CN106748566A - 组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥及制备方法 - Google Patents

Abstract

一种组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥及制备方法，通过微生物发酵形成全水溶有机叶面肥和固体有机肥，复配多种有益微生物和多种微量元素后，可以起到改善土壤微生态系统，降低土壤病原微生物基数，提高植物抗逆性、病虫害抗性和改善葡萄果实形态的目的，配合田间管理，用于葡萄酸腐病生物综合防治。

Description

组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥及制备方法

技术领域

本发明涉及的是一种葡萄种植领域的技术，具体是一种组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥及制备方法。

背景技术

葡萄酸腐病，近几年在我国已成为葡萄重要的病害之一，造成果实腐烂严重减产；烂果汁液流失，也使无病果粒的含糖量降低，品质下降；鲜食葡萄酸腐病严重到一定程度，即使是无病果粒，也不能食用；酿酒葡萄受酸腐病危害后，受害果粒腐烂后，只留下果皮和种子并干枯，使葡萄失去酿酒价值。腐烂汁液外流会造成霉菌滋生，进而影响无病果粒发酵，甚至造成发酵失败。酸腐病是真菌、细菌和醋蝇联合危害，醋蝇是酸腐病的传播媒介，繁殖速度很快，极易产生抗药性，因此，防治非常困难。

发明内容

本发明针对现有技术功能较为单一且无法全面解决防治葡萄酸腐病的缺陷，提出一种组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥及制备方法，通过改良土壤微生态、降低果园有害微生物群体基数、提高葡萄抗病性等综合调控措施，达到防治葡萄酸腐病的目的。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明涉及一种组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥的制备方法，通过原料发酵、水解处理、固液分离以及复配制取得到。

所述的原料发酵是指：采用市售的赤霉菌(Gibberella fujikuroi)对以葡萄糖、花生饼粉、玉米粉、蔗糖、MgSO₄·7H₂O以及KH₂PO₄组成的发酵底物进行有氧发酵后得到。

所述的发酵底物，其组分及质量百分比含量具体为：葡萄糖0.5-3.0％，花生饼粉0.5-3.0％、玉米粉0.5-3％、蔗糖0.5-6％、MgSO₄·7H₂O 0.1-0.5％、KH₂PO₄ 0.1-0.5％、水84-95％。

所述的有氧发酵，采用市售的赤霉菌(Gibberella fujikuroi)为发酵菌株，25-30℃发酵50-200h，在线监测发酵物种赤霉素浓度到达50-100ppm时停止，进一步优选发酵160h时，发酵液中赤霉素含量低于150ppm。

所述的水解是指：发酵结束后添加α-淀粉酶用于水解发酵液中残留的多糖类物质，然后再添加木瓜蛋白酶用于充分水解发酵液中的蛋白质。

所述的α-淀粉酶的用量优选为0.1-5mg/L。

所述的木瓜蛋白酶的用量优选为0.1-5mg/L。

所述的固液分离是指：发酵液沉淀后，取上清液制取全水溶有机叶面肥，发酵液下部沉淀用于制取固体有机肥。

所述的上清液，优选经浓缩至原有浓度的10-15％。

所述的沉淀，优选经干燥到含水量10-15％。

所述的复配是指：将微生物菌群和微量元素组合加入干制的发酵液沉淀物中混匀，其中：微生物菌群是指：采用市售的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、圆褐固氮菌(Azotobacterchroococcum)、乳糖细黄链霉菌(Streptomyces microflavus var.lactosus)和腊样芽孢杆菌(Bacillus cereus)，其中每种在混合群落中数量为10-20％。微生物总重量为干制发酵液沉淀物重量的0.5-2.0％，且总活菌数大于2亿株/g；微量元素组合是指：Cu 500-1000ppm、Fe 200-500ppm、Zn 100-300ppm、Ca 50-100ppm、Mn10-100ppm、Mg 5-20ppm、B 5-20ppm。

本发明涉及上述方法制备得到的组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥，包括液态形式有机肥和固体形式有机肥两个组分，其中液态有机肥的组分及质量百分比含量为：氨基酸含量5-8％，还原糖含量1-2％，赤霉素含量500-1000ppm，水分90-94％；固态有机肥的组分及质量百分比含量为：有机质81.8-89.9％，微量元素0.1-0.2％，水分10-18％。

本发明涉及上述组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥的应用，通过将液态形式有机肥稀释后喷施于葡萄叶面或将固体形式有机肥直接置于土壤中得以实现。

所述的应用，优选在葡萄挂果期全程悬挂灭蝇灯以进一步提高防治葡萄酸腐病的效果。

所述的稀释，即加水稀释60-150倍。

所述的喷施是指：于葡萄生长周期内喷施2次。第一次为采收后1-2个月内，入冬前叶面均匀喷施，第二次为春季新叶长出后1-3周内喷施。喷施全水溶有机叶面肥需在阴天或晴天早晚，避免强光高温天气喷施。如露天栽培葡萄喷施后12小时内遇雨，需补喷一次。

所述的固体形式的有机肥，通过在秋季葡萄整枝根施基肥时，代替传统农家肥和化肥，直接施入土壤中得以实现，其用量优选为50-200kg/亩。

技术效果

与现有技术相比，本发明侧重于病虫害生物综合防治，应用了土壤微生态修复、植物抗逆性增强的联合手段。发酵产物形成的固体有机肥中包含了多种具有固氮、解钾、解磷、抑制病源微生物的菌株，作为土壤微生态系统改造材料，可将土壤中原有的病原微生物基数显著降低，减少病原菌的感染来源，同时又能为植物提供生长期内充足的速效、缓效肥料和微量元素。通过发酵产生的全水溶有机叶面肥中的多糖类物质，不但可以作为植物早期生长的营养物质，而且可以显著提高植物的抗逆性和病虫害抗性。全水溶有机叶面肥中极微量的植物激素不仅可以弥补早春时期植物激素含量不足的问题，而且可以促使葡萄花梗延长，起到疏果的作用，减少葡萄颗粒之间互相挤压造成破裂，进而引发的酸腐病。通过上述综合防治手段，可以大大降低葡萄酸腐病的田间发病率。

具体实施方式

实施例1

本实施例涉及有机肥的制备方法，包括发酵、水解、分离、浓缩/干燥、复配步骤，具体如下：

1)以葡萄糖1.0％，花生饼粉1.0％，玉米粉1％，蔗糖5％，MgSO₄·7H₂O 0.1％，KH₂PO₄0.2％为发酵底物，以赤霉菌为发酵菌株，28℃±1℃发酵155h，在线监测发酵物种赤霉素浓度到达65ppm时停止。

2)发酵结束后添加α-淀粉酶至1mg/L水解发酵液中残留的多糖类物质5h，再添加木瓜蛋白酶至2mg/L，充分水解发酵液中的蛋白质5h。

3)水解完毕后，沉淀24h，待发酵液分层后，抽取上清液，刮板浓缩至原体积的1/10，即可得到全水溶有机叶面肥。

4)水解完毕后，沉淀24h，取下层沉淀物质，喷雾干燥到水分含量12％，用于制作固体有机肥。

5)枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、圆褐固氮菌、乳糖细黄链霉菌、腊样芽孢杆菌多种微生物发酵至10亿活菌/g±10％，按每种12.5％比例配置，加入干制发酵液沉淀物中。混合菌与干制发酵液沉淀重量比为1:99。

6)在上述混合菌与干制发酵液沉淀物种，加入多种微量元素，使其浓度分别达到：Cu 500-1000ppm、Fe 200-500ppm、Zn 100-300ppm、Ca 50-100ppm、Mn 10-100ppm、Mg 5-20ppm、B 5-20ppm。配比混匀后形成固体有机肥。

上述方法制备得到的有机肥的组分含量具体为：液态有机肥中，氨基酸含量6.72％，还原糖含量1.38％，赤霉素含量685ppm，水分91.83％；固态有机肥中，有机质88.9％，水分11.1％。其中，有机质中氨基酸含量22.66％(天冬氨酸3.94％，谷氨酸3.32％，丝氨酸1.80％，丙氨酸1.76％，苏氨酸1.46％，赖氨酸3.00％，缬氨酸0.96％，亮氨酸0.96％，甘氨酸0.86％，脯氨酸0.86％，精氨酸0.82％，苯丙氨酸0.76％，异亮氨酸0.66％，酪氨酸0.62％，组氨酸0.50％，胱氨酸0.26％，蛋氨酸0.12％)，铜678ppm，铁360ppm，锌160ppm，钙88ppm，锰48ppm，镁8.3ppm，硼7.8ppm。

实施例2

本实施例涉及上述有机肥的实施方法，包括：

1)固体有机肥施用方法为：秋季葡萄整枝根施基肥时，代替传统农家肥和化肥，直接施入土壤中。用量为100kg/亩。

2)本实施例于浙江省嘉兴市大桥镇绿江葡萄合作社施用固体有机肥和全水溶有机叶面肥后，于2015年11月固体有机肥使用60d后，检测土壤中醋酸杆菌数量为5×10⁶个/g，相比对照组250×10⁶个/g，酸腐病致病菌基数大大降低。

3)全水溶有机叶面肥使用时加水稀释80倍，于葡萄生长周期内喷施2次。第一次为采收后第50d，叶面均匀喷施，第二次为春季新叶长出后2周喷施。喷施全水溶有机叶面肥需在阴天或晴天早晚，避免强光高温天气喷施。如露天栽培葡萄喷施后12小时内遇雨，需补喷一次。

4)本实施例于浙江省嘉兴市大桥镇绿江葡萄合作社施用固体有机肥和全水溶有机叶面肥后，于2016年8月测定相同叶位的葡萄叶面积、叶绿素含量、苯丙氨酸解氨酶活性、单穗重、含糖量、裂果率等生理生化指标，其中：处理组叶面积358.66±29.28cm²，叶绿素含量3.39±0.21mg.g^-1，显著高于对照组叶面积265.32±15.69cm²，叶绿素含量2.46±0.17mg.g^-1。处理组的苯丙氨酸解氨酶活性3.11±0.37U.g-¹.h^-1，显著高于对照组的0.32±0.07U.g^-1.h^-1；单穗重922±84g，显著高于对照组715±51g；含糖量16.47±0.19％，显著高于对照组14.58±0.14％；裂果率5.9％，显著低于对照组65.3％。

5)组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥在使用时，需配合的田间定期检查摘除病果，同时悬挂灭蝇灯诱杀蝇类。

上述具体实施可由本领域技术人员在不背离本发明原理和宗旨的前提下以不同的方式对其进行局部调整，本发明的保护范围以权利要求书为准且不由上述具体实施所限，在其范围内的各个实现方案均受本发明之约束。

Claims (10)

1.一种组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥的制备方法，其特征在于，通过原料发酵、水解处理、固液分离以及复配制取得到：

所述的原料发酵是指：采用赤霉菌(Gibberella fujikuroi)对以葡萄糖、花生饼粉、玉米粉、蔗糖、MgSO₄·7H₂O以及KH₂PO₄组成的发酵底物进行有氧发酵后得到；

所述的水解是指：发酵结束后添加α-淀粉酶用于水解发酵液中残留的多糖类物质，然后再添加木瓜蛋白酶用于充分水解发酵液中的蛋白质；

所述的固液分离是指：发酵液沉淀后，取上清液制取全水溶有机叶面肥，发酵液下部沉淀用于制取固体有机肥；

所述的复配是指：将微生物菌群和微量元素组合加入干制的发酵液沉淀物中混匀。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述的发酵底物，其组分及质量百分比含量具体为：葡萄糖0.5-3.0％，花生饼粉0.5-3.0％、玉米粉0.5-3％、蔗糖0.5-6％、MgSO₄·7H₂O0.1-0.5％、KH₂PO₄ 0.1-0.5％、水84-95％。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述的的有氧发酵，采用市售的赤霉菌为发酵菌株，25-30℃发酵50-200h，在线监测发酵物种赤霉素浓度到达50-100ppm时停止，进一步发酵160h时，发酵液中赤霉素含量低于150ppm。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述的α-淀粉酶的用量为0.1-5mg/L；所述的木瓜蛋白酶的用量为0.1-5mg/L。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述的上清液，经浓缩至原有浓度的10-15％；所述的沉淀，经干燥到含水量10-15％。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述的微生物菌群是指：采用市售的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、圆褐固氮菌(Azotobacter chroococcum)、乳糖细黄链霉菌(Streptomyces microflavus var.lactosus)和腊样芽孢杆菌(Bacillus cereus)，其中每种在混合群落中数量为10-20％。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述的微量元素组合是指：Cu 500-1000ppm、Fe 200-500ppm、Zn 100-300ppm、Ca 50-100ppm、Mn 10-100ppm、Mg 5-20ppm、B 5-20ppm。

8.一种基于权利要求1～7中任一所述方法制备得到的组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥，其特征在于，包括液态形式有机肥和固体形式有机肥，其中液态有机肥的组分及质量百分比含量为：氨基酸含量5-8％，还原糖含量1-2％，赤霉素含量500-1000ppm，水分90-94％；固态有机肥的组分及质量百分比含量为：有机质81.8-89.9％，微量元素0.1-0.2％，水分10-18％。

9.一种基于上述权利要求所述组合式葡萄酸腐病防治微生物有机肥的应用，其特征在于，通过将液态形式有机肥稀释后喷施于葡萄叶面，同时配合将固体形式有机肥直接置于土壤中得以实现。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征是，所述的稀释，即加水稀释60-150倍；所述的固体形式的有机肥，通过在秋季葡萄整枝根施基肥时，代替传统农家肥和化肥，直接施入土壤中得以实现，其用量为50-200kg/亩。