CN106771211A - 一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡 - Google Patents

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张根义
胡彬
张进
吴念绮
周合
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Abstract

本发明公开了一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是8‑40μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为0.3‑20%的海藻糖及5‑20mL胶体金溶液的混合物。牛奶的处理方法是：准确称取1‑3g待测的牛奶于离心管中；加入1‑4mL 40‑80mM、pH7.0 Tris‑HCl样品抽提液，涡动至组织完全分散；经100℃水浴8‑30分钟，冷却至室温，取清亮部分作为测试样品。或将牛奶在2000‑10000r/min的转速下离心4‑20min，过滤，取上清液作为测试样品。本发明大大简化了检验程序，缩短了检测时间，可为食品企业质量控制，用于食品安全监管部门对细菌性食物检测。

Description

一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡
技术领域
本发明涉及食品检测技术领域，具体是一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡。
背景技术
金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus ) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因此，食品受到污染的机会很多。所以目前世界各国都把金黄色葡萄球菌列为食品卫生的法定检测项目。常规方法检测食品中金黄色葡萄球菌首先要根据样品进行富集培养，使被检测金黄色葡萄球菌的数量在样品中达到可检测的水平，然后才能根据食品微生物研究法进行金黄色葡萄球菌的分离，形态特征观察及一系列生理生化特性鉴定，通常这种检测时间需要5-7天，操作繁琐、检测时间长，不能满足食品卫生监管部门对食物中毒病原菌的快速检测、预警及应对突发公共卫生事件的需要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是8-40μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为0.3-20%的海藻糖及5-20mL胶体金溶液的混合物。
作为本发明进一步的方案：NC膜上设置有控制线和检测线。
作为本发明进一步的方案：NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
作为本发明进一步的方案：金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是10-20μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为0.5-10%的海藻糖及8-15mL胶体金溶液的混合物。
作为本发明进一步的方案：牛奶的处理方法是：准确称取1-3g待测的牛奶于离心管中；加入1-4mL 40-80mM、pH7.0 Tris-HCl样品抽提液，涡动至组织完全分散；经100℃水浴8-30分钟，冷却至室温，取清亮部分作为测试样品。
作为本发明进一步的方案：牛奶的处理方法是：在2000-10000r/min的转速下离心4-20min，过滤，取上清液作为测试样品。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提供的金黄色葡萄球菌免疫胶体金检测卡，大大简化了检验程序，缩短了检测时间，可为食品企业质量控制，应用于工商、卫生、质监等食品安全监管部门现场执法、日常监管及应对细菌性食物检测领域。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明实施例中，一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是8μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为0.3%的海藻糖及5mL胶体金溶液的混合物。NC膜上设置有控制线和检测线。NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
牛奶的处理方法是：准确称取1g待测的牛奶于离心管中；加入1mL 40mM、pH7.0Tris-HCl样品抽提液，涡动至组织完全分散；经100℃水浴8分钟，冷却至室温，取清亮部分作为测试样品。
实施例2
本发明实施例中，一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是40μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为20%的海藻糖及20mL胶体金溶液的混合物。NC膜上设置有控制线和检测线。NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
牛奶的处理方法是：准确称取3g待测的牛奶于离心管中；加入4mL 80mM、pH7.0Tris-HCl样品抽提液，涡动至组织完全分散；经100℃水浴30分钟，冷却至室温，取清亮部分作为测试样品。
实施例3
本发明实施例中，一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是10μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为0.5%的海藻糖及8mL胶体金溶液的混合物。NC膜上设置有控制线和检测线。NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
牛奶的处理方法是：在2000r/min的转速下离心4min，过滤，取上清液作为测试样品。
实施例4
本发明实施例中，一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是20μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为10%的海藻糖及15mL胶体金溶液的混合物。NC膜上设置有控制线和检测线。NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
牛奶的处理方法是：在10000r/min的转速下离心20min，过滤，取上清液作为测试样品。
实施例5
本发明实施例中，一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是12μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为1%的海藻糖及10mL胶体金溶液的混合物。NC膜上设置有控制线和检测线。NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
牛奶的处理方法是：在3000r/min的转速下离心15min，过滤，取上清液作为测试样品。
实施例6
本发明实施例中，一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是18μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为8%的海藻糖及12mL胶体金溶液的混合物。NC膜上设置有控制线和检测线。NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
牛奶的处理方法是：在8000r/min的转速下离心10min，过滤，取上清液作为测试样品。
实施例7
本发明实施例中，一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是15μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为5%的海藻糖及8mL胶体金溶液的混合物。NC膜上设置有控制线和检测线。NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
牛奶的处理方法是：准确称取1g待测的牛奶于离心管中；加入2mL 50mM、pH7.0Tris-HCl样品抽提液，涡动至组织完全分散；经100℃水浴15分钟，冷却至室温，取清亮部分作为测试样品。
实施例8
本发明实施例中，一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是30μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为14%的海藻糖及15mL胶体金溶液的混合物。NC膜上设置有控制线和检测线。NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
牛奶的处理方法是：准确称取2g待测的牛奶于离心管中；加入3mL 70mM、pH7.0Tris-HCl样品抽提液，涡动至组织完全分散；经100℃水浴20分钟，冷却至室温，取清亮部分作为测试样品。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (6)

1.作为一种检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，包括样品垫、金标抗体结合垫、NC膜与吸水纸，金其特征在于，标抗体结合垫上滴加的金标抗体是8-40μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为0.3-20%的海藻糖及5-20mL胶体金溶液的混合物。
2.根据权利要求1所述的检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，其特征在于，NC膜上设置有控制线和检测线。
3.根据权利要求1所述的检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，其特征在于，NC膜上包被抗体金黄色葡萄球菌。
4.根据权利要求1所述的检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，其特征在于，金标抗体结合垫上滴加的金标抗体是10-20μg/ml金黄色葡萄球菌单克隆抗体、质量浓度为0.5-10%的海藻糖及8-15mL胶体金溶液的混合物。
5.根据权利要求1所述的检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，其特征在于，牛奶的处理方法是：准确称取1-3g待测的牛奶于离心管中；加入1-4mL 40-80mM、pH7.0 Tris-HCl样品抽提液，涡动至组织完全分散；经100℃水浴8-30分钟，冷却至室温，取清亮部分作为测试样品。
6.根据权利要求1所述的检测牛奶中金黄色葡萄球菌的检测卡，其特征在于，牛奶的处理方法是：在2000-10000r/min的转速下离心4-20min，过滤，取上清液测试样品。
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