CN106835317A - 一种鱼皮胶原自组装成纤维的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于电线电缆料技术领域，提供了一种鱼皮胶原自组装成纤维的方法，包括如下步骤：（1）提取鱼皮胶原粉；（2）将鱼皮胶原粉溶解于柠檬酸溶液中；（3）对混合液进行离心，取上清液；（4）将上清液与醋酸缓冲液在冰浴中混合，搅拌均匀，调节溶液PH；（5）将混合液在水浴锅中水浴，即得自组装体胶原纤维。本发明探讨水产胶原自组装形成纤维的方法，通过本发明方法所得胶原纤维为丝状纤维，与深海鱼皮中天然存在的胶原纤维形态极其相似，在医用生物材料领域具有很高的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于生物材料技术领域，具体地，涉及一种鱼皮胶原自组装成纤维的方法。
背景技术
胶原是动物组织中的一类结构蛋白，约占总蛋白量的1/3，广泛分布于动物的皮肤、骨骼、软骨、结缔组织、腱、角膜、内脏细胞间质、肌腔、韧带、巩膜等部位。因其具有独特的三股螺旋结构、低抗原性、无毒性、良好的生物相容性和生物可降解性等特点，已被广泛应用于组织工程支架材料、止血海绵、药物控缓释系统、基因传递载体、美容外科等生物医用领域。但是，目前使用的胶原蛋白主要来源于猪皮、牛皮和猪骨、牛骨，近年来由于疯牛病、口蹄疫等人畜交叉流行病的频发，猪和牛中来源的胶原蛋白的应用受到了限制。此外，在某些宗教人群中，猪来源的胶原蛋白被禁止使用。在这种情况下，水产胶原蛋白由于原料丰富、易于提取、低抗原性、低致敏性、高度可溶性、没有传染病危险和宗教障碍而受到广泛的关注。其中深海鱼皮胶原蛋白，顾名思义就是以深海鱼鱼皮为原料提取的胶原蛋白。由于深海的低温低压，使这类胶原蛋白具有着普通的陆生动物胶原蛋白和淡水鱼、浅海鱼胶原蛋白所不具备的特殊性质。首先区别在于胶原蛋白活性激发的温度。陆生动物内提取的胶原蛋白活性要在35度才能把活性全部激发。也就是说要在35度以上吸收的效果才会达到最佳。而鱼提取的活性激发温度就要低很多，十度以上就能发挥最好的效果。
自组装性是胶原的重要特性。通常，溶解于溶液中的胶原是游离的多肽链，而不是三股螺旋链。胶原通过自组装能够形成三股螺旋结构，进而形成纤维等，这是其在生物材料领域应用的基础。以往关于胶原自组装性的研究多针对陆生哺乳动物胶原，对水产胶原的探讨较少。
发明内容
针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种鱼皮胶原自组装成纤维的方法，本发明将鱼皮胶原蛋白粉作为原料采用柠檬酸对其溶解反应，最终通过自组装形成纤维。
为解决现有技术问题，本发明的提供一种鱼皮胶原自组装成纤维的方法，所述鱼皮胶原自组装成纤维的方法包括如下步骤：
（1）提取鱼皮胶原粉；
（2）将所述步骤（1）中的鱼皮胶原粉溶解于柠檬酸溶液中；
（3）对所述步骤（2）中的混合液进行离心，取上清液；
（4）将所述步骤（3）中的上清液与醋酸缓冲液在冰浴中混合，搅拌均匀，调节溶液PH；
（5）将所述步骤（4）中的混合液在水浴锅中水浴，即得自组装体胶原纤维。
优选地，所述鱼皮胶原粉的制备方法包括如下步骤：
（1）取新鲜鱼皮清洗，除杂；
（2）取清洗后的鱼皮原料用浓度为0.16-3.0mol/L的氢氧化钾溶液在0-20℃条件下浸泡1-20h，所加入的氢氧化钾溶液与鱼皮原料的体积重量比为10-20∶1，在浸泡过程中，每隔2-4h，更换浸泡用氢氧化钾溶液1-2次；浸泡完毕后，清洗，过滤；清洗后向鱼皮原料中加入有机溶剂浸泡2-6h，加清水，使鱼皮原料与有机溶剂的质量体积百分比为5-10％；
（3）取所述步骤（2）所得原料混合液，加入浓度为0.36-1.68mol/L的醋酸溶液在0-20℃的条件下进行溶胀处理12-36h，所加入的醋酸溶液溶液与原料混合液的体积重量比为10-15∶1；然后在0-30℃条件下冻结1-10h；冻结完毕后，加入适量的0.15-0.45mol/L的醋酸溶液进行打浆破碎，获得粒径2-4mm的颗粒料浆；
（4）向所述步骤（3）中的颗粒料浆中加入0.05-3.56mol/L的醋酸溶液进行提取，所加入的醋酸溶液与颗粒料浆的体积重量比为15-30∶1，提取温度0-25℃，提取时间为24-48h；提取完毕后，以60-80目纱网过滤，得提取液；向滤渣中加醋酸溶液，按上述操作重复提取1-2次，得提取液和滤渣，向提取液中加入1.5-2.5mol/L氯化钠溶液进行盐析沉淀，沉淀干燥后即得鱼皮胶原粉。
优选地，所述柠檬酸溶液的制备方法包括如下步骤：
（1）质料过滤除杂：制备橘汁，用压滤机压滤，对橘汁过滤除杂，得橘汁酸水；
（2）中和：把橘汁酸水加热至60-75℃，逐步向其掺加碳酸钙乳浆，持续加热2-3h，初温控制在5-8℃左右，最终可升高到90-100℃，至溶液呈青绿色时，即表明已完结中和，然后静置沉淀，所得沉淀即为柠檬酸钙；
（3）除盐：所得柠檬酸钙富含盐分，用清水洗刷，加热至60-70℃，重复2-3次，直至盐分除净停止，干燥得柠檬酸钙浆液，备用；
（4）酸解脱色：将柠檬酸钙浆液加热至60-70℃，掺加质量分数为20-30 %的盐酸，加热2-3小时，静置沉积，上层清液即为柠檬酸溶液，用3-5%活性炭脱色20-30min，则得柠檬酸溶液。
优选地，所述步骤（2）中鱼皮胶原粉溶解于0.2-0.6mol/L柠檬酸溶液中，溶解24-48h，制成2-6mg/mL的胶原溶液。
优选地，所述步骤（3）中离心条件为2000-2500r/min，离心时间为20-30min。
优选地，所述步骤（4）中的醋酸缓冲液为0.2-0.4mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液。
优选地，所述步骤（4）中的上清液与醋酸缓冲液体积比为2-3：1。
优选地，所述步骤（5）中的水浴温度为20-30℃，水浴时间为12-36h。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
（1）本发明探讨水产胶原自组装形成纤维的方法，通过本发明方法所得胶原纤维为丝状纤维，与深海鱼皮中天然存在的胶原纤维形态极其相似，在医用生物材料领域具有很高的应用前景；
（2）本发明采用柠檬酸溶液溶解鱼皮胶原蛋白，由于柠檬酸具有3个羧基，可同时与多个蛋白质多肽链的羟基脱水缩合，进而使多肽链的螺旋结构更加紧密牢固，形成的纤维横纹密而多，提高了纤维的性能。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1
本实施例提供的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，包括如下步骤：
（1）提取鱼皮胶原粉；
（2）将所述步骤（1）中的鱼皮胶原粉溶解于柠檬酸溶液中，所述鱼皮胶原粉溶解于0.6mol/L柠檬酸溶液中，溶解24h，制成6mg/mL的胶原溶液；
（3）对所述步骤（2）中的混合液进行离心，取上清液，离心条件为2000r/min，离心时间为30min；
（4）将所述步骤（3）中的上清液与醋酸缓冲液在冰浴中混合，搅拌均匀，调节溶液PH，所述醋酸缓冲液为0.2mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液，所述上清液与醋酸缓冲液体积比为3：1；
（5）将所述步骤（4）中的混合液在水浴锅中水浴，即得自组装体胶原纤维，所述水浴温度为20℃，水浴时间为36h。
其中，所述鱼皮胶原粉的制备方法包括如下步骤：
（1）取新鲜鱼皮清洗，除杂；
（2）取清洗后的鱼皮原料用浓度为0.16mol/L的氢氧化钾溶液在20℃条件下浸泡1h，所加入的氢氧化钾溶液与鱼皮原料的体积重量比为20∶1，在浸泡过程中，每隔2h，更换浸泡用氢氧化钾溶液2次；浸泡完毕后，清洗，过滤；清洗后向鱼皮原料中加入有机溶剂浸泡2h，加清水，使鱼皮原料与有机溶剂的质量体积百分比为10％；
（3）取所述步骤（2）所得原料混合液，加入浓度为0.36mol/L的醋酸溶液在20℃的条件下进行溶胀处理12h，所加入的醋酸溶液溶液与原料混合液的体积重量比为15∶1；然后在0℃条件下冻结10h；冻结完毕后，加入适量的0.15mol/L的醋酸溶液进行打浆破碎，获得粒径4mm的颗粒料浆；
（4）向所述步骤（3）中的颗粒料浆中加入0.05mol/L的醋酸溶液进行提取，所加入的醋酸溶液与颗粒料浆的体积重量比为30∶1，提取温度0℃，提取时间为48h；提取完毕后，以60目纱网过滤，得提取液；向滤渣中加醋酸溶液，按上述操作重复提取2次，得提取液和滤渣，向提取液中加入1.5mol/L氯化钠溶液进行盐析沉淀，沉淀干燥后即得鱼皮胶原粉。
其中，所述柠檬酸溶液的制备方法包括如下步骤：
（1）质料过滤除杂：制备橘汁，用压滤机压滤，对橘汁过滤除杂，得橘汁酸水；
（2）中和：把橘汁酸水加热至75℃，逐步向其掺加碳酸钙乳浆，持续加热2h，初温控制在8℃左右，最终可升高到90℃，至溶液呈青绿色时，即表明已完结中和，然后静置沉淀，所得沉淀即为柠檬酸钙；
（3）除盐：所得柠檬酸钙富含盐分，用清水洗刷，加热至70℃，重复2次，直至盐分除净停止，干燥得柠檬酸钙浆液，备用；
（4）酸解脱色：将柠檬酸钙浆液加热至70℃，掺加质量分数为20%的盐酸，加热3小时，静置沉积，上层清液即为柠檬酸溶液，用3%活性炭脱色30min，则得柠檬酸溶液。
实施例2
本实施例提供的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，包括如下步骤：
（1）提取鱼皮胶原粉；
（2）将所述步骤（1）中的鱼皮胶原粉溶解于柠檬酸溶液中，所述鱼皮胶原粉溶解于0.2mol/L柠檬酸溶液中，溶解48h，制成2mg/mL的胶原溶液；
（3）对所述步骤（2）中的混合液进行离心，取上清液，离心条件为2500r/min，离心时间为20min；
（4）将所述步骤（3）中的上清液与醋酸缓冲液在冰浴中混合，搅拌均匀，调节溶液PH，所述醋酸缓冲液为0.4mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液，所述上清液与醋酸缓冲液体积比为2：1；
（5）将所述步骤（4）中的混合液在水浴锅中水浴，即得自组装体胶原纤维，所述水浴温度为30℃，水浴时间为12h。
其中，所述鱼皮胶原粉的制备方法包括如下步骤：
（1）取新鲜鱼皮清洗，除杂；
（2）取清洗后的鱼皮原料用浓度为3.0mol/L的氢氧化钾溶液在0℃条件下浸泡20h，所加入的氢氧化钾溶液与鱼皮原料的体积重量比为10∶1，在浸泡过程中，每隔4h，更换浸泡用氢氧化钾溶液1次；浸泡完毕后，清洗，过滤；清洗后向鱼皮原料中加入有机溶剂浸泡6h，加清水，使鱼皮原料与有机溶剂的质量体积百分比为5％；
（3）取所述步骤（2）所得原料混合液，加入浓度为1.68mol/L的醋酸溶液在0℃的条件下进行溶胀处理36h，所加入的醋酸溶液溶液与原料混合液的体积重量比为10∶1；然后在30℃条件下冻结1h；冻结完毕后，加入适量的0.45mol/L的醋酸溶液进行打浆破碎，获得粒径2mm的颗粒料浆；
（4）向所述步骤（3）中的颗粒料浆中加入3.56mol/L的醋酸溶液进行提取，所加入的醋酸溶液与颗粒料浆的体积重量比为15∶1，提取温度25℃，提取时间为24h；提取完毕后，以80目纱网过滤，得提取液；向滤渣中加醋酸溶液，按上述操作重复提取1次，得提取液和滤渣，向提取液中加入2.5mol/L氯化钠溶液进行盐析沉淀，沉淀干燥后即得鱼皮胶原粉。
其中，所述柠檬酸溶液的制备方法包括如下步骤：
（1）质料过滤除杂：制备橘汁，用压滤机压滤，对橘汁过滤除杂，得橘汁酸水；
（2）中和：把橘汁酸水加热至60℃，逐步向其掺加碳酸钙乳浆，持续加热3h，初温控制在5℃左右，最终可升高到100℃，至溶液呈青绿色时，即表明已完结中和，然后静置沉淀，所得沉淀即为柠檬酸钙；
（3）除盐：所得柠檬酸钙富含盐分，用清水洗刷，加热至60℃，重复3次，直至盐分除净停止，干燥得柠檬酸钙浆液，备用；
（4）酸解脱色：将柠檬酸钙浆液加热至60℃，掺加质量分数为30 %的盐酸，加热2小时，静置沉积，上层清液即为柠檬酸溶液，用5%活性炭脱色20min，则得柠檬酸溶液。
实施例3
本实施例提供的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，包括如下步骤：
（1）提取鱼皮胶原粉；
（2）将所述步骤（1）中的鱼皮胶原粉溶解于柠檬酸溶液中，所述鱼皮胶原粉溶解于0.4mol/L柠檬酸溶液中，溶解40h，制成5mg/mL的胶原溶液；
（3）对所述步骤（2）中的混合液进行离心，取上清液，离心条件为2200r/min，离心时间为25min；
（4）将所述步骤（3）中的上清液与醋酸缓冲液在冰浴中混合，搅拌均匀，调节溶液PH，所述醋酸缓冲液为0.3mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液，所述上清液与醋酸缓冲液体积比为3：1；
（5）将所述步骤（4）中的混合液在水浴锅中水浴，即得自组装体胶原纤维，所述水浴温度为25℃，水浴时间为30h。
其中，所述鱼皮胶原粉的制备方法包括如下步骤：
（1）取新鲜鱼皮清洗，除杂；
（2）取清洗后的鱼皮原料用浓度为1.5mol/L的氢氧化钾溶液在15℃条件下浸泡15h，所加入的氢氧化钾溶液与鱼皮原料的体积重量比为15∶1，在浸泡过程中，每隔3h，更换浸泡用氢氧化钾溶液1次；浸泡完毕后，清洗，过滤；清洗后向鱼皮原料中加入有机溶剂浸泡4h，加清水，使鱼皮原料与有机溶剂的质量体积百分比为7％；
（3）取所述步骤（2）所得原料混合液，加入浓度为1.4mol/L的醋酸溶液在10℃的条件下进行溶胀处理30h，所加入的醋酸溶液溶液与原料混合液的体积重量比为13∶1；然后在20℃条件下冻结6h；冻结完毕后，加入适量的0.35mol/L的醋酸溶液进行打浆破碎，获得粒径3mm的颗粒料浆；
（4）向所述步骤（3）中的颗粒料浆中加入0.25mol/L的醋酸溶液进行提取，所加入的醋酸溶液与颗粒料浆的体积重量比为20∶1，提取温度20℃，提取时间为40h；提取完毕后，以70目纱网过滤，得提取液；向滤渣中加醋酸溶液，按上述操作重复提取1次，得提取液和滤渣，向提取液中加入2.0mol/L氯化钠溶液进行盐析沉淀，沉淀干燥后即得鱼皮胶原粉。
其中，所述柠檬酸溶液的制备方法包括如下步骤：
（1）质料过滤除杂：制备橘汁，用压滤机压滤，对橘汁过滤除杂，得橘汁酸水；
（2）中和：把橘汁酸水加热至65℃，逐步向其掺加碳酸钙乳浆，持续加热3h，初温控制在7℃左右，最终可升高到95℃，至溶液呈青绿色时，即表明已完结中和，然后静置沉淀，所得沉淀即为柠檬酸钙；
（3）除盐：所得柠檬酸钙富含盐分，用清水洗刷，加热至66℃，重复3次，直至盐分除净停止，干燥得柠檬酸钙浆液，备用；
（4）酸解脱色：将柠檬酸钙浆液加热至68℃，掺加质量分数为24%的盐酸，加热2小时，静置沉积，上层清液即为柠檬酸溶液，用4%活性炭脱色28min，则得柠檬酸溶液。
实施例4
本实施例提供的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，包括如下步骤：
（1）提取鱼皮胶原粉；
（2）将所述步骤（1）中的鱼皮胶原粉溶解于柠檬酸溶液中，所述鱼皮胶原粉溶解于0.3mol/L柠檬酸溶液中，溶解42h，制成5mg/mL的胶原溶液；
（3）对所述步骤（2）中的混合液进行离心，取上清液，离心条件为2100r/min，离心时间为22min；
（4）将所述步骤（3）中的上清液与醋酸缓冲液在冰浴中混合，搅拌均匀，调节溶液PH，所述醋酸缓冲液为0.3mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液，所述上清液与醋酸缓冲液体积比为2：1；
（5）将所述步骤（4）中的混合液在水浴锅中水浴，即得自组装体胶原纤维，所述水浴温度为21℃，水浴时间为17h。
其中，所述鱼皮胶原粉的制备方法包括如下步骤：
（1）取新鲜鱼皮清洗，除杂；
（2）取清洗后的鱼皮原料用浓度为1.65mol/L的氢氧化钾溶液在15℃条件下浸泡18h，所加入的氢氧化钾溶液与鱼皮原料的体积重量比为14∶1，在浸泡过程中，每隔2h，更换浸泡用氢氧化钾溶液2次；浸泡完毕后，清洗，过滤；清洗后向鱼皮原料中加入有机溶剂浸泡3h，加清水，使鱼皮原料与有机溶剂的质量体积百分比为6％；
（3）取所述步骤（2）所得原料混合液，加入浓度为0.78mol/L的醋酸溶液在14℃的条件下进行溶胀处理23h，所加入的醋酸溶液溶液与原料混合液的体积重量比为12∶1；然后在12℃条件下冻结3h；冻结完毕后，加入适量的0.35mol/L的醋酸溶液进行打浆破碎，获得粒径3mm的颗粒料浆；
（4）向所述步骤（3）中的颗粒料浆中加入2.56mol/L的醋酸溶液进行提取，所加入的醋酸溶液与颗粒料浆的体积重量比为19∶1，提取温度12℃，提取时间为33h；提取完毕后，以64目纱网过滤，得提取液；向滤渣中加醋酸溶液，按上述操作重复提取1次，得提取液和滤渣，向提取液中加入2.5mol/L氯化钠溶液进行盐析沉淀，沉淀干燥后即得鱼皮胶原粉。
其中，所述柠檬酸溶液的制备方法包括如下步骤：
（1）质料过滤除杂：制备橘汁，用压滤机压滤，对橘汁过滤除杂，得橘汁酸水；
（2）中和：把橘汁酸水加热至73℃，逐步向其掺加碳酸钙乳浆，持续加热3h，初温控制在6℃左右，最终可升高到99℃，至溶液呈青绿色时，即表明已完结中和，然后静置沉淀，所得沉淀即为柠檬酸钙；
（3）除盐：所得柠檬酸钙富含盐分，用清水洗刷，加热至61℃，重复3次，直至盐分除净停止，干燥得柠檬酸钙浆液，备用；
（4）酸解脱色：将柠檬酸钙浆液加热至63℃，掺加质量分数为23%的盐酸，加热3小时，静置沉积，上层清液即为柠檬酸溶液，用4%活性炭脱色26min，则得柠檬酸溶液。
实施例5
本实施例提供的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，包括如下步骤：
（1）提取鱼皮胶原粉；
（2）将所述步骤（1）中的鱼皮胶原粉溶解于柠檬酸溶液中，所述鱼皮胶原粉溶解于0.4mol/L柠檬酸溶液中，溶解46h，制成5mg/mL的胶原溶液；
（3）对所述步骤（2）中的混合液进行离心，取上清液，离心条件为2400r/min，离心时间为23min；
（4）将所述步骤（3）中的上清液与醋酸缓冲液在冰浴中混合，搅拌均匀，调节溶液PH，所述醋酸缓冲液为0.3mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液，所述上清液与醋酸缓冲液体积比为2：1；
（5）将所述步骤（4）中的混合液在水浴锅中水浴，即得自组装体胶原纤维，所述水浴温度为27℃，水浴时间为23h。
其中，所述鱼皮胶原粉的制备方法包括如下步骤：
（1）取新鲜鱼皮清洗，除杂；
（2）取清洗后的鱼皮原料用浓度为0.22mol/L的氢氧化钾溶液在13℃条件下浸泡5h，所加入的氢氧化钾溶液与鱼皮原料的体积重量比为17∶1，在浸泡过程中，每隔3h，更换浸泡用氢氧化钾溶液2次；浸泡完毕后，清洗，过滤；清洗后向鱼皮原料中加入有机溶剂浸泡3h，加清水，使鱼皮原料与有机溶剂的质量体积百分比为8％；
（3）取所述步骤（2）所得原料混合液，加入浓度为1.48mol/L的醋酸溶液在13℃的条件下进行溶胀处理19h，所加入的醋酸溶液溶液与原料混合液的体积重量比为12∶1；然后在25℃条件下冻结9h；冻结完毕后，加入适量的0.25mol/L的醋酸溶液进行打浆破碎，获得粒径3mm的颗粒料浆；
（4）向所述步骤（3）中的颗粒料浆中加入2.56mol/L的醋酸溶液进行提取，所加入的醋酸溶液与颗粒料浆的体积重量比为17∶1，提取温度13℃，提取时间为37h；提取完毕后，以63目纱网过滤，得提取液；向滤渣中加醋酸溶液，按上述操作重复提取1次，得提取液和滤渣，向提取液中加入1.9mol/L氯化钠溶液进行盐析沉淀，沉淀干燥后即得鱼皮胶原粉。
其中，所述柠檬酸溶液的制备方法包括如下步骤：
（1）质料过滤除杂：制备橘汁，用压滤机压滤，对橘汁过滤除杂，得橘汁酸水；
（2）中和：把橘汁酸水加热至65℃，逐步向其掺加碳酸钙乳浆，持续加热3h，初温控制在6℃左右，最终可升高到98℃，至溶液呈青绿色时，即表明已完结中和，然后静置沉淀，所得沉淀即为柠檬酸钙；
（3）除盐：所得柠檬酸钙富含盐分，用清水洗刷，加热至63℃，重复3次，直至盐分除净停止，干燥得柠檬酸钙浆液，备用；
（4）酸解脱色：将柠檬酸钙浆液加热至67℃，掺加质量分数为22 %的盐酸，加热2小时，静置沉积，上层清液即为柠檬酸溶液，用4%活性炭脱色24min，则得柠檬酸溶液。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。
Claims (8)
1.一种鱼皮胶原自组装成纤维的方法，其特征在于：所述鱼皮胶原自组装成纤维的方法包括如下步骤：
提取鱼皮胶原粉；
将所述步骤（1）中的鱼皮胶原粉溶解于柠檬酸溶液中；
对所述步骤（2）中的混合液进行离心，取上清液；
将所述步骤（3）中的上清液与醋酸缓冲液在冰浴中混合，搅拌均匀，调节溶液PH；
将所述步骤（4）中的混合液在水浴锅中水浴，即得自组装体胶原纤维。
2.根据权利要求1所述的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，其特征在于：所述鱼皮胶原粉的制备方法包括如下步骤：
（1）取新鲜鱼皮清洗，除杂；
（2）取清洗后的鱼皮原料用浓度为0.16-3.0mol/L的氢氧化钾溶液在0-20℃条件下浸泡1-20h，所加入的氢氧化钾溶液与鱼皮原料的体积重量比为10-20∶1，在浸泡过程中，每隔2-4h，更换浸泡用氢氧化钾溶液1-2次；浸泡完毕后，清洗，过滤；清洗后向鱼皮原料中加入有机溶剂浸泡2-6h，加清水，使鱼皮原料与有机溶剂的质量体积百分比为5-10％；
（3）取所述步骤（2）所得原料混合液，加入浓度为0.36-1.68mol/L的醋酸溶液在0-20℃的条件下进行溶胀处理12-36h，所加入的醋酸溶液溶液与原料混合液的体积重量比为10-15∶1；然后在0-30℃条件下冻结1-10h；冻结完毕后，加入适量的0.15-0.45mol/L的醋酸溶液进行打浆破碎，获得粒径2-4mm的颗粒料浆；
（4）向所述步骤（3）中的颗粒料浆中加入0.05-3.56mol/L的醋酸溶液进行提取，所加入的醋酸溶液与颗粒料浆的体积重量比为15-30∶1，提取温度0-25℃，提取时间为24-48h；提取完毕后，以60-80目纱网过滤，得提取液；向滤渣中加醋酸溶液，按上述操作重复提取1-2次，得提取液和滤渣，向提取液中加入1.5-2.5mol/L氯化钠溶液进行盐析沉淀，沉淀干燥后即得鱼皮胶原粉。
3.根据权利要求1所述的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，其特征在于：所述柠檬酸溶液的制备方法包括如下步骤：
（1）质料过滤除杂：制备橘汁，用压滤机压滤，对橘汁过滤除杂，得橘汁酸水；
（2）中和：把所述步骤（1）中的橘汁酸水加热至60-75℃，逐步向其掺加碳酸钙乳浆，持续加热2-3h，初温控制在5-8℃左右，最终可升高到90-100℃，至溶液呈青绿色时，即表明已完结中和，然后静置沉淀，所得沉淀即为柠檬酸钙；
（3）除盐：所得柠檬酸钙富含盐分，用清水洗刷，加热至60-70℃，重复2-3次，直至盐分除净停止，干燥得柠檬酸钙浆液，备用；
（4）酸解脱色：将柠檬酸钙浆液加热至60-70℃，掺加质量分数为20-30 %的盐酸，加热2-3小时，静置沉积，上层清液即为柠檬酸溶液，用3-5%活性炭脱色20-30min，则得柠檬酸溶液。
4.根据权利要求1所述的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，其特征在于：所述步骤（2）中鱼皮胶原粉溶解于0.2-0.6mol/L柠檬酸溶液中，溶解24-48h，制成2-6mg/mL的胶原溶液。
5.根据权利要求1所述的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，其特征在于：所述步骤（3）中离心条件为2000-2500r/min，离心时间为20-30min。
6.根据权利要求1所述的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，其特征在于：所述步骤（4）中的醋酸缓冲液为0.2-0.4mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液。
7.根据权利要求1所述的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，其特征在于：所述步骤（4）中的上清液与醋酸缓冲液体积比为2-3：1。
8.根据权利要求1所述的鱼皮胶原自组装成纤维的方法，其特征在于：所述步骤（5）中的水浴温度为20-30℃，水浴时间为12-36h。
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