CN106518942A - 用于治疗hcv感染的新型环磷酯 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种新型环状磷酯化合物及其药学上可接受的盐或酯及用于治疗HCV感染的药物组合物。本发明采用特定的环来替代Hepdirect环状磷酯前药中苯环上的氯，不仅可以有效降低毒性，消除潜在的致癌风险，而且能够基本保持甚至提高药代特性和体内活性，是与Hepdirect环状磷酯相比更理想的临床治疗试剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种适于治疗HCV感染的新型环磷酯。
背景技术
丙型肝炎病毒(HCV)感染是一个严重的健康问题，感染HCV会导致慢性肝脏疾病，如肝硬化和肝癌。HCV感染人群众多，据估计，约占全世界人口的2-15％。根据美国疾病控制中心估计，仅美国就有四百五十万感染者。按照世界卫生组织的统计，全世界有超过2亿的感染者，每年至少新增300万-400万感染者。在感染人群中，约20％患者可以自动清除HCV病毒，但其余患者体内驻扎的HCV病毒将会伴随他们一生。10-20％的慢性感染者最终发展成肝硬化或肝癌。HCV疾病为非肠道传播，它通过污染的血液和血液制品、污染针头、性传播或直接由被感染或携带者母亲传播给其子女。中国当前用于HCV感染的治疗仅限于单独使用重组干扰素α或与核苷类似物利巴韦林联合的免疫疗法，但疗效有限。此外，还没有批准的HCV疫苗。因此，迫切需要能够有效治疗HCV感染的改进药物。本发明提供了一种有望满足该需求的化合物。
含有磷酸基团的核苷药物，如替诺福韦等，在生理pH下是高度负电的，很难透过细胞膜或肠壁，因此不易到达作用靶点。同时，虽然核苷本身可以透过细胞膜，但核苷在肝细胞里的单磷酸化非常慢，如果单独成药则生物利用度非常差，导致活性三磷酸代谢物在靶细胞中的浓度很低。而做成前药可以解决这类问题，如图1所示，核苷单磷酸前药很容易透过细胞膜，在细胞中各种酶的作用下脱除前药部分成为核苷单磷酸，继而生成活性的三磷酸代谢物，因此具有靶向性。
索非布韦(PSI7977)是Gilead上市的一款丙肝药物，该药就是一个核苷磷酰胺前药，能在体内肝组织细胞中有效的转化为活性核苷三磷酸代谢物(PSI7409)。
Erion等也提出了另外一种肝靶向的环状磷酯前药(J.Am.Chem.Soc.2004,126:5154-5163；J.Pharmacol.Exp.Ther.2005,312:554-560；Curr Opin InvestigDrugs.2006,7:109-117)，如下式所示，这种前药结构中的4位芳基取代基能够被肝细胞中的细胞色素P450同功酶家族中CYP3A4特异性催化氧化，随后4位开环生成一个带有单磷酸负电荷的中间体，使其不易通过细胞膜而保留在肝细胞内，再经过酯酶催化水解、β-消除反应，释放出核苷单磷酸。而前药部分产生的芳基乙烯酮则与肝细胞中含量丰富的谷胱甘肽结合而被清除。
WO2009073506公开了Hepdirect环状磷酯前药，这类前药，如Compound B，产生的三磷酸代谢物PSI7409能在肝中高度集中。
WO2015077368也公开了Hepdirect环状磷酯前药，这类前药，如Compound 102，产生的三磷酸代谢物PSI7409也能在肝中高度集中。
CN103848877B公开了同一类Hepdirect环磷酯前药，这类前药，如Compound VIII，在肝组织中分布最高。
虽然Hepdirect环磷酯这类前药确实有肝靶向的优势，但这类前药中肝靶向乙肝药物Pradefovir(一种环状磷酯阿德福韦前药，曾开发到临床3期)，在动物模型上看到肿瘤形成，高剂量组大鼠、小鼠会增加患癌风险，从而停止了进一步的开发。由于阿德福韦酯并不会产生这种毒性，因此，该毒性非常可能是由前药部分1或其代谢物2引起的。由此推断，WO2009073506、WO2015077368、CN103848877中发明的以索非布韦核苷部分为基础、以如下化合物1为前药前体的Hepdirect环磷酯可能存在患癌风险。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有Hepdirect环状磷酯前药具有潜在致癌毒性风险的不足，提供一类新的能够用于治疗HCV病毒的环状磷酯前药。
为解决以上技术问题，本发明采取如下技术方案：
一种式(I)的化合物及其药学上可接受的盐或酯，
其中，
R1选自H、COR2，其中，R2为不含或含有杂原子的烷基或卤代烷基；
X,Y独立地为CR3R4、O或S，其中R3，R4独立地为H，C1-6烷基或C1-6卤代烷基；
n是1、2、3或4。
根据本发明，式(I)中，R2优选为不含或含有杂原子的烷基，其中，杂原子可以是O，N，P，S等。进一步地，烷基碳原子数可以为1～20个，优选1-10个，更优选1-6个。杂原子优选0-3个，可以是作为碳链的取代基例如氨基，羟基的形式存在，也可以是对碳链进行间断的方式，例如醚的形式，胺的形式等。根据一个优选的方面，R2为不含或含有1个或2个或3个杂原子的C1-6烷基，其中杂原子为O和/或N。
根据本发明的一个具体且优选方面，R1为H、乙酰基、丙酰基、丁酰基或氨基取代丁酰基。
根据本发明，R3或R4优选为H或C1-6烷基，其中C1-6烷基例如甲基，乙基，异丙基等，更优选地，R3或R4优选为H或C1-3烷基，最优选地，R3或R4均为H。
根据本发明的优选方案，X,Y独立地为CH2、CHCH3、CHCH2CH3、O或S。根据一个进一步的优选方案，X,Y同时为CH2。根据又一进一步的优选方案，X,Y同时为O；根据第三个进一步的优选方案，X,Y中的一个为O或S，另一个为CH2。
根据本发明，n进一步优选为1或2或3，更优选为1或2。
根据本发明的一个具体且优选方面，式(I)中，R1为H、乙酰基、丙酰基、丁酰基或氨基取代丁酰基；X,Y独立地为CH2或O；n为1或2。
根据本发明，典型的化合物举例如下：
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
cis 1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
cis 1-((2R,3R,4R,5R)-5-((((2R,4S)-4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢-1H-茚-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并呋喃-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-3-甲基-5-(((2-氧化-4-(5,6,7,8-四氢萘-2-位)-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并[b]噻吩-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
(2R,3R,4R,5R)-2-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-5-(2,4-二氧-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-位)-4-氟-4-甲基四氢呋喃-3-位丙酸酯。
本发明所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯可替代现有Hepdirect环状磷酯前药和索非布韦，用于HCV感染治疗和HCV感染治疗药物的制备，在保持甚至提高药代性质的前提下，降低毒性，提高安全性。
本发明进一步提供一种药物组合物，其包括第一治疗剂和药学可接受基质，其中第一治疗剂为选自本发明所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯中的一种或多种的组合。
根据本发明的药物组合物为HCV感染治疗药物，可用于HCV感染治疗。
进一步地，所述药物组合物还包括第二治疗剂，第二治疗剂为选自HCV抗病毒试剂、免疫调节剂及抗感染试剂中的一种或多种的组合。
进一步地，所述HCV抗病毒试剂可选自HCV蛋白酶抑制剂、HCV NS5A抑制剂和HCVNS5B聚合酶抑制剂等。
本发明还提供一种治疗HCV感染的方法，该方法包括给予HCV感染病人一种本发明的化合物或其药学上可接受的盐。
进一步地，该方法还包括进一步给予HCV感染病人另一种不同于本发明化合物的其他抗病毒试剂或者还给予一种免疫调节剂或者还给予一种抗感染试剂等。
由于以上技术方案的实施，本发明与现有技术相比具有如下优点：
本发明意外发现，采用特定的环来替代Hepdirect环状磷酯前药中苯环上的氯，不仅可以有效降低毒性，消除潜在的致癌风险，而且能够基本保持甚至提高药代特性和体内活性。为此，本发明化合物及其酯或可药用盐是与Hepdirect环状磷酯相比更理想的临床治疗试剂。
附图说明
图1显示了核苷单磷酸前药裂解和转化过程。
具体实施方式
根据本发明，如果无另外说明，这里引用的所有术语具有与那些本领域的熟练人员理解本发明相同的含义。
如本文所使用的用语“一”实体是指一个或多个所述实体，例如，一化合物是指一个或多个化合物或者至少一个化合物。同样地，术语“一个或多个”以及“至少一个”在本文可互换使用。
如无其他与特定的含义相背的，以复数形式表示的词语也包括一个单数词语的含义。例如，词语“化合物”也指“一个化合物”，除非一个单数可能与特定的含义相背。
如本文所使用的术语“选择性地”是指其后描述的事件或情况可以出现但不是必须出现，并且该描述包括该事件或情况出现的例子和不出现的例子。
如本文所使用的术语“代谢物”是指给予一个客体需要的药物后在体内产生的一个化合物。
如本文所使用的术语“大约”(也可表示为～)是指援引的数值是一个在标准实验误差内变化的部分范围。
如本文所使用的术语“前药”是指一个药物分子的生物转化衍生物，它在体内经过酶或化学的转化释放出活性母药，然后活性母药发挥期望的药效。关于前药也有其他的描述，例如J.Rautio等的文献(Nat Rev Drug Discov.,2008Mar；7(3):255-70)，据此通过引用将上述文献完整地并入。
如本文所使用的术语“卤素”包括氯、溴、碘和氟。
如本文所用的术语“盐”是指含阳离子和阴离子的化合物，其可通过可接受质子部位的质子化和/或可供质子部位的去质子化来产生。值得注意的是，可接受质子部位的质子化导致形成阳离子类物质，其电荷通过生理阴离子的存在而平衡，而可供质子部位的去质子化导致形成阴离子类物质，其电荷通过生理阳离子的存在而平衡。
术语“药学上可接受的盐”指盐是药学上可接受的。药学上可接受的盐的例子包括但不限于：(1)酸加成盐，与无机酸形成，如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等等；或与有机酸形成，如羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4对甲苯磺酸、樟脑酸、十二烷基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、水杨酸、顺式-已二烯二酸等等；或(2)碱加成盐，和上述无机酸的任一种的共轭碱形成，其中共轭碱包含选自Na+、K+、Mg2+、Ca2+、NHgR”’4-g+中的阳离子组分，其中R”’是C1-3烷基，g是选自0、1、2、3或4的整数。应该理解，所有涉及药学上可接受的盐都包括相同酸加成盐的本文中所定义的溶剂加成形式(溶剂化物)或晶体形式(多晶型物)。
术语“烷基”是指含有1至30个碳原子的非支链或支链、饱和、单价烃基。术语“C1-M烷基”是指包含1至M个碳原子的烷基，其中M是具有下列数值的整数：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30。术语“C1-6烷基”是指含有1至6个碳原子的烷基。烷基的例子包括但不限于低级烷基，包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基或戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。
本文中使用的术语“杂原子”是指至少具有一个选自于O、S、N或P的杂原子。
术语“制剂”或“剂型”特指包括活性化合物的固体和液体配方且本领域的技术人员将了解活性成分可以不同制剂形式存在，这取决于所需剂量及药代动力学参数。
以下结合具体的实施例对本发明做进一步详细的说明，但本发明不限于以下实施例，实施例是为了更好的阐释本发明的某些具体体现而不能被解释为以任何方式限定本发明的范围。实施例中未注明的条件为常规条件。
实施例1.制备1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(5)
化合物5按照下列流程制备：
将化合物1(17.000g,0.103mol)溶于甲苯(150ml)中，N2保护下于冰浴中分批次加入钠氢(8.284g,0.207mol,2eq)。加毕继续搅拌反应30min后缓慢滴加化合物碳酸二甲酯(27.834g,0.309mol,3.0eq)。滴毕升温至回流反应3h，TLC监测反应完毕，将反应液倒入饱和氯化铵溶液中，加入乙酸乙酯(150ml*3)萃取，分离有机相，饱和食盐水洗涤2-3次。无水硫酸钠干燥有机相，浓缩蒸干得29.0g粗品2备用。
将化合物2(11.000g,0.050mol)溶于甲醇(150ml)中，冰浴条件下分批次加入硼氢化钠(9.405g,0.247mol)。撤掉冰浴后转至油浴回流反应3h，TLC监测反应完毕，旋干反应溶剂，加入乙酸乙酯(80ml*3)和水萃取，分离有机相浓缩蒸干柱层析(PE:EA＝2:1)得8.950g化合物3。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:6.90(d,1H,J＝1.6Hz),6.84-6.77(m,2H),5.96(s,2H),4.89(dd,1H,J＝4.0Hz,8.8Hz),3.88-3.81(m,2H),2.88(brs,1H),2.42(brs,1H),2.05-2.03(m,1H),1.93-1.85(m,1H)。
三氯氧磷(3.241g,21.2mmol)溶于二氯甲烷(40ml)，冷却至-60℃，加入三乙胺(6.822g,67.5mmol)，室温搅拌10分钟，加入化合物3(3.700g,19.3mmol)的二氯甲烷的溶液(20ml)。加料完毕，在-60℃反应3h，加入对硝基苯酚(2.685g,0.0193mol)和三乙胺(2.132g,22.5mmol)的二氯甲烷溶液(10ml)。加料完毕后反应1小时，旋干，粗品溶于乙酸乙酯(150ml)，过滤，滤液旋干得到化合物4粗品4.320g。
化合物A1(1.055g,4.0mmol)溶于无水DMF(8ml)，冷却至0℃，加入叔丁基氯化镁(11ml,11mmol)。加料完毕后在0℃搅拌0.5小时，缓慢滴加化合物4(2.000g,5.3mmol)的DMF溶液(7ml)，约5分钟滴完，滴加完毕后在室温下反应19小时。加入饱和氯化铵溶液(200ml)淬灭反应，分离有机层，水层用乙酸乙酯萃取(80ml)两次，合并后水洗(60ml)，饱和食盐水洗(60ml)，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，粗品经过制备纯化得到白色固体0.054g，即为化合物5。ESI-MS m/z 523.6(M+Na)+。
实施例2.制备cis 1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(6)
化合物6按照下列流程制备：
将化合物4(3.140g,0.016mol)溶于无水THF(50ml)中，N2保护下于冰浴中加入三乙胺(6.464g,0.064mol)。然后加入二氯化磷酸4-硝基苯酯(4.300g,0.0168mol)的THF溶液(10ml)。滴加完毕升至室温搅拌1小时后回流搅拌2小时。冷却至30℃，加入4-硝基苯酚钠(7.728g,0.048mol)后继续回流2小时，然后室温过夜。饱和氯化铵淬灭反应，乙酸乙酯萃取，滤液旋干得到反式粗品4.120g。
然后按照实施例1的方法从粗品4’制备得到cis化合物6.ESI-MS m/z 523.6(M+Na)+；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.63(s,1H),7.81-7.67(m,1H),6.91(s,1H),6.85-6.82(m,2H),6.26(d,1H,J＝22.4Hz),5.98(s,2H),5.73-5.68(m,1H),5.37-5.34(m,1H),4.71-4.59(m,3H),4.42-4.22(m,4H),2.05-1.95(m,2H),1.38-1.32(m,3H).
实施例3.制备cis 1-((2R,3R,4R,5R)-5-((((2R,4S)-4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(7)
化合物7按照下列流程制备：
将三乙胺(2.659g,0.026mol)缓慢滴加到HCOOH(3.981g,0.089mol)中，控制温度在40℃以下，滴加完毕后，化合物2(15.000g,0.068mol)溶于DMF(50ml)，氮气鼓泡除去体系中的氧气后加催化剂(s,s)-Ts-DPEN-RuCl-(p-cymene)(0.042g,0.068mmol)，加热至60℃，反应19h，TLC显示反应了约1/3。补加催化剂(0.042g,0.068mmol)，接着反应5小时，将反应液倒入到水中，乙酸乙酯萃取3次(100ml)，合并乙酸乙酯层，水洗2次，饱和食盐水洗(150ml)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液旋干得到粗品，粗品经过柱层析(PE：EA＝15:1)得到化合物2a 5.4g，收率：40％。
将化合物2a(5.400g,0.024mol)溶于甲醇(150ml)中，冰浴条件下分批次加入硼氢化钠(5.347g,0.144mol)，加毕转至油浴回流反应1h，TLC监测反应完毕。旋干反应溶剂，加入乙酸乙酯(100ml*3)和水萃取，有机相浓缩蒸干柱层析(PE:EA＝2:1)得3.67g化合物3’。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:6.90(d,1H,J＝1.6Hz),6.84-6.77(m,2H),5.96(s,2H),4.89(dd,1H,J＝4.0Hz,8.8Hz),3.88-3.81(m,2H),2.88(brs,1H),2.42(brs,1H),2.05-2.03(m,1H),1.93-1.85(m,1H).
按照实施例2的方法从化合物3’开始制备得到cis化合物7.ESI-MS m/z 523.6(M+Na)+.
实施例4.制备1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢-1H-茚-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(13)
化合物13按照下列流程制备：
将化合物8(10.0g,0.085mol)溶于200mL二氯甲烷中，冰浴条件下滴加乙酰氯(6.43mL,1.07eq)，分批次加入三氯化铝(22.56g,0.170mol,2eq)。反应完毕后将反应液倒入饱和氯化铵溶液中，二氯甲烷萃取(20mL*3)，1N HCl洗涤有机相2次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩蒸干得到化合物9粗品。
将化合物9(6.363g,0.040mol)和碳酸二甲酯(9.304g,0.103mol,2.6eq)溶于100mL甲苯中，室温条件下分批次加入NaH，加毕回流反应2-3h。反应完毕后将反应液倒入饱和氯化铵溶液中，用乙酸乙酯(15mL*3)萃取，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩蒸干得黑色油状物化合物10。
将化合物10(8.285g,0.038mol)溶于100mL甲醇中，室温下分批次加入硼氢化钠(10.53g,0.285mol,7.5eq)。加毕反应30min后将反应液蒸干，乙酸乙酯萃取(20mL*3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩蒸干柱层析(PE:EA＝2:1)得5.000g油状物化合物11。
将化合物11(1.500g,7.8mmol)溶于30mL二氯甲烷中，氮气保护下于-78℃加入三乙胺(3.24mL,3eq)，将(1.09mL,1.5eq)三氯氧磷缓慢滴加。滴加完毕继续搅拌反应1h，TLC监测反应完毕，将对硝基苯酚(1.629g,12.7mmol,1.5eq)溶于10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(2.16mL,2.0eq)缓慢滴加到上述反应体系中，继续搅拌反应1h，TLC监测反应完毕后旋干反应溶剂后柱层析(PE:EA＝10:1)得560mg白色固体化合物12。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.26-8.24(m,2H),7.46-7.44(m,2H),7.27-7.24(m,2H),7.14-7.12(m,1H),5.56-5.53(m,1H),4.64-4.56(m,2H),2.92-2.90(m,4H),2.49-2.46(m,1H),2.12-2.08(m,3H)。
按照实施例1的方法制备得到产品化合物13.ESI-MS m/z 519.5(M+Na)+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.35(s,1H),7.75-7.60(m,1H),7.30-7.15(m,3H),6.23(d,1H,J＝22.0Hz),5.71-5.60(m,1H),5.59-5.50(m,1H),4.68-4.50(m,3H),4.45-4.17(m,4H),2.95-2.85(m,4H),2.55-2.40(m,1H),2.15-1.93(m,3H),1.40-1.27(m,3H).
实施例5.制备1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并呋喃-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(14)
可参照实施例1的方法制备得到化合物14。
实施例6.制备1-((2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-3-甲基-5-(((2-氧化-4-(5,6,7,8-四氢萘-2-位)-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(15)
可参照实施例1的方法制备得到化合物15。
实施例7.制备1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(16)
可参照实施例1的方法制备得到化合物16。
实施例8.制备1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并[b]噻吩-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(17)
可参照实施例1的方法制备得到化合物17。
实施例9.制备(2R,3R,4R,5R)-2-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-5-(2,4-二氧-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-位)-4-氟-4-甲基四氢呋喃-3-位丙酸酯(18)
将化合物5与丙酸酐在DMAP催化下缩合制备得到化合物18，反应方程式如下：
实施例10. Caco-2透膜性测试
本试验的目的是利用Caco-2细胞单层来评价受试化合物的肠透膜性。试验步骤按照实际测试方法描述如下：
1)在37℃水浴中预热HBSS Buffer；
2)从-20℃冰箱里取出化合物，超声几分钟(不少于1分钟)；
3)溶液制备：
给体溶液缓冲液：含0.3％DMSO和5μM LY的HBSS缓冲液：将150μL DMSO和50μL LY(5mM)加入到50ml HBSS缓冲液(pH 7.4)中；含0.1％DMSO和5μM LY HBSS的缓冲液：将50μLDMSO和50μL LY(5mM)加入到50mL HBSS缓冲液(pH7.4)中。
受体溶液缓冲液：制备含0.4％DMSO的缓冲液：将200μL DMSO加入到50ml HBSS缓冲液(pH7.4)中。
4)将细胞培养皿从培养箱中取出，用HBSS缓冲液清洗细胞单层，然后在室温条件下测试TEER值。
5)在4000rpm下将化合物溶液离心5分钟，然后载入到受体室；
6)基于下表列出的溶剂量添加溶液(确保吸取额外的100uL给体样品作为T0备份)；
7)为了测试顶室LY浓度，从顶室吸取100μL样品注入一个不透明培养皿作为LYT0；
8)37℃预热顶面培养皿和底面培养皿约5分钟，然后将顶面培养皿放到底面培养皿上开始转运；
9)培养皿放在37℃培养箱中90分钟；
10)标曲制备；
11)培养90分钟后将顶面培养皿从底面培养皿中分离；
12)从底面培养皿中吸取100μL样品注入到一个不透明培养皿作为LYT90；
13)用荧光计测量LYT0和LYT90的LY浓度(485nm激发/535nm辐射)；
14)制备LC-MS/MS样品:
给体样品(1:10稀释)：6μL给体样品+54μL 0.4％DMSO HBSS+60μL ACN(带内标利胆酚或丙咪嗪)；
受体样品：60μL受体样品+60μL CAN(带内标利胆酚或丙咪嗪)。结果参见下表。
| 化合物 | Sofosbuvir | 化合物5 | 化合物13 |
| Papp×106/cm·s‐1(A‐B) | 0.19 | 1.2 | 1.5 |
上表总结表明，受试化合物显示了不可预见的优于sofosbuvir的透膜性。
实施例11. Huh-7肝细胞毒性
在96孔白色/不透明板内，将Huh-7细胞系按照3000个细胞/孔(50μL)铺板。将50μL化合物(2复孔)加入96孔板，37℃、5％湿度CO2气体的细胞培养箱内培养4天。培养后，加入10ul MTT试剂，4小时后，加入100ul MTT-buffer孵育过夜。第五天读MTT结果。结果列于下表中：
| 化合物 | CC50(uM) | 细胞病变率at 100uM,％ |
| Sofosbuvir | 63 | 63 |
| 5 | >100 | 0％ |
| 13 | >100 | 0％ |
| Compound A | >100 | 40％ |
在肝细胞毒性方面，本发明的化合物(CC50>100uM)大大优于sofosbuvir(CC50＝63uM)。而且相比于同一类公开的hepdirect参比化合物A，也显示了更低的细胞毒性，虽然本发明化合物和参比化合物细胞毒都>100uM，但在最高浓度100uM处，参比化合物A细胞病变率已有40％，而本发明化合物仍然还未产生细胞病变。
实施例12.叙利亚地鼠PK研究
在体内评价了本发明的化合物，口服后测试了肝中活性尿嘧啶三磷酸代谢物的水平。每一个化合物叙利亚地鼠口服剂量为10mg/kg，肝摘除后肝提取液用于分析其NTP(2’-脱氧-2’-α-F-2’-β-C-甲基尿嘧啶三磷酸)水平。下表列出了PK研究结果。
相比于报道的有效治疗HCV感染的其他化合物，本发明的化合物不可预见的显示了比sofosbuvir更高的Cmax值。更重要的是，受试化合物在肝内有更高的活性NTP代谢物药物暴露。
实施例13.大鼠PK研究
在体内评价了本发明的化合物，口服后测试了肝中活性尿嘧啶三磷酸代谢物的水平。每一个化合物大鼠口服剂量为30mg/kg，肝摘除后肝提取液用于分析其NTP(2’-脱氧-2’-α-F-2’-β-C-甲基尿嘧啶三磷酸)水平。下表列出了PK研究结果。
相比于报道的有效治疗HCV感染的其他化合物，本发明的化合物不可预见的显示了比sofosbuvir更高的Cmax值。更重要的是，受试化合物在肝内有更高的活性NTP代谢物药物暴露。
所有上述结果表明，本发明提供了一种有优秀PK性质的新型抗HCV的抑制剂化合物，该新型化合物相比现有化合物，对肝细胞毒性低，无致癌毒性风险或风险小。
实施例14.用于治疗HCV感染的药物胶囊
将化合物13和乳糖粉末按质量2:1比例小心混匀，然后将该混粉装进明胶胶囊中做成300mg规格的胶囊，该胶囊可供HCV感染患者口服使用。
实施例15.本发明化合物的应用
将化合物13(1g)和乳糖粉末按质量2:1比例小心混匀，然后将该混粉装进明胶胶囊中做成300mg规格的胶囊。HCV感染病患同时服用胶囊与Daclatasvir(BMX-790052,NS5A抑制剂)或Declatasvir(NS5A抑制剂)。
实施例16.本发明化合物的应用
将化合物13(1g)和乳糖粉末按2:1比例小心混匀，然后将该混粉装进明胶胶囊中做成300mg规格的胶囊。HCV感染病患同时服用该胶囊与Simeprevir(NS3抑制剂)或Seroprevir(NS3抑制剂)。
实施例17.含有本发明化合物和Simeprevir的药物胶囊
将化合物13、Simeprevir、乳糖粉末按质量比2:1:1比例小心混匀，然后将该混粉装进明胶胶囊中做成400mg规格的胶囊，该胶囊可供HCV感染患者口服使用。
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (12)
1.一种式(I)的化合物及其药学上可接受的盐或酯，
其中，
R1选自H、COR2，其中，R2为不含或含有杂原子的烷基或卤代烷基；
X,Y独立地为CR3R4、O或S，其中R3，R4独立地为H，C1-6烷基或C1-6卤代烷基；n是1、2、3或4。
2.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯，其特征在于，R2为不含或含有1个或2个或3个杂原子的C1-6烷基，所述杂原子为O和/或N。
3.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯，其特征在于，R1为H、乙酰基、丙酰基、丁酰基或氨基取代丁酰基。
4.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯，其特征在于，X,Y独立地为CH2、CHCH3、CHCH2CH3、O或S。
5.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯，其特征在于，X,Y同时为CH2；或者X,Y同时为O；或者，X,Y中的一个为O或S，另一个为CH2。
6.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯，其特征在于，R1为H、乙酰基、丙酰基、丁酰基或氨基取代丁酰基；X,Y独立地为CH2或O；n为1或2。
7.如权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯，其特征在于，所述化合物是如下化合物中的一种：
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
cis 1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
cis 1-((2R,3R,4R,5R)-5-((((2R,4S)-4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢-1H-茚-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并呋喃-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-3-甲基-5-(((2-氧化-4-(5,6,7,8-四氢萘-2-位)-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
1-((2R,3R,4R,5R)-5-(((4-(2,3-二氢苯并[b]噻吩-6-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-3-氟-4-羟基-3-甲基四氢呋喃-2-位)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮；
(2R,3R,4R,5R)-2-(((4-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-位)-2-氧化-1,3,2-二氧磷杂环己烷-2-位)氧)甲基)-5-(2,4-二氧-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-位)-4-氟-4-甲基四氢呋喃-3-位丙酸酯。
8.一种药物组合物，其特征在于：包括第一治疗剂和药学可接受基质，所述第一治疗剂为选自权利要求1至7中任一项权利要求所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯中的一种或多种的组合。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物为HCV感染治疗药物。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物还包括第二治疗剂，所述第二治疗剂为选自HCV抗病毒试剂、免疫调节剂及抗感染试剂中的一种或多种的组合。
11.根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于：所述HCV抗病毒试剂选自HCV蛋白酶抑制剂、HCV NS5A抑制剂和HCV NS5B聚合酶抑制剂。
12.如权利要求1至7中任一项权利要求所述的化合物及其药学上可接受的盐或酯在制备HCV感染治疗药物中的应用。
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|---|---|---|---|---|
| WO2005084192A2 (en) * | 2004-02-13 | 2005-09-15 | Merck & Co., Inc. | Novel 2’-c-methyl nucleoside derivatives |
| WO2007022073A2 (en) * | 2005-08-12 | 2007-02-22 | Merck & Co., Inc. | Novel 2'-c-methyl and 4'-c-methyl nucleoside derivatives |
| WO2015077368A1 (en) * | 2013-11-22 | 2015-05-28 | Ligand Pharmaceuticals Incorporated | Derivatives of uridine 5'-cyclophosphate useful to treat hepatitis c viral infections |
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005084192A2 (en) * | 2004-02-13 | 2005-09-15 | Merck & Co., Inc. | Novel 2’-c-methyl nucleoside derivatives |
| WO2007022073A2 (en) * | 2005-08-12 | 2007-02-22 | Merck & Co., Inc. | Novel 2'-c-methyl and 4'-c-methyl nucleoside derivatives |
| WO2015077368A1 (en) * | 2013-11-22 | 2015-05-28 | Ligand Pharmaceuticals Incorporated | Derivatives of uridine 5'-cyclophosphate useful to treat hepatitis c viral infections |
| CN103848877B (zh) * | 2013-12-16 | 2016-08-24 | 安徽贝克联合制药有限公司 | 核苷环磷酸酯化合物及其制备方法和其应用 |
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