CN106232613A - 选择性糖皮质激素受体配体 - Google Patents

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Abstract

本文中所述的是某些类固醇衍生物化合物，例如式(I)的化合物:其中，X1、X2、X3、L和Ar如本文所定义，以及包括该类化合物的药物组合物，该类化合物和组合物对于特定靶向糖皮质激素作用的用途，以及该类化合物和组合物在治疗急性和慢性炎性病症，尤其是类风湿性关节炎、血液学及其它恶性肿瘤、及用于在预防或治疗移植排斥中引起免疫抑制中的用途，以及制备该类化合物的方法。

Description

选择性糖皮质激素受体配体
技术领域
本发明通常涉及治疗性化合物领域，更具体地涉及某些类固醇衍生物。本发明还涉及包含这类化合物的药物组合物，涉及将这类化合物和组合物用于特异性靶向糖皮质激素作用，并涉及将这类化合物和组合物用于治疗急性和慢性炎性疾病，特别是类风湿性关节炎、血液学和其它恶性肿瘤、和用于在预防或治疗移植排斥中引起免疫抑制，以及制备该类化合物的方法。
背景技术
糖皮质激素(GC)是高度有效的抗炎剂，但也对碳水化合物代谢发挥重要作用，其会导致包括糖尿病和肥胖的脱靶效应，并且糖皮质激素可分解代谢骨骼，导致骨质疏松。因此，对于识别糖皮质激素作用的广效性如何可被限制，以保留有利的抗炎作用，而减少代谢、脱靶效应有着相当大的兴趣。糖皮质激素作用通过核受体超家族中的一员-糖皮质激素受体(GR)起作用。GR是配体激活的转录因子，迅速地转运到活化细胞核以结合到靶基因。
已经提出了一些作用机制以解释靶基因表达的GR调节。这些机制包括在拴留排列(tethering arrangement)中将同型二聚体直接结合到DNA元件，并结合到其它转录因子。结合到被称为糖皮质激素应答元件(GRE)的同型二聚体被充分表征以解释GR的代谢作用，反之，结合到相对的NFkB转录因子的作用解释了大多数抗炎作用。
糖皮质激素受体结构
糖皮质激素(GC)通过核激素受体超家族的中的一员-糖皮质激素受体(GR，或NR3C1)发挥作用。GR包括三个主要的功能域，N-末端转录激活域(NTD)、中央DNA结合域(DBD)和C-末端配体结合域(LBD)。DBD和LBD通过铰链区相连。
LBD采用复杂的球状三级结构，包括11个α螺旋和4个短的β折叠，作为配体的中央口袋。LBD禁止配体通过，并同时募集分子伴侣和共激活因子。具有朝向C-末端的转录激活功能-2(AF2)残基。AF2由526-556个残基构成，并具有显著的配体依赖性功能，用于募集具有模体LXXLL的共激活因子复合物。
糖皮质激素受体功能
在没有配体的情况下，GR主要存在于细胞质中作为多亚基复合物的一部分，包括Hsp90、Hsp70、Hsp40、免疫亲和素、CyP40和P23。响应于糖皮质激素，GR复合物迅速经历构象变化并随后从热休克蛋白中分离。随后，结合GR的配体通过动力蛋白马达蛋白的驱动转运至细胞核内。
活化的GR结合到宿主细胞基因组中的共识元件(consensus element)以激活或抑制基因转录。这些位点为细胞型特异性，部分地通过染色质结构被确定。已推测出多种机制以解释抗炎GR作用，但主要机制是NFkB转录因子功能的抑制(或转录抑制)，其中GR作为结合到DNA结合的NFkB的拴留蛋白。与之相对，主要影响了葡萄糖代谢和骨内稳态的GR的代谢作用通过结合到共识糖皮质激素应答元件(或转录激活)的同型二聚体GR被调节。因此，相比于脱靶代谢作用，由于不同的机制似乎控制了所需的GR抗炎作用，这提高了开发能够在多种机制之间分离的配体的可能性，因此获得了新颖的、更好耐受的药物。靶向雌激素受体(ER)的类似方法已应用在临床中的选择性ER激动剂(雷洛昔芬、他莫昔芬)中。
糖皮质激素转录激活和转录抑制：两种作用机制
GR的转录抑制和转录激活可以是独立的。结合中可以是激动剂或拮抗剂的GR配体结合域(LBD)的晶体结构现已得到解决。α螺旋形成侧口袋和由纵向裂口构成的疏水口袋。在结合激动剂时，看似C-末端螺旋移动以围绕配体，形成新的复合表面。然而，在结合拮抗剂时，螺旋12显然是在不同的位置，因此活化表面不同于在结合激动剂时所形成的复合表面。GR-LBD的计算机建模和突变研究已提出了若干个重要的氨基酸，其与类固醇D-环以及与其相关联的官能团相结合。氨基酸Met560和Tyr735的细微变化会导致受体保留高亲和力的配体结合，但示出了转录激活的选择性损失。此外，预测了配体结合口袋与Met560、Tyr735相互作用的、连接到类固醇D-环中C-17的官能团的改变导致了体外转录激活的选择性损失。
糖皮质激素引起的骨质疏松
在临床实践中，糖皮质激素引起的骨质疏松(GIOP)在患者和他们的医疗护理人员中被普遍担心。高达50％的长期糖皮质激素治疗的患者将患有GIOP。GIOP的发病机理是复杂的，包括骨骼作用和骨骼外作用，例如抑制性激素以及损害钙吸收。体内GC通过损害成骨细胞的生成，并促进细胞凋亡来抑制成骨细胞功能。与此相反，GC对破骨细胞的作用是有争议的。在一些研究中，Gc促进破骨细胞的活性和使用寿命，然而在其它研究中，Gc促进破骨细胞凋亡。在不同的动物模型和人类之间可能有很大的差异。不希望受理论的束缚，因此，解释人类中糖皮质激素诱导的骨质疏松的主要机制看似是成骨细胞功能的抑制。
糖皮质激素对糖代谢的影响
糖皮质激素作用于肝脏，以促进氨基酸(糖异生)合成葡萄糖，以及作用于肝脏和外周组织以对抗胰岛素作用。结果，导致了高血糖。对胰岛素作用的对抗还导致失调的脂质代谢，并且这些紊乱对于能量平衡的最终结果是动脉粥样硬化的加速。事实上，在给药合成的GC用于类风湿关节炎的早期试验中，早期的负面效果指示为加速的心血管疾病，过早死亡。因此，跟踪给药GC的血糖反应提供了对于能量代谢的整体影响的有效预测，并替代加速的动脉粥样硬化。
糖皮质激素的应用
其中，GC已显示出具有显着的抗炎作用的疾病包括炎性关节炎，如类风湿性关节炎、强直性脊柱炎和牛皮癣性关节病，其它类风湿疾病，如全身性红斑狼疮、硬皮病、包括颞动脉炎和结节性多动脉炎的血管炎，炎性肠疾病，如克罗恩病和溃疡性结肠炎，肺疾病，如哮喘和慢性阻塞性气道疾病，以及很多其它病症，如风湿性多肌痛。GC由于其免疫抑制性质还非常广泛地用于移植排斥的预防和治疗中。最后，GC由于其抗肿瘤作用已被用于多种恶性肿瘤。GC在淋巴组织增生和其它恶性肿瘤的治疗中的活性被认为是因为GC诱导细胞凋亡的能力(McColl KS,He H,Zhong H,Whitacre CM,Berger NA,Distelhorst CW.，分子和细胞内分泌学,1998；139:229-38；Miyashita T,Nagao K,Krajewski S,Salvesen GS,ReedJC,Inoue T等，细胞死亡与分化，1998；5:1034-41)。
如下面所讨论的，类固醇GC的使用，特别是在炎性疾病中，由于其副作用已受到严格的限制。已采取许多方法来克服药物的副作用。最常用的方法是将类固醇局部地应用到炎症部位。已采用这种方法的靶向器官包括肺，通过口腔吸入治疗哮喘和慢性阻塞性气道疾病；鼻子，通过局部应用治疗过敏性鼻炎；眼睛，通过局部应用治疗一系列严重的眼部炎症疾病，如葡萄膜炎；大关节，通过关节腔注射类固醇以治疗炎症；和皮肤，用于治疗湿疹、牛皮癣和一系列其它的皮肤疾病。局部分配允许剂量随着全身性副作用的降低而减少。
近年来对于局部应用，全身性副作用通过引入所谓的“软类固醇”，如氟替卡松被进一步降低。这些软类固醇在吸收后通过代谢被迅速灭活进入全身循环，从而减少全身性副作用。但是，软类固醇的局部应用仍与显著的局部副作用相关联，局部副作用如皮肤变薄。在例如颞动脉或者多肌痛风湿病的需要药物全身给药的疾病中并不使用软类固醇，因为使用这些药物会产生许多不期望的全身效应报告。
类固醇的副作用包括以下内容：骨质疏松症；生长障碍；血管股坏死；近端肌病；糖耐量减低或明显糖尿病；体液潴留和水肿；高血压；低钾血症；库欣氏症表相；体重增加；肥胖；欣快感；精神病；失眠；颅内压升高；癫痫加重；记忆障碍；海马萎缩；消化性溃疡；胰腺炎；下丘脑垂体轴的抑制；提高眼内压力；青光眼；视神经乳头水肿；皮肤变薄；降低对感染的抵抗力；受损的伤口愈合。
尽管记载了类固醇的副作用，但其仍被非常广泛的使用，因为其抗炎作用超过了其它任何药物类。它们继续在移植排斥的治疗和预防中以及在淋巴增殖性疾病和某些其它恶性肿瘤的治疗中发挥核心作用。
持续需求具有与此类中现有药物功效相同、但具有降低的副作用潜力的新颖的类固醇。
试图确定新颖的、能够模仿已取得一些成效的突变GR蛋白效果的合成的GR配体。然而，先前描述的配体或分子并不具有将在治疗上被使用的GR两种作用机制的足够大范围的分离。
早期的、在体外有成功希望的候选分子RU24858在进一步的分析中被揭示是低效力、低功效的完全激动剂(Vayssiere BM,Dupont S,Choquart A,Petit F,Garcia T,Marchandeau C等，分子内分泌，1997；11:1245-55)。此外RU24858不诱导细胞凋亡，因此缺少了GC的一个重要活性，也不能活化孕酮受体，从而缺失不希望缺少的特异性作用。
先前的研究已试图在引起转录激活和转录抑制的能力方面区分已知的和新颖的类固醇的效果(VandenBerghe W等，分子药理学，1999；56:797-806；Hofmann TG等，FEBS快报，1998；441:441-6))。
药物设计的后续迭代已揭示候选分子，但没有一个是试用于全身应用。
WO02/36606公开了具有通式的某些类固醇衍生物：
其中，R是-NH2、-NHR1、-NHOR2、-NHNHR2、-NHCOR2或-CH2OC(O)NHR3，R1是C1-4烷基、C3-6环烷基、C(Ph)n，其中n为1-3，R2是甲基或乙基，R3是烷基、环烷基、取代的烷基、取代的环烷基、芳基、杂芳基、取代的芳基或取代的杂芳基，R4和R5是C1-4烷基。化合物被发现在促炎细胞内以诱导细胞凋亡。还公开了某些类固醇衍生物的前药。
尽管如此，仍需要高亲和力、高效力的GR配体，其选择性用于抗-NFkB活性，其具有抗风湿和抗炎与对葡萄糖代谢和骨代谢的脱靶效应作用的充分有利的分离。
发明内容
本发明的一个方面涉及某些如本文所述的类固醇衍生物化合物。特别是，本发明提供了式(I)的类固醇衍生物化合物：
其中X1、X2、X3、L和Ar如本文所定义。
本发明的另一个方面涉及组合物(例如药物组合物)，该组合物包含如本文所述的类固醇衍生物化合物和药学上可接受的载体或稀释剂。
本发明的另一个方面涉及制备组合物(例如药物组合物)的方法，该方法包含将如本文所述的类固醇衍生物化合物和药学上可接受的载体或稀释剂混合的步骤。
本发明的另一个方面涉及包括将治疗有效量的如本文所述的类固醇衍生物化合物优选以药物组合物的形式给药于需要治疗的受试者的治疗方法。
本发明的另一个方面涉及将如本文所述的类固醇衍生物化合物用于通过疗法治疗人体或动物体的方法中。
本发明的另一个方面涉及如本文所述的类固醇衍生物化合物在制备用于治疗的药物中的用途。
在一些实施例中，治疗包括治疗或预防炎性病症、治疗血液学和其它恶性肿瘤、引起免疫抑制以预防或治疗受试者中的移植排斥。
在一些实施例中，治疗可以是下述治疗：类风湿性关节炎，强直性脊柱炎和牛皮癣性关节病，其它类风湿病如全身性红斑狼疮，硬皮病，包括颞动脉炎和结节性多动脉炎的血管炎，炎性肠病如克罗恩病和溃疡性结肠炎，肺疾病如哮喘和慢性阻塞性气道疾病，以及很多其它病症如风湿性多风湿病。
本发明的另一方面涉及一种试剂盒，该试剂盒包括(a)如本文所述的类固醇衍生物化合物，优选作为药物组合物，并提供在合适的容器中和/或用合适的包装提供；和(b)使用说明，例如关于如何给药该化合物的书面说明。
本发明的另一个方面涉及合成如本文所述的类固醇衍生物化合物的某些方法。
本领域技术人员可以理解的是，本发明的一个方面的特征和优选实施例也将涉及本发明的其它方面。
附图说明
图1示出了地塞米松与本发明的示例性化合物Dex124之间的头-头比较结果。
图2示出了具有固定浓度的Dex124或媒介物的转录激活报告(reporter)细胞经受地塞米松的剂量响应时，Dex124的基础转录。
图3示出了对于孕酮受体(PR)、雄激素受体(AR)和盐皮质激素受体(MR)中每一个Dex124与泼尼松龙和同源配体的比较。
图4中比较了Dex124和泼尼松龙的类固醇诱导的促炎性细胞因子表达的抑制。
图5示出了使用Dex124的大鼠佐剂性关节炎的剂量依赖性抑制，并与泼尼松龙进行了比较。
图6示出了响应于泼尼松龙或Dex124的关节炎的进化(evolution)。
图7总结了临床关节炎模型中的头-头比较数据。
图8示出了响应于地塞米松、泼尼松龙和Dex124的血清葡萄糖的诱导。
图9示出了使用泼尼松龙的骨钙素浓度的剂量依赖性抑制，以及Dex124的右移的剂量响应。
图10示出了泼尼松龙和Dex124在骨增量中的剂量依赖性降低。
图11是长骨的CT重建。
图12示出了骨结构和矿物质含量的微型计算机断层成像结果。
图13示出了长骨的骨骺或骨端由内侧和外侧髁构成。
详细描述和优选
化合物
本文描述的是通式(I)的化合物：
其中：
X1和X2各自独立地选自-H和-F；
X3选自-H和-Me；
L为选自L1和L2中的连接基团；和
Ar选自苯基和C5-9杂芳基，可选的，被一个或多个取代基RA取代；
其中：
每个RA独立地选自：-F、-Cl、-Br、-I、-ORO、-N(RN)2、-C(＝O)ORO、-C(＝O)N(RN)2、-SO2N(RN)2、-CF3和-CN，其中RO和Rn的每一个独立地选自-H和-C1-4烷基；
L1是:
L2是:
L1A选自-LA-和-LB-O-；
L2A选自-C(＝O)-、-C(＝O)-LB-和-LB-；
其中LA是饱和的C3-4亚烷基和LB是饱和的C1-4亚烷基；
和RN1和RN2各自独立地选自-H和-Me。
在优选的实施例中，本发明提供了式(II)的化合物：
其中L和Ar如前所定义。
在一些实施例中，化合物是式(IIa)的化合物：
其中L和Ar如上所定义。
在一些实施例中，如本文所定义，所述化合物是式(I)或(Ia)的化合物，条件是所述化合物不是9-氟-11,17-二羟基-N-(3-咪唑-1基-丙基)-3-氧代-6,7,8,10,11,12,13,14,15,16-十氢环五[a]菲-17-甲酰胺。
X 1 和X 2 基团
在式(I)和(Ia)的化合物中，X1和X2各自独立地选自-H和-F。本发明的一些实施例包括以下内容：
(X1-1)如本文所定义的式(I)或(Ia)的化合物，其中X1和X2均独立地为-H。
(X1-2)如本文所定义的式(I)或(Ia)的化合物，其中X1独立地为-H和X2独立地为-F。
(X1-3)如本文所定义的式(I)或(Ia)的化合物，其中X1独立地为-F和X2为独立地为-H。
(X1-4)如本文所定义的式(I)或(Ia)的化合物，其中X1和X2均独立地为-F。
X 3 基团
在式(I)和(Ia)的化合物中，X3独立地选自-H和-Me。本发明的一些实施例包括以下内容：
(X1-5)根据段落(X1-1)至(X1-4)任一项所述的化合物，其中X3独立地为-H。
(X1-6)根据段落(X1-1)至(X1-4)任一项所述的化合物，其中X3独立地为-Me。
Ar基团
在式(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的化合物中，Ar独立地选自苯基和C5-9杂芳基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
本文中所使用的术语“C5-9杂芳基”涉及通过从C5-9杂芳香族化合物的环原子上除去氢原子而得到的一价部分，所述化合物具有一个环或两个环(即稠合)并具有5至9个环原子，其中所述环(多个环)中的至少一个是芳香环，并且其中“C5-9”表示环原子，不论碳原子或杂原子。
本发明的一些实施例包括以下内容：
(A1-2)根据段落(X1-1)至(X1-6)中任一项的化合物，其中Ar独立地选自苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、恶唑基、异恶唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基和吡嗪基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并恶唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基和苯并噻唑基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
(A1-3)根据段落(X1-1)至(X1-6)中任一项的化合物，其中Ar独立地选自苯基、吡啶基、噻唑基、吡咯基、呋喃基、苯并噻唑基和苯并恶唑基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
(A1-4)根据段落(X1-1)至(X1-6)中任一项的化合物，其中Ar独立地为苯基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
(A1-5)根据段落(X1-1)至(X1-6)中任一项的化合物，其中Ar独立地为吡啶基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
(A1-6)根据段落(X1-1)至(X1-6)中任一项的化合物，其中Ar独立地为2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
(A1-7)根据段落(X1-1)至(X1-6)中任一项的化合物，其中Ar独立地为2-吡啶基或4-吡啶基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
(A1-8)根据段落(X1-1)至(X1-6)中任一项的化合物，其中Ar独立地为2-吡啶基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
(A1-9)根据段落(X1-1)至(X1-6)中任一项的化合物，其中Ar独立地为4-吡啶基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
(A1-10)根据段落(A1-1)至(A1-9)中任一项的化合物，其中Ar是未被取代的。
(A1-11)根据段落(A1-1)至(A1-9)中任一项的化合物，其中Ar被一个或多个取代基RA取代。
(A1-12)根据段落(A1-1)至(A1-9)中任一项的化合物，其中Ar被一个或两个RA基团取代。
(A1-13)根据段落(A1-1)至(A1-9)中任一项的化合物，其中Ar被一个RA基团取代。
(A1-14)根据段落(A1-1)至(A1-9)中任一项的化合物，其中Ar被两个RA基团取代。
R A
基团Ar，在存在时可选地被一个或多个取代基RA取代。本发明的一些实施例包括以下内容：
(R1-1)根据段落(A1-11)至(A1-14)中任一项的化合物，其中每个RA独立地选自-F、-Cl、-Br、-I、-ORO、-N(RN)2、-C(＝O)ORO、-C(＝O)N(RN)2、-SO2N(RN)2、-CF3和-CN，其中RO和Rn的每一个独立地选自-H和-C1-4烷基。
(R1-2)根据段落(A1-11)至(A1-14)中任一项的化合物，其中RA独立地选自-F、-ORO、-C(＝O)ORO和-CF3，其中，每个RO独立地选自-H和-C1-4烷基。
(R1-3)根据(R1-1)或(R1-2)的化合物，其中RO和Rn的每一个，如果存在，独立地选自-H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu和-tBu。
(R1-4)根据(R1-1)或(R1-2)的化合物，其中RO和Rn的每一个，如果存在，独立地选自-H、-Me和-Et。
(R1-5)根据(R1-1)或(R1-2)的化合物，其中RO和Rn的每一个，如果存在，独立地选自-H或-Me。
(R1-6)根据(R1-1)或(R1-2)的化合物，其中RO和Rn的每一个，如果存在，独立地选自-H.
(R1-7)根据段落(A1-11)至(A1-14)中任一项的化合物，其中RA独立地选自-F、-OH、-OMe、-CO2Me、-CO2H和-CF3。
(R1-8)根据段落(A1-11)至(A1-14)中任一项的化合物，其中RA独立地选自-F、-OMe和-CO2Me。
(R1-9)根据段落(A1-11)至(A1-14)中任一项的化合物，其中RA独立地选自-F或-Cl。
(R1-10)根据段落(A1-11)至(A1-14)中任一项的化合物，其中RA独立地为-F。
(R1-11)根据段落(A1-11)至(A1-14)中任一项的化合物，其中RA独立地为-OMe。
L基团
在式(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的化合物中，L为选自L1和L2的连接基团，其中：
L1是:
L2是:
本发明的一些实施例包括以下内容：
(L1-1)根据段落(A1-1)至(A1-14)以及(R1-1)至(R1-11)中任一项的化合物，其中L为L1。
(L1-2)根据段落(L1-1)的化合物，其中L1A是-LA-，其中LA独立地为饱和的C3-4亚烷基。
(L1-3)根据段落(L1-2)的化合物，其中-LA-独立地选自：
-CH(CH3)CH2-；-CH2CH(CH3)-
-CH2CH2CH2-；
-CH(CH3)CH2CH2-；-CH2CH(CH3)CH2-；-CH2CH2CH(CH3)-；和
-CH2CH2CH2CH2-。
(L1-4)根据段落(L1-2)的化合物，其中-LA-是-CH2CH2CH2-或-CH2CH2CH2CH2-。
(L1-5)根据段落(L1-2)的化合物，其中-LA-是-CH2CH2CH2-。
(L1-6)根据段落(L1-1)的化合物，其中L1A是-LB1-O-，其中-LB-独立地为饱和的C1-4亚烷基。
(L1-7)根据段落(L1-6)的化合物，其中LB独立地选自：
-CH2-；
-CH(CH3)-；
-CH2CH2-；
-CH(CH3)CH2-；-CH2CH(CH3)-
-CH2CH2CH2-；
-CH(CH3)CH2CH2-；-CH2CH(CH3)CH2-；-CH2CH2CH(CH3)-；和
-CH2CH2CH2CH2-。
(L1-8)根据段落(L1-6)的化合物，其中LB是-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-。
(L1-9)根据段落(L1-6)的化合物，其中LB是-CH2CH2-。
(L1-10)根据段落(L1-6)的化合物，其中LB是-CH2CH2CH2-。
(L1-11)根据段落(L1-1)至(L1-10)中任一项的化合物，其中RN1是-Me。
(L1-12)根据段落(L1-1)至(L1-10)中任一项的化合物，其中RN1是-H。
(L2-1)根据段落(A1-1)至(A1-14)以及(R1-1)至(R1-11)中任一项的化合物，其中L为L2。
(L2-2)根据段落(L2-1)的化合物，其中L2A是-C(＝O)-。
(L2-3)根据段落(L2-1)的化合物，其中L2A选自-C(＝O)-LB-和-LB-，其中-LB-为独立地饱和的C1-4亚烷基。
(L2-4)根据段落(L2-1)的化合物，其中L2A是-C(＝O)-LB-，其中-LB-为独立地饱和的C1-4亚烷基。
(L2-5)根据段落(L2-1)的化合物，其中L2A是-LB-，其中-LB-为独立地饱和的C1-4亚烷基。
(L2-6)根据段落(L2-3)至(L2-6)中任一项的化合物，其中LB独立地选自：
-CH2-；
-CH(CH3)-；
-CH2CH2-；
-CH(CH3)CH2-；-CH2CH(CH3)-
-CH2CH2CH2-；
-CH(CH3)CH2CH2-；-CH2CH(CH3)CH2-；-CH2CH2CH(CH3)-；和
-CH2CH2CH2CH2-。
(L2-7)根据段落(L2-3)至(L2-6)中任一项的化合物，其中LB为-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-。
(L2-8)根据段落(L2-3)至(L2-6)中任一项的化合物，其中LB为-CH2CH2-。
(L2-9)根据段落(L2-3)至(L2-6)中任一项的化合物，其中LB为-CH2CH2CH2-。
(L2-10)根据段落(L2-1)至(L2-9)中任一项的化合物，其中RN2是-Me。
(L2-11)根据段落(L2-1)至(L2-9)中任一项的化合物，其中RN2是-H。
某些优选实施例
在一些实施例中，所述化合物为选自下表中所列出的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物：
异构体
某些化合物可以存在一种或多种特定的几何学、光学、对映体、非对映体、差向异构体、阿托、立体异构、互变异构、构象或端基异构形式，包括但不限于顺式和反式；E形和Z形；c形、t形和r形；内切形式和外切形式；R形，S形和内消旋形；D形和L形；d形和l形；(+)和(-)形式；酮形、烯醇形和烯醇化物形；顺(syn-)式和反(anti-)式；顺错式和反错式；α形和β形；直立式(axial form)和平伏式(equatorial form)；船式、椅式、扭式、信封式和半椅式；以及它们的组合，下文中统称为“异构体”(或“异构形式”)。
需要注意的是，如本文所使用的、除了特别从术语“异构体”中所排除的、如下面所讨论的互变异构形式外，异构体均为结构(或构成)异构体(即，该异构体的原子之间的连接是不同的，而不仅仅是空间中原子位置的不同)。例如，提及甲氧基、-OCH3，不应被限制为提及的是其结构异构体羟甲基、-CH2OH。同样地，提及对邻氯苯基不应被限制为提及的是其结构异构体间-氯苯基。但是，提及该类结构很可能包括落入那类(例如，C1-7烷基包括正丙基和异丙基；丁基包括正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基；甲氧基苯基包括邻-甲氧基苯基、间-甲氧基苯基和对-甲氧基苯基)中的结构异构体形式。
以上排除不涉及互变异构形式，例如酮形、烯醇形和烯醇化物形，例如下述的互变异构对：酮/烯醇(如下所示)、亚胺/烯胺、酰胺/亚氨基醇、脒/脒、亚硝基/肟、硫酮/烯硫醇、N-亚硝基/羟基偶氮和硝基/酸式硝基。
注意的是，具体包括在术语“异构体”中的是具有一个或多个同位素取代的化合物。例如，H可以是以任意的同位素形式，包括1H、2H(D)和3H(T)；C可以是以任意的同位素形式，包括12C、13C和14C；O可以是以任意的同位素形式，包括16O和18O等。
除非另外指明，提及的特定化合物包括所有这些异构形式，这些异构形式包括它们的混合物(例如外消旋混合物)。这些异构形式的制备方法(例如不对称合成)和分离(例如分步结晶和色谱手段)在本领域中是已知的或以已知的方式容易地通过采用本文教导的方法或已知的方法获得。
盐
可以便捷地或可期望地制备、纯化和/或处理所述化合物的相应盐，例如药学上可接受的盐。在贝尔赫(Berge)等，1977，“可药用盐”，药物科学杂志，第66卷第1-19页讨论了药学上可接受的盐的例子。
例如，如果化合物是阴离子的或者具有可以是阴离子(例如，-COOH可以是-COO-)的官能团，则可以与合适的阳离子组成盐。合适的无机阳离子的例子包括，但不限于，碱金属离子如Na+和K+，碱土金属阳离子如Ca2+和Mg2+，和其它阳离子如Al3+。合适的有机阳离子的例子包括，但不限于，铵离子(即，NH4+)和取代的铵离子(例如，NH3R+、NH2R2 +、NHR3 +、NR4 +)。一些合适的取代的铵离子的例子是从乙胺、二乙胺、二环己胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、苄胺、苯基苄胺、胆碱、葡甲胺和氨丁三醇，以及氨基酸如赖氨酸和精氨酸中所衍生的那些铵离子。常见的季铵离子的例子是N(CH3)4+。
如果化合物是阳离子的或者具有可以是阳离子(例如，-NH2可以是-NH3+)的官能团，那么可以与合适的阴离子组成盐。合适的无机阴离子的例子包括，但不限于，从下列无机酸中所衍生的那些阴离子：盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、亚硫酸、硝酸、亚硝酸、磷酸和亚磷酸。
合适的有机阴离子的例子包括，但不限于，从下列有机酸中所衍生的那些阴离子：2-乙酰羟苯甲酸、乙酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟脑磺酸、肉桂酸、柠檬酸、依地酸(edetic)、乙二磺酸、乙磺酸、富马酸、葡糖庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、羟基、羟基萘甲酸、羟乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、甲磺酸、粘酸、油酸、草酸、棕榈酸、扑酸(pamoic)、泛酸、苯乙酸、苯磺酸、丙酸、丙酮酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、对氨基苯磺酸、酒石酸、甲苯磺酸和戊酸。合适的聚合有机阴离子的例子包括，但不限于，从下列聚合酸中所衍生的那些阴离子：鞣酸、羧甲基纤维素。
除非另外指明，提及的特定化合物还包括其盐形式。
水合物和溶剂化物
可以便捷地或可期望地制备、纯化和/或处理所述化合物的相应的水合物或溶剂化物(例如，化合物的药学上可接受的水合物或溶剂化物)。本文中使用的术语“溶剂化物”传统意义上是指溶质(例如，化合物，化合物的盐)和溶剂的复合物。如果溶剂是水，则溶剂化物可以简便地称为水合物，例如，单水合物、二水合物、三水合物等。
除非另外指明，提及的特定化合物还包括其水合物和溶剂化物形式。
化学保护形式
可以便捷地或可期望地制备、纯化和/或处理化学保护形式的该化合物。术语“化学保护形式”在本文中是以常规化学意义被使用，并涉及化合物中一个或多个反应性官能团在特定条件下(例如，pH、温度、辐射、溶剂等)不参与不希望的化学反应。在实践中，采用熟知的化学方法在特定条件下可逆地使官能团是不发生反应的，否则将是反应性的。在化学保护形式中，一个或多个反应性官能团是以被保护或保护基团(也称为被掩蔽或掩蔽基团或者被阻断或保护基团)的形式存在。通过保护反应性官能团，可以进行涉及其它未保护的反应性官能团的反应，而不影响被保护的基团；保护基可通常在随后的步骤中被移除，而基本上不影响分子的其余部分。例如，参见有机合成中的保护性基团(T.Green和P.Wuts；第4版，约翰·威利父子出版公司，2006年)。
各种各样的“保护”、“阻断”或“掩蔽”方法在有机合成中被广泛采用并且是众所周知的。例如，具有两个非等价、且在特定条件下都是反应性的反应性官能团的化合物可被衍生以呈现的一个“被保护的”的官能团，因此在特定条件下是不反应的；所以保护时，化合物可以被用作仅具有一个有效地反应性官能团的反应物。在所需的反应(涉及其它官能团)被完成后，被保护基团可以被“脱保护”来恢复其原来的功能。
例如，羟基可被保护为醚(OR)或酯(-OC(＝O)R)，例如：叔丁基醚；苄基，二苯甲基(二苯基甲基)，或三苯甲基(三苯基甲基)醚；三甲基硅烷或叔丁基二甲基硅烷醚；或乙酰酯(-OC(＝O)CH3、-OAc)。
例如，醛或酮基团可以分别被保护为缩醛(R-CH(OR)2)或缩酮(R2C(OR)2)，其中，例如通过与伯醇反应，羰基(>C＝O)被转化为二醚(>C(OR)2)。醛或酮基团在酸存在下通过使用过量的水水解很容易地再生。
例如，胺基例如可以被保护为酰胺(-NRCO-R)或氨基甲酸酯(-NRCO-OR)，例如甲基酰胺(-NHCO-CH3)；苄酰胺(-NHCO-OCH2C6H5，-NH-Cbz)；叔丁氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)3，-NH-Boc)；2-联苯-2-丙氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5，NH-Bpoc)，9-芴基甲氧基酰胺(-NH-Fmoc)，6-硝基藜芦氧基酰胺(-NH-Nvoc)，2-三甲基甲硅烷基乙氧基酰胺(-NH-Teoc)，2，2，2-三氯乙氧基酰胺(-NH-Troc)，为烯丙氧基酰胺(-NH-Alloc)，2-(苯磺酰基)乙氧基酰胺(-NH-Psec)；或者，在适当情况下(例如，环胺)，被保护为氮氧自由基(>N-O·)。
例如，羧酸基可以被保护为酯，例如：C1-7烷基酯(例如，甲基酯；叔丁基酯)；C1-7卤代烷基酯(例如，C1-7三卤代酯)；三C1-7烷基硅烷-C1-7烷基酯；或C5-20芳基-C1-7烷基酯(例如苄基酯；硝基苄基酯)；或酰胺，例如甲基酰胺。
例如，硫醇基可以被保护为硫醚(-SR)，例如：苄基硫醚；乙酰氨基醚(-SCH2NHC(＝O)CH3)。
例如，羰基可以被保护为肟(-C(＝NOH)-)或取代的肟(-C(＝NOR)-)，例如，其中R是饱和的脂肪族C1-4烷基。
前药
可以便捷地或可期望地制备、纯化和/或处理前药形式的所述化合物。如本文所用的术语“前药”，涉及被代谢时(例如，在体内)得到的所需的活性化合物的化合物。通常的，前药是无活性的或比所需的活性化合物的活性低，但可以提供有利的处理、给药或代谢特性。
例如，一些前药是活性化合物的酯(例如，生理学上可接受的代谢不稳定的酯)。在代谢过程中，酯基(-C(＝O)OR)被裂解得到活性药物。这样的酯可例如通过母体化合物中任何羧酸基团(-C(＝O)OH)的酯化来形成，在合适的情况下，如果需要，母体化合物中存在的任何其它反应性基团的前期保护随后被脱保护。
另外，一些前药通过酶激活得到活性化合物，或化合物基于进一步的化学反应产生活性化合物(例如在ADEPT、GDEPT、LIDEPT等中)。例如，前药可以是糖衍生物或其它糖苷缀合物，或可以是氨基酸酯衍生物。
一般合成方法
式(I)的化合物可以使用本领域中已知的方法由可商购的起始原料制备。
例如，其中L为L1的通式(I)的化合物，即下述通式的酰胺化合物：
其中X1、X2、X3、RN1、L1A和Ar如上所定义，可由相应的通式(I-i)的羧酸化合物通过与合适的胺偶合制备：
该胺可以是通式的胺：
其中RN1、L1A和Ar如前所定义。
耦合可以包括式(Ⅱ)的酸与胺和合适的偶联剂的处理。合适的偶联剂包括，但不限于，羰基二咪唑、N,N'-二环己基碳二亚胺、N,N'-二异丙基碳二亚胺、羟基苯并三唑(HOBt)、苯并三唑-1-基-氧基-三-(二甲基氨基)-鏻六氟磷酸盐(BOP)和苯并三唑-1-基-氧基-三四氢吡咯鏻六氟磷酸盐(PyBOP)。
所述胺可以是盐的形式，在这种情况下，碱(例如三乙胺)可被加入到该偶联反应。
通式(I-i)的化合物可由通式(I-ii)的化合物制备，例如通过与高碘酸钠氧化：
其中X1、X2和X3如上述所定义。
通式(I-ii)的化合物例如为已知的地塞米松、氟米松和泼尼松龙。
其中L为L2的通式(I)的化合物，即下述通式的氨噻唑化合物：
其中X1、X2、X3、RN2、L2A和Ar如上所定义，可以通过‘封端(capping)’相应的通式(I-iii)的噻唑化合物与适当的羧酸(或相应的活化的羧酸衍生物，如酰氯)制备：
所述酸的通式可以是：
其中L2A和Ar如前所定义。
通式(I-iii)的噻唑化合物可由如上所定义的通式(I-ii)的化合物制备：
例如通过先后与甲磺酰氯、硫脲反应。
医疗用途/治疗方法
本文所述的类固醇衍生物化合物用于医学治疗的方法中。
本文所述的类固醇衍生物化合物发现了例如在炎性病症、血液学和其它恶性肿瘤的治疗中、在引起免疫抑制中，以及在预防或治疗移植排斥中的用途。本文所述的化合物还可用于在靶细胞中诱导细胞凋亡的方法中。
在一些实施例中，该化合物被用于在促炎性细胞和/或恶性细胞中诱导细胞凋亡。
在一些实施例中，治疗包括治疗或预防炎性病症，该炎性病症包括炎性关节炎如类风湿性关节炎、强直性脊柱炎和牛皮癣性关节病，其它类风湿疾病如全身性红斑狼疮、硬皮病、包括颞动脉炎和结节性多动脉炎的血管炎、炎性肠病如克罗恩病和溃疡性结肠炎，肺疾病如哮喘和慢性阻塞性气道疾病，以及很多其它病症如风湿性多肌痛。
在一些实施例中，治疗包括治疗或预防肿瘤、血液学恶性肿瘤、淋巴组织增生性恶性肿瘤和其它恶性肿瘤。
在一些实施例中，治疗包括预防或治疗移植排斥。
本文中所用的术语“治疗”在上下文中指治疗病症，一般涉及治疗和疗法，无论是在人或动物(例如在兽医应用中)中，实现某些所需的治疗效果，例如病症进度的抑制，并且包括降低病症的进展速度、停止进展速度、减轻症状的症状、改善病情和治疗病症。治疗作为预防措施(即预防)也被包括在内。例如，在未患病的、但有患病危险的患者中使用被包含在术语“治疗”中。
如本文所用的术语“治疗有效量”涉及化合物、或包含化合物的材料、组合物或剂型的量，在根据期望的治疗方案给药时，其对于产生一些期望的治疗效果以及相对合理的利益/风险比是有效的。
组合疗法
术语“治疗”包括组合治疗和疗法，其中两种或多种治疗或疗法被组合，例如依次或同时进行。例如，本文所述的化合物也可用于组合疗法中，例如与其它试剂共同使用，其它试剂例如细胞毒性剂、抗癌剂、分子靶向药物等。治疗和疗法的例子包括，但不限于，化疗(给药活性剂，包括例如药物、抗体(例如在免疫疗法中)，前药(例如在光动力疗法、GDEPT、ADEPT等)；外科手术；放射疗法；光动力疗法；基因疗法和控制饮食。
给药途径
化合物或包含该化合物的药物组合物可通过任何方便的给药途径给药于受试者，无论是全身性/外周或局部给药(即，在所需作用的位点)。
给药途径包括但不限于口服(例如，通过摄取)；颊；舌下含服；透皮(包括例如通过贴剂、硬膏剂等)；经粘膜(包括例如通过贴剂、硬膏剂等)；鼻内(例如，通过鼻腔喷雾)；眼(例如通过滴眼剂)；肺部(例如，通过口或鼻使用气雾剂的吸入或吹入疗法)；直肠(例如，通过栓剂或灌肠剂)；阴道(例如通过阴道栓)；肠胃外，例如，通过注射，包括皮下、皮内、肌内、静脉内、动脉内、心内、鞘内、脊柱内、囊内、囊下、眼眶内、腹膜内、气管内、表皮下、关节内、蛛网膜下和胸骨内；例如皮下或肌内植入贮库或贮池。
受试者/患者
受试者/患者可以是脊索动物、脊椎动物、哺乳动物、胎盘哺乳动物、有袋动物(例如袋鼠、袋熊)、单孔目动物(例如鸭嘴兽)、啮齿类动物(例如豚鼠、仓鼠、大鼠、小鼠)、鼠科(例如小鼠)、兔类动物(例如兔)、禽类(例如鸟)、犬科(例如狗)、猫科(例如猫)、马科(例如马)、猪科(例如猪)、羊科(例如绵羊)、牛科(例如母牛)、灵长类、类人猿(例如猴子或猿)、猴(例如狨猴、狒狒)、猿(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩、长臂猿)或人。
此外，受试者/患者可以是其任何发育形式，例如胎儿。
在一个优选的实施例中，受试者/患者是人。
制剂
仅单独给药类固醇衍生物化合物是可能的，优选将其作为包含至少一种如本文所述的类固醇衍生物化合物和一种或多种本领域技术人员所公知的其它药学上可接受的成分的药物制剂(例如组合物、制剂、药物)，药学上可接受的成分包括但不限于药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂、助剂、填充剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧化剂、润滑剂、稳定剂、增溶剂、表面活性剂(如润湿剂)、掩蔽剂、着色剂、调味剂和甜味剂。该制剂可以进一步包含其它活性剂，例如其它治疗剂或预防剂。
因此，本发明进一步提供了如上述所定义的药物组合物，以及制备药物组合物的方法，该方法包括将至少一种如本文所述的类固醇衍生物化合物和一种或多种本领域技术人员所公知的其它药学上可接受的成分混合，药学上可接受的成分例如载体、稀释剂、赋形剂等。如果配制为独立的单位(例如片剂等)，每个单位含有预定量(剂量)的化合物。
如本文所用的术语“药学上可接受的”涉及化合物、成分、材料、组合物、剂型等，在合理的医学判断范围内，其适用于与讨论中的受试者(例如人)的组织相接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应的问题，或其它问题或并发症，具有相对合理的利益/风险比。每种载体、稀释剂、赋形剂等必须是与制剂的其它成分相容的意义上的“可接受的”。
合适的载体、稀释剂、赋形剂等可在标准药学课本中找到，例如，雷明顿药物科学，第18版，麦克出版公司，伊斯顿，宾夕法尼亚州，1990；和药用辅料手册，第5版，2005年。
该制剂可通过药学领域中熟知的任何方法来制备。这样的方法包括将化合物与构成一种或多种辅助成分的载体相结合的步骤。一般而言，制剂是通过均匀地且紧密地将化合物与载体(例如液体载体，细碎的固体载体等)相结合来制备，然后如果需要的话，使产品成型。
该制剂可被制备以提供快速或缓慢释放；立即、延迟、定时或持续释放；或它们的组合。
制剂可以适宜地是液体、溶液(例如水性、非水性)、混悬液(例如水性、非水性)、乳剂(例如水包油、油包水)、酏剂、糖浆剂、糖饵剂、漱口剂、滴剂、片剂(包括例如包衣片剂)、颗粒剂、粉剂、锭剂、糖果锭剂、胶囊(包括例如硬明胶胶囊和软明胶胶囊)、扁囊剂、丸剂、安瓿剂、大丸剂、栓剂、阴道栓剂、酊剂、凝胶剂、糊剂、软膏、霜剂、洗剂、油剂、泡沫剂、喷雾剂、雾剂或气雾剂。
制剂可以适宜地被提供为浸有一种或多种化合物和任选的一种或多种其它药学上可接受的成分的贴剂、橡皮膏、绷带、敷料等，包括例如渗透、散布和吸收增强剂等。制剂也可以适宜地被提供为贮库或贮池的形式。
该化合物可以溶于、悬浮于或混合有一种或多种其它药学上可接受的成分。该化合物可以在脂质体或其它微粒中，该微粒被设计为靶向化合物，例如靶向血液成分或一种或多种器官。
适合于口服给药(例如，通过摄入)的制剂包括液体、溶液(例如水性、非水性)、混悬液(例如水性、非水性)、乳剂(例如水包油、油包水)、酏剂、糖浆剂、糖饵剂、片剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂、扁囊剂、丸剂、安瓿剂、大丸剂。
适于颊部给药的制剂包括漱口剂、锭剂、糖果锭剂以及贴剂、橡皮膏、贮库和贮池。锭剂通常包含调味基质中的化合物，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶。糖果锭剂通常包含惰性基质中的化合物，如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶。漱口剂通常包含在适宜液体载体中的化合物。
适合舌下给药的制剂包括片剂、锭剂、糖果锭剂、胶囊剂和丸剂。
适于口服透粘膜给药的制剂包括液体、溶液(例如水性、非水性)、混悬液(例如水性、非水性)、乳剂(例如水包油、油包水)、漱口水、锭剂、糖果锭剂、以及贴剂、橡皮膏、贮库和贮池。
适于非口服透粘膜给药的制剂包括液体、溶液(例如水性、非水性)、混悬液(例如水性、非水性)、乳剂(例如水包油、油包水)、栓剂、阴道栓剂、凝胶剂、糊剂、软膏、霜剂、洗剂、油剂、以及贴剂、橡皮膏、贮库和贮池。
适于透皮给药的制剂包括凝胶剂、糊剂、软膏、霜剂、洗剂、和油剂、以及贴剂、橡皮膏、绷带、敷料、贮库和贮池。
片剂可通过常规方法制备，例如与任一种或多种辅助成分压缩或模制制备。压缩片剂可通过在合适的机器中压缩自由流动形式的诸如粉末或颗粒的化合物来制备，该化合物可选的混合有一种或多种粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮、明胶、阿拉伯胶、山梨醇、西黄蓍胶、羟丙基甲基纤维素)；填充剂或稀释剂(例如乳糖、微晶纤维素、磷酸氢钙)；润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石、二氧化硅)；崩解剂(例如羟基乙酸淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠)；表面活性剂或分散剂或湿润剂(例如月桂基硫酸钠)；防腐剂(例如甲酸甲酯、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸丙酯、山梨酸)；矫味剂、风味增强剂和甜味剂。模制片剂可通过在合适的机器中将惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物模制来制备。所述片剂可以任选进行包衣或划痕，并且可以被配制以便提供缓释或控释化合物，该化合物中使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素以提供所需的释放曲线。片剂可以可选地提供有涂层，例如以影响释放，例如肠溶包衣，以在除胃以外的肠的部分被释放。
软膏剂通常由所述化合物和石蜡或水可混溶的软膏基质制备。
霜剂通常由所述化合物和水包油霜剂基质制备。如果需要，软膏基质的水相可以包括，例如至少约30％w/w的多元醇，即，具有两个或多个羟基的醇，例如丙二醇、丁烷-1,3-醇二醇、甘露醇、山梨醇、丙三醇和聚乙二醇及它们的混合物。局部制剂可以期望地包括通过皮肤或其它受影响区域增强化合物吸收或渗透的化合物。这类皮肤穿透增强剂的例子包括二甲基亚砜和相关类似物。
乳剂通常由所述化合物和油相制备，油相可以任选地仅包括乳化剂(或者称为乳化剂)，或者可以包括至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪和油的混合物。优选地，亲水性乳化剂与亲脂性乳化剂相互作用作为稳定剂。还优选同时包括油和脂肪。同时，具有或不具有稳定剂的乳化剂(多种)组成所谓的乳化蜡，该乳化蜡与油和/或脂肪组成所谓的乳化软膏基质，该乳化软膏基质形成霜剂的油性分散相。
合适的乳化剂和乳剂稳定剂包括吐温60、司盘80、鲸蜡硬脂醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯和月桂基硫酸钠。用于制剂的合适的油或脂肪的选择是基于获得所需的化妆品特性，因为可能在药物乳剂制剂中使用的大多数油中的化合物的溶解度可能非常低。因此，乳剂应优选为具有合适稠度的非油脂、非色素和可洗产品，以避免从管或其它容器中渗漏。可以使用直链或支链、一元或二元烷基酯如二异己二酸酯、异十六烷基硬脂酸酯、椰子脂肪酸的丙二醇二酯、肉豆蔻酸异丙酯、油酸癸酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、2-乙基己基棕榈酸酯，或已知是鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯(和)肉豆蔻酸异丙酯(Crodamol CAP)的支链酯的共混物，最后三种是优选的酯。依据所需性质，可以单独或组合使用这些酯。或者，可使用高熔点脂类如白色软石蜡和/或液体石蜡或其它矿物油。
适于鼻内给药的制剂中载体是液体，包括例如鼻腔喷雾剂、滴鼻剂、或者通过喷雾剂雾化给药，包括该化合物的水性溶液或油性溶液。
适于鼻内给药的制剂中载体是固体，包括例如那些呈现为具有颗粒尺寸的粗粉，颗粒尺寸例如约20至约500微米的范围，其通过鼻摄取的方式被给药，即鼻腔通道从靠近鼻子的粉末容器快速吸入被给药。
适于肺部给药(例如通过吸入或吹入疗法)的制剂包括那些表现为加压包喷雾器中使用的合适的推进剂，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯-四氟乙烷、二氧化碳或其它合适的气体。
适于眼部给药的制剂包括滴眼剂，其中所述化合物被溶解或悬浮在合适的载体中，尤其是化合物的含水溶剂。
适于直肠给药的制剂可以呈现为具有合适基质的栓剂，该基质包括例如天然或硬化油、蜡、脂肪、半液体或液体多元醇，例如可可脂或水杨酸盐；或作为灌肠治疗的溶液或悬浮液。
适于阴道给药的制剂可呈现为阴道栓剂、棉塞、霜剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂，其含有除化合物以外的载体，这类载体是本领域中所公知适用的载体。
适于肠胃外给药(例如、通过注射)的制剂包括水性或非水性的、等渗的、无热原、无菌液体(例如、溶液、悬浮液)，其中，所述化合物被溶解、混悬或以其它方式提供(例如在脂质体或其它微粒中)。这些液体可额外包含其它药学可接受的成分，如抗氧化剂、缓冲剂、防腐剂、稳定剂、抑菌剂、助悬剂、增稠剂和使制剂与接受者的血液(或其它相关体液)等渗的溶质。赋形剂的例子包括例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。用于这些制剂的适合的等渗载体的例子包括氯化钠注射液、林格氏溶液或乳酸林格氏注射液。通常，液体中化合物的浓度为从约1ng/ml至约10μg/ml、例如从约10ng/ml至约1μg/ml。所述制剂可以提供在单剂量或多剂量密封容器中，例如安瓿和小瓶，并且可以存储在仅需要加入无菌液体载体的冷冻干燥(冻干)条件中，例如在临用前加入的用于注射剂的水。临用注射溶液和悬浮液可以由无菌粉末、颗粒和片剂来制备。
剂量
本领域技术人员将应理解的是，可根据患者的不同调整化合物的合适剂量以及含有该化合物的组合物。确定最佳剂量通常将涉及平衡治疗益处与任何风险或有害副作用的水平。所选的剂量水平将取决于多种因素，包括但不限于具体化合物的活性、给药途径、给药时间、化合物的排泄速率、治疗的持续时间、组合使用的其它药物、化合物和/或材料、疾病的严重程度、以及患者的人种、性别、年龄、体重、状况、一般健康状况、以及病史。虽然将会选择一般剂量以在作用部位给予达到预期效果而不会导致大量的有害或有毒副作用的局部浓度，但化合物的量和给药途径将最终由医师、兽医或临床医师判断。
给药可以在一个剂量内连续或间歇地(例如，以适当的间隔分开给予剂量)贯穿整个治疗过程进行。确定最有效的手段和给药剂量的方法是本领域技术人员所公知的，将根据治疗使用的制剂、治疗的目的、所处理的靶向细胞(多个细胞)以及被对待的患者的不同而不同。单次或多次给药可根据治疗医师、兽医或临床医师所选择的剂量水平和方案进行实施。
实施例
以下实施例仅用于阐述本发明，并不限制本文中所述的本发明的范围。
合成实施例
缩略语表
DCM＝二氯甲烷
THF＝四氢呋喃
DMF＝二甲基甲酰胺
EtOH＝乙醇
MeOH＝甲醇
EtOAc＝乙酸乙酯
DMSO＝二甲亚砜
TEA＝三乙胺
PyBOP＝六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三四氢吡咯磷
EDC＝1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺
HOBT＝羟基苯并三唑
Boc＝叔丁氧羰基
DIPEA＝N,N’-二异丙基乙胺
ESI＝电喷雾离子化
LCMS＝液相色谱-质谱
UPLC-MS＝超高效液相色谱-质谱
HRMS＝高分辨质谱
NMR＝核磁共振
TLC＝薄层色谱
材料与方法：
所有试剂均为市售，直接使用。所有反应均在氮气气氛下进行。通过使用适当的染色试剂进行TLC分析或ESI-LCMS(紫外吸收波长为254nm的正离子模式)分析对反应进行监测。
使用残留溶剂峰作为内标、以δppm来表示1H NMR化学位移。用于NMR谱图的数据记录如下：化学位移(δppm)、多重性(s＝单峰，br s＝宽单峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，dd＝双重双峰，m＝多重峰)、耦合常数(Hz)、整合。
NMR仪：
NMR谱图数据记录在Bruker(布鲁克)DRX 500MHz NMR或者Bruker DPX250MHz NMR(B114)上。
Bruker DRX 500MHz NMR的配置:
高性能数字核磁共振波谱仪、2-通道控制台、用于运行1.3版本Topspin软件的Windows XP主机工作站。
配备有：
牛津仪器超导磁体11.74特斯拉(500MHz质子共振频率)
B-VT3000温度控制器
GRASP II梯度光谱配件，用于二维脉冲序列的快速采集
氘梯度匀场锁场开关
带有自动调谐和匹配(BBI ATMA)功能的5毫米宽带反向双共振探头。允许在2H锁场和屏蔽z-梯度线圈下、在15N和31P频率范围内观察1H晶核脉冲/去耦。
Bruker DPX 250MHz NMR(B114)的配置:
Bruker250MHz高性能数字双通道核磁共振波谱仪控制台和用于运行3.5版本XwinNMR软件的Windows XP主机工作站。
配备有：
牛津仪器超导磁体5.87特斯拉(250MHz质子共振频率)
B-VT3300可变温度控制器单元
四核(QNP)切换探头，用于观察2H锁场下的1H、13C、19F和31P。
LCMS仪器:
3分钟LCMS：
色谱柱：Waters Atlantis dC18,2.1mm×50mm,3μm色谱柱。
HPLC系统，能够梯度洗脱且配有紫外检测器或二极管阵列检测器。
UV检测，通常在所选择的波长下或在一定扫描范围内进行。
MC检测，通常在一定质量范围内进行以包括目标质量和其他感兴趣的离子。
LC条件:
流速＝1.0ml/min
柱温＝40℃
时间(分钟) ％B
0 5
2.50 100
2.70 100
2.71 5
0.1％甲酸水溶液–流动相“A”
0.1％甲酸乙腈溶液–流动相“B”
7分钟LCMS
色谱柱：Waters Atlantis dC18,2.1mm×50mm,3μm色谱柱。
HPLC系统，能够梯度洗脱且配有紫外检测器或二极管阵列检测器。
UV检测，通常在所选择的波长下或在一定扫描范围内进行。
质谱检测，通常在一定质量范围内进行以包括目标质量和其他感兴趣的离子。
LC条件:
流速＝0.6ml/min
柱温＝40℃
0.1％甲酸水溶液–流动相“A”
0.1％甲酸乙腈溶液–流动相“B”
uPLC-MS,2分钟方法
仪器UPLC系统，能够梯度洗脱且配有紫外检测器或二极管阵列检测器。
色谱柱：Acquity UPLC BEH C18 2.1×50mm,1.7微米。
检测波长：215nm(扫描范围在210-400nm区域)。
利用足够的锥孔和毛细管电压、通常在m/z 150到800范围之间采集数据，以得到分子离子。ES+ve和-ve(锥孔电压：30V；毛细管电压：3.0KV)。
LC条件:
流速＝0.7ml/min
柱温＝环境温度
时间(分钟) ％B
0.00 5
1.5 100
1.7 100
1.8 5
流动相A：0.1％甲酸HPLC级水溶液：0.1％甲酸乙腈溶液(90:10)
流动相B：0.1％甲酸乙腈溶液：0.1％甲酸HPLC级水溶液(90:10)
实施例1-19
按照下述整体方案制备实施例1-19：
方案1
羧酸100的合成
9-氟-11,17-二羟基-10,13,16-三甲基-3-氧代-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氢-3H-环戊二烯并[a]菲-17基-羧酸100a
向装有H5IO6(1.12当量)的单颈圆底烧瓶中搅拌加入地塞米松(1当量)的EtOH(10体积)和水(4体积)的悬浮液。30分钟后，得到透明溶液，将其继续搅拌5小时，形成白色固体。反应过程用TLC(TLC系统：二氯甲烷：甲醇95:05，Rf＝0.1)监测。向反应混合物中加入水，并继续搅拌1小时。将悬浮液过滤，用水充分洗涤固体，并在真空中干燥，得到所需化合物，为白色固体(收率97％)。UPLC-MS(2分钟方法):MH+理论值m/z＝378实际值：m/z＝379,保留时间(Rt)＝1.06分钟(97％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.42(s,1H),7.29(d,J＝10.1Hz,1H),6.22(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.00(s,1H),5.24(dd,J＝3.8,1.8Hz,1H),4.63(s,1H),4.22–4.07(m,1H),2.82(ddd,J＝11.1,7.2,4.1Hz,1H),2.62(td,J＝13.6,6.1Hz,1H),2.41–2.24(m,2H),2.06–1.94(m,2H),1.81–1.72(m,1H),1.62(q,J＝11.6Hz,1H),1.55–1.46(m,4H),1.34(qd,J＝12.7,4.8Hz,1H),1.05(ddd,J＝17.2,8.8,4.6Hz,1H),1.00(s,3H),0.85(d,J＝7.1Hz,3H)。
6,9-二氟-11,17-二羟基-10,13,16-三甲基-3-氧代-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氢-3H-环戊二烯并[a]菲-17基-羧酸100b
向氟米松(205mg；0.5mmol)的甲醇(400mL)悬浮液中加入高碘酸钠(161mg；0.75mmol)水(300mL)溶液和2M硫酸(100mL)。在室温下搅拌18小时后，通过减压蒸发除去一半甲醇(210mL)，并加入冰水(800mL)。将悬浮液搅拌2小时，然后过滤，用水洗涤并干燥。收率＝175mg(88％)。HRMS–C21H26F2O5–理论值:397.1826，实际值:397.1823，偏差＝-0.8ppm。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δH ppm 0.86(d,J＝7.25Hz,3H)0.99(s,3H)1.09(ddd,J＝12.06,8.20,4.02Hz,1H)1.39-1.47(m,1H)1.49(s,3H)1.54(d,J＝13.71Hz,1H)1.65(q,J＝11.61Hz,1H)1.96-2.12(m,2H)2.21(dd,J＝6.38,4.97Hz,1H)2.34-2.49(m,1H)2.79-2.89(m,1H)4.09-4.18(m,1H)4.69(d,J＝5.36Hz,1H)5.33(d,J＝2.21Hz,1H)5.53-5.72(m,1H)6.10(s,1H)6.28(dd,J＝10.17,1.66Hz,1H)7.26(d,J＝10.25Hz,1H)12.42(br.s.,1H)。
(1S,2R,10S,11S,14R,15S,17S)-14,17-二羟基-2,15-二甲基-5-氧代四环-[8.7.0.02,7.011,15]十七碳-3,6二烯基-14-羧酸100c
向泼尼松龙(43g；0.119mol)的甲醇(860mL)和水(645mL)的悬浊液中，加入高碘酸钠(38g；0.179mol)，接着加入2M硫酸(215mL)。将混合物在室温(RT)下搅拌16小时，用旋转薄膜蒸发除去大部分甲醇，然后加入冷水(750mL)。过滤得到目标产物，用水洗涤并干燥。收率＝40.7g(98.8％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δH ppm 0.84-0.88(m,1H)0.90(s,3H)0.99(qd,J＝13.14,4.73Hz,1H)1.27(qd,J＝11.72,5.99Hz,1H)1.39(s,3H)1.44-1.57(m,2H)1.57-1.76(m,3H)1.94-2.07(m,2H)2.29(dd,J＝13.08,3.31Hz,1H)2.41-2.48(m,1H)2.52-2.58(m,1H)4.22-4.30(m,1H)4.64(d,J＝2.84Hz,1H)4.81(br.s.,1H)5.91(s,1H)6.16(dd,J＝10.09,1.89Hz,1H)7.32(d,J＝10.09Hz,1H)12.26(br.s.,1H)。
一般方法A：
将酸100(50mg；0.13mmol)和PyBOP(76mg；0.15mmol)溶解于DMF(0.5ml)中，并在室温下搅拌1-2小时。胺(0.20mmol–0.40mmol)，并且如果所述胺是盐，加入三乙胺(0.20–0.40mmol)，并在50℃–70℃下加热该反应。当完成时，将混合物冷却至室温，然后装载到一个2g碱性柱上，并用乙腈(3ml)洗脱。随后将洗脱液装载到一个2g的酸性柱上，并用乙腈进一步洗脱。将溶剂蒸发至干，如果需要的话，通过硅胶色谱法进行纯化。
实施例1
使用酸100a通过一般方法A合成，并利用25-75％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝48mg(72％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.49分钟(514；M+H)。HRMS 514.2751(C30H37F2NO4理论值为514.2769)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.22Hz,1H)7.18-7.25(m,2H)6.95-7.02(m,2H)6.28(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.08(s,1H)4.23(ddd,J＝10.99,3.81,1.83Hz,1H)3.26-3.34(m,1H)3.08-3.20(m,2H)2.67-2.77(m,1H)2.61-2.67(m,2H)2.35-2.51(m,2H)2.17-2.25(m,2H)1.85-1.92(m,1H)1.79-1.85(m,2H)1.71-1.79(m,1H)1.59(s,3H)1.49-1.57(m,1H)1.47(dd,J＝13.89,1.68Hz,1H)1.16-1.22(m,1H)1.10(s,3H)0.89(d,J＝7.17Hz,3H)。
实施例2
使用酸100a通过一般方法A合成，利用100％EtOAc通过快速色谱进行纯化。收率＝58mg(88％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：2.97min(497；M+H)。
HRMS 497.2797(C29H37FN2O4理论值为497.2816)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.42-8.47(m,1H)7.77(td,J＝7.67,1.75Hz,1H)7.42(d,J＝10.07Hz,1H)7.35(d,J＝7.78Hz,1H)7.23-7.28(m,1H)6.28(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.08(s,1H)4.20-4.28(m,1H)3.32-3.38(m,1H)3.08-3.25(m,2H)2.79-2.88(m,2H)2.67-2.77(m,1H)2.35-2.52(m,2H)2.16-2.27(m,2H)1.85-1.96(m,3H)1.70-1.80(m,1H)1.59(s,3H)1.47-1.57(m,2H)1.17-1.22(m,1H)1.10(s,3H)0.90(d,J＝7.32Hz,3H)。
实施例3
使用酸100a通过一般方法A合成，利用75％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝46mg(78％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.08min(512；M+H)。HRMS 512.2797(C30H38FNO5理论值为512.2812)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.07Hz,1H)7.05-7.10(m,1H)6.99(td,J＝7.71,1.68Hz,1H)6.71-6.78(m,2H)6.28(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.08(s,1H)4.24(ddd,J＝11.02,3.78,1.83Hz,1H)3.07-3.19(m,2H)2.59-2.77(m,3H)2.35-2.52(m,2H)2.15-2.27(m,2H)1.85-1.93(m,1H)1.70-1.84(m,3H)1.59(s,3H)1.47-1.57(m,2H)1.25-1.35(m,1H)1.16-1.23(m,1H)1.10(s,3H)0.87-0.93(m,3H)。
实施例4
利用75％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝53mg(85％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.27分钟(542；M+H)。HRMS 542.2909(C31H40FNO6理论值为542.2918)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.07Hz,1H)6.80-6.90(m,4H)6.28(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.08(s,1H)4.19(ddd,J＝10.99,3.81,1.83Hz,1H)3.98-4.03(m,2H)3.73(s,3H)3.43-3.50(m,1H)3.33-3.39(m,1H)3.13(ddd,J＝11.18,7.21,4.20Hz,1H)2.67-2.77(m,1H)2.36-2.51(m,2H)2.15-2.24(m,2H)1.94-2.02(m,2H)1.85-1.92(m,1H)1.70-1.80(m,1H)1.59(s,3H)1.52(qd,J＝12.92,5.04Hz,1H)1.45(dd,J＝13.96,1.60Hz,1H)1.20(ddd,J＝12.32,8.28,4.43Hz,1H)1.09(s,3H)0.89(d,J＝7.17Hz,3H)。
实施例5
使用酸100a通过一般方法A合成，利用30-60％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝34mg(51％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.26分钟(516；M+H)。HRMS 516.2554(C29H35F2NO5理论值为516.2562)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.07Hz,1H)6.97-7.03(m,2H)6.90-6.97(m,2H)6.28(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.07(s,1H)4.22(ddd,J＝10.91,3.81,1.91Hz,1H)3.98-4.07(m,2H)3.66(dt,J＝13.89,5.72Hz,1H)3.50-3.58(m,1H)3.08-3.18(m,1H)2.66-2.77(m,1H)2.35-2.51(m,2H)2.15-2.25(m,2H)1.84-1.92(m,1H)1.71-1.81(m,1H)1.43-1.62(m,5H)1.16-1.22(m,1H)1.09(s,3H)0.89(d,J＝7.17Hz,3H)。
实施例6
使用酸100a通过一般方法A合成，利用30-60％EtOAc：庚烷作为洗脱剂，通过快速色谱进行纯化。收率＝46mg(67％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.35分钟(530；M+H)。HRMS530.2729(C30H37F2NO5理论值为530.2718)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.22Hz,1H)6.95-7.02(m,2H)6.88-6.95(m,2H)6.28(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.08(s,1H)4.21(ddd,J＝10.99,3.74,1.75Hz,1H)3.97-4.06(m,2H)3.41-3.50(m,1H)3.36(dt,J＝13.54,6.73Hz,1H)3.07-3.18(m,1H)2.66-2.77(m,1H)2.34-2.51(m,2H)2.14-2.25(m,2H)1.93-2.03(m,2H)1.83-1.92(m,1H)1.69-1.80(m,1H)1.42-1.63(m,5H)1.16-1.22(m,1H)1.09(s,3H)0.89(d,J＝7.32Hz,3H)。
实施例7
使用酸100a通过一般方法A合成，利用50-75％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝43mg(63％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.22分钟(528；M+H)。HRMS 528.2775(C30H38FNO6理论值为528.2761)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.07Hz,1H)6.86-6.91(m,2H)6.81-6.86(m,2H)6.28(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.07(s,1H)4.22(ddd,J＝10.91,3.66,1.75Hz,1H)3.95-4.05(m,2H)3.74(s,3H)3.64(dt,J＝13.85,5.66Hz,1H)3.52(dt,J＝13.89,5.95Hz,1H)3.13(ddd,J＝11.10,7.21,4.12Hz,1H)2.66-2.77(m,1H)2.35-2.52(m,2H)2.14-2.25(m,2H)1.85-1.92(m,1H)1.71-1.81(m,1H)1.43-1.61(m,5H)1.16-1.22(m,1H)1.09(s,3H)0.90(d,J＝7.32Hz,3H).
实施例7的可替代合成方法：
在室温下，向羧酸100(1.0当量)的DCM(10体积)溶液中加入TEA(3.0当量)，和EDC.HCl(1.2当量)，将反应搅拌10分钟。然后将4-甲氧基苯氧基乙胺(1.2当量)和HOBT(0.1当量)加入到上述混合物中。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用DCM稀释并用碳酸氢钠溶液洗涤，然后用HCl溶液分离有机层，经硫酸钠干燥并浓缩，得到白色固体。对残余物使用硅胶柱色谱，以DCM：MeOH(98:02)作为洗脱剂，分离得到目标化合物(收率78％)。LC-MS(3分钟方法):MH+理论值:m/z＝528实际值:m/z＝527,保留时间＝2.83分钟(97％)。化合物为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO)1H NMR(300MHz,DMSO)δ0.79(d,J＝7.2Hz,3H),0.94(s,3H),1.12–0.99(m,1H),1.46–1.21(m,2H),1.48(s,3H),1.61(q,J＝11.6Hz,1H),1.85–1.69(m,1H),2.14–1.94(m,2H),2.44–2.18(m,2H),2.70–2.53(m,1H),3.12–2.92(m,1H),3.42–3.32(m,1H),3.56–3.42(m,1H),3.68(s,3H),3.90(t,J＝6.2Hz,2H),4.10(d,J＝10.6Hz,1H),4.74(s,1H),5.23(d,J＝3.0Hz,1H),5.99(s,1H),6.21(dd,J＝10.1,1.6Hz,1H),6.94–6.80(m,4H),7.29(d,J＝10.1Hz,1H),7.49(t,J＝5.7Hz,1H)。
实施例8
(i)
向NaH(60％分散在矿物油中，2.5mmol)的二氧己环(10mL)溶液中加入2-羟基乙胺(2.5mmol)，并加热回流30分钟。反应冷却至室温，加入2-氯吡啶并加热至80℃反应18小时。反应冷却至室温并浓缩。加入水，然后用DCM(×3)萃取混合物。合并有机相,用Na2SO4干燥，浓缩，并以5-10％MeOH：DCM进行快速色谱纯化。收率＝211mg(61％)，浅黄色油状物。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 8.08-8.20(m,1H)7.51-7.62(m,1H)6.86(dd,J＝6.49,5.72Hz,1H)6.75(d,J＝8.24Hz,1H)4.32(t,J＝5.34Hz,2H)3.07(t,J＝5.26Hz,2H)。
(ii)
使用酸100a和按照步骤(i)制备的胺，通过一般方法A合成，以50-70％EtOAc：庚烷进行快速色谱纯化。收率＝53mg(82％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：3.93分钟(499；M+H)。HRMS 499.2613(C28H35FN2O5理论值为499.2608)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.12(dd,J＝4.73,1.37Hz,1H)7.65-7.73(m,1H)7.41(d,J＝10.07Hz,1H)6.96(dd,J＝6.48,5.72Hz,1H)6.83(d,J＝8.39Hz,1H)6.28(dd,J＝10.07,1.53Hz,1H)6.08(s,1H)4.32-4.43(m,2H)4.20(dd,J＝10.91,1.75Hz,1H)3.69(dt,J＝13.92,5.78Hz,1H)3.53(dt,J＝13.92,5.70Hz,1H)3.07-3.16(m,1H)2.72(td,J＝13.58,5.95Hz,1H)2.34-2.52(m,2H)2.13-2.24(m,2H)1.84-1.92(m,1H)1.75(q,J＝11.75Hz,1H)1.41-1.62(m,5H)1.16-1.22(m,1H)1.08(s,3H)0.89(d,J＝7.32Hz,3H)。
实施例9
(i)
在室温下，向NaH(60％分散在矿物油中，5.0mmol)加入DMSO(5mL)。然后将苯酚(5.0mmol)的DMSO(5mL)溶液缓慢加入，并在室温下搅拌2小时。加入溴(5.0mmol)的DMSO(5mL)溶液，并将反应在室温下搅拌16小时。反应倒入冰/水(100mL)中，过滤收集沉淀物。将沉淀物溶解于DCM中，经硫酸钠干燥并浓缩。以DCM作为洗脱剂，对粗产物进行快速色谱纯化。收率＝849mg(57％)，白色固体。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.81-7.88(m,2H)7.69-7.77(m,2H)7.50(d,J＝8.70Hz,2H)6.86(d,J＝8.70Hz,2H)4.08(t,J＝5.95Hz,2H)3.93(t,J＝6.79Hz,2H)2.22(quin,J＝6.37Hz,2H)。
(ii)
将邻苯二甲酰亚胺(1.69mmol)和水合肼(3.39mmol)在EtOH(10mL)中加热回流4小时。反应浓缩，并在EtOAc和5％氢氧化钠溶液之间分配。分离有机物，经Na2SO4干燥。过滤，加入4N HCl的二氧己环溶液(2.5mL)。搅拌10分钟，浓缩并干燥。收率＝381mg(88％)，灰白色固体。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.18(br.s.,3H)7.66(d,J＝8.70Hz,2H)7.13(d,J＝8.70Hz,2H)4.16(t,J＝6.18Hz,2H)2.87-3.00(m,2H)2.06(quin,J＝6.75Hz,2H)。
(iii)
使用酸100a和按照步骤(ii)制备的胺，通过一般方法A合成，利用50％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝33mg(44％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.66分钟(580；M+H)。HRMS 580.2675(C31H37F4NO5理论值为580.2686)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.57(d,J＝8.70Hz,2H)7.40(d,J＝10.22Hz,1H)7.08(d,J＝8.70Hz,2H)6.28(dd,J＝10.07,1.53Hz,1H)6.08(s,1H)4.20(dd,J＝10.91,1.60Hz,1H)4.13(t,J＝6.10Hz,2H)3.43-3.51(m,1H)3.34-3.42(m,1H)3.07-3.17(m,1H)2.72(td,J＝13.62,6.03Hz,1H)2.35-2.51(m,2H)2.15-2.25(m,2H)1.98-2.09(m,2H)1.84-1.93(m,1H)1.75(q,J＝11.75Hz,1H)1.41-1.61(m,5H)1.16-1.22(m,1H)1.09(s,3H)0.89(d,J＝7.32Hz,3H)。
实施例10
(i)
向NaH(60％分散在矿物油中，2.5mmol)的二氧己环(10mL)溶液中加入2-羟基乙胺(2.5mmol)，并在室温下搅拌30分钟。加入2-氯苯并恶唑，加热至80℃反应16小时。反应冷却至室温并浓缩。加入水，然后用EtOAc(×3)萃取混合物。合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物用于酰胺偶联反应中。
LCMS(3分钟方法):1.01分钟(179；M+H)
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.20-7.30(m,2H)7.14(td,J＝7.61,1.22Hz,1H)6.95-7.07(m,1H)3.67-3.81(m,2H)3.43-3.56(m,2H)。
(ii)
使用酸100a和按照步骤(i)制备的胺，通过一般方法A合成，以60％EtOAc：庚烷进行快速色谱，然后通过质量导向的制备HPLC纯化。收率＝15mg(21％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.26分钟(539；M+H)。HRMS 539.2548(C30H35FN2O6理论值为539.2557)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝8.09Hz,1H)7.32-7.38(m,2H)7.28(t,J＝7.55Hz,1H)7.14-7.22(m,1H)6.28(d,J＝10.07Hz,1H)6.06(s,1H)4.35-4.43(m,1H)4.28-4.35(m,1H)4.11(d,J＝10.22Hz,1H)3.72-3.85(m,2H)2.91-3.02(m,1H)2.69(td,J＝13.50,5.80Hz,1H)2.31-2.47(m,2H)1.99-2.15(m,2H)1.85(d,J＝12.82Hz,1H)1.66(q,J＝11.80Hz,1H)1.42-1.60(m,5H)1.16(ddd,J＝12.05,8.16,4.04Hz,1H)1.04(s,3H)0.88(d,J＝7.17Hz,3H)。
实施例11
使用酸100a，通过一般方法A合成，利用50％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝51mg(79％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.39分钟(496；M+H)。HRMS 496.2870(C30H38FNO4理论值为496.2863)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.22Hz,1H)7.23-7.28(m,2H)7.18-7.23(m,2H)7.13-7.18(m,1H)6.28(dd,J＝10.07,1.68Hz,1H)6.08(s,1H)4.23(dd,J＝10.99,1.68Hz,1H)3.27-3.35(m,1H)3.07-3.21(m,2H)2.71(td,J＝13.54,6.03Hz,1H)2.65(t,J＝7.78Hz,2H)2.35-2.51(m,2H)2.15-2.24(m,2H)1.80-1.92(m,3H)1.75(q,J＝11.80Hz,1H)1.58(s,3H)1.44-1.57(m,2H)1.16-1.23(m,1H)1.10(s,3H)0.90(d,J＝7.17Hz,3H)。
实施例12
(i)
向NaH(60％分散在矿物油中，12.0mmol)的二氧己环(10mL)溶液中冷却加入2-氨基乙醇(33.1mmol)。反应在室温下搅拌1小时，然后加入4-氯吡啶盐酸盐(4.0mmol)并在室温下搅拌16小时。反应在60。下加热2小时，然后浓缩。残余物在EtOAc(4mL)和水(4mL)之间分配，然后加入二碳酸二叔丁酯(Boc2O)(10.0mmol)并搅拌2小时。加入更多的水和EtOAc，并分离有机物，用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。利用EtOAc通过快速色谱纯化粗产物。收率＝260mg(27％)，无色油状物。
LCMS(3分钟方法):1.00分钟(239；M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 8.43(d,J＝6.10Hz,2H)6.81(d,J＝6.10Hz,2H)5.00(br.s.,1H)4.08(t,J＝5.11Hz,2H)3.56(q,J＝5.24Hz,2H)1.45(s,9H)。
(ii)
将Boc-保护的胺(0.96mmol)加入4N HCl的二氧己环溶液中，室温下搅拌6小时。浓缩。收率＝200mg(99％)，白色固体。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.79(d,J＝7.17Hz,2H)8.59(br.s.,3H)7.58(d,J＝7.02Hz,2H)4.59(t,J＝4.96Hz,2H)3.28(d,J＝4.58Hz,2H)。
(iii)
使用酸100a和按照步骤(ii)制备的胺，通过一般方法A合成，利用5-7.5％MeOH:DCM通过快速色谱进行纯化。收率＝35mg(54％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：2.92分钟(499；M+H)。HRMS 499.2609(C28H35FN2O5理论值为499.2608)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.39(d,J＝6.10Hz,2H)7.57(t,J＝5.80Hz,1H)7.31(d,J＝10.22Hz,1H)6.99(d,J＝6.26Hz,2H)6.22(dd,J＝10.15,1.60Hz,1H)6.00(s,1H)5.24(d,J＝3.36Hz,1H)4.75(s,1H)4.05-4.14(m,3H)3.49-3.59(m,1H)3.38-3.46(m,1H)2.97-3.07(m,1H)2.56-2.67(m,1H)2.25-2.41(m,2H)1.99-2.10(m,2H)1.73-1.81(m,1H)1.62(q,J＝11.55Hz,1H)1.49(s,3H)1.28-1.45(m,2H)1.06(ddd,J＝11.90,8.09,4.12Hz,1H)0.94(s,3H)0.80(d,J＝7.17Hz,3H)。
实施例13
使用酸100a，通过一般方法A合成，以50-75％EtOAc：庚烷进行快速色谱，然后通过质量导向制备HPLC进行纯化。收率＝41mg(57％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.17分钟(556；M+H)。HRMS 556.3071(C32H42FNO6理论值为556.3074)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.57(t,J＝5.49Hz,1H)7.41(d,J＝10.22Hz,1H)6.79-6.90(m,2H)6.76(d,J＝8.24Hz,1H)6.28(d,J＝10.22Hz,1H)6.08(s,1H)4.18-4.29(m,1H)3.82(s,3H)3.79(s,3H)3.07-3.22(m,2H)2.72(td,J＝13.47,5.72Hz,1H)2.60(t,J＝7.63Hz,2H)2.34-2.53(m,2H)2.13-2.25(m,2H)1.69-1.93(m,4H)1.41-1.63(m,5H)1.20(ddd,J＝12.13,8.32,4.12Hz,1H)1.10(s,3H)0.89(d,J＝7.32Hz,3H)。
实施例14
使用酸100a，通过一般方法A合成，利用50％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝66mg(98％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.41分钟(514；M+H)。HRMS514.2769(C30H37F2NO4理论值为514.2769)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.22Hz,1H)7.24-7.30(m,1H)7.03(d,J＝7.63Hz,1H)6.96(d,J＝10.22Hz,1H)6.89(td,J＝8.58,2.37Hz,1H)6.28(dd,J＝10.07,1.53Hz,1H)6.08(s,1H)4.23(dd,J＝11.06,1.60Hz,1H)3.26-3.35(m,1H)3.07-3.22(m,2H)2.63-2.77(m,3H)2.35-2.52(m,2H)2.14-2.26(m,2H)1.70-1.93(m,4H)1.59(s,3H)1.43-1.57(m,2H)1.17-1.22(m,1H)1.10(s,3H)0.90(d,J＝7.17Hz,3H)。
实施例15
(i)
步骤同实施例9中用于制备胺的步骤。收率＝1.069g(69％)，白色固体。LCMS(3分钟方法)：2.23分钟(312；M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.85(dd,J＝5.34,3.05Hz,2H)7.72(dd,J＝5.42,3.13Hz,2H)7.14(t,J＝8.24Hz,1H)6.49(dd,J＝8.24,2.14Hz,1H)6.42(dd,J＝8.09,1.98Hz,1H)6.37(t,J＝2.21Hz,1H)4.02(t,J＝6.03Hz,2H)3.91(t,J＝6.94Hz,2H)3.75(s,3H)2.19(quin,J＝6.45Hz,2H)。
(ii)
步骤同实施例9中用于制备胺的步骤。收率＝705mg(96％)，白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.19(br.s.,3H)7.17(t,J＝8.09Hz,1H)6.33-6.66(m,3H)4.04(t,J＝6.26Hz,2H)3.72(s,3H)2.92(br.s.,2H)1.95-2.09(m,2H)。
(iii)
使用酸100a和按照步骤(ii)制备的胺，通过一般方法A合成，利用30-50％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝49mg(70％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.35分钟(542；M+H)。HRMS 542.2927(C31H40FNO6理论值为542.2918)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.07Hz,1H)7.09-7.20(m,1H)6.45-6.56(m,3H)6.28(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.08(s,1H)4.20(dd,J＝10.91,1.91Hz,1H)4.04(t,J＝6.03Hz,2H)3.75(s,3H)3.42-3.52(m,1H)3.36(dt,J＝13.47,6.62Hz,1H)3.08-3.18(m,1H)2.67-2.77(m,1H)2.35-2.52(m,2H)2.15-2.27(m,2H)1.95-2.02(m,2H)1.84-1.92(m,1H)1.70-1.81(m,1H)1.59(s,3H)1.43-1.57(m,2H)1.16-1.22(m,1H)1.09(s,3H)0.89(d,J＝7.32Hz,3H)。
实施例16
(i)
步骤同实施例9中用于制备胺的步骤。利用0.5MeOH:DCM通过快速色谱进行纯化。收率＝1.178g(69％)，白色固体。LCMS(3分钟方法):2.08分钟(342；M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.85(dd,J＝5.49,3.05Hz,2H)7.72(dd,J＝5.34,3.05Hz,2H)6.74(d,J＝8.70Hz,1H)6.39(d,J＝2.59Hz,1H)6.34(dd,J＝8.70,2.59Hz,1H)3.99(t,J＝5.95Hz,2H)3.92(t,J＝6.87Hz,2H)3.82(s,3H)3.80(s,3H)2.17(quin,J＝6.41Hz,2H)。
(ii)
步骤同实施例9中用于制备胺的步骤。收率＝802mg(95％)，粉红色固体。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.22(br.s.,3H)6.84(d,J＝8.85Hz,1H)6.59(d,J＝2.75Hz,1H)6.42(dd,J＝8.77,2.82Hz,1H)4.00(t,J＝6.18Hz,2H)3.73(s,3H)3.67(s,3H)2.85-2.98(m,2H)2.02(quin,J＝6.79Hz,2H)。
(iii)
使用酸100a，通过一般方法A合成，利用50-70％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝43mg(58％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.09分钟(572；M+H)。HRMS 572.3008(C32H42FNO7理论值为572.3024)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.40(d,J＝10.22Hz,1H)6.84(d,J＝8.85Hz,1H)6.62(d,J＝2.75Hz,1H)6.46(dd,J＝8.70,2.75Hz,1H)6.28(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.08(s,1H)4.19(ddd,J＝10.95,3.62,1.75Hz,1H)4.02(t,J＝5.87Hz,2H)3.79(s,3H)3.76(s,3H)3.43-3.52(m,1H)3.37(dt,J＝13.35,6.60Hz,1H)3.08-3.19(m,1H)2.66-2.78(m,1H)2.35-2.53(m,2H)2.15-2.28(m,2H)1.95-2.01(m,2H)1.84-1.93(m,1H)1.71-1.81(m,1H)1.58(s,3H)1.43-1.57(m,2H)1.20(ddd,J＝12.44,8.39,4.50Hz,1H)1.09(s,3H)0.89(d,J＝7.32Hz,3H)。
实施例17
(i)
步骤同实施例9中用于制备胺的步骤。收率＝1.659g(98％)，白色固体。LCMS(3分钟方法)：2.18分钟(340；M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.92-7.97(m,2H)7.82-7.87(m,2H)7.70-7.76(m,2H)6.78-6.83(m,2H)4.09(t,J＝5.95Hz,2H)3.93(t,J＝6.79Hz,2H)3.88(s,3H)2.22(quin,J＝6.41Hz,2H)。
(ii)
步骤同实施例9中用于制备胺的步骤。收率＝576mg(96％)，白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.16(br.s.,3H)7.91(d,J＝8.85Hz,2H)7.05(d,J＝8.85Hz,2H)4.15(t,J＝6.10Hz,2H)3.81(s,3H)2.87-3.02(m,2H)2.06(quin,J＝6.75Hz,2H)。
(iii)
使用酸100a，通过一般方法A合成，利用60％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝144mg(97％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.28分钟(570；M+H)。HRMS 570.2861(C32H40FNO7理论值为570.2867)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.91-8.01(m,2H)7.40(d,J＝10.22Hz,1H)6.96-7.06(m,2H)6.28(dd,J＝10.15,1.75Hz,1H)6.08(s,1H)4.19(dd,J＝10.99,1.98Hz,1H)4.13(t,J＝6.10Hz,2H)3.87(s,3H)3.42-3.51(m,1H)3.38(dt,J＝13.47,6.77Hz,1H)3.12(ddd,J＝11.14,7.17,4.27Hz,1H)2.66-2.77(m,1H)2.35-2.52(m,2H)2.14-2.25(m,2H)1.99-2.08(m,2H)1.84-1.93(m,1H)1.75(q,J＝12.31Hz,1H)1.59(s,3H)1.52(qd,J＝12.92,5.19Hz,1H)1.44(dd,J＝13.89,1.53Hz,1H)1.16-1.23(m,1H)1.08(s,3H)0.89(d,J＝7.32Hz,3H)。
实施例18
(i)
步骤同实施例9中用于制备胺的步骤。收率＝1.14g(70％)，黄色油状物。LCMS(3分钟方法)：2.21分钟(326；M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3).ppm 1.75-1.96(m,4H)3.72-3.82(m,5H)3.95(t,J＝6.15Hz,2H)6.82(s,4H)7.72(dd,J＝5.44,3.07Hz,2H)7.85(dd,J＝5.36,3.00Hz,2H)。
(ii)
步骤同实施例9中用于制备胺的步骤。收率＝560mg(69％)，浅黄色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 1.59-1.80(m,4H)2.72-2.94(m,2H)3.68(s,3H)3.90(t,J＝5.83Hz,2H)6.85(s,4H)7.97(br.s.,2H)。
(iii)
使用酸100a，通过一般方法A合成，利用40-60％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝43mg(％)，白色固体。LCMS(7分钟方法)：4.30分钟(556；M+H)。HRMS 556.3076(C32H42FNO6理论值为556.3074)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 0.91(d,J＝7.25Hz,3H)1.11(s,3H)1.18-1.25(m,1H)1.42-1.58(m,2H)1.61(s,3H)1.66-1.86(m,5H)1.86-1.98(m,1H)2.13-2.28(m,2H)2.34-2.54(m,2H)2.66-2.80(m,1H)3.09-3.28(m,2H)3.34-3.41(m,1H)3.75(s,3H)3.97(t,J＝6.15Hz,2H)4.20-4.28(m,1H)6.10(s,1H)6.30(dd,J＝10.09,1.89Hz,1H)6.74-6.94(m,4H)7.34-7.50(m,1H)7.43(d,J＝10.09Hz,1H)7.68(t,1H)7.62-7.75(m,1H)。
实施例19
将实施例17的酯(40mg，0.07mmol)和LiOH.H2O(9mg，0.21mmol)溶解于1mL的MeOH/H2O(1:1)溶液中。将反应液在室温下搅拌16小时。向溶液中加入1当量LiOH.H2O(3mg，0.07mmol)中，将溶液在室温下再搅拌24小时。最后，加入1当量LiOH.H2O(3mg，0.07mmol)中，在室温下搅拌溶液，通过LCMS监测，直到反应完成(72小时)。在真空中除去MeOH，用HCl(1M)将水溶液酸化至pH～4。过滤沉淀物，用水洗涤并在真空下干燥。收率＝21mg(54％)，白色固体。LCMS(3分钟方法)：1.84分钟(556；M+H)。HRMS 556.2698(C31H38FNO7理论值为556.2711)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 0.80(d,J＝7.25Hz,3H)0.94(s,3H)1.06(br.s.,1H)1.32-1.44(m,2H)1.49(s,3H)1.61(q,J＝12.03Hz,1H)1.77(d,J＝6.15Hz,1H)1.87-1.94(m,2H)2.03-2.09(m,2H)2.29-2.38(m,2H)2.58-2.66(m,2H)3.02(br.s.,1H)3.17-3.32(m,2H)4.03-4.14(m,3H)4.72(s,1H)5.26(br.s.,1H)6.01(s,1H)6.23(dd,J＝10.09,1.58Hz,1H)7.00(d,J＝8.51Hz,2H)7.30(d,J＝10.09Hz,1H)7.56(t,J＝5.83Hz,1H)7.89(d,J＝8.67Hz,2H)。
实施例20
(i)
将氢化钠(60％悬浮在油中；6.4g；0.16mol)加入到DMSO(100mL)中，搅拌直到气体停止逸出。冷却滴加4-羟基苯甲酸甲酯(24.3g；0.16mol)的DMSO(50mL)溶液，1小时加完，在室温继续搅拌1小时。加入N-(3-溴丙基)邻苯二甲酰亚胺(42.9g；0.16mol)的DMSO(150mL)溶液，5分钟加完，将反应在室温下搅拌3.5小时，然后倒入水(2.1L)中，搅拌10分钟，过滤，然后用水洗涤。将固体溶解于DCM(300ml)中，分离并干燥(MgSO4)。过滤然后蒸发后得到产物。收率＝54.3g(100％)。LCMS(3分钟方法):2.17分钟-308(M-OMe),326(M-Me+H),362(M+Na)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm2.07(quin,J＝6.27Hz,2H)3.76(t,J＝6.70Hz,2H)3.79(s,3H)4.09(t,J＝5.91Hz,2H)6.88(d,J＝8.83Hz,2H)7.80-7.88(m,6H)。
(ii)
将4-[3-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)丙氧基]苯甲酸甲酯(60g；0.18mol)溶解于乙醇(1L)中，与水合肼(11mL；0.35mol)加热回流。4小时后，用旋转薄膜蒸发除去溶剂，残余物在EtOAc(400mL)和1N NaOH(400mL)之间分配，通过过滤除去不溶解的固体。分离各层，再用1N NaOH(50mL)洗涤有机相，然后干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发至剩下目标化合物。
收率＝33.8g(91％)。LCMS(3分钟方法)：1.13分钟-210(M+H)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δHppm 1.80(quin,J＝6.54Hz,2H)2.69(t,J＝6.70Hz,2H)3.80(s,3H)4.10(t,J＝6.46Hz,2H)7.03(d,J＝8.83Hz,2H)7.89(d,J＝8.83Hz,2H)。
(iii)
将酸100c(1.0g；2.89mmol)溶解于无水DMF(5mL)中，加入PyBOP(1.65g；3.18mmol)。将反应物在室温下搅拌1小时后，加入4-(3-氨基丙氧基)苯甲酸甲酯(1.21g；5.78mmol)，并在60℃加热2.5小时。将混合物冷却并加入水(20mL)。倾出上清液，并用另外的水(20ml)洗涤残余油。将残余物溶解于EtOAc(20mL)中，并用1N的HCl(2×20mL)和饱和碳酸氢钠(20mL)洗涤。蒸发后，残余物以50-80％的EtOAc/庚烷作为洗脱剂，通过硅胶色谱进行纯化，然后依次用乙腈和甲醇重结晶。很难将晶体中的残留溶剂减少至6％以下。收率＝840mg(54％)。LCMS(7分钟方法):4.04分钟–520(M-OH),538(M+H),560(M+Na)。HRMS–C31H39NO7–理论值:538.2805,实际值:538.2792,偏差＝-2.4ppm。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δH ppm 0.84(s,3H)0.87(dd,J＝11.03,3.31Hz,1H)1.00(qd,J＝12.82,3.78Hz,1H)1.22-1.34(m,1H)1.39(s,3H)1.40-1.47(m,1H)1.50(dd,J＝13.79,1.97Hz,1H)1.53-1.67(m,2H)1.77(dd,J＝13.79,3.39Hz,1H)1.84-1.95(m,2H)1.95-2.06(m,2H)2.28(dd,J＝13.00,3.23Hz,1H)2.52-2.58(m,1H)2.60-2.70(m,1H)3.17-3.23(m,1H)3.29(dq,J＝13.10,6.61Hz,1H)3.81(s,3H)4.07(t,J＝6.38Hz,2H)4.20-4.27(m,1H)4.62(d,J＝2.99Hz,1H)5.05(s,1H)5.91(s,1H)6.16(dd,J＝10.09,1.73Hz,1H)7.03(d,J＝8.99Hz,2H)7.32(d,J＝10.09Hz,1H)7.62(t,J＝5.91Hz,1H)7.91(d,J＝8.83Hz,2H)。
实施例21
(i)
将4-甲氧基苯酚(5.0g；40mmol)，溴乙腈(4.8mL；69mmol)和碳酸钾(27.8g；202mmol)溶解/悬浮于THF(100ml)中，在50℃下加热6小时。通过旋转薄膜蒸发除去大部分的溶剂，然后加入水(50ml)，并用EtOAc(50mL)萃取。将有机相用碳酸氢钠溶液(75mL)和盐水洗涤，然后蒸发至干，并在庚烷(30ml)中加热该残余油。冷却后，倾出上清液，以DCM/庚烷(50-100％)作为洗脱剂，通过硅胶色谱纯化残余物，得到目标化合物。收率＝3.74g(57％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δH ppm 3.80(s,3H)4.72(s,2H)6.86-6.91(m,2H)6.94-6.99(m,2H)。
(ii)
将2-(4-甲氧基苯氧基)乙腈(3.74g；22.9mmol)溶解于乙醚(37mL)中，然后在冰上冷却。滴加氢化铝锂(1M分散在THF中；68.8mL；68.8mmol)溶液，在45分钟内完成，除去冰浴，将反应在室温下搅拌1小时。然后按顺序小心地加入水(2.6mL)、15％NaOH(2.6mL)和更多的水(7.8mL)。将固体滤出，用THF洗涤。通过旋转薄膜蒸发除去溶剂，将残余物溶于EtOAc(30ml)中。将其用1N的HCl(2×20mL)萃取，并用4N的NaOH(15mL)碱化合并的酸层。将其用EtOAc(2×25mL)萃取，干燥(Na2SO4)，过滤，并通过旋转薄膜蒸发除去溶剂，分离得到油状的目标化合物。收率＝2.21g(58％)。LCMS(3分钟方法):0.80分钟-168(M+H)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δH ppm 3.06(t,J＝5.19Hz,2H)3.78(s,3H)3.95(t,J＝5.19Hz,2H)6.82-6.88(m,4H)。
(iii)
将酸100c(1.5g；4.33mmol)溶解于无水DMF(7.5mL)中，然后加入PyBOP(2.48g；4.77mmol)。将反应物在室温下搅拌1小时后，加入1-(2-氨基乙氧基)-4-甲氧基苯(1.09g；6.50mmol)和三乙胺(0.60mL；4.33mmol)，并在60℃加热1.5小时。将混合物冷却并加入1N的HCl(20mL)和水(20mL)。倾出上清液，并用另外的水(10ml)洗涤残余油。将残余物溶解于EtOAc(50mL)中，然后用1N的HCl(30ml)和饱和碳酸氢钠(20mL)洗涤。蒸发后，残余物以50-80％的EtOAc/庚烷作为洗脱剂，通过硅胶色谱法纯化两次，得到目标化合物，呈奶油泡沫状物。收率＝1.61g(75％)。LCMS(7分钟方法):3.94分钟–478(M-OH),496(M+H)。HRMS–C29H37NO6–理论值:496.2699,实际值:496.27,偏差＝0.2ppm。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δH ppm 0.85(s,3H)0.86-0.90(m,1H)1.00(qd,J＝13.02,4.12Hz,1H)1.30(qd,J＝11.27,6.03Hz,1H)1.39(s,3H)1.41-1.48(m,1H)1.52(dd,J＝13.81,2.21Hz,1H)1.54-1.67(m,2H)1.76(dd,J＝13.81,3.43Hz,1H)1.96-2.06(m,2H)2.29(dd,J＝13.20,3.13Hz,1H)2.52-2.57(m,1H)2.60-2.70(m,1H)3.36-3.41(m,1H)3.41-3.49(m,1H)3.69(s,3H)3.90(t,J＝6.41Hz,2H)4.22-4.29(m,1H)4.60(d,J＝3.20Hz,1H)5.12(s,1H)5.91(s,1H)6.16(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.83-6.87(m,2H)6.87-6.91(m,2H)7.33(d,J＝10.07Hz,1H)7.56(t,J＝5.95Hz,1H)。
实施例22
将酸100c(1.038g；3.0mmol)溶解于无水DMF(15mL)中，加入PyBOP(1.794g；3.45mmol)。将反应物在室温下搅拌1小时后，加入实施例15中制备的1-(3-氨基丙氧基)-3-甲氧基苯(814mg；4.5mmol)和三乙胺(0.85mL；5mmol)，然后在60℃加热2.5小时。将混合物冷却，并在1N的HCl(50mL)和EtOAc(100mL)之间分配。用EtOAc(100mL)将水相再萃取一次。将合并的有机层用饱和NaHCO3(50mL)洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤并真空蒸发，得到棕色油状物，其经过色谱柱(60％EtOAc-40％庚烷)纯化。终产物通过另一个色谱柱(用含1-4％MeOH的DCM洗脱)进一步纯化，得到白色泡沫状物。收率＝820mg(53％)。LCMS(7分钟方法):4.25分钟-510(M++H)和532(M++23)。HRMS–C30H39NO6–理论值:510.2856,实际值:510.2869,偏差＝2.5ppm。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δH ppm 1.01(s,3H)1.04-1.19(m,2H)1.24-1.33(m,1H)1.40-1.59(m,6H)1.61-1.68(m,1H)1.76-1.86(m,1H)1.95(dd,J＝14.19,3.78Hz,1H)1.99-2.06(m,1H)2.07-2.16(m,1H)2.33(dd,J＝13.40,3.31Hz,1H)2.46(s,1H)2.51-2.62(m,1H)2.74-2.85(m,1H)3.38-3.48(m,1H)3.54(dq,J＝13.16,6.44Hz,1H)3.76-3.83(m,2H)4.00-4.09(m,1H)4.40(t,J＝2.84Hz,1H)6.01(s,1H)6.26(dd,J＝10.09,1.89Hz,1H)6.43-6.48(m,1H)6.52(ddd,J＝15.76,8.20,2.21Hz,1H)6.94(t,J＝5.52Hz,1H)7.20(t,J＝8.35Hz,1H)7.26(d,J＝10.09Hz,1H)。
实施例23-47
按照下述整体方案制备实施例23-47：
方案2
氨基噻唑200的合成：
(i)甲基磺酸2-(9-氟-11,17-二羟基-10,13,16-三甲基-3-氧代
-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氢-3H-环戊二烯并[a]菲-17基-2-氧代-乙基酯
将地塞米松(3g；7.65mmol)溶解于吡啶(40ml)中，冷却至0中，然后加入甲磺酰氯(0.88mL；11.5mmol)，并在室温下搅拌3小时。将反应倒入冰水(250ml)中，并搅拌1小时，然后过滤和水洗。将干燥的固体悬浮于二氯甲烷(40ml)中，搅拌10分钟，然后过滤和干燥。收率＝3.45g(96％)。HRMS–C23H31FO7S–理论值:471.1853,实际值:471.1837,偏差＝-3.4ppm。1H NMR(500MHz,MeOD).ppm 0.87(d,J＝7.32Hz,3H)1.03(s,3H)1.21(ddd,J＝12.25,8.20,4.12Hz,1H)1.45-1.58(m,2H)1.59(s,3H)1.71-1.81(m,1H)1.84-1.93(m,1H)2.22(td,J＝11.83,8.39Hz,1H)2.32(dt,J＝13.58,2.90Hz,1H)2.36-2.54(m,2H)2.72(td,J＝13.54,5.72Hz,1H)3.00-3.12(m,1H)3.19(s,3H)4.23-4.30(m,1H)5.02(d,J＝18.01Hz,1H)5.26(d,J＝18.01Hz,1H)6.08(s,1H)6.29(dd,J＝10.22,1.83Hz,1H)7.40(d,J＝10.07Hz,1H。
(ii)17-(2-氨基-噻唑-4-基)-9-氟-11,17-二羟基-10,13,16-三甲基
-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氢-环戊二烯并[a]菲-3-酮(200)
将如上制备的甲磺酸酯(50mg；0.11mmol)与微波管中的乙腈(0.5ml)中的硫脲(9mg；0.12mmol)混合，在100℃加热1小时。加入水(2ml)，过滤出沉淀物。将溶液用饱和碳酸钠(pH10-11)碱化，过滤该沉淀物，然后用水洗涤并干燥。收率＝35mg(74％)。LCMS(7分钟方法):2.87分钟(433；M+H)。HRMS–C23H29FN2O3S–理论值:433.1961,实际值:433.1975,偏差＝3.2ppm。
1H NMR(500MHz,MeOD).ppm 0.93(s,3H)0.98(d,J＝7.17Hz,3H)1.28(ddd,J＝12.21,8.32,4.04Hz,1H)1.48-1.61(m,4H)1.64(d,J＝12.97Hz,1H)1.77(q,J＝11.55Hz,1H)1.85-1.96(m,1H)2.18-2.29(m,2H)2.35-2.49(m,2H)2.72(td,J＝13.54,5.87Hz,1H)2.86-2.99(m,1H)4.23(dd,J＝11.22,1.75Hz,1H)6.08(s,1H)6.28(dd,J＝10.15,1.75Hz,1H)6.33(s,1H)7.43(d,J＝10.22Hz,1H)
一般方法A：
向DCM：吡啶(1:1，2mL)溶液中的氨基噻唑200(50mg，0.12mmol)中加入适当的酰氯(0.23mmol)，在室温下搅拌16小时。当完成时，将混合物装载到2g碱性柱上，并用乙腈(3ml)洗脱。将溶剂蒸发至干，用庚烷(×洗)共沸蒸馏，如果需要，在硅胶上通过色谱法纯化。
一般方法B：
向DMF(0.5mL)中的适合的酸(0.14mmol)中加入PyBOP(90mg，0.17mmol)和DIPEA(60μL，0.35mmol)，并在室温下搅拌1小时。加入氨基噻唑200(50mg，0.12mmol)，并加热至50并反应2小时。当完成时，将混合物冷却至室温，然后装载到一个2g碱性柱上，并用乙腈(3ml)洗脱。将洗脱液装载到一个2g的酸性柱上，再次用乙腈洗脱。将溶剂蒸发至干，如果需要，在硅胶上通过色谱法纯化。
一般方法C：
向DCM(1mL)中的适合的酸(0.23mmol)溶液中加入草酰氯(20μL，0.23mmol)和DMF(1滴)，并在室温下搅拌2小时。向该溶液中加入氨基噻唑200的吡啶(1mL)溶液，并在室温下搅拌2小时。当完成时，将混合物装载到一个2g碱性柱上，并用乙腈(3ml)洗脱。将溶剂蒸发至干，用庚烷(×3)共沸蒸馏，如果需要，在硅胶上通过色谱法纯化。
实施例23
将氨基噻唑200(40mg；0.093mmol)、4-氟苯甲酰氯(16l；0.14mmol)和三乙胺(19l；0.14mmol)悬浮于二氯甲烷(0.8mL)中，在50℃加热5小时，然后加入另外的酰氯(32l)，继续加热3小时。由于反应仍然不完全，再加入三乙胺(38l)，并继续加热4小时。然后蒸发溶剂，将残余物溶于甲醇(2ml)和0.88氨(0.2mL)中。1小时后，将溶剂蒸发，残余物部分地通过含10–40％EtOAc的庚烷溶液进行色谱纯化。利用1：1的甲醇：水重结晶除去4-氟苯甲酰胺的残余物。收率＝17mg(33％)。LCMS(7分钟方法):4.70分钟(555；M+H)。HRMS–C30H32F2N2O4S–理论值:555.2129,实际值:555.2132,偏差＝0.5ppm。
1H NMR(500MHz,MeOD).ppm 0.92(s,3H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)1.33(ddd,J＝12.32,8.05,4.04Hz,1H)1.52-1.63(m,5H)1.77-1.89(m,1H)1.90-1.98(m,1H)2.26-2.36(m,2H)2.38-2.53(m,2H)2.68-2.79(m,1H)3.09-3.16(m,1H)4.26(dt,J＝11.18,2.04Hz,1H)4.59(s,1H)6.09(s,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.95(s,1H)7.29(t,J＝8.70Hz,2H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)8.09(dd,J＝8.70,5.34Hz,2H)。
实施例24
使用方法A制备，但以4倍比例进行。利用30-50％EtOAc：庚烷通过快速色谱纯化。收率＝53mg(20％)，白色固体。LCMS(3分钟方法):2.30分钟(569；M+H)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.42(d,J＝10.07Hz,1H)7.32-7.38(m,2H)7.03-7.10(m,2H)6.88(s,1H)6.28(dd,J＝10.07,1.98Hz,1H)6.09(s,1H)4.24(ddd,J＝11.14,3.74,1.91Hz,1H)3.75(s,2H)3.11(ddd,J＝10.99,7.02,4.12Hz,1H)2.67-2.78(m,1H)2.36-2.50(m,2H)2.23-2.32(m,2H)1.88-1.96(m,1H)1.75-1.85(m,1H)1.51-1.62(m,5H)1.31(ddd,J＝12.25,8.28,4.04Hz,1H)0.98(d,J＝7.17Hz,3H)0.88(s,3H)。
实施例25
将乙腈(4mL)中的甲磺酰化地塞米松(200mg，0.43mmol)，N-苄基硫脲(85mg，0.51mmol)和二甲基苯胺(215μL，1.70mmol)在密封管中在100℃下加热4小时。反应冷却，并在EtOAc(20mL)和水(20mL)之间分配。有机物用1M KHSO4(20mL)、饱和的NaHCO3(20mL)洗涤，然后用Na2SO4干燥。浓缩，然后利用30％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝97mg(42％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):3.96分钟(523；M+H)。HRMS 523.2417(C30H35FN2O3S理论值为523.2431)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.96(t,J＝5.87Hz,1H)7.27-7.40(m,5H)7.21-7.27(m,1H)6.33(s,1H)6.21(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.00(s,1H)5.09(d,J＝2.14Hz,1H)4.32-4.44(m,2H)4.07-4.15(m,1H)3.95(s,1H)2.86-2.97(m,1H)2.56-2.68(m,1H)2.23-2.38(m,2H)2.03-2.16(m,2H)1.75-1.84(m,1H)1.65(q,J＝11.75Hz,1H)1.44-1.55(m,4H)1.36(qd,J＝12.79,4.96Hz,1H)1.13(ddd,J＝12.09,8.20,3.97Hz,1H)0.86(d,J＝7.02Hz,3H)0.82(s,3H)。
实施例26
使用方法A制备。利用25-50％EtOAc：庚烷进行快速色谱纯化。收率＝47mg(73％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.81分钟(555；M+H)。HRMS 555.2148(C30H32F2N2O4S理论值为555.2129)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.86(d,J＝7.78Hz,1H)7.76(dt,J＝9.54,1.95Hz,1H)7.58(td,J＝8.01,5.65Hz,1H)7.43(d,J＝10.22Hz,1H)7.39(td,J＝8.39,2.59Hz,1H)6.97(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.09(s,1H)4.23-4.30(m,1H)3.09-3.18(m,1H)2.69-2.78(m,1H)2.38-2.52(m,2H)2.26-2.35(m,2H)1.90-1.98(m,1H)1.78-1.88(m,1H)1.52-1.68(m,5H)1.25-1.37(m,1H)1.01(d,J＝7.32Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例27
使用方法A制备。利用30-50％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝64mg(97％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.95分钟(571；M(35Cl)+H)。HRMS 571.1819(C30H32ClFN2O4S理论值为571.1834)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.01(d,J＝8.54Hz,2H)7.57(d,J＝8.54Hz,2H)7.43(d,J＝10.22Hz,1H)6.96(s,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dd,J＝11.06,1.91Hz,1H)3.09-3.19(m,1H)2.68-2.79(m,1H)2.37-2.52(m,2H)2.26-2.35(m,2H)1.90-1.97(m,1H)1.77-1.87(m,1H)1.52-1.66(m,5H)1.28-1.37(m,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例28
使用方法A制备。利用25-50％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝57mg(89％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.73分钟(555；M+H)。HRMS555.2145(C30H32F2N2O4S理论值为555.2129)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.84(td,J＝7.51,1.75Hz,1H)7.61-7.66(m,1H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)7.36(td,J＝7.63,0.92Hz,1H)7.30(dd,J＝10.91,8.47Hz,1H)6.98(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(ddd,J＝11.10,3.78,1.91Hz,1H)3.12(ddd,J＝10.99,7.10,4.04Hz,1H)2.69-2.78(m,1H)2.37-2.51(m,2H)2.26-2.35(m,2H)1.90-1.97(m,1H)1.78-1.87(m,1H)1.52-1.67(m,5H)1.26-1.36(m,1H)1.01(d,J＝7.32Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例29
使用方法A制备。利用30-50％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝48mg(73％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.77分钟(567；M+H)。HRMS567.2324(C31H35FN2O5S理论值为567.2329)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.55-7.61(m,2H)7.40-7.49(m,2H)7.17-7.22(m,1H)6.95(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(ddd,J＝11.02,3.78,1.83Hz,1H)3.89(s,3H)3.08-3.18(m,1H)2.68-2.78(m,1H)2.38-2.52(m,2H)2.26-2.35(m,2H)1.90-1.97(m,1H)1.83(q,J＝11.24Hz,1H)1.51-1.68(m,5H)1.25-1.37(m,1H)1.02(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例30
使用方法A制备。利用40％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝66mg(95％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):5.03分钟(605；M+H)。HRMS605.2110(C31H32F4N2O4S理论值为605.2097)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.19(d,J＝8.09Hz,2H)7.87(d,J＝8.24Hz,2H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)6.98(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dd,J＝11.06,1.91Hz,1H)3.17(dt,J＝3.24,1.66Hz,1H)2.68-2.79(m,1H)2.38-2.52(m,2H)2.26-2.36(m,2H)1.90-1.98(m,1H)1.83(q,J＝11.24Hz,1H)1.51-1.67(m,5H)1.26-1.37(m,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例31
使用方法A制备。利用50-100％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝57mg(92％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.13分钟(538；M+H)。HRMS538.2195(C29H32FN3O4S理论值为538.2176)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.77(d,J＝5.95Hz,2H)7.97(d,J＝5.65Hz,2H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)7.00(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dd,J＝11.06,1.91Hz,1H)3.10-3.21(m,1H)2.68-2.79(m,1H)2.37-2.52(m,2H)2.26-2.36(m,2H)1.90-1.98(m,1H)1.83(q,J＝11.70Hz,1H)1.51-1.65(m,5H)1.28-1.37(m,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例32
使用方法A制备。利用50-100％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝50mg(81％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.16分钟(538；M+H)。HRMS538.2194(C29H32FN3O4S理论值为538.2176)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 9.17(br.s.,1H)8.76(d,J＝3.97Hz,1H)8.43(d,J＝7.93Hz,1H)7.62(dd,J＝7.86,4.96Hz,1H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)6.98(s,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dd,J＝11.06,1.75Hz,1H)3.09-3.20(m,1H)2.68-2.79(m,1H)2.38-2.52(m,2H)2.26-2.36(m,2H)1.89-1.98(m,1H)1.83(q,J＝11.65Hz,1H)1.52-1.66(m,5H)1.33(ddd,J＝12.25,8.28,4.04Hz,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.93(s,3H)。
实施例33
使用方法B制备。利用50-60％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝31mg(51％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.23分钟(528；M+H)。HRMS528.1949(C27H30FN3O5S理论值为528.1968)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.18(s,1H)7.46(s,1H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)7.02(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.09(s,1H)4.23-4.30(m,1H)3.06-3.18(m,1H)2.68-2.78(m,1H)2.37-2.52(m,2H)2.27-2.36(m,2H)1.90-1.97(m,1H)1.78-1.88(m,1H)1.51-1.67(m,5H)1.33(ddd,J＝12.25,8.28,4.04Hz,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.91(s,3H)。
实施例34
使用方法A制备。利用30-50％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝59mg(90％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.71分钟(567；M+H)。HRMS567.2325(C31H35FN2O5S理论值为567.2329)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.97-8.03(m,2H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)7.04-7.10(m,2H)6.92(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dt,J＝11.14,1.83Hz,1H)3.89(s,3H)3.12(ddd,J＝10.95,7.06,4.12Hz,1H)2.68-2.78(m,1H)2.37-2.52(m,2H)2.25-2.36(m,2H)1.90-1.98(m,1H)1.82(q,J＝11.24Hz,1H)1.51-1.68(m,5H)1.33(ddd,J＝12.21,8.24,4.12Hz,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例35
使用方法B制备。利用50-70％的EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝36mg(57％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.30分钟(544；M+H)。HRMS544.1754(C27H30FN3O4S2理论值为544.1740)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 9.22(br.s.,1H)8.65(br.s.,1H)7.43(d,J＝10.22Hz,1H)6.95(br.s.,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dd,J＝11.06,1.75Hz,1H)3.06-3.20(m,1H)2.68-2.79(m,1H)2.38-2.52(m,2H)2.25-2.37(m,2H)1.89-1.98(m,1H)1.83(q,J＝11.65Hz,1H)1.51-1.65(m,5H)1.33(ddd,J＝12.28,8.24,4.20Hz,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.93(s,3H)。
实施例36
使用方法B制备。利用50-100％的EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝53mg(84％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.42分钟(544；M+H)。HRMS544.1752(C27H30FN3O4S2理论值为544.1740)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 9.12(d,J＝1.98Hz,1H)8.52(d,J＝1.98Hz,1H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)6.99(s,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.09(s,1H)4.27(ddd,J＝11.18,3.78,1.83Hz,1H)3.11(ddd,J＝10.99,7.10,4.04Hz,1H)2.67-2.79(m,1H)2.38-2.52(m,2H)2.26-2.36(m,2H)1.90-1.98(m,1H)1.78-1.89(m,1H)1.51-1.70(m,5H)1.30-1.37(m,1H)1.02(d,J＝7.17Hz,3H)0.91(s,3H)。
实施例37
使用方法C制备。利用30-50％的EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝32mg(52％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.34分钟(526；M+H)。HRMS526.2181(C28H32FN3O4S理论值为526.2176)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.43(d,J＝10.07Hz,1H)7.09(dd,J＝3.81,1.22Hz,1H)7.06(dd,J＝2.44,1.37Hz,1H)6.86(s,1H)6.25-6.32(m,2H)6.09(s,1H)4.23-4.29(m,1H)3.04-3.16(m,1H)2.68-2.78(m,1H)2.38-2.51(m,2H)2.26-2.34(m,2H)1.90-1.97(m,1H)1.82(q,J＝11.55Hz,1H)1.52-1.68(m,5H)1.28-1.38(m,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例38
使用方法C制备。利用30-50％的EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝34mg(51％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.84分钟(583；M+H)。HRMS583.2448(C32H36F2N2O4S理论值为583.2442)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.42(d,J＝10.07Hz,1H)7.22-7.28(m,2H)6.96-7.03(m,2H)6.87(s,1H)6.28(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.08(s,1H)4.20-4.26(m,1H)3.07-3.14(m,1H)2.97-3.03(m,2H)2.68-2.77(m,3H)2.35-2.50(m,2H)2.22-2.32(m,2H)1.88-1.96(m,1H)1.74-1.84(m,1H)1.50-1.61(m,5H)1.26-1.34(m,1H)0.97(d,J＝7.17Hz,3H)0.88(s,3H)。
实施例39
使用方法B制备。利用50-80％的EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。所得的固体加EtOAc研磨，过滤并干燥。收率＝20mg(29％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.59分钟(594；M+H)。HRMS594.1891(C31H32FN3O4S2理论值为594.1897)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 12.72(br.s.,1H)9.60(s,1H)8.95(d,J＝0.92Hz,1H)8.18-8.26(m,2H)7.30(d,J＝10.07Hz,1H)7.04(s,1H)6.23(dd,J＝10.15,1.75Hz,1H)6.02(s,1H)5.13(d,J＝1.68Hz,1H)4.38(br.s.,1H)4.15(dd,J＝10.91,0.99Hz,1H)3.11-3.20(m,1H)2.59-2.68(m,1H)2.28-2.42(m,2H)2.15-2.25(m,2H)1.78-1.86(m,1H)1.73(q,J＝11.34Hz,1H)1.47-1.55(m,4H)1.39(qd,J＝12.77,4.73Hz,1H)1.19-1.27(m,1H)0.91(d,J＝7.02Hz,3H)0.84(s,3H)。
实施例40
使用方法B制备。利用30-50％的EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝61mg(98％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.67分钟(538；M+H)。HRMS538.2192(C29H32FN3O4S理论值为538.2176)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.73-8.78(m,1H)8.25(d,J＝7.78Hz,1H)8.05(td,J＝7.74,1.60Hz,1H)7.66(ddd,J＝7.63,4.73,1.07Hz,1H)7.44(d,J＝10.07Hz,1H)7.01(s,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.98Hz,1H)6.09(s,1H)4.27(ddd,J＝11.14,3.74,1.75Hz,1H)3.07-3.16(m,1H)2.69-2.79(m,1H)2.38-2.52(m,2H)2.27-2.37(m,2H)1.90-1.98(m,1H)1.78-1.89(m,1H)1.67(dd,J＝14.19,1.68Hz,1H)1.52-1.64(m,4H)1.30-1.38(m,1H)1.03(d,J＝7.17Hz,3H)0.91(s,3H)。
实施例41
使用方法B制备。利用50-70％的EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝35mg(57％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.13分钟(528；M+H)。HRMS528.1970(C27H30FN3O5S理论值为528.1968)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 12.87(br.s.,1H)8.69(s,1H)8.26(br.s.,1H)7.29(d,J＝10.22Hz,1H)7.04(s,1H)6.22(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.01(s,1H)5.12(dd,J＝3.36,1.83Hz,1H)4.40(br.s.,1H)4.10-4.18(m,1H)3.12(br.s.,1H)2.63(td,J＝13.24,6.03Hz,1H)2.26-2.41(m,2H)2.14-2.24(m,2H)2.08(s,1H)1.77-1.85(m,1H)1.71(q,J＝11.39Hz,1H)1.48(s,3H)1.33-1.44(m,1H)1.22-1.29(m,1H)0.90(d,J＝7.17Hz,3H)0.81(s,3H)。
实施例42
将乙腈(1mL)中的甲磺酰化地塞米松(50mg，0.11mmol)、N-4-甲氧苯甲醇硫脲(25mg，0.13mmol)和二甲基苯胺(54μL，0.43mmol)在密封管中在100℃下加热4小时。从反应混合物中结晶得到产物。过滤固体，用乙腈洗涤，然后干燥。收率＝45mg(74％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):3.87分钟(553；M+H)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.41(d,J＝10.07Hz,1H)7.31-7.36(m,2H)6.93-6.98(m,2H)6.70(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.91Hz,1H)6.09(s,1H)4.48-4.57(m,2H)4.28(ddd,J＝10.57,3.70,1.91Hz,1H)3.80(s,3H)2.68-2.84(m,5H)2.35-2.52(m,3H)2.28(td,J＝11.63,8.47Hz,1H)1.88-1.95(m,1H)1.82(q,J＝11.65Hz,1H)1.48-1.61(m,4H)1.41(dd,J＝13.81,1.45Hz,1H)1.27-1.34(m,1H)0.96-1.01(m,6H)。
实施例43
(i)
将甲磺酰化地塞米松(200mg，0.43mmol)和N-甲基硫脲(46mg，0.51mmol)在吡啶(2mL)中加热至80℃反应2小时。浓缩反应液，加入水，然后用EtOAc萃取。分离有机相，经Na2SO4干燥然后浓缩。利用60％乙酸乙酯：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝68mg(35％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):3.13分钟(447；M+H)。HRMS447.2110(C24H31FN2O3S理论值为447.2118)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.35(q,J＝4.58Hz,1H)7.29(d,J＝10.07Hz,1H)6.36(s,1H)6.21(dd,J＝10.07,1.83Hz,1H)6.00(s,1H)5.09(dd,J＝3.59,1.91Hz,1H)4.07-4.15(m,1H)3.94(s,1H)2.84-2.93(m,1H)2.77(d,J＝4.88Hz,3H)2.57-2.67(m,1H)2.23-2.39(m,2H)2.03-2.16(m,2H)1.75-1.84(m,1H)1.65(q,J＝11.65Hz,1H)1.51-1.57(m,1H)1.48(s,3H)1.37(qd,J＝12.74,5.11Hz,1H)1.09-1.15(m,1H)0.87(d,J＝7.17Hz,3H)0.83(s,3H)。
(ii)
使用步骤(i)制得的氨基噻唑、通过上述方法A制备。利用25-35％EtOAc：庚烷通过快速色谱对产物进行纯化。收率＝44mg(68％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.96分钟(569；M+H)。HRMS569.2288(C31H34F2N2O4S理论值为569.2286)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 7.55-7.62(m,2H)7.15-7.25(m,3H)6.81(s,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.75Hz,1H)6.11(s,1H)4.36(dd,J＝6.33,3.89Hz,1H)3.65(s,3H)3.01(s,1H)2.86-2.96(m,1H)2.58-2.68(m,1H)2.28-2.45(m,4H)1.83-1.91(m,1H)1.68-1.82(m,2H)1.57-1.68(m,1H)1.54(s,3H)1.47(d,J＝14.19Hz,1H)1.40(ddd,J＝12.21,7.71,4.04Hz,1H)1.03(d,J＝7.17Hz,3H)0.91(s,3H)。
实施例44
使用方法A制备。利用25％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝61mg(89％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.83分钟(573；M+H)。HRMS573.2046(C30H31F3N2O4S理论值为573.2035)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.94-8.03(m,1H)7.90(d,J＝7.63Hz,1H)7.39-7.52(m,2H)6.96(s,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.68Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dd,J＝10.99,1.68Hz,1H)3.08-3.19(m,1H)2.73(td,J＝13.12,6.10Hz,1H)2.37-2.53(m,2H)2.25-2.36(m,2H)1.89-1.98(m,1H)1.83(q,J＝11.19Hz,1H)1.51-1.66(m,5H)1.33(ddd,J＝12.21,8.24,4.12Hz,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H)。
实施例45
通过方法A制备。利用10-20％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝44mg(67％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.81分钟(551；M+H)。HRMS551.2362(C31H35FN2O4S理论值为551.2380)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.91(d,J＝8.09Hz,2H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)7.37(d,J＝7.93Hz,2H)6.94(s,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.68Hz,1H)6.09(s,1H)4.22-4.30(m,1H)3.08-3.16(m,1H)2.73(td,J＝13.31,5.72Hz,1H)2.36-2.52(m,5H)2.25-2.36(m,2H)1.89-1.98(m,1H)1.82(q,J＝11.49Hz,1H)1.51-1.69(m,5H)1.30-1.37(m,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H).
实施例46
通过方法A制备。利用10-20％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝37mg(53％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.83分钟(581；M+H)。HRMS581.2498(C32H37FN2O5S理论值为581.2485)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 7.98(d,J＝8.70Hz,2H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)7.04(d,J＝8.70Hz,2H)6.91(s,1H)6.29(dd,J＝10.07,1.53Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dd,J＝11.06,1.75Hz,1H)4.13(q,J＝7.02Hz,2H)3.05-3.16(m,1H)2.72(td,J＝13.47,6.03Hz,1H)2.35-2.51(m,2H)2.25-2.35(m,2H)1.88-1.96(m,1H)1.81(q,J＝11.49Hz,1H)1.64(d,J＝14.19Hz,1H)1.49-1.61(m,4H)1.42(t,J＝6.94Hz,3H)1.27-1.36(m,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.91(s,3H)。
实施例47
通过方法B制备。利用30％EtOAc：庚烷通过快速色谱进行纯化。收率＝34mg(51％)，白色固体。LCMS(7分钟方法):4.43分钟(556；M+H)。
1H NMR(500MHz,MeOD)δppm 8.87(br.s.,1H)8.54(t,J＝7.02Hz,1H)7.43(d,J＝10.07Hz,1H)7.24(dd,J＝8.54,1.53Hz,1H)6.97(br.s.,1H)6.29(dd,J＝10.15,1.75Hz,1H)6.09(s,1H)4.26(dd,J＝11.06,1.60Hz,1H)3.09-3.22(m,1H)2.73(td,J＝13.35,5.80Hz,1H)2.37-2.53(m,2H)2.25-2.36(m,2H)1.88-1.98(m,1H)1.82(q,J＝11.34Hz,1H)1.50-1.66(m,5H)1.25-1.37(m,1H)1.01(d,J＝7.17Hz,3H)0.92(s,3H)。
生物学实施例
一般方法
缩略语表
DMEM–杜尔贝科(Dulbecco)改良伊格尔(Eagle)培养基.
FBS–胎牛血清.
PBS–磷酸盐缓冲液.
PLB–被动裂解液.
材料和方法
胎牛血清(FBS)和Opti-MEMTMI减血清培养基购自英杰(Invitrogen)公司。杜尔贝科改良伊格尔培养基(DMEM)和稳定的谷氨酰胺溶液购自PAA实验室股份有限公司(帕兴(Pasching)，奥地利)。DMSO购自西格玛-奥德里奇(Sigma-Aldrich)公司。
NFκB报告基因质粒pNF-κB Luc，具有五个NFκB应答元件(TGGGGACTTTCCGC)5，购自Stratagene公司。编码海肾(Renilla)萤光素酶的质粒pGL4-hRLuc购自普洛麦格(Promega)公司。
HD转染试剂购自瑞士罗氏(Roche)公司。双荧光素酶系统和被动裂解液(PLB)购自Promega公司。
海拉(HeLa)细胞购自欧洲细胞株/微生物保藏中心(ECACC)，并在含有10％FBS的DMEM中传代。细胞在37℃和5％CO2中进行常规培养。
化合物：
化合物在DMSO(5mM)中进行溶解，然后用DMEM进一步稀释至所需浓度。
转录激活试验：
将海拉细胞在100mm平皿上以80×104个细胞/皿接种。第二天，使用FuGENE HD(15μL)在250μL的Opti-MEM I中利用MMTV-Luc(5μg)和pGL4-hRLuc(0.1μg)进行转染。24小时后，将细胞胰蛋白酶化，并以8-10×104细胞/mL的密度接种到96孔板中。
之后，过夜培养以允许附着，将细胞用所需浓度的化合物处理，然后进一步培养16小时。吸出培养基，并用40μL的1×PLB溶解细胞。
按照制造商的方案，使用双荧光素酶报告系统测定萤火虫和海肾萤光素酶活性。
转录抑制试验：
将海拉细胞在100mm平皿上以80×104个细胞/皿接种。第二天，使用FuGENE HD(15μL)在50μL的Opti-MEM I中利用MMTV-Luc(5μg)和pGL4-hRLuc(0.1μg)，进行细胞传代。24小时后，将细胞胰蛋白酶化，并以8-10×104细胞/mL的密度接种到24孔板中。之后，过夜培养，将细胞在DMEM中饥饿24小时。
在实验的当天，将化合物加入细胞中，一小时后，加入TNFκ(0.5ng/mL)。过16小时后，将细胞先用冰的PBS洗涤两次，然后用100μL的1×PLB溶解。
按照制造商的方案，使用双荧光素酶报告系统测定萤火虫和海肾萤光素酶活性。
IC50和EC50：
通过使用GraphPad Prism 5.0软件计算得到IC50值和EC50值。简言之，使用海肾荧光值对荧光素酶的荧光值进行标准化。将标准化值输入到GraphPad Prism 5.0中。使用软件的“对数(浓度)与响应”方程，将希尔斜率系数固定为1，进行非线性回归分析。
IC50值和EC50值为该化合物的nM级别的所有IC50值/EC50值的平均值。Max％值为Max％活性的平均值。
结果
IC50为NFkB的半-最大抑制所需的浓度，TR Max％是相对于地塞米松的最大NFkB抑制的比较，EC50为半-最大转录激活的浓度，TA Max％是相对于地塞米松可看出的最大激活的比较。
比较研究：
对常规的治疗性类固醇地塞米松和泼尼松龙进行了比较。测定了EC50和最大效应，并与传统的类固醇进行了比较。下表总结了将常规类固醇地塞米松(Dex)和泼尼松龙(Pred)与本发明的新的取代类固醇(化合物)进行比较的多个实验的结果。IC50为NFkB的半-最大抑制所需的浓度，TR％是相对于地塞米松的最大NFkB抑制的比较，EC50为半-最大转录激活的浓度，TA％是相对于地塞米松可看出的最大激活的比较。
化合物 IC50 TR％ EC50 TA％
Dex 2.86 100 6.78 100
Pred 12.86 99 238.18 68
7 1.22 98 293.65 44
17 1.19 87 831.80 39
18 5.96 84 668.80 26
23 35.82 52 1401.82 6
图1A示出了合成的、常规的糖皮质激素地塞米松和本发明的示例性的新的取代类固醇，被称为Dex124之间的头对头比较结果，示出了相似的NFkB活性抑制的剂量-响应曲线。图1B示出了最大转录激活中的显著降低，其中在剂量-响应曲线上可以看出不太显著的右移。
具有固定浓度的Dex124或媒介物的转录激活报告细胞经受了地塞米松的剂量-响应。图2示出了具有Dex124的基础转录激活，而且对于地塞米松的剂量-响应是右移的，支持了竞争性拮抗作用。这个数据支持了Dex124具有高亲和性，对于GR是部分激动剂的想法。
不同的人类固醇受体之间具有高度的结构相似性。因此，配体可以与类固醇受体家族的其他成员交叉反应。特别是孕酮受体和盐皮质激素受体显示了最大的结构相似性。对于孕酮受体(PR)、雄激素受体(AR)和盐皮质激素受体(MR)的每一个，将Dex124与传统的类固醇泼尼松龙及同源配体的活性进行了比较。
结果示于图3。Dex124(D124)示出了对于三种类固醇受体的任一种均没有活性。然而，泼尼松龙对盐皮质激素受体具有显著活性，因此预测将导致盐和水潴留，并提高人类心血管疾病风险，在临床研究中所观察到的确实如此。Dex124中看出的MR的保护作用是意想不到的额外治疗优势。
促炎性细胞因子表达的抑制被记录为评估潜在抗炎作用的附加方法。简要地说，这些研究测量了在用类风湿关节炎疾病表现的主要效应因子促炎细胞因子TNFα刺激后，类固醇诱导的从培养的细胞中释放的促炎细胞因子的抑制。图4总结了结果并示出了，Dex124在功效和效力上可与传统的类固醇泼尼松龙相提并论。
脱靶效应：
体内抗风湿作用：
建立的大鼠关节炎模型被选定为与人类的慢性炎症性关节炎最相关的预测模型。该疾病通过弗氏佐剂在尾部注入所引发，并14天后建立疾病模型。口服给药抗炎分子，通常是每天一次，并在7天后处死动物。爪体积是主要的测量指标，多个部位的炎症损害得分作为辅助指标。记录尸体解剖的肾上腺、脾和胸腺的重量。
经历连续7天每天0.5-100mg/kg的宽剂量范围测试了Dex124，虽然试验之间有一定差异，但数据显示了爪体积和症状的一致的剂量依赖性降低。图5示出了使用Dex124的大鼠佐剂性关节炎的剂量依赖性抑制，并与单剂量的泼尼松龙进行了比较。
在这些研究中使用了大鼠的关节炎得分，因为炎症性疾病包含两种破坏性炎症性关节炎，而且具有全身性表现。这一数据为Dex124的抗风湿活性提供了有力支撑。
在Dex124和泼尼松龙之间进行了更全面的头对头比较。图6中的三个图表示出了响应于泼尼松龙或Dex124的关节炎的进化。头对头比较被扩展到临床得分的测量，如同以上使用，并且所有的数据总结于图7中，其示出了对于类固醇和剂量的临床得分。该分析使用了实验过程中的关节炎得分曲线下的面积，以得到每个实验动物的单一、综合测量。出于比较的目的，媒介物处理的动物的曲线下的面积被表示在图上，但标记在任意对数剂量。增加泼尼松龙和Dex124的剂量都能抑制关节炎的临床得分，如曲线下面积(AUC)下部区域中的下降所示。该分析揭示了Dex124和泼尼松龙在大鼠佐剂性关节炎研究中具有相似的功效和效力。
体内糖代谢
进一步体内研究所用的葡萄糖稳态，其是在人类中使用类固醇所看到的能量代谢受阻的有效替代品。在空腹大鼠中响应于类固醇单一剂量的血清葡萄糖的急性感应被用作干扰葡萄糖稳态的简单且有力的量度。感应随时间留下轨迹，相比于媒介物，曲线下的面积被认为是类固醇给药的综合效果。
图8示出了响应于地塞米松(Dex)、泼尼松龙(Pred)和Dex124的血清葡萄糖的感应。对GC给药的响应在血清葡萄糖中是急性上升的，其可以随时间被绘制。响应曲线下的面积可被绘制以提供整体的代谢响应。未处理的动物和媒介物处理的动物显示出了负区，因为这些动物中的血清葡萄糖随时间的延长而降低，导致该区域处于低于基线的曲线的下方，因此被绘制为负值。媒介物和未处理组被分配任意的剂量值，以允许绘制在对数刻度上。
Dex124的剂量响应曲线是右移的，而最大效应低于泼尼松龙的最大效应，这意味着葡萄糖稳态对Dex124具有抗性。这表明Dex124对于干扰葡萄糖和能量代谢的影响小于泼尼松龙。
体内骨代谢
使用大鼠骨形成试验分析通过口服给药的GC的骨代谢及其调节。这是为了允许直接比较相同物种之间的不同类固醇作用，以及为了模拟人类病理学，其中，长期使用类固醇主要影响成骨细胞功能是很明显的，因此限制骨重塑建模，导致骨量的渐进性丧失。这也极大地导致结构骨强度的损失，如成骨细胞作用的损失导致受损的骨修复和微裂缝的累积。
骨钙素分析
血清骨钙素是成骨细胞活性的简便的循环生物标志物，并且先前已被示出在响应于类固醇给药时受到抑制。每日口服给药不同剂量的泼尼松龙或Dex124来处理大鼠，以允许获得剂量-响应曲线。收集最终的(35天)血浆，并测量骨钙素，作为整个骨架的成骨细胞活性的综合量度。这揭示了骨钙素浓度对于泼尼松龙呈剂量依赖性抑制，而对于Dex124为右移剂量响应(参见图9)。该右移再次表明，Dex124对于体内成骨细胞功能的影响小于泼尼松龙。媒介物对于血清骨钙素没有影响，所以没有被绘出。计算的IC50值表明，Dex124相比于泼尼松龙在IC50中至少三倍的右移。这表明相对于类固醇的脱靶骨效应，Dex124对于抗炎和抗风湿作用的选择性。
骨内膜增量
骨钙素数据表明两种类固醇之间对于成骨细胞功能的差异效应。然而，成骨细胞活性在整个骨架中并不是一致的，其可导致高于估计的类固醇效应或低于估计的类固醇效应。在骨生长期间，年幼的、成长的大鼠长骨重塑提供了有吸引力的模型来研究活性骨形成，因为由于骨内膜形成、骨膜骨吸收，轴直径减小，骨内膜表面具有新骨形成。如图11(CT重建)中所示出的，由于骨在外表面或骨膜表面上的损失，和由于成骨作用，骨在内表面或内膜表面上的沉积，长骨在生长结束时(20％标记)生长的轴直径大于朝向骨(30％和40％标记)的中间位置的轴直径。
如图10中所示出的，使用泼尼松龙看到了骨增量中明显的剂量依赖性降低，计算的IC50为7.8mg/Kg。与此相反，Dex124没有看到效果，直到100mg/Kg，给出了估计的IC50约为90mg/Kg。总体来看，这些数据表明，Dex124相比于泼尼松龙对于骨形成、成骨细胞功能展示了显著降低的效果。剂量-响应曲线是右移的，表明对于Dex124的骨效果需要更高的剂量。因此，当每日给药相同剂量、具有相同的抗风湿活性时，泼尼松龙和Dex124对骨将发挥不同的效果，其中Dex124具有保骨作用。
微型计算机断层扫描
该成像模态提供了一种非破坏性的方法以测量骨结构和矿物质含量。在定义的与总骨长度相关的点上进行分析，如类固醇剂量骨骼整体短于对照组。泼尼松龙的主要作用被认为在20％，此时，轴正在经历建模，并且是最薄的。在这一点上，泼尼松龙和Dex124之间出现了显著差异，所测定的IC50具有9.1倍的增加。这再次支持了Dex124相比泼尼松龙所产生的骨破坏是显著降低的(图12)。
进行了股骨头中松质骨的进一步分析。图13示出了长骨的骨骺或骨端由内侧和外侧髁构成，具有圆形突起。分析了响应于泼尼松龙或Dex124的股骨髁节的骨密度。该数据显示在外侧和内侧髁之间类固醇作用的令人惊讶的选择性，但也发现了Dex124的显著的骨保护效果。
安全性研究：
对本发明的示例性分子Dex124进行了药物动力学、代谢和安全性研究，并表明该分子为良性分子，能够被口服给药14天，药物浓度高达150mg/kg，且在此期间，以15mg/kg/天给药无影响水平。该分子在浓度远超出那些使用在对于疗效的体外研究中使用的浓度时，且远超出在下述的PK和毒性PK研究中口服给药的浓度时，不产生诱变或心律失常问题的风险。PK研究中给出的血清浓度远低于安全性研究中给出的没有影响水平的浓度。Dex124对关节炎起有益效果的ED50剂量比安全性研究中没有影响的剂量阈值低近5倍。甚至在14天给药150mg/kg时，仅看到了与体重减轻有关的变化，且没有报道与器官毒性有关的化合物。

Claims (18)

1.一种式(II)的化合物：
其中L为选自L1和L2中的连接基团；和
Ar选自苯基和C5-9杂芳基，可选的，被一个或多个取代基RA取代；
其中：每个RA独立地选自：-F、-Cl、-Br、-I、-ORO、-N(RN)2、-C(＝O)ORO、-C(＝O)N(RN)2、-SO2N(RN)2、-CF3和-CN，其中RO和Rn的每一个独立地选自-H和-C1-4烷基；
L1是:
L2是:
L1A选自-LA-和-LB-O-；
L2A选自-C(＝O)-、-C(＝O)-LB-和-LB-；
其中LA是饱和的C3-4亚烷基，LB是饱和的C1-4亚烷基；
且RN1和RN2各自独立地选自-H和-Me。
2.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物是式(IIa)的化合物：
其中L和Ar如上所定义。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中Ar独立地选自苯基、吡啶基、噻唑基、吡咯基、呋喃基、苯并噻唑基和苯并恶唑基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
4.根据权利要求1或2所述的化合物，其中Ar独立地为苯基或吡啶基，可选的，被一个或多个取代基RA取代。
5.根据权利要求1-4任一项所述的化合物，其中RA独立地选自-F、-OMe和-CO2Me。
6.根据前述任一项权利要求所述的化合物，其中L为L1。
7.根据前述任一项权利要求所述的化合物，其中L1A是-LB1-O-，其中-LB-独立地为饱和的C1-4亚烷基。
8.根据前述任一项权利要求所述的化合物，其中LB是-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-。
9.根据前述任一项权利要求所述的化合物，其中RN1是-H。
10.一种选自下述化合物中的化合物及其药学上可接受的盐：
11.根据前述任一项权利要求所述的化合物，所述化合物用于医学治疗的方法中。
12.根据前述任一项权利要求所述的化合物，所述化合物用于治疗或预防炎性病症、治疗血液学和其它恶性肿瘤、引起免疫抑制以预防或治疗受试者中的移植排斥。
13.根据权利要求1-10任一项所述的化合物，所述化合物用于治疗选自下述医疗病症的方法中：类风湿性关节炎、强直性脊柱炎和牛皮癣性关节病，其它类风湿疾病如全身性红斑狼疮、硬皮病、包括颞动脉炎和结节性多动脉炎的血管炎、炎性肠病如克罗恩病和溃疡性结肠炎，肺疾病如哮喘和慢性阻塞性气道疾病，以及很多其它病症如风湿性多肌痛。
14.根据权利要求1-10任一项所述的化合物，所述化合物用于诱导靶向细胞中细胞凋亡的方法中。
15.一种治疗或预防炎性病症、治疗血液学和其它恶性肿瘤、引起免疫抑制以预防或治疗受试者中移植排斥的方法，所述方法包括向需要治疗的受试者给药治疗有效量的根据权利要求1-10任一项所述的化合物。
16.一种诱导靶向细胞中细胞凋亡的方法，所述方法包括向所述靶向细胞或靶向细胞位置的附近给药有效量的根据权利要求1-10任一项所述的化合物。
17.一种药物组合物，所述药物组合物包括根据权利要求1-10任一项所述的化合物和药学上可接受的载体或稀释剂。
18.一种试剂盒，所述试剂盒包括(a)根据权利要求1-10任一项所述的化合物，优选提供为药物组合物，且提供在适合的容器内和/或具有适合的包装；和(b)使用说明，例如如何给药所述化合物的书面说明。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002036606A1 (en) * 2000-11-03 2002-05-10 Matrix Therapeutics Limited Selective glucocorticoid receptor agonists
WO2009085879A2 (en) * 2007-12-21 2009-07-09 Schering Corporation C20-c21 substituted glucocorticoid receptor agonists

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