyr Glu Phe
195 200 205
Arg Ser Asn Gln Val Cys Pro Gly Ser Pro Gly Gly Gly Asn Leu Ile
210 215 220
Ser Pro Gly Ser Val Ile Ser Asn Ser Gly Thr Ser Ser Pro Tyr Pro
225 230 235 240
Gly Lys Ser Pro Met Val Glu Phe Arg Ile Gly Glu Pro Pro Lys Phe
245 250 255
Leu Gly Phe Glu His Phe Thr Ala Arg Lys Trp Gly Ser Arg Phe Gly
260 265 270
Ser Gly Ser Ile Thr Pro Val Gly His Gly Ser Gly Leu Ala Ser Gly
275 280 285
Ala Leu Thr Pro Asn Gly Pro Glu Ile Val Ser Gly Asn Leu Thr Pro
290 295 300
Asn Asn Thr Thr Trp Pro Leu Gln Asn Gln Ile Ser Glu Val Ala Ser
305 310 315 320
Leu Ala Asn Ser Asp His Gly Ser Glu Val Met Val Ala Asp His Arg
325 330 335
Val Ser Phe Glu Leu Thr Gly Glu Asp Val Ala Arg Cys Leu Ala Ser
340 345 350
Lys Leu Asn Arg Ser His Asp Arg Met Asn Asn Asn Asp Arg Ile Glu
355 360 365
Thr Glu Glu Ser Ser Ser Thr Asp Ile Arg Arg Asn Ile Glu Lys Arg
370 375 380
Ser Gly Asp Arg Glu Asn Glu Gln His Arg Ile Gln Lys Leu Ser Ser
385 390 395 400
Ser Ser Ile Gly Ser Ser Lys Glu Phe Lys Phe Asp Asn Thr Lys Asp
405 410 415
Glu Asn Ile Glu Lys Val Ala Gly Asn Ser Trp Ser Phe Phe Pro Gly
420 425 430
Leu Arg Ser Gly Val Ser
435
<210> 24
<211> 1994
<212> DNA
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<220>
<221> CDS
<222> (384)..(1733)
<400> 24
gataatttta atattttaac acaataatag cgaataaata atatatacat ggaagcgcgt 60
gggtccaaac cgtcaaatta tgatgacgtg gcaaaatctc gtgggaaatt gaatgaaaac 120
tgtaaaagat aacgaccggt gacagagaga gagagagagg agaagaagaa tagaagaagc 180
ggctcatatc cataataaaa gccatttgct cctttattta ttctctcatt ctttcttctt 240
cattattcat ttctctcgtt attcgtttcg tattttgttt gtgtttatga ttttacctcc 300
ttagttgctg tgagatcaag aagtggtgaa agaaaagtta ctaaatctgg atgttatttg 360
attgtcgtcg ttggtcttga gct atg agg agc gtt aat aat agt agt gtc gac 413
Met Arg Ser Val Asn Asn Ser Ser Val Asp
1 5 10
acc gtg aac gcc gcc gct tcc gcc atc gtc tcc gct gag tct aga aca 461
Thr Val Asn Ala Ala Ala Ser Ala Ile Val Ser Ala Glu Ser Arg Thr
15 20 25
caa ccg tcg tcg gtt cag aaa aaa agg gga agc tgg tgg agc ttg tac 509
Gln Pro Ser Ser Val Gln Lys Lys Arg Gly Ser Trp Trp Ser Leu Tyr
30 35 40
tgg tgt ttt gga tcc aag aag aac aat aaa agg ata ggc cac gcg gtg 557
Trp Cys Phe Gly Ser Lys Lys Asn Asn Lys Arg Ile Gly His Ala Val
45 50 55
ctt gta ccc gaa cca gct gca tca gga gct gcg gtg gct cca gtc caa 605
Leu Val Pro Glu Pro Ala Ala Ser Gly Ala Ala Val Ala Pro Val Gln
60 65 70
aac tct tcg agc aat tct act tca ata ttc atg ccc ttt ata gct cct 653
Asn Ser Ser Ser Asn Ser Thr Ser Ile Phe Met Pro Phe Ile Ala Pro
75 80 85 90
cct tca tct cct gct tcc ttt ctg cca tca ggt cct ccc tct gcg tca 701
Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Leu Pro Ser Gly Pro Pro Ser Ala Ser
95 100 105
cat act cct gat cct ggt cta ctt tgt tcc cta acc gtc aat gaa ccg 749
His Thr Pro Asp Pro Gly Leu Leu Cys Ser Leu Thr Val Asn Glu Pro
110 115 120
cct tca gcc ttt act att gga cca tac gct cat gag act caa cct gtt 797
Pro Ser Ala Phe Thr Ile Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Pro Val
125 130 135
act cct cca gtg ttc tct gct ttc aca acg gaa ccc tcc acc gcg cca 845
Thr Pro Pro Val Phe Ser Ala Phe Thr Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro
140 145 150
ttc acg cca cct cct gaa tca cct tct tcc cct gaa gtg cct ttt gct 893
Phe Thr Pro Pro Pro Glu Ser Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala
155 160 165 170
cag tta ctt aca tct tca ttg gaa agg gct agg agg aac agt ggt ggt 941
Gln Leu Leu Thr Ser Ser Leu Glu Arg Ala Arg Arg Asn Ser Gly Gly
175 180 185
gga atg aat cag aag ttt tca gct gca cac tac gag ttt aag tct tgt 989
Gly Met Asn Gln Lys Phe Ser Ala Ala His Tyr Glu Phe Lys Ser Cys
190 195 200
caa gtg tat cct gga agt cca ggt ggt aat cta atc tct cct ggt tca 1037
Gln Val Tyr Pro Gly Ser Pro Gly Gly Asn Leu Ile Ser Pro Gly Ser
205 210 215
ggt aca tct tct cct tac cca ggg aaa tgc tcc atc atc gag ttt cgt 1085
Gly Thr Ser Ser Pro Tyr Pro Gly Lys Cys Ser Ile Ile Glu Phe Arg
220 225 230
atc ggc gaa cct cca aag ttt ctt ggt ttt gag cac ttc aca gcg cgt 1133
Ile Gly Glu Pro Pro Lys Phe Leu Gly Phe Glu His Phe Thr Ala Arg
235 240 245 250
aaa tgg gga tca aga ttc ggt tct gga tcc atc aca cct gct gga caa 1181
Lys Trp Gly Ser Arg Phe Gly Ser Gly Ser Ile Thr Pro Ala Gly Gln
255 260 265
ggt tca agg ttg ggt tca ggt gct ttg act cct gat ggc tca aag cta 1229
Gly Ser Arg Leu Gly Ser Gly Ala Leu Thr Pro Asp Gly Ser Lys Leu
270 275 280
act tct ggt gta gtg aca cca aat ggt gca gag act gtt ata aga atg 1277
Thr Ser Gly Val Val Thr Pro Asn Gly Ala Glu Thr Val Ile Arg Met
285 290 295
agt tat ggg aat ctc aca cca ctt gaa ggc agt ctt ttg gat agt cag 1325
Ser Tyr Gly Asn Leu Thr Pro Leu Glu Gly Ser Leu Leu Asp Ser Gln
300 305 310
atc tct gag gtt gcg tct tta gcc aat tcg gac cac ggg tcg tca agg 1373
Ile Ser Glu Val Ala Ser Leu Ala Asn Ser Asp His Gly Ser Ser Arg
315 320 325 330
cat aat gat gaa gct ctc gtg gtt cct cac aga gtt tct ttc gag ttg 1421
His Asn Asp Glu Ala Leu Val Val Pro His Arg Val Ser Phe Glu Leu
335 340 345
act ggt gaa gac gtt gca cgg tgt ctt gca agc aag cta aac cgt tcc 1469
Thr Gly Glu Asp Val Ala Arg Cys Leu Ala Ser Lys Leu Asn Arg Ser
350 355 360
ggt tca cat gaa aaa gca agc ggc gaa cat tta aga cca aac tgt tgt 1517
Gly Ser His Glu Lys Ala Ser Gly Glu His Leu Arg Pro Asn Cys Cys
365 370 375
aaa acg tcg gga gaa aca gag agc gaa cag agt cag aag cta aga tcg 1565
Lys Thr Ser Gly Glu Thr Glu Ser Glu Gln Ser Gln Lys Leu Arg Ser
380 385 390
ttt tct aca ggc tct aac aaa gaa ttc aag ttt gat agc acc aat gaa 1613
Phe Ser Thr Gly Ser Asn Lys Glu Phe Lys Phe Asp Ser Thr Asn Glu
395 400 405 410
gag atg ata gag aaa att cga tcg gag tgg tgg gcg aat gag aag gtc 1661
Glu Met Ile Glu Lys Ile Arg Ser Glu Trp Trp Ala Asn Glu Lys Val
415 420 425
gcc gga aaa ggt gat cac agt cca aga aac agt tgg act ttc ttt cca 1709
Ala Gly Lys Gly Asp His Ser Pro Arg Asn Ser Trp Thr Phe Phe Pro
430 435 440
gtc tta cgc tct gga cat act tag cacaaagaaa tagcttttac cttcttcatt 1763
Val Leu Arg Ser Gly His Thr
445
acctctaaca tgggaagcaa agtcagtgat atggtaagag attggggtct aacaactata 1823
catatatata gcttggtatt gtaggtgtct ttgttctttg tactgttaat tatataaaat 1883
agttttaaca cttaaatggt agacttatca ttgacaaaag aaaagaaact gtattctttc 1943
ttggttatgt ataaacataa aaatcatctc tttactatat tgtcttacat t 1994
<210> 25
<211> 449
<212> PRT
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 25
Met Arg Ser Val Asn Asn Ser Ser Val Asp Thr Val Asn Ala Ala Ala
1 5 10 15
Ser Ala Ile Val Ser Ala Glu Ser Arg Thr Gln Pro Ser Ser Val Gln
20 25 30
Lys Lys Arg Gly Ser Trp Trp Ser Leu Tyr Trp Cys Phe Gly Ser Lys
35 40 45
Lys Asn Asn Lys Arg Ile Gly His Ala Val Leu Val Pro Glu Pro Ala
50 55 60
Ala Ser Gly Ala Ala Val Ala Pro Val Gln Asn Ser Ser Ser Asn Ser
65 70 75 80
Thr Ser Ile Phe Met Pro Phe Ile Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser
85 90 95
Phe Leu Pro Ser Gly Pro Pro Ser Ala Ser His Thr Pro Asp Pro Gly
100 105 110
Leu Leu Cys Ser Leu Thr Val Asn Glu Pro Pro Ser Ala Phe Thr Ile
115 120 125
Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Pro Val Thr Pro Pro Val Phe Ser
130 135 140
Ala Phe Thr Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu
145 150 155 160
Ser Pro Ser Ser Pro Glu Val Pro Phe Ala Gln Leu Leu Thr Ser Ser
165 170 175
Leu Glu Arg Ala Arg Arg Asn Ser Gly Gly Gly Met Asn Gln Lys Phe
180 185 190
Ser Ala Ala His Tyr Glu Phe Lys Ser Cys Gln Val Tyr Pro Gly Ser
195 200 205
Pro Gly Gly Asn Leu Ile Ser Pro Gly Ser Gly Thr Ser Ser Pro Tyr
210 215 220
Pro Gly Lys Cys Ser Ile Ile Glu Phe Arg Ile Gly Glu Pro Pro Lys
225 230 235 240
Phe Leu Gly Phe Glu His Phe Thr Ala Arg Lys Trp Gly Ser Arg Phe
245 250 255
Gly Ser Gly Ser Ile Thr Pro Ala Gly Gln Gly Ser Arg Leu Gly Ser
260 265 270
Gly Ala Leu Thr Pro Asp Gly Ser Lys Leu Thr Ser Gly Val Val Thr
275 280 285
Pro Asn Gly Ala Glu Thr Val Ile Arg Met Ser Tyr Gly Asn Leu Thr
290 295 300
Pro Leu Glu Gly Ser Leu Leu Asp Ser Gln Ile Ser Glu Val Ala Ser
305 310 315 320
Leu Ala Asn Ser Asp His Gly Ser Ser Arg His Asn Asp Glu Ala Leu
325 330 335
Val Val Pro His Arg Val Ser Phe Glu Leu Thr Gly Glu Asp Val Ala
340 345 350
Arg Cys Leu Ala Ser Lys Leu Asn Arg Ser Gly Ser His Glu Lys Ala
355 360 365
Ser Gly Glu His Leu Arg Pro Asn Cys Cys Lys Thr Ser Gly Glu Thr
370 375 380
Glu Ser Glu Gln Ser Gln Lys Leu Arg Ser Phe Ser Thr Gly Ser Asn
385 390 395 400
Lys Glu Phe Lys Phe Asp Ser Thr Asn Glu Glu Met Ile Glu Lys Ile
405 410 415
Arg Ser Glu Trp Trp Ala Asn Glu Lys Val Ala Gly Lys Gly Asp His
420 425 430
Ser Pro Arg Asn Ser Trp Thr Phe Phe Pro Val Leu Arg Ser Gly His
435 440 445
Thr
<210> 26
<211> 1947
<212> DNA
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<220>
<221> CDS
<222> (374)..(1669)
<400> 26
attctgatta aaatagaaat gctttttcct tggtaaggat catcttttca tgccgattgc 60
atcagtgcag atttccttat ttactctttc tcttctcaaa tttccatttt tttctttatc 120
tctcccactc ccactcataa aattagtttt gtctttcttt ccccaaaaat ctttacttaa 180
aatctttttc acccttttgc tttaactttt gtttgctcct cctctggatc gtatcagtaa 240
actggaagaa gaaattgtga gaaaaaatgg agaaaaccaa gatgattacg tctatgacct 300
gttgaagaaa ccctactcag aataagagta aaactctgtg atttttctga ctaacagaga 360
gagagacacc taa atg ggc tca gag cag gat cag agg aaa agg tgg gga 409
Met Gly Ser Glu Gln Asp Gln Arg Lys Arg Trp Gly
1 5 10
ggt tgt tta gga gtg ttc tct tgt ttc aag tca caa aaa ggt gga aaa 457
Gly Cys Leu Gly Val Phe Ser Cys Phe Lys Ser Gln Lys Gly Gly Lys
15 20 25
aga att gta cct gct tct cgc att cct gaa ggt ggc aat gtc tca gct 505
Arg Ile Val Pro Ala Ser Arg Ile Pro Glu Gly Gly Asn Val Ser Ala
30 35 40
tca caa cct aat gga gct cat caa gct ggt gtc tta aat aat caa gct 553
Ser Gln Pro Asn Gly Ala His Gln Ala Gly Val Leu Asn Asn Gln Ala
45 50 55 60
gca gga ggg att aat cta tca cta ttg gct cca cct tcc tct cct gct 601
Ala Gly Gly Ile Asn Leu Ser Leu Leu Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala
65 70 75
tcc ttc acc aat tca gct ctt cct tca act act cag tct cca aac tgc 649
Ser Phe Thr Asn Ser Ala Leu Pro Ser Thr Thr Gln Ser Pro Asn Cys
80 85 90
tac tta tct ctg gct gca aat tca ccg gga ggt cct tcg tcg agt atg 697
Tyr Leu Ser Leu Ala Ala Asn Ser Pro Gly Gly Pro Ser Ser Ser Met
95 100 105
tat gcc act gga cca tat gct cat gaa acc caa tta gtc tca ccg cct 745
Tyr Ala Thr Gly Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro Pro
110 115 120
gtt ttc tct act ttc acc acc gag cca tcg act gct cct ttc act cct 793
Val Phe Ser Thr Phe Thr Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro
125 130 135 140
cct cca gag ctt gca cgt ctg act gcc cct tct tca cct gat gta cct 841
Pro Pro Glu Leu Ala Arg Leu Thr Ala Pro Ser Ser Pro Asp Val Pro
145 150 155
tat gct cgt ttc ttg act tcc tcc atg gat ctc aag aac tct ggt aaa 889
Tyr Ala Arg Phe Leu Thr Ser Ser Met Asp Leu Lys Asn Ser Gly Lys
160 165 170
ggt cat tac aat gat ctt caa gct act tat tct ctt tat ccc gga agt 937
Gly His Tyr Asn Asp Leu Gln Ala Thr Tyr Ser Leu Tyr Pro Gly Ser
175 180 185
cca gcc agt gct ctt aga tca cca atc tct cgg gct tcg gga gat ggg 985
Pro Ala Ser Ala Leu Arg Ser Pro Ile Ser Arg Ala Ser Gly Asp Gly
190 195 200
tta ttg tcg cct caa aat ggt aaa tgc tca agg agt gat tct ggc aac 1033
Leu Leu Ser Pro Gln Asn Gly Lys Cys Ser Arg Ser Asp Ser Gly Asn
205 210 215 220
aca ttc ggg tat gac aca aat gga gtc tca aca cct ttg cag gag tca 1081
Thr Phe Gly Tyr Asp Thr Asn Gly Val Ser Thr Pro Leu Gln Glu Ser
225 230 235
aac ttc ttc tgt cct gaa act ttt gcc aag ttt tac ctg gat cac gac 1129
Asn Phe Phe Cys Pro Glu Thr Phe Ala Lys Phe Tyr Leu Asp His Asp
240 245 250
cct tca gtt cct caa aac ggt gga aga tta agc gtg tcg aag gat tca 1177
Pro Ser Val Pro Gln Asn Gly Gly Arg Leu Ser Val Ser Lys Asp Ser
255 260 265
gat gtg tat cct aca aat gga tat gga aac ggg aac cag aat agg cag 1225
Asp Val Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Gly Asn Gly Asn Gln Asn Arg Gln
270 275 280
aac aga agt ccc aag caa gac atg gag gag tta gaa gct tac agg gcg 1273
Asn Arg Ser Pro Lys Gln Asp Met Glu Glu Leu Glu Ala Tyr Arg Ala
285 290 295 300
tcc ttt ggt ttt agt gca gat gaa atc atc aca act agt cag tat gta 1321
Ser Phe Gly Phe Ser Ala Asp Glu Ile Ile Thr Thr Ser Gln Tyr Val
305 310 315
gag atc act gat gtg atg gat ggg tct ttt aac aca tca gct tac tct 1369
Glu Ile Thr Asp Val Met Asp Gly Ser Phe Asn Thr Ser Ala Tyr Ser
320 325 330
cca agc gat gga caa aag ctt ctc aga aga gaa gca aat ttg ctg agt 1417
Pro Ser Asp Gly Gln Lys Leu Leu Arg Arg Glu Ala Asn Leu Leu Ser
335 340 345
caa aca agc ccc aaa tca gaa gcc gat ctt gat tca caa gtt gta gac 1465
Gln Thr Ser Pro Lys Ser Glu Ala Asp Leu Asp Ser Gln Val Val Asp
350 355 360
ttc caa tca cca aag tca tca aat agc tac aaa gat cac aaa caa aga 1513
Phe Gln Ser Pro Lys Ser Ser Asn Ser Tyr Lys Asp His Lys Gln Arg
365 370 375 380
aac cgg atc cat gcg gat gaa gag gct tta ttg tcg aga gtg ggg tct 1561
Asn Arg Ile His Ala Asp Glu Glu Ala Leu Leu Ser Arg Val Gly Ser
385 390 395
gta aaa gga agc aga agc tat cat att tca agc tct gat gca gag gtc 1609
Val Lys Gly Ser Arg Ser Tyr His Ile Ser Ser Ser Asp Ala Glu Val
400 405 410
gag tac aga aga gga aga agc tta agg gaa agc aga gag aac aga cac 1657
Glu Tyr Arg Arg Gly Arg Ser Leu Arg Glu Ser Arg Glu Asn Arg His
415 420 425
agg aaa gcc tga tcaagaacaa caacaacaag aagaagaaag cctgatctgt 1709
Arg Lys Ala
430
tcttaaagtc ttctaaggtc taaaaagttg atcttgtgat gctaactctt gagataagaa 1769
gtctagtttt taagtatata tagatatata taaatataat tacagatggt tttttagtag 1829
aatgatgtta tatataagaa gagagcaagg gtgagaaagt gaatgcttgt tttttagttt 1889
gacatggctt ttttgtaaga ccccatcttt tatctaattg caccaatctg tttgagct 1947
<210> 27
<211> 431
<212> PRT
<213> 拟南芥(Arabidopsis thaliana)
<400> 27
Met Gly Ser Glu Gln Asp Gln Arg Lys Arg Trp Gly Gly Cys Leu Gly
1 5 10 15
Val Phe Ser Cys Phe Lys Ser Gln Lys Gly Gly Lys Arg Ile Val Pro
20 25 30
Ala Ser Arg Ile Pro Glu Gly Gly Asn Val Ser Ala Ser Gln Pro Asn
35 40 45
Gly Ala His Gln Ala Gly Val Leu Asn Asn Gln Ala Ala Gly Gly Ile
50 55 60
Asn Leu Ser Leu Leu Ala Pro Pro Ser Ser Pro Ala Ser Phe Thr Asn
65 70 75 80
Ser Ala Leu Pro Ser Thr Thr Gln Ser Pro Asn Cys Tyr Leu Ser Leu
85 90 95
Ala Ala Asn Ser Pro Gly Gly Pro Ser Ser Ser Met Tyr Ala Thr Gly
100 105 110
Pro Tyr Ala His Glu Thr Gln Leu Val Ser Pro Pro Val Phe Ser Thr
115 120 125
Phe Thr Thr Glu Pro Ser Thr Ala Pro Phe Thr Pro Pro Pro Glu Leu
130 135 140
Ala Arg Leu Thr Ala Pro Ser Ser Pro Asp Val Pro Tyr Ala Arg Phe
145 150 155 160
Leu Thr Ser Ser Met Asp Leu Lys Asn Ser Gly Lys Gly His Tyr Asn
165 170 175
Asp Leu Gln Ala Thr Tyr Ser Leu Tyr Pro Gly Ser Pro Ala Ser Ala
180 185 190
Leu Arg Ser Pro Ile Ser Arg Ala Ser Gly Asp Gly Leu Leu Ser Pro
195 200 205
Gln Asn Gly Lys Cys Ser Arg Ser Asp Ser Gly Asn Thr Phe Gly Tyr
210 215 220
Asp Thr Asn Gly Val Ser Thr Pro Leu Gln Glu Ser Asn Phe Phe Cys
225 230 235 240
Pro Glu Thr Phe Ala Lys Phe Tyr Leu Asp His Asp Pro Ser Val Pro
245 250 255
Gln Asn Gly Gly Arg Leu Ser Val Ser Lys Asp Ser Asp Val Tyr Pro
260 265 270
Thr Asn Gly Tyr Gly Asn Gly Asn Gln Asn Arg Gln Asn Arg Ser Pro
275 280 285
Lys Gln Asp Met Glu Glu Leu Glu Ala Tyr Arg Ala Ser Phe Gly Phe
290 295 300
Ser Ala Asp Glu Ile Ile Thr Thr Ser Gln Tyr Val Glu Ile Thr Asp
305 310 315 320
Val Met Asp Gly Ser Phe Asn Thr Ser Ala Tyr Ser Pro Ser Asp Gly
325 330 335
Gln Lys Leu Leu Arg Arg Glu Ala Asn Leu Leu Ser Gln Thr Ser Pro
340 345 350
Lys Ser Glu Ala Asp Leu Asp Ser Gln Val Val Asp Phe Gln Ser Pro
355 360 365
Lys Ser Ser Asn Ser Tyr Lys Asp His Lys Gln Arg Asn Arg Ile His
370 375 380
Ala Asp Glu Glu Ala Leu Leu Ser Arg Val Gly Ser Val Lys Gly Ser
385 390 395 400
Arg Ser Tyr His Ile Ser Ser Ser Asp Ala Glu Val Glu Tyr Arg Arg
405 410 415
Gly Arg Ser Leu Arg Glu Ser Arg Glu Asn Arg His Arg Lys Ala
420 425 430
<210> 28
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 28
ggaagttcat ttattcggag ag 22
<210> 29
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 29
ggcaacagga ttcaatctta ag 22
<210> 30
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 30
cgccatccaa gctgttctc 19
<210> 31
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 31
tcacgtccag caaggtcaag 20
<210> 32
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 32
cattcgtctc tcgggtcca 19
<210> 33
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 33
tcttcggcga agctgatcta 20
<210> 34
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 34
cgagaaaatt ctcagactca 20
<210> 35
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 35
aagcagctgc gtttatagta 20
<210> 36
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 36
ggtggtttct gagtagtagt 20
<210> 37
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 37
agtctcaacg ctgttatta 19
<210> 38
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 38
gttatttgat tgtcgtcgtt 20
<210> 39
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 39
ttctagactc agcggagac 19
<210> 40
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 40
ctgttgaaga aaccctactc 20
<210> 41
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 41
accttttcct ctgatcct 18
<210> 42
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 42
caccatgaga agcggtgcta atgg 24
<210> 43
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 43
ttagcttagt gtacctgact g 21
<210> 44
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 44
caccatgcag agtgggagcg agat 24
<210> 45
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 45
ttagctgacc cctggctgt 19
<210> 46
<211> 39
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 46
aggatttatc acaagtttgt acaaaaaagc aggctccgc 39
<210> 47
<211> 40
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 47
gtttggtgtt actcctgcag gatttatcac aagtttgtac 40
<210> 48
<211> 63
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 48
caccactttg tacaagaaag ctgggtcggc gcgcccaccc ttttagctta gtgtacctga 60
ctg 63
<210> 49
<211> 54
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 49
ggccgatttg gcccctgcag gatttatcac cactttgtac aagaaagctg ggtc 54

Claims (27)

1.一种导入了编码蛋白质的核酸的植物,其中,
该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。
2.根据权利要求1所述的植物,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的植物,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的植物,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
5.一种使植物的生物质增加的方法,该方法包括向植物导入编码蛋白质的核酸的工序,其中,
该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
8.根据权利要求5~7中任一项所述的方法,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
9.一种增加了生物质的植物的制备方法,该方法包括向植物导入编码蛋白质的核酸的工序,其中,该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。
10.根据权利要求9所述的方法,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
11.根据权利要求9或10所述的方法,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
12.根据权利要求9~11中任一项所述的方法,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
13.一种包含编码蛋白质的核酸及启动子的构建体,其中,
该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性。
14.根据权利要求13所述的构建体,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
15.根据权利要求13或14所述的构建体,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
16.一种载体,其包含权利要求13~15中任一项所述的构建体。
17.一种宿主细胞,其包含权利要求16所述的载体。
18.一种植物,其导入了权利要求17所述的载体。
19.根据权利要求18所述的植物,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
20.一种增加了生物质的植物的筛选方法,该方法包括:
(1)在受试植物及野生型植物中,对蛋白质或编码该蛋白质的核酸的表达量进行测定的工序,该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性,
(2)对由工序(1)得到的表达量进行比较的工序,以及
(3)选择比野生型植物中的表达量显示出更高表达量的受试植物的工序。
21.根据权利要求20所述的方法,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
22.根据权利要求20或21所述的方法,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
23.根据权利要求20~22中任一项所述的方法,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
24.一种对增加了生物质的植物进行判定的方法,该方法包括:
(1)在受试植物及野生型植物中,对蛋白质或编码该蛋白质的核酸的表达量进行测定的工序,该蛋白质包含:
序列号1所示的氨基酸序列、以及
与序列号7或11所示的氨基酸序列具有25%以上的同一性或75%以上的相似性的氨基酸序列,且
该蛋白质具有使植物的生物质增加的活性,
(2)对由工序(1)得到的表达量进行比较的工序,以及
(3)确认受试植物中的表达量高于野生型植物中的表达量的工序。
25.根据权利要求24所述的方法,其中,序列号1所示的氨基酸序列为序列号2所示的氨基酸序列。
26.根据权利要求24或25所述的方法,其中,蛋白质包含序列号3~5中任一项所示的氨基酸序列。
27.根据权利要求24~26中任一项所述的方法,其中,核酸为源自单子叶植物或双子叶植物的核酸,植物为单子叶植物。
CN201580055075.2A 2014-10-10 2015-10-09 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用 Active CN107231808B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110189952.2A CN112980872A (zh) 2014-10-10 2015-10-09 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2014-209154 2014-10-10
JP2014209154A JP2017212881A (ja) 2014-10-10 2014-10-10 植物のバイオマスを増大させる新規遺伝子及びその利用
PCT/JP2015/078754 WO2016056650A1 (ja) 2014-10-10 2015-10-09 植物のバイオマスを増大させる新規遺伝子及びその利用

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110189952.2A Division CN112980872A (zh) 2014-10-10 2015-10-09 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107231808A true CN107231808A (zh) 2017-10-03
CN107231808B CN107231808B (zh) 2021-03-05

Family

ID=55653254

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110189952.2A Pending CN112980872A (zh) 2014-10-10 2015-10-09 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用
CN201580055075.2A Active CN107231808B (zh) 2014-10-10 2015-10-09 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110189952.2A Pending CN112980872A (zh) 2014-10-10 2015-10-09 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用

Country Status (5)

Country Link
US (2) US10640782B2 (zh)
JP (1) JP2017212881A (zh)
CN (2) CN112980872A (zh)
BR (1) BR112017006500A8 (zh)
WO (1) WO2016056650A1 (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011074553A1 (ja) * 2009-12-18 2011-06-23 国立大学法人広島大学 植物の生育促進およびバイオマス量の増加に関与する遺伝子ならびにその利用方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6162965A (en) * 1997-06-02 2000-12-19 Novartis Ag Plant transformation methods
JP2005185101A (ja) * 2002-05-30 2005-07-14 National Institute Of Agrobiological Sciences 植物の全長cDNAおよびその利用
BRPI0721515A2 (pt) * 2007-03-28 2014-02-18 Riken Gene que tem atividade promotora de endoreduplicação
CA2718396C (en) 2008-03-14 2016-01-05 Toyota Jidosha Kabushiki Kaisha Gene for increasing the production of plant biomass and/or seeds and method for use thereof
EP2361985A1 (en) * 2010-02-26 2011-08-31 BASF Plant Science Company GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011074553A1 (ja) * 2009-12-18 2011-06-23 国立大学法人広島大学 植物の生育促進およびバイオマス量の増加に関与する遺伝子ならびにその利用方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HEOLOGIS A等: "登录号:NP_564816", 《GENBANK》 *
TANAKA T等: "登录号:NP_001048555", 《GENBANK》 *
宮地朋子: "ブラシノステロイド情報伝達遺伝子BIL7およびBIL1に関する化学生物学的研究", 《东京大学毕业论文》 *

Also Published As

Publication number Publication date
BR112017006500A2 (pt) 2017-12-19
US20200248198A1 (en) 2020-08-06
CN112980872A (zh) 2021-06-18
BR112017006500A8 (pt) 2022-11-08
CN107231808B (zh) 2021-03-05
US11312974B2 (en) 2022-04-26
US20180201947A1 (en) 2018-07-19
WO2016056650A1 (ja) 2016-04-14
JP2017212881A (ja) 2017-12-07
US10640782B2 (en) 2020-05-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5695422B2 (ja) デンプン代謝改変植物
US9624502B2 (en) Methods of controlling plant seed and organ size
US7329797B2 (en) Modulating plant carbon levels
DK3033354T3 (en) Methods for modulating seed and organ size in plants
AU2018253488B2 (en) Methods of controlling seed size in plants
CA2590923A1 (en) Modulating plant nitrogen levels
Wang et al. The Arabidopsis BE1 gene, encoding a putative glycoside hydrolase localized in plastids, plays crucial roles during embryogenesis and carbohydrate metabolism
CN105612171B (zh) 调节植物中的种子和器官大小的方法
US11643665B2 (en) Nucleotide sequences encoding Fasciated EAR3 (FEA3) and methods of use thereof
AU2012323042B2 (en) Plants with decreased activity of a starch dephosphorylating enzyme
CN107231808A (zh) 使植物的生物质增加的新基因及对其的利用
AU2013201355B2 (en) Plants with decreased activity of a starch dephosphorylating enzyme
WO2007149570A2 (en) Modulation of protein levels in plants
JP2011188744A (ja) 高温耐性植物及びそのスクリーニング方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20220524

Address after: Osaka, Japan

Patentee after: KANEKA Corp.

Patentee after: RIKEN

Address before: Tokyo, Japan

Patentee before: JAPAN TOBACCO Inc.

Patentee before: RIKEN

TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20231120

Address after: Saitama Prefecture, Japan

Patentee after: RIKEN

Address before: Osaka, Japan

Patentee before: KANEKA Corp.

Patentee before: RIKEN