CN106214623B - 具有降糖作用的南瓜多糖复合水凝胶的制备方法 - Google Patents
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Abstract
具有降糖作用的南瓜多糖复合水凝胶的制备方法,其步骤为:将南瓜多糖粉末加入到干燥的反应釜中,然后加入乙醇,在25℃下搅拌;取质量为南瓜多糖质量的0.5‑0.50倍的NaIO4溶于水,配成饱和溶液,缓慢加入到反应体系中,在避光的状态下反应;再向反应体系中加入乙二醇,搅拌;向反应体系中加入无水乙醇,搅拌后抽滤,然后用截留分子量为3500的透析袋透析72h,50℃下干燥12小时,即得氧化的南瓜多糖;称取氧化南瓜多糖质量,溶于蒸馏水,称取质量为氧化南瓜多糖质量2‑4倍的N,O‑羧甲基壳聚糖,按质量体积比1:10溶于蒸馏水,将两种溶液等体积混合,在室温下静置10min,即得具有降糖作用的南瓜多糖凝胶。
Description
技术领域
本发明属于生物材料领域,具体涉及一种具有降糖作用的南瓜多糖复合水凝胶的制备方法。
背景技术
水凝胶因独特的三维网状结构,具备良好的渗透性,能够有效提高载药量和生物半周期和稳定性等,在药物释放领域受到极大关注。药物缓释就是把高分子载体和小分子药物,以化学或者物理方法结合,在体内通过各种控制方法,使药物能够以想要的浓度和想要的释放速率,在一定的时间内作用在机体的病变位置,然后达到减少用药次数、提高药物利用率等目的。但载药量小,不能满足药效需要是目前缓释制剂开发的制约因素,因此如何在保证药效的前提下降低缓释制剂的载药量成为目前研究的重点。通过制备活性水凝胶的方法可以实现上述目的。目前尚未见到具有降糖活性的水凝胶的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有降糖活性的南瓜多糖复合水凝胶的制备方法。
具有降糖作用的南瓜多糖复合水凝胶的制备方法,其特征在于,其步骤为:
(1)将南瓜多糖粉末加入到干燥的反应釜中,然后加入体积为南瓜多糖质量数2-3倍的50%乙醇,在25℃下,150转/分搅拌2小时;
(2)取质量为南瓜多糖质量的0.45-0.50倍的NaIO4溶于适量水中,配成饱和溶液,缓慢加入到反应体系中,在避光的状态下反应8h;
(3)再向反应体系中加入体积数为南瓜多糖质量总数的0.10-0.20倍的乙二醇,150转/分搅拌30min;
(4)向反应体系中加入体积约2倍于前述反应体系的无水乙醇,搅拌10min后抽滤,然后用截留分子量为3500的透析袋透析72h,50℃下干燥12小时,即得氧化的南瓜多糖;
(5)称取氧化南瓜多糖质量,按质量体积比1:20溶于蒸馏水,称取质量为氧化南瓜多糖质量2-4倍的N,O-羧甲基壳聚糖,按质量体积比1:10溶于蒸馏水,将两种溶液混合,在室温下静置10min,即得具有降糖作用的南瓜多糖凝胶。
与现有的药物辅料相比,本发明的有益之处在于:产品原料来源广泛,制备工艺简单,成本较低;水凝胶本身具有降糖活性,作为药物辅料,可以和胰岛素、磺脲类、二甲双胍类、α-糖苷酶抑制剂类、胰岛素增敏剂类、GLP-1受体激动剂类等降糖药物构成复方,制备缓释制剂,减少主要用量,弥补缓释制剂载药量小的不足。
附图说明
图1是本发明制备的具有降糖作用的南瓜多糖复合水凝胶;图2是本发明实施例1制备的缓释型胰岛素水凝胶的释放曲线;图3是本发明实施例2制备的格列本脲/南瓜多糖缓释微球的释放曲线。
具体实施方式
本发明是具有降糖作用的南瓜多糖复合水凝胶的制备方法,其步骤为:
(1)将南瓜多糖粉末加入到干燥的反应釜中,然后加入体积为南瓜多糖质量数2-3倍的50%乙醇,在25℃下,150转/分搅拌2小时;
(2)取质量为南瓜多糖质量的0.45-0.50倍的NaIO4溶于适量水中,配成饱和溶液,缓慢加入到反应体系中,在避光的状态下反应8h;
(3)再向反应体系中加入体积数为南瓜多糖质量总数的0.10-0.20倍的乙二醇,150转/分搅拌30min;
(4)向反应体系中加入体积约2倍于前述反应体系的无水乙醇,搅拌10min后抽滤,然后用截留分子量为3500的透析袋透析72h,50℃下干燥12小时,即得氧化的南瓜多糖;
(5)称取氧化南瓜多糖质量,按质量体积比1:20溶于蒸馏水,称取质量为氧化南瓜多糖质量2-4倍的N,O-羧甲基壳聚糖,按质量体积比1:10溶于蒸馏水,将两种溶液混合,在室温下静置10min,即得具有降糖作用的南瓜多糖凝胶,如图1所示。
根据以上所述的制备方法,所述步骤(5)中氧化南瓜多糖和N,O-羧甲基壳聚糖的用量为质量比1:2-1:4。
用30只雄性大鼠适应性喂养1W后,禁食24h(禁食不禁水),连续两天腹腔注射链脲佐菌素55mg/kg,注射后2h喂以6%的糖水,72h后测空腹血糖值,把血糖值大于11.0mmol/L大鼠定为糖尿病大鼠。将30只糖尿病大鼠按血糖值随机分为3组,每组10只,分别为:模型对照组,阳性对照组,南瓜多糖凝胶组。模型对照组给予等体积的生理盐水,阳性对照组给予二甲双胍(剂量为280mg/kg),南瓜多糖凝胶组给予南瓜多糖凝胶(剂量为840mg/kg).造模成功后1W灌胃给药,每组灌胃给药21d,一日两次,每次2mL,每2d称体重一次,及时根据体重调整灌胃剂量,降糖结果见表1,显示南瓜多糖水凝胶有较好的降糖作用。
表1南瓜多糖复合水凝胶的降糖效果:
下面结合实施例进一步展开本发明。
实施例1:
(1)取180g质量的南瓜多糖粉末,加入到干燥的反应釜中,然后加入50%乙醇540ml,在25℃下,150转/分搅拌2小时;
(2)取85.14gNaIO4溶于适量水中,配成饱和溶液,缓慢加入到反应体系中,在避光的状态下反应8h;
(3)再向反应体系中22.32ml乙二醇,150转/分搅拌30min;
(4)向反应体系中加入约1500ml无水乙醇,搅拌10min后抽滤,然后用截留分子量为3500的透析袋透析72h,50℃下干燥12小时,即得氧化的南瓜多糖;
(5)取25g氧化的南瓜多糖,溶于500ml蒸馏水,制备存贮液A;
(6)称取50gN,O-羧甲基壳聚糖,溶于500蒸馏水中,制备存贮液B;
(7)应用前分别取贮存液A、B各0.5ml,将一定量的胰岛素(根据患者使用量而定)溶于贮存液B,将AB两种溶液等体积混合,迅速注入皮下,即得缓释型胰岛素水凝胶;
(8)将制得的缓释型胰岛素水凝胶冻干后,取含10g胰岛素的凝胶置1L37℃恒温的PBS(pH7.4)缓冲液中,50转/分持续搅拌,每隔12h用卡马斯亮蓝法测定溶液中胰岛素蛋白含量,每个时间点胰岛素蛋白含量/10g*100%=累积释放度,实验重复三次,作图即得释放曲线,如图2所示,胰岛素释放较均匀,且释放较完全,到290小时累计释放总量的95%左右。
实施例2:
(1)取180g质量的南瓜多糖粉末,加入到干燥的反应釜中,然后加入50%乙醇540ml,在25℃下,150转/分搅拌2小时;
(2)取85.14gNaIO4溶于适量水中,配成饱和溶液,缓慢加入到反应体系中,在避光的状态下反应8h;
(3)再向反应体系中22.32ml乙二醇,150转/分搅拌30min;
(4)向反应体系中加入约1500ml无水乙醇,搅拌10min后抽滤,然后用截留分子量为3500的透析袋透析72h,50℃下干燥12小时,即得氧化的南瓜多糖;
(5)取25g氧化的南瓜多糖,溶于500ml蒸馏水,制备存贮液A;
(6)称取50gN,O-羧甲基壳聚糖,溶于500蒸馏水中,制备存贮液B;
(7)取75mg格列本脲溶于贮存液B,将贮存A液加入1L液体石蜡中,室温下300转/分快速搅拌,边搅拌边加入溶有格列本脲的贮存液B,持续搅拌10分钟,静置20分钟,将分层后的微球取出干燥,即得格列本脲/南瓜多糖缓释微球;
(8)将制得的列本脲/南瓜多糖缓释微球冻干后,取含10mg格列本脲的微球置1L37℃恒温的PBS(pH7.4)缓冲液中,50转/分持续搅拌,每隔4h用高效液相色谱法(照中国药典2010版格列本脲分析方法)测定溶液中格列本脲含量,每个时间点格列本脲含量/10mg*100%=累积释放度,实验重复三次,作图即得释放曲线。如图3所示,胰岛素释放较均匀,且释放较完全,到24小时累计释放总量的96%左右。
实施例3:
(1)取180g质量的南瓜多糖粉末,加入到干燥的反应釜中,然后加入50%乙醇540ml,在25℃下,150转/分搅拌2小时;
(2)取85.14gNaIO4溶于适量水中,配成饱和溶液,缓慢加入到反应体系中,在避光的状态下反应8h;
(3)再向反应体系中22.32ml乙二醇,150转/分搅拌30min;
(4)向反应体系中加入约1500ml无水乙醇,搅拌10min后抽滤,然后用截留分子量为3500的透析袋透析72h,50℃下干燥12小时,即得氧化的南瓜多糖;
(5)取25g氧化的南瓜多糖,溶于500ml蒸馏水,制备存贮液A;
(6)称取50gN,O-羧甲基壳聚糖,溶于500蒸馏水中,制备存贮液B;
(7)取75mg格列本脲溶于贮存液B,迅速和贮存A混合,300转/分快速搅拌5分钟,然后将混合液缓慢滴入液体石蜡接收液中,即得具有缓释作用的格列本脲/南瓜多糖滴丸。
Claims (1)
1.具有降糖作用的南瓜多糖复合水凝胶的制备方法,其特征在于,其步骤为:
(1)将南瓜多糖粉末加入到干燥的反应釜中,然后加入体积为南瓜多糖质量数2-3倍的50%乙醇,在25℃下,150转/分搅拌2小时;
(2)取质量为南瓜多糖质量的0.45-0.50倍的NaIO4溶于适量水中,配成饱和溶液,缓慢加入到反应体系中,在避光的状态下反应8h;
(3)再向反应体系中加入体积数为南瓜多糖质量总数的0.10-0.20倍的乙二醇,150转/分搅拌30min;
(4)向反应体系中加入体积2倍于前述反应体系的无水乙醇,搅拌10min后抽滤,然后用截留分子量为3500的透析袋透析72h,50℃下干燥12小时,即得氧化的南瓜多糖;
(5)称取氧化南瓜多糖质量,按质量体积比1:20溶于蒸馏水,称取质量为氧化南瓜多糖质量2-4倍的N,O-羧甲基壳聚糖,按质量体积比1:10溶于蒸馏水,将两种溶液混合,在室温下静置10min,即得具有降糖作用的南瓜多糖凝胶。
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