CN106333761B - 一种裸鼹鼠的超数排卵方法 - Google Patents

一种裸鼹鼠的超数排卵方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106333761B
CN106333761B CN201610826221.3A CN201610826221A CN106333761B CN 106333761 B CN106333761 B CN 106333761B CN 201610826221 A CN201610826221 A CN 201610826221A CN 106333761 B CN106333761 B CN 106333761B
Authority
CN
China
Prior art keywords
naked mole
naked
injection
rat
super
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610826221.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106333761A (zh
Inventor
崔淑芳
杨文静
徐晨
李周桐
刘攀
蔡丽萍
林丽芳
程继帅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Second Military Medical University SMMU
Original Assignee
Second Military Medical University SMMU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Second Military Medical University SMMU filed Critical Second Military Medical University SMMU
Priority to CN201610826221.3A priority Critical patent/CN106333761B/zh
Publication of CN106333761A publication Critical patent/CN106333761A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106333761B publication Critical patent/CN106333761B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61D—VETERINARY INSTRUMENTS, IMPLEMENTS, TOOLS, OR METHODS
    • A61D19/00—Instruments or methods for reproduction or fertilisation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61D—VETERINARY INSTRUMENTS, IMPLEMENTS, TOOLS, OR METHODS
    • A61D7/00—Devices or methods for introducing solid, liquid, or gaseous remedies or other materials into or onto the bodies of animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/24—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g. HCG; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及实验动物生产领域，具体是一种裸鼹鼠的超数排卵方法，包括以下步骤：在发情结束后第1、3、5、7天，为雌性裸鼹鼠腹腔注射PMSG；第7天对裸鼹鼠以0.12IU/g体重的剂量腹腔注射HCG；在注射HCG后1h，将雌性裸鼹鼠与群落中具有繁殖能力的雄鼠开始合笼，自由交配。本发明通过大量试验验证，确定了技术方案的实施日程、用药成分和剂量。本发明制订了一套裸鼹鼠超数排卵程序，填补了国内裸鼹鼠引种之后暂没有制定超排程序的空白，每只实验动物都对超排程序有反应，且可形成51‑55个卵泡。本发明所采用的药物和程序更适合裸鼹鼠，超排程序较为经济。

Description

一种裸鼹鼠的超数排卵方法
技术领域
本发明涉及实验动物生产技术领域，具体地说，是一种裸鼹鼠的超数排卵方法。
背景技术
超数排卵就是在在雌性动物发情周期的一段时间内，利用外源性激素诱发诱导其卵巢内多个卵泡同时发育，降低卵泡发育周期，提高成熟卵泡的数量，以达到提高繁殖率的效果。目前大鼠、小鼠的超排技术已经非常成熟，并且已经具有相应的操作标准，并在大鼠、小鼠的净化和基因修饰动物生产中被大规模应用。
裸鼹鼠是一种原产自非洲东部地下的动物，包括肯尼亚、埃塞俄比亚和索马里等地区，营真社会性生活。一个裸鼹鼠群落内一般会有40-90个个体，最多能达到300个以上。在裸鼹鼠群落内部，通常只有一只母鼠(鼠王)和1-3只雄鼠具有生殖能力。除了在野生环境中有这种情况，实验室饲养的裸鼹鼠群落也存在同样的情况。此外裸鼹鼠具有其特殊的生理特点，现有的大鼠或小鼠的超排程序并不适用于裸鼹鼠。因此，制定裸鼹鼠的超排程序，提高人为控制的裸鼹鼠繁殖率，从而扩大种群，具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于填补目前我国裸鼹鼠超数排卵程序的空白，结合裸鼹鼠生理特点和超排成本等多种因素，提供一套裸鼹鼠超数排卵的日程安排及使用药品及用量。
本发明的第一方面，提供一种裸鼹鼠的超数排卵方法，包括以下步骤：
A)在发情结束后第1、3、5、7天，为雌性裸鼹鼠腹腔注射PMSG(孕马血清，PregnantMare Serum Gonadotropin,PMSG)；所述的PMSG的注射剂量为0.06～0.24IU PMSG/g体重；
B)第7天对裸鼹鼠以0.12IU/g体重的剂量腹腔注射HCG(人绒毛膜促性腺激素，human chorionic gonadotrophin,HCG)；
C)在注射HCG后1h，将雌性裸鼹鼠与群落中具有繁殖能力的雄鼠开始合笼，自由交配。
所述的步骤B中，第7天对裸鼹鼠腹腔注射HCG目的是促进卵泡细胞增殖和卵泡生长，促进卵巢分泌雌激素，抑制优势卵泡的发育，人为制造大量卵泡，诱导排卵前LH高峰出现。
优选的，所述的步骤A中PMSG注射时间为注射当日的16:00。所述的PMSG注射时间是根据裸鼹鼠体内激素水平的波动规律选择的，裸鼹鼠一般从16:00至次日清晨指间大量进行交配活动，体内激素水平相应升高，因此选择16:00。
优选的，所述的步骤B中HCG注射时间为第7日20:00。所述HCG注射时间一方面与裸鼹鼠体内激素含量波动一致，同时结合HCG的发挥效力的有效期(一般为12小时左右效力达到峰值)进行选择的，20:00注射之后便于1小时后合笼并提高裸鼹鼠在次日清晨到来之前(HCG仍未完全代谢)这段时间的发生交配几率。
优选的，所述的步骤A中PMSG注射剂量为平均每g体重0.06、0.12、0.24IU，在实际生产中根据裸鼹鼠体重进行适度调整用量。更优选为0.12IU/g体重(筛选过程见表1)。
表1PMSG剂量筛选
Figure BDA0001115360530000021
注：与0.06IU/g体重相比：*P＜0.05，***P＜0.001；与0.24IU/g体重相比：##P＜0.01。
优选的，所述雌性裸鼹鼠为健康的18-30月龄，体重45-55g，在处理期间为单独饲养状态。
本发明优点在于：
本发明通过大量试验验证，确定了技术方案的实施日程、用药成分和剂量。本发明制订了一套裸鼹鼠超数排卵程序，填补了国内裸鼹鼠引种之后暂没有制定超排程序的空白，每只实验动物都对超排程序有反应，且可形成51-55个卵泡。本发明所采用的药物和程序更适合裸鼹鼠，超排程序较为经济。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。
实施例1裸鼹鼠超数排卵
1.药剂：
孕马血清(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG)：中国宁波第二激素厂；
人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)：中国宁波三生药业有限公司。
2.适龄健康动物的选择
在裸鼹鼠繁殖最佳季节(每年3-6月)选取健康的18-30月龄的裸鼹鼠40只，体重50±0.2g，在处理期间为单独饲养状态。因为裸鼹鼠属于季节性繁殖的物种，在非繁殖季节整体性腺功能退化，对超数排卵相关药物无反应，因此必须在繁殖季节开展这一工作。裸鼹鼠在8月龄完成性成熟，14月龄完成体成熟，18-30月龄是最佳繁育时期，从体况看体重45-55g为膘情适中，适合进行超数排卵处理。
3.超排程序
于16:00对每只雌性裸鼹鼠腹腔注射0.06IU、0.12IU、0.24IU PMSG/g体重，注射当日记为第1天，注射次日记为第2天，以此类推。第3、5、7天注射同等剂量的PMSG。
第7天20:00对裸鼹鼠以0.12IU/g的剂量腹腔注射HCG，以是促进卵泡细胞增殖和卵泡生长，促进卵巢分泌雌激素，人为制造大量卵泡。
在注射HCG后1h，将雌性裸鼹鼠与群落中具有繁殖能力的雄鼠开始合笼，自由交配。
在首次交配后第7-9天开始手术收集胚胎。
裸鼹鼠发情周期是30-35天，属于交配刺激排卵。但人为注射PMSG和HCG可以刺激优势卵泡排卵进而形成功能性黄体使雌性裸鼹鼠顺利进入下一个情期，便于人为控制裸鼹鼠卵子形成。PMSG可以诱发发情、超数排卵或增加排卵率，在实际实验中裸鼹鼠对PMSG反应敏感，注射PMSG对超排效果影响显著。
4.超排效果
此处对比了3种PMSG剂量对裸鼹鼠超数排卵的效果，具体实验数据见表1，平均排卵率＝黄体数×100/(黄体数+卵泡数)，可以看出剂量为0.12IU/g体重的效果最好。
表2不同PMSG剂量的超排效果
Figure BDA0001115360530000041
注：与0.06IU/g体重相比：*P＜0.05，***P＜0.001；与0.24IU/g体重相比：##P＜0.01。
以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (1)

1.一种裸鼹鼠的超数排卵方法，其特征在于，包括以下步骤：
A）在发情结束后第1、3、5、7天，为雌性裸鼹鼠腹腔注射孕马血清；所述雌性裸鼹鼠为健康的18-30月龄，体重45-55g，在处理期间为单独饲养状态；所述的孕马血清的注射剂量为0.12 IU孕马血清/g体重；孕马血清注射时间为注射当日的16:00；
B）第7天对裸鼹鼠以0.12IU/g体重的剂量腹腔注射人绒毛膜促性腺激素；人绒毛膜促性腺激素注射时间为第7日20:00；
C）在注射人绒毛膜促性腺激素后1h，将雌性裸鼹鼠与群落中具有繁殖能力的雄鼠开始合笼，自由交配。
CN201610826221.3A 2016-09-18 2016-09-18 一种裸鼹鼠的超数排卵方法 Active CN106333761B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610826221.3A CN106333761B (zh) 2016-09-18 2016-09-18 一种裸鼹鼠的超数排卵方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610826221.3A CN106333761B (zh) 2016-09-18 2016-09-18 一种裸鼹鼠的超数排卵方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106333761A CN106333761A (zh) 2017-01-18
CN106333761B true CN106333761B (zh) 2020-08-11

Family

ID=57839054

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610826221.3A Active CN106333761B (zh) 2016-09-18 2016-09-18 一种裸鼹鼠的超数排卵方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106333761B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113439709A (zh) * 2021-05-18 2021-09-28 陆华 一种肾精不足伴生殖功能低下的动物模型的造模方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103451149A (zh) * 2013-05-09 2013-12-18 刘国庆 转基因仓鼠及其制备方法
CN103800603A (zh) * 2014-03-11 2014-05-21 伊犁德瑞骏发生物科技有限公司 一种诱导母马超数排卵的药物组合及其使用方法
CN105593369A (zh) * 2013-10-04 2016-05-18 内帕基因株式会社 使用电穿孔的哺乳动物基因修饰方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10050831A1 (de) * 2000-10-05 2002-05-02 Veyx Pharma Gmbh Verfahren zum Zyklusstart bei weiblichen Zuchttieren
CN104542447A (zh) * 2013-10-21 2015-04-29 王秀松 果子狸年产二胎饲养方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103451149A (zh) * 2013-05-09 2013-12-18 刘国庆 转基因仓鼠及其制备方法
CN105593369A (zh) * 2013-10-04 2016-05-18 内帕基因株式会社 使用电穿孔的哺乳动物基因修饰方法
CN103800603A (zh) * 2014-03-11 2014-05-21 伊犁德瑞骏发生物科技有限公司 一种诱导母马超数排卵的药物组合及其使用方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
不同时间注射PMSG和HCG对小鼠超排卵效果的影响;陈喜英，等;《山西医科大学学报》;20140131;第45卷(第1期);第23-25页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN106333761A (zh) 2017-01-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103960548B (zh) 一种妊娠母猪的饲喂方法
CN104688380B (zh) 一种提高羊超数排卵数量与质量的方法
CN104068275B (zh) 林麝母麝催情促孕饲料及利用其进行母麝养殖的方法
CN108042485B (zh) 一种烯丙孕素制剂及其制备方法
CN103238563A (zh) 促使大鲵亲鱼雌雄同步发育成熟的方法
CN104521891A (zh) 一种提高母猪年上市商品猪数的系统营养方案
van Wettere et al. Controlling lactation oestrus: The final frontier for breeding herd management
CN106922613A (zh) 一种促进母猪发情的养殖方法
CN106333761B (zh) 一种裸鼹鼠的超数排卵方法
CN103238754B (zh) 一种用于母猪快速分娩及产后康复的复合预混料及其制备工艺
CN108207797A (zh) 一种山羊一胎多羔的高效繁殖方法
Carcangiu et al. Can advance of first lambing induced by melatonin implants influence the next lambing time in Sarda breed sheep?
CN107173329A (zh) 一种蜀宣花牛母牛繁殖方法
CN107155971A (zh) 一种鱤鱼与青鱼杂交新品系育种方法
CN104855741A (zh) 一种林麝母麝催情促孕饲料及其养殖方法
CN104664168A (zh) 一种仔猪专用复合维生素微乳液制剂及其制备方法和应用
CN104026075B (zh) 一种林麝母麝催情促孕饲料及利用其进行母麝养殖的方法
CN103610517B (zh) 一种阿拉善双峰驼的超数排卵方法
Hidalgo et al. Influence of lactation length and gonadotrophins administered at weaning on fertility of primiparous sows
CN1099232C (zh) 大鲵催产剂及其使用方法
Mostafa et al. Effect of Flushing with Energy or Protein Sources on the Reproductive Performance in Ossimi Ewes
CN107594178B (zh) 一种促进空怀母猪发情和多排卵的营养添加剂
CN102949380B (zh) 一种提高母猪繁殖性能的药物组合物
CN105341400A (zh) 一种从授精后至分娩完成20日期间的母猪饲养方法
CN106689028A (zh) 一种努比山羊的养殖方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant