CN107099476A - 一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法 - Google Patents

一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107099476A
CN107099476A CN201710406776.7A CN201710406776A CN107099476A CN 107099476 A CN107099476 A CN 107099476A CN 201710406776 A CN201710406776 A CN 201710406776A CN 107099476 A CN107099476 A CN 107099476A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lactobacillus plantarum
spray
survival rate
culture medium
processing method
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710406776.7A
Other languages
English (en)
Inventor
敖晓琳
张国丽
刘书亮
周康
杨勇
何利
陈姝娟
邹立扣
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sichuan Agricultural University
Original Assignee
Sichuan Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sichuan Agricultural University filed Critical Sichuan Agricultural University
Priority to CN201710406776.7A priority Critical patent/CN107099476A/zh
Publication of CN107099476A publication Critical patent/CN107099476A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，涉及植物乳杆菌处理工艺技术领域。本发明在MRS肉汤培养基的基础上添加NaCl、葡萄糖、果胶和全脂乳粉，添加之后的NaCl浓度为40mg/ml，葡萄糖浓度为15mg/ml，果胶浓度为1.5mg/ml，全脂乳粉的浓度为15mg/ml，接种植物乳杆菌，接种量为1×（105-107）CFU/ml，培养温度为42℃，培养环境PH值为5.8，培养时间为36h。本发明通过调节培养营养基质和培养条件，促进植物乳杆菌生物膜形成，增强植物乳杆菌对外界条件的耐受度，从而提高植物乳杆菌在喷雾干燥之后的成活率。

Description

一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法
技术领域
本发明涉及植物乳杆菌处理工艺技术领域，更具体地说涉及一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法。
背景技术
植物乳杆菌目前被广泛应用于食品发酵工业，如发酵泡菜、酸奶等产品。而且植物乳杆菌作为人体胃肠道的益生菌群，具有维持肠道内菌群平衡、提高机体免疫力和促进营养物质吸收等多种功能。目前植物乳杆菌菌种的投入方式主要是直投式菌种，生产方法主要有冷冻干燥法和喷雾干燥，冷冻干燥低温条件下生产，冻干耗时，价格昂贵，冷冻浓缩转化和储藏费用高。而喷雾干燥每千克的成本仅为冻干的 1/6，且喷雾干燥粉末运输成本低，能长期稳定储存。但是在喷雾干燥过程中会遇高温，蛋白质容易发生凝聚和变性，细胞膜液体发生改变，胞内pH下降等情况，使干燥之后的样品活菌数下降。
发明内容
为了克服上述现有技术中存在的缺陷和不足，本发明提供了一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，本发明的发明目的旨在于解决植物乳杆菌喷雾干燥后活菌数下降的问题，本发明通过调节培养营养基质和培养条件，促进植物乳杆菌生物膜形成，增强植物乳杆菌对外界条件的耐受度，从而提高植物乳杆菌在喷雾干燥之后的成活率。
为了解决上述现有技术中存在的问题，本发明是通过下述技术方案实现的：
一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，其特征在于：包括如下步骤：
A、培养基的配置，在MRS肉汤培养基的基础上添加NaCl、葡萄糖、果胶和全脂乳粉，以培养基总量计算，每毫升培养基中添加40mgNaCl、15mg葡萄糖、1.5mg果胶和15mg全脂乳粉；
B、接种植物乳杆菌，在A步骤中获得的培养基上接种植物乳杆菌，接种量为CFU/ml，培养温度为42℃，培养环境pH值为5.8，培养时间为36h。
将B步骤培养完成的植物乳杆菌离心去除培养基，将下层菌体沉淀加入保护剂溶液中，保护剂溶液经过90 ℃水浴处理30 min，与菌体混合均匀后进行喷雾干燥，干燥完成后收集菌粉。
所述的离心去除培养基，具体为采用冷冻离心机，控制温度在4℃，离心机转速5000r，冷冻离心5min去除培养基。
所述保护剂溶液是指，以原培养基总量计算，添加10%乳粉，海藻糖2.5%和蔗糖5%，添加蒸馏水复原至原培养基体积，得到保护剂溶液。
所述喷雾干燥具体是指，采用喷雾干燥机进行喷雾干燥，控制喷雾干燥机进口温度150℃，抽气速率95%，出口温度82 ℃，空气流量40。
与现有技术相比，本发明所带来的有益的技术效果表现在：
1、本发明通过调节培养营养基质和培养条件，促进植物乳杆菌聚集，形成生物被膜，增强植物乳杆菌对外界条件的耐受度，从而提高植物乳杆菌在喷雾干燥之后的成活率，而在本发明中，采用特定的培养营养基和特定的培养条件，可以促进植物乳杆菌生物膜的形成，形成后的生物膜值为4.4923，而对照组的值为0.1365。采用扫描电镜对成膜的植物乳杆菌进行观察，所形成的生物膜较之游离菌体有明显差异，具有大量的胞外聚合物包被，整个膜有孔洞，具有典型的生物膜结构。
2、对照组采用常规方式培养得到的植物乳杆菌，培养条件为接种量105-106 CFU/mL，MRS肉汤37 ℃下摇床培养36 h。采用平板计数对植物乳杆菌生物膜成熟前后对某些环境条件的耐受性做了测定，结果表明，植物乳杆菌生物膜成熟后对温度、酸碱度、盐度、抗氧化剂和消毒剂均有更高的耐受性。其中实验组对温度耐受性是对照组的1.39倍，酸碱度耐受性是对照组的1.91倍， NaCl耐受性是对照组的2.46倍，Nisin耐受性是对照组的 1.32倍，山梨酸钾耐受性是对照组的1.62倍，次氯酸钠耐受性是对照组的1.42倍，双氧水耐受性是对照组的1.63倍，胆盐耐受性是对照组的1.66倍。
3、利用喷雾干燥制备了成膜后的植物乳杆菌菌剂，并测定了菌剂相关性质。未成膜的菌体喷雾干燥存活率仅为1.02%，成膜后菌体喷雾干燥存活率达到50.99%。喷雾干燥前后实验组与对照组的产酸能力变化较小，在培养36h之后最终pH值均在3.4~3.5。
附图说明
图1为本发明实验组与对照组产酸能力变化表；
图2为本发明植物乳杆菌生物膜扫描电镜图；
图3为浮游菌株扫描电镜图。
具体实施方式
实施例1
作为本发明一较佳实施例，参照说明书附图1和2，本实施例公开了：
一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，包括如下步骤：
A、培养基的配置，在MRS肉汤培养基的基础上添加NaCl、葡萄糖、果胶和全脂乳粉，以培养基总量计算，每毫升培养基中添加40mgNaCl、15mg葡萄糖、1.5mg果胶和15mg全脂乳粉；
B、接种植物乳杆菌，在A步骤中获得的培养基上接种植物乳杆菌，接种量为CFU/ml，培养温度为42℃，培养环境PH值为5.8，培养时间为36h。
实施例2
作为本发明又一较佳实施例，参照说明书附图1和2，本实施例公开了：
一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，包括如下步骤：
A、培养基的配置，在MRS肉汤培养基的基础上添加NaCl、葡萄糖、果胶和全脂乳粉，以培养基总量计算，每毫升培养基中添加40mgNaCl、15mg葡萄糖、1.5mg果胶和15mg全脂乳粉；
B、接种植物乳杆菌，在A步骤中获得的培养基上接种植物乳杆菌，接种量为CFU/ml，培养温度为42℃，培养环境PH值为5.8，培养时间为36h。
实施例3
作为本发明又一较佳实施例，参照说明书附图1和2，本实施例公开了：
一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，包括如下步骤：
A、培养基的配置，在MRS肉汤培养基的基础上添加NaCl、葡萄糖、果胶和全脂乳粉，以培养基总量计算，每毫升培养基中添加40mgNaCl、15mg葡萄糖、1.5mg果胶和15mg全脂乳粉；
B、接种植物乳杆菌，在A步骤中获得的培养基上接种植物乳杆菌，接种量为CFU/ml，培养温度为42℃，培养环境PH值为5.8，培养时间为36h。
实施例4
作为本发明又一较佳实施例，参照说明书附图1和2，本实施例公开了：
一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，
植物乳杆菌生物膜的培养：A、培养基的配制，在MRS肉汤培养基的基础上添加40mg/mlNaCl、15mg/ml葡萄糖、1.5mg/ml果胶、15mg/ml全脂乳粉；B、接种植物乳杆菌，接种量为1×105CFU/ML，培养温度为42℃，培养时间36h，培养环境pH值5.8；
离心去除培养基，采用冷冻离心机，离心温度为4℃，转速5000r，时间5min；将下层菌体沉淀加入保护剂溶液中，保护剂配制：以原培养基总量计算，添加10%乳粉，海藻糖2.5%和蔗糖5%，添加蒸馏水复原至原培养基体积，得到保护剂溶液，保护剂溶液经过90 ℃水浴处理30 min，与菌体混合均匀后进行喷雾干燥。
上喷雾干燥机进行喷雾干燥；按照说明书安装喷雾干燥机，先采用100 mL蒸馏水试机，待机器运行稳定后出口呈雾状后换料。干燥工艺参数：进口温度150 ℃，抽气速率95%，出口温度82 ℃，空气流量40 m3/h，收集菌粉于密封袋中。

Claims (5)

1.一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，其特征在于：包括如下步骤：
A、培养基的配置，在MRS肉汤培养基的基础上添加NaCl、葡萄糖、果胶和全脂乳粉，以培养基总量计算，每毫升培养基中添加40mgNaCl、15mg葡萄糖、1.5mg果胶和15mg全脂乳粉；
B、接种植物乳杆菌，在A步骤中获得的培养基上接种植物乳杆菌，接种量为CFU/ml，培养温度为42℃，培养环境pH值为5.8，培养时间为36h。
2.如权利要求1所述的一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，其特征在于：将B步骤培养完成的植物乳杆菌离心去除培养基，将下层菌体沉淀加入保护剂溶液中，保护剂溶液经过90 ℃水浴处理30 min，与菌体混合均匀后进行喷雾干燥，干燥完成后收集菌粉。
3.如权利要求2所述的一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，其特征在于：所述的离心去除培养基，具体为采用冷冻离心机，控制温度在4℃，离心机转速5000r，冷冻离心5min去除培养基。
4.如权利要求2或3所述的一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，其特征在于：所述保护剂溶液是指，以原培养基总量计算，添加10%乳粉，海藻糖2.5%和蔗糖5%，添加蒸馏水复原至原培养基体积，得到保护剂溶液。
5.如权利要求2或3所述的一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法，其特征在于：所述喷雾干燥具体是指，采用喷雾干燥机进行喷雾干燥，控制喷雾干燥机进口温度150℃，抽气速率95%，出口温度82 ℃，空气流量40。
CN201710406776.7A 2017-06-02 2017-06-02 一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法 Pending CN107099476A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710406776.7A CN107099476A (zh) 2017-06-02 2017-06-02 一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710406776.7A CN107099476A (zh) 2017-06-02 2017-06-02 一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107099476A true CN107099476A (zh) 2017-08-29

Family

ID=59660966

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710406776.7A Pending CN107099476A (zh) 2017-06-02 2017-06-02 一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107099476A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108315279A (zh) * 2018-04-09 2018-07-24 河南科技大学 一种植物乳杆菌液体制剂的长时间储存方法
CN109517764A (zh) * 2019-01-10 2019-03-26 西华大学 一种生物被膜态乳酸菌发酵菌剂及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6010725A (en) * 1996-07-09 2000-01-04 Nestec S.A. Spray-drying process
CN101914518A (zh) * 2010-08-02 2010-12-15 天津商业大学 利用喷雾干燥法制备干酪乳杆菌微胶囊菌粉的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6010725A (en) * 1996-07-09 2000-01-04 Nestec S.A. Spray-drying process
CN101914518A (zh) * 2010-08-02 2010-12-15 天津商业大学 利用喷雾干燥法制备干酪乳杆菌微胶囊菌粉的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
尤玉如等: "《乳品与饮料工艺学》", 31 March 2014, 中国轻工业出版社 *
廖庆: "植物乳杆菌热应激研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108315279A (zh) * 2018-04-09 2018-07-24 河南科技大学 一种植物乳杆菌液体制剂的长时间储存方法
CN109517764A (zh) * 2019-01-10 2019-03-26 西华大学 一种生物被膜态乳酸菌发酵菌剂及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Jagannath et al. Comparative evaluation of bacterial cellulose (nata) as a cryoprotectant and carrier support during the freeze drying process of probiotic lactic acid bacteria
CN106047709B (zh) 一种植物乳杆菌冻干粉及其制备方法
CN102994395B (zh) 一株出芽短梗霉及其应用
CN104651232B (zh) 一种肠膜明串珠菌冻干制剂及其制备方法和应用
JP7144478B2 (ja) タンパク質加水分解物を用いたタンパク質－多糖類二重コーティング乳酸菌の製造方法
CN104611256B (zh) 一种微生物冻干制剂及其制备方法
CN107287136A (zh) 一种具有益生功能的益生固态乳酸菌菌剂的制备方法
CN102453681B (zh) 用于约氏乳杆菌真空冷冻干燥的保护剂及其应用
CN107981034A (zh) 一株布氏乳杆菌hew-a666及其应用
CN105505801A (zh) 一种高产谷胱甘肽的酿酒酵母及其用途
CN108048349B (zh) 副干酪乳杆菌n1115包埋菌粉的制备方法及其应用
CN107099476A (zh) 一种提高植物乳杆菌喷雾干燥成活率的处理方法
CN106480140A (zh) 基于豆粕蛋白酶解液的乳酸乳球菌发酵培养基及制备方法
CN101606552B (zh) 一种双歧杆菌深层冷冻直投发酵剂及其复合冷冻保护剂
CN107805617A (zh) 一株马胃葡萄球菌zh810及其应用
JP6343817B2 (ja) 石川県の伝統水産発酵食品に由来する乳酸菌を含有するヨーグルト
Guergoletto et al. Dried probiotics for use in functional food applications
CN110819579A (zh) 一种固态枯草芽孢杆菌菌剂的制备方法
Simonelli et al. Kefiran
CN108102954A (zh) 一种提高嗜热链球菌抗逆性的方法及在菌粉制备中的应用
CN110317762B (zh) 一株产蛋白酶的聚乳酸降解菌及其应用
CN116064281B (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌及其在食品低盐发酵中的应用
CN105255807A (zh) 一种冠突散囊菌的分生孢子的制备方法
CN104450574B (zh) 一种瑞士乳杆菌lh43及其制作乳酸菌饮料的方法
CN108949854B (zh) 固定化植物乳杆菌发酵生产胞外多糖的工艺

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170829