CN106305224A - 一种预防或治疗番茄黄萎病的方法 - Google Patents

Abstract

一种预防或治疗番茄黄萎病的方法，为番茄施用枯草芽孢杆菌HMB19198制剂。在试验剂量下其防治效果可达到61.66％‑77.87％。其中以2.5克/穴处理防效最高。有比50％多·福可湿性粉剂化学农药防治效果更好的前提下，同时还是一种微生物菌剂，这样就保证了番茄黄萎病的防治是高效环保，无污染的；同时制作方法也非常简单，成本也非常低，使用技术非常成熟，是防治番茄黄萎病的一种更佳手段。

Description

一种预防或治疗番茄黄萎病的方法

技术领域

本发明涉及微生物领域，特别是涉及枯草芽孢杆菌HMB19198制剂在防治番茄黄萎病的方法。

背景技术

番茄(学名：Lycopersicon esculentum Mill)是茄科番茄属中的草本植物，体高0.6-2米，全体生粘质腺毛，有强烈气味，茎易倒伏，叶羽状复叶或羽状深裂，花序总梗长2-5厘米，常3-7朵花，花萼辐状，花冠辐状，浆果扁球状或近球状，肉质而多汁液，种子黄色，花果期夏秋季。

而在饮食中，番茄是家喻户晓的食物，有的人喜欢把它当做水果吃，直接用来生吃；有的人喜欢把它当做蔬菜吃，做成各种各样的菜肴，其极具有食用价值。

番茄除了食用价值，还具有极高的药用价值，其具有止血、降压、利尿、健胃消食、生津止渴、清热解毒、凉血平肝的功效。由于番茄中维生素A、维生素C的比例合适，所以常吃可增强小血管功能，预防血管老化。番茄中的类黄酮，既有降低毛细血管的通透性和防止其破裂的作用，还有预防血管硬化的特殊功效，可以预防宫颈癌、膀胱癌和胰腺癌等疾病。

综上，番茄是现代人适合的健康蔬果，作为食用蔬菜已被全球性广泛种植，即栽培种植有良好前景，具有巨大的经济价值。

番茄原产南美洲，是全世界栽培最为普遍的果菜之一，中国栽培番茄是从50年代初迅速发展，现已成为我国主要果菜之一。现中国各地普遍种植，栽培面积仍在继续扩大。

在种植过程中，不可避免的会发生很多病害，造成不同程度的减产或更甚至绝产。

番茄黄萎病是保护地和露地番茄生产的重要病害之一，可大幅度降低番茄的产量和品质，是番茄生产的一个主要限制因素。希腊番茄黄萎病严重，有时会使番茄产量下降50％甚至更多。南非、加拿大、意大利、法国、美国等都有报道，产量损失23％以上。

番茄黄萎病多发生于番茄生长后期，叶片由下向上逐渐变黄，首先是叶缘变色，变色沿叶脉扩大，轮廓清晰，成为“V”形黄斑，以后下部叶片明显枯死。发病重的结果小或不能结果，剖开病株茎部，维管束变浅褐色，病株并不迅速枯死，而是逐渐落叶，表现慢性的向上枯死，别于枯萎病。

此前，此病害在我国发生较少，但随着陕西关中地区曾发现此种病害，黑龙江省也对此病害进行报道，近年来在保护地番茄生产中此病害越来越有加重蔓延的趋势。

经研究发现，番茄黄萎病的病原菌为番茄黄萎病菌(verticillium dahlia)。在目前的番茄黄萎病防治中，本技术领域技术人员还没有找到“特效药”。在本领域内，技术人员也正在不断的试验摸索中寻找能更好防治番茄黄萎病的制剂，其中使用较广泛的为“50％多·福可湿性粉剂”，该药剂为一种化学药剂，由于是化学药剂，故其存在根本性的弊端，如药性单一，易造成高毒、高残、导致番茄品质降低，同时易产生抗药性。因为在同一地区长期，连续使用一种农药，或使用作用机理相同的农药，害虫、病菌或杂草对农药抵抗力就会的提高，进而产生一定的抗药性。

近年来，生物防治方法由于高效、环保、无污染、无残留等优点越来越受到重视。因此，如何寻找到能够防治番茄黄萎病生物菌剂是本领域技术人员目前亟需解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种预防或治疗番茄黄萎病的方法。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种预防或治疗番茄黄萎病的方法，包括：为番茄施用枯草芽孢杆菌HMB19198制剂。

优选的，所述枯草芽孢杆菌HMB19198制剂的活芽孢含量为：10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。

优选的，所述枯草芽孢杆菌HMB19198制剂的用量为1.5g/穴-2.5g/穴。

优选的，所述制剂处理施用方式为为一次性穴施给药。

优选的，所述制剂施用的时机为在番茄苗生长至3-4片复叶时

本发明的枯草芽孢杆菌制剂是一种利用生物防治番茄黄萎病的解决办法，该菌剂对番茄黄萎病有较好的防治效果，在试验剂量下其防治效果可达到61.66％-77.87％。其中以2.5g/穴处理防效最高。有比50％多·福可湿性粉剂化学农药防治效果更好的前提下，同时还是一种微生物菌剂，这样就保证了番茄黄萎病的防治是高效环保，无污染的；同时制作方法也非常简单，成本也非常低，使用技术非常成熟，是防治番茄黄萎病的一种更佳手段。

具体实施方式

本发明的核心是提供一种预防或治疗番茄黄萎病的方法，能够有效的防治番茄黄萎病。

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一：枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治番茄黄萎病的安全性测试。

本实施例的目的是测定枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治番茄的安全性，为其防治番茄黄萎病提供依据。

本实施例的供试作物为番茄，其中作物品种分别为北京硕源种子有限公司提供的“奥赛特948”、上海番茄研究所和上海长征良种实验场提供的“粉红番茄918”和天津市津科力丰种苗有限公司提供的“白果强丰”，分别使用育苗盘进行育苗，待番茄苗长出4-6片真叶时，选取健康、长势一致的番茄苗备用。

本实施例的供试药剂为利用枯草芽孢杆菌HMB19198生产的微生物菌剂，该微生物菌剂的活性成分为枯草芽孢杆菌HMB19198芽孢和它的胞外代谢产物。本实施例使用以枯草芽孢杆菌HMB19198芽孢制成的10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂，其用量一般为6KG/亩，而在生产商番茄每亩一般定植3000株左右，本实验按每亩定植3000株计算，每株剂量一般为2g/穴。故本实验取剂量设定一般剂量的1倍、2倍和4倍剂量(2g、4g和8g/穴)为安全性试验剂量。

本实施例的试验方法如下：用电子天平秤称取适量供试药剂备用。在试验田中，用打孔器打孔，行距70cm，株距30cm，每亩约3000穴，移栽前穴施不同剂量的枯草芽孢杆菌，每穴移栽1颗番茄苗，同时设空白对照，每处理重复4次，每处理40棵苗。然后给番茄苗设小拱棚。移栽后1、7、14和21天，观察番茄叶片的颜色、形状及植株生长状况，末次调查测量番茄的株高，每处理随机测量10株。

测试结果见下表：

表1、番茄(奥赛特948)穴施枯草芽孢杆菌21天后株高测量结果汇总

注：同列数据中数字带有字母表示无显著差异(P＝0.05)，反之为显著差异，下同。

表2、番茄(粉红番茄918)穴施枯草芽孢杆菌21天后株高测量结果汇总

表3、番茄(白果强丰)穴施枯草芽孢杆菌21天后株高测量结果汇总

表4、番茄(奥赛特948)穴施枯草芽孢杆菌21天后株高测量结果

表5、番茄(粉红番茄918)穴施枯草芽孢杆菌21天后株高测量结果

表6、番茄(白果强丰)穴施枯草芽孢杆菌21天后株高测量结果

经以上调查结果分析，番茄穴施不同剂量的10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂后，未发现叶片变色以及卷叶、增厚、畸形等可视药害症状，番茄植株生长状况良好，根数及根长正常。用药后21天，株高测量显示，供试番茄(奥赛特948、粉红番茄918、白果强丰)穴施不同剂量10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的株高与空白对照之间无显著差异。

综上所述，供试药剂10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂，在试验剂量下对番茄安全，未发现对番茄生长有何不良影响。

实施例二：枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治番茄黄萎病室内生物活性测定。

本实施例的目的是明确枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对番茄黄萎病室内生物活性，确定药剂的最佳使用剂量和合理的使用技术。

本实施例的供试靶标为番茄黄萎病菌(verticillium dahlia)，单孢纯化后保存于4℃冰箱，在PDA平板培养基于25℃恒温箱活化培养7天后备用。

本实施例的培养条件如下：选用由北京硕源种子有限公司生产(市购)的奥赛特968的番茄品种。整个实验在日光温室内开展，白天温度控制在25-32℃，晚间温度控制在15-22℃。晴天用遮阳网遮阴，阴天用日光灯补光，保证番茄植株的正常生长。育苗基质选用寿光市农丰育苗基质厂生产的富养基质。

本实施例的供试药剂为利用枯草芽孢杆菌HMB19198生产的微生物菌剂，该微生物菌剂的活性成分为枯草芽孢杆菌HMB19198芽孢和它的胞外代谢产物。本实施例使用科绿丰生化科技有限公司以枯草芽孢杆菌HMB19198芽孢生产的10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂；对照药剂选用由山东绿丰农药有限公司生产的50％多·福可湿性粉剂。

本实施例的试验处理如下：

该试验设7个处理，其中供试药剂10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂设置5个剂量，对照药剂50％多·福可湿性粉剂设置1个剂量，另设空白对照，各处理及剂量见表1。

表7枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治番茄黄萎病盆栽试验处理及使用剂量

本实施例每个处理重复4次，每个重复30棵番茄苗，均为在番茄苗生长至3-4片复叶移栽时一次性穴施给药。

接下来进行试验准备及处理：首先为育苗，选用富养基质育苗土，高压蒸汽灭菌2小时，以铺满育苗土的育苗盘作为底盘，育苗盘内每穴定制1株番茄苗，培养至3-4片复叶时备用。其次是带菌土壤的准备，将番茄黄萎病菌菌丝块接种在PDB培养皿中，在28℃，170转/分培养4天，过滤菌丝得到分生孢子，接入无菌育苗基质中，混匀，使得土壤中黄萎病菌分生孢子含量达到10⁶个/克土壤。最后是试验处理，将带菌土壤装入直接15厘米的花盆，按照处理剂量在花盆中定植番茄苗的位置施入10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂或50％多·福可湿性粉剂，每盆中定植一株番茄苗。移栽时托起锥形育苗盘使番茄苗根梢断掉以利于病原菌侵染，然后覆盖带菌土壤，并保持温室正常温湿度和光照培养，

本实施例采用的调查方法如下：参照农药田间药效试验准则(二)杀菌剂防治棉花黄萎病田间药效试验准则方法和农药田间药效试验准则(二)杀菌剂种子处理防治棉花苗期病害田间药效试验准则方法，按如下5级分类标准进行调查并计算病情指数和相对防病效果。

0级：无病植株；

1级：病株叶片有1/4以下表现典型症状；

3级：病株叶片有1/4-1/2表现典型症状；

5级：病株叶片有1/2-3/4表现典型症状；

7级：病株叶片有3/4以上表现典型症状或整株枯死。

病情指数＝×100

防治效果(％)＝×100

本实施例的调查时间是在当空白对照发病较重时(接种后30-50天)对各处理及空白对照进行黄萎病分级调查。然后根据调查结果再计算病情指数和相对防治效果。具体数据如下表：

表8枯草芽孢杆菌可湿性粉剂穴施防治番茄黄萎病盆栽试验数据

从上述的本实施例数据中表明，10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂5个处理(按照0.5、1.0、1.5、2.0、2.5g/穴应用“枯草芽孢杆菌”可湿性粉剂进行穴施)和对照药剂50％多·福可湿性粉剂的1.0g/穴穴施处理都能显著降低番茄黄萎病的病情指数。其中应用0.5g/穴和1g/穴的药剂穴施处理防病效果为61.66％和65.00％，与化学药剂对照(防效62.54％)之间差异不显著；1.5g/穴、2.0g/穴和2.5g/穴的药剂穴施处理防病效果分别为73.63％、74.50％和77.87％，三者之间差异不显著，但是显著高于0.5g/穴、1.0g/穴两个剂量和化学药剂对照。该结果表明10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂在番茄移栽时穴施处理能够有效防治黄萎病，故最佳使用剂量为1.5g/穴和2.5g/穴。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明的基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (5)

1.一种预防或治疗番茄黄萎病的方法，其特征在于，包括：为番茄施用枯草芽孢杆菌HMB19198制剂。

2.根据权利要求1所述的预防或治疗番茄黄萎病的方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌HMB19198制剂的活芽孢含量为：10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。

3.根据权利要求1所述的预防或治疗番茄黄萎病的方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌HMB19198的用量为1.5g/穴-2.5g/穴。

4.根据权利要求1所述的预防或治疗番茄黄萎病的方法，其特征在于，所述施用为一次性穴施给药。

5.根据权利要求1所述的预防或治疗番茄黄萎病的方法，其特征在于，所述施用的时机为在番茄苗生长至3-4片复叶时。