CN106421813A - 具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用 - Google Patents

具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106421813A
CN106421813A CN201610918531.8A CN201610918531A CN106421813A CN 106421813 A CN106421813 A CN 106421813A CN 201610918531 A CN201610918531 A CN 201610918531A CN 106421813 A CN106421813 A CN 106421813A
Authority
CN
China
Prior art keywords
nano particles
medicine
product
obtaining
oleic acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610918531.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106421813B (zh
Inventor
阎玺庆
史永利
刘兆敏
关圆圆
邓秀珍
聂卫敏
常林娜
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xinxiang Medical University
Original Assignee
Xinxiang Medical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Xinxiang Medical University filed Critical Xinxiang Medical University
Priority to CN201610918531.8A priority Critical patent/CN106421813B/zh
Publication of CN106421813A publication Critical patent/CN106421813A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106421813B publication Critical patent/CN106421813B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明公开了一种具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用，属于载药纳米粒子的合成技术领域。本发明的技术方案要点为：（1）制备具有超顺磁性的油基四氧化三铁纳米粒子，并对纳米粒子进行二巯基丁二酸修饰；（2）合成表面具有氨基链特征的介孔硅纳米粒子；（3）将叶酸与介孔材料链接制备叶酸化的介孔材料，或者将（1）所得材料与介孔链接再与叶酸链接，得到磁性叶酸介孔材料。本发明设计的材料可以将药物包载于介孔材料中，并在外磁场作用下被靶向于靶部位，同时可被肿瘤细胞主动摄取。

Description

具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于载药纳米粒子的合成技术领域，具体涉及一种具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用。
背景技术
介孔材料是指孔径介于2-50nm的一类多孔材料。由于具有均一、可调的孔径分布和极大的比表面积而被广泛用于吸附、催化等过程。由于硅基介孔客体孔径可调及具有表面反应活性，可通过药物的可控负载和释放，在生物医药中受到人们的关注。作为理想药物载体，需要能够被动或者主动定位于靶部位，而对介孔硅材料进行表面改性，则可实现该目的。
叶酸是一种水溶性B族维生素，对于核苷酸的更新及单电子转移反应是必须的，甚至在其通过γ-羧基被衍生化后仍能保持对叶酸受体的亲和力，因此成为可能的肿瘤靶向配基。而众所周知，一些恶性肿瘤，尤其是卵巢、鼻咽、宫颈和绒毛膜瘤均有高水平表达的叶酸受体，这些受体可通过血流接近，而在一些正常组织，如胎盘、肾、输卵管脉络膜丛，其表达则被局限在无法接近血流的上皮细胞腔壁。研究表明，尽管存在一定的生理水平的叶酸血流中的叶酸受体，叶酸受体特有的肿瘤依然对叶酸键合物能够吸收。叶酸靶向已经被用来评估很多治疗药物的肿瘤细胞选择性递送过程。因此，具有叶酸的载体可实现对肿瘤部位的主动结合，实现主动靶向。
磁性纳米粒子如Fe3O4已经在生物医学如靶向递药、生物传感器、生化分离及磁共振成像中得到应用，药物磁靶向即将药物固定于磁性材料中，通过外磁场进行导向已经成为重要的递药手段。因其提高了现有的药物和基因传递技术，超顺磁性纳米粒对药物分子的递药有潜在的临床应用。
将介孔材料与磁性纳米粒子结合，载药的介孔硅纳米粒子则可通过体外磁场运输到靶部位释放，同时，纳米粒子还能够起到对介孔内药物密封和开合作用，使之免受介孔外环境作用而保持稳定性和缓释性能。
针对以上设想，本研究通过化学合成方法合成出油酸包裹的Fe3O4纳米粒子，并对其链接二巯基、丁二酸引入羧基，通过模板法制备具氨基的介孔硅纳米粒子，并进行叶酸链接后载药，完成后对载药介孔硅纳米粒进行磁性材料的链接，从而得到载药并具叶酸的磁性介孔纳米粒。
发明内容
本发明解决的技术问题是提供了一种具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法，该方法是为了提高水难溶性或水不稳定性在水性溶剂分散性能及克服细胞毒性药物对正常组织的损伤而设计的双重靶向载药体系，该载药纳米粒子能够有效提高药物的稳定性及延长释放时间，靶向性可以避免细胞毒性药物对正常组织的损伤。
本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，具有双重靶向功能的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于具体步骤为：
（1）将六水合氯化铁和油酸钠溶于乙醇、水和正己烷的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入油酸，在氮气保护下以3-5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以3-5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于氯仿中并加入三乙胺，分散均匀后加入到二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将十六烷基三甲基溴化铵加入到氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入正硅酸四乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、叶酸、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入二甲基亚砜反应48h，产物水洗三遍，常温真空烘干得到表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子；
（5）将步骤（4）得到的表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子和抗肿瘤化疗药物分散于丙酮中，磁力搅拌48h挥干，然后为pH=12的氢氧化钠溶液洗涤产物直至洗至无色得到表面含有叶酸分子的载药纳米粒子；
（6）将步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、步骤（5）得到的表面含有叶酸分子的载药纳米粒子、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，水洗烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
本发明所述的具有双重靶向功能的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于具体步骤为：
（1）将六水合氯化铁和油酸钠溶于乙醇、水和正己烷的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入油酸，在氮气保护下以3-5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以3-5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于氯仿中并加入三乙胺，分散均匀后加入到二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将十六烷基三甲基溴化铵加入到氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入正硅酸四乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入二甲基亚砜反应48h，产物用去离子水洗涤三遍，常温真空干燥得到表面含有磁性分子的介孔纳米粒子；
（5）将抗肿瘤化疗药物、表面含有磁性分子的介孔纳米粒子、叶酸、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
本发明所述的具有双重靶向功能的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于具体步骤为：
（1）将六水合氯化铁和油酸钠溶于乙醇、水和正己烷的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入油酸，在氮气保护下以3-5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以3-5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于氯仿中并加入三乙胺，分散均匀后加入到二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将十六烷基三甲基溴化铵加入到氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入正硅酸四乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、叶酸、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入二甲基亚砜反应48h，产物水洗三遍，常温真空烘干得到表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子；
（5）将抗肿瘤化疗药物、步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到磁性载药纳米粒子；
（6）将步骤（5）得到的磁性载药纳米粒子、表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
进一步优选，所述的抗肿瘤化疗药物为TOPO异构酶抑制剂。
本发明所述的具有双重靶向功能的载药纳米粒子，其特征在于是由上述方法制备得到的，介孔纳米粒子的内部负载有抗肿瘤化疗药物分子，介孔纳米粒子的表面同时具有叶酸分子和磁性分子。
本发明所述的具有双重靶向功能的载药纳米粒子在药物递药系统中的应用。
本发明具有以下有益效果：
1、介孔可以对药物进行装载，因而可以提高药物的稳定性及延长释放时间，靶向性可以避免细胞毒性药物对正常组织的损伤；
2、载药纳米粒子的特征是介孔硅纳米粒子表面链接叶酸，同时表面含有磁性纳米粒子，磁性纳米粒子可以对介孔起到密封作用，从而保证药物更加稳定。
附图说明
图1是本发明实施例1制得的不同物质的红外光谱图，其中MNP-3为含有羧基的磁性纳米粒子，FA为叶酸，MSN为介孔纳米粒子，FMN为表面含有磁性分子的介孔纳米粒子；
图2是本发明实施例1制得的载药纳米粒子的透射电镜图；
图3是本发明实施例1制得的载药纳米粒子的粒径分布曲线；
图4是本发明实施例1制得的载药纳米粒子的BET曲线；
图5是本发明实施例1制得的载药纳米粒子的磁滞回归曲线；
图6是本发明实施例1中空白MSN和FMN的MTT图；
图7是本发明实施例1中HCPT和含等量的HCPT的MSN、FA-MSN、MSN-MNP、FMN及通过磁铁（强度：5000Gs）刺激3min后的含药FMN在0.1μg/mL、0.01μg/mL的两个浓度图。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
（1）将2.7g六水合氯化铁和9.1g油酸钠溶于70mL乙醇、水和正己烷（20:15:35，v/v/v）的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入1.57mL油酸，在氮气保护下以5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将1g步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于10mL氯仿中并加入0.5mL三乙胺，分散均匀后加入到0.5g二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将0.2g十六烷基三甲基溴化铵加入到100mL摩尔浓度为0.2mol/L的氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入0.8mL正硅酸四乙酯和0.2mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液（6g/L）中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将0.05g步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、0.13g叶酸、5mg乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和35mg N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入10mL二甲基亚砜反应48h，产物水洗三遍，常温真空烘干得到表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子；
（5）将300mg步骤（4）得到的表面具有叶酸的介孔纳米粒子和20mg抗肿瘤化疗药物TOPO异构酶抑制剂分散于9mL丙酮中，磁力搅拌48h挥干，然后用pH=12的氢氧化钠溶液洗涤产物直至洗至无色得到表面含有叶酸分子的载药纳米粒子；
（6）将0.06g步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、0.05g步骤（5）得到的表面含有叶酸分子的载药纳米粒子、115mg乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和35mg N-羟基琥珀酰亚胺加入到10mL二甲基亚砜中反应48h，水洗烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
利用MTT法检测抗肿瘤活性，图6为空白MSN和FMN的浓度为1μg/mL时，HepG-2的存活率到80%，说明MSN和FMN生物相容性好；图7为HCPT和含等量的HCPT的MSN、FA-MSN、MSN-MNP、FMN及通过磁铁（强度：5000Gs）刺激3min后的含药FMN在0.1μg/mL、0.01μg/mL的两个浓度图，后者细胞的存活率更高，说明有载药纳米粒的细胞毒性减弱，且载药FA-MSN比MSN和NP-MSN对HepG-2抑制率要高，统计学分析有显著性差异（P<0.05），说明由于叶酸的存在，药物对肿瘤细胞亲和力强；对比磁铁刺激3min的载药NP-MSN和FA-MSN-NP比非磁刺激的对HepG-2抑制率要高，且有显著性差异（P<0.05），说明磁铁能刺激后药物的释放；c为不同浓度的FA作用于含相同量的（HCPT-FMN，1μg/mL）HepG-2培养液中，MTT显示，随着叶酸浓度的较小，OD值增加，说明自由叶酸对FMN表面的叶酸存在竞争作用。
实施例2
（1）将2.7g六水合氯化铁和9.1g油酸钠溶于70mL乙醇、水和正己烷（20:15:35）的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入1.57mL油酸，在氮气保护下以5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将1g步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于10mL氯仿中并加入0.5mL三乙胺，分散均匀后加入到0.5g二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将0.2g十六烷基三甲基溴化铵加入到100mL摩尔浓度为0.2mol/L的氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入0.8mL正硅酸四乙酯和0.2mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液（6g/L）中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将0.12g步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、0.05g步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、115mg乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和35mg N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入10mL二甲基亚砜反应48h，产物用去离子水洗涤三遍，常温真空干燥得到表面含有磁性分子的介孔纳米粒子；
（5）将20mg抗肿瘤化疗药物TOPO异构酶抑制剂、200mg表面含有磁性分子的介孔纳米粒子、0.2g叶酸、5mg乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和30mg N-羟基琥珀酰亚胺加入到20mL二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
实施例3
（1）将2.7g六水合氯化铁和9.1g油酸钠溶于70mL乙醇、水和正己烷（20:15:35）的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入1.57mL油酸，在氮气保护下以5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将1g步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于10mL氯仿中并加入0.5mL三乙胺，分散均匀后加入到0.5g二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将0.2g十六烷基三甲基溴化铵加入到100mL摩尔浓度为0.2mol/L的氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入0.8mL正硅酸四乙酯和0.2mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液（6g/L）中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将0.05g步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、0.13g叶酸、5mg乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和35mg N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入10mL二甲基亚砜反应48h，产物水洗三遍，常温真空烘干得到表面含有叶酸的介孔纳米粒子；
（5）将20mg抗肿瘤化疗药物TOPO异构酶抑制剂、200mg步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、5mg乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和30mg N-羟基琥珀酰亚胺加入到20mL二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到磁性载药纳米粒子；
（6）将步骤（5）得到的磁性载药纳米粒子、0.24g叶酸、5mg乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和20mg N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。

Claims (6)

1.具有双重靶向功能的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于具体步骤为：
（1）将六水合氯化铁和油酸钠溶于乙醇、水和正己烷的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入油酸，在氮气保护下以3-5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以3-5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于氯仿中并加入三乙胺，分散均匀后加入到二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将十六烷基三甲基溴化铵加入到氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入正硅酸四乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、叶酸、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入二甲基亚砜反应48h，产物水洗三遍，常温真空烘干得到表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子；
（5）将步骤（4）得到的表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子和抗肿瘤化疗药物分散于丙酮中，磁力搅拌48h挥干，然后为pH=12的氢氧化钠溶液洗涤产物直至洗至无色得到表面含有叶酸分子的载药纳米粒子；
（6）将步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、步骤（5）得到的表面含有叶酸分子的载药纳米粒子、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，水洗烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
2.具有双重靶向功能的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于具体步骤为：
（1）将六水合氯化铁和油酸钠溶于乙醇、水和正己烷的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入油酸，在氮气保护下以3-5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以3-5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于氯仿中并加入三乙胺，分散均匀后加入到二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将十六烷基三甲基溴化铵加入到氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入正硅酸四乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入二甲基亚砜反应48h，产物用去离子水洗涤三遍，常温真空干燥得到表面含有磁性分子的介孔纳米粒子；
（5）将抗肿瘤化疗药物、表面含有磁性分子的介孔纳米粒子、叶酸、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
3.具有双重靶向功能的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于具体步骤为：
（1）将六水合氯化铁和油酸钠溶于乙醇、水和正己烷的混合溶液中，加热回流2h，用去离子水洗涤后真空干燥得到油酸铁磁流体，将油酸铁磁流体溶于60℃的水中，加入油酸，在氮气保护下以3-5℃/min的升温速率升温至200℃保持20min，继续以3-5℃/min的升温速率升温至320℃保持40min，然后降温至60℃用乙醇洗涤后溶于环己烷中，再用乙醇沉淀并离心分离后于60℃烘干得到油酸保护的四氧化三铁纳米粒子；
（2）将步骤（1）得到的油酸保护的四氧化三铁纳米粒子分散于氯仿中并加入三乙胺，分散均匀后加入到二巯基丁二酸的二甲基亚砜溶液中，再置于60℃的油浴中搅拌反应24h，所得产物离心分离，沉淀用乙醇洗涤得到二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；
（3）将十六烷基三甲基溴化铵加入到氢氧化钠溶液中，加热至80℃稳定后加入正硅酸四乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷，反应2h后冷却至室温，将反应产物离心分离，醇洗三次后得到的产物分散于硝酸铵与乙醇的混合溶液中，在磁力搅拌下于60℃回流10h，除去产物中的十六烷基三甲基溴化铵得到表面具有氨基的介孔纳米粒子；
（4）将步骤（3）得到的表面具有氨基的介孔纳米粒子、叶酸、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合搅拌，加入二甲基亚砜反应48h，产物水洗三遍，常温真空烘干得到表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子；
（5）将抗肿瘤化疗药物、步骤（2）得到的二巯基丁二酸修饰的四氧化三铁纳米粒子、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到磁性载药纳米粒子；
（6）将步骤（5）得到的磁性载药纳米粒子、表面含有叶酸分子的介孔纳米粒子、乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入到二甲基亚砜中反应48h，产物用PBS缓冲溶液洗涤后烘干得到具有双重靶向功能的载药纳米粒子。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的具有双重靶向功能的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于：所述的抗肿瘤化疗药物为TOPO异构酶抑制剂。
5.具有双重靶向功能的载药纳米粒子，其特征在于是由权利要求1-4中任意一项所述的方法制备得到的，介孔纳米粒子的内部负载有抗肿瘤化疗药物分子，介孔纳米粒子的表面同时具有叶酸分子和磁性分子。
6.权利要求5所述的具有双重靶向功能的载药纳米粒子在药物递药系统中的应用。
CN201610918531.8A 2016-10-21 2016-10-21 具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用 Active CN106421813B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610918531.8A CN106421813B (zh) 2016-10-21 2016-10-21 具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610918531.8A CN106421813B (zh) 2016-10-21 2016-10-21 具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106421813A true CN106421813A (zh) 2017-02-22
CN106421813B CN106421813B (zh) 2019-07-26

Family

ID=58175561

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610918531.8A Active CN106421813B (zh) 2016-10-21 2016-10-21 具有双重靶向功能的载药纳米粒子及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106421813B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107884377A (zh) * 2017-11-24 2018-04-06 东南大学 一种基于细胞外泌体纳米簇探针及其在制备细胞靶向荧光和磁性多模态成像制剂中的应用
CN111317825A (zh) * 2020-03-06 2020-06-23 南京市江宁医院 规则折叠的超小尺寸大孔道无机硅大分子药物载体、其制备方法及其应用

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004083902A2 (en) * 2002-10-25 2004-09-30 Georgia Tech Research Corporation Multifunctional magnetic nanoparticle probes for intracellular molecular imaging and monitoring
CN101411877A (zh) * 2008-11-14 2009-04-22 复旦大学 具有磁性和叶酸双重靶向的温敏纳米药物载体的制备方法
CN102210867A (zh) * 2011-05-13 2011-10-12 华东理工大学 pH可逆响应型介孔氧化硅复合载药体系及其制备和应用
CN102585064A (zh) * 2012-02-24 2012-07-18 华南理工大学 一种多孔磁性各向异性微球及其制备方法
CN102703412A (zh) * 2012-06-06 2012-10-03 华东理工大学 固定生物酶的顺磁性的醛基介孔分子筛及其制备方法
CN102703411A (zh) * 2012-06-06 2012-10-03 华东理工大学 固定生物酶的顺磁性的环氧基介孔分子筛及其制备方法
WO2013019151A2 (en) * 2011-08-04 2013-02-07 Institution Of The Russian Academy Of Sciences Tomsk Scientific Center, Siberian Branch, Russian Academy Of Sciences Oxide ferrimagnetics with spinel structure nanoparticles and iron oxide nanoparticles, biocompatible aqueous colloidal systems comprising nanoparticles, ferriliposomes, and uses thereof
CN104069513A (zh) * 2013-03-25 2014-10-01 北京华美精创纳米相材料科技有限责任公司 具有四氧化三铁颗粒和二氧化硅内核的中空二氧化硅亚微米球及其制备方法
CN104560009A (zh) * 2013-10-15 2015-04-29 天津工业大学 一种赫赛汀修饰的载有量子点/四氧化三铁的磁性荧光二氧化硅纳米粒的制备方法
CN105462580A (zh) * 2015-11-19 2016-04-06 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 一种荧光靶向的锌掺杂四氧化三铁纳米颗粒及制备

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004083902A2 (en) * 2002-10-25 2004-09-30 Georgia Tech Research Corporation Multifunctional magnetic nanoparticle probes for intracellular molecular imaging and monitoring
CN101411877A (zh) * 2008-11-14 2009-04-22 复旦大学 具有磁性和叶酸双重靶向的温敏纳米药物载体的制备方法
CN102210867A (zh) * 2011-05-13 2011-10-12 华东理工大学 pH可逆响应型介孔氧化硅复合载药体系及其制备和应用
WO2013019151A2 (en) * 2011-08-04 2013-02-07 Institution Of The Russian Academy Of Sciences Tomsk Scientific Center, Siberian Branch, Russian Academy Of Sciences Oxide ferrimagnetics with spinel structure nanoparticles and iron oxide nanoparticles, biocompatible aqueous colloidal systems comprising nanoparticles, ferriliposomes, and uses thereof
CN102585064A (zh) * 2012-02-24 2012-07-18 华南理工大学 一种多孔磁性各向异性微球及其制备方法
CN102703412A (zh) * 2012-06-06 2012-10-03 华东理工大学 固定生物酶的顺磁性的醛基介孔分子筛及其制备方法
CN102703411A (zh) * 2012-06-06 2012-10-03 华东理工大学 固定生物酶的顺磁性的环氧基介孔分子筛及其制备方法
CN104069513A (zh) * 2013-03-25 2014-10-01 北京华美精创纳米相材料科技有限责任公司 具有四氧化三铁颗粒和二氧化硅内核的中空二氧化硅亚微米球及其制备方法
CN104560009A (zh) * 2013-10-15 2015-04-29 天津工业大学 一种赫赛汀修饰的载有量子点/四氧化三铁的磁性荧光二氧化硅纳米粒的制备方法
CN105462580A (zh) * 2015-11-19 2016-04-06 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 一种荧光靶向的锌掺杂四氧化三铁纳米颗粒及制备

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DONGYUN CHEN等: "Modification of magnetic silica/iron oxide nanocomposites with fluorescent polymethacrylic acid for cancer targeting and drug delivery", 《JOURNAL OF MATERIALS CHEMISTRY》 *
YANG WANG等: "In vivo dual-targeted chemotherapy of drug resistant cancer by rationally designed nanocarrier", 《BIOMATERIALS》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107884377A (zh) * 2017-11-24 2018-04-06 东南大学 一种基于细胞外泌体纳米簇探针及其在制备细胞靶向荧光和磁性多模态成像制剂中的应用
CN111317825A (zh) * 2020-03-06 2020-06-23 南京市江宁医院 规则折叠的超小尺寸大孔道无机硅大分子药物载体、其制备方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN106421813B (zh) 2019-07-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. Facile synthesis of uniform virus-like mesoporous silica nanoparticles for enhanced cellular internalization
Ramezani Farani et al. Folic acid-adorned curcumin-loaded iron oxide nanoparticles for cervical cancer
Abazari et al. A luminescent amine-functionalized metal–organic framework conjugated with folic acid as a targeted biocompatible pH-responsive nanocarrier for apoptosis induction in breast cancer cells
Bouchoucha et al. Size-controlled functionalized mesoporous silica nanoparticles for tunable drug release and enhanced anti-tumoral activity
Li et al. A redox-responsive drug delivery system based on RGD containing peptide-capped mesoporous silica nanoparticles
Kumar et al. Covalently dye-linked, surface-controlled, and bioconjugated organically modified silica nanoparticles as targeted probes for optical imaging
Qiu et al. Novel Fe3O4@ ZnO@ mSiO2 nanocarrier for targeted drug delivery and controllable release with microwave irradiation
Lim et al. Intracellular protein delivery by hollow mesoporous silica capsules with a large surface hole
Porrang et al. How advancing are mesoporous silica nanoparticles? A comprehensive review of the literature
Mozafarinia et al. In vitro breast cancer targeting using Trastuzumab-conjugated mesoporous silica nanoparticles: Towards the new strategy for decreasing size and high drug loading capacity for drug delivery purposes in MSN synthesis
CN105969331A (zh) 一种适用于靶向药物载体的纳米材料的制备方法
Cheng et al. YVO 4: Eu 3+ functionalized porous silica submicrospheres as delivery carriers of doxorubicin
Rajana et al. Multifunctional hybrid nanoparticles in diagnosis and therapy of breast cancer
Wang et al. A smart multifunctional nanocomposite for intracellular targeted drug delivery and self-release
CN105920601A (zh) 偶联叶酸靶向的四氧化三铁/介孔二氧化硅/硫化铜纳米复合粒子及其制备方法和应用
Mo et al. Hyaluronic acid-functionalized halloysite nanotubes for targeted drug delivery to CD44-overexpressing cancer cells
Yew et al. Potential anticancer activity of protocatechuic acid loaded in montmorillonite/Fe3O4 nanocomposites stabilized by seaweed Kappaphycus alvarezii
Singh et al. Preparation of self-activated fluorescence mesoporous silica hollow nanoellipsoids for theranostics
Fytory et al. Dual-ligated metal organic framework as novel multifunctional nanovehicle for targeted drug delivery for hepatic cancer treatment
Mdlovu et al. Multifunctional nanocarrier as a potential micro-RNA delivery vehicle for neuroblastoma treatment
Pandit et al. Iron oxide nanoparticle encapsulated; folic acid tethered dual metal organic framework-based nanocomposite for MRI and selective targeting of folate receptor expressing breast cancer cells
Mahmoodi et al. Co‐condensation synthesis of well‐defined mesoporous silica nanoparticles: effect of surface chemical modification on plasmid DNA condensation and transfection
Grzelak et al. Magnetic mesoporous silica nanorods loaded with ceria and functionalized with fluorophores for multimodal imaging
Teng et al. Intracellular RNA and nuclear DNA-dual-targeted tumor therapy via upconversion nanoplatforms with UCL/MR dual-mode bioimaging
Yan et al. A pH-switched mesoporous nanoreactor for synergetic therapy

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant