CN106163539A - 用于预防性传播感染的组合产品 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了用于抑制性传播感染的传播的组合物，所述组合物含有一种或多种聚阴离子杀微生物剂，如卡拉胶，包括λ卡拉胶，以及水溶性金属盐和特定的凝集素。也公开了制备和应用该组合物的方法。

Description

用于预防性传播感染的组合产品
相关申请的交叉引用
本申请要求在2014年1月28日提交的美国临时专利申请号61/932,706的优先权，其公开的内容在此并入作为参考。
背景技术
在世界各地还未满足对同时防御人类免疫缺陷病毒（HIV）和其它性传播感染（STI）的技术的需求。目前防御HIV和其它STI的杀微生物剂将以能够接受及能够负担的方式处理这些健康风险，并且对全球公共卫生作出主要贡献。而且，具有对除HIV外的STI适应症的杀微生物剂，可更适用于不担心HIV的那些人使用这样的杀微生物剂，从而提高可接受性和粘附性。
令人遗憾的是，以往带有广谱抗病毒活性和能力以在体外或在体内阻挡不同的STI的单一活性药物成分（API）的研究，在临床试验中均没有表现出疗效。临床试验中缺乏如此疗效的原因是未知的，但可能是由于各种原因，例如包括低效力，保护窗不足（shortwindow of protection），生物体液存在下活性降低，或者粘膜的诱导以及微生物群落的变化。Romano, J.W., et al., Non-specific microbicide product development: then and now. Current HIV research, 2012. 10(1): p. 9-18。因此，存在对鉴定更有效和安全的API的持续性需求，此API可被单独使用或组合起来用于杀微生物的用途。
已知在体内具有杀微生物活性的化合物包括卡拉胶。卡拉胶是从通常被称为海藻的赤藻中获得的多糖。它们是海藻的结构部件，并经提取成三种主要类型，即ι、κ、λ，尽管还有其它类型，包括κ-II、μ和ν卡拉胶。卡拉胶作为增稠剂、胶凝剂、稳定剂和分散剂，被广泛应用于食品、药物和化妆品行业。已进行了大量的药理学及毒理学研究。已发现卡拉胶即使在极高剂量下通过口服、经皮和吸入的给药途径都是无毒的。因此卡拉胶在1972年被美国食品及药物管理局（FDA）分类为“一般认为安全”（GRAS）。Food and Drug Administration.GRAS (Generally recognized as safe) food ingredients: Carrageenan. FDAPublications PB-221 206, (1972)。
在猪、大鼠、小鼠、沙鼠、豚鼠、白鼬、仓鼠、狗和猴身上进行了进一步大量的口服药代动力学研究，表明卡拉胶在胃肠道的分解是很少的，并且其吸收是几乎不存在的。Benitz, K.F., et al., Toxicol. Appi. Pharmacol. 22, 282 (1972); Fox, M.R.S. &Jacobs, R.M. Metal Ions in Biological Systems., pp. 214-248 (Marcel Decker,Inc.,1986); Luscombe, D.K. & Nicholls, P.J. Fd. Cosmet. Toxicol. 11, 229-237(1973); Naess, B. Acta Vet. Scand. 12, 592-600. 1971; Samman, S. & Roberts,D.C.K. ,Med. J. Australia 146, 246-249 (1987); U.S.EPA. Health EffectsAssessment of for Zinc (and Compounds). EPA/540-1-96-048. 1984. Washington,D.C., US Environmental Protection Agency, Office of Research and Development;Walden, J.T. & Derreth, D. FDA New Release 72/55. FDA Publications 72/55, (1972); Walker, A.P. et al. Fd. Chem. Toxic. 35, 1099-1106 (1997); Weiner, M.L. Intestinal transport of some macromolecules in food.Fd. Chem. Toxic.26,10, 867-880 (1988)。
国际专利公布号WO 94/15624教导使用硫酸化多糖，如ι卡拉胶、硫酸葡聚糖、κ卡拉胶、λ卡拉胶、肝素模拟物、硫酸肝素、戊聚糖多硫酸酯、硫酸软骨素、香菇多糖硫酸酯、凝胶多糖硫酸酯、脱-N-硫酸化肝素和岩藻多糖，以抑制HIV的细胞至细胞传播，因此也抑制获得性免疫缺乏综合征（AIDS）的性传播以及衣原体有机体。这项公布教导ι卡拉胶是商业上能够得到的在预防HIV感染中以及在体内和体外阻隔衣原体感染中最有效的硫酸化卡拉胶。
锌是针对如HIV和单纯性疱疹病毒-2（HSV-2）这样的性传播病原体的另一种已知的抑制剂。醋酸锌（ZA）和硫酸锌已表现出在细胞培养中抑制HIV感染，以及在细胞培养和试验动物中抑制HSV-2感染。锌盐已表现出在体外有效阻隔HIV引起的感染（Haraguchi, Y.,et al. Antiviral Res 43, 123-133 (1999)），并且还阻隔由口蹄疫病毒、人类鼻病毒、A型流行性感冒和B型流行性感冒、塞姆利基森林病毒和辛德毕斯病毒引起的感染。Sergio,W. Medical Hypotheses 26,253 (1988)。Haraguchi等通过p24 ELISA和RT测定，发现氯化锌、醋酸镉和氯化汞抑制HIV-1产生。当存在浓度多达550μg/mL时，氯化锌并没有显示出明显的细胞毒性。
凝集素是碳水化合物结合蛋白，通过结合到在入侵病原体上存在的碳水化合物，其可在免疫系统中起作用。凝集素被称为格瑞弗森（Griffithsin，GFRT或G），已报道凝集素具有有效的抗HIV活性，能够以次纳米摩尔浓度（IC50值为0.02~0.8 nM）在体外阻隔HIV复制。参见Alexandre, K.B., et al., Virology, 2012. 423(2): p. 175-86; Huskens,D. and D. Schols, Marine Drugs, 2012, 10(7): p. 1476-97; Mori, T., et al.,The Journal of biological chemistry, 2005. 280(10): p. 9345-53；以及美国专利8,088,729，所有这些内容在此全部并入作为参考。
在烟草中能够生产多克量的格瑞弗森。O'Keefe, B.R., et al., Proceedingsof the National Academy of Sciences of the United States of America, 2009.106(15): p. 6099-104. 值得注意的是，GRFT抵抗被几种蛋白酶降解，即使在高温下仍高度稳定，无刺激性，不导致细胞激活，以及通过血液或上皮细胞在炎症性细胞因子和趋化因子的分泌中只导致最小的变化。O'Keefe, B.R., et al., Proceedings of the NationalAcademy of Sciences of the United States of America, 2009. 106(15): p. 6099-104;Kouokam, J.C., et al., PloS one, 2011. 6(8): p. e22635; Moncla, B.J., etal., Advances in bioscience and biotechnology, 2011. 2(6): p. 404-408。
格瑞弗森已表现出在外植体模型中抵抗HIV极好的安全性和有效性，并且修饰形式的GRFT已报道为具有改善的效力、稳定性和溶解性。O'Keefe, B.R., et al.,Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States ofAmerica, 2009. 106(15): p. 6099-104. GRFT也表现出体内抗HSV-2活性。Nixon, B.,et al., Journal of virology, 2013. 87(11): p. 6257-69。
申请人以前曾报道过在水溶性金属盐和卡拉胶之间的复合物（complex）能够提供抗微生物作用。该水溶性金属盐可以是锌金属，以及在一个具体的实施方案中，在卡拉胶凝胶中配制的醋酸锌（ZA）组合已表现出有效抵抗HIV、HSV-2、人类乳头瘤病毒（HPV）以及阴道毛滴虫。Fernandez-Romero, J.A., et al., Antimicrobial agents and chemotherapy,2012. 56(1): p. 358-68; Kenney, J., et al., Antimicrobial Agents andChemotherapy, 2013. 57(8): p. 4001-9。并参见美国专利8,567,098，其全部内容在此并入为参考。尽管这样，对于能够防御HIV和/或其它STI的额外广谱、更有效的杀微生物剂的需求仍然存在。
发明内容
申请人已发现带有广和极有效活性的杀微生物组合物可通过将凝集素与水溶性金属盐和/或卡拉胶结合而生产。因此，在第一方面，本发明涉及抗微生物组合物，该抗微生物组合物包含有效含量的抗微生物剂以及一种或多种额外的抗微生物剂，所述有效含量的抗微生物剂包含一种或多种凝集素，所述一种或多种额外的抗微生物剂选自生理学能够接受的水溶性金属盐、卡拉胶或其它聚合物，如树枝状大分子、纤维素、纤维素类似物、纤维素衍生物及其组合。
在具体的实施方案中，组合物包含与锌金属盐（Z）和/或卡拉胶（C）结合（combination）的一种或多种凝集素。在具体的实施方案中，本发明的抗微生物组合物能够包含与锌金属盐结合的凝集素格瑞弗森（GZ）；或可包含与锌金属盐和卡拉胶结合的格瑞弗森（GZC）。在各种具体的实施方案中，锌金属盐是醋酸盐（ZA）和/或卡拉胶。
在另外的实施方案中，本发明的组合物可以是适用于抗微生物剂传送的任何物质形态，包括凝胶、溶液、固体或者干燥或粉末形态。
在相关方面中，本发明涉及性传播感染（STI）抑制组合物，该组合物包含本发明的抗微生物组合物。如本文所预期，该组合物可防止STI的阴道或直肠感染，并相应地配制该组合物。
本发明的组合物还可包含一种或多种额外的抗微生物剂和/或药物，包括但不限于能够在阴道或直肠给药的药物，以提供可给药于对象的组合物，以作为多用途防治技术治疗或预防一种或多种病症。
在此应该理解本文涵盖了除微生物感染外其它病症的预防。例如，在具体的实施方案中，组合物可包含了一种或多种抗微生物剂，还可包含激素或非激素的抗避孕药以防止非计划的怀孕，或者可包含用于激素取代疗法的试剂。
如本文所预期，在另一方面中，本发明的组合物可以是药物组合物，并因此还包含了除一种或多种药学上可接受的试剂或赋形剂之外，在本文公开的一种或多种抗微生物剂或药物。在具体的实施方案中，此组合物配制为非处方药物组合物。在具体的实施方案中，药学上可接受的试剂或赋形剂是生理学上可接受的pH控制剂和/或生理学上可接受的防腐剂。在另一个实施方案中，药学上可接受的试剂或赋形剂促进将药物组合物传送给有需要的对象。在具体的实施方案中，此药物组合物以适合阴道和/或直肠给药的剂型配制。
在另一方面中，本发明涉及在有需要的对象中抑制微生物感染的方法，该方法包括将本发明的有效含量的抗微生物组合物给药于所述对象。因此，在一个实施方案中，此方法包括将含有有效含量的GRFT和卡拉胶的抗微生物组合物给药于有需要的对象，以便抑制由HPV引起的感染。
在另一实施方案中，此方法包括将含有有效含量的GRFT和锌金属盐的抗微生物组合物给药于有需要的对象，以便抑制由HIV引起的感染。在具体的实施方案中，此锌金属盐是ZA。
在另一实施方案中，此方法包括将含有有效含量的GRFT、卡拉胶和锌金属盐的抗微生物组合物给药于有需要的对象，以便抑制由HSV-2引起的感染。
在另一实施方案中，此方法包括将含有有效含量的GRFT、卡拉胶和锌金属盐的抗微生物组合物给药于有需要的对象，以便抑制HIV、HSV-2、HPV及其它性传播感染（STI）中的一种或多种。
在另一实施方案中，此方法包括将含有有效含量的GRFT的抗微生物组合物给药于有需要的对象，以便抑制由HPV引起的感染。在具体实施方案中，此组合物还包含卡拉胶。
附图说明
图1包括对数坐标图，其显示了在GRFT（nM）存在下病毒复制百分比。图1A和图1B的数据确定了GRFT对抗HIV具有有效活性。图1C的数据表明GRFT对抗HPV16、HPV18以及HPV45假病毒（PsV）具有温和的体外活性。在图1A中，利用MAGI试验（R Begay O, et al. AIDSResearch and Human Retroviruses, 2011 Sep 1;27(9):1019–24）以及实验室菌株HIV-1MN（X4病毒）和HIV-1ADA-M（R5病毒）在TZM-bl细胞中测试抗HIV活性。在图1B中，利用实验室菌株HIV-1NL4-3在PBMC（Trkola A, et al., J Virol. 1999 Nov; 73(11):8966–74）中测试抗HIV活性。在图1C中，利用萤火素酶报告基因试验（Buck CB, et al. PLoS Pathog. 2006Jul 1;2(7):e69）以及测试对抗三种不同HPV PsV类型（16、18和45）的抗病毒活性，在HeLa细胞中评估抗HPV活性。在图1A、1B、1C中，IC50值描述为有95%置信区间的垂直虚线，并利用在GraphPad Prism v5.0软件中的剂量反应抑制（dose-response-inhibition）分析计算出。所有的非毒性GRFT浓度以一式三份测试并用平均值±SD示出。
图2描述的柱状图说明了GRFT防止HSV-2入侵靶细胞但没有防止病毒吸附。图2A描述了对病毒吸附的抑制。如前所述地进行了噬斑抑制试验。Ashley, R., Herpes simplexviruses, p375-395. In Schmidt NJ, Emmons RW (ed), Diagnostic procedures forviral, rickettsial, and chlamydial infections, 7th ed. American Public HealthAssociation, Washington, DC. 1995。在37 ºC下预培养HSV-2 G菌株以及不同浓度的GRFT或培养基（病毒对照）0、0.5、1和2小时，然后添加至预冷冻的Vero细胞并在4ºC下保存。用冷冻培养基将单细胞层清洗三次，然后添加甲基纤维素覆盖物，并在37ºC、5% CO2、98%湿度下培养48小时，接着固定、染色和计量噬斑形成单位（pfu）。病毒复制百分比是相对病毒对照计算的。图2B描述的是对病毒入侵的抑制。进行与图2A相同的试验，但在4ºC下培养2小时后，将细胞转移至37ºC、5% CO2、98%湿度额外培养2小时。用柠檬酸缓冲液（pH=3.0）处理单细胞层2分钟，以使任何残留在细胞表面上的病毒失活。用冷培养基将单细胞层清洗三次，然后添加甲基纤维素覆盖物，并在37ºC、5% CO2、98%湿度下培养48小时，接着固定、染色和计量噬斑形成单位（pfu）。此图显示相对于病毒对照的病毒复制百分比（平均值±SD）（每种条件一式三份）。
图3是描述含有GZC的抗微生物组合物在严格的小鼠模型中显著减少了HSV-2感染的图。在应用的所示的配方（GZC=GRFT+ZA+CG；ZC=ZA+CG；GC=GRFT+CG和C=CG，即卡拉胶凝胶）后，用106 pfu的HSV-2攻击经Depo处理的Balb/C小鼠 1小时(A)或2小时(B)（n=15-30/配方）。基于症状，显示了每一个处理组随时间变化的未被感染的动物百分比。组合配方和单独C之间的显著差异由星号表示（p<0.037）。1小时下GZC对ZC（p=x）与GC对ZC（p=x）之间，以及2小时下GZC对GC（p=x）与ZC对GC（p=x）之间也存在显著差异。利用费舍尔精确检验进行统计分析。
具体实施方式
虽然本说明书通过特别指出并清楚地要求保护本发明的权利要求作出结论，但据信通过以下说明将更好地理解本发明。
在本文使用的百分比和比率均按总组合物的重量计算，除非本文另有说明。所有测量均在25 ºC以及常压下进行，除非另有指定。所有温度均为摄氏度，除非另有规定。本发明能够包括（开放的）或基本上由本发明的组分以及本文所述的其它成分或要素组成。如本文使用的，“包含”的意思是叙述到的要素或其结构或功能上的等价物，加上任何其他的要素或没有叙述到的要素。术语“具有”和“包括”同样解释为开放的，除非上下文另有提示。
所有在本文叙述到的范围包括端点、包括叙述在两个数值“之间”的范围。术语如“约”、“通常”、“大体上”和诸如此类解释为修饰术语或数值，使得其不是绝对的，但不会在现有技术上阅读到。将根据情况定义这样的术语，且它们修饰的术语是本领域的技术人员所理解的。这至少包括用于测量数值的给定技术的预计的实验误差、技术误差以及仪器误差的程度。
除非另有指出，如本文使用的，“一种”和“一”包括复数，例如“一种卡拉胶”能够意味着至少一种卡拉胶，以及复数形式的卡拉胶，即多于一种卡拉胶，包括但不仅限于不同种类的卡拉胶。
在本文使用的，当用于一列两个或者更多个项目时，术语“和/或”意思是任何一个列出的特征能够存在，或者两个或更多个列出的特征的任何组合能够存在。例如，如果一种组合物被描述为包含试剂A、B和/或C，该组合物能够包含只有A特征；只有B；只有C；A和B的组合；A和C的组合；B和C的组合；或A、B和C的组合。
在本文引用的所有参考文献在全文中并入作为参考。
已经研究了卡拉胶和锌金属盐以单独以及组合形式，例如以锌金属盐/卡拉胶凝胶的形式的抗微生物作用。参见例如Fernandez-Romero, J.A., et al., AntimicrobialAgents and Chemotherapy, 2012. 56(1): p. 358-68; Kenney, J., et al.,Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2013. 57(8): p. 4001-9；以及美国专利8,367,098，在此全部并入作为参考。
另外，已经报道过碳水化合物结合剂如特定的海藻凝集素具有抗HIV活性。据说最有效的海藻凝集素为格瑞弗森 （GRFT），其已被报道为对HIV、C型肝炎以及SARS相关的冠状病毒具有抗病毒活性。Huskens, D. and D. Schols, Marine drugs, 2012. 10(7): p.1476-97。最近也已显示GRFT对HSV-2具有抑制作用。Nixon, B., et al., Journal ofvirology, 2013. 87(11): p. 6257-69。
申请人意外地和意想不到地发现特定的抗微生物剂能够结合以生产具有更有效及协同抑制作用的抗微生物组合物。具体地，如在本文公开的，申请人已观察到与醋酸锌（ZA）结合，GRFT的抗HIV活性得到提高，表现出对HIV的协同抗病毒作用。而且，与ZA和CG（GZC）结合的GRFT具有提高的体内和体外抗HSV-2活性。另外，申请人也发现与卡拉胶结合的GRFT对HPV产生协同抑制作用。
如本文所理解的，如在本文实施例1中提供的，本发明的组合物可以凝胶形式配制。如本文使用的，凝胶，例如“卡拉胶凝胶”指的是组合物的相对黏性形式，其能够被用于以促进组合物传送而传送时最少泄漏量的方式给药抗微生物剂，例如用于阴道内或直肠给药。本发明的组合物可以本领域技术人员熟悉的其它物质形态存在，包括但不仅限于固体、溶液或干燥或粉末的形式，其可能是根据预期的剂型特别地合适。因此，在此特别考虑不同于凝胶的制剂，并可根据常规方法制作。例如，包含GRFT、卡拉胶、如醋酸锌的水溶性金属盐的组合物的组分可在溶液中结合以制作组合物，或者可利用常规实验室技术由本领域技术人员结合成干燥或粉末形式。
申请人还在此报道单独的GRFT能够对HPV产生对抑制作用。根据申请人所知，这是GRFT，对包膜病毒具有已被报道的抗病毒活性的凝集素，首次表现出对无包被病毒HPV具有抗病毒活性。
如本文所预期的，本发明包括抗微生物组合物，所述抗微生物组合物能够包含两种或更多种在组合中提供增强的抑制作用的不同抗微生物剂。还考虑到这样的杀微生物组合物可包含至少两种不同的抗微生物成分，所述至少两种不同的抗微生物成分能够提供对包括HIV、HSV-2、HPV和其他STI在内的一种或更多种目标病毒的抗病毒功效的协同作用。如本文使用的，抗微生物剂包括抗病毒剂。
在本文中提及的“抗病毒剂”是本领域技术人员熟悉的。如本文所预期的，这样的试剂包括但不仅限于包括锌金属盐在内的水溶性金属盐、卡拉胶和凝集素。另外，“抗病毒剂”包括本领域技术人员熟悉的其它化合物，包括例如各种聚合物，如萘磺酸盐以及其它硫酸化或磺化聚合物（McCormack S et al., Lancet, 2010 Oct 16;376(9749):1329-37）；树枝状大分子（Rupp R, et al., Int J Nanomedicine,2007;2(4):561–6）；以及纤维素，包括其类似物及衍生物（Chaobo Huanga, et al., Biomaterials Volume 33, Issue 3,January 2012, Pages 962–969）。
如本文所预期的，在本发明的组合物中所用合适的杀微生物剂（包括但不仅限于其它抗病毒剂）是本领域技术人员所熟悉的。在此应理解，这些杀微生物剂包含化合物，所述化合物能够用于对抗STI，包括但不仅限于HIV，即在此考虑到的抗微生物剂并不是所有抗HIV杀微生物剂必需的。McCormack S et al., Lancet, 2010 Oct 16;376(9749):1329-37。
在具体的实施方案中，此组合物包含与卡拉胶配制的ZA，与GRFT或其它凝集素组合，以便生产具有对抗HIV、HSV-2、HPV和潜在的其它STI的广和极有效的活性的组合物。在其它具体实施方案中，该组合物可包含与ZA和/或卡拉胶任意组合的GRFT。在此也考虑到该组合物可包含格瑞弗森，用于预防HPV感染。
如本文使用的，术语“格瑞弗森”通常用于指代天然的格瑞弗森或任何相关、功能上等价的（即抗病毒的）多肽或其衍生物，包括但不仅限于在美国专利US 8,088,729中公开的形式。
如本文使用的，“其它STI”为本领域技术人员熟悉的，并包括例如淋病奈瑟氏菌、沙眼衣原体、细菌性阴道病、阴道毛滴虫、乙型肝炎和其它。
不希望受任何具体操作理论束缚，据信以不同的作用机制使用杀微生物剂传送不同的抗微生物剂将很可能为更多有效策略提供组合物，用于防止和/或治疗更广谱的微生物感染，包括多于一种病原体的合并感染，以及当使用一种或多种抗微生物剂时，能够提供增强的且协同的抑制作用对抗如HIV和其它STI的病毒。因此，在本文中公开的不同的杀微生物剂可组合以获得不同水平的抗微生物保护，以及能够在以各种剂型给药时将其设计成维持不同的时间。在此还考虑到，对预防包括但不仅限于HIV的STI有用的本发明的组合物，将提供一种抗HIV预防策略，所述抗HIV预防策略可被那些不愿意鉴定或确定自己潜在地处于HIV感染高风险的个体更加能够接受而使用，并因此为全世界公共卫生带来益处。
如本文所预期的，在具体实施例中，本发明的抗微生物组合物不包括任何抗逆转录病毒的药物（ARV）。因此，如果本发明的组合物的给药导致抗药性，将不会抵抗ARV。同样地，本发明的组合物不太可能产生抗药性，使得能够危害使用ARV的替代性有效治疗。因此，如本文所预期的，在本文中公开的组合物的使用避免了选择HIV抵抗菌株（其有时会在ARV给药时产生），并因此本发明的组合物为预防HIV提供有利的替代选择。
如本文所预期的，由于本发明的组合物能够用于治疗由多于一种微生物引起的合并感染，理论上，可使用所述组合物，而不需要对个体进行HIV首次筛检。另外，如本文所预期的，本发明的组合物可配制成非处方（OTC）分布。因此，展望此组合物将提升包括抗HIV组合物在内的这些抗微生物组合物的可达性和可负担性，并因此为公共卫生带来重大益处。
当存在于本发明的组合物中时，卡拉胶包含λ卡拉胶。就此而言，存在非λ卡拉胶（这种情况下组合物的卡拉胶组分可被称为“卡拉胶”或“卡拉胶混合物”），卡拉胶混合物含有至少约50%（并优选至少50%）的λ卡拉胶，基于组合物中卡拉胶的总干重。在更优选的实施方案中，λ卡拉胶的用量至少约为卡拉胶总干重的75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99 %（即λ卡拉胶及非λ卡拉胶）。其他优选的用量为至少75%、至少约85%、至少约95%、约85至约99%以及从约94至约97%的λ卡拉胶。适用于本发明中的卡拉胶可从商业供应商（如Sigma Aldrich, St. Louis, MO）中获得。
在本发明的组合物中卡拉胶的剩余部分可包含至少一种非λ卡拉胶。“非λ卡拉胶”意思是除了λ卡拉胶外的任何卡拉胶，如κ卡拉胶、ι卡拉胶、κ-II卡拉胶（其包括κ和ι卡拉胶）、μ卡拉胶和ν卡拉胶。非λ卡拉胶也可从商业上（如Sigma Aldrich, St. Louis, MO）获得，或可依照标准技术从海藻中提取。在优选的实施方案中，非λ卡拉胶包括κ卡拉胶、ι卡拉胶和κ-II卡拉胶，及其任何两种或更多种的混合物。在优选的实施方案中，卡拉胶构成中的非λ卡拉胶组分少于卡拉胶总干重的约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或约25%。在更优选的实施方案中，非λ卡拉胶组分为大约卡拉胶总干重的少于约25%、少于约15%、少于约5%、约1至约15%或约3至约6%。在其它优选的实施方案中，卡拉胶混合物大体上或完全不含右旋糖，此成分常发现在用于食品工业的卡拉胶中。
可使用含有含量少于1%或多于5%的λ卡拉胶或卡拉胶的组合物，只要所述组合物提供抑微生物作用并保持药物可接受性，例如阴道可接受性。“阴道可接受性”的意思是，流变特性，如组合物的粘度允许其用于预期目的（例如组合物保持粘度，以便使用者能够应用并保留在阴道穹窿中，以及提供诸如大体上无气味、平滑、清晰、无色和无味的审美特性）。选择粘度以便使组合物能够均匀地覆盖阴道穹窿的上皮层。通常，组合物的粘度为约10000至约50000cP，优选约20000至约50000cP，以及更优选约30000至约50000cP。
卡拉胶是由以线性方式排列的重复的D-半乳糖以及3,6-脱水D-半乳糖单元组成的线型多糖。此聚合物高度硫酸化，每个二糖单元含有三个SO3基团。卡拉胶具有连续的分子量。通常，在本发明组合物中所用到的卡拉胶混合物可具有多达约2×106道尔顿的分子量，少于约1%的卡拉胶分子具有1×105道尔顿的平均分子量（用气相渗透色谱以及光散射法测定）。更具体地，本发明中的λ卡拉胶具有约600000至约1200000道尔顿的平均分子量。这种物理性质把不被吸收性赋予最终制剂，其反过来提供延长的抗微生物活性。
本发明的卡拉胶能够提供数个其它益处。若曝露在冰冻温度、环境温度或沸腾温度，卡拉胶保持稳定。该混合物能与人类阴道环境相适应。不希望受任何具体操作理论束缚，据信此卡拉胶与人类阴道环境相适应，且不会作为基质，或相反引起或刺激天然阴道菌群的生长，它们也不是有毒的以致瓦解在阴道内的天然菌群的平衡。除归属于本发明的卡拉胶的性质之外，其抗微生物活性延续一段时间，由于其并非全身吸收或降解成对人体有害的任何能够吸收的副产物。
如上面所讨论到的，申请人此前已报道过水溶性金属盐与卡拉胶之间的复合物的抗病毒作用。金属盐与卡拉胶的这种复合物可与一种或多种凝集素结合应用于本发明的组合物中。在优选的实施方案中，此金属盐为锌盐（且此抗微生物组合物可被称为“卡拉胶锌”）。
锌是诸如HIV和HSV-2之类的性传播病原体的抑制剂。已表明醋酸锌与硫酸锌抑制在细胞培养中的HIV感染，以及抑制在细胞培养和实验室动物中的HSV-2感染。已表明锌盐有效阻隔在体外由HIV引起的感染（Haraguchi, Y., et al. Antiviral Res 43, 123-133(1999）以及阻隔由口蹄疫病毒、人类鼻病毒、A型流行性感冒和B型流行性感冒、塞姆利基森林病毒以及辛德毕斯病毒引起的感染（Sergio, W. Medical Hypotheses 26,253(1988)）。Haraguchi等通过p24 ELISA和RT试验，发现氯化锌、醋酸镉和氯化汞抑制HIV-1的生产。当以多达550μg/mL的浓度存在时，氯化锌没有表现出明显的细胞毒性。另外，Fenstermacher和DeStefano提出锌形成带有显著削弱的催化活性的高度稳定的HIV逆转录酶-（引物-模板）复合物。Fenstermacher KJ, Destefano JJ. Journal of BiologicalChemistry. 2011 Nov 18;286(47):40433–42。
因此，除与卡拉胶和凝集素结合使用之外，在本文中也考虑到此水溶性锌盐可与在本发明的组合物中的一种或多种凝集素结合使用。特别地，包含GFRT和醋酸锌的组合物可结合使用，以提高GFRT的抗HIV效力。
在本发明中有用的锌盐既包括无机盐也包括有机盐，当依照本发明使用时，其显示出抗微生物性能，而不引起不能接受的刺激。本发明所使用的可能的水溶性锌盐包括醋酸锌、丙酸锌、丁酸锌、甲酸锌、葡萄糖酸锌、甘油酸锌、羟乙酸锌、乳酸锌、硫酸酸、氯化锌以及溴化锌。在此也考虑到ZnSO4、ZnCl2、ZnBr2、Zn(Ac)2等的使用。铜和银对应的盐在本发明中也是有用的，倘若它们在体内是无刺激性的并且不会引起降解至对人体有害的任何能够吸收的副产物。如本文所预期的，本发明的组合物可包括在约0.03%和1.5%之间的水溶性金属盐，且具体为组合物总重量的约0.3%到1.0%的重量。
卡拉胶和锌金属的复合物，以及具体到在本发明中所使用的醋酸锌，可根据在现有技术中公开的方法制备，如在美国专利8,367,098中所描述的。同时参见Fernández-Romero JA, et al. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2012 Jan;56(1):358–68; Kenney, J., et al., Antimicrobial agents and chemotherapy, 2013. 57(8):p. 4001-9，在此全部并入作为参考。简单地说，这样的复合物可以通过标准程序制备，其中金属离子替换在多糖主链上天然存在的阳离子。例如，卡拉胶锌（指的是本发明的锌阳离子和卡拉胶之间的复合物）是通过锌非共价地附着于卡拉胶的硫酸基团的过程所合成的化合物。Kenney, J., et al., Antimicrobial agents and chemotherapy, 2013. 57(8): p.4001-9。
以上过程产生了水溶的并有效对抗诸如HIV和HSV-2的包膜病毒或如HPV的无包被病毒的化合物。和无机锌盐或简单的有机锌盐不同，卡拉胶锌维持了优选的流变特性并具有高分子量（多达2000000道尔顿），使其负责被配制成无刺激性且不被吸收的阴道内或直肠产品。此组合物可被称为“复合物”，因为在金属与卡拉胶之间存在的分子间相互作用排斥或阻止其解离成游离的金属阳离子。金属盐和带负电的硫酸化多糖的本复合物，在其物理、化学和/或抗微生物性能方面不同于水溶性金属盐和卡拉胶的混合物。
如本文公开的，一种或多种凝集素添加至水溶性锌金属盐和卡拉胶的组合；或者凝集素与锌金属盐或与卡拉胶的组合能够给组合物提供提高的抗病毒效力。适用于本发明的组合物的凝集素，包括但不仅限于格瑞弗森、西亚诺韦林（Cyanovirin）、西托韦林（Scytovirin）、 阿克汀诺文（Actinohivin）及其它抗病毒凝集素蛋白。参见如BrichacekB, et al., In Vivo Evaluation of Safety and Toxicity of a Lactobacillusjensenii Producing Modified Cyanovirin-N in a Rhesus Macaque VaginalChallenge Model. Bereswill S, editor. PLoS ONE. 2013 Nov 12;8(11):e78817;Takebe Y, et al. Antiviral Lectins from Red and Blue-Green Algae Show PotentIn Vitro and In Vivo Activity against Hepatitis C Virus. Choi J, editor. PLoSONE. 2013 May 21;8(5):e64449; Tanaka H, et al. Proceedings of the NationalAcademy of Sciences. 2009 Sep 15;106(37):15633–8；以及O'Keefe, B.R., et al.,Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States ofAmerica, 2009. 106(15): p. 6099-104。
更具体地说，申请人已发现添加GFRT至卡拉胶组合物和醋酸锌组合物（单独或组合）能够提供意想不到且协同的抗病毒活性。特别地，如在以下实施例中所提供的，GFRT的抗HIV活性在醋酸锌的存在下显著地提高。另外，卡拉胶在HPV上的抑制活性，以及卡拉胶和醋酸锌的组合在HSV-2上的抑制作用，均在GFRT的存在下协同地提高。
因此，如本文所预期的，本发明的抗微生物组合物可具体包含与锌金属和卡拉胶中的一种或多种组合的一种或多种凝集素。这些抗微生物剂可用于在本文中叙述的各种组合中，以提供具有提高的且协同的抗微生物活性的杀微生物组合物。这样的组合物可根据常规方法制得。例如，添加剂，如GFRT和/或ZA可例如以复合物的形式，与卡拉胶混合或联合。例如，如在US 8,367,098中所公开的，卡拉胶可与锌金属以复合物的形式存在。
在本文中考虑的卡拉胶、水溶性金属盐以及凝集素的组合优选地包括以上讨论的卡拉胶，包括卡拉胶的干重至少50%含量的λ卡拉胶，卡拉胶的剩余部分为至少一种非λ卡拉胶的，并且最优选的是95%λ卡拉胶和5%κ卡拉胶的组合，总组成以凝胶的形式包括1%至5%之间的卡拉胶，优选约3%的卡拉胶；组合物包括水溶性金属盐，优选包含锌盐，最优选为醋酸锌或乳酸锌的形式，在总组成中包括约0.1 wt.%至1.5 wt.%的金属，例如锌，最优选为约总组成的0.3 wt.%；并且可进一步包括一种或多种凝集素。在一个具体的实施方案中，凝集素的含量可为约0.01至1%之间，并具体为组合物的总重量约0.05%至0.2%之间。如本文所预期的，凝集素，如GRFT，可存在于组合物中，使得其占组合物总重量的0.1%。
如本文所预期的，“抗微生物剂”的“有效含量”是在有需要的对象中抑制一种或多种微生物感染的传染性的足够含量。然而，如本领域技术人员所理解的，抗微生物剂的有效含量，或用于组合物中这样的试剂的实际重量百分比，能够根据各种因素而有所变化，例如包括在组合物中的凝集素和其它抗微生物剂对于待处理的目标微生物的实际抗微生物活性。这样的活性能够根据常规方法以及相应配制的活性试剂的含量确定。例如，物质的抗病毒活性可根据在本文的图1和表2中所描述的方法测量。在确定活性抗微生物剂的剂量中所考虑的其它因素是本领域技术人员所熟悉的，且所述其它因素包括药物组合物的实际剂型和传送方式，例如此剂型是否打算用于缓释。
在此应理解，在组合物中的个别活性抗微生物剂，如每一个构成本发明的组合物的抗微生物剂的抗病毒组分，可以足以产生杀微生物剂的含量存在于组合物中，如以足以在将对所需个体施行组合物给药于有需要的对象时产生抗病毒作用的含量存在于组合物中。如本文所描述，以及在以下实施例中详述的，提高的且协同的抗微生物作用能够根据某些抗病毒剂的组合而获得。
因此，如上文描述的，为了提供抗微生物作用，λ卡拉胶或卡拉胶通常以基于组合物总重量约1至约5%的含量存在。当包含在本发明的组合物中时，在优选的实施方案中，卡拉胶以占组合物总重量约3%的含量存在。然而，这样的含量，还有凝集素、金属盐和其它试剂的含量，可变化并由本领域技术人员利用常规方法确定。
“抗微生物的”或“抗微生物作用”意思是此组合物抑制或降低由细菌、原生动物、病毒或另一微生物引起的性传播感染的传播可能性。本发明的组合物对于预防性传播感染，例如抑制由HIV、HPV和HSV-2引起的感染是有用的。另一方面，术语“抗微生物的”和“抗微生物作用”并不意为表达、暗示或被限制为由此实现抑制感染传播的任何具体的方法。
申请人也意外地发现GFRT对HPV具有抗病毒效用。因此，本发明包含了含有单独的GFRT或与其它抗微生物剂和药剂组合的GFRT的组合物，以及通过给药这样的组合物在有需要的对象中治疗HPV感染的方法。如本文讨论到的，GFRT在这样的组合物中的有效含量和剂型可由本领域技术人员根据常规方法确定。
本领域技术人员将意识到在本文公开的任何一种或多种抗微生物组合物还可具有对其它STI的抑制作用，并因此作为多用途预防技术的一部分，向有需要的对象给药这样的组合物可同时用于治疗或预防由其它STI引起的感染，并因此获得公共卫生益处。
因此，在此可以预期本发明的抗微生物组合物可给药于对象（如人类），以便治疗或预防微生物感染，包括但不仅限于病毒感染，例如通过抑制微生物的生长或复制。特别需要关注治疗或预防的病毒包括但不仅限于HIV、HPV、HSV各种菌株，包括HSV-2。
如本文所使用的，有需要的对象包括处于微生物如病毒感染风险的人或已受感染的人。如本文具体考虑的，微生物感染的风险包括病毒感染的风险，并且包括但不仅限于性传播引起的感染的风险。如在本文中使用的，术语对象的“治疗”是本领域技术人员所熟悉的，并包含在已感染的个体中减少症状和/或病原体的扩散。这样的减少可与处于病原体传播至另一个体的可能性中的疾病相关，并与已治疗的对象获得另一种微生物感染，如HIV的可能性的减少相关。例如，已观察到受疱疹感染的个体具有获得HIV感染的增加的倾向。因此，据信根据本发明的方法， STI的治疗将具有使病人不易受其它感染，如HIV影响的相关益处。
如本文所使用的，术语“预防”被理解为是指设计成降低微生物感染可能性的预防性治疗，包括但不仅限于未受感染、通过性传播易受影响的个体的感染。
如本文所使用的，“其它STI”是本领域技术人员所熟悉的，并及包括如淋病奈瑟氏菌、沙眼衣原体、细菌性阴道病、阴道毛滴虫、乙型肝炎和其它。
除在此讨论的卡拉胶、凝集素及金属盐之外，其它抗微生物化合物也能够用于本发明的组合物，包括聚合物，如萘磺酸盐及其他硫酸化或磺化的聚合物（McCormack S etal., Lancet. 2010 Oct 16;376(9749):1329-37；树枝状大分子（Rupp R, et al., Int JNanomedicine,2007;2(4):561–6；以及纤维素，包括纤维素类似物及其衍生物（ChaoboHuanga, et al., Biomaterials Volume 33, Issue 3, January 2012, Pages 962–969。这些及其它合适的抗微生物剂，包括但不仅限于适用于本发明组合物的抗病毒化合物，均为本领域技术人员所熟悉。
本发明的组合物可配制成进一步含有其它活性试剂和/或惰性成分，取决于预期的用途（如以下描述的）。例如，包含一种或多种治疗剂的制药配方，包括例如一种或多种活性抗微生物剂或其它治疗剂或在药学上可接受的载体中的药物，均在此考虑到。适用于药物组合物的载体，以及特别是用于在此考虑到的组合物的阴道内和直肠内能接受的剂型的载体，均为本领域技术人员所熟悉，并且包括例如各种商业上能够获得的生理学能接受的运载体（vehicles）、助剂、赋形剂和稀释剂。
这样的组合物可经配制用于处方及非处方用途。如本文所理解的，“非处方”药物组合物（也称为“OTC”或非处方药物）为本领域技术人员所熟悉并且指的是没有处方也能买到的药物。
在具体实施方案中，本发明的组合物还可含有能够在阴道给药的药物。优选的药物包括，例如避孕药，如类固醇激素，例如Saleh等、美国专利5,972,372（“Saleh”）公开的那些，其所公开的内容在此并入作为参考。在本发明中有用的的避孕药的例子包括孕酮、ACTH、雄激素、雌激素、促性腺激素、人类生长激素、尿促性素、黄体酮、孕酮（如左炔诺孕酮、炔诺酮、3-酮-去氧孕烯和孕二烯酮）、孕激素、尿促卵泡素、抗利尿激素及其组合。优选的试剂包括促孕化合物（如醋酸炔诺酮和NESTORONE™ (“NES”)。（也就是16-亚甲基-17α-乙酰氧基-19-去甲孕甾烯-3,20-二酮（16-methylene-17.alpha.-acetoxy-19-norpregnene-3,20-dione））），以及孕酮（如左炔诺孕酮（LNG））。
优选的避孕药为Nestorone 16-亚甲基-17α-乙酰氧基-19-去甲孕甾-4-烯-3,20-二酮（16-methylene- l7α-acetoxy- 19-norpregn-4-ene-3, 20-dione）（在下文为“NES”），其在文献中已被鉴定为“ST-1435”。在利用经典生物鉴定测量促孕的效力的比较研究中，发现NES具有高于黄体酮100倍并高于左炔诺孕酮10倍的促孕活性（Kumar, N., etal.Steroid 65, 629-636 (2000)）。因此需要较少含量的NES以获得排卵抑制。与缺乏雄激素、雌激素和类糖皮质激素（肝糖原沉积）活性以及缺乏对脂质或临床化学参数的作用结合的效力，赋予NES在避孕药中使用的特殊优点。Kumar, N., et al.Steroid 65, 629-636(2000); Odlind, V., et al. Contraception 31, 130 (1985); Robins, A. & Bardin,C. Ann N Y Acad Sci828, 38-46 (1997)。然而，NES在口服时已表现出经历快速的新陈代谢和失活，使其当经由移植物或阴道环来给予时适用于哺乳期妇女。Massai, R., et al.Steroid 65, 703-707 (2000); Lahteenmaki PLA, et al. Contraception 42, 555-562(1990)。当与κ/λ卡拉胶混合物以凝胶形式结合时，NES的优选传送剂量为约75至约100µg每天之间，这将达到约200 pmol/L的NES的血浆水平并获得在月经期间良好的出血模式。其它优选的能够在阴道给药的药物包括用于激素取代疗法的试剂，如雌激素物质（例如乙炔雌二醇）以及其它甾族化合物。
不希望受任何具体操作理论束缚，据信卡拉胶具有赋予杀微生物性能，同时为避孕药剂或用于激素取代疗法的试剂提供释放传送系统的双重功能。另外，据信卡拉胶能够赋予杀微生物性能，同时稳定蛋白质乳液。当它们可以凝胶形式在组合物中使用时，在此描述的组合物不仅限于只包含卡拉胶凝胶的使用。能够制备出用于其它传送系统的制剂，也因此该组合物可以是适用于抗微生物剂传送的任何物理形态，包括凝胶、溶液、固体或者干燥或粉末的形态。
此组合物还可含有与在本文公开的组合物适用的、生理学能接受的pH控制剂。合适的缓冲剂可由本领域技术人员利用常规方法确定。在具体实施方案中，此缓冲液为醋酸缓冲液。在另一实施方案中，此醋酸缓冲液包含醋酸和醋酸钠的混合物。
在具体的实施方案中，此组合物还可包含防腐剂。在具体的实施方案中，此防腐剂为苯甲酸甲酯。其它合适的防腐剂包括例如对羟基苯甲酸的烷基酯（如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯）、乙内酰脲衍生物、对羟基苯甲酸酯类（如对羟基苯甲酸甲酯）、丙酸盐、三氯生三碳酸替苯胺（triclosan tricarbanilide）、茶树油、乙醇、法尼醇、醋酸法尼酯、六氯酚以及季铵盐，如苯变形物（benzolconjure）、锌盐和铝盐、苯甲酸钠、苯甲醇、苯扎氯铵和氯丁醇。通常，此防腐剂以基于组合物总重量多达约0.3%的用量存在。
除了抑制在生产过程中因疏忽引入的微生物的生长之外，此防腐剂能够防止可能发生在组合物中的活性试剂的有害影响，归因于一旦组合物引入体内，存在正常的身体菌群。这会延长活性试剂在组合物中保持活性的时间长度。此组合物包括约5mM至约25mM的pH控制剂以及0.1%至0.3%的防腐剂。
如根据本发明的方法所考虑到的，本发明的组合物可以本技术领域人员所熟悉的各种各剂型给药。因此，在此可以理解，本发明的抗微生物组合物的药物制剂包含常见的制剂，该常见的制剂适于使用在本文公开的抗微生物剂的治疗所用的剂型和给药路径。这样的制剂能够包括例如液体溶液、液体悬浮液、片剂、胶囊、软胶囊（gelcap）、气溶胶以及皮肤贴片，所述液体溶液、液体悬浮液、片剂、胶囊、软胶囊、气溶胶以及皮肤贴片包含有效含量的一种或多种用于口腔、鼻腔、和/或外用的抗微生物剂。因此，在此考虑到的是组合物可被给药以治疗或预防全身性感染。然而，如本文所考虑的，在具体的实施方案中，本发明的药物制剂和组合物期望用于阴道和/或直肠给药以预防或治疗感染。
这样的组合物可由本领域技术人员根据制药工业的标准技术适当地配制成例如凝胶、乳霜、泡沫、薄膜、片剂和栓剂、阴道内环、子宫内避孕器或系统以及纳米纤维。
如本文所考虑的，本发明的方法包括根据由本领域技术人员设计的给药模式和频率给药在本文公开的组合物，以实现在有需要的对象中以最适合预防或治疗微生物感染的含量和一段时间内的治疗剂量给药。这样的给药可例如用于立即释放或缓释。
以下实施例用于进一步阐明本发明的某些实施方案，但并不用于以任何方式限制本发明。在下文描述到的实验中利用了常规方法和商业上能能够获取的试剂，除了由B. O'Keefe (Molecular Targets Development Program, National Cancer Institute atFrederick, Frederick, MD)友好提供的GFRT外。
实施例1. GZC凝胶制剂的生产。
此前已描述过适用于本发明的卡拉胶+醋酸锌组合的制备方法，并在下文概述。参见例如Kenney J, et al. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2013 Jul 15;57(8):4001–9。
卡拉胶的制备：对于步骤1，将2829g无菌已过滤的水以及3.923g三水乙酸钠（Sigma）倒进4升双行星式搅拌器（Charles Ross & Son, Hauppauge, NY）中。在69°C、40rpm下加热此溶液5分钟。加入卡拉胶（102g，最终浓度为3.4%），并在69°C下搅拌此混合物3小时。对于步骤2，待此制剂冷却至25°C后，加入含有6g苯甲酸甲酯（Spectrum, Gardena,CA）)-60ml丙二醇（Sigma）的溶液，并在40rpm下搅拌此溶液额外1小时。调节制剂pH至6.8，并在真空条件下搅拌反应体积15分钟以除去气泡。
醋酸锌/卡拉胶的制备：对于步骤1，利用与制作卡拉胶的方案类似的方案制作醋酸锌/卡拉胶的组合，但有以下改变：使用894ml的10mM醋酸钠缓冲液（pH 6.4）。加入卡拉胶（31g）以达到3%的最终浓度。加入含有3g二水醋酸锌-50ml醋酸钠缓冲液的溶液，并在40rpm下搅拌此溶液额外20分钟。使用含有2g苯甲酸甲酯-20ml丙二醇的混合物。
对羟基苯甲酸甲酯含量、锌的含量以及生理化学性质（渗透压浓度、pH、简单粘度（simple viscosity））利用如在Fernandez-Romero JA et al., 2012, AntimicrobAgents Chemother. 56:358-368中描述的已建立的方法确定。
稳定性研究。等份（25g）的凝胶在以下条件下储存在30ml聚丙烯瓶（Qorpak,Bridgeville, PA）中：30°C/65%相对湿度（RH），40°C/75% RH以及50°C/环境湿度。定期移出瓶子，并分析凝胶的对羟基苯甲酸甲酯含量、渗透压浓度、pH、粘度以及锌的含量，如Fernandez-Romero JA et al., 2012, Antimicrob Agents Chemother. 56:358-368所描述的。
格瑞弗森/醋酸锌/卡拉胶制剂的制备：重复如上提供的制备醋酸锌/卡拉胶制剂的步骤，但有额外的第三步，其中往醋酸锌/卡拉胶制剂加入GRFT的水溶液（O'Keefe,B.R., et al., Proceedings of the National Academy of Sciences of the UnitedStates of America, 2009. 106(15): p. 6099-104；美国专利8,088,729），并且如在步骤2中的在25°C、40rpm下混合额外的20分钟。
实施例2. GRFT对抗HIV和HPV的活性的体外试验。
在标准体外试验中验证GRFT对抗HIV的活性。简单来说，GRFT由Dr. Barry O’Keefe (NCI)提供并利用如Begay O, et al. AIDS Research and Human Retroviruses.2011 Sep 1;27(9):1019–24所描述的MAGI试验以及实验室菌株HIV-1MN（X4病毒）和HIV-1ADA-M（R5病毒）在TZM-bl细胞（NIH AIDS Research and Reference Reagent Program）中测试其抗HIV活性；参见图1A。
实验室菌株HIV-1MN（X4病毒）和HIV-1ADA-M（R5病毒）由在the AIDS and CancerVirus Program, SAIC-Frederick, Inc., National Cancer Institute, Frederick, MD的Dr. J.D. Lifson提供。用不同的非毒性GRFT浓度处理TZM-bl细胞，然后立即加入HIV-1病毒（100-200个感染单位），接着培养72小时，然后固定并染色细胞单层。在GraphPadPrism v5.0软件中利用剂量反应抑制分析计算IC50值（在图中表示为有95%的置信区间的垂直虚线）。所有非毒性GRFT浓度均以一式三份测试。图表显示了平均值±SD。
还根据常规方法利用实验室菌株HIV-1NL4-3在外周血单个核细胞（PBMC）中测试抗HIV活性。参见Trkola A, et al., J Virol. 1999 Nov;73(11):8966–74。简单来说，用不同的非毒性浓度的GRFT处理激活的PBMC（2×106/ml），然后添加100 TCID50的病毒，接着过夜培养。在感染后的第1天和第4天将上层清液替换为新鲜的刺激培养基。在感染后第7天利用p24 ELISA测试上层清液中的p24水平。在GraphPad Prism v5.0软件中利用剂量反应抑制分析计算IC50值（在图中表示为有95%的置信区间的垂直虚线）。所有的非毒性GRFT浓度均以一式三份测试。参见图1B。此图表显示平均值±SD。来自两种试验的数据证实了GRFT在体外具有有效的抗HIV活性。
还研究了GRFT对抗HPV假病毒的活性。具体地，在HeLa细胞中利用荧光素酶检测估计GRFT对HPV16、HPV18以及HPV45假病毒（PsV）的抗病毒活性（Buck CB, et al. PLoSPathog. 2006 Jul 1;2(7):e69）。在此实验中，用不同的非毒性GRFT浓度处理HeLa细胞，然后立即添加HPV16、HPV18或HPV45 PsV（生产~300-700相对发光单元的病毒数量），接着培养72小时。进行荧光素酶检测以获得图1C所示的剂量反应曲线。在GraphPad Prism v5.0软件中利用剂量反应抑制分析计算IC50值（在图中表示为有95%的置信区间的垂直虚线）。所有的非毒性GRFT浓度均以一式三份测试。此图表显示平均值±SD。数据表明GRFT具有温和的体外活性对抗HPV16、18和45 PsV。
实施例3. 与ZA和C组合的GRFT导致抗HIV和抗HPV协同作用。
根据以上描述的方法测试与醋酸锌（ZA）和卡拉胶（C）组合的GRFT的抗HIV和抗HPV活性。简单来说，为了测试抗HIV活性，用各种均等剂量的GRFT、ZA或GRFT+ZA（基于每一个API的IC50）在37 oC下处理激活的PBMC 1小时，然后在相同剂量的每个化合物或组合存在下，曝露于100 TCID50 的HIV-192BR014（一式三份）。包括了培养基处理（只有病毒）的细胞作为对照。十八个小时之后，清洗细胞并在有IL-2的培养基的存在下铺板（plate）（仅有的例外是用ZA处理的那些样品，其中ZA已经被替换）。在第4天重复此步骤并在第7天收集上层清液，以通过ELISA测量HIV-1的p24水平。为了试验抗HPV活性，在 37 oC下用各种均等剂量的GRFT、C或GRFT+C（基于每一个API的IC50）处理HeLa细胞，并立即曝露于HPV16 PsV（一式三份）。包括了培养基处理（只有病毒）的细胞作为对照。荧光素酶测试在感染后72小时进行。利用Chou-Talalay方法（Chou, T.C. Pharmacological Reviews, 2006, 58(3): p. 621-81）与Windows软件的Cacusyn（Biosoft, Cambridge, United Kingdom）估计组合指数（Combination indexes，CI）。结果在表1中提供。如本文所提供的，“CI”指的是药物相互作用程度的数量测度，如下：累加作用（CI=1）；协同作用（CI<1），或拮抗作用（CI>1）。“Dm”指的是半数有效剂量（IC50）；“m”指的是剂量效应曲线的S形态的测量，还代表了半数有效曲线的斜率；“r”指的是半数有效曲线的线性相关系数。如其中所使用的，%IC50下降= 1-[IC50组合/IC50 GRFT]*100。%IC50下降值是基于粗体的API。N/A=不适用。
在表1中提供的数据表明在ZA和GRFT之间对抗HIV以及在C和GRFT之间对抗HPV16PsV有意外的协同作用（表1；CI值小于1）。另外，重要的是，看不到在GRFT和C或ZA之间的拮抗作用的证据。
表1. 与ZA和CG组合的GRFT导致抗HIV和抗HPV协同作用。
实施例4. GRFT防止HSV-2入侵靶细胞但没有阻止病毒吸附。
Nixon等最近的研究（Nixon, B., et al., Journal of virology, 2013. 87(11): p. 6257-69）表明 GRFT在体内外阻隔HSV-2感染，而且提到抑制病毒作为作用方式的细胞至细胞的传播。我们已在Vero细胞中进行了实验，提出了抑制HSV-2的入侵但没有吸附至靶细胞。对于抑制病毒吸附，如此前描述的进行了噬斑抑制试验。Ashley, R., Herpessimplex viruses, p375-395. In Schmidt NJ, Emmons RW (ed), Diagnosticprocedures for viral, rickettsial, and chlamydial infections, 7th ed.American Public Health Association, Washington, DC. 1995。简单来说，在37 ºC下预培养HSV-2 G菌株和不同浓度的GRFT或培养基（病毒对照）0、0.5、1和2小时，然后添加至预冷冻的Vero细胞并于4 ºC下保存。用冷培养基清洗单细胞层三次，然后添加甲基纤维素覆盖物，并在37ºC、5% CO2和98%的湿度下培养48小时，然后固定、染色和计量噬斑形成单位（pfu）。病毒复制百分比是相对病毒对照计算的。参见图2A。还试验了病毒入侵的抑制。简单来说，进行了与上述吸附研究和图2A相同的试验，然而，在4ºC下培养2小时后，细胞被转移至37ºC、5% CO2和98%的湿度培养额外的2h。用柠檬酸缓冲液（pH=3.0）处理单细胞层2分钟，以使残留在细胞表面上的任何病毒失活。用冷培养基清洗单细胞层三次，然后添加甲基纤维素覆盖物，并在37ºC、5% CO2和98%的湿度下培养48小时，然后固定、染色和计量噬斑形成单位（pfu）。在图2B中描述的图表示相对于病毒对照的病毒复制百分比（平均值±SD）（每种条件一式三份）。
实施例5. GRFT/ZA/C组合提高了对抗HSV-2的抗病毒活性。
之前我们报道过ZA和CG的组合导致了对抗HSV-2的有效的抗病毒协同作用。Fernandez-Romero, J.A., et al., Antimicrobial agents and chemotherapy, 2012.56(1): p. 358-68。最近我们发现在体外抗HSV-2活性的水平GRFT、ZA和C的兼容性，并发现当两种或三种这些化合物组合时IC50值的显著下降。简单来说，在37 ºC下预培养HSV-2 G菌株和不同浓度的每种化合物或其组合（基于均等的IC50比率），并添加至Vero细胞，然后在37ºC、5% CO2和98%的湿度下培养6天。进行了上染PrestoBlue试验以测试抗病毒活性。相对荧光单元（RFU）在570nm下激发、600nm下发射而测量。利用以下公式计算病毒复制百分比：病毒复制百分比=[(O.D细胞对照- O.D化合物)/(O.D细胞对照- O.D病毒对照)]*100。在GraphPad Prism v5.0软件中利用剂量反应抑制分析计算IC50值。数据在下文的表2中提供。如表所提供的，IC50或IC50降低百分比数值是基于粗体字的API；N/A=不适用。
表2. GRFT/ZA/C组合提高对抗HSV-2的抗病毒活性。
实施例6. GZC在严格小鼠模型中显著降低HSV-2感染
为了确定GZC组合是否在体内有效对抗HSV-2，我们使用了高度严格的模型，其中用醋酸锌/卡拉胶凝胶处理经DepoProvera处理的小鼠1或2小时，然后用106 pfu的HSV-2进行阴道攻击。Fernández-Romero JA, et al. Antimicrobial Agents and Chemotherapy.2012 Jan;56(1):358–68。
简单来说，在指定的配方（GZC=GRFT+ZA+C；ZC=ZA+C；GC=GRFT+C且在此实施例中C表示卡拉胶）之后，用106pfu的HSV-2攻击经Depo处理的Balb/C小鼠1小时（图3A）或2小时（图3B）。在此实施例中的所有制剂均应用为凝胶制剂（n=15-30/配方）。基于症状，在图3中对每一个治疗组记录并显示随时间变化的未被感染的动物百分比。在组合配方与单独C之间的显著区别由星号（p<0.037）指出。利用费舍尔精确检验进行统计分析。利用此方法，我们发现包含0.1%GRFT、0.3%ZA以及3%CG凝胶（GZC）的组合物显著降低了HSV-2感染（相对于CG对照；图3）。值得注意的是，可见在GZC处理的小鼠中的感染频率低于在GC或ZC组中观察到的感染频率。
尽管本发明在此已参照特定实施方案进行描述，但是应该理解这些实施方案仅仅作为例证说明本发明的原理和应用。因此应理解，可对示例性实施方案进行各种修改，并且可设计其它方案，而不背离由所附权利要求书限定的本发明的精神和范围。

Claims (25)

1.一种抗微生物组合物，该抗微生物组合物包含有效含量的抗微生物剂以及一种或多种额外的抗微生物剂，所述有效含量的抗微生物剂包含一种或多种凝集素，所述一种或多种额外的抗微生物剂选自生理学能够接受的水溶性金属盐、卡拉胶、聚合物、树枝状大分子、纤维素、纤维素类似物、纤维素衍生物和它们的组合。
2.权利要求1的抗微生物组合物，该抗微生物组合物还包括生理学能够接受的pH控制剂。
3.权利要求2的抗微生物组合物，其中所述生理学能够接受的pH控制剂是醋酸盐缓冲液。
4.权利要求3的抗微生物组合物，其中所述醋酸盐缓冲液包含醋酸和醋酸钠的混合物。
5.权利要求1的抗微生物组合物，该抗微生物组合物还包括生理学能够接受的防腐剂。
6.权利要求5的抗微生物组合物，其中所述生理学能够接受的防腐剂包含对羟基苯甲酸甲酯。
7.权利要求1的抗微生物组合物，其中所述凝集素是格瑞弗森。
8.权利要求7的抗微生物组合物，其中所述格瑞弗森的存在量占所述组合物总重量的约0.01%至1%。
9.权利要求1的抗微生物组合物，其中所述卡拉胶的存在量占所述组合物总重量的约1%至约5%。
10.权利要求1的抗微生物组合物，该抗微生物组合物具有约为5.5至约7.5的pH值。
11.权利要求1的抗微生物组合物，其中所述金属盐是锌、铜或硫。
12.权利要求11的抗微生物组合物，其中所述锌金属盐是醋酸锌。
13.权利要求1的抗微生物组合物，其中所述金属盐的存在量为基于所述组合物总重量的约0.03%至约1.5%。
14.权利要求1的抗微生物组合物，其中所述抗微生物剂包含格瑞弗森和醋酸锌。
15.权利要求1的抗微生物组合物，其中所述抗微生物剂包含格瑞弗森和卡拉胶。
16.权利要求1的抗微生物组合物，其中所述抗微生物剂包含格瑞弗森、醋酸锌和卡拉胶。
17.一种在有需要的对象中抑制一种或多种微生物感染的方法，该方法包括将权利要求1的有效含量的抗微生物组合物给药于所述对象。
18.权利要求17的方法，其中的凝集素是格瑞弗森，抗病毒剂是醋酸锌和卡拉胶，并且其中病毒感染由一种或多种病毒引起，所述一种或多种病毒选自HIV、HPV、HSV-2和它们的组合。
19.权利要求17的方法，其中凝集素是格瑞弗森，抗病毒剂是醋酸锌，并且病毒感染由HIV引起。
20.权利要求17的方法，其中凝集素是格瑞弗森，抗病毒剂是卡拉胶，并且病毒感染由HPV引起。
21.一种在有需要的对象中抑制HPV感染的方法，该方法包括给药含有格瑞弗森的有效含量的抗微生物组合物。
22.权利要求21的方法，其中所述组合物还包括一种或多种额外的抗微生物剂。
23.权利要求22的方法，其中所述抗微生物剂是卡拉胶。
24.权利要求1的抗微生物组合物，该抗微生物组合物还包括抗避孕药。
25.权利要求1的抗微生物组合物，其中所述组合物的剂型选自凝胶、霜剂、泡沫、薄膜、片剂、栓剂、阴道内环、宫内避孕器或系统以及纳米纤维。
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015116375A1 (en) * 2014-01-28 2015-08-06 The Population Council, Inc. Combination product for the prevention of sexually transmitted infections
EP4164670A1 (de) * 2020-06-10 2023-04-19 URSAPHARM Arzneimittel GmbH Bromelain-protease, bromelain, jacalin-ähnliches lectin, extrakt aus dem stamm und/oder der frucht einer ananas-pflanze, kombinationspräparat, bromelain-proteaseinhibitor, protein-proteasen-gemisch, durch exogene nicht-enzymatische glykation entstandenes glykiertes bromelain-protein zur verwendung bei der behandlung oder prophylaxe von virusinfektionen, hervorgerufen durch coronaviren in einem mensch oder tier
CN112402451A (zh) * 2020-12-04 2021-02-26 湖北精耕生物工程有限公司 一种抗hpv、hsv药物及其制备方法
WO2022240943A1 (en) * 2021-05-13 2022-11-17 The Population Council, Inc. Antiviral agents for treating severe acute respiratory syndrome
WO2022243843A1 (en) * 2021-05-20 2022-11-24 Council For Scientific And Industrial Research Antiviral lotion
WO2023031884A1 (en) * 2021-09-03 2023-03-09 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Formulation for co-administration of q-grft and tenofovir

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001095951A1 (en) * 2000-06-12 2001-12-20 Legere Pharmaceuticals, Ltd. Method of using lectins for contraception and prophylaxis agains t diseases transmittable by sexual contact and condom containing lectins
WO2003093322A2 (en) * 2002-04-30 2003-11-13 The Population Council, Inc. Carrageenan based antimicrobial compositions
WO2006071102A1 (en) * 2004-12-30 2006-07-06 Dobeel Co., Ltd. Spray-dried composition containing collectin family proteins or variants therof and process for preparing the same
WO2007064844A2 (en) * 2005-12-01 2007-06-07 Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-viral griffithsin compounds, compositions, and methods of use
US20090099149A1 (en) * 2007-10-11 2009-04-16 Wyeth Bioadhesive film
CN101687911A (zh) * 2007-05-16 2010-03-31 康久化学生物技术公司 抗病毒肽的半胱磺酸衍生物
US20100256089A1 (en) * 2002-04-30 2010-10-07 The Population Council, Inc. Unique combinations of antimicrobial compositions
CN103221824A (zh) * 2010-09-07 2013-07-24 智能生物科技有限公司 用于在具有低特异性抗体水平的受试者体内检测感染的方法和试剂盒

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0678030A1 (en) 1993-01-08 1995-10-25 The Population Council Use of sulphated polysaccharides for preventing sexually transmitted diseases
US5972372A (en) 1996-07-31 1999-10-26 The Population Council, Inc. Intravaginal rings with insertable drug-containing core
US20130150810A1 (en) * 2002-04-30 2013-06-13 The Population Council, Inc. Intravaginal ring for the delivery of unique combinations of antimicrobial compositions
US8567098B2 (en) 2013-03-19 2013-10-29 Henry Hsu Article of footwear with detachable upper and lower designs
WO2015116375A1 (en) * 2014-01-28 2015-08-06 The Population Council, Inc. Combination product for the prevention of sexually transmitted infections

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001095951A1 (en) * 2000-06-12 2001-12-20 Legere Pharmaceuticals, Ltd. Method of using lectins for contraception and prophylaxis agains t diseases transmittable by sexual contact and condom containing lectins
WO2003093322A2 (en) * 2002-04-30 2003-11-13 The Population Council, Inc. Carrageenan based antimicrobial compositions
US20100256089A1 (en) * 2002-04-30 2010-10-07 The Population Council, Inc. Unique combinations of antimicrobial compositions
WO2006071102A1 (en) * 2004-12-30 2006-07-06 Dobeel Co., Ltd. Spray-dried composition containing collectin family proteins or variants therof and process for preparing the same
WO2007064844A2 (en) * 2005-12-01 2007-06-07 Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-viral griffithsin compounds, compositions, and methods of use
CN101687911A (zh) * 2007-05-16 2010-03-31 康久化学生物技术公司 抗病毒肽的半胱磺酸衍生物
US20090099149A1 (en) * 2007-10-11 2009-04-16 Wyeth Bioadhesive film
CN103221824A (zh) * 2010-09-07 2013-07-24 智能生物科技有限公司 用于在具有低特异性抗体水平的受试者体内检测感染的方法和试剂盒

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BRIANA NIXON等: "Griffithsin Protects Mice from Genital Herpes by Preventing Cell-toCell Spread", 《JOURNAL OF VIROLOGY》 *
JESSICA KENNEY等: "A Modified Zinc Acetate Gel, a Potential Nonantiretroviral Microbicide, Is Safe and Effective against Simian-Human Immunodeficiency Virus and Herpes Simplex Virus 2 Infection In Vivo", 《ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY》 *
JOSEPH CALVIN KOUOKAM等: "Investigation of Griffithsin’s Interactions with Human Cells Confirms Its Outstanding Safety and Efficacy Profile as a Microbicide Candidate", 《PLOS ONE》 *

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Publication number Publication date
AU2020203720B2 (en) 2022-04-14
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US20190070253A1 (en) 2019-03-07
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AU2020203720A1 (en) 2020-06-25

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