CN106619493B

CN106619493B - 一种卡巴他赛注射液及其制备方法

Info

Publication number: CN106619493B
Application number: CN201510741289.7A
Authority: CN
Inventors: 朱朝清; 熊冠军; 赵栋; 何苗; 高国玉; 王利春; 王晶翼
Original assignee: Sichuan Kelun Pharmaceutical Research Institute Co Ltd
Current assignee: Sichuan Kelun Pharmaceutical Research Institute Co Ltd
Priority date: 2015-11-04
Filing date: 2015-11-04
Publication date: 2019-09-13
Anticipated expiration: 2035-11-04
Also published as: CN106619493A

Abstract

本发明涉及一种卡巴他赛注射液及其制备方法，该卡巴他赛注射液由以下原料制成：卡巴他赛、聚山梨酯80、无水乙醇和适量pH调节剂柠檬酸，其中原料聚山梨酯80与无水乙醇的重量比为0.5‑3:1，原料聚山梨酯80与卡巴他赛的重量比为10‑56：1。本发明提供了一种卡巴他赛注射液的制备方法，通过该制备方法中特定的原料加入比例以及原料加入顺序、pH值调节、充氮保护等步骤，使得制备得到的卡巴他赛注射液，总杂质含量低，外观无色澄明，稳定性好，并且，发明人意外发现，在本发明的制备过程中，通过调整聚山梨酯与无水乙醇的加料比，使得溶液不粘稠，方便后续的过滤操作，降低了制备方法的难度，使得制备方法容易操作完成。

Description

一种卡巴他赛注射液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种紫杉醇类药物制剂，尤其涉及一种卡巴他赛注射液及其制备方法。

背景技术

前列腺癌是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤，发病随年龄而增长，其发病率有明显的地区差异，欧美地区较高，亚洲地区发病率较低。前列腺癌的发病率和死亡率仅次于肺癌，位居癌症死亡的第二位。在大多数病例中，前列腺癌在年龄较大的男性中发展缓慢，在亚洲，其发病率低于西方国家，但近年来呈迅速上升趋势。

美国癌症学会统计，前列腺癌占到了美国每年新确诊癌症病例的四分之一，2010年确诊的前列腺癌病患约22万，有超过32,000例患者死于该病。在欧洲，每年的死亡数字是27,000例，但全球前列腺癌死亡数远远超过这个数字。由于前列腺癌的发病年龄通常较晚，因而患者人群呈现出老龄化趋势。前列腺癌药物的市场前景十分广阔。市场调研公司Decision Resources预计，前列腺癌药物的市场价值将从2009年的近40亿美元，增长至2014年的57亿美元；2019年将进一步增至87亿美元。

目前，前列腺癌常用的药物治疗有如下几种：

(1)抗雄激素治疗：抗雄激素制剂主要作用在雄激素对前列腺细胞接受器的阻断，使癌细胞无法接收到雄激素的讯息而不会继续生长，抗雄激素药物有：氟他胺片、康士得(比卡鲁胺片)等。

(2)化学治疗：作为辅助性治疗往往可以起到内分泌治疗及放疗无法替代的效果。前列腺癌最敏感的化疗药物为复方环磷酰胺片，其他化疗药物还有顺铂(PDD)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)、磷酸雌二醇氮芥(EMP)、紫杉烷类等。

(3)中药治疗：根据不同脉相辨证治疗，有一定治疗效果。

(4)免疫治疗：近年来免疫与肿瘤的关系颇为引人关注，免疫药物是通过提高机体免疫力，提高抗病能力来抑制肿瘤细胞的生长，同时它也可保护细胞功能，减少内分泌药物和抗癌药物对机体的损害。目前临床上应用的有凯因益生(重组人干扰素α2b注射液)、欣吉尔(注射用重组人白介素-2(125Ala))等。

(5)双磷酸盐药物治疗：主要应用在前列腺癌骨转移病人，进行靶向治疗等。

卡巴他赛(cabazitaxel)是一种抗肿瘤药物，属于紫杉烷类，由红豆杉萃取的前体半合成制备得到。卡巴他赛是一种微管抑制剂，与微管蛋白结合，促进成微管，同时抑制其组装拆卸。

卡巴他赛分子式为C45H57NO14，白色结晶，不溶于水、可溶于乙醇，化学名为(2R,3S)-3-叔丁氧羰基氨基-2-羟基-3-苯基丙酸-4α-乙酰基-2α-苯甲酰基-5β,20-环氧-1β-羟基-7β,10β-二甲氧基-9-氧-11-紫杉烯-13α-酯，其结构式如下所示：

2010年6月17日，美国食品药品管理局(FDA)批准了卡巴他赛作为二线疗法用于治疗前列腺癌。该药物与泼尼松(prednisone)联用，以治疗既往用含多烯紫杉醇治疗方案的转移性激素难治前列腺癌(mHRPC)患者。欧洲药品局和其他国家的药品管理机构也正在考虑批准使用卡巴他赛。卡巴他赛为去势抵抗性前列腺癌患者提供了一种新型治疗。虽然紫杉烷的使用并未带来治疗性的突破，但却延长了存活期，这给前列腺癌患者带来了希望，虽然只获得了中度收益，但证实了前列腺癌免疫治疗的有效性。

紫杉烷类药物有口服和注射剂等形式，但对于卡巴他赛来说，常用的制剂形式仍然是卡巴他赛注射液。卡巴他赛注射液的研究大致经历了两个阶段，第一个阶段是采用乙醇和蓖麻油与卡巴他赛混合直接用来制备注射液，这种卡巴他赛注射液虽然溶解性好，但是稳定性存在问题。因此，为解决这一问题，研究人员采用聚山梨酯80作为溶解剂溶解卡巴他赛后再过滤，制备得到卡巴他赛浓缩液并作为商品出售，再配以乙醇溶剂作为配套溶剂，在使用前将卡巴他赛浓缩液与乙醇溶剂混合，这样的方式虽然操作繁琐，但是很好的解决了卡巴他赛注射液的稳定性问题，安全性好。

发明人在制备大批量的卡巴他赛注射液的过程中发现，虽然后一阶段提供的卡巴他赛浓缩液能够保证稳定性和安全性，但是在这样的卡巴他赛浓缩液的制备过程中，聚山梨酯80与卡巴他赛直接混合溶解搅拌均匀时，由于聚山梨酯80为粘稠状液体，不仅不易搅拌溶解，而且在溶解后的混合液也不易过滤，包装到容器中也非常困难，原料损耗大，制备方法难度大。

发明内容

针对以上不足，本发明的目的之一在于提供一种卡巴他赛注射液的制备方法。

一种卡巴他赛注射液的制备方法，该卡巴他赛注射液由以下原料制成：卡巴他赛、聚山梨酯80、无水乙醇和适量pH调节剂柠檬酸，其中原料聚山梨酯80与无水乙醇的重量比为0.5-3:1，优选为1-2:1，进一步优选为2:1，所述原料聚山梨酯80与卡巴他赛的重量比为10-56：1，优选为25-28:1，例如26:1，该方法包括下列步骤：

(1)将柠檬酸加入到聚山梨酯80中溶解，调节pH值为2.9-5.4，优选pH值为3.2-3.9，搅拌均匀得到第一溶液；

(2)将无水乙醇加入上述第一溶液中搅拌均匀得到第二溶液；

(3)将卡巴他赛加入上述第二溶液中，搅拌至完全溶解；

(4)将步骤(3)得到的溶液过滤，然后冷冻干燥得到。

在卡巴他赛注射液的制备过程中，将聚山梨酯80与卡巴他赛直接混合溶解搅拌均匀后，由于聚山梨酯80为粘稠状液体，不易溶解及不易搅拌均匀，该混合液在过滤时困难，加大制备难度。进一步的，在将这样直接混合制备得到的混合液进行过滤后，包装到容器的过程中也非常困难，原料损耗大。发明人意外发现，在该制备过程中以1/3-2倍聚山梨酯80量加入无水乙醇而得到的混合液，可以显著增强卡巴他赛的溶解性，其中，以1倍聚山梨酯80量的加入量来加入无水乙醇，卡巴他赛的溶解更快，但是以0.5倍聚山梨酯80量的加入量来加入无水乙醇，不仅仅可以增强卡巴他赛的溶解性，而且溶解后溶液不粘稠，非常适合后期的过滤和包装，降低原料的损耗量，使制备方法容易操作。

进一步的，发明人考察了制备方法过程中加入无水乙醇对于卡巴他赛溶液在常温和冷藏条件下的稳定性，结果表明，加入无水乙醇后卡巴他赛溶液在常温和冷藏条件下在40小时内的稳定性良好，外观均为无色澄明，没有观察到变化，有关物质(单杂和总杂)没有增加。因此，证实了在制备方法中加入无水乙醇操作的可实现性。

在卡巴他赛注射液的制备过程中，发明人发现，需要先调节聚山梨酯溶液的pH值在2.9-5.4后，再加入卡巴他赛原料，这样的加入顺序能保证溶液的稳定性。

发明人发现，柠檬酸调节的聚山梨酯的pH值最终影响得到的卡巴他赛注射液的pH值，并且经实验证实，在本发明的制备方法中，卡巴他赛注射液的pH值通常低于柠檬酸调节的聚山梨酯的pH值约0.2-0.4，因此，为便于制备，控制制备方法过程中柠檬酸调节聚山梨酯的pH值来实现对卡巴他赛注射液的pH值的控制。

优选的，上述方法中，发明人发现，为缩短制备方法的操作时间，在步骤(1)中将柠檬酸加入到少量无水乙醇中适当溶解后，再加入聚山梨酯80中进行溶解，实验证实，此处少量无水乙醇的使用量为不大于无水乙醇处方量的20％重量百分比为宜。

发明人进一步发现，在步骤(3)中卡巴他赛加入第二溶液前，将卡巴他赛加入一定量的无水乙醇中适当溶解，再加入第二溶液中，可以进一步缩短溶解时间，即缩短制备方法的操作时间。

优选的，上述冷冻干燥控制无水乙醇残留量在重量百分比1％以内。

发明人发现，在卡巴他赛注射液制备过程中，注射液中残留的无水乙醇的含量对卡巴他赛注射液的稳定性影响较大，具体表现为考察在高温60℃、光照条件下，存储10天后，有关物质增大明显，因此，需要在包装前通过冷冻干燥去除无水乙醇。进一步通过对去除无水乙醇以后的无水乙醇残留量进行分析和对卡巴他赛注射液进行稳定性考察后发现，无水乙醇残留量控制在1％以下时，注射液的稳定性较好，具体表现为在高温60℃、光照条件下，存储10天后，考察无水乙醇残留量分别为重量百分比3％、2％、1％和0.5％的卡巴他赛注射液的稳定性，较存储前，存储10天后，有关物质均有增加，但无水乙醇残留量在1％时的有关物质增加量较残留量为2％和3％时的有关物质增加量，其增加幅度明显降低，而无水乙醇残留量在1％和0.5％时的有关物质增加水平相当，差异不明显，因此，综合考虑卡巴他赛注射液的稳定性和制备工艺的可操作性和经济性，控制卡巴他赛注射液的乙醇残留量在1％以内。

进一步优选的，上述冷冻干燥步骤包括：在0℃-4℃保持0.5小时-2小时后，升温至20℃-30℃，在20℃-30℃保持30小时以上。

在一个优选的实施例中，冷冻干燥步骤为：在0℃保持0.5小时后，升温至30℃，在30℃保持30小时。常规的注射剂的冷冻干燥步骤包括在-30℃～-50℃范围内进行预冻，然后逐渐阶梯升温至30℃～50℃范围干燥，步骤繁琐，然而，鉴于本发明的注射液冷冻干燥前为粘稠状液体，在冷冻干燥后仍然为粘稠状液体，本发明的冷冻干燥目的为去除无水乙醇，为使制备方法更加简单，本发明经试验证实，本发明的冷冻干燥步骤可以去除中间升温段(阶梯)，并可以不采用冷冻方式，直接采用在0℃预冻0.5小时后，直接升温至30℃保持30小时，可在满足乙醇残留量要求(重量百分比1％以内)的基础上，冷冻干燥步骤更为简单，易实现，能耗更低，更适合工艺放大。进一步的，升温阶段中，在5小时内直接匀速升温至30℃使乙醇残留量控制更佳。冷冻干燥步骤对于卡巴斯注射液的有关物质含量没有影响，单杂和总杂均未增加。

优选的，在所述步骤(4)的溶液过滤前向溶液中加入活性炭，搅拌吸附后除去活性炭，再过滤。活性炭对内毒素有较强的吸附作用，同时具有助滤脱色的作用。

优选的，所述活性炭的加入量为占溶液重量0.2％以内的(W/W％)活性炭，搅拌吸附时间为30min以内。

进一步优选的，所述活性炭的加入量为占溶液重量0.05％以内的(W/W％)活性炭，搅拌吸附时间为20min以内。

发明人通过对活性炭的考察发现，是否添加活性炭及活性炭添加量对于吸附前后注射液的活性成分卡巴他赛的含量、乙醇残留量的影响不大，发明人通过对于活性炭添加量分别为0、0.05、0.1、0.2的卡巴他赛注射液进行考察，发现搅拌吸附20分钟后，活性炭添加量为0.05、0.1、0.2的卡巴他赛注射液的有关物质含量与不添加活性炭的卡巴他赛注射液的有关物质含量有一定降低(单杂降低率在18％左右，总杂的降低率在12％左右)，但是活性炭添加量为0.05、0.1、0.2的三种卡巴他赛注射液之间的有关物质含量相当，基本无差异，并且四种样品的卡巴他赛注射液的细菌内毒素检测均为合格。

因此，在上述结果基础上，本发明制备方法遵循尽量少加辅料的原则，进一步优选采用添加量为占溶液重量0.05％的活性炭进行吸附。

优选的，上述步骤(4)中过滤采用广泛使用的0.22μm滤膜进行过滤，进一步优选为适合于有机溶剂类过滤的聚四氟乙烯0.22μm滤膜进行过滤。

在卡巴他赛注射液制备方法的探索中，将上述制备方法中步骤(3)得到的溶液采用高温灭菌，分别采用121℃灭菌12min(过度灭杀法)和115℃灭菌30min(残存概率法)后发现，两种灭菌后的样品有关物质均明显增大，残存概率法灭菌后单杂量增大7倍多，总杂量增大4倍多，过度灭杀法灭菌后单杂量增大8倍多，总杂量增大接近5倍，并且进一步的，将两种条件下灭菌后的样品在放置10天(分别在高温40℃、高温60℃、光照、冷藏、冷冻)后，灭菌后样品的溶液外观明显发生浑浊，因此，本发明的卡巴他赛注射液的制备方法中采用过滤除菌法。

优选的，上述步骤(4)中的溶液过滤后进行包装，再冷冻干燥，包装采用中性硼硅玻璃管制注射液瓶和/或覆聚四氟乙烯/乙烯共聚物膜氯化丁基橡胶塞。

本发明的卡巴他赛注射液包装时，分别采用中性硅管制西林瓶和未镀膜胶塞及中性硅管制西林瓶和覆聚四氟乙烯/乙烯共聚物膜氯化丁基橡胶塞包装，倒置考察稳定性，于高温60度、光照、室温下放置10天，结果显示，三种情况下，未镀膜胶塞外观均略有发白而覆聚四氟乙烯/乙烯共聚物膜氯化丁基橡胶塞基本无变化，在室温下，两种胶塞包装的注射液有关物质均未发生明显变化，而在光照条件下特别是在高温60度条件下，未镀膜胶塞包装的卡巴他赛注射液的有关物质较覆聚四氟乙烯/乙烯共聚物膜氯化丁基橡胶塞包装的卡巴他赛注射液的有关物质增加明显。

优选的，上述卡巴他赛注射液的制备方法还包括冷冻干燥后的充氮、压塞。

发明人发现，卡巴他赛注射液的制备中充氮保护可以提高卡巴他赛注射液的稳定性。发明人通过对冷冻干燥的卡巴他赛注射液进行充氮气保护试验，将其与不进行充氮气保护的卡巴他赛注射液进行稳定性考察，分别于高温60度、光照下放置10天，考察放置前后的卡巴他赛活性成分含量和有关物质含量，在高温60度、光照条件下，充氮气保护的卡巴他赛注射液的活性成分含量损失率显著降低，有关物质含量增加明显减少。

其中，所述卡巴他赛原料优选为卡巴他赛非丙酮合物，例如中国专利申请CN101918385A中公开的B、C、D、E、F五种无水形式或相应的乙醇化物形式晶型，也可以为卡巴他赛丙酮合物，如美国专利申请US2005065138A1中所申请的丙酮合物形式的结晶物。

其中，W/W％为重量百分比的简写。

聚山梨酯80又名吐温-80、乳化剂T80、聚氧乙烯脱水山梨醇油酸酯等，它是含有20个氧乙烯单元的聚山梨酯，是亲水性非离子表面活性剂，广泛用作稳定的水包油药物乳剂的乳化剂。聚山梨酯80还可用作香精油和油溶性维生素的增溶剂，用作口服或非胃肠道混悬剂的润湿剂。聚山梨酯广泛用于食品以及口服、非胃肠道和局部给药的制剂，通常认为是无毒、无刺激性材料。

柠檬酸，又名枸櫞酸，无色晶体，常含一分子结晶水，无臭，有很强的酸味，易溶于水。柠檬酸广泛存在于各种水果和蔬菜中，在动物的骨骼、血液、肌肉中也有分布。柠檬酸在工业，食品，化妆等行业具有广泛的用途。柠檬酸为无色半透明晶体，或白色颗粒，或白色结晶性粉末，无臭，虽有强烈酸味但令人愉快，稍有一点后涩味。它在温暖空气中渐渐风化，在潮湿空气中微有潮解性。溶于水、乙醇、乙醚，不溶于苯，微溶于氯仿，水溶液显酸性。柠檬酸其钙盐在冷水中比热水中易溶解。柠檬酸存在于人体内，主要在骨骼中。通常作为正常食物的一部分消耗。口服柠檬酸能够吸收，作为辅料使用时是无毒的。然而，过多的或频繁地使用柠檬酸会导致牙齿腐蚀。柠檬酸和枸櫞酸盐还能增强肾病患者肠道内铝的吸收，从而导致增加有害的血清铝浓度，因此建议患有肾功能不全病人，使用铝化合物来控制磷酸盐吸收时不要使用柠檬酸或含柠檬酸盐的产品。在制药工业中柠檬酸可以在多种剂型中使用。

乙醇的分子式为C₂H₅OH，也可写为EtOH，Et代表乙基，是醇类的一种，是酒的主要成份，俗称酒精，它在常温、常压下是一种易燃、易挥发的无色透明液体，它的水溶液具有特殊的、令人愉快的香味，并略带刺激性。乙醇的用途很广，可用乙醇来制造醋酸、饮料、香精、染料、燃料等。医疗上也常用体积分数为70％-75％的乙醇作消毒剂等。无水乙醇又叫无水酒精，是浓度达到99％以上的乙醇。无水乙醇是一种无色澄清液体，有灼烧味，易流动，极易从空气中吸收水分，能与水和氯仿、乙醚等多种有机溶剂以任意比例互溶，能与水形成共沸混合物(含水4.43％)，共沸点78.15℃，相对密度0.789，熔点-114.1℃，沸点78.5℃。乙醇是一种重要的有机溶剂，被广泛用于医药、涂料、卫生用品、化妆品、油脂等各个行业。

本发明中的原料无水乙醇通常是指99％(W/W％)以上的乙醇，优选达到99.5％(W/W％)以上的乙醇，但是本发明的无水乙醇也可以采用95％(W/W％)以上的乙醇。

本发明的另一目的还在于提供一种采用上述方法制备得到的卡巴他赛注射液，所述卡巴他赛注射液的pH值在5以内，优选为2.8-3.5。

发明人发现，卡巴他赛注射液的pH值范围会对注射液的稳定性有一定影响。发明人通过实验发现，卡巴他赛注射液在pH值大于5时，其在高温60度和光照条件下，稳定性差，有关物质增加较大，而pH值在5以内时，卡巴他赛注射液在高温60度和光照条件下，稳定性好，有关物质增加较小。

在一个优选的实施例中，所述卡巴他赛注射液在使用前与配套的溶剂配合溶解待使用，所述溶剂为无水乙醇溶液，优选为重量百分比为(W/W％)12％-14％的无水乙醇溶液，更优选为重量百分比为13％的无水乙醇溶液，将注射液与配套的溶剂混合，得到药液，例如浓度为9-11mg/mL的卡巴他赛药液。

在另一优选的实施例中，卡巴他赛在使用时，还需要将采用配套的溶剂溶解后的卡巴他赛药液进行稀释后再使用，卡巴他赛最终输注时适宜浓度在0.10mg/ml～0.26mg/ml之间，用作稀释的稀释剂可以为输液常用的氯化钠溶液或者葡萄糖溶液，例如0.9％(W/W％)氯化钠溶液或5％(W/W％)葡萄糖溶液。

本发明提供了一种卡巴他赛注射液的制备方法，通过该制备方法中特定的原料加入比例以及原料加入顺序、pH值调节、充氮保护等步骤，使得制备得到的卡巴他赛注射液，总杂质含量低，外观无色澄明，稳定性好，并且，发明人意外发现，在本发明的制备过程中，通过调整聚山梨酯与无水乙醇的加料比，使得溶液不粘稠，方便后续的过滤操作，降低了制备方法的难度，使得制备方法容易操作完成。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。

实验方法

单杂测定方法

取待测品适量(约相当于卡巴他赛25mg)，精密称定，置25ml量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀作为待测品溶液。精密量取对照品溶液1ml，置200ml容量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀作为对照溶液。精密量取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20％；再精密量取待测品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录相应的色谱图，按外标法以峰面积计算。

待测品溶液色谱图中扣除辅料峰(取聚山梨酯80约0.675g，置25ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱)后如有杂质峰，杂质A、E峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的0.4倍(0.2％W/W％)，杂质B(峰面积乘以0.65)不得大于对照溶液主峰面积(0.5％W/W％)，杂质F保留时间一致的杂质峰(RRT＝1.1)，其峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.4倍(0.2％W/W％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰峰面积的0.4倍(0.2％W/W％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(1.0％W/W％)。

总杂测定方法

乙醇残留量测定方法

取待测品约1.0g，精密称定，置顶空瓶中，精密加入二甲基甲酰胺1ml，密封，摇匀，作为待测品溶液。分别取乙醇、正庚烷、甲基环己烷适量，精密称定，用二甲基甲酰胺定量稀释制成每1ml中约含乙醇10mg、正庚烷200μg、甲基环己烷47μg的混合溶液，精密量取1ml，置顶空瓶中，精密加入1.0g吐温80，密封，摇匀，作为对照品溶液。照残留溶剂测定法(中国药典2010年版二部附录ⅧP第二法)试验，以6％氰丙基苯基二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱(如：DB-624柱30m×0.53mm×3.0μm)为色谱柱，起始温度40℃，维持7分钟，以每分钟20℃的速率升温至180℃，维持5分钟；检测器温度为250℃；进样口温度为200℃；顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为20分钟。取对照品溶液顶空进样，记录色谱图，乙醇、正庚烷和甲基环己烷依次出峰，各峰间的分离度均应符合要求。精密量取待测品溶液和对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，含乙醇不得过1％。

注射液中卡巴他赛含量测定方法

取待测品适量(约相当于卡巴他赛30mg)，精密称定，置50ml量瓶中，加稀释剂溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置20ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取卡巴他赛对照品约30mg，精密称定，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

计算公式：

式中：

W_待测品：为待测品称样量，单位为g

A_待测品：为待测品溶液中卡巴他赛峰面积；

A_对照品：为对照品溶液中卡巴他赛峰面积；

C_对照品：为对照品溶液中卡巴他赛浓度，单位为μg/ml

X：为待测品溶液稀释倍数。

Y：为卡巴他赛注射液的标示重量，单位为g；

Z：为卡巴他赛注射液中卡巴他赛标示重量，单位为mg。

水分(％)(W/W)测定

称取取待侧品1g，照水分测定法(中国药典2010年版二部附录ⅧM)测定。

细菌内毒素测定方法

取待测品，用灵敏度为0.06EU/ml(或更高灵敏度)的鲎试剂，依照(中国药典2010年版二部附录ⅪE)检测。

杂质A(7,10,13-三甲基-10-DAB)(％)的测定方法

取待测品适量(约相当于卡巴他赛25mg)，精密称定，置25ml量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀作为待测品溶液。精密量取对照品溶液1ml，置200ml容量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀作为对照溶液。精密量取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20％；再精密量取待测品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。

待测品溶液色谱图中扣除辅料峰(取聚山梨酯80约0.675g，置25ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱)后如有杂质峰，杂质A、E峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的0.4倍(0.2％)，杂质B(峰面积乘以0.65)不得大于对照溶液主峰面积(0.5％)，杂质F保留时间一致的杂质峰(RRT＝1.1)，其峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.4倍(0.2％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰峰面积的0.4倍(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(1.0％)。

杂质B(7,10-二甲基-10-DAB)(％)的测定方法

杂质E((2α,5β,7β,10β,13α)-4-(乙酰氧基)-13-({(2S,3R)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羟基-3-苯基丙酰基}氧基)-1-羟基-7,10-二甲氧基-9-氧代-5,20-环氧-11-烯-2-基苯甲酸酯)(％)的测定方法

杂质F((2α,5β,7β,10β,13α)-4-(丙酰氧基)-13-({(2R,3S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羟基-3-苯基丙酰基}氧基)-1-羟基-7,10-二甲氧基-9-氧代-5,20-环氧-11-烯-2-基苯甲酸酯)(％)的测定方法

摩尔渗透压比值的测定方法

取卡巴他赛注射液一支，加入对应的专用溶媒，摇匀，精密量取6ml，加入到250ml的0.9％氯化钠注射液(或5％葡萄注射液)中，摇匀，即得。参照《中国药典》2010年版二部附录ⅨG，依法测定渗透压摩尔浓度。

用渗透压摩尔浓度测定仪分别测定待测品溶液与0.9％(g/ml)氯化钠标准溶液的渗透压摩尔浓度O_t与O_s。并用下列公式计算渗透压摩尔浓度比：

渗透压摩尔浓度比＝O_t/O_s

5-羟甲基糠醛的测定方法

取卡巴他赛注射液一支，加入对应的专用溶媒，摇匀，精密量取6ml，加入到250m的5％葡萄糖注射液中，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶，用水稀释至刻度，摇匀。依照紫外可见-分光光度法法测定，取待测品溶液于284nm波长测定吸光度。吸光度不得大于0.32。

本发明中所有的实验方法均采用上述方法进行。

实施例1

基本按照实施例7的方法制备卡巴他赛注射液，但是分别在冷冻干燥的不同时间点取样检测无水乙醇残留量，得到不同残留量的无水乙醇卡巴他赛注射液，分别为样品1、样品2、样品3、样品4，将样品分别放置于影响因素(高温60度、光照(光照强度4500lx±500lx)、室温)条件下10天，对比0天与10天样品乙醇残留量及样品的单杂和总杂含量，结果如表1所示。

表1不同乙醇残留量的四种样品的稳定性结果

由表1可见，在室温下放置10天后，不同乙醇残留量的四种样品未表现出有关物质差别，室温下放置10天与未放置时相比，单杂基本无差异，总杂差异不大；在高温60℃、光照(光照强度4500lx±500lx)条件下，较存储前，放置10天后四种样品的有关物质均有增加，但较无水乙醇残留量为2.46％和3.27％时，无水乙醇残留量在1.05％时的有关物质增加，增加幅度明显降低，而无水乙醇残留量在1.03％和0.53％时的有关物质增加水平相当，差异不明显。其他实施例中也证实具有相似的技术效果。

结果表明，需要控制无水乙醇的残留量以提高注射液的稳定性，无水乙醇的残留量越大，稳定性越低，实验证明，当无水乙醇残留量降低到约1％左右时，无水乙醇残留量对稳定性影响明显减弱。

实施例2

基本按照实施例8的方法制备卡巴他赛注射液，不同的是，加入不同量的柠檬酸调节注射液pH值，样品1-5的柠檬酸加入量分别为0、0.15g、0.25g、0.4g、0.5g，加入柠檬酸后聚山梨酯80的pH值分别为：6.5、3.67、3.50、3.29、3.19，最终得到的注射液的pH值如表2所示。

将不同样品在高温60度、光照、室温条件下放置，考察稳定性，得到0天时样品的单杂含量与总杂含量，见表2，及10天时样品的单杂含量与总杂含量，见表3。

表2不同pH值卡巴他赛注射液稳定性考察结果(0天)

表3不同pH值的卡巴他赛注射液的稳定性考察结果(10天)

由表2和表3可见，放置0天时，五种不同pH值的样品其单杂含量基本相当，样品1(pH＝5.57)的总杂较其他样品的总杂含量略高，放置10天后，与样品1相比，样品2-5在高温和光照条件下，有关物质(单杂和总杂)增加明显更少，特别是在高温条件下，而在室温条件下放置10天后，样品2-5与样品1相比，其单杂含量增加明显更少，总杂含量的增加差异不明显。结果表明，卡巴他赛注射液的pH值范围会对注射液的稳定性有一定影响，并且不同pH值的卡巴他赛注射液的稳定性不同，pH值控制越低，稳定性越好，有关物质增加越少。在其他实施例中也证实具有相似的效果。

实施例3卡巴他赛注射液的质量检测

按照表4的原料处方进行卡巴他赛制备，卡巴他赛注射液的制备方法如下：

(1)称取表4聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，柠檬酸的加入量为使聚山梨酯80的pH值控制在3.3～3.8之间；

(2)称取表4处方量的无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀；

(3)按照处方量称取卡巴他赛原料，加入到步骤(2)得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

(4)向步骤2得到的溶液中加入占溶液总量0.05％(W/W)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过0.22μm滤膜，采用冷冻干燥去除乙醇得到卡巴他赛注射液，冷冻干燥程序如下：

将制备得到的卡巴他赛注射液进行溶液外观、pH值、卡巴他赛含量、无水乙醇残留量、水分、细菌内毒素和单杂含量、总杂含量检测，检测结果如表5所示。

表4卡巴他赛注射液原料处方

原料名称	用量(g)
		卡巴他赛非丙酮合物	6
聚山梨酯80	156
		无水乙醇	78
柠檬酸	适量

表5卡巴他赛注射液检测结果

从表5可知，本实施例方法制备得到的卡巴他赛注射液的各检测项目均符合要求，其他实施例中也证实具有与本实施例相似的结果。

实施例4

本实施例制备400瓶装量的卡巴他赛注射液，原料处方如表6所示，制备方法如实验例3所示，将制备得到的卡巴他赛注射液进行溶液外观、pH值、水分、卡巴他赛含量和杂质A、B、E、F和单杂及总杂含量的检测，检测结果如表7所示。

表6卡巴他赛注射液样品原料组成表

卡巴他赛(非丙酮合物)	24g
		聚山梨酯80	624g
无水乙醇	312g
		柠檬酸	适量

表7实验例4卡巴他赛注射液检测结果表

从表7可见，按照本实施例制备得到的卡巴他赛注射液稳定性好，并且可用于放大生产，制备易于操作，工艺稳定，其他实施例中也证实具有与本实施例相似的结果。

实施例5

将实施例3制备的卡巴他赛注射液(样品1)与市售卡巴他赛注射液(对照1，)进行颜色比较和总杂含量比较，结果如表8所示。

表8样品和对照的颜色和总杂对照

	颜色	总杂(％)
			样品1	无色澄明黏稠液体	0.121
对照1	黄色澄明黏稠液体	0.304

从表8可见，本发明实施例3方法制备得到的卡巴他赛注射液的总杂明显低于对照，颜色明显优于对照，其他实施例中也证实具有与本实施例相似的结果。

实施例6

使用13％(W/W％)的无水乙醇将实施例4的卡巴他赛注射液溶解，所得溶液浓度为10mg/ml，将10mg/mL卡巴他赛药液注入到无菌的0.9％氯化钠溶液或5％葡萄糖溶液输注溶液中，加入氯化钠或葡萄糖溶液的体积为保证最终药液浓度在0.10mg/ml～0.26mg/ml之间。分别对采用0.9％氯化钠溶液或5％葡萄糖溶液进行稀释的最终药液进行稳定性考察，在室温下存放，考察各时间点的有关物质含量，结果如表9和表10所示。

表9卡巴他赛注射液稀释后的最终药液的稳定性考察结果(0.9％氯化钠注射液)

表10卡巴他赛注射液稀释后的最终药液的稳定性考察结果(5％葡萄糖注射液)

由表9和表10可见，采用0.9％氯化钠溶液或5％葡萄糖溶液稀释的最终药液在室温下放置24小时后，其摩尔渗透压比值、有关物质含量及活性成分卡巴他赛含量没有明显改变，稳定性好，葡萄糖也保持稳定。其他实施例也证实具有相似的效果。

实施例7

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表11所示，制备方法为：

(1)按处方量分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为3.2；

(2)称取处方量的无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶剂中搅拌至分散均匀；

(3)按照处方量称取卡巴他赛原料，加入到步骤2得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

(4)向步骤3得到的溶液中加入占溶液总量0.05％(W/W％)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过0.22μm滤膜；将过滤后得到的溶液分装于15ml西林瓶中(100瓶)，加覆聚四氟乙烯/乙烯共聚物膜氯化丁基橡胶塞，压半塞；采用冷冻干燥去除乙醇，冷冻干燥程序如下：

(5)样品出箱前向冻干机内充满氮气，充氮气后迅速将胶塞封住，之后压盖，得到卡巴他赛注射液。

表11实施例7的卡巴他赛注射液原料处方组成

原料名称

用量(g)

卡巴他赛(非丙酮合物)	5
		聚山梨酯80	125
无水乙醇	100
		柠檬酸	适量

实施例8

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表12所示，制备方法为：

(1)按处方量分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为3.9；

(4)向步骤3得到的溶液中加入溶液总量0.05％(W/W)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过0.22μm滤膜；将过滤后溶液分装；采用冷冻干燥去除乙醇得到卡巴他赛注射液，冷冻干燥程序如下：

表12实施例8的卡巴他赛注射液原理处方组成

原料名称	用量(g)
		卡巴他赛(非丙酮合物)	3
聚山梨酯80	78
		无水乙醇	39
柠檬酸	适量

实施例9

15ml卡巴他赛注射液，原料处方量组成为：卡巴他赛600mg、聚山梨酯8015.6g、无水乙醇7.8g和适量的柠檬酸，通过制备过程中柠檬酸的加入来调节聚山梨酯80的pH值为3.4，通过冷冻干燥控制卡巴他赛注射液的无水乙醇残留量在重量百分比1.0％以内。

本实施例的卡巴他赛注射液的制备方法，包括下列步骤：

(1)按处方量分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入少量的无水乙醇适当溶解，将适当溶解的柠檬酸加入到处方量的聚山梨酯80中溶解，搅拌均匀，溶解，柠檬酸调节聚山梨酯80的pH值为3.4，得到第一溶液；

(2)将处方量减去步骤(1)加入量后的无水乙醇加入上述第一溶液中搅拌均匀得到第二溶液；

(3)将处方量卡巴他赛加入上述第二溶液中，搅拌至完全溶解；

(4)将步骤(3)得到的溶液中加入溶液总量0.1％(W/W)的活性炭，搅拌吸附15min，过滤除炭，将药液过聚四氟乙烯0.22μm滤膜过滤；将过滤后的滤液冷冻干燥得到卡巴他赛注射液，冷冻干燥的步骤为：在0℃保持0.5小时后，直接升温至30℃，在30℃保持30小时。

经检测，本实施例得到的卡巴他赛注射液的pH值大约为3。

实施例10

100ml卡巴他赛注射液，原料处方量组成为：卡巴他赛4g、聚山梨酯80104g、无水乙醇52g和适量的柠檬酸，通过制备过程中柠檬酸的加入来调节聚山梨酯80的pH值为3.9，通过冷冻干燥控制卡巴他赛注射液的无水乙醇残留量在重量百分比1.0％以内。

本实施例的卡巴他赛注射液的制备方法，包括下列步骤：

(1)按处方量分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到处方量的聚山梨酯80中溶解，搅拌均匀，溶解，柠檬酸调节聚山梨酯80的pH值为3.9，得到第一溶液；

(2)将处方量无水乙醇加入上述第一溶液中搅拌均匀得到第二溶液；

(4)将步骤(3)得到的溶液中加入溶液总量0.08％(W/W)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过聚四氟乙烯0.22μm滤膜过滤，分装到中性硅管制西林瓶中；将步骤(4)过滤后的滤液冷冻干燥，冷冻干燥的步骤为：在0℃保持0.5小时后，直接升温至30℃，在30℃保持30小时。

(5)样品出箱前向冻干机内充满氮气，充氮气后迅速将覆聚四氟乙烯/乙烯共聚物膜氯化丁基橡胶塞封住，之后压盖，得到卡巴他赛注射液。

经检测，本实施例得到的卡巴他赛注射液的pH值大约为3.5。

实施例11

卡巴他赛注射液，原料处方量组成为：卡巴他赛10g、聚山梨酯80110g、无水乙醇200g和适量的柠檬酸，通过制备过程中柠檬酸的加入来调节聚山梨酯80的pH值为5，通过冷冻干燥控制卡巴他赛注射液的无水乙醇残留量在重量百分比1.0％以内。

本实施例的卡巴他赛注射液的制备方法，包括下列步骤：

(1)按处方量分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到处方量的聚山梨酯80中溶解，搅拌均匀，溶解，柠檬酸调节聚山梨酯80的pH值为5，得到第一溶液；

(4)将步骤(3)得到的溶液中加入溶液总量0.2％(W/W)的活性炭，搅拌吸附10min，过滤除炭，将药液过聚四氟乙烯0.22μm滤膜过滤，分装；将过滤后的滤液冷冻干燥，冷冻干燥的步骤为：在0℃保持0.5小时后，在5小时内匀速升温至30℃，在30℃保持30小时。

经检测，本实施例得到的卡巴他赛注射液的pH值大约为4.6。

实施例12

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表13所示，制备方法为：

(4)向步骤3得到的溶液中加入溶液总量0.05％(W/W)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过0.22μm滤膜；将过滤后溶液分装；采用冷冻干燥去除乙醇，冷冻干燥程序如下：

(5)样品出箱前向冻干机内充满氮气，充氮气后迅速将胶塞封住，之后压盖，得到卡巴他赛注射液成品。

表13实施例12的卡巴他赛注射液原理处方组成

原料名称	用量(g)
		卡巴他赛(非丙酮合物)	2
聚山梨酯80	56
		无水乙醇	56
柠檬酸	适量

实施例13

一种卡巴他赛注射液的制备方法：

(1)分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为5.4；

(2)按照聚山梨酯80与无水乙醇1:1的重量比称取无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶剂中搅拌至分散均匀；

(3)按照聚山梨酯80与卡巴他赛为50:1的重量比称取卡巴他赛原料，加入到步骤2得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

(4)向步骤3得到的溶液中加入占溶液总量0.05％(W/W％)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过0.22μm滤膜；将过滤后溶液分装；采用冷冻干燥去除乙醇至无水乙醇残留量为重量百分比1.0％以内。

经检测，该实施例制备得到的卡巴他赛注射液的pH值为5。

实施例14

一种卡巴他赛注射液的制备方法：

(1)分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为3.6；

(2)按照聚山梨酯80与无水乙醇3:1的重量比称取无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶剂中搅拌至分散均匀；

(3)按照聚山梨酯80与卡巴他赛为18:1的重量比称取卡巴他赛原料，加入到步骤2得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

经检测，该实施例制备得到的卡巴他赛注射液的pH值为3.2。

实施例15

一种卡巴他赛注射液的制备方法：

(1)分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为4.5；

(2)按照聚山梨酯80与无水乙醇0.8:1的重量比称取无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶剂中搅拌至分散均匀；

(3)按照聚山梨酯80与卡巴他赛为36:1的重量比称取卡巴他赛原料，加入到步骤2得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

(4)向步骤3得到的溶液中加入占溶液总量0.05％(W/W％)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过0.22μm滤膜；将过滤后溶液分装；采用冷冻干燥去除乙醇至无水乙醇残留量为重量百分比1.0％以内，冷冻干燥程序如下：

经检测，该实施例制备得到的卡巴他赛注射液的pH值为4.3。

实施例16

一种卡巴他赛注射液的制备方法：

(1)分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为4.2；

(2)按照聚山梨酯80与无水乙醇2:1的重量比称取无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶剂中搅拌至分散均匀；

(3)按照聚山梨酯80与卡巴他赛为26:1的重量比称取卡巴他赛原料，加入到步骤2得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

经检测，该实施例制备得到的卡巴他赛注射液的pH值为3.9。

实施例17

一种卡巴他赛注射液的制备方法：

(1)分别称取1.2g聚山梨酯80和柠檬酸，加入0.1g无水乙醇溶解柠檬酸，将溶解后的柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为4.2；

(2)称取0.8g无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶剂中搅拌至分散均匀；

(3)称取0.05g卡巴他赛丙酮合物，加入0.1g无水乙醇中适当溶解，再加入到步骤2得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

程序	温度	时间
			预冻	0℃	0.5h
干燥	35℃	恒温35h

经检测，该实施例制备得到的卡巴他赛注射液的pH值为3.8。

实施例18

一种卡巴他赛注射液的制备方法：

(1)分别称取35g聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为3.2；

(2)称取16g无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶剂中搅拌至分散均匀；

(3)称取1g卡巴他赛丙酮合物，加入到步骤2得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

经检测，该实施例制备得到的卡巴他赛注射液的pH值为2.8。

实施例19

一种卡巴他赛注射液的制备方法：

(1)分别称取3000g聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到50g无水乙醇中适当溶解，将适当溶解后的柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为5.4；

(2)称取850g无水乙醇加入到上述分散均匀的聚山梨酯80溶剂中搅拌至分散均匀；

(3)称取80g卡巴他赛丙酮合物，加入100g卡巴他赛丙酮合物中适当溶解，再加入到步骤2得到的溶液中，搅拌至完全溶解；

经检测，该实施例制备得到的卡巴他赛注射液的pH值为5。

实施例20

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表14所示，制备方法为：

(4)将药液过滤；采用冷冻干燥去除乙醇得到卡巴他赛注射液。

表14实施例20的卡巴他赛注射液原料处方组成

实施例21

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表15所示，制备方法为：

(4)向步骤3得到的溶液中加入占溶液总量0.05％(W/W％)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，再将药液过滤；采用冷冻干燥去除乙醇至无水乙醇残留量为重量百分比1.0％以内，冷冻干燥程序如下：

表15实施例21的卡巴他赛注射液原料处方组成

实施例22

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表16所示，制备方法为：

(4)将药液过滤；采用冷冻干燥去除乙醇至无水乙醇残留量为重量百分比1.0％以内，得到卡巴他赛注射液，冷冻干燥程序如下：

表16实施例22的卡巴他赛注射液原料处方组成

实施例23

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表17所示，制备方法为：

(4)将药液过滤；将过滤后得到的溶液分装于15ml西林瓶中(100瓶)，加覆聚四氟乙烯/乙烯共聚物膜氯化丁基橡胶塞，压半塞；采用冷冻干燥去除乙醇，

表17实施例23的卡巴他赛注射液原料处方组成

实施例24

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表18所示，制备方法为：

(4)向步骤3得到的溶液中加入占溶液总量0.05％(W/W％)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过0.22μm滤膜；采用冷冻干燥去除乙醇至无水乙醇残留量为重量百分比1.0％以内，冷冻干燥程序如下：

表18实施例24的卡巴他赛注射液原料处方组成

原料名称	用量(g)
		卡巴他赛(非丙酮合物)	6
聚山梨酯80	78
		无水乙醇	39
柠檬酸	适量

实施例25

(1)按处方量分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为5.2；

表18实施例25的卡巴他赛注射液原料处方组成

实施例26

(4)向步骤3得到的溶液中加入占溶液总量0.05％(W/W％)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过滤；采用冷冻干燥去除乙醇至无水乙醇残留量为重量百分比0.8％以内，冷冻干燥程序如下：

表18实施例26的卡巴他赛注射液原料处方组成

原料名称	用量(g)
		卡巴他赛(非丙酮合物)	3

聚山梨酯80	78
		无水乙醇	39
柠檬酸	适量

实施例27

(4)向步骤3得到的溶液中加入占溶液总量0.05％(W/W％)的活性炭，搅拌吸附20min，过滤除炭，将药液过滤；采用冷冻干燥去除乙醇至无水乙醇残留量为重量百分比1.0％以内，冷冻干燥程序如下：

表18实施例27的卡巴他赛注射液原料处方组成

原料名称	用量(g)
		卡巴他赛(非丙酮合物)	3
聚山梨酯80	78
		无水乙醇	78
柠檬酸	适量

实施例28

本实施例制备卡巴他赛注射液，该卡巴他赛注射液的原料处方组成如表22所示，制备方法为：

(1)按处方量分别称取聚山梨酯80和柠檬酸，将柠檬酸加入到聚山梨酯80溶液中搅拌至分散均匀、完全溶解，取样检测至聚山梨酯80的pH值为4.2；

表22实施例28的卡巴他赛注射液原料处方组成

原料名称	用量(g)
		卡巴他赛(非丙酮合物)	2
聚山梨酯80	78
		无水乙醇	78
柠檬酸	适量

以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims

1.一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，该卡巴他赛注射液由以下原料制成：卡巴他赛、聚山梨酯80、无水乙醇和适量pH调节剂柠檬酸，其中原料聚山梨酯80与无水乙醇的重量比为1-2:1，所述原料聚山梨酯80与卡巴他赛的重量比为25-28:1，该方法包括下列步骤：

（1）将柠檬酸加入到聚山梨酯80中溶解，调节pH值为2.9-5.4，搅拌均匀得到第一溶液；

（2）将无水乙醇加入上述第一溶液中搅拌均匀得到第二溶液；

（3）将卡巴他赛加入上述第二溶液中，搅拌至完全溶解；

（4）将步骤（3）得到的溶液采用0.22μm滤膜过滤，然后冷冻干燥，所述冷冻干燥步骤包括：在0℃-4℃保持0.5小时-2小时后，升温至20℃-30℃，在20℃-30℃保持30小时以上，控制无水乙醇残留量在重量百分比1%以内；所述卡巴他赛注射液的pH值在5以内。

2.如权利要求1所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，在步骤（1）中pH值调节为3.2-3.9。

3.如权利要求1-2中任一权利要求所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，在步骤（1）中柠檬酸加入到聚山梨酯80前，将柠檬酸加入到无水乙醇中适当溶解，再加入聚山梨酯80中，所述无水乙醇中的使用量不大于无水乙醇处方量的20%重量百分比；和/或在步骤（3）中卡巴他赛加入第二溶液前，将卡巴他赛加入无水乙醇中适当溶解，再加入第二溶液中。

4.如权利要求1所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，原料聚山梨酯80与无水乙醇的重量比为2:1。

5.如权利要求1或4所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，所述原料聚山梨酯80与卡巴他赛的重量比为26:1。

6.如权利要求1所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，所述升温步骤为在5小时内匀速升温至20℃-30℃。

7.如权利要求1所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，在所述步骤（4）中溶液过滤前向溶液中加入活性炭，搅拌吸附后除去活性炭，再过滤。

8.如权利要求7所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，所述活性炭的加入量为占溶液重量0.2%以内的活性炭，搅拌吸附时间为30min以内。

9.如权利要求8所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，所述活性炭的加入量为占溶液重量0.05%以内的活性炭。

10.如权利要求8所述的一种卡巴他赛注射液的制备方法，其特征在于，搅拌吸附时间为20min以内。

11.如权利要求1-10中任一权利要求所述的制备方法制备得到的卡巴他赛注射液。

12.如权利要求11所述的一种卡巴他赛注射液，其特征在于，所述卡巴他赛注射液的pH值为2.8-3.5。