CN106645351B - 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建 - Google Patents

一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建 Download PDF

Info

Publication number
CN106645351B
CN106645351B CN201710039883.0A CN201710039883A CN106645351B CN 106645351 B CN106645351 B CN 106645351B CN 201710039883 A CN201710039883 A CN 201710039883A CN 106645351 B CN106645351 B CN 106645351B
Authority
CN
China
Prior art keywords
nanometer rods
ceo
cuo
hetero
zearalenone
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710039883.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106645351A (zh
Inventor
吴丹
张彤
任祥
韩清志
邢彬
张勇
魏琴
张国庆
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Jinan
Original Assignee
University of Jinan
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Jinan filed Critical University of Jinan
Priority to CN201710039883.0A priority Critical patent/CN106645351B/zh
Publication of CN106645351A publication Critical patent/CN106645351A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106645351B publication Critical patent/CN106645351B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/28Electrolytic cell components
    • G01N27/30Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
    • G01N27/327Biochemical electrodes, e.g. electrical or mechanical details for in vitro measurements
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明涉及基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建,属于新型功能材料,新型传感器构建技术领域。基于抗原抗体之间良好的特异性,该传感器利用Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2‑CuO纳米棒CeO2‑CuO‑NH2‑Au NPs分散液为基底材料,Au@Ag异质结纳米棒和硫堇为标记物通过层层自组装构建了夹心型免疫传感器。本发明构建的电化学免疫传感器表现出灵敏度高、检出限低、重现性好和稳定性高的特点,对玉米赤霉烯酮的检测具有重要的意义。

Description

一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的 构建
技术领域
本发明涉及一种贵金属纳米材料电化学免疫传感器的制备方法及应用。具体是采用CeO2-CuO-NH2-Au NPs作为基底材料,Au@Ag异质结纳米棒和硫堇作为二抗标记物,构建了夹心型免疫传感器并实现了对玉米赤霉烯酮的特异性检测,属于新型生物传感技术的发展和新型传感方法构建技术领域。
背景技术
玉米赤霉烯酮作为一种真菌毒素又名F-2毒素,主要在有赤霉病的玉米中分离得到。玉米赤霉烯酮能污染玉米、小麦、小米等农作物,同时由于它具有雌激素作用,还会影响动物的繁殖技能甚至会导致动物死亡。传统的检测一般都采用液相色谱、气相色谱、质谱和毛细管电泳法等方法,但是这些方法大都存在一定的局限性,如对所需仪器设备要求过高、样品前处理比较复杂等,而电化学传感器具有操作简便、成本低等优点,备受人们的关注。
本发明基于纳米功能材料构建了一种新型的夹心型电化学免疫传感器,用于玉米赤霉烯酮的检测。利用CeO2-CuO-NH2-Au NPs作为基底材料,Au@Ag异质结纳米棒和硫堇作为二抗标记物构建了夹心型免疫传感器,实现了对玉米赤霉烯酮的检测。测试结果显示,上述方法制备的电化学免疫传感器检测灵敏度高、选择性好、重现性好、稳定性高并且易于小型化,一定程度上解决了仪器设备成本问题,基于上述发现,发明人完成了本发明。
发明内容
本发明的目的之一是基于CeO2-CuO-NH2-Au NPs为基底材料,利用Au@Ag异质结纳米棒和硫堇为标记层,构建了一种夹心型的快速超灵敏的电化学免疫传感器。
本发明的目的之二是提供一种基于Au@Ag异质结纳米棒的电化学免疫传感器的制备方法,该方法制备的传感器具有稳定性和选择性好以及灵敏度高的特点。
本发明的目的之三是实现了所述电化学免疫传感器的构建并且对玉米赤霉烯酮进行了有效的检测,实现了所述电化学免疫传感器测定玉米赤霉烯酮的作用。
本发明的技术方案如下:
1. 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建
(1)用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极,超纯水清洗干净;将6 µL 1.0~1.6mg/mL Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液滴加到电极表面,室温下晾干成膜;
(2)依次滴加6 µL 1~5 µg/mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN,3 µL 质量分数为0.5% ~ 2%的BSA溶液到电极表面,超纯水洗净,室温下晾干;
(3)滴加6 µL 10-4~100 ng/mL的一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮到电极表面,孵化2 h,超纯水冲洗,室温下晾干;
(4)滴加6 µL Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇Th的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th,超纯水冲洗,室温下晾干,制得一种夹心型免疫传感器。
2. Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液的制备
(1)CeO2纳米棒的制备
将10~200 mg CeCl3·7H2O在磁力搅拌下溶解于1~50 mL无水乙醇中并加入1.3 mL0.75 mol/L的H2SO4,将得到的白色悬浮液转移到聚四氟乙烯内衬的高压反应釜中,于10~200 °C下加热1~50 h,将产物离心分离后加入到饱和氢氧化钠醇溶液中静置1~10天,将产物洗涤干燥即得到CeO2纳米棒;
(2)CeO2-CuO纳米棒的制备
将1~10 mg Cu(CH3COO)2·H2O溶解到16 mL乙醇中,然后将1~100 mg CeO2纳米棒加入上述溶液中并在1~200 °C条件下反应12 h,将产物离心分离并在80 °C下干燥1~10 h制得CeO2-CuO纳米棒;
(3)Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs的制备
将制得的CeO2-CuO纳米棒加入到50 mL无水乙醇中,并加入1 mL三氨丙基三乙氧基硅烷70 °C下加热2 h,通过离心分离得到氨基化CeO2-CuO,将氨基化CeO2-CuO加入Au NPs洗涤干燥即得Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs。
3. Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
(1)Au@Ag异质结结纳米棒的制备
将1~200 mg硝酸银、0.6 mL 20 mg/mL氯金酸及0.5640 g PDDA同时加入到140 mL乙二醇溶液中,在195 °C条件下反应80 h,将产物离心分离并用超纯水洗涤即得Au@Ag异质结纳米棒;
(2)Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
将0.5 mL 1.0 mg/mL Au@Ag 异质结纳米棒样品溶于1.0 mL超纯水中,并加入0.1mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN和硫堇,4 °C下振荡1~5 h,得到的产物14500 rpm离心分离,固体重新分散在蒸馏水中即为Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th。
4. 玉米赤霉烯酮的检测
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为辅助电极,所制备的免疫传感器为工作电极,在10 mL的含有浓度为4~6 mmol/L铁氰化钾和10-2~10 mmol/L硝酸钾溶液中进行测试;
(2)用方波伏安法对玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测,其电压测试范围为0V ~0.6V;
(3)当背景电流趋于稳定后,通过记录玉米赤霉烯酮加入前后的传感器的峰电流值的变化,绘制工作曲线。
本发明的有益成果
(1)本发明的发明人首次将Au@Ag异质结纳米棒作为二抗标记物应用到电化学免疫传感器的制备当中,Au@Ag异质结纳米棒能够很好的连接玉米赤霉烯酮抗体,同时具有很强的电子传递能力,使电化学免疫传感器的灵敏度得以提高。
(2)在本发明的制备方法中,将氨基化的CeO2-CuO与金纳米颗粒的复合物CeO2-CuO-NH2-Au NPs作为基底材料,能够加速电极表面的电子传递,并且Au易于牢固的和抗体连接,提高了传感器的稳定性。
(3)本发明采用硫堇作为电子媒介体,构建了一个夹心型电化学免疫传感器,并且对玉米赤霉烯酮进行了有效的检测,此方法操作简单,耗时短且降低了成本。
(4)本发明制备的电化学免疫传感器用于玉米赤霉烯酮的检测,该电化学传感器稳定性高,重现性好,检测限低,线性范围宽,可以实现简单、快速、高灵敏和特异性检测。
具体实施方式
实施例1 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建
(1)用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极,超纯水清洗干净;将6 µL1.0 mg/mL Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液滴加到电极表面,室温下晾干成膜;
(2)依次滴加6 µL 1 µg/mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN,3 µL 质量分数为0.5%的BSA溶液到电极表面,超纯水洗净,室温下晾干;
(3)滴加6 µL 10-4~100 ng/mL的一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮到电极表面,孵化2 h,超纯水冲洗,室温下晾干;
(4)滴加6 µL Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th,超纯水冲洗,室温下晾干,制得一种夹心型免疫传感器。
实施例2 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建
(1)用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极,超纯水清洗干净;将6 µL 1.2 mg/mL Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液滴加到电极表面,室温下晾干成膜;
(2)依次滴加6 µL 3.5 µg/mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN,3 µL 质量分数为1%的BSA溶液到电极表面,超纯水洗净,室温下晾干;
(3)滴加6 µL 10-4~100 ng/mL的一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮到电极表面,孵化2 h,超纯水冲洗,室温下晾干;
(4)滴加6 µL Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th,超纯水冲洗,室温下晾干,制得一种夹心型免疫传感器。
实施例3 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建
(1)用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极,超纯水清洗干净;将6 µL1.6 mg/mL Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液滴加到电极表面,室温下晾干成膜;
(2)依次滴加6 µL 5 µg/mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN,3 µL 质量分数为2%的BSA溶液到电极表面,超纯水洗净,室温下晾干;
(3)滴加6 µL 10-4~100 ng/mL的一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮到电极表面,孵化2 h,超纯水冲洗,室温下晾干;
(4)滴加6 µL Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th,超纯水冲洗,室温下晾干,制得一种夹心型免疫传感器。
实施例4 Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液的制备
(1)CeO2纳米棒的制备
将10 mg CeCl3·7H2O在磁力搅拌下溶解于1 mL无水乙醇中并加入1.3 mL 0.75mol/L的H2SO4,将得到的白色悬浮液转移到聚四氟乙烯内衬的高压反应釜中,于10 °C下加热1 h,将产物离心分离后加入到饱和氢氧化钠醇溶液中静置1天,将产物洗涤干燥即得到CeO2纳米棒;
(2)CeO2-CuO纳米棒的制备
将1 mg Cu(CH3COO)2·H2O溶解到16 mL乙醇中,然后将1 mg CeO2纳米棒加入上述溶液中并在1 °C条件下反应12 h,将产物离心分离并在80 °C下干燥1 h制得CeO2-CuO纳米棒;
(3)Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs的制备
将制得的CeO2-CuO纳米棒加入到50 mL无水乙醇中,并加入1 mL三氨丙基三乙氧基硅烷70 °C下加热2 h,通过离心分离得到氨基化CeO2-CuO,将氨基化CeO2-CuO加入Au NPs洗涤干燥即得Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs。
实施例5 Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液的制备
(1)CeO2纳米棒的制备
将145 mg CeCl3·7H2O在磁力搅拌下溶解于20 mL无水乙醇中并加入1.3 mL0.75mol/L的H2SO4,将得到的白色悬浮液转移到聚四氟乙烯内衬的高压反应釜中,于130 °C下加热23 h,将产物离心分离后加入到饱和氢氧化钠醇溶液中静置5天,将产物洗涤干燥即得到CeO2纳米棒;
(2)CeO2-CuO纳米棒的制备
将6 mg Cu(CH3COO)2·H2O溶解到16 mL乙醇中,然后将60 mg CeO2纳米棒加入上述溶液中并在150 °C条件下反应12 h,将产物离心分离并在80 °C下干燥5 h制得CeO2-CuO纳米棒;
(3)Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs的制备
将制得的CeO2-CuO纳米棒加入到50 mL无水乙醇中,并加入1 mL三氨丙基三乙氧基硅烷70 °C下加热2 h,通过离心分离得到氨基化CeO2-CuO,将氨基化CeO2-CuO加入Au NPs洗涤干燥即得Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs。
实施例6 Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液的制备
(1)CeO2纳米棒的制备
将200 mg CeCl3·7H2O在磁力搅拌下溶解于50 mL无水乙醇中并加入1.3 mL0.75mol/L的H2SO4,将得到的白色悬浮液转移到聚四氟乙烯内衬的高压反应釜中,于200 °C下加热50 h,将产物离心分离后加入到饱和氢氧化钠醇溶液中静置10天,将产物洗涤干燥即得到CeO2纳米棒;
(2)CeO2-CuO纳米棒的制备
将10 mg Cu(CH3COO)2·H2O溶解到16 mL乙醇中,然后将100 mg CeO2纳米棒加入上述溶液中并在200 °C条件下反应12 h,将产物离心分离并在80 °C下干燥10 h制得CeO2-CuO纳米棒;
(3)Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs的制备
将制得的CeO2-CuO纳米棒加入到50 mL无水乙醇中,并加入1 mL三氨丙基三乙氧基硅烷70 °C下加热2 h,通过离心分离得到氨基化CeO2-CuO,将氨基化CeO2-CuO加入Au NPs洗涤干燥即得Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs。
实施例7 Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
(1)Au@Ag异质结纳米棒的制备
将1 mg硝酸银、0.6 mL 20 mg/mL氯金酸及0.5640 g PDDA同时加入到140 mL乙二醇溶液中,在195 °C条件下反应80 h,将产物离心分离并用超纯水洗涤即得Au@Ag异质结纳米棒;
(2)Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
将0.5 mL 1.0 mg/mL Au@Ag异质结纳米棒样品溶于1.0 mL超纯水中,并加入0.1mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN和硫堇,4 °C下振荡1 h,得到的产物14500 rpm离心分离,固体重新分散在蒸馏水中即为Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th。
实施例8 Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
(1)Au@Ag异质结纳米棒的制备
将140 mg硝酸银、0.6 mL 20 mg/mL氯金酸及0.5640 g PDDA同时加入到140 mL乙二醇溶液中,在195 °C条件下反应80 h,将产物离心分离并用超纯水洗涤即得Au@Ag异质结纳米棒;
(2)Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
将0.5 mL 1.0 mg/mLAu@Ag异质结纳米棒样品溶于1.0 mL超纯水中,并加入0.1mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN和硫堇,4 °C下振荡3 h,得到的产物14500 rpm离心分离,固体重新分散在蒸馏水中即为Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th。
实施例9 Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
(1)Au@Ag异质结纳米棒的制备
将200 mg硝酸银、0.6 mL 20 mg/mL氯金酸及0.5640 g PDDA同时加入到140 mL乙二醇溶液中,在195 °C条件下反应80 h,将产物离心分离并用超纯水洗涤即得Au@Ag异质结纳米棒;
(2)Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
将0.5 mL 1.0 mg/mLAu@Ag异质结纳米棒样品溶于1.0 mL超纯水中,并加入0.1mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN和硫堇,4 °C下振荡5 h,得到的产物14500 rpm离心分离,固体重新分散在蒸馏水中即为Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th。
实施例10 玉米赤霉烯酮的检测
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为辅助电极,所制备的免疫传感器为工作电极,在10 mL的含有浓度为4 mmol/L铁氰化钾和10-2 mmol/L硝酸钾溶液中进行测试;
(2)用方波伏安法对玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测,其电压测试范围为0V ~0.6V;
(3)当背景电流趋于稳定后,通过记录玉米赤霉烯酮加入前后的传感器的峰电流值的变化,绘制工作曲线。
实施例11 玉米赤霉烯酮的检测
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为辅助电极,所制备的免疫传感器为工作电极,在10 mL的含有浓度为5 mmol/L铁氰化钾和1 mmol/L硝酸钾溶液中进行测试;
(2)用方波伏安法对玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测,其电压测试范围为0V ~0.6V;
(3)当背景电流趋于稳定后,通过记录玉米赤霉烯酮加入前后的传感器的峰电流值的变化,绘制工作曲线。
实施例12 玉米赤霉烯酮的检测
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为辅助电极,所制备的免疫传感器为工作电极,在10 mL的含有浓度为6 mmol/L铁氰化钾和10 mmol/L硝酸钾溶液中进行测试;
(2)用方波伏安法对玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测,其电压测试范围为0V ~0.6V;
(3)当背景电流趋于稳定后,通过记录玉米赤霉烯酮加入前后的传感器的峰电流值的变化,绘制工作曲线。

Claims (4)

1.一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极,超纯水清洗干净;将6 µL 1.0~1.6 mg/mL Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液滴加到电极表面,室温下晾干成膜;
(2)依次滴加6 µL 1~5 µg/mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN,3 µL 质量分数为0.5% ~2%的BSA溶液到电极表面,超纯水洗净,室温下晾干;
(3) 滴加6 µL 10-4~100 ng/mL的一系列不同浓度的玉米赤霉烯酮到电极表面,孵化2h,超纯水冲洗,室温下晾干;
(4)滴加6 µL Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇Th的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th于步骤(3)所得到的电极的表面,超纯水冲洗,室温下晾干,制得一种夹心型免疫传感器。
2.如权利要求1所述的一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建方法,其特征在于,所述的Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs分散液,制备步骤如下:
(1)CeO2纳米棒的制备
将10~200 mg CeCl3·7H2O在磁力搅拌下溶解于1~50 mL无水乙醇中并加入1.3 mL0.75 mol/L的H2SO4,将得到的白色悬浮液转移到聚四氟乙烯内衬的高压反应釜中,于10~200 °C下加热1~50 h,将产物离心分离后加入到饱和氢氧化钠醇溶液中静置1~10天,将产物洗涤干燥即得到CeO2纳米棒;
(2)CeO2-CuO纳米棒的制备
将1~10 mg Cu(CH3COO)2·H2O溶解到16 mL乙醇中,然后将1~100 mg CeO2纳米棒加入上述溶液中并在1~200 °C条件下反应12 h,将产物离心分离并在80 °C下干燥1~10 h制得CeO2-CuO纳米棒;
(3)Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs的制备
将制得的CeO2-CuO纳米棒加入到50 mL无水乙醇中,并加入1 mL三氨丙基三乙氧基硅烷70 °C下加热2 h,通过离心分离得到氨基化CeO2-CuO,将氨基化CeO2-CuO加入Au NPs洗涤干燥即得Au纳米颗粒杂化氨基化CeO2-CuO纳米棒CeO2-CuO-NH2-Au NPs。
3.如权利要求1所述的一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建方法,其特征在于,所述的Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th,制备步骤如下:
(1)Au@Ag异质结纳米棒的制备
将1~200 mg硝酸银、0.6 mL 20 mg/mL氯金酸及0.5640 g PDDA同时加入到140 mL乙二醇溶液中,在195 °C条件下反应80 h,将产物离心分离并用超纯水洗涤即得Au@Ag异质结纳米棒;
(2)Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th的制备
将0.5 mL 1.0 mg/mL Au@Ag 异质结纳米棒样品溶于1.0 mL超纯水中,并加入0.1 mL的玉米赤霉烯酮抗体anti-ZEN和硫堇,4 °C下振荡1~5 h,得到的产物14500 rpm离心分离,固体重新分散在蒸馏水中即为Au@Ag异质结纳米棒负载硫堇的二抗标记物Au@Ag@Ab2@Th。
4.如权利要求1所述的一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器用于玉米赤霉烯酮的检测方法,其特征在于,检测步骤如下:
(1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为辅助电极,所制备的免疫传感器为工作电极,在10 mL的含有浓度为4~6 mmol/L铁氰化钾和10-2~10 mmol/L硝酸钾溶液中进行测试;
(2)用方波伏安法对玉米赤霉烯酮标准溶液进行检测,其电压测试范围为0V ~ 0.6V;
(3)当背景电流趋于稳定后,通过记录玉米赤霉烯酮加入前后的传感器的峰电流值的变化,绘制工作曲线。
CN201710039883.0A 2017-01-19 2017-01-19 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建 Active CN106645351B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710039883.0A CN106645351B (zh) 2017-01-19 2017-01-19 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710039883.0A CN106645351B (zh) 2017-01-19 2017-01-19 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106645351A CN106645351A (zh) 2017-05-10
CN106645351B true CN106645351B (zh) 2019-01-15

Family

ID=58841964

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710039883.0A Active CN106645351B (zh) 2017-01-19 2017-01-19 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106645351B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107589166B (zh) * 2017-09-07 2019-07-02 漳州出入境检验检疫局综合技术服务中心 一种基于TiO2介观晶体的免标记型玉米赤霉烯酮光电化学检测方法和传感器
CN108918853B (zh) * 2018-04-08 2021-03-12 山东理工大学 一种Pd@Ag@CeO2标记的免疫传感器的制备方法及应用
CN108593920B (zh) * 2018-05-03 2021-03-23 上海市农业科学院 一种检测玉米赤霉烯酮的免疫传感器及其制备方法
CN112986348B (zh) * 2021-03-30 2022-10-11 济南大学 一种基于过渡金属硫化物的双模式电化学生物传感器的制备与应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101577228A (zh) * 2009-06-16 2009-11-11 济南大学 一种三维结构的异质结器件的制备方法
CN203178279U (zh) * 2013-04-23 2013-09-04 济南大学 一种同时检测三种真菌毒素的印刷电极免疫传感器
CN104297464A (zh) * 2014-09-06 2015-01-21 济南大学 一种原位生成CdS真菌毒素光电化学传感器制备方法及应用
CN104865242A (zh) * 2015-03-02 2015-08-26 济南大学 一种基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+构建的真菌毒素类和激素类电致化学发光传感器的制备方法及应用
CN105954339A (zh) * 2016-04-25 2016-09-21 山东理工大学 一种基于CeO2@Cu2O/Au@Pt的夹心型免疫传感器的制备方法及应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101577228A (zh) * 2009-06-16 2009-11-11 济南大学 一种三维结构的异质结器件的制备方法
CN203178279U (zh) * 2013-04-23 2013-09-04 济南大学 一种同时检测三种真菌毒素的印刷电极免疫传感器
CN104297464A (zh) * 2014-09-06 2015-01-21 济南大学 一种原位生成CdS真菌毒素光电化学传感器制备方法及应用
CN104865242A (zh) * 2015-03-02 2015-08-26 济南大学 一种基于NPCo/Co3O4-Au/RuSi@Ru(bpy)32+构建的真菌毒素类和激素类电致化学发光传感器的制备方法及应用
CN105954339A (zh) * 2016-04-25 2016-09-21 山东理工大学 一种基于CeO2@Cu2O/Au@Pt的夹心型免疫传感器的制备方法及应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A label-free amperometric immunosensor for detection of zearalenone based on trimetallic Au-core/AgPt-shell nanorattles and mesoporous carbon;Lei Liu等;《Analytica Chimica Acta》;20140721;第847卷;第29-36页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN106645351A (zh) 2017-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106645351B (zh) 一种基于Au@Ag异质结纳米棒的玉米赤霉烯酮免疫传感器的构建
CN102749373B (zh) 一种环境雌激素电化学免疫传感器的制备方法及应用
CN103424448B (zh) 一种电化学适配体传感器检测痕量赭曲霉毒素a的方法
CN104459124B (zh) 一种基于HS-β-CD-Ag-GOD共轭物的电化学免疫传感器的制备方法及应用
CN110806439B (zh) 一种同时检测玉米赤霉烯酮和伏马毒素b1的方法
CN112280831A (zh) 一种基于DNA walker的电化学生物传感器的制备方法及其应用
CN112540073B (zh) 一种基于Fc-apt放大电化学发光信号的双输出模式传感器的制备方法及其应用
CN107389949A (zh) 一种用于pcsk9蛋白检测的电化学免疫传感器制备方法
CN104391117B (zh) 一种基于PPy-NH2GO-Ag2Se@CdSe的胃癌抗原电致化学发光传感器的制备方法及应用
CN103454426A (zh) 纳米金/壳聚糖-石墨烯-亚甲蓝修饰的免疫传感器的制备方法
CN108845015A (zh) 一种基于三氧化钨复合材料的光电化学黄曲霉毒素b1传感器的制备方法及应用
CN106568973A (zh) 一种基于MoS2/Au‑Pd复合物的原降钙素电化学免疫传感器的制备方法及应用
CN104391123A (zh) 一种基于花状纳米氧化锌微球和金钯纳米花复合材料构建的生物传感器的制备方法及应用
CN104502593A (zh) 一种电化学胃癌肿瘤标志物无标记免疫传感器的制备方法
CN110530853A (zh) 基于可视化bpe-ecl技术检测黄曲霉毒素b1的方法
CN109115855A (zh) 一种检测阿尔茨海默症标志物的电化学免疫传感器的制备方法及应用
CN110441528B (zh) 一种基于核壳结构Mo2C@C纳米球的心肌钙蛋白I免疫传感器的构建
CN111707721B (zh) 一种17β-雌二醇电化学发光适配体传感器的制备方法及应用
CN106124586A (zh) 一种同时检测两种乙肝病毒标志物HBs/HBe的传感器的制备方法及应用
CN103235123A (zh) 一种检测禽呼肠孤病毒的电化学免疫传感器及其制备方法
CN111198222B (zh) 一种检测前列腺特异性抗原的夹心型电化学免疫传感器的制备及使用方法
Wang et al. Co 3 O 4/PAn MAGNETIC NANOPARTICLE-MODIFIED ELECTROCHEMICAL IMMUNOSENSOR FOR CHLORPYRIFOS.
CN106124584B (zh) 一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器的制备方法及应用
CN105758912A (zh) 一种纳米TiO2-MoS2光电Saos-2 cell细胞传感器的制备及其应用
CN111721820A (zh) 一种非标记型检测前列腺特异性抗原的电化学免疫传感器及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant