CN107033206B - 6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物及其用途 - Google Patents

6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN107033206B
CN107033206B CN201610580713.9A CN201610580713A CN107033206B CN 107033206 B CN107033206 B CN 107033206B CN 201610580713 A CN201610580713 A CN 201610580713A CN 107033206 B CN107033206 B CN 107033206B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
nmr
characterization data
esi
found
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610580713.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107033206A (zh
Inventor
张健存
林财
周溢谦
孙成海
段安娜
涂正超
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GUANGZHOU HENOVCOM BIOSCIENCE Co.,Ltd.
Original Assignee
Guangzhou Institute of Biomedicine and Health of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Institute of Biomedicine and Health of CAS filed Critical Guangzhou Institute of Biomedicine and Health of CAS
Publication of CN107033206A publication Critical patent/CN107033206A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107033206B publication Critical patent/CN107033206B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/14—Pyrrolo-pyrimidine radicals

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种6‑甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物及其用途，属于药物化学领域。本发明的具有式I结构特征的6‑甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物或者其药学上可接受的盐，是依据RNA病毒聚合酶的蛋白结构特征，设计和合成的一类新结构的化合物，该类化合物能够抑制RNA病毒，从而可以做为预防和治疗如HCV,流感病毒，HRV(鼻病毒)，RSV，Ebola病毒，登革热病毒以及肠道病毒等RNA病毒感染的潜在药物。

Description

6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物及其用途
技术领域
本发明涉及药物化学技术领域，特别是涉及一种6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物及其用途。
背景技术
RNA病毒具有突变率高，繁殖率高和繁殖时间短的特点。这是由于单链RNA链的性质不稳定，作为遗传物质，其在复制和表达过程中，出现错误的频率相当高，且修复机制的酶活性很低，甚至没有。直至2013年，已识别具有感染人类能力的RNA病毒已经达到了180种，且每年以新增2个种类的速度快速增长。
近年来，甲型流感病毒(influenza A)不断爆发严重的疫情，目前的治疗方式有疫苗、M2离子通道抑制剂(如金刚烷胺和金刚乙胺)和神经氨酸酶抑制剂(如奥司他韦和扎那米韦)。但是，有效的预防和治疗的疫苗无法跟上influenza A亚型的变异速度，而临床上用于治疗influenza A药物(包括达菲在内)出现了不同程度的耐药性。此外，利巴韦林还具有造成细胞溶血等的副作用，所以有必要致力于开发出不易出现耐药的高效抗influenza A药物。
登革热病毒(DENV)，是一种通过蚊媒传播的黄病毒科RNA病毒，在这几年里，蔓延快速，已经成为全球关注的健康问题。据WHO报告，全球有五分之二的人面临登革热感染的风险。2000年以后，每年保持1亿人感染的水平，并已导致22000万的儿童死亡。DENV有四种亚型，以DENV-2造成的病症最为严重。预防DENV的疫苗必须包括四种亚型的抗原，否则，如果疫苗在体内生成的抗体对应不上DENV的亚型，会有造成病情加重的可能。所以，目前虽然在研发登革热疫苗上投入很大，但并没有真正能用于临床的疫苗面市，专门用于抗登革热病毒的有效药物更是无从说起。
此外，丙肝病毒(HCV)是全世界慢性肝病的主要病因，且能进一步恶化为肝硬化、肝癌等恶性疾病。但长期以来都是以PEG干扰素α和利巴韦林联合治疗，该方法大概只有50％的适用率。即便RNA依赖的RNA聚合酶抑制剂索非布韦(Sofosbuvir)的上市能有效治愈HCV，但其昂贵价格却让人望而却步。面对这些重大疫情，能真正及时大范围使用并治愈疾病的药物却寥寥无几。
因此，开发出高效的各类病毒尤其是RNA病毒的抑制剂是在目前新药研发领域中具有重要价值和巨大潜力。
发明内容
基于此，本发明的目的在于提供一种
为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：
具有式I结构特征的6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物或者其药学上可接受的盐：
Figure BDA0001056173080000011
其中：
X选自：CH3，CF3，CF2H，CFH2，H，卤素，OR3，OCOR3,CN，N3，-C≡CR4；
Y选自：H，卤素，OR3，OCOR3，CN，N3，-C≡CR4，OCOCH(NHR5)R6；
Z选自：CR3R4，O，S，NR3，CO，CO2，CONR3，SO2，SO2NH，NCONR3，NCO2，OCONR3，CSNR3，NCSNR3，C1-C10烷基，C2-C10不饱和烷基,C3-C7环烷基，芳基，R10取代芳基，R10取代的含有一个或多个O、N、S杂原子的芳杂环，或没有；
W选自：H，卤素，OR3，OCOR3，N3；
R1选自：H，酯基，酰胺基，取代或不取代单膦酸酯，取代或不取代双膦酸酯，取代或不取代三膦酸酯，CO2R3；
R2选自：H,卤素,CN,酰胺基，酯基，CF3，CHF2，CH2F，NO2，C1-C10烷基，C2-C10不饱和烷基,C1-C10取代烷基，取代或非取代C3-C7环烷基，芳基，R10取代芳基，R10取代的含有一个或多个O、N、S杂原子的芳杂环，COOR3，萘环，CONR3R4，COOR3，或没有；
R3选自：H，C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，R10取代的C1-C6烷基，O、N、S杂原子取代的C1-C6烷基，O、N、S杂原子取代的C2-C6不饱和烷基；
R4选自：H、C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，R10取代的C1-C6烷基，O、N、S杂原子取代的C1-C6烷基，O、N、S杂原子取代的C2-C6不饱和烷基；
R5选自：H，C1-C6烷基，芳烷基；
R6选自：H，C1-C6烷基，芳烷基，C1-C6取代烷基，氨基酸侧链基；
R10选自：H，卤素，C1-C6烷基，氰基，C1-C6烷氧基，CF3，C2-C6不饱和烷基，C6-C10取代芳烷基，CF3，CHF2，CH2F，OR11，NR11R12，CN，CO2R11，CONR11R12，SO2R11，SO2NR11R12，NO2，NCONR11R12，NCO2R11，OCONR11R12，CSNR11R12，NCSN R11R12；
R11、R12独立地任选自：H、C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，O、N、S杂原子取代的C1-C6烷基，O、N、S杂原子取代的C2-C 6不饱和烷基。
在其中一些实施例中，R1选自：H、COR3、氨基酸形成的酯基，或如下基团：
Figure BDA0001056173080000021
其中：
R7选自：H,C1-C6烷基,C3-C7环烷基,芳基，R10取代芳基，含有一个或多个O、N、S杂原子的芳杂环；
R8，R16，R17，R18独立地任选自：H，C1-C6烷基，C3-C7环烷基；
R9选自：氨基酸的侧链基团，H，C1-C6烷基，含有O、S、氨基、呱基、咪唑、羧基、酰胺基的C1-C6烷基，芳基取代C1-C6烷基，含有取代苯基的芳基，含有取代吲哚基的芳基；
R10选自：H，CN，NO2，C1-C6烷基，C1-C6取代烷基，卤素，OR3，NR3R4，SR3，CO2R3，CONR3R4，芳基,取代芳基，含有一个或多个O、N、S杂原子的芳杂环；
R11，R12独立地任选自：H、C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，O、N、S杂原子取代的C1-C6烷基，O、N、S杂原子取代的C2-C 6不饱和烷基；
Ar选自：芳基，取代芳基，含有一个或多个O、N、S杂原子的芳杂环；
R2选自：CH3,CF3，CN，卤素，C2-C10不饱和烷基，如下基团，或没有：
Figure BDA0001056173080000022
其中，
A选自：CH2，N；
B选自：C，O，NH，S；
R10选自：H，C1-C6烷基，C1-C6不饱和烷基，C6-C10取代芳烷基，卤素，CF3，CHF2，CH2F，OR11，NR11R12，CN，CO2R11，CONR11R12，SO2R11，SO2NR11R12，NO2，NCON R11R12，NCO2R11，OCONR11R12，CSNR11R12，NCSN R11R12；
Z选自如下基团或没有：
Figure BDA0001056173080000031
其中，
R13，R14独立地任选自：H，卤素，CN，C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，含氟取代C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C3-C6环烷基，C6-C10取代芳烷基，含有O、N、S、P杂原子的C1-C6烷基或环状烷基或不饱和链状或环状烷基；
R15选自：H，C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，C6-C10取代芳烷基，卤素，CF3，CHF2，CH2F，OR11，NR11R12，CN，CO2R11，CONR11R12，SO2R11，SO2NR11R12，NO2，NCON R11R12，NCO2R11，OCONR11R12，CSNR11R12，NCSN R11R12。
在其中一些实施例中，X选自：CH3，H，卤素；
Y选自：H，卤素，OR3；
Z选自：C2-C10不饱和烷基，或没有；优选乙烯基、或没有；
W选自：OH，OCOR3；
R1选自：H，取代或不取代单膦酸酯，COR3；
R2选自：卤素,CN,C2-C10不饱和烷基，芳基，R10取代芳基，R10取代的含有一个或多个O、N、S杂原子的芳杂环，COOR3，萘环，CONR3R4，COOR3；
R3选自：H，C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，R10取代的C1-C6烷基；
R4选自：H、C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，R10取代的C1-C6烷基；
R10选自：H，卤素，C1-C6烷基，氰基，C1-C6烷氧基，CF3。
在其中一些实施例中，X选自：CH3，H，F；优选CH3；
Y选自：H，F，OH；优选F；
在其中一些实施例中，选自式II结构特征化合物：
Figure BDA0001056173080000032
其中：
W选自：OH，或OCOR3；
R1选自：H，或COR3；
R2选自如下基团：
Figure DEST_PATH_GDA0001115581550000041
R3选自：异丙基。
R16选自：H，C1-C6烷基，C1-C6不饱和烷基，C6-C10取代芳烷基，卤素，CF3，CHF2，CH2F，OR11，NR11R12，CN，CO2R11，CONR11R12，SO2R11，SO2NR11R12，NO2，NCON R11R12，NCO2R11，OCONR11R12，CSNR11R12，NCSN R11R12；
R11、R12独立地任选自：H、C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，O、N、S杂原子取代的C1-C6烷基，O、N、S杂原子取代的C2-C6不饱和烷基。
在其中一些实施例中，R2选自如下基团：
Figure BDA0001056173080000042
R16选自：H，C1-C6烷基，C1-C6不饱和烷基，C6-C10取代芳烷基，卤素，CF3，OR11，NR11R12，CN，CO2R11，CONR11R12，SO2R11；
R11、R12独立地任选自：H、C1-C6烷基，C2-C6不饱和烷基，O、N、S杂原子取代的C1-C6烷基，O、N、S杂原子取代的C2-C 6不饱和烷基。
在其中一些实施例中，选自式III结构特征化合物：
Figure BDA0001056173080000043
其中：
X选自：CH3，F；
Y选自：H，F；
R2选自：乙烯基，萘基，-Cl，-Br，乙炔基。
在其中一些实施例中，R2选自如下基团：乙烯基，-Br。
本发明还公开了上述的6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物或者其药学上可接受的盐在制备抑制RNA病毒的药物中的应用。
在其中一些实施例中，所述RNA病毒包括：HCV病毒，流感病毒，HRV病毒(鼻病毒)，RSV病毒，Ebola病毒，登革热病毒和肠道病毒。
所述应用包括单独或与其它药物联用做为治疗药物用于RNA病毒感染的预防和治疗中。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明的6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物或者其药学上可接受的盐，是依据RNA病毒聚合酶的蛋白结构特征，设计和合成的一类新结构的化合物，该类化合物能够抑制RNA病毒，从而可以做为预防和治疗如HCV,流感病毒，HRV(鼻病毒)，RSV，Ebola病毒，登革热病毒以及肠道病毒等RNA病毒感染的潜在药物。
具体实施方式
本文所用“烷基”是指饱和链状烷基，“链状烷基”是指直链或支链的烷基，如C1-C6烷基是指具有1至6个碳原子的饱和直链或支链的烷基，其中直链烷基的示例包括但不限于乙基，正丙基等，支链烷基的示例包括但不限于异丙基，叔丁基等；“环烷基”是指具有环状结构的烷基，如C3-C4环烷基指具有3至4个碳原子的具有环状结构的烷基，示例包括但不限于环丙基，环丁基、甲基取代环丙基等。“烯基”是指不饱和链状烷基，如C2～C6烯基表示碳原子数为2个到6个的具有一个双键的直链或支链烯基，示例包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、异丁烯基、戊烯基、己烯基等。
术语“杂环”代表具有5-7个成环原子、含有一到四个选自N、O、S的杂原子的饱和单环体系。示例包括但不限于：四氢呋喃、吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉等。
术语“芳杂环”代表具有5-6个成环原子、含有一到四个杂原子(选自N、O、S)且遵守Hückel规则的单环体系。示例包括但不限于吡啶环、嘧啶环、哒嗪环、吡嗪环、呋喃环、噻吩环、噻唑环、噁唑环、异噁唑环、异噻唑环、咪唑环、吡唑环、三氮唑环、四氮唑环等。
术语“烷氧基”表示末端含有一个氧原子的直链或支链烷基，示例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基等。
术语“取代”是指用指定取代基的基团置换特定结构中的氢基。本发明中烷基或环烷基上的取代，如没有指明发生在特定的碳原子上，则表示可以发生在任何取代基个数尚未达到饱和的碳原子上。多个取代基从同一系列中选择时，它们可以相同，也可以不同。本发明中苯环、芳杂环或者杂环上的取代，如没有指明发生在特定的原子上，则表示可以发生在任何未被除氢与外的其它原子取代的位置。多个取代基从同一系列中选择时，它们可以相同，也可以不同。
本发明包括式I-III化合物的游离形式，也包括其药学上可接受的盐。可通过常规化学方法自含有碱性部分或酸性部分的本发明化合物合成本发明的药学上可接受的盐。通常，通过离子交换色谱或通过游离碱和化学计算量或过量的所需盐形式的无机或有机酸在适当溶剂或多种溶剂的组合中反应制备碱性化合物的盐。类似的，通过和适当的无机或有机碱反应形成酸性化合物的盐。
因此，本发明化合物的药学上可接受的盐包括通过碱性本发明化合物和无机或有机酸反应形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规的无毒盐包括自无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等制备的盐，也包括自有机酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2一乙酰氧基一苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等制备的盐。
如果本发明化合物为酸性的，则适当的“药学上可接受的盐”指通过药学上可接受的无毒碱包括无机碱及有机碱制备的盐。得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。得自药学上可接受的有机无毒碱的盐，所述碱包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，取代的胺包括天然存在的取代胺、环状胺及碱性离子交换树脂例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N'－二苄基乙二胺、二乙胺、2一二乙基氨基乙醇、2一二甲基氨基乙醇、氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N一乙基吗啉、N一乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、羟钴胺、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪,哌啶、呱咤、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。
除在文献中已知的或在实验程序中例证的标准方法外，可采用如下实施例中的方法制备本发明化合物。结合下述的合成方案，能够对本发明中所述的化合物以及合成方法进行更好的理解。实例中的所有参数及其余说明，除另加说明外，都是以质量为依据的。柱层析分离所用填料若未说明均为硅胶。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。所述的合成方案描述了可以用于制备本发明中所述的化合物的方法，所述的方法仅仅是为说明目的的说明性方案描述，并不构成对本发明所具有的范围的限制。
实施例1碱基的制备
Figure BDA0001056173080000061
按照以上线路，包括如下步骤：
(1)2-氰基-4,4-二乙氧基丁酸乙酯(化合物1)的制备。
取一500mL的两口瓶，将氰基乙酸乙酯(50g，0.44mol)溶于无水DMF(N,N-二甲基甲酰胺)(300mL)溶液中，加入乙醇钠(36g，0.528mol，1.2当量)和碘化钠(催化量)，在常温下搅拌30min，加入2-溴-1,1-二乙氧基乙烷(66.5mL，0.44mol，1当量)，升温至90℃，搅拌4h。冷却至常温，减压蒸发除去大部分DMF，加入EA(乙酸乙酯)，搅拌10min，过滤，取滤液加饱和食盐水萃取。收集有机相，干燥，旋干，过柱(PE：EA＝12:1，即石油醚：乙酸乙酯的体积比为12：)得浅黄色油状液体产物61.3g，产率为60.5％。
化合物1的表征数据：1H-NMR(400MHz,Chloroform-d):σ1.18–1.22(m,6H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H),2.16–2.21(m,1H),2.24–2.29(m,1H),3.49–3.55(m,2H),3.64–3.71(m,3H),4.24(q,J＝7.2Hz,2H),4.68(t,J＝5.4Hz,1H).
(2)6-氨基-5-(2,2-二乙氧基乙基)-2-硫代-2,3-二氢嘧啶-4(1H)-酮(化合物2)的制备。
取一250mL单口瓶，加入化合物1(34g，14.8mmol)，用乙醇(100mL)溶解，加入乙醇钠(12g，17.8mmol，1.2当量)，搅拌，加入硫脲(13.7g，17.8mmol，1.2当量)，升温至95℃，回流过夜。冷却至常温，旋干，加入水溶解，用乙醚洗，收集水相，加入醋酸调至中性，过滤，干燥，得黄色固体的粗产品20.3g，产率为55％。
化合物2的表征数据：1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):σ1.07(t,J＝7.2Hz,6H),2.43(d,J＝5.4Hz,2H),3.37–3.43(m,6H),3.56–3.61(m,2H),4.50(t,J＝5.4Hz,1H),6.07(s,2H),11.5(br s,1H),11.7(br s,1H).
(3)2-硫代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4(7H)-酮(化合物3)
取一250mL的单口瓶，加入化合物2(15g，5.7mmol)和0.2N HCl(18mL)，搅拌过夜，过滤，得橙黄色固体的粗产物20g。
化合物3的表征数据：1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):σ6.33(s,1H),6.72(s,1H),11.28(s,1H),11.86(s,1H).
(4)1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4(7H)-酮(化合物4)
取一500mL的单口瓶，加入化合物3(15g，90mmol)，用水(150mL)溶解，加入氨水(10mL)，搅拌，加入雷尼镍(催化量)，升温至100℃，回流5h。待反应完毕，在滤纸上垫上一层硅藻土，减压过滤，将滤饼取出，用水和甲醇的混合液搅拌10min，再次过滤，旋干，得绿色固体产物8.25g，制备化合物3和4的两步产率为54％。
化合物4的表征数据：1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):σ6.43(s,1H),7.03(s,1H),7.82(s,1H),11.84(s,1H).
(5)4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(化合物5)
取一250mL的单口瓶，加入化合物4(10g，74.5mmol)和三氯氧磷(100mL)，升温至100℃，回流反应5h。冷却，旋干，置于0℃的低温反应器中，加入冰块淬灭，用乙酸乙酯萃取，干燥，旋干，过柱(PE：EA＝2:1)，得白色固体产物7.5g，产率为65.7％。
化合物5的表征数据：1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):σ6.61(t,J＝3Hz,1H),7.70(t,J＝3Hz,1H),8.59(s,1H).
(6)4-氯-5-碘7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(化合物6)
取一250mL的两口瓶，加入化合物5(5g，33mmol)，氩气保护，加入无水DMF，缓慢加入NIS(8.1g，36mmol，1.1当量)的无水DMF溶液，常温搅拌3h。加入饱和硫代硫酸钠溶液(50mL)淬灭反应，加入EA(100mL)，收集有机相，饱和食盐水洗，萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝4:1)，得白色固体产物7.4g，产率为82％。
化合物6的表征数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):σ12.94(s,1H),8.59(s,1H),7.93(s,1H).
实施例2中间体的制备
Figure BDA0001056173080000071
(1)化合物8的制备
取一50mL两口瓶，加入化合物6(112mg，0.40mmol)，氩气保护，加入无水乙腈(5mL)溶解，加入BSA(N,O-双三甲硅基乙酰胺)(0.11mL，0.44mmol，1.1当量)，常温搅拌10min，加入溶解于干燥乙腈(5mL)中的化合物7(222mg，0.44mmol，1.1当量)，加入TMSOTf(三氟甲磺酸三甲基硅酯)(0.081mL，0.42mmol，1.05当量)，室温搅拌15min，升温至80℃，直至TLC(薄层色谱)显示原料反应完毕，冷却至室温，加入乙酸乙酯(75mL)稀释，加入饱和NaHCO3(碳酸氢钠)溶液，萃取，加入饱和食盐水，萃取，Na2SO4干燥，旋干，过柱(PE：EA＝10:1)，得白色固体产物135mg，产率为45％。
化合物8的表征数据：1H-NMR(400MHz,Chloroform-d):σ8.58(s,1H),8.12(d,J＝7.2Hz,2H),8.00(d,J＝7.2Hz,2H),7.93(d,J＝7.2Hz,2H),7.62–7.51(m,6H),7.43–7.36(m,4H),6.15(d,J＝4.4Hz,1H),6.15(d,J＝18Hz,2H),4.91(d,J＝12.4Hz,1H),4.80(s,1H),4.70(d,J＝11.6Hz,1H).
(2)化合物9的制备
取一50mL单口瓶，加入化合物8(228mg，0.315mmol)，无水四氢呋喃(5mL)溶解，置于-10℃，滴加异丙基氯化镁氯化锂溶液(1.3M，0.24mL，0.315mmol，1当量)，搅拌30min，TLC显示原料反应完毕。加入1N HCl(5mL)溶液淬灭，加入EA萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝10:1)，得白色固体产物151mg，产率为80％。
化合物9的表征数据：1H-NMR(400MHz,Chloroform-d):σ8.09(t,J＝5.6Hz,3H),8.02-8.00(m,3H),7.61(d,J＝4.8Hz,2H),7.59–7.34(m,10H),6.23(d,J＝7.6Hz,1H),5.71(dd,J＝6.4,6.8Hz,1H),4.73–4.66(m,3H),4.45(dd,J＝3.6,3.6Hz,1H).
(3)化合物10的制备
取一25mL单口瓶，加入化合物9(100mg，0.17mmol)，无水四氢呋喃(5mL)溶解，加入Pd(PPh3)4(四三苯基膦钯)(40mg，0.034mmol，0.2当量)，滴加三甲基铝正己烷溶液(1.6M，0.2ml，2当量)，置于100℃回流，反应5min，冷却至室温，加入1N HCl(5mL)溶液淬灭，加入EA萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝4:1)，得白色固体产物75mg，产率为78％。
化合物10的表征数据：1H-NMR(400MHz,Chloroform-d):σ8.75(s,1H),8.13(d,J＝6Hz,2H),8.01(d,J＝6Hz,2H),7.93(d,J＝6.4Hz,2H),7.61–7.33(m,10H),6.74(d,J＝4.4Hz,1H),6.57(d,J＝2.4Hz,1H),6.26(t,J＝4.8Hz,1H),6.17(t,J＝4Hz,1H),4.88(d,J＝9.6Hz, 1H),4.79(d,J＝2.4Hz,1H),4.70(d,J＝2.8Hz,1H),2.70(s,3H).
(4)化合物11a或11b的制备
化合物11a：取一250mL的两口瓶，加入化合物10(5g，8.7mmol)，氩气保护，加入无水DMF，在常温下缓慢加入NIS(N-碘代丁二酰亚胺)(2.1g，9.6mmol，1.1当量)的无水DMF溶液，室温搅拌3h。加入饱和硫代硫酸钠溶液(50mL)淬灭反应，加入EA(100mL)，收集有机相，加入饱和食盐水，萃取，干燥，旋干，所得粗产物11a直接投下一步。
化合物11b：取一250mL的两口瓶，加入化合物10(1g，1.8mmol)，氩气保护，加入无水DMF，在常温下缓慢加入NBS(N-溴代丁二酰亚胺)(0.32g，2.0mmol，1.1当量)的无水DMF溶液，室温搅拌3h。加入饱和硫代硫酸钠溶液(50mL)淬灭反应，加入EA(100mL)，收集有机相，加入饱和食盐水，萃取，干燥，旋干，所得粗产物11b直接投下一步。
(5)化合物12a或12b的制备
化合物12a或12b：取一100ml单口瓶，加入化合物11a或11b，加入NH3的甲醇溶液(30mL)溶液，室温搅拌2h，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10：1，即二氯甲烷：异丙醇＝10:1)，分别得白色固体4.45g和0.48g，两步产率均为80％。
化合物12a的表征数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):σ8.66(s,1H),6.18(d,J＝6.2Hz,1H),5.38(d,J＝6.4Hz,1H),5.18(d,J＝4.8Hz,1H),5.10(t,J＝5.5Hz,1H),4.38(dd,J＝6.3,5.1Hz,1H),4.09(dd,J＝5.0,3.2Hz,1H),3.91(dd,J＝3.9,3.2Hz,1H),3.64(dd,J＝11.9,5.6Hz,1H),3.55(d,J＝11.9Hz,1H),2.88(s,3H).MS(ESI)C13H15IFN3O3requires:391.0.Found:392.1.(M+H+).
化合物12b的表征数据：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.70(s,1H),8.06(s,1H),6.21(d,J＝6.2Hz,1H),5.40(d,J＝6.3Hz,1H),5.19(d,J＝4.8Hz,1H),5.10(t,J＝5.4Hz,1H),4.38(t,J＝6.2Hz,1H),4.10(t,J＝4.9Hz,1H),3.91(d,J＝3.6Hz,1H),3.64(q,J＝11.9,5.2Hz,1H),3.55(q,J＝11.9,5.5Hz,1H),2.85(s,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ159.5,151.6,149.7,126.3,115.6,88.1,86.6,85.5,74.3,70.6,61.5,21.1.MS(ESI)C13H15BrFN3O3requires:343.0,Found:344.0.(M+H+).
实施例3
Figure BDA0001056173080000081
(1)化合物14的制备
取一50mL的两口瓶，加入化合物13(1g，2.6mmol)，氩气保护，无水DCM(10mL) 溶解，置于-25℃下，加入PPh3(三苯基膦)(2.2g，7.8mmol，3当量)的无水DCM(8mL)溶液，搅拌15min，再加入CBr4(2.8g，7.8mmol，3当量)的无水DCM(8mL)溶液，在-20℃下搅拌10min，直至原料反应完毕。加入硅胶，用湿法上柱，过柱(PE：EA＝12:1)，得无色透明液体1.115g(a构型)，产率为95％。
化合物14的表征数据：1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.13(d,J＝7.2Hz,2H),8.02(d,J＝7.6Hz,2H),7.63-7.56(m,2H),7.50-7.42(m,4H),6.34(s,1H),5.29(dd,J＝5.3,2.8Hz,1H),4.89-4.86(m,1H),4.80-4.76(m,1H),4.65-4.61(m,1H),1.72(d,J＝21.2Hz,3H).
(2)化合物15的制备
取一50mL两口瓶，加入化合物14(1.79g，7.6mmol，3当量)，氩气保护，加入无水的MeCN：tBuOH(乙腈：叔丁醇)(1.5:1)的混合溶液(8mL)，搅拌，加入tBuOK(叔丁钾)(0.85g，7.7mmol，3当量)的无水的MeCN：tBuOH(1.5:1)的混合溶液(10mL)，搅拌30min，反应物溶解，变澄清，将化合物5(1.1g，2.5mmol)溶于无水MeCN(10mL)，加入，缓慢升温至50℃，搅拌5h，直至TLC显示化合物反应完毕，冷却至常温，加入醋酸，调至中性，过滤掉生成的无机盐，旋干，过柱(PE：EA＝10:1)，得白色固体产物0.65g，产率为50.1％。
化合物15的表征数据：1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.67(s,1H),8.12(d,J＝7.6Hz,2H),8.05(d,J＝4Hz,2H),7.64–7.57(m,2H),7.49–7.41(m,5H)，6.64(d,J＝16Hz,1H),6.59(s,1H),6.02(dd,J＝8,12Hz,1H),4.92(dd,J＝4,4Hz,1H),4.79–4.75(m,1H),4.67-4.11(m,1H),1.22(d,J＝20Hz).MS(ESI)requires:509.01.Found:510.1(M+H+).
(3)化合物16的制备
取一25mL单口瓶，将化合物15(0.65g，1.27mmol)溶于无水THF(5mL)中，加入Pd(Ph3P)4(0.147g，0.127mmol，0.1当量)，加入AlMe3(三甲基铝)的正己烷溶液(1.6M，0.1524mmol，0.91mL，1.2当量)，置于100℃下，回流反应5min，冷却至常温，加入EA稀释，再加入1M稀盐酸(10mL)，萃取，干燥，旋干，过柱(PE：EA＝4:1)，得白色固体产物0.59g，产率为96％。
化合物16的表征数据：1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.77(s,1H),8.10(d,J＝8Hz,2H),8.04(d,J＝8Hz,2H),7.58–7.52(m,2H),7.46–7.34(m,5H),6.64(d,J＝20Hz),6.53(d,J＝4Hz,1H),6.07(dd,J＝12,8Hz,1H),4.90(dd,J＝4.4Hz,1H),4.77–4.73(m,1H),4.68–4.63(m,1H),2.70(s,3H),1.20(d,J＝20Hz).MS(ESI)requires:489.13.Found:490.1(M+H+).
(4)化合物18a或18b的制备
化合物18a：取一50mL两口瓶，加入化合物16(0.62g，1.26mmol)，氩气保护，加入无水DMF(5mL)溶解，将NIS(2g，8.87mmol，7当量)溶于无水DMF(5mL)，缓慢加入，置于80℃下，反应5h，用油泵旋去大部分DMF，EA溶解，加入饱和硫代硫酸钠溶液(10mL)淬灭反应，加入EA(20mL)，收集有机相，加入饱和食盐水，萃取，干燥，旋干，过柱(PE：EA＝5:1)，得白色固体产物(化合物17a)，直接用于下一步；将化合物17a用NH3的甲醇溶液(5mL)溶解，常温搅拌30min，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物0.323g，两步产率为65％。
化合物18a的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.66(s,1H),8.13(s,1H),6.53(d,J＝20Hz,1H),4.22(dd,J＝8,8Hz,1H),4.06–4.03(m,1H),3.87(d,J＝4Hz,2H),2.98(s,3H),1.00(d,J＝24Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.8,152.0,151.1,132.8,119.7,101.6(d,JC-F＝180Hz),89.8(d,J＝39Hz),83.4,72.3(d,J＝18Hz),60.4,53.6,20.6,16.6(d,J＝25Hz).MS(ESI)C13H15IFN3O3requires:407.01.Found:407.9(M+H+).
化合物18b，18c：参照化合物18a的方法制备化合物18b和18c。
化合物18b的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,1H),8.14(s,1H),6.46(d,J＝17.5Hz,1H),5.70(d,J＝6.5Hz,1H),5.35(t,J＝5Hz,1H),4.20–4.12(m,1H),3.93(d,J＝9Hz,1H),3.90–3.87(m,1H),3.73-3.69(m,1H),2.86(s,3H),0.94(d,J＝22.5Hz,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ159.7,151.6,148.8,125.3,115.3,101.9(d,JC-F＝180Hz),88.3,87.8(d,J＝38Hz),82.0,70.4(d,J＝18Hz),58.8,20.9,16.3(d,J＝25Hz).MS(ESI)C13H15BrFN3O3 requires:359.03.Found:360.0(M+H+).
化合物18c的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.68(s,1H),7.99(s,1H),6.56(d,J＝16Hz,1H),4.21(dd,J＝8,12Hz,1H),4.06-4.03(m,1H),3.84(m,dd,J＝4,4Hz,2H),2.91(s,3H),1.02(d,J＝20Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.4,152.6,150.2,124.5,116.1,106.7,103.0(d,JC-F＝181Hz),89.9(d,J＝39Hz),83.4,72.4(d,J＝18Hz),60.4,21.1,16.6(d,J＝25Hz).MS(ESI)C13H15ClFN3O3requires:315.08.Found:316.1(M+H+).
实施例4
Figure BDA0001056173080000101
(1)化合物21的制备
取一50mL单口瓶，将化合物19(1.962g，4.22mmol)溶于DCM(10mL)中，加入33％w/w的HBr(溴化氢)的醋酸溶液(2.1mL，8.45mmol，2当量)，室温搅拌过夜。将反应液倒入50mL饱和NaHCO3溶液中，搅拌10min，DCM萃取，加入饱和食盐水，萃取，干燥，旋干，得化合物20粗品。
取一100mL两口瓶，加入化合物5(1.937g，12.66mmol，3当量)，氩气保护，加入无水的MeCN：tBuOH(1.5:1)的混合溶液(20mL)，搅拌，加入tBuOK(1.42g，12.66mol，3当量)的无水的MeCN：tBuOH(1.5:1)的混合溶液(15mL)，搅拌30min，反应物溶解，变澄清，将化合物20粗品溶于无水MeCN(5mL)，加入，缓慢升温至50℃，搅拌5h，直至TLC显示化合物反应完毕，冷却至常温，加入醋酸，调至中性，过滤掉生成的无机盐，旋干，过柱(PE：EA＝10:1)，得白色固体产物1.08g，两步产率为54％。
化合物21的表征数据：1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.69(s,1H),8.15(m,4H),7.60–7.56(m,1H),7.53–7.43(m,4H),6.91(dd,J＝2.8,2.8Hz,1H),6.67(d,J＝4Hz,1H),5.78(dd,J＝2.8,2.4Hz,1H),5.41(dd,J＝2.8,2.8Hz,1H),4.80–4.56(m,2H),4.12(d,J＝6.8Hz,1H).(2)化合物22的制备
将化合物21(0.65g，1.28mmol)溶于无水THF(5mL)中，加入Pd(Ph3P)4(0.15g，0.128mmol，0.1当量)，加入AlMe3的正己烷溶液(1.6M，0.16mmol，0.95mL，1.2当量)，置于100℃下，回流反应5min，冷却至常温，加入EA稀释，再加入1M稀盐酸(10mL)，萃取，干燥，旋干，过柱(PE：EA＝4:1)，得白色固体产物0.58g，产率为96％。
化合物22的表征数据：1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.79(s,1H),8.11–8.07(m,4H),7.66–7.41(m,7H),6.92(dd,J＝2,2Hz,1H),6.59(d,J＝3.6Hz,1H),6.59(d,J＝3.6Hz,1H),5.76(d,J＝17.2Hz,1H),4.80(t,J＝8.8Hz,2H),4.55(d,J＝3.2Hz,1H),2.71(s,3H).
(3)化合物24a或24b的制备
化合物24a：取一50mL两口瓶，加入化合物22(0.62g，1.27mmol)，氩气保护，加入无水DMF(5mL)溶解，将NIS(2g，8.89mmol，7当量)溶于无水DMF(5mL)，缓慢加入，置于50℃下，反应5h，用油泵旋去大部分DMF，EA溶解，加入饱和硫代硫酸钠溶液(10mL)淬灭反应，加入EA(20mL)，收集有机相，加入饱和食盐水，萃取，干燥，旋干，过柱(PE：EA＝5:1)，得白色固体产物(化合物23a)，直接用于下一步。将化合物23a用NH3的甲醇溶液(5mL)溶解，常温搅拌30min，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物0.323g，两步产率为66％。
化合物24a的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.64(s,1H),7.88(d,J＝2Hz,1H),6.76(dd,J＝4,4Hz,1H),5.15–5.00(m,1H),4.49–4.43(m,1H),3.98(q,J＝4.8,4.8Hz,1H),3.87–3.77(m,2H),2.97(s,3H).13C NMR(125MHz,MeOH-d4)δ162.2,152.7,152.1,135.3(d,J＝3Hz),120.3,97.3(d,JC-F＝191Hz),86.1(d,J＝4Hz),84.6(d,J＝17Hz),75.6(d,J＝24Hz),63.0,53.9,21.3.MS(ESI)C12H13IFN3O3requires:393.00.Found:394.0(M+H+).
化合物24b，24c：参照化合物24a的方法制备化合物24b和24c。
化合物24b的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.65(s,1H),7.81(d,J＝2Hz,1H),6.78(dd,J＝4,4Hz,1H),5.16–5.01(m,1H),4.50–4.43(m,1H),3.98(q,J＝4.8,4.4Hz,1H),3.87–3.77(m,2H),2.93(s,3H).13C NMR(125MHz,MeOH-d4)δ162.0,153.1,151.7,129.8(d,J＝4Hz),118.1,97.3(d,JC-F＝191Hz),90.7,86.1(d,J＝4Hz),84.4(d,J＝17Hz),75.6(d,J＝25Hz),63.0,21.7.MS(ESI)C12H13BrFN3O3requires:345.01.Found:346.0(M+H+).
化合物24c的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(s,1H),7.88(d,J＝1.5Hz,1H),6.74–6.68(m,1H),5.95(d,J＝3.6Hz,1H),5.27–5.08(m,1H),5.27–5.08(m,1H),4.43(q,J＝4,4.4Hz,1H),3.83(t,J＝4.4Hz,1H),3.71–3.60(m,2H),2.83(s,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ160.1,152.6,149.5,125.4(d,J＝3Hz),114.8,104.4,95.8(d,JC-F＝191Hz),83.9(d,J＝5Hz),81.7(d,J＝17Hz),73.1(d,J＝23Hz),61.1,22.0.MS(ESI)C12H13ClFN3O3requires:301.06.Found:302.1(M+H+).
实施例5
Figure BDA0001056173080000111
(1)化合物26的制备
取一50mL两口瓶，加入化合物6(903mg，3.23mmol，1.1当量)、化合物25(1.7g，2.93mmol)，氩气保护，无水乙腈(20mL)溶解，加入DBU(1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯)(1.3mL，8.69mmol，3当量)，在0℃下，滴加入TMSOTf(2.1mL，11.62mmol，4 当量)，升温至80℃搅拌，直至TLC显示原料反应完毕，冷却至室温，加入乙酸乙酯(75mL)稀释，加入饱和NaHCO3溶液，萃取，饱和食盐水洗，Na2SO4干燥，旋干，过柱(PE：EA＝10:1)，得白色固体产物0.87g，产率为40％。
化合物26的表征数据：1H-NMR(400MHz,Chloroform-d):σ8.75(s,1H),8.11-7.96(m,6H),7.69(s,1H),7.61-7.54(m,6H),7.47-7.34(m,6H),6.95(s,1H),6.03(d,J＝5.8Hz,1H),4.95(dd,J＝12.2,3.4Hz,1H),4.85(dd,J＝12.2,5.8Hz,1H),4.72(dd,J＝5.8,3.4Hz,1H),1.59(s,3H).
(2)化合物27的制备
取一50mL单口瓶，加入化合物26(456mg，0.63mmol)，无水四氢呋喃(5mL)溶解，置于-10℃，滴加异丙基氯化镁氯化锂溶液(1.3M，0.48mL，0.61mmol，1当量)，搅拌30min，TLC显示原料反应完毕。加入1N HCl(10mL)溶液淬灭，加入EA萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝10:1)，得白色固体产物291mg，产率为74％。
化合物27的表征数据：MS(ESI)C26H22ClN3O6requires:507.12.Found:508(M+H+).
(3)化合物28的制备
取一25mL单口瓶，加入化合物27(202mg，0.34mmol)，加入无水四氢呋喃(8mL)溶解，加入Pd(PPh3)4(80mg，0.068mmol，0.2当量)，滴加三甲基铝正己烷溶液(1.6M，0.4ml，2当量)，置于100℃回流，反应5min，冷却至室温，加入1N HCl(8mL)溶液淬灭，加入EA萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝4:1)，得白色固体产物160mg，产率为79％。
化合物28的表征数据：MS(ESI)C27H25N3O6requires:487.17.Found:488(M+H+).
(4)化合物30a或30b的制备
化合物30a：取一250mL的两口瓶，加入化合物28(2.5g，4.3mmol)，氩气保护，加入无水DMF(20mL)，在常温下缓慢加入NIS(1.1g，30.3mmol，1.1当量)的无水DMF溶液，室温搅拌3h。加入饱和硫代硫酸钠溶液(25mL)淬灭反应，加入EA(50mL)，收集有机相，加入饱和食盐水，萃取，干燥，旋干，所得粗产物直接投下一步。加入NH3的甲醇溶液(20mL)溶液，室温搅拌2h，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10：1)得白色固体1.66g，两步产率为80％。
化合物30a的表征数据：MS(ESI)C13H16IN3O4requires:404.12.Found:405(M+H+).
化合物30b：参照化合物30a的方法制备化合物30b。
化合物30b的表征数据：MS(ESI)C13H16BrN3O4requires:357.03.Found:358(M+H+).
实施例6
Figure BDA0001056173080000121
(1)化合物32的制备
取一250mL单口瓶，加入化合物31(5g，17.89mmol)，无水乙腈(100mL)溶解，分别加入KOH(氢氧化钾)(1.53g，26.84mmol，1.5当量)，TDA-1(三(3,6-二氧杂庚基)胺)(5.73mL，17.89mmol，1当量)和化合物6(16.33g，35.78mmol，2当量)，置于50℃，直至TLC显示原料反应完毕。冷却至室温，加入EA(80mL)稀释，加入1M HCl(80mL)， 过滤掉沉淀物，水洗，收集有机相，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝10:1)，得白色固体0.8g，产率为8％。
化合物32的表征数据：1H-NMR(400MHz,Chloroform-d):σ8.66(s,1H),8.14-8.08(m,4H),7.66-7.61(m,2H),7.58(d,J＝2.8Hz,1H),7.54-7.47(m,4H),6.73(dd,J＝11.4,6.8Hz,1H),5.84(dd,J＝13.4,5.5Hz,1H),4.87(dd,J＝12.4,3.6Hz,1H),4.73(dd,J＝12.4,4.5Hz,1H),4.65(dd,J＝5.6,4.5Hz,1H).
(2)化合物33的制备
取一50mL单口瓶，加入化合物32(800mg，1.25mmol)，无水四氢呋喃(10mL)溶解，置于-10℃，滴加异丙基氯化镁氯化锂溶液(1.3M，0.96mL，1.25mmol，1当量)，搅拌30min，TLC显示原料反应完毕。加入1N HCl(10mL)溶液淬灭，加入EA萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝10:1)，得白色固体产物519mg，产率为81％。化合物33的表征数据：MS(ESI)C25H18ClF2N3O5requires:513.09.Found:514(M+H+).
(3)化合物34的制备
取一25mL单口瓶，加入化合物33(500mg，0.97mmol)，无水四氢呋喃(8mL)溶解，加入Pd(PPh3)4(225mg，0.19mmol，0.2当量)，滴加三甲基铝正己烷溶液(1.6M，1.2ml，2当量)，置于100℃回流，反应5min，冷却至室温，加入1N HCl(8mL)溶液淬灭，加入EA萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝4:1)，得白色固体产物402mg，产率为84％。化合物34的表征数据：MS(ESI)C26H21F2N3O5requires:493.14.Found:494(M+H+).
(4)化合物36a或36b的制备
化合物36a：取一50mL的两口瓶，加入化合物34(400mg，0.81mmol)，氩气保护，加入无水DMF，在常温下缓慢加入NIS(201mg，0.89mmol，1.1当量)的无水DMF溶液，室温搅拌3h。加入饱和硫代硫酸钠溶液(5mL)淬灭反应，加入EA(5mL)，收集有机相，加入饱和食盐水，萃取，干燥，旋干，所得粗产物直接投下一步。加入NH3的甲醇溶液(10mL)溶液，室温搅拌2h，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10：1)得白色固体273mg，两步产率为82％。化合物36a的表征数据：MS(ESI)C12H12F2IN3O3requires:410.99.Found:412(M+H+).
化合物36b：参照化合物36a的方法制备化合物36b。化合物36b的表征数据：MS(ESI)C12H12F2BrN3O3requires:363.0.Found:364(M+H+).
实施例7
Figure BDA0001056173080000131
(1)化合物38的制备
取一50mL单口瓶，加入化合物27(3g，7.7mmol)，无水DCM(20mL)溶解，加入咪唑(1.1g，16.9mmol，2.2当量)，搅拌溶解，在0℃下滴加((iPr)2SiCl)2O(1,3二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷)(2.5mL，7.7mmol，1当量)，搅拌15min，升至室温搅拌，直至TLC显示原料反应完毕。加入水和饱和食盐水，DCM萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，得油状液体2.9g，产率为60％。化合物38的表征数据：MS(ESI)C24H40IN3O5Si2requires:633.16.Found:634(M+H+).
(2)化合物39的制备
取一250mL单口瓶，加入化合物38(2.8g，4.42mmol)，TEA(三乙胺)(1.5mL，10.6mmol，2.4当量)和DMAP(4-二甲氨基吡啶)(54mg，0.44mmol)，无水乙腈(150mL)溶解，滴加醋酸酐(1mL，10.6mmol，2.4当量)，室温搅拌1.5h。加入EA(100mL)稀释，加入饱和NaHCO3溶液，萃取，水洗，收集有机相，无水硫酸钠干燥，旋干，得无色油状液体2.98g，产率为100％。
化合物39的表征数据：MS(ESI)C26H42IN3O6Si2requires:675.17.Found:676(M+H+).
(3)化合物40的制备
取一250mL单口瓶，加入化合物39(2.98g,4.40mmol)，无水乙腈(150mL)溶解，加入Et3N 3HF(氟化氢三乙胺络合物)(1.44mL，8.81mmol，2当量)，室温搅拌过夜，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10：1)得白色固体1.56g，产率为82％。化合物40的表征数据：MS(ESI)C14H16IN3O5requires:433.01.Found:434(M+H+).
(4)化合物41的制备
取一250mL单口瓶，加入化合物40(1.5g，1.84mmol)，DMF(50mL)溶解，加入TsOHH2O(对甲基苯磺酸水合物)(1.31g，3.68mmol，2当量)，置于0℃，加入DHP(4.73mL，27.6mmol，15当量)，升至室温，搅拌过夜。加入EA(100mL)稀释，加入饱和NaHCO3溶液，萃取，饱和食盐水洗，收集有机相，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝4:1)，得黄色固体1.68g，产率为81％。化合物41的表征数据：MS(ESI)C24H32IN3O7requires:601.13.Found:602(M+H+).
(5)化合物42的制备
取一100mL单口瓶，加入化合物41(1.6g，2.66mmol)，无水甲醇(30mL)溶解，滴加甲醇钠的甲醇溶液(1M，2.7mL，2.7mmol，1当量)，室温搅拌过夜，加入1M HCl溶液中和反应，萃取，饱和食盐水洗，收集有机相，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝3:1)得黄色固体1.25g，产率为84％。化合物42的表征数据：MS(ESI)C22H30IN3O6requires:559.12.Found:560(M+H+).
(6)化合物43的制备
取一50mL单口瓶，加入化合物42(650mg，1.16mmol)，无水DCM(16mL)溶解，加入吡啶(0.7mL，8.7mmol，7.8当量)，置于0℃，滴加DAST(二乙胺基三氟化硫)(0.77mL，5.80mmol，5当量)。升至室温，搅拌过夜。加入饱和NaHCO3溶液中和反应，加入DCM和水，萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE：EA＝4:1)，所得产物直接投下一步，90％TFA溶液溶解，反应液搅拌2h，加入甲醇旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10：1)得白色固体163mg，两步产率为36％。化合物43的表征数据：MS(ESI)C12H13FIN3O3requires:393.00.Found:394(M+H+).
实施例8
Figure BDA0001056173080000141
(1)化合物45a的制备
取一25mL单口瓶，加入化合物18b(150mg，0.42mmol)，重蒸THF(5mL)溶解， 滴加叔丁基氯化镁的THF溶液(1M，0.88mL，0.88mmol，2.1当量)，滴加过程超过2min，搅拌30min，滴加化合物44(230mg，0.504mmol，1.2当量)的THF溶液，滴加过程超过3min，在35℃下搅拌18h。加入甲醇淬灭，旋干，过柱(DCM:iPrOH＝12:1)，得白色固体137mg，产率为52％。化合物45a的表征数据：MS(ESI)C25H31FBrN4O7P requires:628.11.Found:629.1(M+H+).
(2)化合物46a的制备
取一10mL单口瓶，加入化合物18b(50mg，0.14mmol)和DMAP(催化量)，重蒸DCM(2mL)溶解，加入TEA(48μL，0.35mmol，2.5当量)，置于0℃，滴加异丁酰氯(35μL，0.35mmol，2.5当量)，搅拌5min，常温搅拌0.5h，依次分别加入NaHCO3溶液和饱和食盐水，萃取，旋干，重结晶。得白色固体28.6mg，产率为42％。化合物46a的表征数据：MS(ESI)C21H27FBrN3O5requires:499.11.Found:500.1(M+H+).
实施例9
Figure BDA0001056173080000151
(1)化合物18d的制备
将化合物18a(300mg，0.9mmol)，Pd(PPh3)4(80mg，0.09mmol，10mol％)溶于无水DMF(5mL)，氩气保护，加入三丁基(乙烯基)锡(650μL，2.7mmol，3当量)，置于100℃下搅拌30min，冷却至常温，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物150mg，产率为66％。
化合物18d的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.62(s,1H),8.07(s,1H),7.10(dd,J＝11.2,10.8Hz,1H),6.59(d,J＝18Hz,1H),5.67(dd,J＝1.2,1.6Hz,1H),5.29(dd,J＝1.6,1.2Hz,1H),4.35(dd,J＝9.2,9.6Hz,1H),4.08–4.04(m,1H),3.89(dd,J＝2.8,2.8Hz,2H),2.82(s,3H),1.05(d,J＝22.4Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.2,151.7,151.6,129.3,123.6,117.6,117.4,115.7,101.6(d,JC-F＝180Hz),89.7(d,J＝39Hz),83.3,72.5(d,J＝18Hz),60.6,22.6,16.4(d,J＝25Hz).MS(ESI)C15H17FN3O3requires:307.13.Found:308.1(M+H+).
(2)化合物45b的制备：参照化合物45a的方法制备化合物45b。化合物45b的表征数据：MS(ESI)C27H34FN4O7P requires:578.21.Found:579.1(M+H+).
(3)化合物46b的制备：参照化合物46a的方法制备化合物46b。化合物46b的表征数据：MS(ESI)C23H30FN3O5requires:447.22.Found:448.1(M+H+).
实施例10
Figure BDA0001056173080000152
Figure BDA0001056173080000161
(1)化合物18e的制备
取一10mL单口瓶，将化合物18a(50mg，0.122mmol)，Pd(OAc)2(醋酸钯)(3mg，0.0122mmol，10mol％),PPh3(7mg，0.0244mol，20mol％)，溶于无水DMF(2mL)，氩气保护，加入无水三乙胺(34μL，0.244mmol，2当量)，苯乙烯(22μL，0.184mmol，1.5当量)，置于100℃反应30min，冷却至常温，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物23mg，产率为49％。
化合物18e的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(s,1H),8.25(s,1H),7.59(d,J＝7.6Hz,2H),7.50(d,J＝16Hz,1H),7.40(t,J＝7.2Hz,2H),7.29(t,J＝7.2Hz,1H),7.04(d,J＝16Hz,1H),6.53(d,J＝18.4Hz,1H),5.68(d,J＝7.2Hz,1H),5.35(t,J＝4.8Hz,1H),4.29–4.18(m,1H),3.97-3.90(m,2H),3.76–-3.73(m,1H),2.87(s,3H),1.01(d,J＝22.4Hz,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ206.3,159.8,151.0,150.0,137.0,128.7,127.3,126.1,121.8,119.8,115.5,114.7,100.5(d,JC-F＝180Hz),87.5(d,J＝36Hz),81.9,70.6(d,J＝18Hz),59.2,30.6,23.0,16.1(d,J＝25Hz).MS(ESI)C21H22FN3O3requires:383.16.Found:384.2(M+H+).
(2)化合物45c的制备：参照化合物45a的方法制备化合物45c。
化合物45c的表征数据：1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.75(s,1H),7.55(s,1H),7.40(d,J＝6Hz,1H),7.32–7.20(m,10H),7.14(t,J＝5.6Hz,1H),6.98(d,J＝12.8Hz,1H),6.65(d,J＝15.2Hz,1H),4.95–4.90(m,1H),4.65–4.61(m,1H),4.50–4.37(m,1H),4.32(d,J＝38.4Hz,1H),4.23(d,J＝6.8Hz,1H),3.99–3.94(m,1H),3.75(t,J＝8.8Hz,1H),3.32(s,1H),2.90(s,3H),1.31(d,J＝5.6Hz,3H),1.18–1.14(m,9H).13C NMR(125MHz,Chloroform-d)δ202.7,202.7,189.9,180.4,180.3,180.2,167.0,160.2,159.0,158.0,156.9,155.8,154.5,151.4,149.8,149.8,148.4,146.2,146.0,129.6(d,JC-F＝181Hz),109.4(d,J＝7.7Hz),101.8,101.7(d,J＝52.4Hz),98.4,94.7,80.0,51.2,50.2,50.1,48.9,48.8,44.9(d,J＝25Hz).MS(ESI)C33H38FN4O7P requires:652.25.Found:653.1(M+H+).
(3)化合物46c的制备：参照化合物46a的方法制备化合物46c。
化合物46c的表征数据：1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.76(s,1H),7.60(s,1H),7.49(d,J＝6Hz,2H),7.40(t,J＝5.6Hz,2H),7.33–7.28(m,2H),6.94(d,J＝12.8Hz,1H),6.67(d,J＝14.8Hz),5.61(q,J＝6.8Hz,1H),4.49–4.38(m,3H),2.90(s,3H),2.71(t,J＝4.8Hz,2H),1.24–1.10(m,15H).13C NMR(125MHz,Chloroform-d)δ176.9,176.6,160.7,152.2,151.1,137.3,130.5,129.1,128.1,126.5,120.8,119.9,117.0,116.9,99.7(d,JC-F＝184.5Hz),89.2(d,J＝38.6Hz),71.9(d,J＝16.1Hz),62.2,34.3,34.1,30.0,23.6,19.4,19.3,19.2,19.1,17.3(d,J＝25Hz).MS(ESI)C29H34FN3O5requires:523.25.Found:524.1(M+H+).
实施例11
Figure BDA0001056173080000162
Figure BDA0001056173080000171
(1)化合物18f的制备：参照化合物18e的方法制备化合物18f。
化合物18f的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.64(s,1H),8.19(s,1H),7.30(s,1H),7.21(q,J＝16.4Hz,2H),7.11(s,1H),7.02(s,1H),6.60(d,J＝17.6Hz,1H),4.35(dd,J＝23.8,8.9Hz,1H),4.09(m,2H),3.92(d,J＝11.5Hz,1H),2.89(s,3H),1.06(d,J＝22.1Hz,3H). 13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.3,151.9,151.8,143.9,128.7,127.0,125.4,124.2,123.4,119.8,117.5,116.8,102.4(d,J＝179.8),89.9(d,J＝37.5),83.4,72.6(d,J＝17.5),60.6,22.7,16.6(d,J＝25.1).MS(ESI):C19H20FN3O3S required:389.12.Found:390.1(M+H+).
(2)化合物45d的制备：参照化合物45a的方法制备化合物45d。
化合物45d的表征数据：MS(ESI)C31H36FN4O7PS requires:658.20.Found:659.0(M+H+).(3)化合物46d的制备：参照化合物46a的方法制备化合物46d。
化合物46d的表征数据：MS(ESI)C27H32FN3O5S requires:529.20.Found:530.1(M+H+).
实施例12
Figure BDA0001056173080000172
(1)化合物48的制备
取一单口瓶，加入3-甲基-2-醛基噻吩(0.5mL)，氩气保护，乙醚(5mL)溶解，将其置于0℃下搅拌，逐滴加入亚甲基三甲基硅基氯化镁的乙醚溶液(1mL)，反应12h至反应完全。加入乙醚与饱和氯化铵溶液，取乙醚层，旋干，并加入1M HCl水溶液，搅拌2h，加入乙醚，萃取分液，干燥，低温冷旋得粗产物3-甲基-2-乙烯基噻吩。
Figure BDA0001056173080000173
(2)化合物18g的制备
取一50mL单口瓶，加入化合物18a(50mg，0.12mmol)，三苯基磷(6.5mg，0.024mmol，20％mol)，醋酸钯(3mg，0.012mmol，10％mol)，氩气保护下加入含有上述粗产物3-甲基-2-乙烯基噻吩的DMF溶液，及三乙胺(35μl，0.24mmol，2当量)，置于100℃下反应0.5h。加入EA和饱和NaHCO3溶液，萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(DCM:iPrOH＝10:1)，得白色固体27mg，产率为55％。
化合物18g的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.69(s,1H),8.17(s,1H),7.12(s,2H),6.88(d,J＝3.2Hz,1H),6.70(m,1H),6.61(d,J＝18Hz,1H),4.35(m,1H),4.05(m,1H),3.93(m,1H),2.91(s,1H),2.50(s,1H),1.03(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.3,152.0,151.9,144.3,128.9,127.0,124.8,124.2,123.4,120.0,117.5,116.8,102.4(d,J＝179.8Hz),89.9(d,J＝37.5Hz),83.4,72.6(d,J＝17.5Hz),60.6,39.6,22.7,16.6(d,J＝25.1Hz).MS(ESI)C20H22FN3O3S requires:403.14.Found:404.2(M+H+).
实施例13
Figure DEST_PATH_GDA0001115581550000181
(3)化合物18h的制备：参照化合物18f的方法制备化合物18h(35mg，产率61％)。
化合物18h的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4))δ8.68(s,1H),8.25(s,1H),7.12(s,2H),7.17(s,1H),7.15-6.70(m,1H),7.12(d,J＝12.8Hz,1H),6.61(d,J＝18Hz,1H),4.35(m,1H),4.05(m,1H),3.93(m,1H),2.92(s,1H),1.05(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.5,152.4,150.9,143.9,128.7,127.0,125.4,124.2,123.4,120.4,117.5,116.9,102.4(d,J＝180.0Hz),89.9(d,J＝38.5Hz),83.4,72.6(d,J＝17.6Hz),60.8,22.6,16.8(d,J＝25.7Hz).MS(ESI)C19H19BrFN3O3S requires:467.03.Found:468.0(M+H+).
实施例14
Figure DEST_PATH_GDA0001115581550000182
(1)化合物18i的制备
参照化合物18g方法制备化合物18i(26mg，产率54％)。
化合物18i的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.72(s,1H),8.46(s,1H),7.89(d,J＝16Hz,1H),7.83(d,J＝3.2Hz,1H),7.56(d,J＝3.6Hz,1H),7.29(d,J＝16Hz,1H),6.64(d.J＝18Hz,1H),4.39(dd,J＝24.4,9.4Hz,1H),4.14(m,2H),3.97(m,1H),2.98(s,3H),1.11(d,J＝22.2Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ168.8,161.5,152.2,152.2,144.1,126.9,125.2,121.8,119.9,117.5,115.4,102.4(d,J＝178.9Hz),90.0(d,J＝38.9Hz),83.5,72.6(d,J＝17.6Hz),60.6,22.6,16.7(d,J＝25.1Hz).MS(ESI):C18H19FN4O3Srequired:390.1.Found:391.0(M+H+).
实施例15
Figure BDA0001056173080000183
(1)化合物53的制备
取一50ml单口瓶，加入3-溴-2-甲醛噻吩(250mg，1.3mmol)，溴化亚铜(352mg，3.93mmol，3当量)，碘化亚铜(75mg，0.39mmol，30％mol)，DMF(5mL)溶解，加热回流6h。加入EA及饱和NaHCO3溶液，萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(PE:EA＝6:1)，得到固体产物3-氰基-2-甲醛噻吩169mg，产率93.4％。
(2)化合物54的制备
取一100mL单口瓶，加入Ph3P-CH2I(1.5g，3.65mol)与tBuOK(408.8mg，3.65mmol)，N2保护，无水THF溶解，置于0℃下反应0.5h，加入化合物53反应5h。之后加入EA和饱和NaHCO3，萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩，得3-氰基-2-乙烯基噻吩粗产物。
Figure BDA0001056173080000191
(3)化合物18j的制备
参照化合物18g的方法制备化合物18j(28mg，产率56％)。
化合物18j的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.69(s,1H),8.68(s,1H),8.28(s,1H),7.40(s,2H),7.19(d,J＝18.8Hz,1H),6.64(d,J＝18Hz,1H),4.39(dd,J＝24.4,9.4Hz,1H),4.14(m,2H),3.97(m,1H),2.91(s,3H),1.08(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.5,152.1,135.9,135.8,131.7,131.6,127.0,124.4,123.3,121.9,116.0,115.9,111.9,102.4(d,J＝178.9),90.0(d,J＝38.9),83.5,72.6(d,J＝17.6),60.6,22.8,16.7(d,J＝25.1).MS(ESI):C20H19FN4O3S required:414.2.Found:415.0(M+H+).
实例化合物18g-j可以根据化合物18g的两种前药实例的合成方法，合成出此类化合物的两种前药形式。
实施例16
Figure DEST_PATH_GDA0001115581550000192
(1)化合物18k的制备
参照化合物18h的方法制备化合物18k(30mg，产率65％)。
化合物18k的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.67(s,1H),8.21(s,1H),7.53(s,1H),7.37(s,1H),7.33(d,J＝16.4Hz,1H),6.90(d,J＝16Hz,1H),6.49(s,1H),6.43(s,1H),4.35(m,1H),4.11(m,1H),3.93(m,1H),2.91(s,3H),1.08(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.4,154.5,151.9,143.5,123.3,118.8,118.7,117.6,116.9,112.6,109.4,102.5(d,J＝178.5Hz),90.1(d,J＝38.6Hz),83.4,72.6(d,J＝17.8Hz),60.7,22.8,16.7(d,J＝25.3Hz).MS(ESI)C19H20FN3O4requires:373.14.Found:374.0(M+H+).
Figure BDA0001056173080000193
Figure BDA0001056173080000201
(2)化合物45f的制备：参照化合物45a的方法制备化合物45f。化合物45f的表征数据：MS(ESI)C31H36FN4O8P requires:642.23.Found:643.1(M+H+).
(3)化合物46f的制备：参照化合物46a的方法制备化合物46c。化合物46f的表征数据：MS(ESI)C27H32FN3O6requires:513.23.Found:514.1(M+H+).
实施例17
Figure BDA0001056173080000202
(1)化合物18l的制备
取一25mL单口瓶，将化合物18a(110mg，0.27mmol)，Pd(PPh3)2Cl2(二(三苯基膦)二氯化钯)(31mg，0.027mmol，10mol％)，CuI(10mg，0.054mmol，20mol％)溶于无水DMF和THF的混合溶液(THF:DMF＝90:10，2mL)中，氩气保护，加入无水三乙胺(75μL，0.54mmol，2当量)，三甲基硅乙炔(70μL，0.54mmol，2当量)，置于45℃下搅拌5h，冷却至常温，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物。将产物溶于甲醇中，加入K2CO3(74.5mg，0.54mmol，2当量)，常温搅拌30min，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物80mg，两步产率为98％。
化合物18l的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.68(s,1H),8.18(s,1H),6.58(d,J＝17.6Hz,1H),4.31(dd,J＝8.8,9.2Hz,1H),4.06–4.03(m,1H),3.88(dd,J＝2.8,3.2Hz,2H,),3.69(s,1H),2.92(s,3H),1.06(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ162.3,152.7,150.8,132.2,118.8,101.6(d,JC-F＝180Hz),98.4,89.8(d,J＝39Hz),83.5,82.0,77.3,72.3(d,J＝18Hz),60.5,20.7,16.4(d,J＝25Hz).MS(ESI)C15H15FN3O3requires:305.12.Found:306.0(M+H+).
Figure BDA0001056173080000203
(2)化合物18m的制备
取一25mL单口瓶，加入化合物18l(35mg，0.12mmol)，碘苯(19μl，0.17mmol)，叠氮钠(11.05mg，0.17mmol)，无水硫酸铜(7.1mg，0.06mmol)，维生素钠(12mg，0.06mmol)，L-脯氨酸(7mg，0.06mmol)，碳酸钠(6.4mg，0.06mmol)，在氩气保护下，加入DMSO：H2O＝9:1的混合溶液溶解，并于60℃下加热搅拌5h。加入EA与饱和NaHCO3溶液萃取，用无水硫酸钠干燥，旋干，过柱(DCM:iPrOH＝10:1)，得白色固体32mg，产率为68％。
化合物18m的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(s,1H),8.78(s,1H),8.20(s,1H),7.99(s,1H),7.97(s,1H),7.67(t,2H),7.55(t,1H),6.61(d,1H),5.72(d,1H),5.24(t,1H),4.26-4.16(m,1H),3.99-3.88(m,1H),3.75-3.70(m,1H),2.50(s,1H),1.03(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ160.3,151.3,150.1,141.3,136.6,129.9,129.6,128.7,125.3,121.5,120.1,115.3,106.0,101.9,100.5,87.7(d,J＝158.5Hz),82.0,70.8(d,J＝70Hz),59.3,23.1,16.3(d,J＝25Hz).MS(ESI)C21H21FN6O3requires:424.0.Found:425.0(M+H+).
Figure BDA0001056173080000211
(3)化合物45g的制备：参照化合物45a的方法制备化合物45g。化合物45g的表征数据：MS(ESI)C33H37FN7O7P requires:693.25.Found:694.1(M+H+).
(4)化合物46g的制备：参照化合物46a的方法制备化合物46g。化合物46g的表征数据：MS(ESI)C29H33FN6O5requires:564.25.Found:565.1(M+H+).
实施例18
Figure BDA0001056173080000212
(1)化合物18n的制备
取一10mL单口瓶，加入化合物18a(50mg，0.122mmol)，Pd(OAc)2(3mg，0.0122mmol，10mol％),PPh3(7mg，0.0244mol，20mol％)，溶于无水DMF(2mL)，氩气保护，加入无水三乙胺(34μL，0.244mmol，2当量)，2-乙烯基吡啶(20μL，0.184mmol，1.5当量)，置于100℃反应30min，冷却至常温，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物19.3mg，产率为41％。
化合物18n的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.69(s,1H),8.54(d,J＝4.5Hz,1H),8.39(s,1H),7.97(d,J＝15.9Hz,1H),7.84(m,1H),7.58(d,J＝7.9Hz,1H),7.33–7.28(m,1H),7.14(d,J＝16.0Hz,1H),6.64(d,J＝17.8Hz,1H),4.39(dd,J＝24.4,9.5Hz,1H),4.17–4.09(m,2H),3.95(m,1H),2.98(s,3H),1.10(d,J＝22.2Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.6,156.7,152.0,150.2,138.8,130.8,129.0,125.3,124.6,123.6,123.4,117.6,116.4,102.4(d,J＝179.6Hz),90.0(d,J＝38.5Hz),83.5,72.6(d,J＝17.8Hz),60.6,23.0,16.6(d,J＝25.3Hz).MS(ESI):C20H21FN4O3required:384.16.Found:385.1(M+H+).
(2)化合物45h的制备：参照化合物45a的方法制备化合物45h。化合物45h的表征数据：MS(ESI)C32H37FN5O7P requires:653.24.Found:654.0(M+H+).
(3)化合物46h的制备参照化合物46a的方法制备化合物46h。化合物46h的表征数据：MS(ESI)C28H33FN4O5requires:522.24.Found:523.1(M+H+).
实施例19
Figure BDA0001056173080000221
参照化合物18g的方法制备化合物18o。化合物18o的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.67(s,1H),8.17(s,1H),7.51(d,J＝8.6Hz,2H),7.33(d,J＝16.2Hz,1H),7.02(d,J＝16.1Hz,1H),6.96(d,J＝8.6Hz,2H),6.63(d,J＝17.9Hz,1H),4.39(dd,J＝24.4,9.3Hz,1H),4.16–4.09(m,2H),3.94(s,1H),3.85(s,3H),2.94(s,3H),1.10(d,J＝22.2Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.4,160.9,151.7,131.5,131.0,129.9,129.3,128.6,123.0,117.7,115.2,115.0,102.3(d,J＝178.4Hz),90.0(d,J＝38.8Hz),83.4,72.7(d,J＝17.5Hz),60.7,55.8,22.8,16.7(d,J＝25.2Hz).MS(ESI):C22H24FN3O4required:413.18.Found:414.1(M+H+).
Figure BDA0001056173080000222
参照化合物18g的方法制备化合物18p。化合物18p的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.68(s,1H),8.22(s,1H),7.64–7.57(m,2H),7.42(d,J＝15.8Hz,1H),7.13(m,2H),7.06(d,J＝16.1Hz,1H),6.63(d,J＝17.9Hz,1H),4.38(dd,J＝24.4,9.4Hz,1H),4.13(m,2H),3.95(m,1H),2.94(s,3H),1.10(d,J＝22.2Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.4,151.8,135.2,135.1,131.9,131.8,130.0,129.1,123.5,120.4,120.0,117.7,117.2,116.7,102.5(d,J＝178.5Hz),90.1(d,J＝38.6Hz),83.4,72.6(d,J＝17.8Hz),60.7,22.8,16.7(d,J＝25.3Hz).MS(ESI):C21H21F2N3O3required:401.16.Found:402.1(M+H+).
Figure BDA0001056173080000223
参照化合物18g的方法制备化合物18q。化合物18q的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.71(s,1H),8.35(s,1H),7.76(d,J＝7.6Hz,2H),7.65(dd,J＝24.2,7.2Hz,3H),7.15 (d,J＝13.2Hz,1H),6.65(d,J＝17.7Hz,1H),4.39(dd,J＝24.4,9.4Hz,1H),4.14(m,2H),3.97(m,1H),2.98(s,3H),1.11(d,J＝22.2Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD)δ161.1,151.8,151.4,142.6,130.3,130.0,129.5,127.7,126.7,126.6,126.0,124.5,123.1,117.6,116.9,102.4(d,J＝178.9Hz),90.0(d,J＝38.9Hz),83.5,72.6(d,J＝17.6Hz),60.6,22.6,16.7(d,J＝25.1Hz).MS(ESI):C22H21F4N3O3required:451.15.Found:452.2(M+H+).
Figure BDA0001056173080000231
参照化合物18g的方法制备化合物18r。化合物18r的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.69(s,1H),8.28(s,1H),7.68(d,J＝7.2Hz,6H),7.55(d,J＝16.1Hz,1H),7.48(t,J＝7.5Hz,2H),7.38(d,J＝7.3Hz,1H),7.13(d,J＝16.1Hz,1H),6.65(d,J＝18.0Hz,1H),4.41(dd,J＝24.2,9.2Hz,1H),4.14(m,2H),3.99–3.93(m,1H),2.98(s,3H),1.11(d,J＝22.3Hz,3H). 13C NMR(126MHz,MeOD)δ161.4,151.8,151.7,141.9,141.6,137.8,130.9,130.7,130.0,128.4,128.3,128.2,128.1,127.9,127.8,127.7,123.6,120.4,118.0,117.4,102.5(d,J＝178.5Hz),90.1(d,J＝38.6Hz),83.4,72.6(d,J＝17.8Hz),60.7,22.8,16.7(d,J＝25.3Hz).MS(ESI):C27H26FN3O required:459.20.Found:460.2(M+H+).
Figure BDA0001056173080000232
参照化合物18g的方法制备化合物18s。化合物18s的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.71(s,1H),8.52(d,J＝5.6Hz,2H),8.41(s,1H),7.83(d,J＝15.9Hz,1H),7.61(d,J＝5.4Hz,2H),7.08(d,J＝16.1Hz,1H),6.64(d,J＝17.7Hz,1H),4.39(dd,J＝24.3,9.6Hz,1H),4.13(m,2H),3.96(m,1H),2.98(s,3H),1.11(d,J＝22.2Hz,3H).13C NMR(126MHz,MeOD)δ161.6,152.1,152.0,150.2,147.6,127.3,126.4,125.1,125.0,123.1,122.3,117.5,116.2,102.4(d,J＝178.8Hz),90.0(d,J＝38.8Hz),83.5,72.6(d,J＝17.5Hz),60.7,23.0,16.7(d,J＝25Hz).MS(ESI):C20H21FN4O3required:384.16.Found:385.1(M+H+).
Figure BDA0001056173080000233
参照化合物18g的方法制备化合物18t。化合物18t的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.70(d,J＝8.4Hz,2H),8.62(s,1H),8.46(d,J＝11.1Hz,2H),8.19(d,J＝15.1Hz,1H),7.20(d,J＝15.8Hz,1H),6.65(d,J＝16.8Hz,1H),4.39(dd,J＝24.8,9.7Hz,1H),4.15(m,2H),3.97(d,J＝11.4Hz,1H),2.98(s,3H),1.11(d,J＝22.2Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.6,152.8,152.1,145.8,144.8,144.5,143.6,130.1,127.5,125.2,118.3,116.0,102.0(d,J＝178.7Hz),90.6(d,J＝38.9Hz),83.3,72.6(d,J＝17.7Hz),60.8,22.4,16.7(d,J＝25.0Hz).MS(ESI):C19H20FN5O3required:385.16.Found:386.1(M+H+).
Figure BDA0001056173080000241
参照化合物18g的方法制备化合物18u。化合物18u的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.69(s,1H),8.53(s,1H),8.09(d,J＝15.6Hz,1H),6.61(d,J＝17.6Hz,1H),6.46(d,J＝15.6Hz,1H),4.36(dd,J＝9.6,9.6Hz,1H),4.10-4.06(m,1H),3.91(dd,J＝2.4,2.4Hz,2H),3.79(s,3H),2.90(s,3H),1.08(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ169.1,161.5,152.3,152.2,137.3,127.1,118.1,117.4,113.9,101.6(d,JC-F＝180Hz),89.8(d,J＝38Hz),83.6,72.2(d,J＝18Hz),60.4,52.1,22.9,16.5(d,J＝25Hz).MS(ESI)C17H20FN3O5requires:365.14.Found:366.0(M+H+).
实例化合物18o-u可以根据化合物18g实例的合成方法，合成出此类化合物以及其两种前药形式。
实施例20
Figure BDA0001056173080000242
(1)化合物18v的制备
取一10mL单口瓶，将化合物18a(50mg，0.12mmol)，Pd(PPh3)2Cl2(9mg，0.012mmol，10mol％)，CuI(5mg，0.024mmol，20mol％)溶于无水DMF(2mL)，氩气保护，加入无水三乙胺(25μL，0.18mmol，1.5当量)，苯乙炔(25μL，0.18mmol，1.5当量)，置于45℃下搅拌5h，冷却至常温，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物24mg，产率为51％。
化合物18v的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(s,1H),8.29(s,1H),7.56(d,J＝5.6Hz,2H),7.44(d,J＝5.2Hz,3H),6.51(d,J＝17.6Hz,1H),5.71(d,J＝6.4Hz,1H),5.35(s,1H),4.24–4.13(m,1H),3.97–3.88(m,2H),3.74-3.71(m,1H),2.92(s,3H),1.01(d,J＝22.4Hz,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ160.5,152.0,149.2,130.8,129.5,128.8,128.6,122.4,116.7,100.4(d,JC-F＝180Hz),96.3,91.4,87.7(d,J＝40Hz),82.9,82.0,70.3(d,J＝17Hz),58.9,30.6,20.8,16.1(d,J＝25Hz).MS(ESI)C21H20FN3O3requires:381.15.Found:382.2(M+H+).
(2)化合物45i的制备：参照化合物45a的方法制备化合物45c。化合物45i的表征数据：MS(ESI)C33H36FN4O7P requires:650.23.Found:651.1(M+H+).
(3)化合物46i的制备：参照化合物46a的方法制备化合物46c。化合物46i的表征数据：MS(ESI)C29H32FN3O5requires:521.23.Found:522.1(M+H+).
实施例21
Figure BDA0001056173080000251
根据上述反应路线，参照下述操作步骤，制备得到化合物18w，18x，18y，18z，18A和18B：取一10mL两口瓶，加入化合物18a(50mg，0.12mmol)，硼酸试剂(0.18mmol，1.5当量)，Na2CO3(碳酸钠)(40mg，0.36mmol，3当量)，Pd(OAc)2(3mg，0.012mmol，10mol％)，PPh3(7mg，0.024mmol，20mol％)，氩气保护，溶于去离子水：MeCN(2:1)的混合溶液(5mL)，置于100℃下搅拌3h，冷却至常温，加入稀HCL(1M)调至中性，分液，收集有机相，依次用饱和NaHCO3溶液和饱和食盐水水洗，收集有机相，干燥，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)。
化合物18w的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),7.92(s,1H),7.50–7.39(m,5H),6.58(d,J＝18.4Hz,1H),5.66(d,J＝6.4Hz,1H),5.22(s,1H),4.25–4.17(m,1H),3.95–3.85(m,2H),3.69–3.66(m,1H),2.46(s,3H),1.03(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ159.5,150.9,150.0,134.0,129.8,128.1,127.1,123.8,117.4,115.5,100.5(d,JC-F＝180Hz),87.4(d,J＝36Hz),81.8,70.5(d,J＝18Hz),58.9,22.8,16.1(d,J＝25Hz).MS(ESI)C19H20FN3O3requires:357.15.Found:358.2(M+H+).
化合物18x的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.70(s,1H),7.89(s,1H),7.52(t,J＝6.4Hz,2H),7.22(t,J＝6.8Hz,2H),6.68(d,J＝14.4Hz,1H),4.36(dd,J＝7.6,7.6Hz,1H),4.08(t,J＝4.4Hz,2H),3.88(d,J＝10Hz,1H),2.52(s,3H),1.13(d,J＝18Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ164.9,162.9,161.3,151.8,151.6,133.0(d,J＝8.1Hz),131.6,131.6,125.7,118.9,117.7,116.0(d,J＝21.6Hz),101.7(d,JC-F＝179Hz),89.7(d,J＝38.6Hz),83.3,72.5(d,J＝17.8Hz),60.5,22.5,16.5(d,J＝25.3Hz).MS(ESI)C19H19F2N3O3requires:375.14.Found:376.3(M+H+).
化合物18y的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.73(s,1H),8.03(s,1H),7.79(d,J＝6.4Hz,2H),7.73(d,J＝6.8Hz,1H),6.70(d,J＝14.4Hz,1H),4.38(dd,J＝7.6,7.6Hz,1H),4.09(t,J＝4Hz,2H),3.89(dd,J＝1.6,2Hz,1H),2.56(s,3H),1.15(d,J＝18.4Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.3,152.0,151.9,139.7,131.6,130.4(d,J＝32.3Hz),126.3(d,J＝14Hz),126.2,126.2,124.7(d,JC-F3＝269.5Hz),118.5,117.4,101.7(d,JC-F＝179.4Hz),89.7(d,J＝39.1Hz),83.4,72.5(d,J＝17.8Hz),60.5,22.9,16.5(d,J＝25.3Hz).MS(ESI)C20H19F4N3O3requires:425.14.Found:426.1(M+H+).
化合物18z的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.68(s,1H),7.81(s,1H),7.40(d,J＝6.4Hz,2H),7.03(d,J＝6.4Hz,2H),6.68(d,J＝14.4Hz,1H),4.36(dd,J＝7.6,7.6Hz,1H),4.07(t,J＝4.4Hz,2H),3.86(s,4H),2.52(s,3H),1.13(d,J＝18Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.3,160.9,151.6,151.6,132.3,127.5,125.2,119.8,117.9,114.8,101.7(d,JC-F＝179.1Hz),89.7(d,J＝38Hz),83.3,72.6(d,J＝17.9Hz),60.6,55.7,22.4,16.5(d,J＝25.4Hz).MS(ESI)C20H22FN3O4requires:387.16.Found:388.3(M+H+).
化合物18A的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.76(s,1H),8.61(s,2H),8.17(s,1H),7.62(s,2H),6.66(d,J＝14Hz,1H),4.38(dd,J＝7.8,8.2Hz,1H),4.10(d,J＝10Hz,2H),3.90(d,J＝10Hz,1H),2.637(s,3H),1.14(d,J＝18Hz,3H,).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.4,152.2,150.1,145.0,127.2,126.3,117.0,116.9,101.7(d,JC-F＝179.5Hz),89.8(d,J＝38. 8Hz),83.5,72.4(d,J＝17.9Hz),60.5,23.2,16.5(d,J＝25.4Hz).MS(ESI)C18H19FN4O3requires:358.14.Found:359.1(M+H+).
化合物18B的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.74(s,1H),7.99–7.94(m,3H),7.60–7.51(m,4H),7.46–7.41(m,1H),6.77(dd,J＝4.4,4.4Hz,1H),4.39–4.93(m,1H),4.14(m,2H),3.86(m,1H),2.03(s,3H),1.24(q,J＝14.4Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ161.4,152.0,135.0,134.8,129.9,129.5,129.4,127.6,127.5,127.1,126.7,126.4,126.3,119.4,117.2,101.7(d,JC-F＝183Hz),89.9(d,J＝30Hz),83.3,72.6(d,J＝18.4Hz),60.6,21.2,16.8(d,J＝25.4Hz).MS(ESI)C23H22FN3O3requires:407.16.Found:408.16(M+H+).
实施例22
Figure BDA0001056173080000261
化合物18C的制备：将化合物18a(100mg，0.246mmol)，Zn(CN)2(氰化锌)(44mg，0.369mmol，1.5当量)，Pd(PPh3)4(43mg，0.0369mmol，15mol％)溶于无水DMF(2mL)，氩气保护，置于150℃下搅拌5h，冷却至常温，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物11mg，产率为15％。
化合物18C的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.82(s,1H),8.76(s,1H),6.61(d,J＝16.8Hz,1H),4.33(dd,J＝9.2,9.2Hz,1H),4.09–4.06(m,1H),3.90(dd,J＝2.4,2.4Hz,2H),2.91(s,3H),1.11(d,J＝22Hz,3H).13C NMR(125MHz,MeOD-d4)δ162.7,153.2,151.0,136.3,117.8,116.1,101.4(d,JC-F＝174Hz),102.8,89.8(d,J＝40Hz),86.7,82.7,72.0(d,J＝18Hz),60.3,20.8,16.3(d,J＝24Hz).MS(ESI)C14H15FN4O3requires:306.11.Found:307.1(M+H+).
化合物18D的制备：将化合物18C(10mg，0.033mmol)置于10mL封管中，溶于1，4-二氧六环，加入氨水，双氧水，拧紧，置于100℃下搅拌30min，冷却至常温，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物6mg，产率为57％。
化合物18D的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),8.18(s,1H),7.77(s,1H),7.23(s,1H),6.54(d,J＝18.4Hz,1H),5.67(d,J＝6.8Hz,1H),5.15(d,J＝5.2Hz,1H),4.26–4.15(m,1H),3.95–3.89(m,2H),3.72–3.69(m,1H),2.86(s,3H),1.00(d,J＝22.4Hz,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ165.0,161.0,151.4,150.2,127.8,114.8,112.7,100.5(d,JC-F＝175.9Hz),87.3(d,J＝40.6Hz),82.0,70.9(d,J＝17.6Hz),59.4,23.7,16.3(d,J＝25Hz).MS(ESI)C14H17FN4O4requires:324.12.Found:325.1(M+H+).
化合物18E的制备：将化合物18a(40mg，0.1mmol)，Pd(PPh3)4(18mg，0.015mmol，15mol％)溶于无水DMF(10mL)，氩气保护，加入三丁基(2-噻吩基)锡(57mg，0.15mmol，1.5当量)，置于100℃下搅拌30min，冷却至常温，旋干，过柱(DCM：iPrOH＝10:1)，得白色固体产物17.05mg，产率为48％。
化合物18E的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,1H),8.06(s,1H),7.60(d,J＝4Hz,1H),7.24(t,J＝2.4Hz,1H),7.17(dd,J＝2.8,2.8Hz,1H),6.55(d,J＝14.4Hz,1H),5.68(d,J＝5.6Hz,1H),5.29(t,3.6Hz,1H),4.24–4.16(m,1H),3.95(d,J＝7.2Hz,1H),3.89–3.86(m,1H),3.71–3.67(m,1H),2.55(s,3H),1.01(d,J＝18Hz,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ159.8,151.3,149.8,134.4,128.2,127.6,126.2,125.1,115.7,109.4,100.5(d,JC-F＝179.1Hz),87.5(d,J＝38.5Hz),81.9,70.3(d,J＝17.3Hz),58.8,22.5,16.2(d,J＝24.9Hz).MS(ESI)C17H18FN3O3S requires:363.11.Found:364.2(M+H+).
实施例23
Figure BDA0001056173080000262
Figure BDA0001056173080000271
化合物24d合成步骤同合成化合物18l方法，白色固体产物，两步产率为95％。
化合物24d的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.66(s,1H),7.95(d,J＝2Hz,1H),6.75(dd,J＝4,4Hz,1H),5.17–5.02(m,1H),4.50–4.44(m,1H),3.99(q,J＝4.8,4.4Hz,1H),3.88–3.78(m,2H),3.67(s,1H),2.92(s,3H).13C NMR(125MHz,MeOH-d4)δ161.9,152.6,150.9,133.9,118.6,97.8,96.4(d,JC-F＝192Hz),85.3(d,J＝4Hz),83.8(d,J＝17Hz),81.7,77.4,74.8(d,J＝17Hz),62.1,20.6.MS(ESI)C14H14FN3O3requires:291.10.Found:292.1(M+H+).
化合物24e合成步骤同合成化合物18u方法，白色固体产物，产率是49％
化合物24e的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.67(s,1H),8.29(s,1H),8.09(d,J＝16Hz,1H),6.77(d,J＝15.6Hz,1H),6.49(d,J＝15.6Hz,1H),5.18(d,J＝52Hz,1H),4.52(d,J＝18.4Hz,1H),4.00(d,J＝4Hz,1H),3.91–3.84(m,2H),3.79(s,3H),3.67(s,1H),2.89(s,3H).13C NMR(125MHz,MeOH-d4)δ169.2,161.1,152.3,152.2,137.4,128.9,117.9,117.3,113.4,96.4(d,JC-F＝192Hz),85.4,83.9(d,J＝17Hz),74.6(d,J＝27Hz),62.0,52.1,22.9.MS(ESI)C16H18FN3O5requires:351.12.Found:352.1(M+H+).
化合物24f合成步骤同合成化合物18d方法，白色固体产物，产率是68％。
化合物24f的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.60(s,1H),7.84(d,J＝1.6Hz,1H),7.10–7.03(m,1H),6.76(dd,J＝4,4Hz,1H),5.67(dd,J＝1.6,1.6Hz,1H),5.29(dd,J＝1.2,1.6Hz,1H),5.15–5.01(m,1H),4.51–4.45(m,1H),3.97(t,J＝4.8Hz,1H),3.89–3.79(m,2H),2.82(s,3H).13C NMR(125MHz,MeOH-d4)δ160.8,151.8,151.6,129.4,125.4(d,J＝4Hz),117.3,117.0,115.5,96.5(d,JC-F＝192Hz),85.1(d,J＝4Hz),83.6(d,J＝17Hz),74.9(d,J＝24Hz),62.2,22.5.MS(ESI)C14H16FN3O3requires:293.12.Found:294.1(M+H+).
化合物24g合成步骤同合成化合物18d方法，白色固体产物，产率为48％。
化合物24g的表征数据：1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ8.68(s,1H),7.76(s,1H),7.48(d,J＝3.6Hz,1H),7.16(q,J＝4,2.8Hz,2H),6.82(q,J＝3.2,3.2Hz,1H),5.18–5.06(m,1H),4.51–4.46(m,1H),3.99(q,J＝3.6,4Hz,1H),3.87–3.31(m,2H),2.01(s,3H).13C NMR(125MHz,MeOH-d4)δ161.1,151.9,1 51.7,135.7,129.5,128.8,128.3,127.0,117.9,111.2,96.5(d,JC-F＝192Hz),85.2,83.6(d,J＝17Hz),74.9(d,J＝25Hz),62.2,22.1.MS(ESI)C16H16FN3O3S requires:349.09.Found:350.1(M+H+).
化合物24h合成步骤同合成化合物18C方法，白色固体产物，产率为14％
化合物24h的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(s,1H),8.71(d,J＝1.6Hz,1H),6.73(q,J＝4.4,4.4Hz,1H),6.00(d,J＝3.6Hz,1H),5.33–5.14(m,1H),5.20–5.14(m,1H),4.44(q,J＝3.6,3.6Hz,1H),3.91(q,J＝4.4,4.8Hz,1H),3.74–2.33(m,2H),2.82(s,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ160.1,152.8,149.2,136.6,115.6,115.0,94.5(d,JC-F＝192Hz),84.3,83.6(d,J＝6Hz),81.9(d,J＝17Hz),72.1(d,J＝23Hz),60.1,20.7.MS(ESI)C13H13FN4O3requires:292.10.Found:293.0(M+H+).
化合物24i合成步骤同合成化合物18D方法，白色固体产物，产率是59％。
化合物24i的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(s,1H),8.15(s,1H),7.84(brs,1H),7.20(brs,1H),6.74(q,J＝4.4,4.4Hz,1H),6.00(br,1H),5.26–5.11(m,1H),5.05(brs,1H),4.43–4.37(m,1H),3.89(q,J＝4.8,4.8Hz,1H),3.71–2.64(m,2H),2.88(s,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ164.8,160.9,151.2,150.4,129.5,114.9,112.2,94.7(d,JC-F＝191Hz),83.5(d,J＝5Hz),81.2(d,J＝17Hz),72.9(d,J＝23Hz),60.7,24.0.MS(ESI)C13H15FN4O4requires:310.11.Found:311.1(M+H+).
化合物24j合成步骤同合成化合物18v方法，白色固体产物，产率是53％。
化合物24j的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.75(s,1H),8.12(d,J＝1.6Hz,1H),7.58(q,J＝2.4,1.2Hz,2H),7.46(q,J＝5.6,4.4Hz,3H),6.73(dd,J＝4.8,4.4Hz,1H),5.96(d,J＝5.2Hz,1H),5.30-5.12(m,2H),4.47–4.39(m,1H),3.88(q,J＝4.4,4.8Hz,1H),3.75–3.63(m,2H),2.93(s,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ160.8,152.5,149.9,131.8,131.3,129.3,129.1,123.0,117.0,96.5,95.4(d,JC-F＝191Hz),91.8,83.7(d,J＝6Hz),83.4,81.7(d,J＝17Hz),72.9(d,J＝23Hz),60.7,21.3.MS(ESI)C20H19FN4O3requires:367.13.Found:368.0.(M+H+).
化合物24k合成步骤同合成化合物18e方法，白色固体产物，产率是43％。
化合物24k的表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),7.99(s,1H),7.55(d,J＝7.6Hz,2H),7.47(d,J＝16Hz,1H),7.37(t,J＝7.6Hz,2H),7.26(t,J＝7.8Hz,1H),7.06(d,J＝16.4Hz,1H),6.79(q,J＝4,4Hz,1H),5.19–5.04(m,1H),4.55–4.49(m,1H),4.01–3.97(m,1H),3.93–3.83(m,2H),2.91(s,3H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ161.0,152.0,151.7,138.8,131.0,129.7,128.6,127.3,125.4,125.3,117.6,116.7,96.6(d,JC-F＝193Hz),85.2(d,J＝4Hz),83.7(d,J＝16Hz),74.9(d,J＝24Hz),62.3,22.8.MS(ESI)C20H19FN4O3requires:369.15.Found:370.0.(M+H+).
实验例
(1)化合物的H1N1病毒和H3N2病毒抑制活性的测定。
1.MDCK细胞的准备
在37℃、5％CO2的培养箱中进行MDCK细胞培养，培养基为加10％FBS和1％链霉素青霉素双抗的DMEM(购置invitrogen)。把培养好的MDCK细胞消化5-10min,消化时间看细胞状态而定，用完全培养基终止消化，然后用细胞计数板或细胞计数仪计数，以每孔2.5x104个细胞计算,每块96孔板以120孔计算制备细胞悬液，然后每孔加100μL铺板。放到37℃孵箱培养18-24h贴壁备用。
2.病毒感染液的准备(实验前准备)。50mL体系用量：DMEM为48mL，7.5％BSA为2mL，2mg/mL TPCK胰酶为50μL。
3.稀释化合物，用病毒感染液稀释化合物，以每孔110μL计算，每种浓度化合物须做二个复孔，4#(H3N2A/Hong Kong/8/68)和3#(H1N1A/WSN/33)用Ribavirin做对照，从10μM开始5倍稀释共7个梯度。
4.洗板，把实验用的铺有MDCK细胞的96孔板培养上清吸掉，每孔加100μLHanks液，轻轻拍打，然后吸掉上清，再加入100μLHanks液。
5.加入化合物，每孔100μL，设不加化合物对照。37℃培养箱培养三天。
6.加入CCK-8，37℃孵育2h后于酶标仪上检测光吸收，波长为450nM。
7.检测的OD值分析每个化合物的毒性。
(2)化合物对influenza A抑制活性和细胞毒性的测试结果
表1目标化合物对influenza A抑制活性和细胞毒性的测试结果
Figure BDA0001056173080000281
Figure BDA0001056173080000291
a:病毒的半抑制浓度；b:细胞的半抑制浓度。
从上述结果可知，本发明所提供的6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物对甲型流感病毒具有广谱抑制作用，若干化合物对野生型H3N2和突变型H1N1流感病毒有抑制活性，对H1N1和H3N2两种流感病毒半数抑制浓度，化合物18e、18n和18f少于阳性对照物利巴韦林，特别是化合物18n，具有很好的抑制活性，且细胞毒性较小。
(3)化合物的登革热病毒抑制活性的测定方法
1、A549细胞培养基：含10％FBS(胎牛血清)的DMEM完全培养基。病毒维持液：含2％FBS，1.2％CMC的DMEM完全培养基。化合物用DMSO溶解成10000μM至于-20℃冰箱保存，取用时用培养基稀释成对应浓度。
2、化合物细胞毒性实验(CC50：50％Cytotoxic Concentration)
由此实验确定化合物最大无毒计量(MNTD，Maximum non-toxic dose)，即细胞存活80％以上所对应的化合物浓度，并以此浓度作为一个化合物剂量上限。将A549细胞铺于96孔板，每孔细胞数1×104，37℃，5％CO2孵育24h。去除培养基更换成含0μM，0.41μM，1.23μM，3.7μM，11.1μM，33.3μM，100μM化合物的培养基(200μL/well，三复孔)37℃孵育48h。避光条件下，向每孔加入5mg/mL MTT 28μL，37℃孵育4h。吸出废液，每孔加入200μL DMSO(Sigma)，避光混匀，用多功能酶标仪(BioTek’s SynergyTM 2Multi-Detection MicroplateReader)测定490nM吸光度。应用Microsoft Excel 2013计算CC50及MNTD。
3、化合物抗病毒活性实验
将A549细胞以4×104/well铺于24孔板，37℃，5％CO2孵育24h。去除培养基，PBS清洗2次，加入200μL/well含对应浓度化合物病毒液(MOI:1)吸附2h。去除病毒液，用PBS清洗3次，加入500μL含梯度浓度(0.0041倍、0.037倍、0.11倍、0.33倍、1倍的MNTD)化合物的病毒维持液。37℃，5％CO2培养48h，分别回收上清液和细胞沉淀，置于-80℃冰箱保存。
4、提取上清液中2型登革病毒RNA
每份样品取200μL上清液，应用MagenTM公司的病毒上清提取试剂盒(LogPureViral DNA/RNA Kit#10601)提取RNA。每份样品用50μL无RNA酶的超纯水洗脱，置于-80℃冰箱保存。
5、逆转录RNA取10μL
RNA洗脱液，应用ThermoTM公司的逆转录试剂盒(RevertAid First Strand cDNASynthesis Kit#K1622)逆转录RNA至cDNA。产物置于4℃冰箱保存。
6、荧光定量PCR
DENV2-NGC上下游引物及探针来源于Life technologiesTM公司，探针法PCR试剂来源于RocheTM的LightCycler 480Probes Master#04887301001。
6.1制作标准曲线
取病毒原液，10倍稀释(10-5，10-6，10-7，10-8，10-9，10-10)按相同步骤提取RNA，逆转录RNA，取相同量(2μL)做荧光定量PCR。以PCR的Ct值为纵坐标，以拷贝数(copy number)10的对数(即稀释倍数)为横坐标，做直线回归，得到log(copy number)与Ct值 的关系。Ct＝-3.092×log(copy number)+43.96(R2＝0.905)
6.2荧光定量PCR
取样品的逆转录产物2μL，做荧光定量PCR，检测DENV2-NGC，记录Ct值，根据标准曲线计算对应的拷贝数。以对应的无病毒，无化合物培养的上清样品作为阴性对照组(Mock)；以对应的有病毒，无化合物培养的上清样品作为空白对照组(Control)。每一块24孔板均有一个阴性和空白对照孔。
6.3计算抑制率及EC50(病毒的半抑制浓度)：Ct值＝-3.0924×log(病毒拷贝数)+43.96病毒抑制率(％)＝100–(样品组拷贝数/空白组拷贝数)×100
EC50应用Microsoft Excel 2013的函数公式计算：log(EC50)＝forecast(50％，log Concentration,％Viral Inhibition)
(4)化合物对登革热病毒抑制活性和细胞毒性的测试结果
表2.目标化合物对DENV 2NGC病毒抑制活性和细胞毒性的测试结果。
Figure BDA0001056173080000301
a:病毒的半抑制浓度；b:细胞的半抑制浓度。
从上述结果可知，本发明所提供的6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物对登革热病毒有抑制活性，其中化合物18d和24b的抑制活性很好，分别达到2.081和0.183μM，选择性分别为大于72和26,抑制活性和选择性都优于上市药物利巴韦林(EC50＝11.821μM，选择性为12)。特别是其中化合物18d，抑制活性非常好且细胞毒性小。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (3)

1.选自如下化合物之一的6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物或者其药学上可接受的盐：
Figure FDA0002500018730000011
2.权利要求1所述的6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物或者其药学上可接受的盐在制备抑制RNA病毒的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述RNA病毒为登革热病毒。
CN201610580713.9A 2016-02-03 2016-07-21 6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物及其用途 Active CN107033206B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610076905 2016-02-03
CN2016100769056 2016-02-03

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107033206A CN107033206A (zh) 2017-08-11
CN107033206B true CN107033206B (zh) 2020-07-28

Family

ID=59532654

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610580713.9A Active CN107033206B (zh) 2016-02-03 2016-07-21 6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物及其用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107033206B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111349100A (zh) * 2020-04-27 2020-06-30 安徽大学 一种4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶的制备方法
CN114057814B (zh) * 2020-08-05 2023-12-08 广州市恒诺康医药科技有限公司 核苷类似物及其应用
CN114907348B (zh) * 2022-07-15 2022-10-28 济南宣正药业有限公司 一种4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶的制备方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Cai Lin, et al.,.Design, synthesis, and in vitro biological evaluation of novel 6-methyl-7-substituted-7-deaza purine nucleoside analogs as anti-influenza A agents..《Antiviral Research》.2016,第129卷第13-20页.. *
Design, synthesis, and in vitro biological evaluation of novel 6-methyl-7-substituted-7-deaza purine nucleoside analogs as anti-influenza A agents.;Cai Lin, et al.,;《Antiviral Research》;20160121;第129卷;第13-20页. *
Sugar-modified derivatives of cytostatic 6-(het)aryl-7-deazapurine nucleosides: 2"-C-methylribonucleosides, arabinonucleosides and 2"-deoxy-2"-fluoroarabinonucleosides.;Petr Naus, et al.,;《Collection of Czechoslovak Chemical Communications 》;20110707;第957-988页. *
Sugar-modified derivatives of cytostatic 7-(het)aryl-7-deazaadenosines: 2"-C-methylribonucleosides, 2"-deoxy-2"-fluoroarabinonucleosides, arabinonucleosides and 2"-deoxyribonucleosides.;Naus, Petr, et al.,;《Bioorganic & Medicinal Chemistry》;20120720;第20卷;第5202-5214页. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN107033206A (zh) 2017-08-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105143206B (zh) 用于治疗癌症的嘧啶-2,4-二胺衍生物
CN102427729B (zh) 丙型肝炎病毒复制的抑制剂
EP3262049B1 (en) Tyk2 inhibitors and uses thereof
AU2002313410B2 (en) Hepatitis C virus polymerase inhibitors with a heterobicyclic structure
NO20220309A1 (en) Mta-cooperative prmt5 inhibitors
WO2021127278A1 (en) Irak degraders and uses thereof
WO2020251974A1 (en) Smarca inhibitors and uses thereof
KR20100081294A (ko) 간염과 같은 바이러스성 감염 치료용 이미다조[1,2-ａ] 피라진 화합물
WO2021011868A1 (en) Irak degraders and uses thereof
WO2020251972A1 (en) Smarca degraders and uses thereof
CA3005921A1 (en) Substituted-(pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl)-pyrimidin derivatives and use thereof as inhibitors of influenza virus replication
CA3115088A1 (en) Tyk2 inhibitors and uses thereof
JP2013512246A (ja) ウイルス疾患治療に有用な縮合型三環式化合物およびその誘導体
TW201209051A (en) Substituted Biphenylene Compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EP3166951A1 (en) Dihydropyridopyrazine-1,8-diones and their use in the treatment, amelioration or prevention of viral diseases
CA3045371A1 (en) Inhibitors of influenza virus replication and uses thereof
CN107033206B (zh) 6-甲基7位脱氮嘌呤核苷类化合物及其用途
CN105073755A (zh) 杂环-取代的四环化合物及其治疗病毒性疾病的使用方法
WO2023044046A1 (en) Bcl-xl degraders and uses thereof
CA2909464A1 (en) Substituted condensed pyrimidine compounds
EP4301756A1 (en) Hpk1 antagonists and uses thereof
TW202003496A (zh) 一種新穎磷酸肌醇3 - 激酶抑制劑及其製備方法和用途
AU2013374113A1 (en) Thiophene-substituted tetracyclic compounds and methods of use thereof for treatment of viral diseases
CN108290897A (zh) 一类取代三唑并哌嗪类parp抑制剂及其制备方法和用途
CA3206499A1 (en) Gpr84 antagonists and uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20220421

Address after: 510535 9th floor, building C4, 11 Kaiyuan Avenue, Science City, Guangzhou Economic and Technological Development Zone, Guangdong Province

Patentee after: GUANGZHOU HENOVCOM BIOSCIENCE Co.,Ltd.

Address before: 510663 190 Kaiyuan Avenue, Guangzhou Science City, Guangzhou, Guangdong Province

Patentee before: GUANGZHOU INSTITUTES OF BIOMEDICINE AND HEALTH, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES