CN106332774A - 一种采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法，筛选多个一般配合力高、矮杆早熟、抗倒耐病、株型紧凑、含油率高、花期集中、适宜机收的半冬性高世代纯合自交系，作为化学杂交剂SX‑1诱导型雄性不育母本进行雄性不育系诱导；选用多个农艺性状优良，结实性好，无明显缺陷的半冬性细胞核雄性不育系或半冬性细胞质雄性不育系。同时，筛选一个适应性广、抗逆性强、丰产稳产性好的高世代亲本自交系或优良恢复系，其光温敏感类型为半冬性或弱冬性的品系作为共同授粉系父本，分别与CIMS、GMS或CMS三种类型的多个不育系杂交为冬油菜区配制生产杂交种。本发明具有缩短了育种周期，提高选育效率、节约成本的特点，适合推广应用。

Description

一种采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法

技术领域

本发明属于农作物遗传育种技术领域，具体地说，涉及一种采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法。

背景技术

我国从20世纪60年代起就开始了油菜杂种优势利用的研究，是世界上最早育成杂交油菜并大面积推广应用的国家，油菜杂种优势利用处于世界领先水平。目前细胞质雄性不育(CMS)、细胞核雄性不育(GMS)、利用化学杂交剂诱导雄性不育(CIMS)是油菜杂种优势利用的主要途径。

化学杂交剂SX-1是由陕西省杂交油菜研究中心研制筛选出的一种较为理想的化学杂交剂，2006获得国家发明专利(专利号：ZL03105389.0)，其具有杀雄彻底、无残留、无污染、成本低、用量少、操作方便等特点，是目前油菜生产中应用最为广泛的一种化学杂交剂。

通过叶面喷施SX-1，能完全诱导油菜生理型雄性不育，并生成相应的诱导型不育系(CIMS)，并能有效解决细胞核雄性不育系(GMS)和细胞质雄性不育系(CMS)在育种和生产应用中存在的诸多问题。

用化学杂交剂SX-1诱导雄性不育系(CIMS)：即对甘蓝型油菜杂交种或育种材料进行诱导杀雄，大量研究证明，利用SX-1在长江上游区对渝黄2号母本进行2次喷施，喷施质量浓度分别为5.5和7.0mg/L时杀雄效果最佳，全不育率达100；利用SX-1在冬油菜区以6.0mg/L+7.0mg/L，春油菜区以6.5mg/L+7mg/L质量浓度；利用SX-1以9.0和10mg/L于显蕾和显蕾后10～12d各喷施1次，对陇油6号诱导雄性不育株率达到95％；SX-1对春油菜区42份不同类型的甘蓝型油菜都有较好的杀雄效果，在油菜育种中具有重要的应用价值。

细胞核雄性不育系(GMS)：主要用于GMS不育系制种中正常植株的诱导杀雄，不管是单隐性核不育还是双隐性核不育，在制种时均需人工拔除50％左右的正常可育株，不仅费时、费工，制种成本高，产量低，而且因人为因素而影响制种纯度。用化学诱导直接杀雄技术除省工、省时保证质量外，还能将50％必须拔除的正常可育株诱导成不育株配制杂交种，可使杂交种产量增加20％-30％。其杀雄方法与正常油菜的方法相同。

细胞质雄性不育系(CMS)：目前生产上应用的均为低温敏感型不育系，该不育系初花期如果遇到低温，往往产生微粉自交结实而影响制种纯度，如在不育系花粉母细胞进入单核期，用SX-1进行1次叶面喷施处理，能够有效消除微粉，使不育系育性彻底。如SX-1在“秦优7号”、“秦杂油1号”等多个油菜CMS制种中应用，使杂交种子恢复率提高5～10个百分点，种子纯度稳定在90％以上。

发明内容

本发明的目的在于提供一种采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法，该方法应用多个高世代纯合自交系或不育系与一个共同授粉系父本在一个隔离区或隔离网室杂交，无论为冬油菜区还是春油菜区配制杂交种。由于亲本选择范围广，一次配制组合多，实现当年制种当年使用(春制冬用)，且制种量大，能满足预备试验、品比试验与示范等多个试验用种需求，从而有效缩短了育种周期，提高了杂交种的选育效率，加速了育种进程，节约了生产成本，促进了新品种选育和推广，是一种新型高效的育种方法，所以具有非常重要的科学价值和生产应用价值。

其具体技术方案为：

一种采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法，包括以下步骤：

步骤1、科学选择优良亲本

依据优势性状互补原则，在前期配合力试验和育种经验的基础上，慎重确定一个适应性广、抗逆性强、丰产稳产性好的高世代纯合自交系或优良恢复系作为共同授粉系父本的基础上，再选取与父本优势性状互补的多个优良材料CIMS或不育系GMS、CMS作为母本。依据光温敏特性和育种经验，在为冬油菜区配制杂交种时，母本为半冬性材料，父本为半冬性或弱冬性材料；为春油菜区配制杂交种时，母本为春性材料，对应的共同授粉系父本为春性或半冬性材料。

步骤2、做好隔离规格播种

制种地隔离区1500m或者使用隔离网室进行制种。9月中旬和次年4月下旬分别在冬、春油菜区，采用多母一父方式，父母本1:2，行距40cm,株距10cm，亩留苗1.5万株左右，其它同一般制种田。在正常年份，若个母本面积8-16㎡左右，CIMS、GMS和CMS每个不育系均能生产出优质杂交种约1.8-3.6Kg以上。

步骤3、利用SX-1杀雄诱导

3月中旬或6月下旬当母本材料花粉母细胞进入单核期，利用SX-1对化学诱导型不育系CIMS和细胞核雄性不育材料GMS叶面喷施2次杀雄，第1次施药浓度为6.5mg/L，1次施药后10-15天进行第2次喷施，浓度为7mg/L；对细胞质雄性不育材料CMS消除微粉只喷施1次，时期为花粉母细胞进入单核期，浓度为6.0mg/L；

步骤4、调节花期保证纯度

进入初花期，对所有母本进行摘顶打苔处理，防止母本由于前期杀雄不彻底而引起花粉污染，砍除花期与父本相差太大的母本，对相邻父本采用隔株摘顶打苔或者全部摘顶打苔处理，延长父本花期，促进父母本花期相遇。及时摘除后期由于母本营养过剩造成的“返花”现象，防止花粉污染，保证制种的纯度。

步骤5、辅助授粉提高产量

盛花期开始，辅助以人工授粉，每天上午9～11时及下午2～4时。两人拉绳平行于行向向前拉动，或用竹竿平行于行向左右拨动，杆上缠上纱布或粗布条浸潮，父本位上，母本位下，轻轻抖动父本，达到授粉目的，每天2-4次，盛花到终花期共授粉15-20天；

步骤6、适时收获防止混杂

当父本接近终花时及时砍除，并运出田间，减少病害发生。母本角果80％黄熟时收获，每一个母本应单收、单运、单打、单晒，并附加种子标签，清选分类保存备用，严防人为和机械混杂。

进一步，步骤3中SX-1对化学诱导型不育系CIMS和细胞核雄性不育材料GMS杀雄方法相同，所采用的步骤为：当多个母本中任何一个化杀母本最大花蕾的花粉母细胞进入单核期，形态上表现为80％以上的油菜单株苔高15～20cm,最大花蕾长度达2.0～2.5mm时，用6.5mg/L的SX-1进行第1次叶面喷施，10～15d后，用7.0mg/L的SX-1进行第2次叶面喷施。两次喷施剂量均为34.5g/㎡，单株平均受药量为2.5～3mL/株。

进一步，步骤3中对细胞质雄性不育材料CMS消除微粉的步骤为：对低温敏感型细胞质雄性不育系，在最大花粉母细胞进入单核期，形态上表现为80％以上的油菜单株苔高15～20cm，最大花蕾长度达2.0～2.5mm时，用6mg/L的SX-1进行1次性喷施。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

通过大量的实践证明，无论为冬油菜区还是春油菜区配制杂交种，采用该方法，由于亲本选择范围广，一次配制组合多，即在一个隔离制种区或隔离网室，就能生产多个杂交种，实现当年制种当年使用，且制种量大，能满足预备试验、品比试验与示范等多个试验用种需求，从而有效缩短了育种周期，提高了杂交种的选育效率，拓展了质不育配制杂交种的应用范围，加速了育种进程，节约了生产成本，促进了新品种选育和推广，是一种新型高效的育种方法，所以具有非常重要的科学价值和生产应用价值。

附图说明

图1是利用CIMS不育系多母一父方式配制杂交种技术路线图；

图2是利用GMS不育系多母一父方式配制杂交种技术路线图；

图3是利用CMS不育系多母一父方式配制杂交种技术路线图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方案对本发明的技术方案作进一步详细地说明。

一种采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法，包括以下步骤：

(1)科学选择优良亲本。依据优势性状互补原则，在前期配合力试验和育种经验的基础上，慎重确定一个适应性广、抗逆性强、丰产稳产性好的高世代纯合自交系或优良恢复系作为共同授粉系父本的基础上，再选取与父本优势性状互补的多个优良材料(CIMS)或不育系(GMS、CMS)作为母本。依据光温敏特性和育种经验，在为冬油菜区配制杂交种时，母本为半冬性材料，父本为半冬性或弱冬性材料；为春油菜区配制杂交种时，母本为春性材料，对应的共同授粉系父本为春性或半冬性材料。

(2)做好隔离规格播种。制种地隔离区1500m或者使用隔离网室进行制种。9月中旬和次年4月下旬分别在冬、春油菜区，采用多母一父方式，父母本1:2，行距40cm,株距10cm，亩留苗1.5万株左右，其它同一般制种田。在正常年份，若个母本面积8-16㎡左右，CIMS、GMS和CMS每个不育系均可生产出优质杂交种约1.8-3.6Kg以上。

(3)利用SX-1杀雄诱导。3月中旬或6月下旬当母本材料花粉母细胞进入单核期，利用SX-1对化学诱导型不育系(CIMS)和细胞核雄性不育材料(GMS)叶面喷施2次杀雄，第1次施药浓度为6.5mg/L，1次施药后10-15天进行第2次喷施，浓度为7mg/L；对细胞质雄性不育材料(CMS)消除微粉只喷施1次，时期为花粉母细胞进入单核期，浓度为6.0mg/L。

(4)调节花期保证纯度。进入初花期，对所有母本进行摘顶打苔处理，防止母本由于前期杀雄不彻底而引起花粉污染，砍除花期与父本相差太大的母本，对相邻父本采用隔株摘顶打苔或者全部摘顶打苔处理，延长父本花期，促进父母本花期相遇。及时摘除后期由于母本营养过剩造成的“返花”现象，防止花粉污染，保证制种的纯度。

(5)辅助授粉提高产量。盛花期开始，辅助以人工授粉，每天上午9～11时及下午2～4时。两人拉绳平行于行向向前拉动，或用竹竿(杆上缠上纱布或粗布条浸潮)平行于行向左右拨动，父本位上，母本位下，轻轻抖动父本，达到授粉目的，每天2-4次，盛花到终花期共授粉15-20天左右，以提高杂交种结实率，保证杂种纯度。做好后期虫、鸟害防治工作。

(6)适时收获防止混杂。当父本接近终花时及时砍除，并运出田间，减少病害发生。母本角果80％左右黄熟时收获，每一个母本应单收、单运、单打、单晒，并附加种子标签，清选分类保存备用，严防人为和机械混杂。

甘蓝型油菜高世代纯合自交系和GMS不育系中正常植株的化学杀雄方法，以及细胞质雄性不育系微粉的消除方法具体步骤如下：

(1)甘蓝型油菜高世代纯合自交系和GMS不育系中正常植株的化学杀雄方法相同，所采用的步骤为：当多个母本中任何一个化杀母本最大花蕾的花粉母细胞进入单核期，形态上表现为80％以上的油菜单株苔高15～20cm,最大花蕾长度达2.0～2.5mm时，用6.5mg/L的SX-1进行第1次叶面喷施，10～15d后，用7.0mg/L的SX-1进行第2次叶面喷施。两次喷施剂量均为34.5g/㎡，单株平均受药量为2.5～3mL/株。达到整个油菜花期雄性不育。

(2)细胞质雄性不育系(CMS)微粉的消除步骤为：对低温敏感型细胞质雄性不育系，在最大花粉母细胞进入单核期，形态上表现为80％以上的油菜单株苔高15～20cm,最大花蕾长度达2.0～2.5mm时，用6mg/L的SX-1进行1次性喷施，即可消除不育系的前期微粉，使不育系育性彻底，开放性好，结实正常。

采用多母一父方式配置油菜杂交种的高效育种方法，申请人先后育成了一批化学杀雄两系杂交种和细胞质雄性不育三系杂交种。

连续9年，在陕西省杂交油菜研究中心张掖春油菜育种基地，采用正常油菜直接杀雄或GMS中正常植株直接杀雄诱导不育系，累计配置杂交组合250个，选育出化学杀雄两系杂交种“秦杂油4号”、“秦杂油5号”、“秦优79”、“秦杂油19”、“秦荣3号”、“秦荣4号”、“秦油88”等国审或省审品种7个，其中冬油菜区品种4个，春油菜区品种3个，新品种的选育效率非常之高。

表1：2007-2015年采用多母一父方式配制的化杀两系杂交种数量

连续4年，利用细胞质雄性不育系(CMS)，选用适应性广、抗病性强、丰产稳产性好的优良恢复系作为父本授粉系，累计配制杂交组合63个，育成的细胞质雄性不育三系杂交种“鸿优88”、“秦优558”等8个高产组合分别参加春油菜国家区域试验和内蒙、青海、甘肃、新疆等省市的区域试验。

表2：2012-2015年，采用多母一父方式配置的细胞质雄性不育三系杂交种数量

采用该方法，现已审定多个高油、高产、优质杂交种，具有重要的科学价值和生产应用价值。其中“秦杂油4号”是我国第一个通过国审的含油量超过50％的杂交油菜新品种，处于国内领先水平；“秦杂油19”含油量49.49％，已经成为春油菜区主推高油品种之一；“秦荣4号”是矮杆抗倒适宜机械化收获的品种之一；“秦油88”2014年通过黄淮区和陕西省审定，两年产量平均亩产分别为263.1和253Kg,产量突破了陕西省审定品种的最高纪录；“秦优558”是一个冬春两用型品种，参试表现突出，有望近年审(认)定。

表3：采用同一父本不同母本选育的优质杂交油菜品种

实施例1：以2013年为例，利用18个诱导型不育系或细胞核雄性不育系，采用多母一父的方法配制杂交种的具体实施步骤(见表4)：

表4：利用一个共同父本授粉系父本ZY1，18个诱导型不育系所配置的杂交种

1、亲本选择：筛选的父本授粉系ZY1，其特征特性表现为：生长势强、株型分散、含油量高、中高杆硬、角性好、中晚熟、抗性好，半冬性。选用的18个诱导型不育系，其分别具有矮杆早熟、株型紧凑、花期集中、丰产性好、含油量高、一般配合力好、抗倒耐病、适宜机收等3-4个特点，全部为半冬性高世代品系。

2、安全隔离：播前处理好安全隔离区，在制种区空间控制在1500m范围内，不种植其他任何十字花科植物。同时选择肥力中等、形状规则，交通便利的地块用于试验。

3、规格播种：科学规划，合理布局，结合当地气候条件，适时播种。试验安排在陕西省杂交油菜研究中心张掖春油菜育种基地，于4月25日，采用多母一父方式，父本：母本按照1：2进行精准播种，保证质量，做到一播全苗,行距40cm,行长10m，每个母本面积8-16㎡。

4、及时定苗：一般在3叶期间苗，5叶期一次性定苗，株距8-10cm，母本留苗2万株左右，父本1.5万株左右。定苗后要结合中耕除草，做好田间的日常管理，防止人、畜等人为因素对试验的破坏。

5、化学杀雄：6月下旬，当任何一个母本80％以上的油菜单株苔高15～20cm,最大花蕾长度达2.0～2.5mm时，用6.5mg/L的SX-1进行第1次喷施，诱导雄性不育。喷药后第3天开始观察记载SX-1对油菜生长发育的影响。7月上旬，用7.0mg/L的SX-1进行第2次喷施，两次喷施剂量均为34.5g/㎡，单株平均受药量为2.5～3mL/株。开花后每2d调查记载1次各处理花的育性状况,直至终花，其不育株率能达到96％以上，不育度达到92％，不育时间可持续26天。

6、花期调节：根据各个诱导型亲本母本生长发育情况，记载初花期，并适时对父母本分别摘顶打苔，调节花期，促进花期相遇。对诱导型母本早于父本的5个材料(2013甘肃♀3、♀6、♀8、♀13、♀16)，其花期早父本3-4天左右，对其母本采用全部深摘顶打苔处理，打掉倒2-3分枝，对相邻父本采用隔株轻摘顶打苔处理。对诱导型母本与父本花期基本一致的13个材料，采用对诱导型母本全部摘顶打苔，打掉倒1-2分枝，对相邻父本采用隔株打顶摘苔，打掉倒2-3分枝。诱导型母本喷施化学杂交剂SX-1后，因其生长发育受到抑制，花期推迟，所以在摘顶打苔时，要考虑到这个因素，宜轻打，以保证花期相遇，能够正常授粉结实。

7、辅助授粉：当诱导型母本和父本进入盛花期以后，每天上午9～11时及下午2～4时。派2人拉绳平行于行向向前拉动，每天上下午各进行2次，直到父本接近终花，人工授粉约18天左右，以提高杂交种结实率和杂交种纯度。

8、防治虫害：做好虫、鸟害防治工作。7月上旬，对个别植株受到无翅蚜虫危害时，可摘除蚜棒装入塑料袋中，带出田外就地踩埋。当7月下旬，油菜进入盛花期后，用20％氧化乐果药剂喷施防治蚜虫。特别应注意防治村头、地边、路边的蚜虫。双低早熟材料，极易受到鸟害的危害，通过搭建草人、燃放鞭炮、人工驱赶等方式，减少飞鸟对早熟材料的危害，保证制种产量。

9、砍除父本：8月初，当父本接近终花时，及时将父本砍除，运出田间，防止混杂，确保制种纯度。

10、适时收获：9月上旬，当母本角果80％左右黄熟时收获，每个母本应单收、单运、单打、单晒，并附加种子标签，清选称重，分类保存备用，严防人为和机械混杂。

2013年，通过该方法在陕西省杂交油菜研究中心张掖春油菜育种基地配制了一批杂交种，同年在全国各地开展品比试验和预备试验，根据试验结果并结合室内品质分析筛选，最终选择7个综合农艺性状表现突出，矮杆早熟、抗倒性强、株型紧凑的半冬性杂交种，于2014年分别参加国家长江中游区预试，陕西区试的陕南组和关中组试验，7个组合全部表现突出，全部参加了区试第2年续试。

2007—2015年，每年连续不断的在甘肃春油菜育种基地，采用多母一父方法诱导高世代纯合自交系雄性不育，并且同步配制杂交种，实施的步骤与例举的实施例1完全相同，先后有8个品种通过该方法选育成功。相比传统先手工杂交再网室制种配制杂交种，收获种子量大，可一次性提供多点试验种子量，缩短了育种年限、节约了成本，是一种新型高效的育种方法。

实施例2：以2015年为例，利用15个细胞质雄性不育系，采用多母一父的方法配置杂交种的实施步骤：

1、亲本选择：筛选的父本授粉系SR3，是优良的细胞质雄性不育恢复系，冬、春两用型。其特征特性表现为：早熟矮杆、分枝短小、角果直生、落黄较好、株型紧凑、抗耐性强、含油量高。15个细胞质雄性不育系均为陕2A胞质，属于春性不育系。其特点表现为：生长势强、丰产性好、株高偏高、熟期中晚、开放性好、易制种，抗倒性差、株型分散，前期易受低温影响产生微粉自交结实。

2、安全隔离：与前述实施例1相同。

3、规格播种：与前述实施例1相同。

4、及时定苗：与前述实施例1相同。

5、微粉消除：6月28日，当15个不育系，每个母本80％以上不育系苔高15～20cm,最大花蕾长度达2.0～2.5mm时，用6.0mg/L的SX-1进行叶面喷施，用于消除前期微粉。喷施剂量均为34.5g/㎡，单株平均受药量为2.5～3mL/株。通过1次喷施，能完全消除不育系由于低温产生的微粉。

6、花期调节：与前述实施例1相同。

7、辅助授粉：与前述实施例1相同。

8、防治虫害：与前述实施例1相同。

9、砍除父本：与前述实施例1相同。

10、适时收获：与前述实施例1相同。

自2011—2015连续5年，都在张掖春油菜区育种基地进行细胞质不育系多母一父杂交种的配制，实施的步骤与列举的实施例2完全相同。短短5年时间，已育成的细胞质雄性不育三系杂交种“鸿优88”、“秦荣6号”、“秦优558”等高产组合8个，分别参加春油菜国家区域试验和内蒙、青海、甘肃、新疆等省市的区试。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。

Claims (3)

1.一种采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、科学选择优良亲本

依据优势性状互补原则，在前期配合力试验和育种经验的基础上，慎重确定一个适应性广、抗逆性强、丰产稳产性好的高世代纯合自交系或优良恢复系作为共同授粉系父本的基础上，再选取与父本优势性状互补的多个优良材料CIMS或不育系GMS、CMS作为母本；依据光温敏特性和育种经验，在为冬油菜区配制杂交种时，母本为半冬性材料，父本为半冬性或弱冬性材料；为春油菜区配制杂交种时，母本为春性材料，对应的共同授粉系父本为春性或半冬性材料；

步骤2、做好隔离规格播种

制种地隔离区1500m或者使用隔离网室进行制种；9月中旬和次年4月下旬分别在冬、春油菜区，采用多母一父方式，父母本1:2，行距40cm,株距10cm，亩留苗1.5万株，其它同一般制种田；在正常年份，若个母本面积8-16㎡，CIMS、GMS和CMS每个不育系均能生产出优质杂交种1.8-3.6Kg以上；

步骤3、利用SX-1杀雄诱导

3月中旬或6月下旬当母本材料花粉母细胞进入单核期，利用SX-1对化学诱导型不育系CIMS和细胞核雄性不育材料GMS叶面喷施2次杀雄，第1次施药浓度为6.5mg/L，1次施药后10-15天进行第2次喷施，浓度为7mg/L；对细胞质雄性不育材料CMS消除微粉只喷施1次，时期为花粉母细胞进入单核期，浓度为6.0mg/L；

步骤4、调节花期保证纯度

进入初花期，对所有母本进行摘顶打苔处理，防止母本由于前期杀雄不彻底而引起花粉污染，砍除花期与父本相差太大的母本，对相邻父本采用隔株摘顶打苔或者全部摘顶打苔处理，延长父本花期，促进父母本花期相遇；及时摘除后期由于母本营养过剩造成的“返花”现象，防止花粉污染，保证制种的纯度；

步骤5、辅助授粉提高产量

盛花期开始，辅助以人工授粉，每天上午9～11时及下午2～4时；两人拉绳平行于行向向前拉动，或用竹竿平行于行向左右拨动，杆上缠上纱布或粗布条浸潮，父本位上，母本位下，轻轻抖动父本，达到授粉目的，每天2-4次，盛花到终花期共授粉15-20天；

步骤6、适时收获防止混杂

当父本接近终花时及时砍除，并运出田间，减少病害发生；母本角果80％黄熟时收获，每一个母本应单收、单运、单打、单晒，并附加种子标签，清选分类保存备用，严防人为和机械混杂。

2.根据权利要求1所述的采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法，其特征在于，步骤3中SX-1对化学诱导型不育系CIMS和细胞核雄性不育材料GMS杀雄方法相同，所采用的步骤为：当多个母本中任何一个化杀母本最大花蕾的花粉母细胞进入单核期，形态上表现为80％以上的油菜单株苔高15～20cm,最大花蕾长度达2.0～2.5mm时，用6.5mg/L的SX-1进行第1次叶面喷施，10～15d后，用7.0mg/L的SX-1进行第2次叶面喷施；两次喷施剂量均为34.5g/㎡，单株平均受药量为2.5～3mL/株。

3.根据权利要求1所述的采用多母一父方式配制油菜杂交种的高效育种方法，其特征在于，步骤3中对细胞质雄性不育材料CMS消除微粉的步骤为：对低温敏感型细胞质雄性不育系，在最大花粉母细胞进入单核期，形态上表现为80％以上的油菜单株苔高15～20cm，最大花蕾长度达2.0～2.5mm时，用6mg/L的SX-1进行1次性喷施。