CN106729414B

CN106729414B - 提高运动机能的药物组合物及其制备方法、用途

Info

Publication number: CN106729414B
Application number: CN201611259636.3A
Authority: CN
Inventors: 陈宁; 彭晓庐
Original assignee: Wuhan Sports University
Current assignee: Wuhan Sports University
Priority date: 2016-12-30
Filing date: 2016-12-30
Publication date: 2020-04-17
Anticipated expiration: 2036-12-30
Also published as: CN106729414A

Abstract

本发明公开了提高运动机能的药物组合物及其制备方法、用途。本发明的药物组合物，其原料按照质量份包含15～30份假马齿苋、10～20份水飞蓟、10～30份人参、20～50份玛咖、5～15份姜黄和5～15份绿茶提取物。本发明的提高运动机能的药物组合物，其原料按照质量份包含假马齿苋、水飞蓟、人参、玛咖、姜黄和绿茶提取物，其采用特定配比，通过激活Nrf2通路，增强小鼠抗炎、抗氧化能力，消除运动性疲劳从而提高运动机能的作用。另外，本发明的药物组合物由于采用中药成分，其副作用较小。

Description

提高运动机能的药物组合物及其制备方法、用途

技术领域

本发明涉及运动辅助药物的技术领域，具体而言，涉及提高运动机能的药物组合物及其制备方法、用途。

背景技术

如何提高运动能力一直是体育界的研究热点，而运动性疲劳的恢复与提高运动能力又有着密切的关系。运动性疲劳的产生机制十分复杂，它是多种因素相互作用、相互影响的结果，氧自由基—脂质过氧化理论就是其中之一。

现有技术中，提高运动机能的药物有“兴奋剂”或类似药物，而这些药物虽然能一定程度的提高运动机能，但存在对人体的刺激性较大的副作用，在现代竞技体育项目中被列为禁用药物。

发明内容

有鉴于此，本发明一方面在于提供一种提高运动机能的药物组合物，该药物组合物能明显提高运动机能，无明显副作用。

一种提高运动机能的药物组合物，其原料按照质量份包含15～30份假马齿苋、10～20份水飞蓟、10～30份人参、20～50份玛咖、5～15份姜黄和5～15份绿茶提取物。

进一步地，所述假马齿苋的质量份为22份。

进一步地，所述水飞蓟的质量份为15份。

进一步地，所述人参的质量份为20份。

进一步地，所述玛咖的质量份为35份。

进一步地，所述姜黄的质量份为10份。

进一步地，所述绿茶提取物的质量份为10份。

本发明另一方面在于提供一种药物组合物的制备方法，该制备方法所获得的药物组合物能明显提高运动机能，无明显副作用。

一种如上述药物组合物的制备方法，将所述原料混合而成。

进一步地，所述混合前还包括将各原料进行粉碎、干燥。

一种如上述药物组合物的用途，其用作增强小鼠抗炎、增强抗氧化能力、延缓运动性疲劳。

本发明的提高运动机能的药物组合物，其原料按照质量份包含假马齿苋、水飞蓟、人参、玛咖、姜黄和绿茶提取物，其采用特定配比，通过激活Nrf2通路，增强小鼠抗炎、抗氧化能力，消除运动性疲劳从而提高运动机能的作用。另外，本发明的药物组合物由于采用中药成分，其副作用较小。

附图说明

图1为小鼠游泳力竭时间的评价结果曲线图；

图2为小鼠血乳酸(Bla)的评价结果曲线图；

图3为小鼠肝糖原含量的评价结果曲线图；

图4为小鼠血清SOD、MDA的评价结果曲线图；

图5为小鼠血清IL-1β和IL-6含量的评价结果曲线图；

图6为小鼠氧化应激相关信号蛋白表达的评价结果曲线图。

具体实施方式

除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。

如本文所用之术语：

“由……制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。

连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由……组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。

当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。

“质量份”指表示多个组分的质量比例关系的基本计量单位，1份可表示任意的单位质量，如可以表示为1g，也可表示2.689g等。假如我们说A组分的质量份为a份，B组分的质量份为b份，则表示A组分的质量和B组分的质量之比a：b。或者，表示A组分的质量为aK，B组分的质量为bK(K为任意数，表示倍数因子)。不可误解的是，与质量分数不同的是，所有组分的质量份之和并不受限于100份之限制。

“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)；

此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。

本发明的提高运动机能的药物组合物，其原料按照质量份包含15～30份假马齿苋、10～20份水飞蓟、10～30份人参、20～50份玛咖、5～15份姜黄和5～15份绿茶提取物。具体地，假马齿苋的质量份可以为15份、15.5份、16份、18份、22份、26份、28份、29份或30份等，优选为22份；水飞蓟的质量份可以为10份、11份、13份、15份、18份、19份或20份等，优选为15份；人参的质量份可以为10份、11份、15份、20份、25份、28份、29份或30份等，优选为20份；玛咖的质量可以为20份、22份、24份、25份、30份、35份、40份、45份、48份或50份等，优选为35份；姜黄的质量份可以为5份、6份、10份、13份、14份或15份等，优选为10份；绿茶提取物的质量份可以为5份、6份、10份、13份、14份或15份等，优选为10份。

作为本发明的假马齿苋，可以在镇静抗焦虑抗癫痫，提高学习记忆能力，能抗炎抗氧化在中枢神经系统中，提高抗疲劳提高运动能力。

上述水飞蓟，是菊科水飞蓟属草本植物，其有效成分主要为水飞蓟宾，作为本发明的水飞蓟，其对于乳腺癌、前列腺癌以及肺癌都有一定的作用。另外，它在保护肝细胞、降血脂等方面的功效也备受关注。水飞蓟可以促进糖原合成方面的能力。

上述，人参是茄科睡茄属植物。作为本发明的人参，其因含有活性成分睡茄内酯类化合物而具有抗氧化、提高免疫力以及降血脂等功效。

作为本发明的玛咖，其因含有玛咖多糖而具有显著的抗氧化作用，充分证明了玛咖具有清除自由基，保护细胞免受氧化的作用；同时，玛咖中含有均衡的营养物质和活性成分支链氨基酸、植物类固醇、甾醇等物质,对增强肌肉耐力和力量，抵抗运动性疲劳，减少肌肉分解和运动性贫血具有显著的功效。

上述姜黄属，芭蕉目，姜科、姜黄属多年生草本植物。作为本发明的从其根茎中提取的姜黄素具有多方面的作用，如抗炎抗氧化、抗肿瘤等作用。

作为本发明的绿茶提取物，其中最主要的成分是茶多酚，它是20多种多酚类物质的总称，主要包括儿茶素、黄酮类、花青素和酚酸等4大类物质组成。它的主要功效包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤、延缓衰老等。

本发明的药物组合物的制备方法，将所述原料混合而成。

上述制备方法中，混合前还包括将各原料进行粉碎。粉碎的方式可采用本领域公知的技术，于此不再详述。为了使得粉碎的粒度更小，可在粉碎之前将原料作干燥处理，干燥的方式可以为风干或自然晾晒等。

以上未述及之处适用于现有技术。

实施例1

步骤一、配比原料：按照质量份包含15份假马齿苋、10份水飞蓟、10～份人参、20份玛咖、5份姜黄和5份绿茶提取物。

步骤二、将各原料在粉碎、干燥后经充分混合而成。

实施例2

步骤一、配比原料：按照质量份包含30份假马齿苋、20份水飞蓟、30份人参、50份玛咖、15份姜黄和15份绿茶提取物。

步骤二、将各原料在粉碎、干燥后经充分混合而成。

实施例3

步骤一、配比原料：按照质量份包含15份假马齿苋、20份水飞蓟、30份人参、20份玛咖、5份姜黄和15份绿茶提取物。

步骤二、将各原料在粉碎、干燥后经充分混合而成。

实施例4

步骤一、配比原料：按照质量份包含30份假马齿苋、10份水飞蓟、10份人参、50份玛咖、15份姜黄和5份绿茶提取物。

步骤二、将各原料在粉碎、干燥后经充分混合而成。

实施例5

步骤一、配比原料：按照质量份包含22份假马齿苋、15份水飞蓟、20份人参、35份玛咖、10份姜黄和10份绿茶提取物。

步骤二、将各原料在粉碎、干燥后经充分混合而成。

评价方法：

一、评价前准备：雄性昆明小鼠60只，8周龄，购自湖北省实验动物研究中心，许可证号SCXK(鄂)2008-0005，每笼5只，分笼饲养，饲养期间饲料充足，不限饮水，室温25℃左右，适应环境7天后开始实验。

将所有昆明小鼠随机分为4组，分别为安静对照组(C组)、运动对照组(CE组)、药物组(HP1组，即按照实施例5的药物组合物以蒸馏水溶解后灌胃给药)，以及药物联合运动组(HP1-E组，即按照实施例5的药物组合物以蒸馏水溶解后灌胃给药，并辅以运动)，每组15只。按组分笼饲养，每笼5只。

适应性喂养结束后，HP1组和HP1-E组小鼠每天上午十点给药，灌胃剂量为2.5mg/d/kg溶解于0.6ml蒸馏水，保证给药时间与运动时间间隔2h以上。同时C组与CE组小鼠灌服同等剂量的蒸馏水。

在适应性喂养后对CE组及HP1-E组小鼠进行适应性游泳训练：第一天游泳10min，之后每天增加10min直至增加至60min，隔天游泳训练一次，每次60min，全程无负重，持续训练时间为8周。

C组和HP1组小鼠不参与运动训练，只在实验的最后两天进行适应性游泳训练，同样无负重。

二、力竭游泳时间的评价

小鼠经过游泳训练8周后的最后一天，HP1与HP1-E组小鼠给HP1灌胃给药。给药3小时后，各组小鼠给予其体重5％的铅皮负重游泳直至力竭，并记录其力竭游泳时间。小鼠游泳力竭的判断以小鼠沉入水底持续8s，无法自主浮出水面呼吸为标准。

三、小鼠血乳酸含量的评价

每组取5只小鼠在力竭运动后用于测定血乳酸的含量：安静时、运动后即刻、运动后15分钟和运动后60分钟将小鼠尾尖用酒精棉球消毒，剪尾取血，第一滴血拭去，用试纸条吸取全血，在用京都便携式血乳酸仪分别进行不同时间点的血乳酸的测定。

四、小鼠血清中相关酶活力及炎性因子含量的评价

每组小鼠力竭运动后即刻摘取眼球取血，脱颈处死。血液在室温下静置2小时后在4℃条件下以3000r/min的转速离心10min，取上层血清放入离心管中，置于-20℃冰箱中保存备用。按照试剂说明书，使用Multiskan MK3型酶标仪检测小鼠血清中超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、白细胞介素1β(IL-1β)以及白介素6(IL-6)含量。

五、小鼠肝糖原、肌糖原含量的评价

小鼠脱颈处死后，取其肝脏与骨骼肌后立即用预冷的0.9％生理盐水洗涤样品，用滤纸吸干水分后放入冻存管中，立即放入干冰中速冻，再转移至-80℃冰箱保存待用。

取适量冻存组织用电子天平称重，按照1：9的比例加入生理盐水，在自动匀浆机上以10000r/min的转速低温4℃匀浆1min，制成10％的组织匀浆液。将匀浆液在低温离心机中以3000r/min离心10min，去组织上清液用糖原试剂盒按照说明书测定其含量。

六、小鼠氧化应激相关信号蛋白表达

小鼠脱颈处死后，取其骨骼肌后立即用预冷的0.9％生理盐水洗涤样品，用滤纸吸干水分后放入冻存管中，立即放入干冰中速冻，再转移至-80℃冰箱保存待用。取适量冻存骨骼肌组织用电子天平称重，按照1：9的比例加入生理盐水，在自动匀浆机上以10000r/min的转速低温4℃匀浆1min，制成10％的组织匀浆液。将匀浆液在低温离心机中以3000r/min离心10min，去组织上清液经过总蛋白含量测定，利用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定Nrf2抗氧化应激相关信号通路蛋白的表达。

七、评价结果处理

所有实验数据记录和运算采用Microsoft Excel 2003及统计学软件SPSS19.0。对每一组数据样本进行统计学处理，组间各指标的显著性差异采用独立Student t-检验，结果以平均数±标准差(M±SD)表示，显著性差异小于0.05，非常显著性差异小于0.01。

评价结果如下：

一、小鼠体重变化的评价结果：

表1 小鼠体重变化(单位：克；n＝15)

二、小鼠游泳力竭时间的评价结果

请参阅图1。图1结果显示：与安静对照组相比，CE组、HP1组与HP1-E组小鼠游泳力竭时间都有非常显著地延长(P＜0.01)；与CE组相比，HP1-E组小鼠游泳力竭时间也有非常显著性的提高(P＜0.01)。在本次实验中，小鼠游泳力竭时间是直接反应其运动能力的指标，从实验结果可以看出，HP1干预后的小鼠运动能力明显优于未进行药物干预的小鼠，而HP1联合运动干预对于提高小鼠运动能力是最为显著，说明HP1与运动训练对于提高机体运动机能有协同作用。同时，运动训练也可提高小鼠运动能力。

三、小鼠血液乳酸(Bla)含量的评价结果

请参阅图2。图2显示各组小鼠在不同时间点血液中Bla含量的变化。在力竭后第一分钟时，小鼠血液中血乳酸含量达到峰值，其中C组小鼠血乳酸含量最高。在运动15min和60min时，各组小鼠血乳酸含量均下降，其中，C组下降幅度最小，而HP1-E组与HP1组相比，血乳酸含量明显下降。乳酸是糖酵解供能的终产物，堆积在肌细胞中的乳酸解离出的H+会是血浆pH值下降，最终导致肌力下降，机体疲劳。本次实验中，各组小鼠在安静状态下血乳酸值无明显差异，力竭运动后1min血乳酸含量均达到峰值，随后开始下降。但HP1-E组小鼠血乳酸清楚的速率明显高于其它组，在运动后60min，CE、HP1以及HP1-E组小鼠血乳酸水平均恢复到安静水平，而C组则仍处于含量较高的状态。说明HP1、运动干预以及两者共同作用都能够有效减少运动中乳酸的产生并加快乳酸清除率。

四、小鼠肝糖原、肌糖原含量的评价结果

请参阅图3。图3结果显示，与C组相比，HP1组及HP1组小鼠肝糖原含量均有非常显著地增加(P＜0.01)；而相较于CE组，HP1-E组小鼠肝糖原含量也有显著升高(P＜0.05)。但各组肌糖原含量均无明显差异，故结果不做展示。在长时间的运动中，糖和脂肪是机体两大主要的氧化供能物质，运动持续的时间和强度决定了这两者供能所占的比例，当运动强度增加时，糖功能的比例则会上升。因此，体内糖的储备量是决定机体运动能力的重要因素。在本次实验中，药物干预的两组小鼠，游泳力竭后体内肝糖原的含量明显高于未用药物干预的C组和CE组小鼠，结合前面的力竭时间可知，本发明的药物组合物可通过提高小鼠体内肝糖原含量增强机体运动能力,而各组小鼠体内肌糖原含量则无明显差异，这可能是因为长时间的游泳运动已将小鼠体内的肌糖原消耗殆尽。

四、小鼠血清SOD、MDA的评价结果

请参阅图4。图4显示，与C组相比，HP1和HP1-E组的SOD含量显著增加，差异具有显著性意义(P＜0.05)，并且，HP1-E组与CE组相比差异则更加明显(P＜0.01)。在MDA的检测中，HP1组和HP1-E组与C组相比有显著性降低(P<0.05)，其余组间无差异。有文献报道力竭运动使内源性氧自由基生成增加，脂质过氧化反应增强，导致细胞膜损伤，这与运动性疲劳的产生密切相关。当细胞膜上的不饱和脂肪酸被自由基损伤后，脂质过氧化的产物丙二醛(MDA)含量就会增加，所以MDA是反应细胞膜受损程度的指标。与此同时，机体内还具有一套抗氧化系统，包括抗氧化酶、维生素及其前体物质、谷胱甘肽等，其中最经典的就数超氧化物歧化酶(SOD)。在本次实验中，HP1-E组小鼠血清中SOD的含量明显高于其他各组，而HP1组及HP1-E组小鼠MDA的含量也少于C组和CE组。这说明HP-1联合运动干预可以显著提高机体抗氧化能力，以此来抵抗由脂质过氧化引起的细胞损伤。

五、小鼠血清SOD、MDA的评价结果

请参阅图5。图5结果显示，与C组相比，CE组、HP1组及HP1-E组小鼠血清IL-1β含量均有非常显著的降低(P＜0.01)；HP1-E组与CE组相比，也存在十分显著的差异(P＜0.01)；小鼠血清IL-6含量结果显示：药物及运动干预后的各组与C组相比，小鼠血清IL-6的含量均有非常显著的下降(P＜0.01)，HP1-E与CE组之间也存在显著性差异(P＜0.05)，这些结果提示我们运动干预与药物联用具有协同的抗炎效应。力竭运动会导致机体免疫系统机能下降，通过检测血清中炎性因子，可以判断机体的免疫功能。在次本实验中，我们检测了白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)两个指标。有研究证明，IL-1β可以诱导星形胶质细胞中5-羟色胺的表达，导致了由炎症反应引起的疲劳的发生[23]。实验结果显示，HP1以及运动训练都可以减少由力竭运动引起的炎症因子的释放。IL-6因为其在调节运动介导方面的作用，又被称为运动因子。运动可以使IL-6表达上调，而这种由运动介导的血液IL-6含量的升高可以被抗氧化剂抑制[24]。同样地，HP-1可以显著降低血液中IL-6的含量。综合IL-1β以及IL-6的实验结果可知，HP1可以增加机体抗炎的能力，运动干预协同药物作用，使得机体抗炎能力更加突出。

六、小鼠血清SOD、MDA的评价结果

请参阅图6。图6显示，运动或HP1以及HP1联合运动干预都能明显激活抗氧化信号通路Nrf2-Keap1通路。其中，HP1-E组与CE和HP1组相比，均能明显增加Nrf2蛋白表达。Nrf2属于亮氨酸拉链家族的调节抗氧化应激反应的重要转录因子，Keap1是其特异性受体，正常情况下，Nrf2的作用被Keap1所抑制，但是在氧化应激等情况下，Nrf2与Keap1解离进入胞质从而被激活，启动抗氧化反应元件(Antioxidant response element，ARE)调控的抗氧化酶基因表达，增加细胞对氧化应激的抵抗能力。Nrf2-Keap1-ARE通路是机体重要的抗氧化通路，抗氧化系统与疾病的关系是近年来的研究热点，激活该通路能够降低由急性运动引起的心肌细胞氧化损伤。同时，激活Nrf2可以促进SOD表达的介导，增加机体抗氧化能力。实验结果显示，HP1联合运动干预可以显著上调Nrf2的表达，有助于机体在运动过程中更好地抵抗氧化损伤，延缓运动性疲劳的出现，提高机体运动能力。

综合以上评价结果，HP1干预后的小鼠力竭游泳时间显著延长，这表明其运动能力有了显著提高；同时，HP1联合运动干预可以有效降低小鼠血乳酸峰值的水平，并且提高机体乳酸清除率，增强机体抗疲劳能力。力竭游泳后HP1以及HP1-E组小鼠肝糖原含量明显升高，说明HP1可以有效提高小鼠体内肝糖原储备，使得机体在运动过程中，有更加充足的能量供应。炎性因子IL-1β、IL-6的降低体现了HP1在增加机体抗炎能力方面的作用。在氧化应激方面，HP1联合运动干预明显激活Nrf2的表达，提高小鼠体内SOD活性，并且降低了MDA含量，说明HP1与运动训练在提高机体抗氧化能力方面具有协同作用。综上所述，HP1联合运动干预可以激活Nrf2-Keap1信号通路，增加机体抗炎、抗氧化能力，增强抗疲劳能力，提高机体运动机能。

由于本发明中所涉及的各工艺参数的数值范围在上述实施例中不可能全部体现，但本领域的技术人员完全可以想象到只要落入上述该数值范围内的任何数值均可实施本发明，当然也包括若干项数值范围内具体值的任意组合。此处，出于篇幅的考虑，省略了给出某一项或多项数值范围内具体值的实施例，此不应当视为本发明的技术方案的公开不充分。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细工艺设备和工艺流程，但本发明并不局限于上述详细工艺设备和工艺流程，即不意味着本发明必须依赖上述详细工艺设备和工艺流程才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅料组分成分的添加、具体方式选择等，落在本发明的保护范围内。

Claims

1.一种提高运动机能的药物组合物，其特征在于，其原料按照质量份由15～30份假马齿苋、10～20份水飞蓟、10～30份人参、20～50份玛咖、5～15份姜黄和5～15份绿茶提取物组成。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述假马齿苋的质量份为22份。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述水飞蓟的质量份为15份。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述人参的质量份为20份。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述玛咖的质量份为35份。

6.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述姜黄的质量份为10份。

7.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述绿茶提取物的质量份为10份。

8.一种如权利要求1～7任意一项所述药物组合物的制备方法，其特征在于，将所述原料混合而成。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述混合前还包括将各原料进行粉碎、干燥。

10.一种如权利要求1～7任意一项所述药物组合物的用途，其特征在于，用于制备增强小鼠抗炎、增强抗氧化能力、延缓运动性疲劳的药物中的用途。