CN103760331B - 精浆联检试剂盒 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种精浆联检试剂盒，可将精浆内含有的九大指标pH值、白细胞酯酶、卵磷脂小体、柠檬酸、锌、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、果糖和中性α-葡萄糖苷酶联合进行快速、准确、简便、实用的一次性检测，对前列腺、附睾、精囊腺等腺体功能进行综合性评价，对引起前列腺炎、生殖系统炎症、性功能障碍以及不孕不育相关疾病的临床诊断和治疗提供了详细的相关信息，填补了市场空缺，易于在临床上推广。

Description

精浆联检试剂盒
技术领域
本发明涉及生物医学检验测定技术领域，尤其是涉及一种体外诊断用精浆联检试剂盒。
背景技术
精浆是男性附属性腺分泌物的混合液,有输送精子、提供精子营养、激发精子活力等作用。对精浆进行分析可以直接、客观地评估男性的生育能力、查找男性不育原因,为人工受精提供精子的质量依据,同时还可以检测生殖系统的炎症及肿瘤，而且对前列腺、附睾和精囊腺的功能进行客观评价，为相关疾病的诊断、治疗和预后监测提供帮助。
精液中白细胞的含量是诊断生殖系统炎性反应和不育的重要指标，临床上通常以白细胞的多少来诊断生殖系统感染或炎性反应，但目前认为这种诊断方法是不可靠的。在精液检查时,常见到一些圆形细胞,未经染色很难分类鉴别,若把这些圆细胞误认为是白细胞,就可能导致错误诊断。虽然正甲苯胺过氧化物酶可以区别白细胞和其他的圆形细胞，但是操作费时、费力，不利于临床快速、多标本量的检测。
精液中的卵磷脂小体来源于前列腺液，既可作诊断慢性前列腺炎的参考指标,又可作为判断性功能状态的客观指标。目前，临床主要通过镜检的方式检测精液中的卵磷脂小体，由于经验和仪器的误差，会造成结果的客观性降低。
精浆中的柠檬酸、锌和酸性磷酸酶主要来源于前列腺，是WHO公认的反映前列腺分泌功能的指标。患有前列腺炎时，这三个指标会下降。目前，检测这三个指标采用的是手工生化反应或者酶法，使用分光光度计或者生化分析仪进行检测。但所用试剂价格高，操作繁琐，且稳定性较差、批间差较大，不能很好地满足现有临床的需求。
弹性蛋白酶可作为静止型生殖道感染的诊断及愈后监测指标，其可靠性得到了世界卫生组织的认可。目前，弹性蛋白酶的临床或实验室诊断方法有：免疫细胞化学法、ELISA方法。但现有检测方法检测时间长、操作繁琐，且需要特殊仪器，无法满足临床快速、简便的需求。
精浆果糖是男性副性腺精囊所分泌的特征性物质,果糖含量还能间接反映睾丸间质细胞分泌睾酮的功能。目前，检测果糖的方法主要有生化显色法和酶法，采用手工和半自动操作，加样程序多，操作繁琐，给临床应用带来极大的不便。
中性α-葡萄糖苷酶是附睾分泌功能的标志酶和特异性酶。精浆中性α-葡萄糖苷酶结合其他指标如精浆果糖、精子染色等的检测，还可实现梗阻性无精子症患者的梗阻部位定位，分泌型或排泄型无精子症的鉴别、附睾水平上局部梗阻的判断等。目前，精浆中性α-葡萄糖苷酶检测的方法为化学比色法，该法多为手工或半自动操作，加样程序多，操作步骤复杂，试剂和样品混匀一定时间后，通过分光光度计逐一进行比色测定，再根据标准曲线回算出结果，耗时耗力，且人为误差也比较大。
发明内容
本发明的目的在于提供一种快速、准确、简便、实用的精浆联检试剂盒，该试剂盒可对多种腺体功能进行综合评价，为相关疾病的诊断和治疗提供准确信息。
为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：
本发明所述的精浆联检试剂盒，它包括至少五种检测试剂，所述五种检测试剂为白细胞酯酶检测试剂、卵磷脂小体检测试剂、酸性磷酸酶检测试剂、果糖检测试剂和中性α-葡萄糖苷酶检测试剂，其中
白细胞酯酶检测试剂由Tris-HCl缓冲液，糖和5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液配制而成；所述Tris-HCl缓冲液的浓度为0.01~2mol/L，pH7.0~10.0,所述糖为蔗糖、葡萄糖、海藻糖或乳糖，浓度为30~60g/L，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液的浓度为0.001~1mol/L；
卵磷脂小体检测试剂由硼酸盐缓冲液、锌试剂溶液和氯化锌溶液配制而成；所述硼酸盐缓冲液的pH为7~10，其中氯化钾：0.1~100g/L，硼酸：0.1~100g/L，氢氧化钠：0.01~10g/L；所述锌试剂溶液中含有0.1~100g/L的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；所述氯化锌溶液中氯化锌含量为0.1~100g/L；
酸性磷酸酶检测试剂中包括0.1~75g/L的柠檬酸，0.1~90g/L的磷酸苯二钠，0.1~65g/L的4-氨基安替比林，0.1~88g/L的氢氧化钠；
果糖检测试剂由盐酸或硫酸10~60%，间苯二酚浓度为0.1~2.0g/L配制的底物溶液组成；或由浓度为250~300μmol/L的碘硝基四唑紫、氯化硝基四氮唑蓝或噻唑蓝配制的底物溶液组成；
中性α-葡萄糖苷酶检测试剂由缓冲液、对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷溶液配制而成：其中缓冲液中磷酸氢二钾12.1~46.4g/L,磷酸二氢钾21.4~43.6g/L，SDS5.0~22.5g/L，pH6.0~9.0，对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷溶液的浓度为0.001~1mol/L；
或由缓冲液、底物溶液配制而成：其中缓冲液中磷酸氢二钾12.1~46.4g/L,磷酸二氢钾21.4~43.6g/L，pH6.0~9.0，底物溶液的浓度为0.1~1g/L，底物为X-α-D吡喃葡萄糖苷。
为给临床提供足够多的、更加详细的指标，它还包括pH值检测试剂、柠檬酸检测试剂、锌检测试剂、弹性蛋白酶检测试剂；其中
pH值检测试剂由0.5~100g/L的溴百里酚蓝钠盐和纯化水配制而成；
柠檬酸检测试剂由硫酸铁铵溶液和磺基水杨酸溶液按1:15的比例配制而成，其中硫酸铁铵溶液的浓度为0.001~1mol/L，磺基水杨酸溶液的浓度为0.001~1mol/L；
锌检测试剂由硼酸盐缓冲液和锌试剂溶液按10:1的比例配制而成，其中硼酸盐缓冲液的pH值为7.0~10.0，包括以下组分：氯化钾0.1~100g/L，硼酸0.1~100g/L，氢氧化钠0.01~10g/L；所述锌试剂溶液中含有0.1~100g/L的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；
弹性蛋白酶检测试剂由pH6.0~9.0，0.1~1.0M的磷酸盐或者Tris-HCl缓冲液与浓度0.1~5mg/L的地衣红弹性蛋白或刚果红弹性蛋白配制而成。
本发明试剂盒中还包括酸性磷酸酶显色液或/和果糖脱氢酶溶液或/和中性α-葡萄糖苷酶显色液或/和弹性蛋白酶显色液；其中
酸性磷酸酶显色液中包括铁氰化钾0.1~100g/L、碳酸氢钠0.1~100g/L和氢氧化钠0.01~10g/L；
果糖脱氢酶溶液由pH4.5~5.0、200~300μmol/L磷酸钾或磷酸钠缓冲液和浓度为2.0~6.0U/ml的果糖脱氢酶组成；
中性α-葡萄糖苷酶显色液为0.1~2.0mol/L的氯化铁溶液；
弹性蛋白酶显色液中含有V/V为50~80%的酸液，所述酸液为盐酸、乙酸、硝酸或硫酸。
所述检测试剂可以固化在棉浆纸、滤纸、玻璃纤维或塑料的固相载体上，也可以直接配制成液体使用。
为方便运输和在临床上使用，本试剂盒还包括开设有多个反应孔的检测卡体，所述检测试剂固化在棉浆纸、滤纸、玻璃纤维或塑料的固相载体上后制作成试剂垫分别置于所述反应孔内。
本发明的优点在于一次性检测指标多且检测方法简单，显示结果直观，将原来需要分别进行检测的一些指标进行联合检测，为临床提供了一种快速、准确、简便、实用的联检试剂盒。本发明试剂盒中增加了卵磷脂小体的指标检测，更好的为诊断前列腺炎提供了依据，对原来检测某些指标所用的试剂及方法均进行了改进，不仅操作更加方便，反应时间大大缩短，且判读结果更容易。
具体实施方式
下面通过具体实施例来进一步说明本发明试剂盒的制备方法和使用方法。
实施例1：
本发明所述的精浆联检试剂盒，包括标本稀释液，显色液以及设置有九个反应孔的检测卡体，在九个反应孔内分别设置有用于检测pH值、白细胞酯酶、卵磷脂小体、柠檬酸、锌、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、果糖和中性α-葡萄糖苷酶的固体试剂，该固体试剂是含有检测试剂的由棉浆纸、滤纸、玻璃纤维或塑料等固相载体制作的试剂垫，九个反应孔中试剂垫的具体制作方法如下：
1、检测pH值的固体试剂垫：将0.5~100g/L的溴百里酚蓝钠盐和20倍的纯化水配制的溶液中，取10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；
2、检测白细胞酯酶的固体试剂垫：由Tris-HCl缓冲液，糖和5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液配制后涂覆于载体上，，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；其中Tris-HCl缓冲液的浓度为0.01~2mol/L，pH7.0~10.0；糖为蔗糖、葡萄糖、海藻糖或乳糖，浓度为30~60g/L；5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液的浓度为0.001~1mol/L；
先制备Tris-HCl缓冲液，再加入海藻糖（或其他糖类），最后加入5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液，得到液体试剂，取10μL液体试剂置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥即可；
3、检测卵磷脂小体的固体试剂垫：由硼酸盐缓冲液、锌试剂溶液和氯化锌溶液反应后涂覆于载体上，经真空冷冻干燥而成；硼酸盐缓冲液的pH为7~10，其中氯化钾：0.1~100g/L，硼酸：0.1~100g/L，氢氧化钠：0.01~10g/L；锌试剂溶液中含有0.1~100g/L的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；氯化锌溶液中氯化锌含量为0.1~100g/L；
首先将硼酸盐缓冲液和锌试剂溶液按1:1比例进行反应，得到的产物记为A，取氯化锌溶液500μL，加入20μL生理盐水，得到的溶液记为B，将A和B按1:5的比例进行反应，得到的产物记为C，取10μL的产物C置于直径5.5mm的试剂垫载体上，经真空冷冻干燥即可；
4、检测柠檬酸的固体试剂垫：由硫酸铁铵溶液（0.001~1mol/L）和磺基水杨酸溶液（0.001~1mol/L）按1:15的比例配制后，取10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；
5、检测锌的固体试剂垫：由硼酸盐缓冲液和锌试剂溶液按10:1的比例反应、稀释后置于直径5.5mm的试剂垫载体上，经真空冷冻干燥而成；其中的硼酸盐缓冲液包括以下组份：氯化钾0.1~100g/L，硼酸0.1~100g/L，氢氧化钠0.01~10g/L，pH值7.0~10.0；锌试剂溶液中含有0.1~100g/L的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；
首先制备硼酸盐缓冲液，将硼酸盐缓冲液和锌试剂溶液按10:1的比例反应后，再加入6倍的硼酸盐缓冲液进行稀释，然后取稀释后的液体试剂10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，经真空冷冻干燥即可；
6、检测酸性磷酸酶的固体试剂垫：将包含有柠檬酸0.1~75g/L,磷酸苯二钠0.1~90g/L，4-氨基安替比林0.1~65g/L，氢氧化钠0.1~88g/L组分的底物液倍比稀释2次后得到的稀释液10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；
其中所用的酸性磷酸酶显色液中包括以下组分:铁氰化钾0.1~100g/L、碳酸氢钠0.1~100g/L、氢氧化钠0.01~10g/L；
7、检测弹性蛋白酶的固体试剂垫：由缓冲液、底物溶液配制后取10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）而成；其中缓冲液为0.1~1.0M的磷酸盐或者Tris-HCl缓冲液，pH6.0~9.0，底物溶液为地衣红弹性蛋白或刚果红弹性蛋白，浓度0.1~5mg/L；
8、检测果糖的固体试剂垫：底物溶液配制后，取10μL置于直径5.5mm的载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；其中底物溶液中盐酸或者硫酸10~60%（V/V）,间苯二酚浓度为0.1~2.0g/L；
9、检测中性α-葡萄糖苷酶固体试剂垫：由缓冲液、对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷溶液配制后，取10μL置于直径5.5mm的载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；其中缓冲液中的磷酸氢二钾12.1~46.4g/L，磷酸二氢钾21.4~43.6g/L，SDS5.0~22.5g/L，pH6.0~9.0；对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷溶液的浓度为0.001~1mol/L。
其中所用的中性α-葡萄糖苷酶显色液为0.1~2.0mol/L的氯化铁溶液。
本试剂盒的检测方法如下：
1、标本预处理：将精液标本1000g离心10分钟，得到标本液；
2、在九个反应孔中分别加入标本液25μl；
3、温育：37℃，15min；
4、加显色液：在第6孔（酸性磷酸酶检测孔）中加入酸性磷酸酶显色液25μl，在第9孔（中性α-葡萄糖苷酶检测孔）中加入中性α-葡萄糖苷酶显色液25μl;
5、记录结果：观察颜色变化，和试剂盒提供的比色卡进行比对，判读结果：
第1孔，pH指标：阴性显黄色，弱阳性显绿色，强阳性显蓝色；
第2孔，白细胞指标：阴性显无色，弱阳性显绿色，强阳性显蓝色；
第3孔，卵磷脂小体指标：阴性显粉红色，阳性显蓝色；
第4孔，柠檬酸指标：阴性显米黄色，阳性显橙红色；
第5孔，锌指标：阴性显蓝色，阳性显桔红色；
第6孔，酸性磷酸酶指标：阴性显红色，弱阳性显橙红色，强阳性显黄色；
第7孔，弹性蛋白酶指标：阴性显白色，弱阳性显浅红色，强阳性显深红色；
第8孔，果糖指标：阴性显淡黄色，弱阳性显红色，强阳性显棕红色；
第9孔，中性α-葡萄糖苷酶指标：阴性显白色，弱阳性显紫色，强阳性显蓝紫色。
实施例2：
本发明所述的精浆联检试剂盒，包括标本稀释液，显色液以及设置有九个反应孔的检测卡体，在九个反应孔内分别设置有用于检测pH值、白细胞酯酶、卵磷脂小体、柠檬酸、锌、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、果糖和中性α-葡萄糖苷酶的固体试剂，该固体试剂是含有检测试剂的由棉浆纸、滤纸、玻璃纤维或塑料等固相载体制作的试剂垫，九个反应孔中试剂垫的具体制作方法如下：
1、检测pH值的固体试剂垫：将0.5~100g/L的溴百里酚蓝钠盐和20倍的纯化水配制的溶液中，取10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；
2、检测白细胞酯酶的固体试剂垫：由Tris-HCl缓冲液，糖和5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液配制后涂覆于载体上，，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；其中Tris-HCl缓冲液的浓度为0.01~2mol/L，pH7.0~10.0；糖为蔗糖、葡萄糖、海藻糖或乳糖，浓度为30~60g/L；5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液的浓度为0.001~1mol/L；
先制备Tris-HCl缓冲液，再加入海藻糖（或其他糖类），最后加入5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液，得到液体试剂，取10μL液体试剂置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥即可；
3、检测卵磷脂小体的固体试剂垫：由硼酸盐缓冲液、锌试剂溶液和氯化锌溶液反应后涂覆于载体上，经真空冷冻干燥而成；硼酸盐缓冲液的pH为7~10，其中氯化钾：0.1~100g/L，硼酸：0.1~100g/L，氢氧化钠：0.01~10g/L；锌试剂溶液中含有0.1~100g/L的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；氯化锌溶液中氯化锌含量为0.1~100g/L；
首先将硼酸盐缓冲液和锌试剂溶液按1:1比例进行反应，得到的产物记为A，取氯化锌溶液500μL，加入20μL生理盐水，得到的溶液记为B，将A和B按1:5的比例进行反应，得到的产物记为C，取10μL的产物C置于直径5.5mm的试剂垫载体上，经真空冷冻干燥即可；
4、检测柠檬酸的固体试剂垫：由硫酸铁铵溶液（0.001~1mol/L）和磺基水杨酸溶液（0.001~1mol/L）按1:15的比例配制后，取10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；
5、检测锌的固体试剂垫：由硼酸盐缓冲液和锌试剂溶液按10:1的比例反应、稀释后置于直径5.5mm的试剂垫载体上，经真空冷冻干燥而成；其中的硼酸盐缓冲液包括以下组份：氯化钾0.1~100g/L，硼酸0.1~100g/L，氢氧化钠0.01~10g/L，pH值7.0~10.0；锌试剂溶液中含有0.1~100g/L的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；
首先制备硼酸盐缓冲液，将硼酸盐缓冲液和锌试剂溶液按10:1的比例反应后，再加入6倍的硼酸盐缓冲液进行稀释，然后取稀释后的液体试剂10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，经真空冷冻干燥即可；
6、检测酸性磷酸酶的固体试剂垫：将包含有柠檬酸0.1~75g/L,磷酸苯二钠0.1~90g/L，4-氨基安替比林0.1~65g/L，氢氧化钠0.1~88g/L组分的底物液倍比稀释2次后得到的稀释液10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；
其中所用的酸性磷酸酶显色液中包括以下组分:铁氰化钾0.1~100g/L、碳酸氢钠0.1~100g/L、氢氧化钠0.01~10g/L；
7、检测弹性蛋白酶的固体试剂垫：由缓冲液、底物溶液配制后取10μL置于直径5.5mm的试剂垫载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）而成；其中缓冲液为0.1~1.0M的磷酸盐或者Tris-HCl缓冲液，pH6.0~9.0，底物溶液为地衣红弹性蛋白或刚果红弹性蛋白，浓度0.1~5mg/L；
其中所用的弹性蛋白酶显色液中包括以下组分：盐酸、乙酸、硝酸或硫酸溶液50~80%（V/V）；
8、检测果糖的固体试剂垫：底物溶液配制后，取10μL置于直径5.5mm的载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）即可；其中底物溶液中含有碘硝基四唑紫、氯化硝基四氮唑蓝或噻唑蓝，浓度为250~300μmol/L；
其中检测果糖所用的果糖脱氢酶溶液由缓冲液和果糖脱氢酶组成，缓冲液为200~300μmol/L的磷酸钾或磷酸钠，pH4.5~5.0；果糖脱氢酶浓度为：2.0~6.0U/ml；
9、检测中性α-葡萄糖苷酶固体试剂垫：由缓冲液、底物溶液配制后涂覆于载体上，除湿干燥（温度18~25℃，湿度≤30%）而成；其中缓冲液中磷酸氢二钾12.1~46.4g/L,磷酸二氢钾21.4~43.6g/L，pH6.0~9.0，底物溶液的浓度为0.1~1g/L，底物为X-α-D吡喃葡萄糖苷。
本试剂盒的检测方法如下：
1、标本预处理：将精液标本1000g离心10分钟，得到标本液；
2、在九个反应孔中分别加入标本液25μl；第8孔（果糖检测孔）中加果糖脱氢酶溶液25μl；
3、温育：37℃，15min；
4、加显色液：在第6孔（酸性磷酸酶检测孔）中加入酸性磷酸酶显色液25μl，在第7孔（弹性蛋白酶测试孔）中加入弹性蛋白酶显色液25μl；
5、记录结果：观察颜色变化，和试剂盒提供的比色卡进行比对，判读结果：
第1孔，pH指标：阴性显黄色，弱阳性显绿色，强阳性显蓝色；
第2孔，白细胞指标：阴性显无色，弱阳性显绿色，强阳性显蓝色；
第3孔，卵磷脂小体指标：阴性显粉红色，阳性显蓝色；
第4孔，柠檬酸指标：阴性显米黄色，阳性显橙红色；
第5孔，锌指标：阴性显蓝色，阳性显桔红色；
第6孔，酸性磷酸酶指标：阴性显红色，弱阳性显橙红色，强阳性显黄色；
第7孔，弹性蛋白酶指标：阴性显白色，弱阳性显浅蓝色，强阳性显深蓝色；
第8孔，果糖指标：阴性显淡黄色，弱阳性浅蓝色，强阳性显深蓝色；
第9孔，中性α-葡萄糖苷酶指标：阴性显白色，弱阳性显浅绿色，强阳性显蓝深绿色。

Claims (1)

1.一种精浆联检试剂盒，其特征在于：它包括下述九种检测试剂和显色液，以及开设有多个反应孔的检测卡体，所述检测试剂固化在棉浆纸、滤纸、玻璃纤维或塑料的固相载体上后制作成试剂垫分别置于所述反应孔内；
所述九种检测试剂为白细胞酯酶检测试剂、卵磷脂小体检测试剂、酸性磷酸酶检测试剂、果糖检测试剂、中性α-葡萄糖苷酶检测试剂、pH值检测试剂、柠檬酸检测试剂、锌检测试剂和弹性蛋白酶检测试剂，其中
白细胞酯酶检测试剂由Tris-HCl缓冲液，糖和5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液配制而成；所述Tris-HCl缓冲液的浓度为0.01~2mol/L，pH7.0~10.0,所述糖为蔗糖、葡萄糖、海藻糖或乳糖，浓度为30~60g/L，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸酯溶液的浓度为0.001~1mol/L；
卵磷脂小体检测试剂由硼酸盐缓冲液、锌试剂溶液和氯化锌溶液配制而成；所述硼酸盐缓冲液的pH为7~10，其中氯化钾：0.1~100g/L，硼酸：0.1~100g/L，氢氧化钠：0.01~10g/L；所述锌试剂溶液中含有0.1~100g/L的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；所述氯化锌溶液中氯化锌含量为0.1~100g/L；
酸性磷酸酶检测试剂中包括0.1~75g/L的柠檬酸，0.1~90g/L的磷酸苯二钠，0.1~65g/L的4-氨基安替比林，0.1~88g/L的氢氧化钠；
果糖检测试剂由盐酸或硫酸10~60%，间苯二酚浓度为0.1~2.0g/L配制的底物溶液组成；或由浓度为250~300μmol/L的碘硝基四唑紫、氯化硝基四氮唑蓝或噻唑蓝配制的底物溶液组成；
中性α-葡萄糖苷酶检测试剂由缓冲液、对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷溶液配制而成：其中缓冲液中磷酸氢二钾12.1~46.4g/L,磷酸二氢钾21.4~43.6g/L，SDS5.0~22.5g/L，pH6.0~9.0，对硝基苯酚吡喃葡萄糖苷溶液的浓度为0.001~1mol/L；
或由缓冲液、底物溶液配制而成：其中缓冲液中磷酸氢二钾12.1~46.4g/L,磷酸二氢钾21.4~43.6g/L，pH6.0~9.0，底物溶液的浓度为0.1~1g/L，底物为X-α-D吡喃葡萄糖苷；
pH值检测试剂由0.5~100g/L的溴百里酚蓝钠盐和纯化水配制而成；
柠檬酸检测试剂由硫酸铁铵溶液和磺基水杨酸溶液按1:15的比例配制而成，其中硫酸铁铵溶液的浓度为0.001~1mol/L，磺基水杨酸溶液的浓度为0.001~1mol/L；
锌检测试剂由硼酸盐缓冲液和锌试剂溶液按10:1的比例配制而成，其中硼酸盐缓冲液的pH值为7.0~10.0，包括以下组分：氯化钾0.1~100g/L，硼酸0.1~100g/L，氢氧化钠0.01~10g/L；所述锌试剂溶液中含有0.1~100g/L的5-(2-羧基苯基)-1-(2-羟基-5-磺基苯基)-3-苯基甲单钠盐；
弹性蛋白酶检测试剂由pH6.0~9.0，0.1~1.0M的磷酸盐或者Tris-HCl缓冲液与浓度0.1~5mg/L的地衣红弹性蛋白或刚果红弹性蛋白配制而成；
所述显色液包括酸性磷酸酶显色液或/和果糖脱氢酶溶液或/和中性α-葡萄糖苷酶显色液或/和弹性蛋白酶显色液；其中
所述酸性磷酸酶显色液中包括铁氰化钾0.1~100g/L、碳酸氢钠0.1~100g/L和氢氧化钠0.01~10g/L；
果糖脱氢酶溶液由pH4.5~5.0、200~300μmol/L磷酸钾或磷酸钠缓冲液和浓度为2.0~6.0U/ml的果糖脱氢酶组成；
中性α-葡萄糖苷酶显色液为0.1~2.0mol/L的氯化铁溶液；
弹性蛋白酶显色液中含有V/V为50~80%的酸液，所述酸液为盐酸、乙酸、硝酸或硫酸。
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