CN106922393A

CN106922393A - 一种块菌菌根苗的合成方法

Info

Publication number: CN106922393A
Application number: CN201710143251.9A
Authority: CN
Inventors: 寸建清
Original assignee: Yunnan Lyuchen Biotechnology Development Co Ltd
Current assignee: Yunnan Lyuchen Biotechnology Development Co Ltd
Priority date: 2017-03-11
Filing date: 2017-03-11
Publication date: 2017-07-07

Abstract

本发明提供了一种块菌菌根苗的合成方法，其特征是1、选用云南松、华山松、板栗、钓栲的任意一种作为宿主植物，在无菌的环境下，使用无菌的基质培育80～100天；2、在装有空气净化器的无菌接种间内进行块菌菌种接种；3、接种后的宿主植物苗放入到在装有空气净化器的无菌育苗室培育15天；4、将菌根苗移入塑料大棚在大棚自然环境下培育，5～6个月后可到大田移栽。本发明接种块菌菌种使用了高纯度液体块菌菌种，宿主植物苗和块菌菌根苗初期培育在无菌的环境下进行，未受外界杂菌的影响，接种时宿主植物苗根部及周围菌种密布，为此，块菌菌根苗合成的感染率高，可以达到90%以上，比现有技术高出30%。

Description

一种块菌菌根苗的合成方法

技术领域

本发明涉及一种块菌菌根苗的合成方法。

背景技术

块菌（Truffles）为了囊菌类、块菌目（Tuberales）、块菌科（Tuberaceae）、块菌属（Tuber），是一类与维管束植物形成共生关系，具有很高营养价值与经济开发价值的地下名贵食用真菌、除具有较高的维生素B₁、维生素B₂与独特的口感及香味外，其内所含的雄性酮类成份是其它类食用菌所无法与之相比的，特别是欧美等国家块菌号称“黑色钻石”。

过去块菌主要靠自然生长，随着需求量的增长，掠夺式的采挖已导致自然野生产量逐年下降，目前已成为濒危物种。近年来，逐步开展了人工栽培块菌的研究，但一是接种块菌菌种均为子囊果均浆液，菌种纯度低，二是宿主植物苗和块菌菌根幼苗的培育在有菌的环境下进行，受外界杂菌的影响，造成块菌菌根苗合成的感染率只有60%以下，寄生成功率较低。

发明内容

本发明的目的是针对上述存在的问题，提供一种感染率高的块菌菌根苗合成方法。

本发明是这样实现的：包括宿主植物苗的培育、块菌菌种接种、块菌菌根苗初期培育、块菌菌根苗后期培育，其特征是：

1、宿主植物苗的培育：宿主植物选用云南松、华山松、板栗、钓栲的任意一种，宿主植物的种子经消毒处理后，在无菌的环境下，使用无菌的基质培育80～100天；

2、块菌菌种接种：在装有空气净化器的无菌接种间内进行块菌菌种接种，作业前开起空气净化器30～50分种，将步骤1培养的宿主植物苗剪去根段末端1/3，根部按顺序蘸生根液和高纯度液体块菌菌种后，放入装有1/3基质的黑色育苗杯内，用接种枪瞄准宿主植物苗根部射入10～13 mL高纯度液体块菌菌种，宿主植物苗扶正后加入基质至距杯上口1.0～1.5cm，生根液为吲哚乙酸水溶液浓度为1 ~2mg/L，基质为过2目砂窗过筛腐殖土、蛭石、石英砂按体积比2：1:1比例混匀后、调整水份30~35%，调整pH值7～8.5，经128℃高压灭菌2小时；

3、块菌菌根苗初期培育：将步骤2接种后的宿主植物苗放入到在装有空气净化器的无菌育苗室培育，1～3天育苗室温度控制在18～26℃，3天后，育苗室温度控制在昼26±1℃，夜15±1℃，每天光照时长10～12小时，光照度为1200～1500Lx，每天开起空气净化器30～50分钟，培育15天后，菌根苗可移入塑料大棚培育；

4、块菌菌根苗后期培育：将步骤3菌根苗移入塑料大棚，3～5天内进行遮阳，遮光率为55～65%，5天后在大棚自然环境下培育， 5～6个月后可到大田移栽。

本发明中一是接种块菌菌种使用了本申请人生产的高纯度液体块菌菌种，二是宿主植物苗和块菌菌根苗初期培育在无菌的环境下进行，未受外界杂菌的影响，三是宿主植物苗蘸生根液和高纯度液体块菌菌种后，用接种枪瞄准宿主植物苗根部射入高纯度液体块菌菌种，宿主植物苗根部及周围菌种密布，为此，块菌菌根苗合成的感染率高，可以达到90%以上，比现有技术高出30%。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作具体说明。

1、宿主植物苗的培育：

（1）宿主植物种子的筛选和保存

宿主植物选用云南松、华山松、板栗、钓栲（大叶槠）任意一种，云南松、华山松种子用水洗去除空壳后晾干，装在玻璃罐或纱布袋中储藏备用；板粟、钓栲种子水洗去除霉烂变质与不饱满的种子、晾干表面水份，种子与湿度为25～35%的洁净河砂按体积比1：2的比例混合装入纸箱中并置于4～6℃的冷藏柜中保存备用；

（2）种子处理：

使用云南松、华山松种子时；用0.1%高锰酸钾溶液浸泡30分种，用清水冲洗2～3遍，再用30%H₂O₂溶液浸泡4小时，并用戴有防护橡胶手套的手搓洗，使种子表面坚硬的腊层尽量去除，以利种子吸收水份和播种后萌发，用无菌水冲洗3～4遍后，再用无菌水浸泡96小时，浸泡时至少每24小时更换一次无菌水，接着沥干水份后备用；使用板粟、钓栲（大叶槠）树种子时，用0.1%高锰酸钾溶液浸泡30分钟，用清水冲洗2～3遍后再用30%H₂O₂溶液浸泡2小时，浸泡时应随时搓洗，除去表面腊层，用无菌水冲洗3～4遍后，再用无菌水浸泡48小时，浸泡时至少每24小时更换一次无菌水，接着沥干水份后备用；

（3）育苗基质制备：过2目砂窗过筛腐殖土、蛭石、石英砂按体积比1:1:1比例混匀，加水调至含水量30～35%后，在128℃高压灭菌2小时备用；

（4）播种：基质装入专用塑料培养筐内，并将处理后的种子播入基质中培育，植入深度为2cm左右。

（5）育苗：播种后用无菌水浇灌、湿度控制在50～60%，播种后15天左右开始出芽，30天后苗基本上出齐，苗龄在90天后可开始接块菌种。

2、块菌菌种接种：在装有空气净化器的无菌接种间内进行块菌菌种接种，作业前开起空气净化器30～50分种，将步骤1培养的宿主植物苗剪去根段末端1/3，根部按顺序蘸生根液和高纯度液体块菌菌种后，放入装有1/3基质的黑色育苗杯内，用接种枪瞄准宿主植物苗根部射入10～13 mL高纯度液体块菌菌种，宿主植物苗扶正后加入基质至距杯上口1.0～1.5cm，生根液为吲哚乙酸水溶液浓度为1 ~2mg/L，基质为过2目砂窗过筛腐殖土、蛭石、石英砂按体积比2：1:1比例混匀后、调整水份30~35%，用石灰粉调整调整pH值7～8.5，经128℃高压灭菌2小时；

3、块菌菌根苗初期培育：接种后的1-3天是菌种能否成活的关键时期，而接种后的7-15天又是菌种与植株共生能否成功的关键期，为此，将步骤2接种后的宿主植物苗放入在装有空气净化器的无菌育苗室培育，1～3天育苗室温度控制在18～26℃，3天后育苗室温度控制在昼26±1℃，夜15±1℃，每天光照时长10～12小时，光照度为1200～1500Lx，每天开起空气净化器30～50分钟，培育15天后，菌根苗可移入塑料大棚培育；

Claims

1.一种块菌菌根苗的合成方法，包括宿主植物苗的培育、块菌菌种接种、块菌菌根苗初期培育、块菌菌根苗后期培育，其特征是：

（1）宿主植物苗的培育：宿主植物选用云南松、华山松、板栗、钓栲的任意一种，宿主植物的种子经消毒处理后，在无菌的环境下，使用无菌的基质培育80～100天；

（2）块菌菌种接种：在装有空气净化器的无菌接种间内进行块菌菌种接种，作业前开起空气净化器30～50分种，将步骤1培养的宿主植物苗剪去根段末端1/3，根部按顺序蘸生根液和高纯度液体块菌菌种后，放入装有1/3基质的黑色育苗杯内，用接种枪瞄准宿主植物苗根部射入10～13 mL高纯度液体块菌菌种，宿主植物苗扶正后加入基质至距杯上口1.0～1.5cm，生根液为吲哚乙酸水溶液浓度为1 ~2mg/L，基质为过2目砂窗过筛腐殖土、蛭石、石英砂按体积比2:1:1比例混匀后、调整水份30~35%，调整pH值7～8.5，经128℃高压灭菌2小时；

（3）块菌菌根苗初期培育：将步骤2接种后的宿主植物苗放入到在装有空气净化器的无菌育苗室培育，1～3天育苗室温度控制在18～26℃，3天后，育苗室温度控制在昼26±1℃，夜15±1℃，每天光照时长10～12小时，光照度为1200～1500Lx，每天开起空气净化器30～50分钟，培育15天后，菌根苗可移入塑料大棚培育；

（4）块菌菌根苗后期培育：将步骤3菌根苗移入塑料大棚，3～5天内进行遮阳，遮光率为55～65%，5天后在大棚自然环境下培育， 5～6个月后可到大田移栽。

2.根据权利要求1所述的块菌菌根苗的合成方法，其特征是宿主植物苗培育的基质为过2目砂窗过筛腐殖土、蛭石、石英砂按体积比1:1:1比例混匀，加水调至含水量30～35%。