CN106187555A - 病毒真菌生物防虫有机肥的制作方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种病毒真菌生物防虫有机肥的制作方法，涉及昆虫病毒生产中昆虫饲养残余物的生物处理技术领域。本制作方法是：①昆虫饲料配制；②前期健康幼虫群养；③病毒接种和病毒增殖；④收集沾有昆虫病毒剩余饲料；⑤病毒真菌生物防虫有机肥配方及配制方法。本发明利用剩余饲料中含有广谱昆虫病毒的特性，加入少量杀线虫真菌，制备病毒真菌生物防虫有机肥，具有较好的应用前景，也具有市场开发价值；病毒真菌生物有机肥能有效防治地下害虫，同时能增加有机质，改良土壤团粒结构，培肥地力，改善农作物品质，提高单位面积产量，恢复生态平衡；亩用量数公斤到10公斤就可有效控制有害昆虫和根结线虫，并有效提高单位面积产量和产值。

Description

病毒真菌生物防虫有机肥的制作方法

技术领域

本发明涉及昆虫病毒生产中昆虫饲养残余物的生物处理技术领域，具体涉及一种病毒真菌生物防虫有机肥的制作方法。

背景技术

昆虫杆状病毒杀虫剂是世界粮农组织推荐使用的安全生物农药，具有杀虫效果好，对人与高等动物安全，不污染环境，不伤害天敌，不易导致害虫产生抗性等特点，是目前大力发展的生态生物农药。

传统上，一种杆状病毒只能防治一种害虫，这对昆虫病毒的产业化和应用造成很大限制，开发广谱昆虫杆状病毒杀虫剂成为发展病毒生物农药产业的方向之一。甘蓝夜蛾核型多角体病毒（Mamestra brassicae multiple nucleopolyhedrovirus, MbMNPV）是目前全球发现的三种广谱昆虫杆状病毒之一，可防治32种以上的农林害虫。在该病毒的杀虫谱中，既包括黄地老虎、小地老虎等地下害虫，也包括甜菜夜蛾、棉铃虫、小菜蛾、烟青虫、甘蓝夜蛾、东方粘虫、水稻螟虫、榆尺蠖和茶尺蠖等我国农林上的重要地上害虫。广谱甘蓝夜蛾核型多角体病毒杀虫剂已建成年产2000吨制剂的生产线，年应用面积超过千万亩，在抗性农林害虫的防治中发挥作用。

昆虫杆状病毒的生产主要通过活体增殖方式进行。使用人工饲料大量饲养宿主昆虫，待昆虫幼虫长到一定大小时，在人工饲料上接种病毒进行感染。幼虫取食接种的病毒后，每头幼虫都成为一个生物反应器，随着幼虫生长，病毒在昆虫体内迅速复制，5-7天后，昆虫整个体内充满病毒死亡，收集病毒致死虫尸制备昆虫杆状病毒杀虫剂制剂或原药。在千吨级昆虫病毒杀虫剂的生产中，每天感染幼虫数十万头到数百万头，有大量幼虫未取食完的沾有病毒的饲料成为废物，这些废物成为生产中的环境污染源需要进行处理。

生物有机肥是特定功能微生物与无害化处理、腐熟的动植物残体等有机物料复合而成，兼具微生物肥料和有机肥效应。近年来，农业上为了追求单位面积产量和产值，化学肥料在农田中使用量越来越多，我国农田单位面积化肥用量是世界平均水平的2-4倍。化学肥料长期超量使用，破坏土壤原有的性质，使得土壤质地板结，团粒结构恶化，土壤的保肥性、保水性和透气性等诸多因素受到破坏，同时导致根结线虫等地下害虫日益猖獗。这些变化使农作物的抗寒和抗病等功能明显降低，农田增产幅度下降；出现典型的增肥不增产甚至大幅减产的现象。现代农业发展亟需开发具有抗虫、抗病和增产的多功能生物肥料产品。

发明内容

本发明的目的就在于提供一种病毒真菌生物防虫有机肥的制作方法，解决昆虫病毒大规模生产过程中的肥料处理问题。

本发明的目的是这样实现的：

病毒真菌生物防虫有机肥的制作方法是：

昆虫饲料配制→前期幼虫饲养→在人工饲料上接种广谱昆虫杆状病毒→昆虫幼虫取食接种病毒后繁殖复制病毒→幼虫体内充满病毒死亡→收集病毒致死幼虫制备病毒母药→收集感染幼虫剩余饲料→干燥剩余饲料并粉碎→对饲料中的病毒含量进行计数→将废物饲料与一定比利的腐殖质→淡紫拟青霉和病毒混合→检验→包装入库。

具体包括下列步骤：

①昆虫饲料配制

将小麦粉、大豆粉和酵母粉按4.5：4.5：1 的比例混合，高压灭菌15分钟，同时用沸水溶化琼脂，琼脂含量1～1.5%，将灭菌好的粉状物倒入含琼脂的液体中搅拌均匀，待冷却后切成小块，供昆虫幼虫食用；

②前期健康幼虫群养

每块饲料上放置10头左右初孵幼虫，在养虫盘中进行饲养，26℃条件下培养5～7天，5%的幼虫用于留种繁殖下一代，其余幼虫用于生产昆虫病毒；

③病毒接种和病毒增殖

根据虫体大小，在饲料上喷上一定浓度的甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬液，接种进行幼虫感染，28℃条件下培养5～8天，每头感染幼虫体内充满病毒死亡，收集病毒致死虫尸制备广谱昆虫病毒杀虫剂母药；

④收集沾有昆虫病毒剩余饲料

昆虫感染病毒后取食量大大减少，幼虫病毒致死后养虫器具中剩余部分饲料，这些饲料中沾有大量昆虫病毒，收集这些废料40～55℃干燥，使其含水量降至5～10%之间，然后粉碎，对其中病毒含量计数，并添加少量病毒母液，使饲料废料中的病毒含量达到每克5～10亿PIB（病毒蛋白质包涵体）。

⑤病毒真菌生物防虫有机肥配方及配制方法

各组分的重量比为：

含病毒饲料废料40～60%，腐植酸5～30%，米糠5～20%，菜籽饼5～15%，40亿孢子/克淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus PL461粉 0～10%；

产品检验：

根据产品标准进行检验，产品合格后进行计量包装，不合格则进行处理，再次加工，直至合格品；包装好产品存放于仓库内。

与现有技术相比，本发明具有下列优点和积极效果：

①昆虫病毒人工大量饲养生产昆虫病毒杀虫剂的生产工程中，剩余饲料的处理一直是一个不好解决的问题，弃之成为废料需要处理，作为其他动物饲料不适用，单纯作为肥料价值不高，用处不大；利用剩余饲料中含有广谱昆虫病毒的特性，加入少量杀线虫真菌，制备病毒真菌生物防虫有机肥，具有较好的应用前景，也具有市场开发价值，这在其他昆虫病毒生产中还没有先例。

②广谱昆虫病毒和杀线虫真菌有机肥施用后，昆虫饲料是昆虫幼虫的天然引诱剂，引诱地下害虫取食饲料中广谱昆虫病毒引起病毒病，导致其死亡；有机肥料和昆虫饲料也引诱根结线虫等地下害虫向其聚集，使杀线虫真菌发挥更大作用；病毒真菌生物有机肥能有效防治地下害虫，如地老虎、根结线虫等，也可防治地上害虫，如稻纵卷叶螟、棉铃虫、小菜蛾、甜菜夜蛾、甘蓝夜蛾等，同时能增加有机质，改良土壤团粒结构，培肥地力，改善农作物品质，提高单位面积产量，恢复生态平衡。

③目前已有的一些杀虫抗虫生物有机肥，其中杀灭地下害虫物质主要是植物源材料，如发明专利“一种可防治地下虫害的有机肥料及其制备方法（专利号：201110379494.5）”中公布的杀虫活性物质主要来源于蓖麻子、苦杏仁、大蒜等；“一种能杀灭地下虫害的生物有机肥（专利号：200910207892.1）”公布的杀虫活性物质主要来源于粉碎的楝树种子、粉碎的蓖麻种子等；“一种防病驱虫生物有机肥及其生产方法（专利号：201210547511.6）”公布的杀虫活性物质主要来源于万寿菊秸秆。地下害虫防治胡安没有主要来源于广谱昆虫病毒生物有机肥。另外，植物源杀虫物质作为肥料施用，对害虫的趋避作用更大些，要想发挥控制害虫作用，亩用量需施200～300公斤。本发明公布的病毒真菌生物防虫有机肥，肥料中的含有病毒昆虫饲料带有虫尸气味，对地下害虫有强引诱作用，亩用量数公斤到10公斤就可有效控制有害昆虫和根结线虫，并有效提高单位面积产量和产值。

具体实施方式

实施实例一

将小麦粉、大豆粉和酵母粉按4.5：4.5：1 的比例混合，高压灭菌15分钟，同时用沸水溶化琼脂，琼脂含量1.5%；将灭菌好的粉状物倒入含琼脂的液体，固体和液体的比例为1：6,加入加入微量山梨酸搅拌均匀，待冷却后切成小块，供昆虫幼虫食用；每块饲料上放置10～13头初孵幼虫，在养虫盘中饲养；26℃下饲养7天，在饲料上喷上5×10⁶PIB/毫升病毒悬液感染幼虫，28℃条件下饲养5天开始收集病毒致死幼虫，8天收集结束；然后收集沾有昆虫病毒剩余饲料，40-55℃干燥，使其含水量降至5～10%之间，然后粉碎，对其中病毒含量计数，并添加少量病毒母液，使饲料废料中的病毒含量达到每克8亿个病毒蛋白包涵体（PIB）。

病毒真菌生物防虫有机肥各组分的重量比为，含病毒饲料50%、腐植酸20%、米糠15%、菜籽饼10%，20亿孢子/克淡紫拟青霉 Paecilomyces lilacinus PL461粉 5%；各组份混合均匀后，根据产品标准检验，计量包装。

实施实例二

将小麦粉、大豆粉、玉米粉和酵母粉按3：3：3：1 的比例混合，高压灭菌15分钟，同时用沸水溶化琼脂，琼脂含量1.3%；将灭菌好的粉状物倒入含琼脂的液体，固体和液体的比例为1：7,加入加入微量山梨酸搅拌均匀，待冷却后切成小块，供昆虫幼虫食用；每块饲料上放置10-15头初孵幼虫，在养虫盘中饲养。26℃下饲养6天，在饲料上喷上1×10⁶PIB/毫升广谱甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬液感染幼虫，28℃条件下饲养5天开始收集病毒致死幼虫，8天收集结束。病毒致死虫尸收集完后，收集养虫器具中沾有昆虫病毒剩余饲料，40-55℃干燥，使其含水量降至5-10%之间，然后粉碎，对其中病毒含量计数，并添加少量200亿PIB/毫升病毒母液，使粉碎饲料的病毒含量达到每克5亿PIB。

病毒真菌生物防虫有机肥各组分的重量比为，含病毒饲料60%、腐植酸15%、米糠10%、菜籽饼10%，20亿孢子/克淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus PL461粉 5%。各组份混合均匀后，根据产品标准检验，计量包装。

实施实例三

病毒真菌生物防虫有机肥由下列组分组成，按重量比，含5亿PIB/克广谱昆虫病毒的取食剩余饲料70%、腐植酸10%、米糠10%、菜籽饼10%，20亿孢子/克淡紫拟青霉 Paecilomyces lilacinus PL461粉剂 5%；各组份混合均匀后，检验包装。

病毒真菌生物防虫有机肥在山东花生田施用，每亩施5公斤，连续应用两年，可有效防治地下有害昆虫、根结线虫和其他有害昆虫，同时平均比对照田增产20-30%。

实施实例四

病毒真菌生物防虫有机肥按如下重量比制备：含8亿PIB/克广谱昆虫病毒的废料饲料40%、腐植酸15%、米糠20%、菜籽饼15%，20亿孢子/克淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinusPL461粉10%。各组份混合均匀后，按产品标准检验，计量包装。

病毒真菌生物防虫有机肥在江西蔬菜田施用，每亩施10公斤，连续应用三年年，可有效防治地老虎等地下有害昆虫、根结线虫和其他有害昆虫，同时具有增产增值作用。平均比对照田增加产量30-50%，增加产值80-200%。

Claims (1)

1.一种病毒真菌生物防虫有机肥的制作方法，其特征在于包括下列步骤：

①昆虫饲料配制

将小麦粉、大豆粉和酵母粉按4.5：4.5：1 的比例混合，高压灭菌15分钟，同时用沸水溶化琼脂，琼脂含量1～1.5%，将灭菌好的粉状物倒入含琼脂的液体中搅拌均匀，待冷却后切成小块，供昆虫幼虫食用；

②前期健康幼虫群养

每块饲料上放置10头左右初孵幼虫，在养虫盘中进行饲养，26℃条件下培养5～7天，5%的幼虫用于留种繁殖下一代，其余幼虫用于生产昆虫病毒；

③病毒接种和病毒增殖

根据虫体大小，在饲料上喷上一定浓度的甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬液，接种进行幼虫感染，28℃条件下培养5～8天，每头感染幼虫体内充满病毒死亡，收集病毒致死虫尸制备广谱昆虫病毒杀虫剂母药；

④收集沾有昆虫病毒剩余饲料

昆虫感染病毒后取食量大大减少，幼虫病毒致死后养虫器具中剩余部分饲料，这些饲料中沾有大量昆虫病毒，收集这些废料40～55℃干燥，使其含水量降至5～10%之间，然后粉碎，对其中病毒含量计数，并添加少量病毒母液，使饲料废料中的病毒含量达到每克5～10亿PIB；

⑤病毒真菌生物防虫有机肥配方及配制方法

各组分的重量比为：

含病毒饲料废料40～60%，腐植酸5～30%，米糠5～20%，菜籽饼5～15%，20亿孢子/克淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus PL461粉 0～10%；

产品检验：

根据产品标准进行检验，产品合格后进行计量包装，不合格则进行处理，再次加工，直至合格品；包装好产品存放于仓库内。