CN106680504B - 一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和联检试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和联检试剂盒，涉及液体活检病理学检测技术领域。本发明公开的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶包括瓶体，瓶体上设置有用于检测原血红素的原血红素检测部和用于检测β‑葡萄糖醛酸苷酶的β‑葡萄糖醛酸苷酶检测部。可同时对原血红素和β‑葡萄糖醛酸苷酶进行检测，二者均是人体体液内异质性增生细胞的标志物，通过联检的方式，将这两种标志物同时检测，作为联合标志物，用于判断人体体液样本中细胞异质性增生的情况，其具有更高的灵敏度和特异性。

Description

一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和联检 试剂盒

技术领域

本发明涉及液体活检病理学检测技术领域，具体而言，涉及一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和联检试剂盒。

背景技术

细胞异质性增生的结果是恶性肿瘤，来源于上皮组织的恶性肿瘤称为癌。癌症是人类的噩梦，其危害与日俱增。世界卫生组织(WHO)报道，当前全世界每年新发现癌症病人约1200万，死亡600万，平均每天有1.7万人死于癌症，每5分钟就有1人因癌症致死。预计未来25年全世界将有3亿人患肿瘤，其中1亿人因本病死亡。癌症将成为新世纪人类的第一杀手，并成为全球最大的公共卫生问题之一。

癌症防治的唯一出路为“三早”，即：早期发现、早期诊断、早期治疗。世界卫生组织明确指出：早期发现是提高癌症治疗率的关键。只要早期发现，90％的癌症完全可以治愈。认真做好癌症的早期发现、早期诊断及早期治疗工作，则癌症的死亡率可减少约三分之一。因此，提高癌症早期发现率刻不容缓。

提高癌症的早期发现率，必须采用灵敏度高、简便、无痛苦、价格低廉、易于接受的筛查方法，在大面积人群体检中普及，在众多无症状的人群中发现更多的早期癌症患者和癌症高危人群。随着人类基因组计划的完成和蛋白质组研究的开始，许多相关的新技术和新方法不断出现，通过寻找理想的肿瘤标志物用于常见肿瘤的筛查、早诊、预后判断及指导个体治疗都已逐渐成为可能，从而达到预测个体患恶性肿瘤的风险度，并对患者进行早诊早治。

但是，目前临床常用的检测细胞异质性增生的筛查方法比较繁琐，且相应的检测都是针对单个的标志物进行检测，检测结果的灵敏度和特异性并不高，对诊断结果不准确，不宜在普通人群中开展大规模的筛查。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

原血红素是血红素家族的重要成员，是血红素在人体内的存在形式，是血红素结合蛋白(以原血红素为辅基的酶和细胞色素)的活性基。它由原卟啉Ⅸ与二价铁离子结合而成。据其分子结构和功能不同又分为原血红素a、b、c，在肿瘤发生过程中被释放，属于医学相关生物标志(medicine-related biomarker)。致癌因素导致细胞异质性增生，糖代谢异常，其耗糖量为正常细胞的十倍，且磷酸戊糖代谢途径旺盛，称为“瓦博格氏效应”。在高糖能量代谢电子传递过程中芬顿氏反应产生的羟自由基、过氧自由基等对线粒体造成氧化损伤，改变细胞蛋白的极性量值，使位居线粒体基膜中血红素结合蛋白疏水核(又称血红素口袋)中的原血红素释放，导致体液例如(组织液、分泌液、血液、尿液、痰液、肠液、前列腺液等)中原血红素含量增加，其释放量与细胞癌变程度呈正相关。原血红素具有过氧化物酶的作用，可以使过氧化物脱氧，进而使供氢体氧化成含显色集团的物质。因为肿瘤细胞脱落，或者肿瘤组织炎性渗出，异质性增生的细胞进入人体的各种体液中，例如组织液、分泌液、血液、尿液、痰液、肠液、前列腺液等。用比色法测定体液中原血红素含量，即可显示体液样本中的细胞是否存有异质性增生。

β-葡萄糖醛酸苷酶是细胞异质性增生过程中活性增强的一种生物标志物。它是由四个相同亚单位组成的糖蛋白，广泛存在于人体的各种组织及体液中，生理状态下具有参与细胞增生的作用，而在病理状态下，β-葡萄糖醛酸苷酶可以作用于葡萄糖醛酸甙的β一糖苷键，水解癌周结缔组织中的蛋白多糖及糖蛋白，破坏其网状结构的防御作用，有利于癌细胞的浸润与扩散。

有关恶性肿瘤β-葡萄糖醛酸苷酶活性增高的机制，一是为适应肿瘤生存引起的机体对酶代谢的改变，如癌细胞分泌β-葡萄糖醛酸苷酶增强，癌细胞膜对β-葡萄糖醛酸苷酶通透性改变，对该酶抑制剂的缺乏或增加；二是肿瘤组织浸润并且破坏周围正常组织，引起其它组织酶生成异常，或因肿瘤压迫梗阻引起该酶的大量释放，造成β-葡萄糖醛酸苷酶增高。

通过联合应用形态学细胞水平的免疫组化技术、亚细胞水平的免疫电镜技术和机能学的ELISA技术，对恶性肿瘤组织及相关体液中β-葡萄糖醛酸苷酶进行的同步检测显示，β-葡萄糖醛酸苷酶在恶性肿瘤患者组织及相关体液中增高，是由癌细胞自身的生物学特性决定的，缘于肿瘤细胞为适应其快速过度增殖和异常分化的自主性生长的生存方式而产生的自我调控，由其自身独特的生长方式决定并成为内因的。在最适温度与PH条件下，酚酞葡萄糖醛酸甙经β-葡萄糖醛酸苷酶催化水解，释放出游离酚酞。加碱性溶液终止反应，酚酞呈红色。观察酚酞指示的颜色变化，即可了解体液样本中β-葡萄糖醛酸苷酶的活性，显示细胞是否存有恶变及其程度。

但是，细胞原血红素a/b/c检测的敏感度高而特异度低，β-葡萄糖醛酸苷酶检测的特异度高而敏感度低。且目前，市面上并没有针对这两种标志物同时检测的装置或设备或试剂瓶等检测工具。

鉴于此，本发明的目的在于提供用于二者联合检测的一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，可对同一样本即人体体液(例如包括组织液、分泌液、血液、尿液、痰液、肠液、前列腺液等)，同时进行两项指标即原血红素和β-葡萄糖醛酸苷酶的检测，相互印证，相互补充，从而弥补其各自的不足，提高细胞异质性增生筛查的生物有效性。

一方面，本发明的目的在于提供一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，该用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶可同时对细胞异质性增生的标志物原血红素和β-葡萄糖醛酸苷酶进行检测，具有操作简单，检测结果准确的特点。

另一方面，本发明的目的在于提供一种联检试剂盒，该联检试剂盒包括上述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，可同时对细胞异质性增生的标志物原血红素和β-葡萄糖醛酸苷酶进行检测，具有操作简单，检测结果准确的特点。

本发明是这样实现的：

一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其包括瓶体，瓶体上设置有用于检测原血红素的原血红素检测部和用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶的β-葡萄糖醛酸苷酶检测部。

进一步地，在本发明较佳的实施例中，上述瓶体设置有瓶颈，瓶体内设置有用于储存样本前处理液的容纳腔，瓶颈内设置有与容纳腔连通的且贯穿瓶颈的引流管，引流管为中空结构，原血红素检测部和β-葡萄糖醛酸苷酶检测部分别位于瓶颈相对的两侧。

进一步地，在本发明较佳的实施例中，上述用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶还包括与瓶体可拆卸连接的瓶盖，瓶盖内设置有用于样本(人体体液样本例如组织液、分泌液、血液、尿液、痰液、肠液、前列腺液等)与样本前处理液反应的反应腔，瓶颈伸入反应腔中。

进一步地，在本发明较佳的实施例中，上述引流管远离瓶体的一端设置有用于封闭引流管的密封帽，密封帽与引流管可拆卸连接。

进一步地，在本发明较佳的实施例中，上述瓶颈的横截面呈方形。

进一步地，在本发明较佳的实施例中，上述容纳腔的纵截面呈圆锥形，容纳腔具有小口端和大口端，小口端与引流管连通。

进一步地，在本发明较佳的实施例中，上述引流管的出液口覆设有封口膜，封口膜的边缘具有往远离封口膜方向延伸的撕扯部。

进一步地，在本发明较佳的实施例中，上述原血红素检测部具有原血红素检测试剂膜，β-葡萄糖醛酸苷酶检测部具有β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜，原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜分别贴合至瓶颈上。

一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂盒，其特征在于，其包括上述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶。

进一步地，在本发明较佳的实施例中，上述用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂盒还包括原血红素比色板和β-葡萄糖醛酸苷酶比色板。

与现有技术相比，本发明提供的一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和联检试剂盒的有益效果是：

本发明提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其包括瓶体，瓶体上设置有用于检测原血红素的原血红素检测部和用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶的β-葡萄糖醛酸苷酶检测部，瓶体上设置的原血红素检测部和β-葡萄糖醛酸苷酶检测部，可同时对原血红素和β-葡萄糖醛酸苷酶进行检测，二者均是细胞异质性增生的标志物，通过联检的方式，将这两种标志物同时检测，作为联合标志物，用于判断样本中细胞异质性增生的情况，其具有更高的灵敏度和特异性，且本发明提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和试剂盒具有操作简单、成本低廉，安全可靠，可快速的筛查出人体体液例如组织液、分泌液、血液、尿液、痰液、肠液、前列腺液等中无异质性增生细胞的样本、含异质性增生细胞的样本和可能含有异质性增生细胞的样本。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实施例1提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶第一视角的结构示意图；

图2为图1的II-II剖面结构示意图；

图3为本发明实施例1提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶第二视角的结构示意图；

图4为图3的IV-IV剖面结构示意图。

图标：100-用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶；110-瓶盖；112-原血红素检测部；113-β-葡萄糖醛酸苷酶检测部；111-反应腔；120-瓶体；121-瓶颈；122-容纳腔；122a-小口端；122b-大口端；123-引流管；124-密封帽；125-出液口；126-进液口；127-斜面锥壁。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本发明实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。

因此，以下对在附图中提供的本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

应注意到：相似的标号和字母在下面的附图中表示类似项，因此，一旦某一项在一个附图中被定义，则在随后的附图中不需要对其进行进一步定义和解释。

在本发明的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，或者是该发明产品使用时惯常摆放的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。

此外，术语“水平”、“竖直”、“悬垂”等术语并不表示要求部件绝对水平或悬垂，而是可以稍微倾斜。如“水平”仅仅是指其方向相对“竖直”而言更加水平，并不是表示该结构一定要完全水平，而是可以稍微倾斜。

在本发明的描述中，还需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“设置”、“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

实施例1

请参阅图1-图4，本实施例提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100，包括瓶体120和瓶盖110，瓶盖110与瓶体120可拆卸连接。瓶体120上设置有用于检测原血红素的原血红素检测部112和用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶的β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113(如图1和图3所示)。

本实施例中，瓶盖110与瓶体120通过螺纹连接，瓶盖110的内侧缘设置有内螺纹，瓶体120的外侧设置有外螺纹。瓶盖110与瓶体120通过螺纹连接，可增强其密闭性，且操作方便。当然，在其他的实施例中，瓶盖110与瓶体120也可以卡接。

此外，在本实施例中，瓶体120设置有瓶颈121，瓶体120内设置有用于储存样本前处理液的容纳腔122，瓶颈121内设置有与容纳腔122连通的且贯穿瓶颈121的引流管123，引流管123为中空结构(如图2所示)。引流管123用于将储存在容纳腔122中的样本前处理液引流到瓶体120外，使其可与样本混合反应，对样本进行前处理，易于后续检测。

在本实施例中，原血红素检测部112和β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113分别位于瓶颈121相对的两侧。需要说明的是，在其他的实施例中，原血红素检测部112和β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113也可位于瓶体120靠近瓶颈121的位置的两侧，或其他位置，其均属于本发明的保护范围。

检测时，样本为人体体液例如患者的痰液(在其他的实际检测情况种，样本可以是其他类型的人体体液例如是组织液、分泌液、血液、尿液、肠液、或者前列腺液等)与样本前处理液混合反应后，得到混合液样本，将原血红素检测部112和β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113伸入到该混合液样本中，通过观察原血红素检测部112和β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113的颜色判断样本中原血红素和β-葡萄糖醛酸苷酶的含量情况。通常情况下，β-葡萄糖醛酸苷酶检测阳性结果呈红色，原血红素检测阳性结果呈蓝色。因此，本实施例提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100又可以称为红与蓝联检筛查试剂瓶。

在本实施例中，原血红素检测部112具有原血红素检测试剂膜，β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113具有β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜，原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜分别贴合至瓶颈121上。

在本实施例中，瓶颈121的横截面呈方形，原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜分别贴合至瓶颈121相对的两侧位置。方形的瓶颈121可将原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜分隔较开，便于观察试剂膜的显色情况。

需要说明的是，在其他的实施例中，瓶颈121的形状并不限于方形，瓶颈121可以是圆柱体形，三棱柱体形或其他形状，其均属于本发明的保护范围。

原血红素检测试剂膜可以与原血红素(包括原血红素a/b/c)发生作用，显示出蓝色，β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜可以与β-葡萄糖醛酸苷酶发生作用，显示出红色。原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜的参考制作方法参考后文介绍，但本发明的原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜并不限于后文所提及的制作方法，只要是能够检测出原血红素和β-葡萄糖醛酸苷酶的试剂膜或试剂条均属于本发明的保护范围。

其中，引流管123远离瓶体120的一端设置有用于封闭引流管123的密封帽124，密封帽124与引流管123可拆卸连接。密封帽124可将引流管123远离瓶体120的端部的出液口125封闭，防止容纳腔122中的样本前处理液在非工作状态或者运输状态下溢流到瓶体120外污染用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100。

在本实施例中，容纳腔122的纵截面呈圆锥形，容纳腔122具有小口端122a和大口端122b，小口端122a与引流管123的进液口126连通(如图4所示)，大口端122a靠近瓶体120底部。圆锥形的容纳腔122的斜面锥壁127可以方便样本前处理液流入至引流管123中，避免样本前处理液残留在容纳腔122中造成浪费。

具体地，在本实施例中，密封帽124与引流管123通过螺纹连接，其密封性能更好。当然，在其他的实施例中，密封帽124与引流管123也可以卡接或其他可拆卸连接方式。

另外，本实施例中，引流管123的出液口125覆设有封口膜(图未示)，封口膜的边缘具有往远离封口膜方向延伸的撕扯部。封口膜的可以进一步防止在运输的途中容纳腔122内的样本前处理液流出到瓶体120外，避免污染。撕扯部的设置在于当使用时便于使用者将封口膜撕扯下，使得出液口125处于畅通状态，易于样本前处理液的流出。需要说明的是，在其他的实施例中，也可不用设置封口膜。封口膜的设置可根据实际情况选择。

另外，瓶盖110内设置有用于样本与样本前处理液反应的反应腔111，当瓶盖110与瓶体120连接时，瓶颈121可伸入反应腔111中。瓶盖110一方面起到保护作用，防止瓶颈121上的β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113和原血红素检测部112受到污染，影响其检测结果的准确性。另一方面，瓶盖110可直接起到作为样本与样本前处理液混合处理的反应场所的作用，例如检测时，将样本置于瓶盖110的反应腔111内，然后往其中加入样本前处理液，样本前处理液与样本充分混合，得到样本混合液，用于后续检测。当然，在其他的实施例中，也可以采用其他的容器作为样本与样本前处理液的混合处理的反应场所。本实施例提供的瓶盖110具有反应腔111既可直接作为样本与样本前处理液的反应场所，其具有简单方便、便捷易行，可操作性强、节约成本即不需要再另外的容器等优点。

本实施例提供了用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100的瓶体120的形状为圆柱体形，由无色透明软塑料制成，便于使用者挤压瓶体120，使其内部的样本前处理液流出。当然，在其他的实施例中，瓶体120的形状为也可以是立方体形或其他形状。

瓶盖110由无色透明硬质塑料制成，提高其支持性能，易于样本与样本前处理液的处理。当然，在其他的实施例中，瓶盖110也可由其他材质制成。

此外，本实施例提供了用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100的设计尺寸，如下：

用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100的瓶体120高4cm、直径1.8cm；瓶盖110高1.5cm，直径与瓶体120相匹配。瓶颈121横截面长边为0.8cm，短边为0.4cm；引流管123长1.2cm，出液口125为圆形，直径0.3cm；原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜均为0.5cm×0.5cm的方形设计。

需要说明的是，上述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100的设计尺寸仅作参考，在其他的实施例中，用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100的设计尺寸可根据实际情况选择。

本实施例提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100，通过瓶体120上设置的原血红素检测部112和β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113，可同时对原血红素和β-葡萄糖醛酸苷酶进行检测，二者均是细胞异质性增生的标志物，通过联检的方式，将这两种标志物同时检测，作为联合标志物，用于判断样本中细胞异质性增生的情况，其具有更高的灵敏度和特异性，且本发明提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100和试剂盒具有操作简单、成本低廉，安全可靠，可快速的筛查出体液样本中无异质性增生细胞的样本、含异质性增生细胞的样本和可能含有异质性细胞的样本。

另外，本实施例提供了一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂盒，其包括上述的的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100，用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100的容纳腔122中储存有样本前处理液。

此外，本实施例提供的联检试剂盒具有密闭性，内衬为黑色，避免透光。

此外，本实施例提供的联检试剂盒含原血红素检测比色板和β-葡萄糖醛酸苷酶检测比色板。

本实施例提供的联检试剂盒可参考如下方法进行检测。

(1)打开试剂盒，取出用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100。打开瓶盖110与瓶体120的衔接，取下瓶盖110。

(2)样本采集：根据体液样本的不同，按照临床操作常规，采用不同的采集方法。将采集的样本(人体体液样本例如组织液、分泌液、血液、尿液、痰液、肠液、前列腺液等)置于瓶盖110的反应腔111内。

(3)打开密封帽124，然后把瓶盖110重新旋入瓶体120，旋紧，使二者契合严密。挤压瓶体120(可将瓶体120倒置)，使其内的预处理液即样本前处理液通过引流管123注入到反应腔111内。

(4)颠倒用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶100，3～5次。在5分钟内观察瓶颈121两侧试剂片的β-葡萄糖醛酸苷酶检测部113和原血红素检测部112颜色变化，并与试剂盒上的比色板进行比对，根据比色结果判断样本中是否含有原血红素或/和β-葡萄糖醛酸苷酶，再根据该两个指标的情况判断出样本是否有异质性增生细胞。

此外，本实施例提供了原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜的制作方法。

1、细胞原血红素a/b/c检测试剂膜制作：

1.1、制作磷酸缓冲液。缓冲液为1.75mol/L、PH值4.5磷酸盐缓冲液。

1.2、把定量聚乙烯吡咯烷酮K30加入上述磷酸缓冲液，搅拌至全溶；聚乙烯吡咯烷酮K30用量为8g/100ml。即每100ml磷酸缓冲液中加入8g聚乙烯吡咯烷酮K30。

1.3、将裁切好的31ET滤纸在以上步骤1.2制得的溶液中均匀浸泡至透，淋去多余试剂，烘干，为试剂膜半成品。

1.4、将定量3，3’，5，5’-四甲基联苯胺加入到无水乙醇500ml中，搅拌至完全溶解；其中，3，3’，5，5’-四甲基联苯胺的加入量为0.75g。

1.5、将定量过氧化羟基异丙苯加入到上述溶液(步骤1.4制得的混合液)中，搅拌至完全溶解；过氧化羟基异丙苯加入量为1ml。

1.6、将步骤(1.3)制得的试剂膜半成品在步骤(1.5)制得的溶液中均匀浸泡至透，淋去多余试剂，均匀地烘干，即得原血红素检测试剂膜。

1.7、避光、干燥条件下保存，

2、β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜的制作：

2.1、制作醋酸缓冲液。醋酸缓冲液为100ml 0.2mol/L pH 5.0的醋酸缓冲液。

2.2、将定量酚酞葡萄糖醛酸苷辛可尼丁盐(PGA)溶于步骤(2.1)制得的醋酸缓冲液中混匀。酚酞葡萄糖醛酸苷辛可尼丁盐用量为0.79g/100ml，即100ml醋酸缓冲液中加入葡萄糖醛酸苷辛可尼丁盐0.79g。

2.3、把定量聚乙烯吡咯烷酮K30加入上述步骤2.2制得的混合溶液中，搅拌至全溶；聚乙烯吡咯烷酮K30用量为8g/100ml。

2.4、将裁切好的31ET滤纸在步骤(2.2)制得的溶液中均匀浸泡至透，淋去多余试剂。

2.5、避光条件下，28℃流动空气干燥2小时。制得试剂膜半成品。

2.6、制作碱性甘氨酸缓冲液。缓冲液为0.22mol/L、PH值为10.5。

2.7、将步骤(2.5)制得的试剂膜半成品在步骤(2.6)制得的溶液中均匀浸泡至透，淋去多余试剂，40℃均匀地烘干。即得β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜。

2.8、避光、干燥条件下保存。

需要说明的是，在其他的实施例中，本发明所用的原血红素检测试剂膜和β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜的制作也可以按其他方法进行制备，无论采用何种方法所制备的试剂膜，其只要能够检测出原血红素和/或β-葡萄糖醛酸苷酶，即属于本发明的保护范围。

3、样本前处理液的制作方法

样本前处理液为三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-Hcl)缓冲液加入定量乙二胺四乙酸二钠(EDTA)制得。其中：Tris-Hcl缓冲液PH值为7.4；Tris-Hcl缓冲液浓度为0.05mol/L；EDTA浓度为0.02mol/L。

需要说明的是，在其他的实施例中，样本前处理液的制作方法也可以按其他的方法进行制备。

综上，本发明实施例提供的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂盒，简单实用，成本低廉，安全可靠，可快速的筛查出体液样本中无异质性增生细胞的样本、含异质性增生细胞的样本和可能含有异质性增生细胞的样本，为进一步检查做准备；且本发明实施例提供了一种检测盒，可专用来盛放检测过程中用到的器皿和试剂，本试剂盒结构简单，只需一个试剂盒便能完成检试，节省空间和试剂，同时也减轻操作者劳动负担。

以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其特征在于，其包括瓶体和瓶盖，所述瓶体上设置有用于检测原血红素的原血红素检测部和用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶的β-葡萄糖醛酸苷酶检测部所述瓶体设置有瓶颈，所述瓶体内设置有用于储存样本前处理液的容纳腔，所述瓶颈内设置有与所述容纳腔连通的且贯穿所述瓶颈的引流管，所述引流管为中空结构，所述原血红素检测部和所述β-葡萄糖醛酸苷酶检测部分别位于所述瓶颈相对的两侧；瓶盖与瓶体可拆卸连接；瓶盖与瓶体通过螺纹连接，瓶盖的内侧缘设置有内螺纹，瓶体的外侧设置有外螺纹。

2.根据权利要求1所述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其特征在于，所述联检试剂瓶还包括与所述瓶体可拆卸连接的瓶盖，所述瓶盖内设置有用于样本与所述样本前处理液反应的反应腔，所述瓶颈伸入所述反应腔中。

3.根据权利要求1或2所述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其特征在于，所述引流管远离所述瓶体的一端设置有用于封闭所述引流管的密封帽，所述密封帽与所述引流管可拆卸连接。

4.根据权利要求1或2所述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其特征在于，所述瓶颈的横截面呈方形。

5.根据权利要求1或2所述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其特征在于，所述容纳腔的纵截面呈圆锥形，所述容纳腔具有小口端和大口端，所述小口端与所述引流管连通。

6.根据权利要求1或2所述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其特征在于，所述引流管的出液口覆设有封口膜，所述封口膜的边缘具有往远离所述封口膜方向延伸的撕扯部。

7.根据权利要求1或2所述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶，其特征在于，所述原血红素检测部具有原血红素检测试剂膜，所述β-葡萄糖醛酸苷酶检测部具有β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜，所述原血红素检测试剂膜和所述β-葡萄糖醛酸苷酶检测试剂膜分别贴合至所述瓶颈上。

8.一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1-7中任一项所述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶。

9.根据权利要求8所述的用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂盒，其特征在于，所述联检试剂盒还包括原血红素比色板和β-葡萄糖醛酸苷酶比色板。