CN106590672A - 一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法 - Google Patents

一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106590672A
CN106590672A CN201611021143.6A CN201611021143A CN106590672A CN 106590672 A CN106590672 A CN 106590672A CN 201611021143 A CN201611021143 A CN 201611021143A CN 106590672 A CN106590672 A CN 106590672A
Authority
CN
China
Prior art keywords
powder
blown
culture
bacillus
plant cover
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201611021143.6A
Other languages
English (en)
Inventor
许文年
薛海龙
夏栋
夏振尧
刘大翔
赵冰琴
夏露
牛鹏辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Three Gorges University CTGU
Original Assignee
China Three Gorges University CTGU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Three Gorges University CTGU filed Critical China Three Gorges University CTGU
Priority to CN201611021143.6A priority Critical patent/CN106590672A/zh
Publication of CN106590672A publication Critical patent/CN106590672A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K17/00—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials
    • C09K17/40—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials containing mixtures of inorganic and organic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2101/00—Agricultural use
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2109/00—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE pH regulation

Abstract

一种植被混凝土改良型微生物菌剂，它包括下列重量份配比的原料：混合微生物发酵粉剂、膨润土、硅藻土、硫酸镁、硫酸锌、硼酸；所述的混合微生物发酵粉剂由经扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌经压滤、闪蒸、烘干后，分别得到褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂，按一定比例混合，制得。本发明提供的一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法，可以解决微生物数量和种类无法尽快提升的问题，通过不同有益微生物菌种的配比，以此来改变土壤的理化环境，提高土壤的生物化学活性，提高肥料的利用率和使用效果，最终促进植物的生长，实现植被混凝土肥力可持续性目的。

Description

一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及微生物菌剂技术领域，尤其是一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法。
背景技术
随着国内基础建设迅猛发展，大规模的工程活动造成的边坡开挖随处可见，对生态环境带来了一系列负面影响，成为制约工程建设的重要因素。如何在保护生态环境的基础上实现区域经济发展可持续发展，成为工程领域关注的重点，种类繁多的边坡防护技术应运而生。传统的工程护坡技术能为边坡提供支挡加固措施，但缺乏生态效果。生态护坡技术能形成稳固又具有生态景观效应的防护结构体系，被越来越多的应用于开挖边坡防护中，其中以植被混凝土护坡技术、厚层基材护坡技术和客土喷播技术等应用最为广泛。
植被混凝土生态防护技术根据边坡实际情况确定具体配比，相较于一般水泥土，所包含的绿化添加剂，能有效调节基材pH值，降低水化热，增加基材孔隙率，为土壤微生物和有机菌提供良好繁殖环境，加速基材的活化，提高基材保水保肥及水肥缓释性能。但在追求初期绿化效果和速度的同时，如何提高植被混凝土的肥力持续性和生物活性也越来越引起相关重视。中国专利申请号201510392465.0公开了一种用于植被混凝土护坡的包衣灌木种子及其制备方法，中国专利号CN201310627756.4公开了一种植被混凝土绿化添加剂AB菌的制备方法，能有效提高灌木种子成活率和有益微生物菌群，从而提高植被混凝土肥力和护坡植物成活率。但土壤中微生物种类繁多，目前的改良方法中所添加混合菌种，不能有针对性的提高植被混凝土中微生物活性，使植被混凝土中的微生物数量和种类在实际应用中尽快提升到较高水平，提高肥力长效性。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法，可以解决微生物数量和种类无法尽快提升的问题，通过不同有益微生物菌种的配比，以此来改变土壤的理化环境，提高土壤的生物化学活性，提高肥料的利用率和使用效果，最终促进植物的生长，实现植被混凝土肥力可持续性目的。
为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种植被混凝土改良型微生物菌剂，它包括下列重量份配比的原料：
混合微生物发酵粉剂 5～10重量份 膨润土 40～45重量份
硅藻土 40～45重量份 硫酸镁 4～6重量份 硫酸锌 2～4重量份
硼酸 2～4重量份；
所述的混合微生物发酵粉剂由经扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌经压滤、闪蒸、烘干后，分别得到褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂，按一定比例混合，制得。
用于扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌从植被混凝土基材中分离得到。
由经扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌经压滤、闪蒸、烘干后，分别得到褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂，将褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂按质量比为2：(1.8～2.2)：(2.5～3.5)的比例混合，制得混合微生物发酵粉剂。
各原料的优选重量份配比为：
混合微生物发酵粉剂8重量份 膨润土 42重量份 硅藻土 42重量份
硫酸镁 5重量份 硫酸锌 3重量份 硼酸 3重量份。
一种上述植被混凝土改良型微生物菌剂的制备方法，该方法包括以下步骤：
步骤1：分别对褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌进行扩大培养，再经过压滤、闪蒸、烘干后，按一定比例混合，制得混合微生物发酵粉剂；
步骤2：将膨润土、硅藻土粉碎、过筛，制得无机非矿物质混合粉末；
步骤3：将步骤1制得的混合微生物发酵粉剂以及步骤2制得的无机非矿物质混合粉末，与硫酸镁、硫酸锌、硼酸，按照上述重量份配比混合均匀，即制成植被混凝土改良型微生物菌剂。
步骤1)中，对褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌进行扩大培养的方法如下：
步骤1-1：将各菌种分别接种于试管内相对应的固体斜面培养基中，置于恒温培养箱中，温度28～35摄氏度活化培养24小时～72小时，分别制得褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的活化种子；
步骤1-2：将步骤1-1制得的各活化种子接种于液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，28～35摄氏度振荡培养48小时，制得各一级种子；
步骤1-3：将步骤1-2制得的各一级种子按体积百分比5～10％接种于液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，温度28～35℃条件下培养18～36小时，制得各二级种子；
步骤1-4：将步骤1-3制得的各二级种子按体积百分比5～10％接种于液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，温度28～35℃条件下培养24～48小时，制得各发酵菌液；
即完成褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的扩大培养。
步骤1-1中所使用的固体斜面培养基，每升组分如下如下：
褐球固氮菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂粉16g，K2HPO4 0.2g，K2SO4 0.2g，NaCl 0.2g，CaCO3 5g，MgSO4·7H2O 0.2g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
巨大芽孢杆菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂20g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl0.3g，MgSO4·7H2O 0.3g，FeSO4 0.03g，MnSO4·H2O 0.03g，Ca3(PO4)2 10.0g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
胶质芽孢杆菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂15g，Na2HPO4 0.2g，MgSO4·7H2O 0.2g，NaCl0.2g，CaSO4·2H2O 0.2g，CaCO3 5.0g，钾长石粉2.5g，去离子水1000ml，pH7.2～7.5。
其中，褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均采集于三峡大学内植被混凝土生态修复边坡的土壤。
本发明提供的一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法，有益效果如下：
1、采用微生物菌剂、硅藻土膨润土以及其他微量元素混合后制得，微生物菌剂由褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌组合获得，三者不仅具有相互促进的效果，并且三种菌能利用进硅藻土和膨润土中的吸附性能及离子交换性能，也能在一定程度上促进其他营养元素的吸收，总体上能改善土壤生物、理化性质以及微生物区系组成，增强作物根际的微生物活性，固氮解磷释钾的能力，提高土壤肥力。
2、将硅藻土和膨润土施入酸化土壤进行中和反应，降低土壤酸化度，改良土壤，提高化肥吸收利用率，促进作物中微量元素的吸收。以上措施可有效缓解由于大量使用化肥而造成的土壤酸化、土壤板结、肥料利用率降低等问题，且对土壤没有任何污染。
3、硅藻土为显微多孔结构，具有超强吸附性，可作保水剂，保水保肥，防止水肥流失；使用的膨润土为晶胞形成的层状结构，具有较强离子交换性能，可较好的改善土壤酸碱度。
4、制得的植被混凝土改良型微生物菌剂的有效活菌数为2.2×108～1.1×109个/g，可以解决微生物数量和种类无法尽快提升的问题，通过不同有益微生物菌种的配比，以此来改变土壤的理化环境，提高土壤的生物化学活性，提高肥料的利用率和使用效果，最终促进植物的生长，实现植被混凝土肥力可持续性目的。
具体实施方式
实施例一
一种植被混凝土改良型微生物菌剂，它包括下列重量份配比的原料：
混合微生物发酵粉剂 5重量份 膨润土 40重量份 硅藻土 40重量份
硫酸镁 4重量份 硫酸锌 2重量份 硼酸 2重量份；
所述的混合微生物发酵粉剂由经扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌经压滤、闪蒸、烘干后，分别得到褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂，按质量比为2：1.8：2.5的比例混合，制得。
用于扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌从植被混凝土基材中分离得到(采集于三峡大学内植被混凝土生态修复边坡的土壤)。
一种上述植被混凝土改良型微生物菌剂的制备方法，该方法包括以下步骤：
步骤1：分别对褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌进行扩大培养，再经过压滤、闪蒸、烘干后，按一定比例混合，制得混合微生物发酵粉剂；
步骤2：将膨润土、硅藻土粉碎、过筛，制得无机非矿物质混合粉末；
步骤3：将步骤1制得的混合微生物发酵粉剂以及步骤2制得的无机非矿物质混合粉末，与硫酸镁、硫酸锌、硼酸，按照上述重量份配比混合均匀，即制成植被混凝土改良型微生物菌剂。
制得的植被混凝土改良型微生物菌剂的检测结果数据如下：
由以上检测结果可知：菌剂能够有效地提高土壤中的有效活菌数数量，能够提高起固氮解磷解钾三大功能的有效菌的数量。菌种干燥粉剂结合无机非矿物质和无机微量元素，一方面能够为微生物生长提供营养，另一方面可以为植物的生长提供必需的微量元素。
实施例二
一种植被混凝土改良型微生物菌剂，它包括下列重量份配比的原料：
混合微生物发酵粉剂 8重量份 膨润土 42重量份 硅藻土 42重量份
硫酸镁 5重量份 硫酸锌 3重量份 硼酸 3重量份；
所述的混合微生物发酵粉剂由经扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌经压滤、闪蒸、烘干后，分别得到褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂，按质量比为2：2：2的比例混合，制得。
用于扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌从植被混凝土基材中分离得到(采集于三峡大学内植被混凝土生态修复边坡的土壤)。
一种上述植被混凝土改良型微生物菌剂的制备方法，该方法包括以下步骤：
步骤1：分别对褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌进行扩大培养，再经过压滤、闪蒸、烘干后，按一定比例混合，制得混合微生物发酵粉剂；
步骤2：将膨润土、硅藻土粉碎、过筛，制得无机非矿物质混合粉末；
步骤3：将步骤1制得的混合微生物发酵粉剂以及步骤2制得的无机非矿物质混合粉末，与硫酸镁、硫酸锌、硼酸，按照上述重量份配比混合均匀，即制成植被混凝土改良型微生物菌剂。
制得的植被混凝土改良型微生物菌剂的检测结果数据如下：
由以上检测结果可知：菌剂能够有效地提高土壤中的有效活菌数数量，能够提高起固氮解磷解钾三大功能的有效菌的数量，使菌剂满足生态修复基材中所需的数量的要求。菌种干燥粉剂结合无机非矿物质和无机微量元素，一方面能够为微生物生长提供营养，另一方面可以为植物的生长提供必需的微量元素。同时菌剂的pH值处于弱碱性，使得处于菌剂阶段时能够起到减缓各菌种微生物的代谢，保存菌种，另一方面在菌剂使用时与基材或土壤接触后，能够缓冲土壤的pH值对菌种的影响，有利于菌种在土壤中扩大繁殖。
实施例三
一种植被混凝土改良型微生物菌剂，它包括下列重量份配比的原料：
混合微生物发酵粉剂 10重量份 膨润土 45重量份 硅藻土 45重量份
硫酸镁 6重量份 硫酸锌 4重量份 硼酸 4重量份；
所述的混合微生物发酵粉剂由经扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌经压滤、闪蒸、烘干后，分别得到褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂，按质量比为2：2.2：3.5的比例混合，制得。
用于扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌从植被混凝土基材中分离得到(采集于三峡大学内植被混凝土生态修复边坡的土壤)。
一种上述植被混凝土改良型微生物菌剂的制备方法，该方法包括以下步骤：
步骤1：分别对褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌进行扩大培养，再经过压滤、闪蒸、烘干后，按一定比例混合，制得混合微生物发酵粉剂；
步骤2：将膨润土、硅藻土粉碎、过筛，制得无机非矿物质混合粉末；
步骤3：将步骤1制得的混合微生物发酵粉剂以及步骤2制得的无机非矿物质混合粉末，与硫酸镁、硫酸锌、硼酸，按照上述重量份配比混合均匀，即制成植被混凝土改良型微生物菌剂。
制得的植被混凝土改良型微生物菌剂的检测结果数据如下：
由以上检测结果可知：菌剂能够有效地提高土壤中的有效活菌数数量，能够提高起固氮解磷解钾三大功能的有效菌的数量，使菌剂达到生态修复基材中所需的数量的要求。菌种干燥粉剂结合无机非矿物质和无机微量元素，一方面能够为微生物生长提供营养，另一方面可以为植物的生长提供必需的微量元素。同时菌剂的pH值处于弱碱性，使得处于菌剂阶段时能够起到减缓各菌种微生物的代谢，保存菌种，另一方面在菌剂使用时与基材和土壤接触后，能够缓冲土壤的pH值对菌种的影响，有利于菌种在土壤中扩大繁殖。
实施例四
上述实施例一至三中，对褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌进行扩大培养的方法如下：
步骤1-1：将各菌种分别接种于试管内相对应的固体斜面培养基中，置于恒温培养箱中，温度28～35摄氏度活化培养24小时～72小时，分别制得褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的活化种子；
步骤1-2：将步骤1-1制得的各活化种子接种于液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，28～35摄氏度振荡培养48小时，制得各一级种子；
步骤1-3：将步骤1-2制得的各一级种子按体积百分比5～10％接种于液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，温度28～35℃条件下培养18～36小时，制得各二级种子；
步骤1-4：将步骤1-3制得的各二级种子按体积百分比5～10％接种于液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，温度28～35℃条件下培养24～48小时，制得各发酵菌液；
即完成褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的扩大培养。
步骤1-1中所使用的固体斜面培养基，每升组分如下如下：
褐球固氮菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂粉16g，K2HPO4 0.2g，K2SO4 0.2g，NaCl 0.2g，CaCO3 5g，MgSO4·7H2O 0.2g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
巨大芽孢杆菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂20g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl0.3g，MgSO4·7H2O 0.3g，FeSO4 0.03g，MnSO4·H2O 0.03g，Ca3(PO4)2 10.0g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
胶质芽孢杆菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂15g，Na2HPO4 0.2g，MgSO4·7H2O 0.2g，NaCl0.2g，CaSO4·2H2O 0.2g，CaCO3 5.0g，钾长石粉2.5g，去离子水1000ml，pH7.2～7.5。
其中，褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌均采集于三峡大学内植被混凝土生态修复边坡的土壤。
褐球固氮菌的分离、筛选方法如下：
1、褐球固氮菌的富集：称取10g土样，装入90mL无菌蒸馏水中(灭菌前加入1滴吐温和几颗玻璃珠)，封口后在摇床上震荡20min，静置30S，得到微生物原液。取5ml微生物原液液加入有50mL富集培养基，28℃,150r/m in振荡培养3d。取菌悬液稀释后涂布于分离培养基，28℃培养2d，长出的菌落划线分离得到纯菌株；
2、褐球固氮菌的分离和初筛：将富集后的菌悬液梯度稀释，取10-3～10-6各200μl涂布分离培养及平板，每个做3个重复，培养箱内28℃培养3～5d，观察平板中菌落生长情况，挑选比较光滑，比较大、粘稠的菌落在分离固体培养基平板上进行划线分离及纯化以获得纯菌株，种子培养基保存。
富集培养基中，每升组分如下如下：
葡萄糖10.0g，K2HPO4 0.2g，K2SO4 0.2g，NaCl 0.2g，CaCO3 5g，MgSO4·7H2O 0.2g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
分离固体培养基中，每升组分如下如下：
葡萄糖10.0g，琼脂粉16g，K2HPO4 0.2g，K2SO4 0.2g，NaCl 0.2g，CaCO3 5g，MgSO4·7H2O 0.2g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
种子培养中，每升组分如下如下：
蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，琼脂粉16g，蒸馏水1000mL，pH 7.0～7.5。
巨大芽孢杆菌的分离、筛选方法如下：
1、巨大芽孢杆菌的富集：称取10g土样，装入90mL无菌蒸馏水中(灭菌前加入1滴吐温和几颗玻璃珠)，封口后在摇床上震荡20min，静置30S，得到微生物原液。取5ml原液液加入有50mL富集培养基，28℃,150r/m in振荡培养3d。取菌悬液稀释后涂布于分离培养基，28℃培养2d，长出的菌落划线分离得到纯菌株；
2、巨大芽孢杆菌的分离和初筛：将富集后的菌悬液梯度稀释，取10-3～10-6各200μl涂布分离培养及平板，每个做3个重复，培养箱内28℃培养3～5d，观察平板中菌落生长情况及溶磷圈的产生，将产生的单菌落在分离固体培养基平板上进行划线分离及纯化以获得纯菌株，根据溶磷圈的大小筛选目标菌，种子培养基保存。
富集培养基中，每升组分如下如下：
葡萄糖10.0g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 0.3g，MgSO4·7H2O 0.3g，FeSO4 0.03g，MnSO4·H2O 0.03g，Ca3(PO4)2 10.0g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
分离固体培养基中，每升组分如下如下：
葡萄糖10.0g，琼脂20g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl0.3g，MgSO4·7H2O 0.3g，FeSO40.03g，MnSO4·H2O 0.03g，Ca3(PO4)2 10.0g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
种子培养基中，每升组分如下如下：
蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，琼脂粉16g，蒸馏水1000mL，pH 7.0～7.5。
胶质芽孢杆菌的分离、筛选方法如下：
1、胶质芽孢杆菌的富集：称取10g土样，装入90mL无菌蒸馏水中(灭菌前加入1滴吐温和几颗玻璃珠)，封口后在摇床上震荡20min，静置30S，得到微生物原液。取5ml原液液加入有50mL富集培养基，28℃,150r/m in振荡培养3d。取菌悬液稀释后涂布于分离培养基，28℃培养2d，长出的菌落划线分离得到纯菌株；
2、解钾菌的分离和初筛：将富集后的菌悬液梯度稀释，取10-3～10-6各200μl涂布分离培养及平板，每个做3个重复，培养箱内28℃培养3～5d，观察平板中菌落生长情况及溶钾圈的产生，将产生的单菌落在分离固体培养基平板上进行划线分离及纯化以获得纯菌株，根据溶钾圈的大小筛选目标菌，种子培养基保存。
富集培养基中，每升组分如下如下：
葡萄糖10.0g，Na2HPO4 0.2g，MgSO4·7H2O 0.2g，NaCl 0.2g，CaSO4·2H2O 0.2g，CaCO3 5.0g，钾长石粉2.5g，去离子水1000ml，pH 7.2～7.5；
分离固体培养基中，每升组分如下如下：
葡萄糖10.0g，琼脂15g，Na2HPO4 0.2g，MgSO4·7H2O 0.2g，NaCl 0.2g，CaSO4·2H2O0.2g，CaCO3 5.0g，钾长石粉2.5g，去离子水1000ml，pH 7.2～7.5；
种子培养基中，每升组分如下如下：蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，琼脂粉16g，蒸馏水1000mL，pH 7.0～7.5。

Claims (8)

1.一种植被混凝土改良型微生物菌剂，其特征在于它包括下列重量份配比的原料：
所述的混合微生物发酵粉剂由经扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌经压滤、闪蒸、烘干后，分别得到褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂，按一定比例混合，制得。
2.根据权利要求1所述的一种植被混凝土改良型微生物菌剂，其特征在于：用于扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌从植被混凝土基材中分离得到。
3.根据权利要求1所述的一种植被混凝土改良型微生物菌剂，其特征在于：由经扩大培养的褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌经压滤、闪蒸、烘干后，分别得到褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂，将褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌的干燥粉剂按质量比为2：(1.8～2.2)：(2.5～3.5)的比例混合，制得混合微生物发酵粉剂。
4.根据权利要求1所述的一种植被混凝土改良型微生物菌剂，其特征在于：各原料的重量份配比为：
5.一种上述权利要求1-4中任一项所述的植被混凝土改良型微生物菌剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
步骤1：分别对褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌以及胶质芽孢杆菌进行扩大培养，再经过压滤、闪蒸、烘干后，按一定比例混合，制得混合微生物发酵粉剂；
步骤2：将膨润土、硅藻土粉碎、过筛，制得无机非矿物质混合粉末；
步骤3：将步骤1制得的混合微生物发酵粉剂以及步骤2制得的无机非矿物质混合粉末，与硫酸镁、硫酸锌、硼酸，按照上述重量份配比混合均匀，即制成植被混凝土改良型微生物菌剂。
6.根据权利要求5所述的植被混凝土改良型微生物菌剂的制备方法，其特征在于步骤1)中，对褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌进行扩大培养的方法如下：
步骤1-1：将各菌种分别接种于试管内相对应的固体斜面培养基中，置于恒温培养箱中，温度28～35摄氏度活化培养24小时～72小时，分别制得褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的活化种子；
步骤1-2：将步骤1-1制得的各活化种子接种于各相对应的液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，28～35摄氏度振荡培养48小时，制得各一级种子；
步骤1-3：将步骤1-2制得的各一级种子按体积百分比5～10％接种于各相对应的液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，温度28～35℃条件下培养18～36小时，制得各二级种子；
步骤1-4：将步骤1-3制得的各二级种子按体积百分比5～10％接种于各相对应的液体培养基中，置于振荡机中，在150～180r/min的转速条件下，温度28～35℃条件下培养24～48小时，制得各发酵菌液；
即完成褐球固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的扩大培养。
7.根据权利要求6所述的植被混凝土改良型微生物菌剂的制备方法，其特征在于步骤1-1中所使用的固体斜面培养基，每升组分如下：
褐球固氮菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂粉16g，K2HPO4 0.2g，K2SO4 0.2g，NaCl0.2g，CaCO3 5g，MgSO4·7H2O 0.2g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
巨大芽孢杆菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂20g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 0.3g，MgSO4·7H2O 0.3g，FeSO4 0.03g，MnSO4·H2O 0.03g，Ca3(PO4)2 10.0g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
胶质芽孢杆菌固体斜面培养基：葡萄糖10.0g，琼脂15g，Na2HPO4 0.2g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，CaSO4·2H2O 0.2g，CaCO3 5.0g，钾长石粉2.5g，去离子水1000ml，pH 7.2～7.5。
8.根据权利要求6所述的植被混凝土改良型微生物菌剂的制备方法，其特征在于步骤1-2、1-3和1-4中所使用的液体培养基，每升组分如下：
褐球固氮菌液体培养基：葡萄糖10.0g，K2HPO4 0.2g,K2SO4 0.2g,NaCl 0.2g，CaCO3 5g，MgSO4·7H2O 0.2g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
巨大芽孢杆菌液体培养基：葡萄糖10.0g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 0.3g，MgSO4·7H2O0.3g，FeSO4 0.03g，MnSO4·H2O 0.03g，Ca3(PO4)2 10.0g，蒸馏水1000mL，pH值7.0～7.5；
胶质芽孢杆菌液体培养基：葡萄糖10.0g，Na2HPO4 0.2g，MgSO4·7H2O 0.2g，NaCl 0.2g，CaSO4·2H2O 0.2g，CaCO3 5.0g，钾长石粉2.5g，去离子水1000ml，pH 7.2～7.5。
CN201611021143.6A 2016-11-15 2016-11-15 一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法 Pending CN106590672A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611021143.6A CN106590672A (zh) 2016-11-15 2016-11-15 一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611021143.6A CN106590672A (zh) 2016-11-15 2016-11-15 一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106590672A true CN106590672A (zh) 2017-04-26

Family

ID=58592302

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201611021143.6A Pending CN106590672A (zh) 2016-11-15 2016-11-15 一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106590672A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107459388A (zh) * 2017-08-01 2017-12-12 三峡大学 一种以腐植酸为主料的生态护坡基材及其制备方法
CN109956713A (zh) * 2019-05-13 2019-07-02 辽宁大学 一种植被混凝土及其制备方法和应用
CN110451837A (zh) * 2019-08-07 2019-11-15 叶建军 湿喷植被混凝土添加剂

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101914445A (zh) * 2010-07-20 2010-12-15 兰州市南北两山环境绿化工程指挥部 土著益生微生物固体菌剂及其制备方法和应用
CN102021118A (zh) * 2010-07-20 2011-04-20 兰州市南北两山环境绿化工程指挥部 土著益生巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和圆褐固氮菌液体菌剂的制备方法
CN102795944A (zh) * 2012-09-04 2012-11-28 德州市元和农业科技开发有限责任公司 一种土壤改良型生物肥料及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101914445A (zh) * 2010-07-20 2010-12-15 兰州市南北两山环境绿化工程指挥部 土著益生微生物固体菌剂及其制备方法和应用
CN102021118A (zh) * 2010-07-20 2011-04-20 兰州市南北两山环境绿化工程指挥部 土著益生巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和圆褐固氮菌液体菌剂的制备方法
CN102795944A (zh) * 2012-09-04 2012-11-28 德州市元和农业科技开发有限责任公司 一种土壤改良型生物肥料及其制备方法

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107459388A (zh) * 2017-08-01 2017-12-12 三峡大学 一种以腐植酸为主料的生态护坡基材及其制备方法
CN109956713A (zh) * 2019-05-13 2019-07-02 辽宁大学 一种植被混凝土及其制备方法和应用
CN110451837A (zh) * 2019-08-07 2019-11-15 叶建军 湿喷植被混凝土添加剂
CN110451837B (zh) * 2019-08-07 2021-07-09 叶建军 湿喷植被混凝土添加剂

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104450597B (zh) 一种石油降解菌固体菌剂的制备方法及由其制备的固体菌剂修复石油污染的土壤的方法
CN104894010B (zh) 一种拮抗土传真菌病害的复合微生物肥料及其制备方法和应用
CN105777329B (zh) 一种固态复合生物多控保水保湿肥料及其制备方法与应用
CN110373207A (zh) 一种盐碱地改良的微生物菌剂及其制备工艺
CN106947725A (zh) 微生物菌剂及其在盐碱地土壤改良中的应用
CN103952349B (zh) 阿氏芽孢杆菌及微生物菌剂和它们的应用
CN103396971B (zh) 一株洋葱伯克霍尔德菌及其应用
CN107297388B (zh) 一种消除连作障碍的土壤微生态环境修复方法
CN102173928A (zh) 林木无纺布容器育苗生物型基质
CN106544302A (zh) 一种用于土壤改良的复合微生物菌剂及其制备方法
CN102747017A (zh) 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN107409928A (zh) 一种有机果园的种植方法
CN106590672A (zh) 一种植被混凝土改良型微生物菌剂及其制备方法
CN103396967A (zh) 一株分散泛菌及其应用
CN106591147A (zh) 一种黑曲霉njdl‑12菌株及其在滨海盐碱土改良上的应用
CN104762087B (zh) 一种用于改良滩涂盐碱土壤结构的微生物添加物及其制备方法和应用
CN108865161A (zh) 一种复合盐碱地改良剂及其制备和应用
CN104961538A (zh) 用于改良辣椒连作障碍的凹土基固定化复合微生物菌剂及其制备方法
CN103396972A (zh) 一株荧光假单胞菌及其应用
CN109601248A (zh) 一种丛枝菌根真菌的野外扩繁方法
CN103238507A (zh) 全有机栽培基质
CN103242065A (zh) 双菇渣全有机栽培基质
CN101812425A (zh) 一种分离纯化嗜铁细菌的方法
CN104830706B (zh) 一株胶冻样芽孢杆菌及马铃薯专用生物有机缓控释肥料
CN106520630A (zh) 一种巨大芽孢杆菌qbjp‑f6及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170426