CN106248924A - 一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法 - Google Patents

一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106248924A
CN106248924A CN201610627388.7A CN201610627388A CN106248924A CN 106248924 A CN106248924 A CN 106248924A CN 201610627388 A CN201610627388 A CN 201610627388A CN 106248924 A CN106248924 A CN 106248924A
Authority
CN
China
Prior art keywords
graphene oxide
horseradish peroxidase
dna
solution
photoactivation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610627388.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106248924B (zh
Inventor
王光丽
曹根霞
董玉明
李小琴
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangnan University
Original Assignee
Jiangnan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangnan University filed Critical Jiangnan University
Priority to CN201610627388.7A priority Critical patent/CN106248924B/zh
Publication of CN106248924A publication Critical patent/CN106248924A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106248924B publication Critical patent/CN106248924B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531—Production of immunochemical test materials
    • G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
    • G01N33/535—Production of labelled immunochemicals with enzyme label or co-enzymes, co-factors, enzyme inhibitors or enzyme substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y30/00—Nanotechnology for materials or surface science, e.g. nanocomposites
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y40/00—Manufacture or treatment of nanostructures

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Composite Materials (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供了一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶(HRP)的免疫分析检测方法。氧化石墨烯在光照下可以产生活性中间体光生空穴和超氧阴离子自由基，使HRP在没有H2O2的存在下能够催化氧化色原底物。以甲胎蛋白(AFP)为模型物，通过DNA杂交链式反应以放大信号，通过氧化石墨烯的光活化HRP作用实现底物的催化氧化，以实现免疫检测。本发明将纳米材料和天然酶的优势相结合，使得AFP的检测限达到0.0001pg/mL。本发明不仅提供了一种新型的通过光激励的纳米材料调控HRP活性的方法，同时为超灵敏的酶联免疫分析法提供了一种新途径。

Description

一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法
技术领域：
本发明涉及纳米材料科技领域和生物分析检测领域，尤其涉及基于纳米材料的光诱导酶催化及其在免疫分析检测中的应用。
背景技术：
酶联免疫吸附测定法(ELISA)是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型免疫测定技术，为分析化学领域的前沿课题。其核心技术是抗原或者抗体与酶的复合物相结合，然后通过酶催化反应产生信号来检测抗原或者抗体[Kawatsu K.；Hamano Y.；SugiyamaA.et al.J.Food Protect.2002,65,1304-1308；Micheli L.；Di Stefano S.；MosconeD.et al.Anal.Bioanal.Chem.2002,373,678-684]。其具有快速、特异性强和操作简便等优点,在化学、生命科学各领域得到广泛应用，并且已迈出医药、临床领域，步入农业、渔业、畜牧业和食品加工业。
传统的酶联免疫吸附测定法是先用酶标记抗体，再进行抗原抗体间的免疫反应，最后结合标记酶的抗体。标记在抗体上的酶通过其催化反应而产生有颜色的物质(显色)，根据颜色的深浅来判断待检测的抗原和抗体的含量。此常规方法虽然简便，但是结果的灵敏度不是令人十分满意[Duffy S.L.；Murphy J.T.Biotechniques 2001,31,495-496,498,500-501；Roda A.；Simoni P.；Mirasoli M.et al.Anal.Bioanal.Chem.2002,372,751-758]。因此，寻求更高灵敏度的酶联免疫分析检测方法仍然是科学研究的目标。
随着纳米科技的发展，纳米材料所具备的优异的性能被逐渐发现，并应用于分析检测领域，取得了可喜的成就。氧化石墨烯是一种新型的二维单原子层纳米薄片，一般是由石墨粉经化学氧化及剥离后获得的产物。由于它具有独特的电子性能，热力学特性，优异的机械性能以及光学特性，其在化学，材料，生物医学等领域引起了广泛的关注[Li X.；MaK.；Zhu S.et al.Anal.Chem.2013,86,298-303]。本发明中，我们发现了氧化石墨烯的一种独特的性能，即其能够在可见光照射下诱导出辣根过氧化酶(HRP)的催化活性。通常，辣根过氧化物酶(作为催化剂)需要借助于过氧化氢作为触发试剂来实现对底物的催化氧化反应(反应方程式为:)，我们通过改进后的Hummers法合成得到的氧化石墨烯能够在光照下产生超氧阴离子以及光生空穴等活性物种，这些活性物种能够活化HRP，使其在没有过氧化氢的存在下就能氧化其特征的色原底物。与通常的借助于过氧化氢/浓硫酸来引发/终止HRP的催化活性不同，我们成功的利用光照射氧化石墨烯来控制活性物种的产生，从而提供了一种更为方便、绿色(不需要额外的加入过氧化氢和浓硫酸这些破坏性的化学试剂)的调控HRP的催化活性的方法。考虑到HRP是免疫分析中广泛使用的标记物，在此基础上，我们将此种调控酶活性的方法与DNA杂交链式放大技术相结合，实现了甲胎蛋白(作为免疫分析的模型物质)的高灵敏测定。该发明不仅提供了一种新型的通过光激励的纳米材料调控HRP酶活性的方法，同时为超灵敏的酶联免疫分析法提供了一种新途径，具有广阔的应用前景。
发明内容：
本发明的目的是提供一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶(HRP)的免疫分析检测方法，此方法融合了纳米材料与天然酶的优点，以甲胎蛋白为模型物质，实现了超灵敏的免疫测定。
本发明的目的可通过如下技术措施来实现：
a、氧化石墨烯纳米材料的制备：0℃冰浴条件下，将0.5g石墨原料与0.5g NaNO3置于16.5mL的98％H2SO4中，室温下持续搅拌24h；随后在冰浴中保持10分钟，将3g KMnO4缓慢加入到混合物中，持续搅拌1h；在一定温度下继续搅拌一定时间后加入40mL去离子水；最后加入1400mL去离子水和30％H2O2来终止反应；产物经过滤，经5％HCl多次洗涤并置于50℃烘箱烘干；
b、在Au纳米粒子上固定甲胎蛋白二抗抗体和碱基序列为5'-SH-(CH2)6-AAAAAAGAAGGAGGGGCGACT-3'的捕获DNA1，形成Au NPs/Ab2/DNA1复合物，作为信号标签诱导检测信号的产生；Au NPs/Ab2/DNA1复合物的制备方法如下：100mL0.01％HAuCl4溶液在剧烈搅拌下煮沸，然后快速加入2.5mL 1％的柠檬酸三钠溶液；当溶液的颜色由黄色转变为酒红色，继续搅拌冷却至室温得到Au纳米粒子；将40μL浓度为0.1mg/mL的甲胎蛋白二抗抗体与1.0mL Au纳米粒子在室温下混合搅拌2h，然后加入捕获DNA1，静置过夜后用牛血清白蛋白溶液将非活性位点进行封闭，12,000rpm下离心洗涤三次，并重新分散于200μL 1％牛血清白蛋白溶液中；
c、甲胎蛋白的测定：将20μL 0.1mg/mL的甲胎蛋白一抗抗体固定于96孔板中，经过洗涤以及牛血清白蛋白溶液封闭后加入抗原甲胎蛋白使其充分发生免疫反应，随后96孔板中依次加入25μL的Au NP/Ab2/DNA1复合物，30μL浓度为5μM的生物素标记的碱基序列为5'-biotin-(CH2)6-GGGGCGACTTGAAACAGTCGCCCCTCCTTC-3'的DNA2，浓度为5μM的碱基序列为5'-biotin-(CH2)6-GTTTCAAGTCGCCCCGAAGGAGGGGCGACT-3'的生物素标记的DNA3，亲和素标记的辣根过氧化物酶，孵育洗涤后加入10μL的50mg/L的氧化石墨烯溶液，100μL pH＝3.0的醋酸缓冲溶液和20μL的5mmol/L辣根过氧化物酶的特征底物，40℃条件下置于300W氙灯下用λ≥400nm的可见光照射15min微孔板，用酶标仪测定氧化后的底物的吸收光谱。
本发明的目的还可通过如下技术措施来实现：
所述的制备氧化石墨烯时选用的原料，选自石墨粉、膨胀石墨；所述的制备氧化石墨烯时的温度为30-50℃，搅拌时间为20-60分钟；所述的辣根过氧化物酶的特征底物有3,3’,5,5’-四甲基联苯胺、2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。
附图说明：
图1是发明制备的氧化石墨烯纳米材料的(A)红外光谱，(B)拉曼光谱和(C)XRD图谱。其中，插图是氧化石墨烯的透射电镜图。
图2是不同物质的混合物在光照条件下的吸收光谱图：(a)辣根过氧化物酶与2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐的混合物；(b)氧化石墨烯与2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐的混合物；(c)辣根过氧化物酶，氧化石墨烯与2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐的混合物。辣根过氧化物酶的浓度为80mg/L,氧化石墨烯的浓度为5mg/L,2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐的浓度为5×10-4mol/L。
图3是不同的活性中间体清除剂对氧化石墨烯自身光氧化底物以及氧化石墨烯活化辣根过氧化物酶催化氧化底物的影响，底物为2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。
图4分别以氧化石墨烯自身光氧化以及氧化石墨烯活化辣根过氧化物酶催化氧化0.5mM 2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐的光开关性能。
图5是以氧化石墨烯活化辣根过氧化物酶作为信号产生来源，以2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐为底物进行免疫检测甲胎蛋白的线性关系图(A)以及选择性(B)。
实施实例1：
a、氧化石墨烯纳米材料的制备：0℃冰浴条件下，将0.5g石墨粉与0.5g NaNO3置于16.5mL的98％H2SO4中，室温下持续搅拌24h；随后在冰浴中保持10分钟，将3g KMnO4缓慢加入到混合物中，持续搅拌1h；将温度保持在35℃继续搅拌50min后加入40mL去离子水；最后加入1400mL去离子水和30％H2O2来停止反应；产物经过滤，经5％HCl多次洗涤并置于50℃烘箱烘干；
b、在Au纳米粒子上固定甲胎蛋白二抗抗体和碱基序列为5'-SH-(CH2)6-AAAAAAGAAGGAGGGGCGACT-3'的捕获DNA1，形成Au NPs/Ab2/DNA1复合物，作为信号标签诱导检测信号的产生；Au NPs/Ab2/DNA1复合物的制备方法如下：100mL 0.01％HAuCl4溶液在剧烈搅拌下煮沸，然后快速加入2.5mL 1％的柠檬酸三钠溶液；当溶液的颜色由黄色转变为酒红色，继续搅拌冷却至室温得到Au纳米粒子；将40μL浓度为0.1mg/mL的甲胎蛋白二抗抗体与1.0mL Au纳米粒子在室温下混合搅拌2h，然后加入捕获DNA1，静置过夜后用牛血清白蛋白溶液将非活性位点进行封闭，12000rpm下离心洗涤三次，并重新分散于200μL 1％牛血清白蛋白溶液中；
c、甲胎蛋白的测定：20μL 0.1mg/mL的甲胎蛋白一抗抗体固定于96孔板中，经过洗涤，BSA封闭后加入抗原甲胎蛋白使其充分发生免疫反应，随后96孔板中依次加入25μL的AuNP/Ab2/DNA1复合物，30μL浓度为5μM的生物素标记的碱基序列为5'-biotin-(CH2)6-GGGGCGACTTGAAACAGTCGCCCCTCCTTC-3'的DNA2，浓度为5μM的碱基序列为5'-biotin-(CH2)6-GTTTCAAGTCGCCCCGAAGGAGGGGCGACT-3'的生物素标记的DNA3，亲和素标记的辣根过氧化物酶，孵育洗涤后加入10μL的50mg/L的氧化石墨烯溶液，100μL pH＝3.0的醋酸缓冲溶液和20μL的5mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺，40℃条件下置于300W氙灯下用λ≥400nm的可见光照射15min，用酶标仪测定3,3’,5,5’-四甲基联苯胺氧化后的吸收光谱。
实施实例2：
a、氧化石墨烯纳米材料的制备：0℃冰浴条件下，将0.5g膨胀石墨与0.5g NaNO3置于16.5mL的98％H2SO4中，室温下持续搅拌24h；随后在冰浴中保持10分钟，将3g KMnO4缓慢加入到混合物中，持续搅拌1h；将温度保持在40℃继续搅拌30min后加入40mL去离子水；最后加入1400mL去离子水和30％H2O2来停止反应；产物经过滤，经5％HCl多次洗涤并置于50℃烘箱烘干；
b、在Au纳米粒子上固定甲胎蛋白二抗和碱基序列为5'-SH-(CH2)6-AAAAAAGAAGGAGGGGCGACT-3'的捕获DNA1，形成Au NPs/Ab2/DNA1复合物，作为信号标签诱导检测信号的产生；Au NPs/Ab2/DNA1复合物的制备方法如下：100mL 0.01％HAuCl4溶液在剧烈搅拌下煮沸，然后快速加入2.5mL 1％的柠檬酸三钠溶液；当溶液的颜色由黄色转变为酒红色，继续搅拌冷却至室温得到Au纳米粒子；将40μL浓度为0.1mg/mL的甲胎蛋白二抗与1.0mL Au纳米粒子在室温下混合搅拌2h，然后加入捕获DNA1，静置过夜后用牛血清白蛋白溶液将非活性位点进行封闭，12000rpm下离心洗涤三次，并重新分散于200μL 1％BSA溶液中；
c、甲胎蛋白的测定：20μL 0.1mg/mL的甲胎蛋白一抗固定于96孔板中，经过洗涤，BSA封闭后加入抗原甲胎蛋白使其充分发生免疫反应，随后96孔板中依次加入25μL的AuNP/Ab2/DNA1复合物，30μL浓度为5μM的生物素标记的碱基序列为5'-biotin-(CH2)6-GGGGCGACTTGAAACAGTCGCCCCTCCTTC-3'的DNA2，浓度为5μM的碱基序列为5'-biotin-(CH2)6-GTTTCAAGTCGCCCCGAAGGAGGGGCGACT-3'的生物素标记的DNA3，亲和素标记的辣根过氧化物酶，孵育洗涤后加入10μL的50mg/L的氧化石墨烯溶液，100μL pH＝3.0的醋酸缓冲溶液和20μL的5mmol/L的2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐，40℃条件下置于300W氙灯下用λ≥400nm的可见光照射15min，用酶标仪测定2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐氧化后的吸收光谱。

Claims (4)

1.一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法，其特征在于：
a、氧化石墨烯纳米材料的制备：0℃冰浴条件下，将0.5g石墨原料与0.5g NaNO3置于16.5mL的98％H2SO4中，室温下持续搅拌24h；随后在冰浴中保持10分钟，将3g KMnO4缓慢加入到混合物中，持续搅拌1h；在一定温度下继续搅拌一定时间后加入40mL去离子水；最后加入1400mL去离子水和30％H2O2来终止反应；产物经过滤，经5％HCl多次洗涤并置于50℃烘箱烘干；
b、在Au纳米粒子上固定甲胎蛋白二抗抗体和碱基序列为5'-SH-(CH2)6-AAAAAAGAAGGAGGGGCGACT-3'的捕获DNA1，形成Au NPs/Ab2/DNA1复合物，作为信号标签诱导检测信号的产生；Au NPs/Ab2/DNA1复合物的制备方法如下：100mL0.01％HAuCl4溶液在剧烈搅拌下煮沸，然后快速加入2.5mL 1％的柠檬酸三钠溶液；当溶液的颜色由黄色转变为酒红色，继续搅拌冷却至室温得到Au纳米粒子；将40μL浓度为0.1mg/mL的甲胎蛋白二抗抗体与1.0mL Au纳米粒子在室温下混合搅拌2h，然后加入捕获DNA1，静置过夜后用牛血清白蛋白溶液将非活性位点进行封闭，12000rpm下离心洗涤三次，并重新分散于200μL1％牛血清白蛋白溶液中；
c、甲胎蛋白的测定：将20μL 0.1mg/mL的甲胎蛋白一抗抗体固定于96孔板中，经过洗涤以及牛血清白蛋白溶液封闭后加入抗原甲胎蛋白使其充分发生免疫反应，随后96孔板中依次加入25μL的Au NP/Ab2/DNA1复合物，30μL浓度为5μM的生物素标记的碱基序列为5'-biotin-(CH2)6-GGGGCGACTTGAAACAGTCGCCCCTCCTTC-3'的DNA2，浓度为5μM的碱基序列为5'-biotin-(CH2)6-GTTTCAAGTCGCCCCGAAGGAGGGGCGACT-3'的生物素标记的DNA3，亲和素标记的辣根过氧化物酶，孵育洗涤后加入10μL的50mg/L的氧化石墨烯溶液，100μL pH＝3.0的醋酸缓冲溶液和20μL的5mmol/L辣根过氧化物酶的特征底物，40℃条件下置于300W氙灯下用λ≥400nm的可见光照射15min微孔板，用酶标仪测定氧化后的底物的吸收光谱。
2.根据权利要求1所述的一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析检测方法，其特征在于所示制备氧化石墨烯时选用的原料，选自石墨粉、膨胀石墨。
3.根据权利要求1所述的一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析检测方法，其特征在于制备氧化石墨烯时的温度为30-50℃，搅拌时间为20-60分钟。
4.根据权利要求1所述的一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析检测方法，其特征在于所述的辣根过氧化物酶的特征底物有3,3’,5,5’-四甲基联苯胺、2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。
CN201610627388.7A 2016-08-02 2016-08-02 一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法 Active CN106248924B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610627388.7A CN106248924B (zh) 2016-08-02 2016-08-02 一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610627388.7A CN106248924B (zh) 2016-08-02 2016-08-02 一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106248924A true CN106248924A (zh) 2016-12-21
CN106248924B CN106248924B (zh) 2018-07-06

Family

ID=57607110

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610627388.7A Active CN106248924B (zh) 2016-08-02 2016-08-02 一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106248924B (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107907683A (zh) * 2017-12-17 2018-04-13 江南大学 一种基于光控酶级联反应的酸性磷酸酶活性检测方法
CN108107094A (zh) * 2017-12-12 2018-06-01 江南大学 一种高通量的光电化学酪氨酸酶传感器
CN109030829A (zh) * 2018-06-29 2018-12-18 南京航思生物科技有限公司 一种均相化学发光法检测犬il-6的定量试剂盒及其使用方法
CN109900911A (zh) * 2019-03-11 2019-06-18 西安交通大学 一种运用核壳结构纳米星检测肝癌肿瘤标志物afp的方法
CN110940809A (zh) * 2019-12-09 2020-03-31 福州大学 一种基于激光诱导荧光结合纸芯片检测血液中甲胎蛋白的技术

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020183470A1 (en) * 2000-11-27 2002-12-05 Sukant Tripathy Polymerization of aromatic monomers using derivatives of hematin
CN1428606A (zh) * 2001-12-24 2003-07-09 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 一种新型抗原检测方法及利用该方法制成的检测装置
CN101706504A (zh) * 2009-11-27 2010-05-12 东南大学 金纳米粒子模拟酶应用于生物检测的方法
CN103063715A (zh) * 2012-11-03 2013-04-24 福建医科大学 一种基于石墨烯金复合材料电化学DNA生物传感器检测survivin基因的方法
CN103713029A (zh) * 2013-12-19 2014-04-09 江苏大学 用于农药西维因检测的电化学发光传感器及其制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020183470A1 (en) * 2000-11-27 2002-12-05 Sukant Tripathy Polymerization of aromatic monomers using derivatives of hematin
CN1428606A (zh) * 2001-12-24 2003-07-09 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 一种新型抗原检测方法及利用该方法制成的检测装置
CN101706504A (zh) * 2009-11-27 2010-05-12 东南大学 金纳米粒子模拟酶应用于生物检测的方法
CN103063715A (zh) * 2012-11-03 2013-04-24 福建医科大学 一种基于石墨烯金复合材料电化学DNA生物传感器检测survivin基因的方法
CN103713029A (zh) * 2013-12-19 2014-04-09 江苏大学 用于农药西维因检测的电化学发光传感器及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
罗成 等: "纳米材料模拟酶的应用研究进展", 《中国科学：化学》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108107094A (zh) * 2017-12-12 2018-06-01 江南大学 一种高通量的光电化学酪氨酸酶传感器
CN108107094B (zh) * 2017-12-12 2019-09-03 江南大学 一种高通量的光电化学酪氨酸酶传感器
CN107907683A (zh) * 2017-12-17 2018-04-13 江南大学 一种基于光控酶级联反应的酸性磷酸酶活性检测方法
CN107907683B (zh) * 2017-12-17 2019-09-13 江南大学 一种基于光控酶级联反应的酸性磷酸酶活性检测方法
CN109030829A (zh) * 2018-06-29 2018-12-18 南京航思生物科技有限公司 一种均相化学发光法检测犬il-6的定量试剂盒及其使用方法
CN109900911A (zh) * 2019-03-11 2019-06-18 西安交通大学 一种运用核壳结构纳米星检测肝癌肿瘤标志物afp的方法
CN110940809A (zh) * 2019-12-09 2020-03-31 福州大学 一种基于激光诱导荧光结合纸芯片检测血液中甲胎蛋白的技术

Also Published As

Publication number Publication date
CN106248924B (zh) 2018-07-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106248924A (zh) 一种基于氧化石墨烯光活化辣根过氧化物酶的免疫分析方法
Yang et al. Silver nanoparticles deposited on graphene oxide for ultrasensitive surface-enhanced Raman scattering immunoassay of cancer biomarker
Yi et al. The research of aptamer biosensor technologies for detection of microorganism
Ma et al. Cubic Cu2O nanoframes with a unique edge-truncated structure and a good electrocatalytic activity for immunosensor application
CN101037676A (zh) 磁性纳米材料的新功能及新用途
Song et al. Using silver nanocluster/graphene nanocomposite to enhance photoelectrochemical activity of CdS: Mn/TiO2 for highly sensitive signal-on immunoassay
CN106066324B (zh) 一种电致化学发光生物传感器标记物的制备方法
Wu et al. Fluorescence ELISA based on glucose oxidase-mediated fluorescence quenching of quantum dots for highly sensitive detection of Hepatitis B
Zuo et al. Rapid detection of severe fever with thrombocytopenia syndrome virus via colloidal gold immunochromatography assay
Carmona et al. Study of ferritin self-assembly and heteropolymer formation by the use of Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) technology
Xu et al. Micro/nano technology for next‐generation diagnostics
Parween et al. Image-based ELISA on an activated polypropylene microtest plate—A spectrophotometer-free low cost assay technique
Hou et al. based immunosensor with NH2-MIL-53 (Fe) as stable and multifunctional signal label for dual-mode detection of prostate specific antigen
Alharthi et al. Evolution in biosensors for cancers biomarkers detection: a review
Zhang et al. Artificial clickase-triggered fluorescence “turn on” based on a click bio-conjugation strategy for the immunoassay of food allergenic protein
Zhang et al. Biomineralization-inspired artificial clickase for portable click SERS immunoassay of Salmonella enterica serovar Paratyphi B in foods
JP2015508500A5 (zh)
US9588123B2 (en) Compositions and methods for in vitro diagnostic tests including zwitterionic solubilization reagent
Li et al. Low temperature synthesis of carbon dots in microfluidic chip and their application for sensing cefquinome residues in milk
Lv et al. Recent advances in quantum dot-based fluorescence-linked immunosorbent assays
Lai et al. All-in-one preparation strategy integrated in a miniaturized device for fast analyses of biomarkers in biofluids by surface enhanced Raman scattering
CN110520733B (zh) 用于测定活体样品中的测定对象物质的试剂盒及方法
Su et al. Novel scandium-MOF nanocrystals as peroxidase-mimicking nanozymes for highly sensitive colorimetric detection of ascorbic acid in human serum
Mao et al. pH-Based immunoassay: explosive generation of hydrogen ions through an immuno-triggered nucleic acid exponential amplification reaction
Fu et al. Signal amplification surface-enhanced Raman scattering immunosorbent assay of human chorionic gonadotrophin based on repeated enzyme biocatalytic precipitation

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant