CN106258985A - 一种延长香蕉组培苗保存期的培养基及培养方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种延长香蕉组培苗保存期的培养基及培养方法。本发明的延长香蕉组培苗保存期的培养基，其是在香蕉生根培养基的基础上，再添加硝酸铵1.50‑1.65g/L、硝酸钾1.80‑1.90g/L、磷酸二氢钾0.15‑0.20g/L、七水硫酸镁0.3‑0.35g/L和氯化钙0.3‑0.35g/L而得到的培养基；将待进行生根培养的香蕉不定芽接种于该培养基上进行培养，可以延长香蕉组培苗保存期，实现香蕉组培苗的周年均衡生产。本发明具有简单易操作、安全可靠的特点，使用的添加成分对培养的材料不会产生毒副作用，方法简单有效，具有操作性强、生产效率和应用价值高等优点。

Description

一种延长香蕉组培苗保存期的培养基及培养方法
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种延长香蕉组培苗保存期的培养基及培养方法。
背景技术
植物组织培养已广泛应用于农业生产中的多个领域，已经在种苗脱毒生产、种苗快速繁殖、植物新资源的规模化应用、植物新品种选育等方面给现代农业产生了深远的影响，是农业生物技术在现代农业应用上的典范，是现代种业的重要组成部分。目前，我国植物组培苗已经在花卉、果树、阴生植物、药用植物等取得了大面积的推广与应用，全世界植物组培苗的年贸易额已超过150亿美元，并且，每年以超过10％的速度在递增。利用基于离体培养技术的植物种苗组培快繁方法来生产种苗，比常规繁殖方法快万倍乃至十万倍以上，一个植株一年可以繁育几万到几百万个植株。利用组培快繁技术来繁殖种苗的成本非常低廉，比用常规的种苗生产方法生产成本低10倍以上。并且，对一些营养繁殖系数低且不能通过种子繁殖的农业植物(如香蕉等)、在自然条件下种子难以萌发的植物(如铁皮石斛等)或数量稀少的优良材料(如生产过程中发现的某些优良变异单株等)而言，如果没有组培快繁技术，要想实现其规模化产业化生产是非常困难的，对一些通过种子来繁殖时农艺性状会出现分离的作物(如番木瓜等)而言，如果没有种苗的组培脱毒快繁技术，要想进一步提高其生产效益也是非常困难的。正是基于种苗组培快繁技术在繁殖速度高和成本低廉等方面的优势，植物种苗组培快繁目前已在农业领域发展成了一个巨大的产业，并取得了巨大的社会经济效益。我省的种苗组培快繁产业年产值和技术在全国处于领先地位，目前我省涉及到利用组培快繁来生产种苗的农业植物有300多种，估计组培产业年产值在10亿元以上。
我国种苗的组培产业起源香蕉种苗的生产，并成就了我国现在的“香蕉产业”。上世纪的80年代，中国科学院华南植物园(原华南植物研究所)曾碧露研究员率先完成了香蕉试管苗工厂化生产技术的研制，并在当时的广东省科委的支持下，在新会市建成了年产2000万株苗的植物种苗生产工厂，这是我国种苗组培产业发展过程中的标志性事件之一。香蕉脱毒组培苗的成功推广，使我国香蕉生产基本上实现了种植品种的良种化、种苗生产的工厂化，目前国内香蕉种植的良种覆盖率已达90％以上，香蕉试管苗代替传统的吸芽苗，产量提高了30-50％，果品品质也大幅度提高。目前，我国每年生产的香蕉组培苗在1.5亿株以上，产值达6000万元以上，另外，香蕉组培苗比传统吸芽苗更高产，若每株按增产8千克计算，每年可新增产值20亿元以上。但是香蕉组培苗的生产有淡季、旺季的现状，香蕉组培苗工厂因为淡季的原因不得不削减人力降低生产量，而当旺季来临时却又因人手不够而不得不加班加点来完成生产任务。因此，为了提高香蕉组培苗生产的劳动效率和降低生产成本，利用一种简易的方法来解决周年均衡生产显得很有必要和实际应用意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种延长香蕉组培苗保存期的培养基及培养方法，以解决香蕉组培苗生产工厂在周年生产时碰到淡季、旺季问题，实现香蕉组培苗的周年均衡生产，既可以在淡季时正常生产，又可以避免旺季时超负荷生产，便于生产管理和提高生产效率。
一种延长香蕉组培苗保存期的培养基，其是在香蕉生根培养基的基础上，再添加硝酸铵1.50-1.65g/L、硝酸钾1.80-1.90g/L、磷酸二氢钾0.15-0.20g/L、七水硫酸镁0.3-0.35g/L和氯化钙0.3-0.35g/L而得到的培养基。
优选，所述的香蕉生根培养基的配方为：以MS培养基为基本培养基，还含有IBA2.0mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖15-30g/L和琼脂6-7g/L，pH 5.8-6.0。
一种延长香蕉组培苗保存期的培养方法，包括以下步骤：
将待进行生根培养的香蕉不定芽接种于所述的延长香蕉组培苗保存期的培养基上，进行培养。
优选，在接种前先剔除被污染的香蕉不定芽。
优选，所述的培养条件为：温度23-28℃、光照强度1000-3000lx、光照时间10-16h/d。
所述的MS培养基为国际通用的培养基，其成份可参考书籍(谭文澄、戴策刚主编.观赏植物组织培养技术.北京：中国林业出版社，1991.)。
本发明利用将延长保存期母液(含硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、七水硫酸镁和氯化钙)添加至香蕉生根培养基中可以有效延长香蕉组培苗培养周期，可以于香蕉组培苗市场需求淡季时能正常安排生产，生产出香蕉组培苗可以多存放3个月以上，正好是香蕉组培苗需求的淡季的高温季节，此存放的组培苗能保存生长活力，符合待售的香蕉组培苗商品苗标准，移栽成活率高，同时又可以解决香蕉组培苗需求旺季的供不应求的问题，不但提高香蕉组培苗生产效率，而且生产安全可靠，应用前景广阔。
本发明具有简单易操作、安全可靠的特点，使用延长保存期母液的成分对培养的材料不会产生毒副作用，方法简单有效，具有操作性强，生产效率和应用价值高等优点。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1
1.材料：实验材料为香蕉(Musa nana Lour.)不定芽繁殖材料。
选取香蕉的吸芽为外植体，经常规消毒后取其顶芽接种于不定芽诱导培养基上，培养45天左右获得其不定芽，将不定芽切割接种至增殖培养基上获得大量香蕉不定芽繁殖材料。
2.药品购买
从相关公司购买香蕉组培苗生产所需的MS培养基的成分的药品，包括大量元素、微量元素、有机物、琼脂等，购买植物生长调节剂吲哚丁酸(IBA)和奈乙酸(NAA)以及延长保存期母液中成分的药品。
3.母液配制
香蕉生根培养基的配方为：以MS培养基为基本培养基，还含有IBA 2.0mg/L、NAA0.2mg/L、蔗糖15g/L、琼脂6g/L，pH 5.8。根据香蕉生根培养基配方要求，分门别类按组成成分配制其各母液(铁盐母液、大量元素母液、微量元素母液、维生素母液、甘氨酸母液、肌醇母液、植物生长调节剂母液)。药品逐一完全溶解，倒入各选定的容量瓶内，最后定容。如遇加热才能溶解情况，需待溶液冷却后再定容。
延长保存期母液的配方是：含有硝酸铵15.0g/L、硝酸钾18.0g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、七水硫酸镁3.0g/L和氯化钙3.0g/L，盛装延长保存期母液的试剂瓶，应贴明显标签纸，写上母液名称、浓度和配制日期，配制好的母液放置冰箱(2～5℃)备用。
4.培养基配制
根据香蕉不定芽繁殖材料组培苗生产的要求，配制延长香蕉组培苗保存期的培养基，其是在香蕉生根培养基的基础上添加一定量的延长保存期母液而制备得到的；配制该培养基按以下程序添加药品或母液：蔗糖——无离子水——铁盐母液——大量元素母液——微量元素母液——维生素母液——甘氨酸母液——肌醇母液——植物生长调节剂母液——延长保存期母液——琼脂，调整pH至5.8，其中每升该培养基中添加了延长保存期母液100ml，即延长香蕉组培苗保存期的培养基是在香蕉生根培养基的基础上，再添加硝酸铵1.50g/L、硝酸钾1.80g/L、磷酸二氢钾0.15g/L、七水硫酸镁0.3g/L和氯化钙0.3g/L，调pH至5.8而得。将混合均匀的培养基溶液分装于透明塑料袋中，每袋分装25-30ml培养基，于1.06kg/cm2(121℃)条件下灭菌20min，冷却凝固待用。
5.接种转移
按规定要求将香蕉不定芽繁殖材料逐一细致观察，剔除污染材料，用体积分数75％乙醇溶液抹干净培养瓶表面，把延长香蕉组培苗保存期的培养基输入工作室备用。于超净工作台上，按正常的操作分切繁殖材料，将分切好的香蕉不定芽插植于延长香蕉组培苗保存期的培养基。
6.培养
将接种好的香蕉不定芽放置于培养温度23-27℃、光照强度1000lx、光照时间16h/d的条件下培养。香蕉不定芽在延长香蕉组培苗保存期的培养基上培养10天后长出不定根成为完整植株。通常香蕉长根成苗后培养时间超1个月后根系变黑、苗开始黄化，而在延长香蕉组培苗保存期的培养基中的香蕉组培苗培养周期达4个月时根系颜色没有变黑，苗叶片浓绿，苗生长旺盛，符合待售的香蕉组培苗商品苗标准。
7.组培苗移栽：将上述的培养周期为4个月的香蕉组培苗用清水清洗干净后即可进行移栽，移栽基质为干净河沙，移栽后用800倍多菌灵淋透，保持适当通风和足够的湿度，移栽的成活率均可达98％以上。
实施例2
实施例2与实施例1基本相同，不同的是：
实施例2中的香蕉生根培养基的配方为：以MS培养基为基本培养基，还含有IBA2.0mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7g/L，pH 6.0。延长保存期母液的配方是：含有硝酸铵16.5g/L、硝酸钾19.0g/L、磷酸二氢钾2.0g/L、七水硫酸镁3.5g/L和氯化钙3.5g/L。配制的每升延长香蕉组培苗保存期的培养基中，其是在香蕉生根培养基的基础上添加了100ml的延长保存期母液。即延长香蕉组培苗保存期的培养基是在香蕉生根培养基的基础上，再添加硝酸铵1.65g/L、硝酸钾1.90g/L、磷酸二氢钾0.20g/L、七水硫酸镁0.35g/L和氯化钙0.35g/L，调pH至6.0而得。该培养基上接种好的香蕉不定芽置于培养温度24-28℃、光照强度3000lx、光照时间10h/d的条件下培养。
将香蕉不定芽接种于本实施例的延长香蕉组培苗保存期的培养基上进行培养，在香蕉长根成苗后培养时间达4个月时根系颜色没有变黑，苗叶片浓绿，苗生长旺盛，符合待售的香蕉组培苗商品苗标准。将其移栽到干净河沙中后，移栽成活率也均可达98％以上。

Claims (5)

1.一种延长香蕉组培苗保存期的培养基，其特征在于，其是在香蕉生根培养基的基础上，再添加硝酸铵1.50-1.65g/L、硝酸钾1.80-1.90g/L、磷酸二氢钾0.15-0.20g/L、七水硫酸镁0.3-0.35g/L和氯化钙0.3-0.35g/L而得到的培养基。
2.根据权利要求1所述的延长香蕉组培苗保存期的培养基，其特征在于，所述的香蕉生根培养基的配方为：以MS培养基为基本培养基，还含有IBA 2.0mg/L、NAA 0.2mg/L、蔗糖15-30g/L和琼脂6-7g/L，pH 5.8-6.0。
3.一种延长香蕉组培苗保存期的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
将待进行生根培养的香蕉不定芽接种于权利要求1所述的延长香蕉组培苗保存期的培养基上，进行培养。
4.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，在接种前先剔除被污染的香蕉不定芽。
5.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，所述的培养条件为：温度23-28℃、光照强度1000-3000lx、光照时间10-16h/d。
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