CN106258072B - 提高黄海棠种子萌发率的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提高黄海棠种子萌发率的方法，包括如下步骤：取成熟的黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子；用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子15‑20min，然后用清水冲洗干净后晾干种子表面的水分；将晾干的种子于0.1‑0.3mM的赤霉素溶液中浸泡20‑24h后取出，用清水冲洗干净，再将种子在2‑5℃下湿藏3‑4周；将湿藏后的种子置于15℃、光暗周期为12小时光照与12小时黑暗交替的培养箱中催芽，培养时间为25‑30天。本发明可以大幅度提高黄海棠的种子萌发率，降低了人工繁育的难度，使得黄海棠的规模化种植得到了可能。
Description
技术领域
本发明涉及植物栽培领域。更具体地说，本发明涉及一种汽提高黄海棠种子萌发率的方法。
背景技术
黄海棠(Hypericum ascyron L.)为藤黄科金丝桃属多年生草本植物，生于山坡林下、林缘、灌丛间、草丛或草甸中、溪旁及河岸湿地等处。黄海棠是我国常用的中药材之一，地上部分供药用，具有平肝、止血、败毒、消肿及抗炎镇痛的作用，主治吐血、子宫出血、外伤出血、疮疖痈肿、风湿、痢疾以及月经不调等症。此外，黄海棠花多而大，色泽艳丽，在观赏方面的应用价值极高。黄海棠有多年栽培历史，但生产上存在出苗缓慢，萌发率低等问题，严重制约其规模化种植及应用。目前，国内对黄海棠的研究极其有限，主要集中于成分分析、药理作用等方面。在种子萌发特性研究上，虽已发现赤霉素处理能够提高黄海棠种子萌发率，但效果不佳，萌发率仅28％，未能有效地打破黄海棠种子休眠，解决人工繁育难的问题。
发明内容
本发明的一个目的是解决黄海棠种子萌发率低的问题，并提供至少后面将说明的优点。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种提高黄海棠种子萌发率的方法，包括如下步骤：
步骤一：取成熟的黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子；
步骤二：用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子15-20min，然后用清水冲洗干净后晾干种子表面的水分；
步骤三：将步骤二中晾干的种子于0.1-0.3mM的赤霉素溶液中浸泡20-24h后取出，用清水冲洗干净，再将种子在2-5℃下湿藏3-4周；
步骤四：将湿藏后的种子置于15℃、光暗周期为12小时光照与12小时黑暗交替的培养箱中催芽，培养时间为25-30天。
优选的是，步骤三中湿藏的方法为：取吸水材料，将吸水材料放于水中吸水使其保持湿润状态，再将种子放于吸水材料上，之后将两者放于培养皿中。
优选的是，将培养皿用塑料膜密封，并在湿藏过程中向培养皿中补充水分以保持吸水材料始终处于湿润状态。
优选的是，所述吸水材料和培养皿在使用之前均在120℃的高温、高压下灭菌20-30min。
优选的是，步骤三中在用赤霉素溶液浸泡种子的过程中将浸泡中的种子放于超声波发生器上处理5-10min，浸泡结束后先用浓度为1-2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液涂在种子表面，再用浓度为1-2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液将纱布打湿，用打湿的纱布包裹种子放于磁场强度为160-180mT的磁场中磁化处理4-8min。
优选的是，步骤三中将种子在2-5℃下湿藏3-4周的过程中还包括如下操作步骤：
1)在种子湿藏第5-7天后，在2-5℃下将种子放于硫酸亚锰和硫酸铜的混合溶液中浸泡12-24h，其中硫酸锰的浓度为0.05-0.1mM，硫酸铜的浓度为0.1-0.2mM，浸泡完后取出放于磁场强度为160-180mT的磁场中磁化处理5-10min，然后再继续放于2-5℃下湿藏；
2)在种子湿藏第10-12天后，在2-5℃下将种子放于黄腐酸钾和钼酸铵的混合溶液中浸泡12-24h，其中黄腐酸钾的质量浓度为0.05-0.1％，钼酸铵的浓度为0.04-0.08mM，且在浸泡的过程中将浸泡中的种子放于磁场强度为160-180mT的磁场中磁化处理5-10min，磁化处理完后继续将种子放于2-5℃下湿藏；
3)在种子湿藏第16-18天后，在2-5℃下将种子放于硫酸锌和细胞分裂素的混合溶液中浸泡12-24h，其中硫酸锌的浓度为0.03-0.06mM，细胞分裂素的质量浓度为0.01-0.03％，浸泡后将种子放于超声波发生器上处理5-10min，超声波处理后将种子放于2-5℃下继续湿藏至湿藏结束。
优选的是，步骤四中每4-6天向培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中的气体的含氧量为20-23％。
本发明至少包括以下有益效果：
(1)本发明利用植物激素赤霉素GA3处理种子与低温湿藏相结合的方法打破黄海棠种子休眠，并在最适种子萌发温度下催芽，能使黄海棠种子萌发率提高到80.0％以上；
(2)该方法操作简单、成本低、易于人工操作，对黄海棠种子育苗、规模化种植具有很高的实际应用价值；
(3)在黄海棠种子低温冷藏过程中，用硫酸锰和硫酸铜溶液浸泡种子，微量元素锰在低温下能促进种子胚根、胚轴等的发育，铜元素是种子中某些氧化还原酶的组成部分，用这些溶液浸种能促进种子萌芽；黄腐酸钾和钼酸铵，黄腐酸钾和钼酸铵不但能为种子萌发提供营养，还能激发种子的生物活性，打破休眠促进萌发；硫酸锌和细胞分裂素，锌元素是RNA聚合酶活动的必须元素，为种子补充锌元素能提高种子中RNA聚合酶的活性，促进萌芽，细胞分裂素能促进种子细胞的分裂和分生组织的细胞生长，促进种子萌芽，提高种子的萌芽率；
(4)种子在萌发过程中新陈代谢作用加快，新陈代谢活动需要的能量主要通过呼吸作用进行，种子在吸水萌发过程中需氧量较大，在培养箱中通入氧气，维持培养箱中的氧气在一定的范围内可以促进种子的新陈代谢作用，提高种子萌发率。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1
收集9-10月成熟黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子。用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子15min进行消毒，再用清水冲洗干净后晾干种子表面的水分。将消毒后的种子浸泡于0.1mM的赤霉素GA3溶液中，24h后将种子取出，用清水冲洗干净后，将种子摆放于垫有两层湿润滤纸的玻璃培养皿上，用塑料封口膜封口，在4℃下低温湿藏3周，湿藏过程中每隔4天向培养皿中加水以使滤纸始终保持湿润状态。所用滤纸和培养皿在使用之前经120℃的高温、高压灭菌20min。湿藏后，将培养皿取出，置于15℃、光暗周期为12小时光照与12小时黑暗交替的培养箱中催芽28天。
实施例2
收集9-10月成熟黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子。用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子20min，再用清水冲洗干净后晾干种子表面的水分。将消毒后的种子浸泡于0.1mM的GA3溶液中，24h后将种子取出，用清水冲洗干净后，将种子摆放于垫有两层湿润滤纸的玻璃培养皿上，用封口膜封口，在2℃下低温湿藏3周，湿藏过程中每隔3天向培养皿中加水以使滤纸始终保持湿润状态。所用滤纸和培养皿在使用之前经120℃的高温、高压灭菌20min。湿藏后，将培养皿取出，置于15℃、光暗周期为12h/12h的培养箱中催芽28天。
实施例3
收集9-10月成熟黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子。用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子18min，再用清水冲洗干净后晾干种子表面水分。将消毒后的种子浸泡于0.2mM的GA3溶液中，24h后将种子取出，用清水冲洗干净后，将种子摆放于垫有两层湿润滤纸的玻璃培养皿上，用封口膜封口，在4℃下低温湿藏4周，湿藏过程中每隔4天向培养皿中加水以使滤纸始终保持湿润状态。所用滤纸和培养皿在使用之前经120℃的高温、高压灭菌30min。湿藏后，将培养皿取出，置于15℃、光暗周期为12h/12h的培养箱中催芽28天。
实施例4
收集9-10月成熟黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子。用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子20min，用清水冲洗干净后晾干种子表面的水分。将消毒后的种子浸泡于0.3mM的GA3溶液中，20h后将种子取出，用清水冲洗干净后，将种子摆放于垫有两层湿润滤纸的玻璃培养皿上，用封口膜封口，在4℃下低温湿藏4周，湿藏过程中每隔5天向培养皿中加水以使滤纸始终保持湿润状态。所用滤纸和培养皿在使用之前经120℃的高温、高压灭菌20min。湿藏后，将培养皿取出，置于15℃、光暗周期为12h/12h的培养箱中催芽28天。
实施例5：
收集9-10月成熟黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子。用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子17min，再用清水冲洗干净后晾干种子表面的水分。将消毒后的种子浸泡于0.2mM的GA3溶液中，在浸泡种子的过程中将浸泡中的种子放于超声波发生器上处理5min，在GA3溶液中浸泡24h后取出用清水冲洗干净、擦干后，浸泡结束后先用浓度为1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液涂在种子表面，再用浓度为1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液将纱布打湿，用打湿的纱布包裹种子放于磁场强度为160mT的磁场中磁化处理8min。再将种子摆放于垫有两层湿润滤纸的玻璃培养皿上，用封口膜封口且每隔5天向培养皿中加水以使滤纸始终保持湿润状态，所用滤纸和培养皿在使用之前经120℃的高温、高压灭菌30min。将种子在5℃下低温湿藏，在种子湿藏第5天后，在5℃下将种子放于硫酸亚锰和硫酸铜的混合溶液中浸泡12h，其中硫酸锰的浓度为0.05mM，硫酸铜的浓度为0.2mM，浸泡完后取出放于磁场强度为160mT的磁场中磁化处理10min，然后再继续放于5℃下湿藏；在种子湿藏第10天后，在5℃下将种子放于黄腐酸钾和钼酸铵的混合溶液中浸泡20h，其中黄腐酸钾的质量浓度为0.1％，钼酸铵的浓度为0.04mM，且在浸泡的过程中将浸泡中的种子放于磁场强度为180mT的磁场中磁化处理5min，磁化处理完后继续将种子放于5℃下湿藏；在种子湿藏第16天后，在5℃下将种子放于硫酸锌和细胞分裂素的混合溶液中浸泡24h，其中硫酸锌的浓度为0.03mM，细胞分裂素的质量浓度为0.03％，浸泡后将种子放于超声波发生器上处理10min，超声波处理后将种子放于5℃下继续湿藏至第28天结束。湿藏后，将培养皿取出，置于15℃、光暗周期为12h/12h的培养箱中催芽30天，在催芽过程中每6天向培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中的气体的含氧量为20％-23％。
实施例6：
收集9-10月成熟黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子。用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子15min，再用清水冲洗干净后晾干种子表面水分。将消毒后的种子浸泡于0.3mM的GA3溶液中，在浸泡种子的过程中将浸泡中的种子放于超声波发生器上处理10min，在GA3溶液中浸泡20h后取出用清水冲洗干净后，浸泡结束后先用浓度为2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液涂在种子表面，再用浓度为1-2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液将纱布打湿，用打湿的纱布包裹种子放于磁场强度为180mT的磁场中磁化处理4min。再将种子摆放于垫有两层湿润滤纸的玻璃培养皿上，用封口膜封口且每隔4天向培养皿中加水以使滤纸始终保持湿润状态，所用滤纸和培养皿在使用之前经120℃的高温、高压灭菌20min。将种子在2℃下低温湿藏，在种子湿藏第7天后，在2℃下将种子放于硫酸亚锰和硫酸铜的混合溶液中浸泡24h，其中硫酸锰的浓度为0.1mM，硫酸铜的浓度为0.1mM，浸泡完后取出放于磁场强度为180mT的磁场中磁化处理5min，然后再继续放于2℃下湿藏；在种子湿藏第12天后，在2℃下将种子放于黄腐酸钾和钼酸铵的混合溶液中浸泡12h，其中黄腐酸钾的质量浓度为0.05％，钼酸铵的浓度为0.08mM，且在浸泡的过程中将浸泡中的种子放于磁场强度为160mT的磁场中磁化处理10min，磁化处理完后继续将种子放于2℃下湿藏；在种子湿藏第18天后，在2℃下将种子放于硫酸锌和细胞分裂素的混合溶液中浸泡12h，其中硫酸锌的浓度为0.06mM，细胞分裂素的质量浓度为0.01％，浸泡后将种子放于超声波发生器上处理5min，超声波处理后将种子放于2℃下继续湿藏至第24天结束。湿藏后，将培养皿取出，置于15℃、光暗周期为12h/12h的培养箱中催芽25天，在催芽过程中每4天向培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中的气体的含氧量为20％-23％。
实施例7：
收集9-10月成熟黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子。用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子20min，再用清水冲洗干净后晾干种子表面水分。将消毒后的种子浸泡于0.1mM的GA3溶液中，在浸泡种子的过程中将浸泡中的种子放于超声波发生器上处理8min，在GA3溶液中浸泡24h后取出用清水冲洗干净、擦干后，浸泡结束后先用浓度为1.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液涂在种子表面，再用浓度为1.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液将纱布打湿，用打湿的纱布包裹种子放于磁场强度为170mT的磁场中磁化处理6min。再将种子摆放于垫有两层湿润滤纸的玻璃培养皿上，用塑料封口膜封口且每隔4天向培养皿中加水以使滤纸始终保持湿润状态，所用滤纸和培养皿在使用之前经120℃的高温、高压灭菌25min。将种子在2℃下低温湿藏，在种子低温湿藏第6天后，在4℃下将种子放于硫酸亚锰和硫酸铜的混合溶液中浸泡20h，其中硫酸锰的浓度为0.08mM，硫酸铜的浓度为0.13mM，浸泡完后取出放于磁场强度为170mT的磁场中磁化处理7min，然后再继续放于2℃下湿藏；在种子湿藏第10天后，在2℃下将种子放于黄腐酸钾和钼酸铵的混合溶液中浸泡24h，其中黄腐酸钾的质量浓度为0.07％，钼酸铵的浓度为0.05mM，且在浸泡的过程中将浸泡中的种子放于磁场强度为170mT的磁场中磁化处理6min，磁化处理完后继续将种子放于2℃下湿藏；在种子湿藏第17天后，在2℃下将种子放于硫酸锌和细胞分裂素的混合溶液中浸泡18h，其中硫酸锌的浓度为0.05mM，细胞分裂素的质量浓度为0.02％，浸泡后将种子放于超声波发生器上处理6min，超声波处理后将种子放于2℃下继续湿藏至第21天结束。湿藏后，将培养皿取出，置于15℃、光暗周期为12h/12h的培养箱中催芽28天，在催芽过程中每4天向培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中的气体的含氧量为20％-23％。
为了说明本发明的有益效果，本发明的申请人选取八组数量相同、品质相同的种子，每组三份，其中七组分别采用实施例1-实施例7中的方法让种子萌发，第八组的种子不未做处理按常规的催芽方法催芽28天，统计每组种子萌发率的平均值，得出如表1中的数据：
表1
由上表可知，用本发明的方法可以大幅度提高黄海棠的种子萌发率，降低了人工繁育的难度，使得黄海棠的规模化种植得到了可能，适合大范围推广。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (6)
1.一种提高黄海棠种子萌发率的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一：取成熟的黄海棠果实，自然阴干后去掉果壳，用风选法去杂，选出净种子；
步骤二：用质量浓度为1％的次氯酸钠溶液浸泡种子15-20min，然后用清水冲洗干净后晾干种子表面的水分；
步骤三：将步骤二中晾干的种子于0.1-0.3mM的赤霉素溶液中浸泡20-24h后取出，用清水冲洗干净，再将种子在2-5℃下湿藏3-4周；
其中，将种子在2-5℃下湿藏3-4周的过程中还包括如下操作步骤：
1)在种子湿藏第5-7天后，在2-5℃下将种子放于硫酸锰和硫酸铜的混合溶液中浸泡12-24h，其中硫酸锰的浓度为0.05-0.1mM，硫酸铜的浓度为0.1-0.2mM，浸泡完后取出放于磁场强度为160-180mT的磁场中磁化处理5-10min，然后再继续放于2-5℃下湿藏；
2)在种子湿藏第10-12天后，在2-5℃下将种子放于黄腐酸钾和钼酸铵的混合溶液中浸泡12-24h，其中黄腐酸钾的质量浓度为0.05-0.1％，钼酸铵的浓度为0.04-0.08mM，且在浸泡的过程中将浸泡中的种子放于磁场强度为160-180mT的磁场中磁化处理5-10min，磁化处理完后继续将种子放于2-5℃下湿藏；
3)在种子湿藏第16-18天后，在2-5℃下将种子放于硫酸锌和细胞分裂素的混合溶液中浸泡12-24h，其中硫酸锌的浓度为0.03-0.06mM，细胞分裂素的质量浓度为0.01-0.03％，浸泡后将种子放于超声波发生器上处理5-10min，超声波处理后将种子放于2-5℃下继续湿藏至湿藏结束；
步骤四：将湿藏后的种子置于15℃、光暗周期为12小时光照与12小时黑暗交替的培养箱中催芽，培养时间为25-30天。
2.如权利要求1所述的提高黄海棠种子萌发率的方法，其特征在于，步骤三中湿藏的方法为：取吸水材料，将吸水材料放于水中吸水使其保持湿润状态，再将种子放于吸水材料上，之后将两者放于培养皿中。
3.如权利要求2所述的提高黄海棠种子萌发率的方法，其特征在于，将培养皿用塑料膜密封，并在湿藏过程中向培养皿中补充水分以保持吸水材料始终处于湿润状态。
4.如权利要求3所述的提高黄海棠种子萌发率的方法，其特征在于，所述吸水材料和培养皿在使用之前均在120℃的高温、高压下灭菌20-30min。
5.如权利要求1所述的提高黄海棠种子萌发率的方法，其特征在于，步骤三中在用赤霉素溶液浸泡种子的过程中将浸泡中的种子放于超声波发生器上处理5-10min，浸泡结束后先用浓度为1-2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液涂在种子表面，再用浓度为1-2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤溶液将纱布打湿，用打湿的纱布包裹种子放于磁场强度为160-180mT的磁场中磁化处理4-8min。
6.如权利要求1所述的提高黄海棠种子萌发率的方法，其特征在于，步骤四中每4-6天向培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中的气体的含氧量为20-23％。
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