CN106191162A - 一种细菌纤维素及其绿色制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种细菌纤维素及其绿色制备方法与应用,属于细菌纤维素的技术领域。该方法包括以下步骤:氨基酸离子液体的预处理;沉淀物的酶解;酶解液的脱毒处理;发酵培养基的制备;细菌纤维素的合成。本发明采用蔗渣水解液作为培养基碳源,降低了合成细菌纤维素的成本。采用的氨基酸离子液体预处理蔗渣是一种绿色高效的预处理手段,氨基酸离子液体化学稳定性好且可以回收利用,另外无毒,具有优良的生物溶解性、预处理温度低、效率高、缩短了反应时间。采用的微生物合成细菌纤维素的设备和操作简单,原料丰富,适宜于规模化的大生产。本发明制得的细菌纤维素产量高、粒径均一、性能优良的优势,可以作为生物材料应用于医用材料领域。
Description
技术领域
本发明属于细菌纤维素的技术领域,具体涉及一种细菌纤维素及其绿色制备方法与应用。
背景技术
细菌纤维素(Bacterial Cellulose,BC)已被世界公认为性能最好,实用价值较好的纤维素,作为一种新型的纳米材料已引起了广泛的关注。细菌纤维素是葡萄糖分子通过β-1,4-糖苷键连接成的高分子网状结构。相比植物纤维素,细菌纤维素不含有木素、半纤维素、抽出物等伴生物,因而具有高纯度、高结晶度以及高聚合度;且细菌纤维素具有更高的含水量、杨氏模量、纤维超细结构、生物降解性和生物适应性等特性。细菌纤维素这些优异的性能使其被广泛地应用于食品、医药、音响、造纸、电子设备等领域。
目前,实验室发酵生产细菌纤维素的发酵培养基成份主要为成本较高的试剂,不能适应工业生产的需要。蔗渣是一种农作物副产品,据统计,我国蔗渣年产量约为2600万吨,来源丰富。由于蔗渣水解液中含有丰富的糖类,可被进一步地用于生物发酵,从而实现了木质纤维素的最大化利用,以水解液中的糖类物质为碳源,采用木醋杆菌发酵产出了细菌纤维素。细菌纤维素是一种天然的纳米纤维素,具有较高的使用价值。
氨基酸离子液体是一种新型绿色溶剂,它被认为与超临界CO2,和双水相一起构成的三大绿色溶剂,具有优良的生物降解性,同时能形成更强的氢键网络结构,能溶解生物质基材料中的DNA、纤维素、碳水化合物等,因此选用氨基酸离子液体预处理蔗渣,将具有绿色节能、回收率高等优势。
发明内容
为了克服现有技术的缺点与不足,本发明的目的在于提供一种细菌纤维素的绿色制备方法。
本发明的另一目的在于提供一种由上述制备方法制备得到的细菌纤维素。
本发明的再一目的在于提供一种上述细菌纤维素的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现:
一种细菌纤维素的绿色制备方法,包括以下操作步骤:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的蔗渣与氨基酸离子液体均匀混合,预处理后进行冷却,离心分离处理得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入纤维素酶,酶解反应后,离心分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用酸调节PH至1.5~2.5,进行酸化处理,过滤后再用碱调节PH值至6.0~7.0,往过滤后的滤液中加入活性炭,水浴震荡,过滤得到脱毒后的酶解液;
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中再添加蛋白胨、柠檬酸、无机盐,进行灭菌处理,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种木醋杆菌种子液,静止培养,得到细菌纤维素。
步骤(1)中所述的粉粹后的蔗渣尺寸为40~60目。
步骤(1)中所述的氨基酸离子液体优选为甘氨酸离子液体、赖氨酸离子液体、丙氨酸离子液体或脯氨酸离子液体。
步骤(1)中所述的蔗渣与氨基酸离子液体按2%~10%(w/w)的比例混合均匀。
步骤(1)中所述的预处理的条件为温度控制在80~120℃,预处理时间0.5h~3.0h。
步骤(1)中所述的离心处理的条件为:离心速度4000~10000rpm,离心时间10min~30min。
步骤(2)中所述的纤维素酶的浓度为6~15U/mL,纤维素酶与沉淀物的质量比为1/5~4/5。
步骤(2)中所述的酶解反应的条件为:温度35~55℃,pH 4.0~6.0,时间12~30h。
步骤(2)中所述的离心处理的条件为:离心速度3000~8000rpm,离心时间5~20min。
步骤(3)中所述的酸优选为浓硫酸、盐酸或磷酸等;
步骤(3)中所述的碱优选为氧化钙、磷酸氢二钠或醋酸钠等;
步骤(3)中所述的活性炭的加入量为1%~4%(w/v)。
步骤(3)中所述的水浴震荡的条件为在25~30℃,100~200rpm下水浴震荡10~20min;
步骤(4)中所述的蛋白胨、柠檬酸、无机盐优选为蛋白胨1.6%(w/v),柠檬酸0.2%(w/v),Na2HPO4 0.2%(w/v)、KH2PO4 0.3%(w/v)、MgSO4 0.03%(w/v)。
步骤(4)中所述的灭菌处理的条件优选为灭菌温度121℃,灭菌时间20min。
步骤(5)中所述的木醋杆菌种子液的接种量为6%~10%(v/v)。
所述的木醋杆菌种子液,是将从广东省微生物所购买的冻干菌种,用无菌水溶解活化后得到的,其浓度没有要求。
步骤(5)中所述的静止培养的条件为:培养温度25~35℃,pH 6.0~7.0,培养时间5~12天。优选为:培养温度25℃,pH 6.0,培养时间5~12天。
一种细菌纤维素,通过上述制备方法制备得到。
所述的细菌纤维素的性能指标:产量:3.2~4.5g/L;直径:14~269nm;长度:76~1346nm。
所述的细菌纤维素在医用材料领域中的应用。
本发明相对于现有技术,具有如下的优点及效果:
(1)本发明采用蔗渣水解液含有丰富的糖类,将其作为培养基碳源,降低了合成细菌纤维素的成本,同时我国蔗渣产量丰富,有利于变废为宝,能提供充足的原材料。
(2)本发明采用的氨基酸离子液体预处理蔗渣是一种绿色高效的预处理手段,氨基酸离子液体化学稳定性好且可以回收利用,另外无毒,具有优良的生物溶解性、预处理温度低、效率高、缩短了反应时间,因此符合绿色节能的理念。
(3)本发明采用的微生物合成细菌纤维素的设备和操作简单,原料丰富,适宜于规模化的大生产。
(5)本发明制得的细菌纤维素产量高、粒径均一(即得到的细菌纤维素颗粒的直径分布比较均匀)、性能优良(即得到的细菌纤维素尺寸比较小,有利于在材料复合中均匀分散,从而能得到高性能的复合材料)的优势,可以作为生物材料应用于医用材料领域。
附图说明
图1是实施例10制得的细菌纤维素的扫描电镜图。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
本发明实施例中使用的蔗渣购于广西某蔗渣浆厂,木醋杆菌(Acetobacterxylinus)购于广东省微生物所,其它试剂药品均可从市场购买或按照现有技术方法制得。
实施例1
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的40目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以2%的比例在80℃下均匀混合,预处理0.5h后进行冷却,在转速为4000rpm下离心分离处理10min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入6U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为1/5,在温度35℃和pH 4.0条件下酶解时间12h,接着在3000rpm下离心分离处理5min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至1.5,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至6.0,往过滤后的滤液中加入1%的活性炭,在25℃,100rpm下水浴震荡10min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种6%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养5天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:3.2g/L;直径:63~269nm;长度:221~1346nm。
实施例2
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的40目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以3%的比例在80℃下均匀混合,预处理1.0h后进行冷却,在转速为4000rpm下离心分离处理10min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入7U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为1/5,在温度40℃和pH 4.0条件下酶解时间12h,接着在4000rpm下离心分离处理10min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至1.5,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至6.5,往过滤后的滤液中加入1%的活性炭,在25℃,150rpm下水浴震荡10min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种6%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养6天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标::产量:3.4g/L;直径:51~229nm;长度:202~1170nm。
实施例3
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的50目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以4%的比例在90℃下均匀混合,预处理1.5h后进行冷却,在转速为5000rpm下离心分离处理20min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入8U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为2/5,在温度40℃和pH 4.5条件下酶解时间18h,接着在5000rpm下离心分离处理10min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至2.0,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至6.5,往过滤后的滤液中加入2%的活性炭,在30℃,150rpm下水浴震荡20min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种7%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养7天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:3.6g/L;直径:39~203nm;长度:159~988nm。
实施例4
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的50目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以5%的比例在90℃下均匀混合,预处理1.5h后进行冷却,在转速为6000rpm下离心分离处理20min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入9U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为2/5,在温度40℃和pH 5.0条件下酶解时间18h,接着在6000rpm下离心分离处理15min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至2.0,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至7.0,往过滤后的滤液中加入2%的活性炭,在30℃,200rpm下水浴震荡15min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种8%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养8天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:3.8g/L;直径:32~191nm;长度:129~783nm。
实施例5
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的50目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以6%的比例在100℃下均匀混合,预处理2.0h后进行冷却,在转速为7000rpm下离心分离处理20min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入10U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为2/5,在温度45℃和pH 5.5条件下酶解时间24h,接着在7000rpm下离心分离处理15min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至2.5,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至7.0,往过滤后的滤液中加入3%的活性炭,在30℃,150rpm下水浴震荡15min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种8%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养9天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:3.9g/L;直径:30~164nm;长度:121~713nm。
实施例6
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的50目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以7%的比例在110℃下均匀混合,预处理2.5h后进行冷却,在转速为8000rpm下离心分离处理20min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入11U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为3/5,在温度45℃和pH 5.5条件下酶解时间24h,接着在7000rpm下离心分离处理20min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至2.0,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至7.0,往过滤后的滤液中加入3%的活性炭,在30℃,150rpm下水浴震荡15min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种9%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养10天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:4.0g/L;直径:25~151nm;长度:99~621nm。
实施例7
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的50目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以8%的比例在120℃下均匀混合,预处理3.0h后进行冷却,在转速为9000rpm下离心分离处理30min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入12U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为4/5,在温度50℃和pH 6.0条件下酶解时间24h,接着在8000rpm下离心分离处理20min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至2.0,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至7.0,往过滤后的滤液中加入4%的活性炭,在25℃,150rpm下水浴震荡20min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种10%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养11天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:3.9g/L;直径:23~94nm;长度:90~611nm。
实施例8
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的60目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以9%的比例在110℃下均匀混合,预处理处理2.5h后进行冷却,在转速为10000rpm下离心分离处理30min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入13U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为3/5,在温度55℃和pH 5.5条件下酶解时间30h,接着在8000rpm下离心分离处理15min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至2.0,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至7.0,往过滤后的滤液中加入3%的活性炭,在25℃,150rpm下水浴震荡10min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种9%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养12天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:4.2g/L;直径:19~95nm;长度:87~599nm。
实施例9
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的60目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以10%的比例在100℃下均匀混合,预处理3.0h后进行冷却,在转速为10000rpm下离心分离处理30min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入14U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为2/5,在温度45℃和pH 4.5条件下酶解时间24h,接着在8000rpm下离心分离处理20min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至2.0,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至7.0,往过滤后的滤液中加入1%的活性炭,在25℃,150rpm下水浴震荡15min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种8%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养10天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:4.3g/L;直径:18~82nm;长度:76~587nm。
实施例10
本实施例的一种细菌纤维素的绿色制备方法,具体制备步骤如下:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的60目的蔗渣与甘氨基酸离子液体以8%的比例在100℃下均匀混合,预处理3.0h后进行冷却,在转速为10000rpm下离心分离处理30min得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入15U/mL的纤维素酶,纤维素酶与沉淀物的质量比为3/5,在温度50℃和pH 5.0条件下酶解时间18h,接着在8000rpm下离心分离处理20min分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用浓硫酸调节PH至2.0,进行酸化处理,过滤后再用氧化钙调节PH值至7.0,往过滤后的滤液中加入3%的活性炭,在25℃,150rpm下水浴震荡15min后,过滤得到脱毒后的酶解液。
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中添加蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%,在121℃下灭菌处理20min,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种7%的木醋杆菌种子液,在25℃、pH=6条件下静止培养8天得到细菌纤维素。
本实施例的细菌纤维素的性能指标:产量:4.5g/L;直径:14~72nm;长度:81~539nm。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种细菌纤维素的绿色制备方法,其特征在于包括以下操作步骤:
(1)氨基酸离子液体的预处理:将粉碎后的蔗渣与氨基酸离子液体均匀混合,预处理后进行冷却,离心分离处理得到沉淀物;
(2)沉淀物的酶解:将步骤(1)得到沉淀物用蒸馏水洗涤至中性,再向沉淀物中加入纤维素酶,酶解反应后,离心分离未降解的蔗渣和酶解液;
(3)酶解液的脱毒处理:先用酸调节PH至1.5~2.5,进行酸化处理,过滤后再用碱调节PH值至6.0~7.0,往过滤后的滤液中加入活性炭,水浴震荡,过滤得到脱毒后的酶解液;
(4)发酵培养基的制备:向步骤(3)得到的酶解液中再添加蛋白胨、柠檬酸、无机盐,进行灭菌处理,得到发酵培养基;
(5)细菌纤维素的合成:向步骤(4)得到的发酵培养基中接种木醋杆菌种子液,静止培养,得到细菌纤维素。
2.根据权利要求1所述的细菌纤维素的绿色制备方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的粉粹后的蔗渣尺寸为40~60目;
步骤(1)中所述的氨基酸离子液体为甘氨酸离子液体、赖氨酸离子液体、丙氨酸离子液体或脯氨酸离子液体。
3.根据权利要求1所述的细菌纤维素的绿色制备方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的蔗渣与氨基酸离子液体按2%~10%的比例混合均匀。
4.根据权利要求1所述的细菌纤维素的绿色制备方法,其特征在于:
步骤(2)中所述的纤维素酶的浓度为6~15U/mL,纤维素酶与沉淀物的质量比为1/5~4/5。
5.根据权利要求1所述的细菌纤维素的绿色制备方法,其特征在于:
步骤(3)中所述的活性炭的加入量为1%~4%。
6.根据权利要求1所述的细菌纤维素的绿色制备方法,其特征在于:
步骤(4)中所述的蛋白胨、柠檬酸、无机盐为蛋白胨1.6%,柠檬酸0.2%,Na2HPO40.2%、KH2PO4 0.3%、MgSO4 0.03%。
7.根据权利要求1所述的细菌纤维素的绿色制备方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的预处理的条件为温度控制在80~120℃,预处理时间0.5h~3.0h;
步骤(1)中所述的离心处理的条件为:离心速度4000~10000rpm,离心时间10min~30min;
步骤(2)中所述的酶解反应的条件为:温度35~55℃,pH 4.0~6.0,时间12~30h;
步骤(2)中所述的离心处理的条件为:离心速度3000~8000rpm,离心时间5~20min;
步骤(3)中所述的水浴震荡的条件为在25~30℃,100~200rpm下水浴震荡10~20min。
8.根据权利要求1所述的细菌纤维素的绿色制备方法,其特征在于:
步骤(5)中所述的木醋杆菌种子液的接种量为6%~10%;
步骤(5)中所述的静止培养的条件为:培养温度25~35℃,pH 6.0~7.0,培养时间5~12天。
9.一种细菌纤维素,其特征在于通过权利要求1~8任一项所述的制备方法制备得到。
10.权利要求9所述的细菌纤维素在医用材料领域中的应用。
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