CN106107033A - 一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法 - Google Patents

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CN106107033A CN201610500889.9A CN201610500889A CN106107033A CN 106107033 A CN106107033 A CN 106107033A CN 201610500889 A CN201610500889 A CN 201610500889A CN 106107033 A CN106107033 A CN 106107033A
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Abstract

本发明涉及一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，该方法，将饲用枯草芽孢杆菌活化，接种到种子培养液中培养，得种子液；将种子液接种到培养液中培养，得二级种子液；将二级种子液接种到液体发酵培养基中，培养，得发酵液；取地黄、陈皮、白术、麦冬、天花粉、山楂和麦饭石粉，粉碎，加水浸泡，煎煮过滤，所得滤液进行浓缩，得到浓缩液；将发酵液和浓缩液按照体积比8‑10:1‑3的比例混合均匀后，所得混合液体用泵输送至两效真空浓缩设备中，浓缩，加入淀粉混合均匀，进行雾化，热空气进行并流干燥，回收，即制备出饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉；本发明菌粉的制备方法，含水量均小于6%，活菌数在8000‑18000亿/g，保存两年仍然能保存95%菌种活性。

Description

一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法
技术领域
本发明涉及一种菌粉的制备方法，具体的说是一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法。
背景技术
枯草芽孢杆菌作为一种微生物制剂中的常用菌，枯草芽孢杆菌以芽孢形态进入动物肠道后，可迅速从休眠状态重新萌发，作为一种需氧菌，枯草芽孢杆菌在萌发、生长过程中可迅速、大量地消耗消化道中的游离氧，造成缺氧环境；而有害菌一般多为好氧菌，故其生长受到抑制，厌氧有益菌群成为优势菌群。同时，枯草芽孢杆菌还具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，可将体内酶原激活为有活性的酶，还可分泌一系列胞外酶系，如果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等，可帮助分解植物饲料中非淀粉多糖等物质，改善饲料利用率；且酸性肠道环境可刺激动物的肠道蠕动，促进消化吸收。此外，枯草芽孢杆菌本身作为非特异性免疫因子，可通过菌体或细胞壁成分刺激宿主细胞，从而激活巨噬细胞，或可作为非特异性免疫反应的免疫佐剂；也可使IgA等免疫球蛋白分泌增强，提高免疫识别力；刺激抗原呈递细胞(APC)，诱导T细胞、B细胞产生细胞因子，通过淋巴活化全身免疫系统 。同时，枯草芽孢杆菌在生长繁殖过程中能合成B族维生素,以及维生素E、K，可参与动物机体的新陈代谢，有促进钙、磷吸收、抗氧化、促凝血等作用。 目前市场上的枯草芽孢生产企业很多，但多数是小规模企业，作坊式生产，设备工艺落后，草芽孢杆菌质量参差不齐，产品中的成分构成不科学，有些虽然含菌数多，但杂菌率高，效果不好。因此制备具有稳定高活性的芽孢杆菌菌粉或者制剂，对推动生态绿色养殖，减少抗生素使用，提高动物性食品源头安全尤为重要。
发明内容
本发明目的是为解决上述技术问题的不足，提供一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉含水量均小于6%，活菌数在8000-18000亿/g，菌粉保存两年仍然能保存95%菌种活性。
一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将饲用枯草芽孢杆菌接种在斜面种子培养基上，35-37℃培养48h；所述斜面种子培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，蛋白胨0.2-2%，牛肉膏0.5-1.5%，酵母膏0.5-1.5%，氯化钠0.5%，琼脂1.5-2%，余量为水；
步骤二、从培养的新鲜斜面上挑取2-4环菌苔接种于装有50ml液体扩大培养基的250ml三角瓶中，35-37℃，180-240rpm摇床振荡培养16-24h，得到种子液；
所述液体扩大培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，蛋白胨0.2-2%，牛肉膏0.5-1.5%，酵母膏0.5-1.5%和氯化钠0.5%，余量为水；
步骤三、将上述培养的种子液接种到装有3L培养液的5L发酵罐中，接种量为培养液体积的5-15%；接种结束后，于150-250rpm，1:1通风量，pH6.5-7.0，35-37℃条件下培养16-20h，得到二级种子液；
所述培养液中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，豆饼粉0.5-2.0%，蛋白胨0.5-2.5%，硫酸铵0.25-1.5%，磷酸氢二钠 0.05-0.20%，磷酸二氢钠0.05-0.20%，硫酸镁0.05-0.5%和氯化钙0.01-0.10%，余量为水；
步骤四、将培养的二级种子液接种于装有30-35L发酵培养基的50L发酵罐中，接种量为发酵培养基体积的5-15%；接种结束后按1:0.6-0.75通风量，150-220rpm，pH6.5-7.0，35-37℃培养30-36h，得到发酵液；
所述发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.0-3.0%，淀粉0.5-2.0%，豆饼粉0.5-2.0%，蛋白胨0.2-2%，硫酸铵0.25-1.5%；碳酸钙0.01-0.05%，磷酸氢二钾0.01-0.05%，磷酸锰0.01-0.05%和氯化钙0.01-0.05%，余量为水；
步骤五、按重量份数，取地黄10-25份、陈皮7-11份、白术6-10份、麦冬8-12份、天花粉9-13份、山楂10-20份和麦饭石粉2-4份置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小时，然后置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎2-3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行5-6倍浓缩，得到浓缩液，备用；
步骤六、将发酵液和浓缩液按照体积比8-10:1-3的比例混合均匀后，所得混合液体用泵输送至两效真空浓缩设备中，一效温度75-80℃，真空度0.05-0.055MPa，二效50-55℃，真空度0.058-0.065MPa，浓缩比为3-4:1，浓缩结束后按10-20%比例加入淀粉混合均匀，用泵将物料输送至喷雾干燥塔顶部，由离心式雾化器在15000-18000rpm下进行雾化，用进口温度为140-155℃的热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出后从接料桶中回收，即制备出饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉；
所制备的浓缩液相对密度为1.5-1.8。
所述饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，含水量均小于6%，活菌数在8000-18000亿/g。
有益效果是：
本发明饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，针对饲用枯草芽孢杆菌的特点，对其进行分级培养，结合步骤中中药成分的添加，可增加菌种活性，延长其保持活性的周期，使所制备的菌粉活菌数在8000-18000亿/g，菌粉保存两年仍然能保存95%菌种活性。本发明工艺中各步骤的有机结合，保证采用的原料中药，地黄、陈皮、白术、麦冬、天花粉、山楂、麦饭石粉与饲用枯草芽孢杆菌相互作用，最终使所制备的饲料添加剂适用于各种动物，包括家禽，家畜等，可促进动物肠胃对营养物质的吸收，可促进动物健康快速生长。实验验证，本发明饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉在饲料中添加后，可明显提高动物机体的抗病性，加快动物生长速度。且本发明饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉不含防腐剂，对畜体无损害，具有广阔的市场应用前景。
具体实施方式
一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将饲用枯草芽孢杆菌接种在斜面种子培养基上，35-37℃培养48h；所述斜面种子培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，蛋白胨0.2-2%，牛肉膏0.5-1.5%，酵母膏0.5-1.5%，氯化钠0.5%，琼脂1.5-2%，余量为水；
步骤二、从培养的新鲜斜面上挑取2-4环菌苔接种于装有50ml液体扩大培养基的250ml三角瓶中，35-37℃，180-240rpm摇床振荡培养16-24h，得到种子液；
所述液体扩大培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，蛋白胨0.2-2%，牛肉膏0.5-1.5%，酵母膏0.5-1.5%和氯化钠0.5%，余量为水；
步骤三、将上述培养的种子液接种到装有3L培养液的5L发酵罐中，接种量为培养液体积的5-15%；接种结束后，于150-250rpm，1:1通风量，pH6.5-7.0，35-37℃条件下培养16-20h，得到二级种子液；
所述培养液中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，豆饼粉0.5-2.0%，蛋白胨0.5-2.5%，硫酸铵0.25-1.5%，磷酸氢二钠 0.05-0.20%，磷酸二氢钠0.05-0.20%，硫酸镁0.05-0.5%和氯化钙0.01-0.10%，余量为水；
步骤四、将培养的二级种子液接种于装有30-35L发酵培养基的50L发酵罐中，接种量为发酵培养基体积的5-15%；接种结束后按1:0.6-0.75通风量，150-220rpm，pH6.5-7.0，35-37℃培养30-36h，得到发酵液；
所述发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.0-3.0%，淀粉0.5-2.0%，豆饼粉0.5-2.0%，蛋白胨0.2-2%，硫酸铵0.25-1.5%；碳酸钙0.01-0.05%，磷酸氢二钾0.01-0.05%，磷酸锰0.01-0.05%和氯化钙0.01-0.05%，余量为水；
步骤五、按重量份数，取地黄10-25份、陈皮7-11份、白术6-10份、麦冬8-12份、天花粉9-13份、山楂10-20份和麦饭石粉2-4份置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小时，然后置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎2-3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行5-6倍浓缩，得到浓缩液，备用；
步骤六、将发酵液和浓缩液按照体积比8-10:1-3的比例混合均匀后，所得混合液体用泵输送至两效真空浓缩设备中，一效温度75-80℃，真空度0.05-0.055MPa，二效50-55℃，真空度0.058-0.065MPa，浓缩比为3-4:1，浓缩结束后按10-20%比例加入淀粉混合均匀，用泵将物料输送至喷雾干燥塔顶部，由离心式雾化器在15000-18000rpm下进行雾化，用进口温度为140-155℃的热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出后从接料桶中回收，即制备出饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉；
所制备的浓缩液相对密度为1.5-1.8。
所述饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，含水量均小于6%，活菌数在8000-18000亿/g。
实施例1
一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将饲用枯草芽孢杆菌接种在斜面种子培养基上，35℃培养48h；所述斜面种子培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖0.5%，蛋白胨0.2%，牛肉膏0.5%，酵母膏0.5%，氯化钠0.5%，琼脂1.5%，余量为水；
步骤二、从培养的新鲜斜面上挑取2环菌苔接种于装有50ml液体扩大培养基的250ml三角瓶中，35℃，180rpm摇床振荡培养24h，得到种子液；
所述液体扩大培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖0.5%，蛋白胨0.2%，牛肉膏0.5%，酵母膏0.5%和氯化钠0.5%，余量为水；
步骤三、将上述培养的种子液接种到装有3L培养液的5L发酵罐中，接种量为培养液体积的5%；接种结束后，于150rpm，1:1通风量，pH6.5，35℃条件下培养20h，得到二级种子液；
所述培养液中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖0.5%，豆饼粉0.5%，蛋白胨0.5%，硫酸铵0.25%，磷酸氢二钠 0.05-0.20%，磷酸二氢钠0.05%，硫酸镁0.05%和氯化钙0.01%，余量为水；
步骤四、将培养的二级种子液接种于装有30L发酵培养基的50L发酵罐中，接种量为发酵培养基体积的5%；接种结束后按1:0.6通风量，150rpm，pH6.5，35℃培养30h，得到发酵液；
所述发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.0%，淀粉0.5%，豆饼粉0.5%，蛋白胨0.2%，硫酸铵0.25%；碳酸钙0.01%，磷酸氢二钾0.01%，磷酸锰0.01%和氯化钙0.01%，余量为水；
步骤五、按重量份数，取地黄10份、陈皮7份、白术6份、麦冬8份、天花粉9份、山楂10份和麦饭石粉2份置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过60目筛，在所得中药粉末中添加其重量15倍的水，浸泡5小时，然后置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎2小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行5倍浓缩，得到浓缩液，备用；
步骤六、将发酵液和浓缩液按照体积比8:1的比例混合均匀后，所得混合液体用泵输送至两效真空浓缩设备中，一效温度75℃，真空度0.05MPa，二效50℃，真空度0.058-0.065MPa，浓缩比为3:1，浓缩结束后按10%比例加入淀粉混合均匀，用泵将物料输送至喷雾干燥塔顶部，由离心式雾化器在15000rpm下进行雾化，用进口温度为140℃的热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出后从接料桶中回收，即制备出饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉；
所制备的浓缩液相对密度为1.5。
所述饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，含水量均小于6%，活菌数在8000亿/g。
本实施例中所述饲用枯草芽孢杆菌购买自北京北纳创联生物技术研究院，菌种编号为BNCC189983。
实施例2
一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将饲用枯草芽孢杆菌接种在斜面种子培养基上， 37℃培养48h；所述斜面种子培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖1.5%，蛋白胨2%，牛肉膏1.5%，酵母膏1.5%，氯化钠0.5%，琼脂2%，余量为水；
步骤二、从培养的新鲜斜面上挑取4环菌苔接种于装有50ml液体扩大培养基的250ml三角瓶中， 37℃，240rpm摇床振荡培养16h，得到种子液；
所述液体扩大培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.5%，蛋白胨2%，牛肉膏1.5%，酵母膏1.5%和氯化钠0.5%，余量为水；
步骤三、将上述培养的种子液接种到装有3L培养液的5L发酵罐中，接种量为培养液体积的5-15%；接种结束后，于250rpm，1:1通风量，pH7.0， 37℃条件下培养16h，得到二级种子液；
所述培养液中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.5%，豆饼粉2.0%，蛋白胨2.5%，硫酸铵1.5%，磷酸氢二钠 0.20%，磷酸二氢钠0.20%，硫酸镁0.5%和氯化钙0.10%，余量为水；
步骤四、将培养的二级种子液接种于装有35L发酵培养基的50L发酵罐中，接种量为发酵培养基体积的15%；接种结束后按1: 0.75通风量， 220rpm，pH7.0， 37℃培养30h，得到发酵液；
所述发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖3.0%，淀粉2.0%，豆饼粉2.0%，蛋白胨2%，硫酸铵1.5%；碳酸钙0.05%，磷酸氢二钾0.05%，磷酸锰0.01-0.05%和氯化钙0.05%，余量为水；
步骤五、按重量份数，取地黄25份、陈皮11份、白术10份、麦冬12份、天花粉13份、山楂20份和麦饭石粉4份置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量25倍的水，浸泡8小时，然后置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行6倍浓缩，得到浓缩液，备用；
步骤六、将发酵液和浓缩液按照体积比10: 3的比例混合均匀后，所得混合液体用泵输送至两效真空浓缩设备中，一效温度80℃，真空度0.055MPa，二效55℃，真空度0.065MPa，浓缩比为4:1，浓缩结束后按20%比例加入淀粉混合均匀，用泵将物料输送至喷雾干燥塔顶部，由离心式雾化器在18000rpm下进行雾化，用进口温度为155℃的热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出后从接料桶中回收，即制备出饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉；
所制备的浓缩液相对密度为1.8。
所述饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，含水量均小于6%，活菌数在18000亿/g。
本实施例中所述饲用枯草芽孢杆菌购买自北京北纳创联生物技术研究院，菌种编号为BNCC189983。
实施例3
一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将饲用枯草芽孢杆菌接种在斜面种子培养基上，36℃培养48h；所述斜面种子培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖1.0%，蛋白胨1.5%，牛肉膏1.2%，酵母膏1.3%，氯化钠0.5%，琼脂1.8%，余量为水；
步骤二、从培养的新鲜斜面上挑取3环菌苔接种于装有50ml液体扩大培养基的250ml三角瓶中，36℃，180-240rpm摇床振荡培养20h，得到种子液；
所述液体扩大培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.0%，蛋白胨1.5%，牛肉膏1.2%，酵母膏1.3%和氯化钠0.5%，余量为水；
步骤三、将上述培养的种子液接种到装有3L培养液的5L发酵罐中，接种量为培养液体积的12%；接种结束后，于200rpm，1:1通风量，pH6.8，36℃条件下培养18h，得到二级种子液；
所述培养液中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.2%，豆饼粉1.5%，蛋白胨2.2%，硫酸铵1.2%，磷酸氢二钠 1.8%，磷酸二氢钠0.12%，硫酸镁0.3%和氯化钙0.08%，余量为水；
步骤四、将培养的二级种子液接种于装有32L发酵培养基的50L发酵罐中，接种量为发酵培养基体积的5-15%；接种结束后按1:0.65通风量，200rpm，pH6.8，36℃培养32h，得到发酵液；
所述发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖2.2%，淀粉1.5%，豆饼粉1.5%，蛋白胨1.8%，硫酸铵0.75%；碳酸钙0.02%，磷酸氢二钾0.03%，磷酸锰0.04%和氯化钙0.07%，余量为水；
步骤五、按重量份数，取地黄18份、陈皮8份、白术8份、麦冬10份、天花粉12份、山楂15份和麦饭石粉3份置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过70目筛，在所得中药粉末中添加其重量20倍的水，浸泡7小时，然后置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行5.5倍浓缩，得到浓缩液，备用；
步骤六、将发酵液和浓缩液按照体积比9:2的比例混合均匀后，所得混合液体用泵输送至两效真空浓缩设备中，一效温度77℃，真空度0.08MPa，二效52℃，真空度0.063MPa，浓缩比为3.5:1，浓缩结束后按15%比例加入淀粉混合均匀，用泵将物料输送至喷雾干燥塔顶部，由离心式雾化器在17000rpm下进行雾化，用进口温度为150℃的热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出后从接料桶中回收，即制备出饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉；
所制备的浓缩液相对密度为1.6。
所述饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，含水量均小于6%，活菌数在120000亿/g。
实施例4
一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、将饲用枯草芽孢杆菌接种在斜面种子培养基上，36℃培养48h；所述斜面种子培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖0.8%，蛋白胨1.3%，牛肉膏1.1%，酵母膏1.5%，氯化钠0.5%，琼脂1.8%，余量为水；
步骤二、从培养的新鲜斜面上挑取2环菌苔接种于装有50ml液体扩大培养基的250ml三角瓶中，36℃，190rpm摇床振荡培养17h，得到种子液；
所述液体扩大培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.4%，蛋白胨1.5%，牛肉膏1.1%，酵母膏1.8%和氯化钠0.5%，余量为水；
步骤三、将上述培养的种子液接种到装有3L培养液的5L发酵罐中，接种量为培养液体积的10%；接种结束后，于170rpm，1:1通风量，pH6.5-7.0，36℃条件下培养17h，得到二级种子液；
所述培养液中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.3%，豆饼粉1.6%，蛋白胨1.6%，硫酸铵1.3%，磷酸氢二钠 0.13%，磷酸二氢钠0.05-0.20%，硫酸镁0.32%和氯化钙0.08%，余量为水；
步骤四、将培养的二级种子液接种于装有32L发酵培养基的50L发酵罐中，接种量为发酵培养基体积的5-15%；接种结束后按1:0.63通风量，190rpm，pH6.8，36℃培养33h，得到发酵液；
所述发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖2.2%，淀粉1.8%，豆饼粉1.25%，蛋白胨1.7%，硫酸铵1.6%；碳酸钙0.03%，磷酸氢二钾0.03%，磷酸锰0.01-0.05%和氯化钙0.06%，余量为水；
步骤五、按重量份数，取地黄12份、陈皮8份、白术9份、麦冬11份、天花粉11份、山楂13份和麦饭石粉3份置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量20倍的水，浸泡7小时，然后置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行5.8倍浓缩，得到浓缩液，备用；
步骤六、将发酵液和浓缩液按照体积比8: 3的比例混合均匀后，所得混合液体用泵输送至两效真空浓缩设备中，一效温度77℃，真空度0.051MPa，二效52℃，真空度0.062MPa，浓缩比为3.3:1，浓缩结束后按18%比例加入淀粉混合均匀，用泵将物料输送至喷雾干燥塔顶部，由离心式雾化器在17000rpm下进行雾化，用进口温度为152℃的热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出后从接料桶中回收，即制备出饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉；
所制备的浓缩液相对密度为1.7。
所述饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，含水量均小于6%，活菌数在9000亿/g。
相关动物实验
实验1：采用由本发明中的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，对其效果进行相关实验验证。选300只刚断奶的仔羊，平均分成三组，每组100只，分别为试验组、对照组和空白组，三组饲喂不同的饲料，试验组在断奶后饲喂的添加本发明所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，对照组饲喂的饲料中添加普通饲料添加剂，空白组饲喂的羊饲料中不添加饲料添加剂。空白组、试验组和对照组饲喂断奶仔羊在其他条件完全相同的环境中让仔羊尽可能高性能生长，统计断奶后6周的生长过程中断奶仔羊的平均日采食量、平均日增重和平均生病率，其中平均生病率为一组仔羊6周所有生病次数与仔羊数量的比值。经统计，结果如表1所示：
表1：
实验2：采用由本发明中的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，对其效果进行相关实验验证。选300只刚断奶的仔兔，平均分成三组，每组100只，分别为试验组、对照组和空白组，三组饲喂不同的饲料，试验组在断奶后饲喂的添加本发明所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的饲料，对照组饲喂的饲料中添加普通饲料添加剂，空白组饲喂的兔饲料中不添加饲料添加剂。空白组、试验组和对照组饲喂断奶仔兔在其他条件完全相同的环境中让仔兔尽可能高性能生长，统计断奶后6周的生长过程中断奶仔兔的平均日采食量、平均日增重和平均生病率，其中平均生病率为一组仔兔6周所有生病次数与仔兔数量的比值。经统计，结果如表2所示：
表2：
由以上数据可知，试验组的仔羊和仔兔的平均日采食量和平均日增重均较对照组和空白组高，平均生病率明显较低，本发明制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉可明显增加动物体重，提高免疫力，有效减轻食欲不振、消化不良、饲料利用率低、抗病力下降、生长缓慢、甚至死亡等问题，从而提高仔羊的生长性能。对动物的生长，具有明显的促进作用。
本发明中所述饲用枯草芽孢杆菌为普通菌株，可通过市场购买得到。

Claims (3)

1.一种饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一、将饲用枯草芽孢杆菌接种在斜面种子培养基上，35-37℃培养48h；所述斜面种子培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，蛋白胨0.2-2%，牛肉膏0.5-1.5%，酵母膏0.5-1.5%，氯化钠0.5%，琼脂1.5-2%，余量为水；
步骤二、从培养的新鲜斜面上挑取2-4环菌苔接种于装有50ml液体扩大培养基的250ml三角瓶中，35-37℃，180-240rpm摇床振荡培养16-24h，得到种子液；
所述液体扩大培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，蛋白胨0.2-2%，牛肉膏0.5-1.5%，酵母膏0.5-1.5%和氯化钠0.5%，余量为水；
步骤三、将上述培养的种子液接种到装有3L培养液的5L发酵罐中，接种量为培养液体积的5-15%；接种结束后，于150-250rpm，1:1通风量，pH6.5-7.0，35-37℃条件下培养16-20h，得到二级种子液，备用；
所述培养液中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖0.5-1.5%，豆饼粉0.5-2.0%，蛋白胨0.5-2.5%，硫酸铵0.25-1.5%，磷酸氢二钠 0.05-0.20%，磷酸二氢钠0.05-0.20%，硫酸镁0.05-0.5%和氯化钙0.01-0.10%，余量为水；
步骤四、将培养的二级种子液接种于装有30-35L发酵培养基的50L发酵罐中，接种量为发酵培养基体积的5-15%；接种结束后按1:0.6-0.75通风量，150-220rpm，pH6.5-7.0，35-37℃培养30-36h，得到发酵液，备用；
所述发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.0-3.0%，淀粉0.5-2.0%，豆饼粉0.5-2.0%，蛋白胨0.2-2%，硫酸铵0.25-1.5%；碳酸钙0.01-0.05%，磷酸氢二钾0.01-0.05%，磷酸锰0.01-0.05%和氯化钙0.01-0.05%，余量为水；
步骤五、按重量份数，取地黄10-25份、陈皮7-11份、白术6-10份、麦冬8-12份、天花粉9-13份、山楂10-20份和麦饭石粉2-4份置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小时，然后置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎2-3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行5-6倍浓缩，得到浓缩液，备用；
步骤六、将发酵液和浓缩液按照体积比8-10:1-3的比例混合均匀后，所得混合液体用泵输送至两效真空浓缩设备中，一效温度75-80℃，真空度0.05-0.055MPa，二效温度50-55℃，真空度0.058-0.065MPa，浓缩比为3-4:1，浓缩结束后按10-20%比例加入淀粉混合均匀，用泵将物料输送至喷雾干燥塔顶部，由离心式雾化器在15000-18000rpm下进行雾化，用进口温度为140-155℃的热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出后从接料桶中回收，即制备出饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉。
2.如权利要求1所述饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法，其特征在于：所制备的浓缩液相对密度为1.5-1.8。
3.如权利要求1所述饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉的制备方法所制备的饲用枯草芽孢杆菌中药菌粉，其特征在于：含水量小于6%，活菌数在8000-18000亿/g。
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