CN1069060C - 活性肽用于增强动物免疫力和用作疫苗佐剂的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种增强动物免疫力的方法，专用于提高家畜、家禽及各类经济动物的免疫能力，并能提高疫苗的免疫效果。技术方案为，化合物活性肽(Lys-His-Gly-NH2)用于增强动物免疫力，按动物体重每公斤使用活性肽1～600纳克，每只动物采用注射或口服方法。活性肽用作动物疫苗佐剂，每1000毫升动物疫苗与8～40微克活性肽配合使用，按疫苗常规剂量用于动物。本发明所提供的方法，一方面能增强动物机体免疫能力，提高保护率10～20%；另一方面能使疫苗的免疫效果更确实、可靠，将疫苗免疫水平提高一个层次，具有直接的经济效益和社会效益。
Description
本发明涉及一种增强动物免疫力的方法，专用于提高动物诸如鸡、鸭、兔、猪、羊、犬、牛、鹿等家畜、家禽及各类经济动物的免疫能力，并能提高疫苗的免疫效果。
畜禽养殖业的发展十分迅速，尤其是集约化饲养规模日益扩大。目前阻碍养殖业发展的主要问题是疾病，尤其是传染病。疫苗接种是预防传染病最基本、最有效的方法，但是由于多种原因，目前许多疫苗的免疫效果还不十分理想，不能对动物提供完全保护。因此人们进行了大量的研究工作，试图通过不同途径来提高疫苗的效果，这些途径包括提高疫苗质量(如增加抗原含量、增强免疫原性、使用高效佐剂、优化制苗工艺等)、改进免疫方法(如采用粘膜免疫、胚胎免疫、超前免疫等)及增强动物机体自身的免疫应答能力(如使用免疫增强剂、减少有毒物质对免疫系统的损害、控制免疫抑制性病原微生物的侵染、提供良好的饲养管理条件等)。而研究、开发新型高效佐剂是提高免疫效果的主要手段之一。
佐剂按其作用方式可分为两大类，一是作用于疫苗，改善疫苗本身的性能，如传统的化学佐剂氢氧化铝胶和油类可以减缓疫苗抗原在体内的释放速率，但往往引起注射部位肿胀甚至感染化浓等不良反应。皂素糖苷可以与某些抗原蛋白及胆固醇结合形成免疫刺激复合物，使非颗粒性的抗原形成颗粒结构，从而增强疫苗的免疫效果，但因来源有限而使成本较高。另一类是直接作用于动物机体细胞，增强机体的自主免疫应答能力，如胸腺素直接作用于T淋巴细胞、白介素作用于T、B淋巴细胞及其它细胞，但均因其成本太高而无法用于动物。
目前佐剂的品种较多，分别来自动物(如胸腺素、白介素、干扰素、蜂蜡等)、植物(如植物血凝素、黄芪多糖、人参皂甙等)、微生物(如真菌多糖、分枝杆菌细胞壁等)及化学合成物(如左旋咪唑、氢氧化铝、聚肌一胞等)。上述各种佐剂中，有些还在研究阶段，尚未应用于生产，如白介素、真菌多糖等；有些虽然已应用于人类如胸腺素和干扰素，但因其价格较昂贵或来源有限而不可能用于动物。目前动物疫苗所用佐剂主要还是从物理学角度提高其免疫效果，例如氢氧化铝、油类、蜂蜡等，但这些佐剂不但性质粘稠，不易注射，而且容易引起局部肿胀、甚至感染化浓等副作用。因此目前还没有具有直接增强动物机体自身免疫应答能力的生物活性佐剂来从治本角度提高免疫效果。
本发明的目的是，提供一种增强动物机体自身免疫力的方法，一方面能增强动物机体免疫能力，另一方面能使疫苗的免疫效果更确实、可靠，将疫苗免疫水平提高一个层次，具有直接的经济效益和社会效益。
本发明所提供的技术方案如下：
活性肽(Lys-His-Gly-NH2)用于增强动物免疫力的方法，按动物体重每公斤使用活性肽1～600纳克，每只动物采用注射或口服方法。
上述活性肽用于增强动物免疫力的方法，如果选用注射方法，使用药用级活性肽效果会更好。
活性肽(Lys-His-Gly-NH2)用作动物疫苗佐剂的方法，其特征在于：每1000毫升动物疫苗与8～40微克活性肽配合使用，按疫苗常规剂量用于动物。
上述活性肽用作动物疫苗佐剂的方法，如果每1000毫升动物疫苗与8～40微克活性肽混合使用，使用药用级活性肽效果会更好，更加方便。
活性肽(Lys-His-Gly-NH2)是存在于禽类法氏囊(也叫囊上腔)组织中的一种免疫活性物质，由法氏囊的滤泡和树突网状上皮细胞产生。其化学本质是由赖氨酸、组氨酸和甘氨酸组成的天然三肽，对热及灭活剂稳定。目前还没有将该活性肽作为疫苗佐剂或将活性肽用于增强动物免疫力的报道。根据发明人研究，其体外生物学活性是可以刺激前体淋巴细胞分化、增殖，成为具有抗体产生潜力的B淋巴细胞和具有细胞免疫潜力的T淋巴细胞。在活性肽的刺激下，T、B淋巴细胞的转化率可以分别提高10％和30％，而T、B淋巴细胞的转化及其数量代表着机体的免疫功能(见参考文献，杜念兴，《兽医免疫学》上海科技出版社，1984,16-18,272)。因此，按照本发明所提供的方法将活性肽用于动物，可使动物机体自身免疫应答能力提高。试验表明，活性肽作为疫苗佐剂，可促进和增强宿主机体的自身免疫系统，提高各类动物疫苗诸如鸡新城疫、法氏囊、狂犬病疫苗、牛出败、牛流行热、鸭瘟、兔瘟、貂肠炎、猪瘟、猪肺疫、猪脑炎疫苗等的免疫保护率10-20％。
由于活性肽是动物体内存在的纯天然物质，分子量小，单独或与疫苗同时使用没有毒性，不产生抗活性肽的抗体，它是通过提高宿主自身的免疫应答能力而提高机体免疫力，十分安全、可靠。活性肽化学合成制造方便，成本低廉，使用药用级活性肽更加安全、可靠。
活性肽单独用于动物既可注射，也可口服，注射比口服效果更好，口服比注射更方便，增强免疫效果。活性肽作为疫苗佐剂，可以有针对性地提高疫苗的免疫保护率。由于活性肽是通过提高宿主自身免疫应答能力而达到增强疫苗免疫效果的目的，绝无毒副作用、药物残留及接种部位局部损伤等，是一种理想佐剂。
畜禽、经济动物及各类其他人工饲养动物都要接种疫苗，动物疫苗种类繁多，活性肽可以配合所有各种动物疫苗作为免疫增强剂使用，应用面宽，其经济效益和社会效益十分可观。
实施例1:2月龄麻鸭，单独注射活性肽50纳克，3天后用鸭疫巴氏杆菌攻毒，死亡率为50％(15/30)，而未注射活性肽的对照组死亡率为60％(18/30)，试验组比对照组的保护率提高了10％。
实施例2:1日龄艾维茵肉鸡，单独口服活性肽30纳克，1周后用传染性支气管炎病毒攻击，发病率为65％(65/100)，而未口服活性肽的对照组发病率为76％(76/100)，试验组比对照组的降低发病率11％。
实施例3:1月龄肉鸽，单独注射活性肽20纳克后3天，再用鸡新城疫病毒LaSota株疫苗点眼免疫。免疫后2周用新城疫F48E8株强毒攻击，保护率为95％(190/200)，而未注射活性肽的对照组保护率只有83％(166/200)，试验组比对照组的保护率提高了12％。
实施例4:1月龄珍珠鸡，注射新城疫Ⅳ系疫苗后3天，再注射活性肽20纳克，2周后用新城疫F48E8株强毒攻击，保护率为95％(95/100)，而未注射活性肽的对照组保护率只有85％(85/100)，试验组比对照组的保护率提高了10％。
实施例5:1月龄新西兰大耳白兔，口服50纳克活性肽，3天后注射兔出败疫苗，免疫后3周用兔多杀性巴氏杆菌强毒攻击，保护率为89％(89/100)，而未口服活性肽的对照组保护率只有77％(77/100)，试验组比对照组的保护率提高了12％。
实施例6:1月龄水貂，口服活性肽50纳克，2天后注射水貂病毒性肠炎疫苗，免疫后3周用貂细小病毒强毒攻击，保护率为90％(18/20)，未口服活性肽的对照组保护率为80％(16/20)，试验组比对照组提高保护率10％。
实施例7:15日龄伊莎蛋用雏鸡，注射含有8微克活性肽/千毫升的鸡传染性法氏囊病疫苗0.2毫升，免疫后4周用强毒攻击，保护率为80％，而未加活性肽的疫苗对照组保护率只有60％，试验组比对照组的保护率提高了20％。
实施例8:30日龄家兔，接种含有10微克活性肽/千毫升的兔巴氏杆菌灭活疫苗1毫升，免疫后4周用强毒菌攻击，保护率为90％，而未加活性肽的疫苗对照组保护率只有75％，试验组比对照组的保护率提高了15％。
实施例9:1日龄杜洛克商品仔猪，接种含有15微克活性肽/千毫升的猪肺疫菌苗2毫升(一头份)，免疫后3周用强毒菌株攻击，保护率为80％，而未加活性肽的疫苗对照组保护率只有70％，试验组比对照组的保护率提高了10％。
实施例10:1月龄土种犬，接种含有20微克活性肽/千毫升的细小病毒疫苗1毫升，免疫后3周用强毒攻击，保护率为100％，而未加活性肽的疫苗对照组保护率只有85％，试验组比对照组的保护率提高了15％。
实施例11:6月龄犊牛，接种含有40微克活性肽/千毫升的牛出败疫苗5毫升(一头份)，免疫后4周用强毒攻击，保护率为100％，而未加活性肽的疫苗对照组保护率只有80％，试验组比对照组的保护率提高了20％。
Claims (5)
1、活性肽Lys-His-Gly-NH2用于增强动物免疫力的方法，其特征在于：按动物体重每公斤使用活性肽1-600纳克，每只动物采用注射或口服方法。
2、根据权利要求1所述的化合物活性肽用于增强动物免疫力的方法，其特征在于：使用的活性肽为药用级活性肽。
3、活性肽Lys-His-Gly-NH2用作动物疫苗佐剂的方法，其特征在于：每1000毫升动物疫苗与8-40微克活性肽配合使用，按疫苗常规剂量用于动物。
4、根据权利要求3所述的化合物活性肽用作动物疫苗佐剂的方法，其特征在于：每1000毫升动物疫苗与8-40微克活性肽混合使用，按疫苗常规剂量用于动物。
5、根据权利要求3所述的化合物活性肽用作疫苗佐剂的方法，其特征在于：使用的活性肽为药用级活性肽。
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| 兽医免疫学 1984.1.1 杜念兴 上海科技出版社 * |
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