CN106551920B

CN106551920B - 一种多元番茄红素磷脂复合物及其制备方法

Info

Publication number: CN106551920B
Application number: CN201510629195.0A
Authority: CN
Inventors: 张钧寿; 孙超男
Original assignee: Nanjing Hill Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Hill Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2015-09-28
Filing date: 2015-09-28
Publication date: 2019-12-24
Anticipated expiration: 2035-09-28
Also published as: CN106551920A

Abstract

本发明公开了一种多元番茄红素磷脂复合物及其制备方法，该多元番茄红素磷脂复合物主要由天然多元番茄红素与磷脂制成，其中，天然多元番茄红素与磷脂的质量比为：1:0.05～5。本发明多元番茄红素磷脂复合物安全可靠，显著提高多元番茄红素的生物利用度。

Description

一种多元番茄红素磷脂复合物及其制备方法

技术领域：

本发明属于制药技术领域，具体涉及一种提高番茄红素生物利用度的多元番茄红素磷脂复合物及其制备方法。

背景技术

番茄红素(lycopene)，分子式为C₄₀H₅₆，相对分子质量为536.85，属类胡萝卜素，广泛存在于自然界中，是人体不能合成的一种功能性天然色素。番茄红素是目前已知的抗氧化活性最高的物质之一，被称为“植物黄金”，现有报道显示，番茄红素可降低发生肿瘤的危险性，预防心血管疾病、骨质疏松症、高血压的发生，延缓衰老，保护皮肤，并对男性和女性不育等也有一定的防护作用，已成为目前食品和医药领域的研究热点，在医药、功能食品、化妆品等行业得到了广泛应用。

番茄红素分子中的长链烷烃结构决定了它的脂溶性，不溶于水，难溶于甲醇等极性有机溶剂。其存在的11个共轭双键，导致番茄红素的稳定性极差，容易发生顺反异构化，易受空气中的氧、光线氧化和分解。由于番茄红素溶解性能较差，造成口服生物利用度极低，因此，番茄红素的推广和应用亟待解决的问题即溶解性、稳定性以及其生物利用度。现有公开的番茄红素制剂技术，如软胶囊(CN201410856732.0，)、微囊化(CN201410806201.0、CN201310217228.1、CN201210397726.4)、环糊精包合物(CN201410423227.7、CN201410042216.4)、肠溶胶囊(CN201410166751.0)或是上述两种或多种技术的结合(CN201410210824.1)等大都以提高其稳定性和溶解度为目的，虽有部分提到可以改善其生物利用度，但鲜见其实际的生物利用度数据，至于天然番茄红素磷脂复合物更无资料可查。

已有文献报道，磷脂可与多种类型的化合物通过氢键、离子键形成较为稳定的复合物，从而改善母体化合物的溶解性，增强其吸收，且其制备过程简单、成本低廉，利于产品的工业化。但是，多元番茄红素与磷脂之间是靠分子之间的范德华力结合，结合力度弱，而且，现有技术制备磷脂复合物需要的原料药纯度要求高，否则难以保证磷脂复合物的质量。

经文献检索，目前尚未发现将番茄红素与磷脂结合，以改善其吸收，提高其生物利用度的报道，特别是天然多元番茄红素主要由番茄中提取，所含的成分如番茄红素、六氢番茄红素、八氢番茄红素等多种活性成分，与磷脂之间的结合更加难以稳定，生物利用度难以提高。

发明内容

本发明的目的是克服上述不足之处提供一种多元番茄红素磷脂复合物，此复合物可显著提高番茄红素的生物利用度。

本发明的另一目的是提供该多元番茄红素磷脂复合物的制备方法。本发明不仅可以有力地促进番茄红素的推广和应用，还可以填补国内外市场上的空白，具有巨大的社会效益和经济效益，应用前景广阔。

本发明的目的是通过以下方式实现的：

一种多元番茄红素磷脂复合物，该多元番茄红素磷脂复合物组要由天然多元番茄红素与磷脂制成，天然多元番茄红素与磷脂的质量比为：1:0.05～5，优选天然多元番茄红素与磷脂的质量比为：1:0.5～5，最优选天然多元番茄红素与磷脂的质量比为：1:0.5～2。本发明所使用磷脂用量远高于常见复合物中磷脂用量，能够保证天然多元番茄红素中所含的活性成分番茄红素、六氢番茄红素、八氢番茄红素均与磷脂形成复合物。但是磷脂用量不能过高，过高不仅导致原料的浪费，且产物粘度过大，不易操作，对其稳定性产生不利影响。

天然多元番茄红素中，番茄红素含量为5％～20％，六氢番茄红素含量为0.5％～3％、八氢番茄红素含量为0.5％～3％；优选番茄红素含量为5％～10％，六氢番茄红素含量为0.5％～1.5％、八氢番茄红素含量为0.5％～1.5％；最优选天然多元番茄红素中，番茄红素含量为5％～10％，六氢番茄红素含量为1％～1.3％、八氢番茄红素含量为1％～1.3％。

上述磷脂选自天然磷脂、合成磷脂、溶血磷脂、胆甾醇、胆酸及其盐类的一种或他们的任意混合物，优选为天然磷脂。天然磷脂优选为蛋黄卵磷脂、大豆磷脂。

本发明所采用的天然多元番茄红素主要是由番茄中提取，所含成分番茄红素、六氢番茄红素、八氢番茄红素均能与磷脂形成复合物，从而发生协同作用，达到更佳效果。

本发明多元番茄红素磷脂复合物中还可以包含抗氧化剂、吸收促进剂或避光剂等其他组分的一种或多种。

本发明还可将多元番茄红素磷脂复合物与药学可接受的辅料制成剂型，所述的剂型优选为软胶囊、硬胶囊、片剂、粉剂、颗粒剂、滴丸、乳剂、口服液、凝胶剂、栓剂或贴剂。可用于食品、保健品、药品及化妆品行业。

上述多元番茄红素磷脂复合物的制备方法包括以下步骤：

将天然多元番茄红素与磷脂溶于有机溶剂中，20～70℃条件下搅拌回流至溶液澄清透明，通过蒸发或干燥除去有机溶剂，即得多元番茄红素磷脂复合物。优选搅拌温度为25～45℃。所述的蒸发或干燥可采用旋转蒸发法、喷雾干燥法或真空干燥法。

所使用的溶剂为乙酸乙酯、乙醇、丙酮、氯仿、己烷、乙醚、二氯甲烷、石油醚、四氢呋喃中的一种或多种混合，优选为乙酸乙酯或乙醚，最优选为乙酸乙酯。天然多元番茄红素占溶剂用量的0.2％～3％(g/ml)。

番茄红素与磷脂之间并非以氢键或离子键结合，而是以较弱的范德华力结合，且番茄红素的溶解度较小，大量的实验得到乙酸乙酯较其他溶剂具有更佳的安全性和溶解度，优选天然多元番茄红素占乙酸乙酯用量的0.2％～3％(g/ml)，在此用量范围内，可以使得番茄红素最大限度的溶解，以增加番茄红素分子与磷脂分子之间碰撞机会。但是溶剂用量也不能过大，过大由于溶剂中的分子较为稀少，亦会减小番茄红素分子与磷脂分子之间碰撞机会，使其结合率下降。

本发明的多元番茄红素磷脂复合物还可采用下述方法制备：

将天然多元番茄红素与磷脂溶于有机溶剂中，加入抗氧化剂、吸收促进剂或避光剂，20～70℃条件下搅拌回流至溶液澄清透明，通过旋转蒸发法、喷雾干燥法或真空干燥法除去有机溶剂，即得多元番茄红素磷脂复合物。

以下通过具体试验例对本发明效果进行进一步说明：

本发明所述的多元番茄红素磷脂复合物动物体内药代学研究研究如下：

(1)取多元番茄红素磷脂复合物(本发明实施例2制备)，以实施例2所用天然多元番茄红素油树脂原料为参比(均于0.5％CMC中混悬)：将6只SD雄性大鼠随机分成两组，实验前禁食12h,按50mg/kg单剂量灌胃多元番茄红素磷脂复合物和天然多元番茄红素油树脂原料，分别于0、1、2、4、6、8、10、12h眼眶取血100uL,经肝素处理后离心分离，取血浆50uL依次加入50uL含1％BHT的无水乙醇和50uL蒸馏水，涡旋60s，精密量取含1％BHT的乙酸乙酯250uL，涡旋振荡60s后均以10000rpm的速度离心10min，取上清液250uL置干净离心管中，再次等量乙酸乙酯萃取后收集上清液，37℃恒温下真空干燥至干，加入50uL的含1％BHT的乙酸乙酯后涡旋1min，取上清液20uL进样,照HPLC方法，以Diamonsil C18柱(4.6mm×150mm，5um)为色谱柱，甲醇：乙腈(V:V＝50:50)为流动相，检测波长为472nm，流速为1.5mL/min，依法检测，并绘制药时曲线(见附图1)。

结果(见表1和表2)显示，多元番茄红素磷脂复合物与多元番茄红素原料的t_max均为4h，前者c_max为后者的2.8倍，与番茄红素原料相比，形成的多元磷脂复合物较原料生物利用度提高了300％，说明多元番茄红素磷脂复合物显著提高了其在动物体内生物利用度；

表1实施例2与其所用原料的大鼠体内番茄红素血液浓度表

表2实施例2与其所用原料的大鼠体内番茄红素血液浓度各参数表

(2)取多元番茄红素磷脂复合物(本发明实施例4制备)，以现有制剂1和现有制剂2(现有制剂1为片剂，番茄红素含量为：1.6g/100g 500mg/片；现有制剂2为胶囊，番茄红素含量为7.0g/100g，0.35g/粒)为参比制剂(现有制剂也可为市售制剂)：将9只SD雄性大鼠随机分成两组，实验前禁食12h，按50mg/kg单剂量灌胃多元番茄红素磷脂复合物、现有制剂1和现有制剂2，依法进行血样采集、处理及进样检测，并绘制药时曲线(见附图2)。结果(见表3与表4)显示：与两种现有番茄红素产品相比，多元番茄红素磷脂复合物的c_max分别为两者的2.47倍与2.88倍，而生物利用度分别提高了213％和417％。说明多元番茄红素磷脂复合物比番茄红素的现有产品更利于其本身的吸收。

表3实施例3与两种现有制剂的大鼠体内番茄红素血液浓度表

表4实施例3与两种现有制剂的大鼠体内番茄红素血液浓度各参数表

与现有技术比较本发明的有益效果：

(1)本发明多元番茄红素与磷脂形成复合物之后，使得番茄红素的亲水性与亲脂性均得到了改善，为其生物利用度的提高奠定了基础。药代学结果显示，与多元番茄红素原料相比，形成的多元磷脂复合物较原料生物利用度提高了300％；与两种现有番茄红素产品相比，生物利用度分别提高了213％和417％。说明多元番茄红素磷脂复合物较番茄红素的现有产品具有显著的吸收优势，可以更小的剂量达到更佳的效果。此外，本发明磷脂复合物具有良好的生物相容性，对生物体正常的新陈代谢有明显的调节作用，同时安全可靠，可克服纳米制剂在改善生物利用度的同时带来的表面活性剂用量大所导致的安全性问题.

(2)本发明制备工艺简单、反应条件温和，从而更利于番茄红素在药品、食品、保健品及化妆品行业中的工业化生产与推广。

(3)现有技术制备磷脂复合物需要的原料药纯度要求高，但是本发明多元番茄红素磷脂复合物使用的原料天然多元番茄红素含量仅在5％～20％即可，其他成分的含量并不影响制备得到的磷脂复合物的稳定性及生物利用度。

附图说明

图1为SD大鼠口服实施例2多元番茄红素磷脂复合物和实施例2所用天然番茄红素油树脂原料后的药时曲线图。

图2为SD大鼠分别口服实施例4多元番茄红素磷脂复合物、现有制剂1和现有制剂2后的药时曲线图。

具体实施方式

以下通过具体实施例进一步说明本发明。但实施例的具体细节仅用于解释本发明，不应理解为对本发明总的技术方案的限定。以下实施例所述天然多元番茄红素粉、天然多元番茄红素油树脂购自新疆科宇科技有限公司。

实施例1

天然多元番茄红素粉(番茄红素含量为5％、六氢番茄红素含量为0.5％、八氢番茄红素含量为0.5％)1g与大豆卵磷脂0.5g溶于40mL乙醚中，25℃水浴回流(回流的同时进行搅拌)3h，取出，过滤，滤液真空干燥，即得。取适量，用二氯甲烷溶解后，流动相定容，经HPLC检测可知其番茄红素含量为1.59％、六氢番茄红素含量为0.15％、八氢番茄红素含量为0.15％。

实施例2

天然多元番茄红素油树脂(番茄红素含量为10％、六氢番茄红素含量为1％、八氢番茄红素含量为1％)1.4g与蛋黄卵磷脂3g溶于600mL乙醚中，25℃水浴回流(回流的同时进行搅拌)7h后取出过滤，滤液真空干燥，即得。取适量，用二氯甲烷溶解后，流动相定容，经HPLC检测可知其番茄红素含量为3.26％、六氢番茄红素含量为0.32％、八氢番茄红素含量为0.31％。

实施例3

天然多元番茄红素粉(番茄红素含量为5％、六氢番茄红素含量为0.5％、八氢番茄红素含量为0.5％)1g与蛋黄卵磷脂0.5g溶于40mL乙酸乙酯中，45℃水浴回流(回流的同时进行搅拌)3h后取出过滤，滤液真空干燥，即得。取适量，用二氯甲烷溶解后，流动相定容，经HPLC检测可知其番茄红素含量为1.98％、六氢番茄红素含量为0.20％、八氢番茄红素含量为0.19％。

实施例4

天然多元番茄红素油树脂(番茄红素含量为10％、六氢番茄红素含量为1％、八氢番茄红素含量为1％)2g与蛋黄卵磷脂4g溶于700mL乙酸乙酯中，45℃水浴回流(回流的同时进行搅拌)6h后，真空干燥，即得。取适量，用二氯甲烷溶解后，流动相定容，经HPLC检测可知其番茄红素含量为3.33％、六氢番茄红素含量为0.32％、八氢番茄红素含量为0.32％。

实施例5

天然多元番茄红素油树脂(番茄红素含量为10％、六氢番茄红素含量为1％、八氢番茄红素含量为1％)2g与蛋黄卵磷脂4g溶于700mL乙酸乙酯中，并加入特丁基对苯二酚(TBHQ)0.00385g和天然维生素E琥珀酸酯0.2g(两者均为抗氧化剂)，45℃水浴回流(回流的同时进行搅拌)6h后取出，旋转蒸发，即得。取适量，用二氯甲烷溶解后，流动相定容，经HPLC检测可知其番茄红素含量为3.33％、六氢番茄红素含量为0.34％、八氢番茄红素含量为0.33％。

实施例6

天然多元番茄红素油树脂(番茄红素含量为10％、六氢番茄红素含量为1％、八氢番茄红素含量为1％)2g，溶于500mL二氯甲烷和己烷按照1:1的混合物中，胆甾醇4g溶于200mL乙醇中，混合后45℃水浴回流(回流的同时进行搅拌)6h后取出，旋转蒸发，即得。取适量，用二氯甲烷溶解后，流动相定容，经HPLC检测可知其番茄红素含量为3.07％、六氢番茄红素含量为0.28％、八氢番茄红素含量为0.28％。

实施例7

天然多元番茄红素油树脂(番茄红素含量为20％、六氢番茄红素含量为2％、八氢番茄红素含量为2％)1g与溶血磷脂5g溶于300mL四氢呋喃中，45℃水浴回流(回流的同时进行搅拌)6h后取出过滤，滤液旋转蒸发，即得。取适量，用二氯甲烷溶解后，流动相定容，经HPLC检测可知其番茄红素含量为3.02％、六氢番茄红素含量为0.29％、八氢番茄红素含量为0.29％。

实施例8

按照实施例1方法制备得到的多元番茄红素磷脂复合物研磨后加入淀粉等颗粒剂常规辅料按照常规工艺制备得到颗粒剂。

实施例9

按照实施例2方法制备得到的多元番茄红素磷脂复合物研磨后加入糊精等片剂常规辅料按照常规工艺压制得片剂。

实施例10

按照实施例3方法制备得到的多元番茄红素磷脂复合物研磨后加入淀粉等常规辅料按照常规工艺制备得到颗粒，再灌装硬胶囊皮制得胶囊剂。

实施例11

按照实施例4方法制备得到的多元番茄红素磷脂复合物研磨后加入滴丸常规辅料按照常规工艺制备得到滴丸。

以上番茄红素含量按照GB/T 22249-2008方法进行检测。六氢番茄红素和八氢番茄红素含量检测分别按照以下文献中记载的方法进行：An improved HPLC method forthe separation of fourteen carotenoids,including 15-/13-and 9-cis-β-caroteneisomers,phytoene and phytofluene.F.Granado,B.Olmedilla,I.Blanco&E.Rojas-hidalgo.Journal of Liquid Chromatography,1991,14(13),2457-2475.

Claims

1.一种多元番茄红素磷脂复合物，其特征在于多元番茄红素磷脂复合物主要由天然多元番茄红素与磷脂制成，其中，天然多元番茄红素与磷脂的质量比为：1:0.05～5；天然多元番茄红素中，番茄红素含量为5%～20%，六氢番茄红素含量为0.5%～3%、八氢番茄红素含量为0.5%～3%；所述的多元番茄红素磷脂复合物由以下方法制备得到：将天然多元番茄红素与磷脂溶于有机溶剂中，20～70℃条件下搅拌回流至溶液澄清透明，通过蒸发或干燥除去有机溶剂，即得多元番茄红素磷脂复合物；所使用的有机溶剂为乙酸乙酯或乙醚；天然多元番茄红素占溶剂用量的0.2%～3%g/ml。

2.根据权利要求1所述的多元番茄红素磷脂复合物，其特征在于天然多元番茄红素与磷脂的质量比为：1:0.5～5。

3.根据权利要求1或2所述的多元番茄红素磷脂复合物，其特征在于所述磷脂选自天然磷脂、溶血磷脂、合成磷脂及其盐类的一种或它们的任意混合物。

4.根据权利要求3所述的多元番茄红素磷脂复合物，其特征在于所述磷脂为天然磷脂。

5.根据权利要求3所述的多元番茄红素磷脂复合物，其特征在于所述的天然磷脂为蛋黄卵磷脂、大豆磷脂。

6.根据权利要求1或2所述的多元番茄红素磷脂复合物，其特征在于多元番茄红素磷脂复合物还包含抗氧化剂、吸收促进剂或避光剂中的一种或多种。

7.根据权利要求1所述的多元番茄红素磷脂复合物，其特征在于将多元番茄红素磷脂复合物与药学可接受的辅料制成剂型。

8.根据权利要求7所述的多元番茄红素磷脂复合物，其特征在于所述的剂型为软胶囊、硬胶囊、片剂、粉剂、颗粒剂、滴丸、乳剂、口服液、凝胶剂、贴剂或栓剂。

9.一种权利要求1所述的多元番茄红素磷脂复合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

将天然多元番茄红素与磷脂溶于有机溶剂中，20～70℃条件下搅拌回流至溶液澄清透明，通过蒸发或干燥除去有机溶剂，即得多元番茄红素磷脂复合物；其中，所使用的有机溶剂为乙酸乙酯或乙醚；天然多元番茄红素占溶剂用量的0.2%～3%g/ml。