CN106591376B - 一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物、制备方法及其防治方法 - Google Patents

一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物、制备方法及其防治方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物，包括嗜酸乳杆菌培养物、哈茨木霉培养物、淡紫拟青霉培养物，按照比例配成固体发酵母液，发酵母液接种于由烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例配成的发酵基质中进行厌氧发酵所得微生物培养物，还公开了防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法以及地蛆及地下线虫的微生物培养物的防治方法；本发明微生物培养物的不添加任何杀菌剂或杀虫剂，安全高效，防治方法有效解决了地蛆及地下线虫对作物生长的巨大破坏，生态环保，对改善农作物品质、保障农产品食用安全具有重大意义。

Description

一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物、制备方法及其防 治方法
技术领域
本发明属于害虫防治技术领域，具体地说是一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物、制备方法及其防治方法。
背景技术
地蛆及地下线虫是目前困扰种植业的一大顽疾，化学制品的频繁使用使其产生了极强的抗性，为切实防治其对作物的伤害带来了很大的困难，而传统的治疗方法采用毒性较高的化学农药，又导致作物具有较高浓度的化学残留，影响人们的食用安全，重者出现中毒反应。
本发明公开了一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物、制备方法及其防治方法，利用有益微生物发酵具有驱虫、杀虫功能的植物源性介质，将地蛆及地下线虫诱赶至地表并杀死。本发明不添加任何杀菌剂或杀虫剂，不添加任何对作物有害的其它化学成分、安全高效，不但有效解决了地蛆及地下线虫对作物生长的巨大破坏，而且生态环保，对改善农作物品质、保障农产品食用安全具有重大意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物、制备方法及其防治方法，旨在解决传统的农药不能有效解决化学残留，造成食品安全隐患及土壤退化的弊端。
为达上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物，包括嗜酸乳杆菌培养物、哈茨木霉培养物、淡紫拟青霉培养物，其中按照重量分数嗜酸乳杆菌培养物：哈茨木霉培养物：淡紫拟青霉培养物=60：20：20的比例配成固体发酵母液，发酵母液接种于由烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例配成的发酵基质中进行厌氧发酵所得微生物培养物。
一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法，包括以下步骤：
1）嗜酸乳杆菌培养物的具体培养步骤如下：a、斜面嗜酸乳杆菌种活化；b、三角瓶种子培养；c、二级种子培养；d、种子发酵罐发酵培养；e、发酵罐放大培养，部分进行液体产品分装，部分进行固体发酵培养后进行固体产品分装；
2）哈茨木霉培养物的具体培养步骤如下：a、PDA培养基平板活化种；b、用无菌水和接种铲刮取哈茨木霉孢子，制备孢子液；c、发酵罐液体发酵培养；d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得哈茨木霉固体培养物；
3）淡紫拟青霉培养物的具体培养步骤如下：a、PDA培养基平板活化种；b、用无菌水和接种铲刮取淡紫拟青霉孢子，制备孢子液；c、发酵罐液体发酵培养；d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得淡紫拟青霉固体培养物；
4）将烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例将植物源发酵基质混合搅拌，蒸汽灭菌后冷却至37-40℃，接种按比例配成的液体菌种搅拌均匀接入厌氧发酵袋内，发酵袋热合封口移入发酵室发酵、检测后成品混合。
进一步优选的，所述嗜酸乳杆菌培养采用的培养基由以下重量的组分组成：葡萄糖：20克；蛋白胨：10克；牛肉膏：10克；酵母膏：10克；乙酸钠：5克；柠檬酸铵：2克；磷酸氢二钾：2克；硫酸镁：0.5克；硫酸亚铁：0.3克；硫酸锰：0.2克；水：1000克。
进一步优选的，所述PDA培养基由以下重量的组分组成：马铃薯：200克；蔗糖：20克；水：1000克。
进一步优选的，所述液体发酵培养基由以下重量的组分组成：葡糖糖：160克；硝酸钠：10克；硫酸铵：5克；黄豆饼粉：5克；磷酸氢二钾：1.5克；硫酸镁：1.5克；碳酸钙：2克；水：1000克。
进一步优选的，所述固体发酵培养基包括固体基质和营养液，所述固体基质由以下重量分数的组分配成：小麦麸皮：30%；稻壳粉：30%；胚芽粕：20%；蓖麻饼粉：10%；豆粕粉：10%；营养液质量浓度为：糖蜜：20g/L；硫酸铵：4g/L；硝酸钠：4g/L；磷酸氢二钾：2g/L。
进一步优选的，所述植物源发酵基质由以下重量分数配比组成：烟草末20%，博落回15%，苍耳子10%，艾叶5%，蓖麻饼30%，玉米8%，豆粕10%，糖蜜2%，糖蜜以外的基质用粉碎机粉碎至40目筛，用不锈钢混合搅拌均匀，按照比例配成植物源发酵基质。
一种地蛆及地下线虫的微生物培养物的防治方法，包括以下步骤：
1）筛选具有极好渗透性及生物驱蔽性的嗜酸乳杆菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉三株有益微生物在培养基中培养、发酵，制成固体发酵母液，选择对地蛆、地下线虫具有生物抗性和驱杀功能的烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜，按照比例配成植物源发酵基质；
2)将配好的固体发酵母液通过菌种罐喷雾装置均匀喷于植物源发酵基质上，边喷边搅拌，喷完再搅拌10-12分钟，接入发酵袋中置20-30℃室温中发酵8-10天使用；通过发酵过程中微生物对植物纤维素、半纤维素及木质素的降解特性，将其有效成分最大限度释放出来；
3)选择晴天傍晚时分，将发酵好的培养物沿作物根系均匀洒施中土壤表层，然后小心浇灌至地表全部湿润。利用特定微生物的驱蔽特性将地蛆及地下线虫驱诱至地表，再利用抗性植物的杀灭功能将其杀死，死亡的地蛆及地下线虫会很快被微生物分解而转化成有机质肥料。
本发明与现有技术比较具有以下有益效果：
（1）本发明采用通过发酵过程中微生物对植物纤维素、半纤维素及木质素的降解特性，将其有效成分最大限度释放出来。
（2）利用特定微生物的驱蔽特性将地蛆及地下线虫驱诱至地表，再利用抗性植物的杀灭功能将其杀死，死亡的地蛆及地下线虫会很快被微生物分解而转化成有机质肥料。
（3）本发明不添加任何杀菌剂或杀虫剂，不添加任何对作物有害的其它化学成分、安全高效，不但有效解决了地蛆及地下线虫对作物生长的巨大破坏，而且生态环保，对改善农作物品质、保障农产品食用安全具有重大意义。
附图说明
图1为嗜酸乳杆菌培养物的培养步骤框图；
图2为哈茨木霉培养物的培养步骤框图；
图3为淡紫拟青霉培养物的培养步骤框图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释发明，并不用于限定本发明。
下面结合具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。
实施例1
一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物，包括嗜酸乳杆菌培养物、哈茨木霉培养物、淡紫拟青霉培养物，其中按照重量分数嗜酸乳杆菌培养物：哈茨木霉培养物：淡紫拟青霉培养物=60：20：20的比例配成固体发酵母液，发酵母液接种于由烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例配成的发酵基质中进行厌氧发酵所得微生物培养物。
一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法，包括以下步骤：
1）如图1，嗜酸乳杆菌培养物的具体培养步骤如下：a、斜面嗜酸乳杆菌种活化；b、三角瓶种子培养；c、二级种子培养；d、种子发酵罐发酵培养；e、发酵罐放大培养，部分进行液体产品分装，部分进行固体发酵培养后进行固体产品分装；
2）如图2，哈茨木霉培养物的具体培养步骤如下：a、PDA培养基平板活化种；b、用无菌水和接种铲刮取哈茨木霉孢子，制备孢子液；c、发酵罐液体发酵培养；d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得哈茨木霉固体培养物；
3）如图3，淡紫拟青霉培养物的具体培养步骤如下：a、PDA培养基平板活化种；b、用无菌水和接种铲刮取淡紫拟青霉孢子，制备孢子液；c、发酵罐液体发酵培养；d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得淡紫拟青霉固体培养物；
4）将烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例将植物源发酵基质混合搅拌，蒸汽灭菌后冷却至37℃，接种按比例配成的液体菌种搅拌均匀接入厌氧发酵袋内，发酵袋热合封口移入发酵室发酵、检测后成品混合。
进一步优选的，所述嗜酸乳杆菌培养采用的培养基由以下重量的组分组成：葡萄糖：20克；蛋白胨：10克；牛肉膏：10克；酵母膏：10克；乙酸钠：5克；柠檬酸铵：2克；磷酸氢二钾：2克；硫酸镁：0.5克；硫酸亚铁：0.3克；硫酸锰：0.2克；水：1000克。
进一步优选的，所述PDA培养基由以下重量的组分组成：马铃薯：200克；蔗糖：20克；水：1000克。
进一步优选的，所述液体发酵培养基由以下重量的组分组成：葡糖糖：160克；硝酸钠：10克；硫酸铵：5克；黄豆饼粉：5克；磷酸氢二钾：1.5克；硫酸镁：1.5克；碳酸钙：2克；水：1000克。
进一步优选的，所述固体发酵培养基包括固体基质和营养液，所述固体基质由以下重量分数的组分配成：小麦麸皮：30%；稻壳粉：30%；胚芽粕：20%；蓖麻饼粉：10%；豆粕粉：10%；营养液质量浓度为：糖蜜：20g/L；硫酸铵：4g/L；硝酸钠：4g/L；磷酸氢二钾：2g/L。
进一步优选的，所述植物源发酵基质由以下重量分数配比组成：烟草末20%，博落回15%，苍耳子10%，艾叶5%，蓖麻饼30%，玉米8%，豆粕10%，糖蜜2%，糖蜜以外的基质用粉碎机粉碎至40目筛，用不锈钢混合搅拌均匀，按照比例配成植物源发酵基质。
一种地蛆及地下线虫的微生物培养物的防治方法，包括以下步骤：
1）筛选具有极好渗透性及生物驱蔽性的嗜酸乳杆菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉三株有益微生物在培养基中培养、发酵，制成固体发酵母液，选择对地蛆、地下线虫具有生物抗性和驱杀功能的烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜，按照比例配成植物源发酵基质；
2)将配好的固体发酵母液通过菌种罐喷雾装置均匀喷于植物源发酵基质上，边喷边搅拌，喷完再搅拌10分钟，接入发酵袋中置20℃室温中发酵8天使用；通过发酵过程中微生物对植物纤维素、半纤维素及木质素的降解特性，将其有效成分最大限度释放出来；
3)选择晴天傍晚时分，将发酵好的培养物沿作物根系均匀洒施中土壤表层，然后小心浇灌至地表全部湿润。利用特定微生物的驱蔽特性将地蛆及地下线虫驱诱至地表，再利用抗性植物的杀灭功能将其杀死，死亡的地蛆及地下线虫会很快被微生物分解而转化成有机质肥料。
使用效果及最佳用量：
韭菜使用效果：每亩使用20KG，5天后，韭蛆被从根部土壤诱驱至地表，大部分在2天内被死，只有靠近地边位置一小部分爬至相邻地块或地垄上，每亩使用40KG的基本上全部被杀死，韭菜收割季无需再用药。
实施例2
一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物，包括嗜酸乳杆菌培养物、哈茨木霉培养物、淡紫拟青霉培养物，其中按照重量分数嗜酸乳杆菌培养物：哈茨木霉培养物：淡紫拟青霉培养物=60：20：20的比例配成固体发酵母液，发酵母液接种于由烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例配成的发酵基质中进行厌氧发酵所得微生物培养物。
一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法，包括以下步骤：
1）如图1，嗜酸乳杆菌培养物的具体培养步骤如下：a、斜面嗜酸乳杆菌种活化；b、三角瓶种子培养；c、二级种子培养；d、种子发酵罐发酵培养；e、发酵罐放大培养，部分进行液体产品分装，部分进行固体发酵培养后进行固体产品分装；
2）如图2，哈茨木霉培养物的具体培养步骤如下：a、PDA培养基平板活化种；b、用无菌水和接种铲刮取哈茨木霉孢子，制备孢子液；c、发酵罐液体发酵培养；d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得哈茨木霉固体培养物；
3）如图3，淡紫拟青霉培养物的具体培养步骤如下：a、PDA培养基平板活化种；b、用无菌水和接种铲刮取淡紫拟青霉孢子，制备孢子液；c、发酵罐液体发酵培养；d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得淡紫拟青霉固体培养物；
4）将烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例将植物源发酵基质混合搅拌，蒸汽灭菌后冷却至40℃，接种按比例配成的液体菌种搅拌均匀接入厌氧发酵袋内，发酵袋热合封口移入发酵室发酵、检测后成品混合。
进一步优选的，所述嗜酸乳杆菌培养采用的培养基由以下重量的组分组成：葡萄糖：20克；蛋白胨：10克；牛肉膏：10克；酵母膏：10克；乙酸钠：5克；柠檬酸铵：2克；磷酸氢二钾：2克；硫酸镁：0.5克；硫酸亚铁：0.3克；硫酸锰：0.2克；水：1000克。
进一步优选的，所述PDA培养基由以下重量的组分组成：马铃薯：200克；蔗糖：20克；水：1000克。
进一步优选的，所述液体发酵培养基由以下重量的组分组成：葡糖糖：160克；硝酸钠：10克；硫酸铵：5克；黄豆饼粉：5克；磷酸氢二钾：1.5克；硫酸镁：1.5克；碳酸钙：2克；水：1000克。
进一步优选的，所述固体发酵培养基包括固体基质和营养液，所述固体基质由以下重量分数的组分配成：小麦麸皮：30%；稻壳粉：30%；胚芽粕：20%；蓖麻饼粉：10%；豆粕粉：10%；营养液质量浓度为：糖蜜：20g/L；硫酸铵：4g/L；硝酸钠：4g/L；磷酸氢二钾：2g/L。
进一步优选的，所述植物源发酵基质由以下重量分数配比组成：烟草末20%，博落回15%，苍耳子10%，艾叶5%，蓖麻饼30%，玉米8%，豆粕10%，糖蜜2%，糖蜜以外的基质用粉碎机粉碎至40目筛，用不锈钢混合搅拌均匀，按照比例配成植物源发酵基质。
一种地蛆及地下线虫的微生物培养物的防治方法，包括以下步骤：
1）筛选具有极好渗透性及生物驱蔽性的嗜酸乳杆菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉三株有益微生物在培养基中培养、发酵，制成固体发酵母液，选择对地蛆、地下线虫具有生物抗性和驱杀功能的烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜，按照比例配成植物源发酵基质；
2)将配好的固体发酵母液通过菌种罐喷雾装置均匀喷于植物源发酵基质上，边喷边搅拌，喷完再搅拌12分钟，接入发酵袋中置30℃室温中发酵10天使用；通过发酵过程中微生物对植物纤维素、半纤维素及木质素的降解特性，将其有效成分最大限度释放出来；
3)选择晴天傍晚时分，将发酵好的培养物沿作物根系均匀洒施中土壤表层，然后小心浇灌至地表全部湿润。利用特定微生物的驱蔽特性将地蛆及地下线虫驱诱至地表，再利用抗性植物的杀灭功能将其杀死，死亡的地蛆及地下线虫会很快被微生物分解而转化成有机质肥料。
使用效果及最佳用量：
大蒜使用效果：春季浇水前每亩使用30KG 撒施于根部土壤表层5天后，即发现地表有许多蒜蛆，逐渐失水萎缩，2天后基本干化，至大蒜提苔一直没有再追施药物，没有发现枯黄、死棵，而且蒜苔、蒜头明显膨大，根系丰满、白嫩、生长健壮，使用40KG的呈现和30KG相同的效果。
上述虽然对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对发明保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围内。

Claims (7)

1.一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物，其特征在于，包括嗜酸乳杆菌培养物、哈茨木霉培养物、淡紫拟青霉培养物，其中按照重量分数嗜酸乳杆菌培养物：哈茨木霉培养物：淡紫拟青霉培养物＝60：20：20的比例配成固体发酵母液，发酵母液接种于由烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例配成的发酵基质中进行厌氧发酵得微生物培养物；
所述发酵基质由以下重量分数配比组成：烟草末20％，博落回15％，苍耳子10％，艾叶5％，蓖麻饼30％，玉米8％，豆粕10％，糖蜜2％，糖蜜以外的基质用粉碎机粉碎至40目筛，用不锈钢混合搅拌均匀，按照比例配成发酵基质。
2.根据权利要求1所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)嗜酸乳杆菌培养物的具体培养步骤如下：a、斜面嗜酸乳杆菌种活化；b、三角瓶种子培养；c、二级种子培养；d、种子发酵罐发酵培养；e、发酵罐放大培养，部分进行液体产品分装，部分进行固体发酵培养后进行固体产品分装；
2)哈茨木霉培养物的具体培养步骤如下：a、PDA培养基平板活化种；b、用无菌水和接种铲刮取哈茨木霉孢子，制备孢子液；c、发酵罐液体发酵培养；d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得哈茨木霉固体培养物；
3)淡紫拟青霉培养物的具体培养步骤如下：a、PDA培养基平板活化种；b、用无菌水和接种铲刮取淡紫拟青霉孢子，制备孢子液；c、发酵罐液体发酵培养；d、用发酵液作为种子进行固体发酵培养得淡紫拟青霉固体培养物；
4)将烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜按比例将植物源发酵基质混合搅拌，蒸汽灭菌后冷却至37-40℃，接种按比例配成的液体菌种搅拌均匀接入厌氧发酵袋内，发酵袋热合封口移入发酵室发酵、检测后成品混合。
3.根据权利要求2所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌培养采用的培养基由以下重量的组分组成：葡萄糖：20克；蛋白胨：10克；牛肉膏：10克；酵母膏：10克；乙酸钠：5克；柠檬酸铵：2克；磷酸氢二钾：2克；硫酸镁：0.5克；硫酸亚铁：0.3克；硫酸锰：0.2克；水：1000克。
4.根据权利要求2所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法，其特征在于，所述PDA培养基由以下重量的组分组成：马铃薯：200克；蔗糖：20克；水：1000克。
5.根据权利要求2所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法，其特征在于，所述液体发酵培养基由以下重量的组分组成：葡糖糖：160克；硝酸钠：10克；硫酸铵：5克；黄豆饼粉：5克；磷酸氢二钾：1.5克；硫酸镁：1.5克；碳酸钙：2克；水：1000克。
6.根据权利要求2所述的一种防治地蛆及地下线虫的微生物培养物的制备方法，其特征在于，所述固体发酵培养基包括固体基质和营养液，所述固体基质由以下重量分数的组分配成：小麦麸皮：30％；稻壳粉：30％；胚芽粕：20％；蓖麻饼粉：10％；豆粕粉：10％；营养液质量浓度为：糖蜜：20g/L；硫酸铵：4g/L；硝酸钠：4g/L；磷酸氢二钾：2g/L。
7.根据权利要求1所述的一种地蛆及地下线虫的微生物培养物的防治方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)筛选具有极好渗透性及生物驱避 性的嗜酸乳杆菌、哈茨木霉、淡紫拟青霉三株有益微生物在培养基中培养、发酵，制成固体发酵母液，选择对地蛆、地下线虫具有生物抗性和驱杀功能的烟草末，博落回，苍耳子，艾叶，蓖麻饼，玉米，豆粕，糖蜜，按照比例配成植物源发酵基质；
2)将配好的固体发酵母液通过菌种罐喷雾装置均匀喷于植物源发酵基质上，边喷边搅拌，喷完再搅拌10-12分钟，接入发酵袋中置20-30℃室温中发酵8-10天使用；
3)选择晴天傍晚时分，将发酵好的培养物沿作物根系均匀洒施中土壤表层，然后小心浇灌至地表全部湿润。
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