CN107027629A - 一种提高香蕉成活率的组织培养方法 - Google Patents

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    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants

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Abstract

本发明提供一种提高香蕉成活率的组织培养方法，步骤如下：（1）诱导培养；（2）继代培养；（3）生根培养；（4）炼苗。并提供了三种培养时使用的培养基及培养条件。应用本发明的方法对香蕉进行组织培养，香蕉成活率高达91%以上。

Description

一种提高香蕉成活率的组织培养方法
技术领域
本发明涉及一种提高香蕉成活率的组织培养方法。
背景技术
香蕉（Musa balbisiana Colla）是我国南方的重要热带水果之一，同时也是许多地区的重要经济收入来源，并且许多农户依靠种植香蕉脱贫致富。大多数的栽培食用香蕉都是单性三倍体AAA，具有高度的不育特性，主要靠无性繁殖，生产上通常利用吸芽进行繁殖，种苗不足时，也可采用香蕉的地下茎切块来繁殖种苗，但是该方法长期使用会累积许多病毒，如：束顶病、花叶病等。造成严重的危害。另外，不良的香蕉种苗会导致生长不良，果品不佳，收获不统一等问题。香蕉组织培养技术能够在短时间内快速繁殖出大量规格统一的优质的无病虫害的健康种苗，并且，新品种的培育和引进也需要利用脱病毒和组培快繁技术加快名优品种的发展。香蕉组培技术是我国农业科研工作者在20 世纪80 年代后期研发推广，该技术的应用对我国香蕉产业的迅速发展起到了重大的推进作用，也使得种苗工厂化生产得以实现，在短时间内将优良品种大面积推广，达到大规模商品化香蕉生产。
发明内容
本发明提供了一种提高香蕉成活率的组织培养方法。
本发明提供一种提高香蕉成活率的组织培养方法，步骤如下：
（1）诱导培养：选择香蕉吸芽作为外植体，将外植体灭菌后，转接到诱导培养基中进行培养，所述诱导培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 10-15mg/L+梨汁1.0-1.2g/L+NAA +蔗糖15-20g/L+琼脂6g/L；诱导培养条件为：黑暗培养，温度为28-30℃；
（2）继代培养：将诱导培养后的丛生芽转入继代培养基中进行培养；所述继代培养基的配方为：MS培养基+2，4-二氯苯氧乙酸0.05-0.08g/L+萘乙酸0.08-0.12g/L+苹果汁+蔗糖15-20g/L+琼脂6g/L；继代培养条件为：每天日光灯光照15-18小时，光强800-1000Lux，温度为28-30℃；
（3）生根培养：将继代培养后的香蕉幼苗转入生根培养基中进行培养；所述生根培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 0.5-0.6g/L+蔗糖15-20g/L+琼脂6g/L；生根培养的条件为：每天日光灯光照15-18小时，光强1200-1500Lux，温度为28-30℃；
（4）炼苗：将香蕉幼苗进行炼苗，炼苗温度为24-28℃，光照为日光照射。
作为优选，步骤如下：
（1）诱导培养：选择香蕉吸芽作为外植体，将外植体灭菌后，转接到诱导培养基中进行培养，所述诱导培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 12mg/L+梨汁1.1g/L+NAA 0.55g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；诱导培养条件为：黑暗培养，温度为29℃；
（2）继代培养：将诱导培养后的丛生芽转入继代培养基中进行培养；所述继代培养基的配方为：MS培养基+2，4-二氯苯氧乙酸0.06g/L+萘乙酸0.1g/L+苹果汁0.02g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；继代培养条件为：每天日光灯光照16小时，光强900Lux，温度为29℃；
（3）生根培养：将继代培养后的香蕉幼苗转入生根培养基中进行培养；所述生根培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 0.55g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；生根培养的条件为：每天日光灯光照16小时，光强1400Lux，温度为29℃；
（4）炼苗：将香蕉幼苗进行炼苗，炼苗温度为26℃，光照为日光照射。
应用本发明的方法对香蕉进行组织培养，香蕉成活率高达91%以上。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售。
实施例1
本发明的一种提高香蕉成活率的组织培养方法，步骤如下：
（1）诱导培养：选择香蕉吸芽作为外植体，将外植体灭菌后，转接到诱导培养基中进行培养，所述诱导培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 12mg/L+梨汁1.1g/L+NAA 0.55g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；诱导培养条件为：黑暗培养，温度为29℃；
（2）继代培养：将诱导培养后的丛生芽转入继代培养基中进行培养；所述继代培养基的配方为：MS培养基+2，4-二氯苯氧乙酸0.06g/L+萘乙酸0.1g/L+苹果汁0.02g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；继代培养条件为：每天日光灯光照16小时，光强900Lux，温度为29℃；
（3）生根培养：将继代培养后的香蕉幼苗转入生根培养基中进行培养；所述生根培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 0.55g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；生根培养的条件为：每天日光灯光照16小时，光强1400Lux，温度为29℃；
（4）炼苗：将香蕉幼苗进行炼苗，炼苗温度为26℃，光照为日光照射。
实施例2
本发明的一种提高香蕉成活率的组织培养方法，步骤如下：
（1）诱导培养：选择香蕉吸芽作为外植体，将外植体灭菌后，转接到诱导培养基中进行培养，所述诱导培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 10mg/L+梨汁1.2g/L+NAA 0.6g/L+蔗糖15g/L+琼脂6g/L；诱导培养条件为：黑暗培养，温度为30℃；
（2）继代培养：将诱导培养后的丛生芽转入继代培养基中进行培养；所述继代培养基的配方为：MS培养基+2，4-二氯苯氧乙酸0.08g/L+萘乙酸0.08g/L+苹果汁0.03g/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L；继代培养条件为：每天日光灯光照15小时，光强1000Lux，温度为30℃；
（3）生根培养：将继代培养后的香蕉幼苗转入生根培养基中进行培养；所述生根培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 0.6g/L+蔗糖15g/L+琼脂6g/L；生根培养的条件为：每天日光灯光照18小时，光强1200Lux，温度为30℃；
（4）炼苗：将香蕉幼苗进行炼苗，炼苗温度为28℃，光照为日光照射。
实施例3
本发明的一种提高香蕉成活率的组织培养方法，步骤如下：
（1）诱导培养：选择香蕉吸芽作为外植体，将外植体灭菌后，转接到诱导培养基中进行培养，所述诱导培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 15mg/L+梨汁1.0g/L+NAA 0.5g/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L；诱导培养条件为：黑暗培养，温度为28℃；
（2）继代培养：将诱导培养后的丛生芽转入继代培养基中进行培养；所述继代培养基的配方为：MS培养基+2，4-二氯苯氧乙酸0.05g/L+萘乙酸0.12g/L+苹果汁0.01g/L+蔗糖15g/L+琼脂6g/L；继代培养条件为：每天日光灯光照18小时，光强800Lux，温度为28℃；
（3）生根培养：将继代培养后的香蕉幼苗转入生根培养基中进行培养；所述生根培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 0.5g/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L；生根培养的条件为：每天日光灯光照15小时，光强1500Lux，温度为28℃；
（4）炼苗：将香蕉幼苗进行炼苗，炼苗温度为24℃，光照为日光照射。
应用本发明的方法进行香蕉的组织培养，成活率均在91%以上：实施例1:94.8%，实施例2:93.5%，实施例3:91%。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种提高香蕉成活率的组织培养方法，其特征在于：步骤如下：
（1）诱导培养：选择香蕉吸芽作为外植体，将外植体灭菌后，转接到诱导培养基中进行培养，所述诱导培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 10-15mg/L+梨汁1.0-1.2g/L+NAA+蔗糖15-20g/L+琼脂6g/L；诱导培养条件为：黑暗培养，温度为28-30℃；
（2）继代培养：将诱导培养后的丛生芽转入继代培养基中进行培养；所述继代培养基的配方为：MS培养基+2，4-二氯苯氧乙酸0.05-0.08g/L+萘乙酸0.08-0.12g/L+苹果汁+蔗糖15-20g/L+琼脂6g/L；继代培养条件为：每天日光灯光照15-18小时，光强800-1000Lux，温度为28-30℃；
（3）生根培养：将继代培养后的香蕉幼苗转入生根培养基中进行培养；所述生根培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 0.5-0.6g/L+蔗糖15-20g/L+琼脂6g/L；生根培养的条件为：每天日光灯光照15-18小时，光强1200-1500Lux，温度为28-30℃；
（4）炼苗：将香蕉幼苗进行炼苗，炼苗温度为24-28℃，光照为日光照射。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤如下：
（1）诱导培养：选择香蕉吸芽作为外植体，将外植体灭菌后，转接到诱导培养基中进行培养，所述诱导培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 12mg/L+梨汁1.1g/L+NAA 0.55g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；诱导培养条件为：黑暗培养，温度为29℃；
（2）继代培养：将诱导培养后的丛生芽转入继代培养基中进行培养；所述继代培养基的配方为：MS培养基+2，4-二氯苯氧乙酸0.06g/L+萘乙酸0.1g/L+苹果汁0.02g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；继代培养条件为：每天日光灯光照16小时，光强900Lux，温度为29℃；
（3）生根培养：将继代培养后的香蕉幼苗转入生根培养基中进行培养；所述生根培养基的配方为：MS培养基+ 6-BA 0.55g/L+蔗糖18g/L+琼脂6g/L；生根培养的条件为：每天日光灯光照16小时，光强1400Lux，温度为29℃；
（4）炼苗：将香蕉幼苗进行炼苗，炼苗温度为26℃，光照为日光照射。
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