CN106047728B - 一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用 - Google Patents

一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106047728B
CN106047728B CN201610603082.8A CN201610603082A CN106047728B CN 106047728 B CN106047728 B CN 106047728B CN 201610603082 A CN201610603082 A CN 201610603082A CN 106047728 B CN106047728 B CN 106047728B
Authority
CN
China
Prior art keywords
profile control
microbial
culture medium
pda
microbial inoculum
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610603082.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106047728A (zh
Inventor
李忠兴
赵继勇
李兆国
李文宏
张永强
向中远
徐飞艳
张宏强
范伟
陈富林
薛姝雯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Petroleum and Natural Gas Co Ltd
Original Assignee
China Petroleum and Natural Gas Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Petroleum and Natural Gas Co Ltd filed Critical China Petroleum and Natural Gas Co Ltd
Priority to CN201610603082.8A priority Critical patent/CN106047728B/zh
Publication of CN106047728A publication Critical patent/CN106047728A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106047728B publication Critical patent/CN106047728B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K8/00—Compositions for drilling of boreholes or wells; Compositions for treating boreholes or wells, e.g. for completion or for remedial operations
    • C09K8/50—Compositions for plastering borehole walls, i.e. compositions for temporary consolidation of borehole walls

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用，该复合微生物调剖菌剂，按质量百分比组成如下：微生物调剖菌剂5～10%；玉米颗粒0.2～0.3%；高分子聚合物0.2～0.5%；助剂0～0.2%；余量的水，其中微生物调剖菌剂是调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）保藏登记号为：CFCC 85199在优化后的PDA培养基中发酵培养得到的发酵液；这种复合微生物调剖菌剂富含微生物生长繁殖过程中自然形成的菌球体及多糖类代谢产物，应用到低渗透非裂缝性油藏，能够在高分子聚合物的悬浮作用下进入低渗透油藏深部，利用缓释营养成分玉米颗粒及助剂进行生长繁殖，或将玉米颗粒作为载体附着生长，对孔渗型高渗带、微裂缝等进行有效封堵，注入黏度低，注入性好，工艺简单，施工安全。

Description

一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及微生物调剖菌剂领域，特别是一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法，以及改复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用。
背景技术
由于油田长期的注水开发，使得储层形成大孔道、高渗带，出现油井含水上升、采油速度降低等问题。
目前，采用调剖剂封堵油藏高含水层的堵水调剖技术，能够起到改善地层非均质性，提高水驱波及体积，提高原油开采效率的作用，已成为油田三次采油中应用最广泛、最常规的手段之一。但是，调剖技术使用的调剖剂一般是有机化合物或无机化合物，这些材料价格昂贵，有些化学剂对人体有害或污染地层，有的在施工中有一定的危险性等（郭万奎等，2006）。微生物调剖（Microbial plugging）技术则能够克服上述问题，对低渗透非裂缝性油藏进行调剖，具有工艺简单、施工安全、不污染环境等优点，同时降低了材料和施工的成本。
可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）作为白木香（又称土沉香，生产沉香的唯一法定植物来源）产生倍半萜的诱导物，近年起备受关注，但不同菌株间存在差异。例如，已报道可可毛色二孢菌可产生植物伤害信号分子JAs并导致植物程序性死亡（Tsukada K,et al.2010; Dhandhukia P C，et al.2008）；可可毛色二孢菌（GenbankNo.JQ782210.1）能够产生茉莉酸类化合物，诱导白木香愈伤产生3种沉香倍半萜（韩晓敏等，2014）；可可毛色二孢菌可对焦化厂土壤多环芳烃污染进行修复（张志远等，2012）。对于其应用于低渗透非裂缝性油藏微生物调剖尚未见报道。
中国专利CN101131075A提供了一种油井微生物调剖堵水方法，该方法是在油层产出水中筛选一株具有调剖能力的代谢产出生物聚合物的菌种，然后采用此菌液与营养液糖蜜段塞式注入或混合式注入环套空间，但未见菌液制备方法，也未涉及调剖菌剂的复配。
发明内容
本发明的目的是提供一种适用于低渗透非裂缝性油藏的复合微生物调剖菌剂及制备方法，以绿色环保的方式解决低渗透非裂缝性油藏深部调剖问题。
为此，本发明提供了一种微生物调剖菌剂，其特征是：微生物调剖菌剂是调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）在优化后的PDA培养基中发酵培养得到的发酵液, 调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）的保藏登记号为：CFCC 85199。
所述的优化后的PDA培养基至少包括20%马铃薯、3%葡萄糖、0.2% MgSO4、0.25%KH2PO4以及1%蛋白胨。
所述的发酵液中调剖用可可毛色二孢菌的活菌数为1×109CFU/ml及以上。
微生物调剖菌剂的培养方法，该方法包括如下步骤：
1）制备PDA优化培养基；
2）将步骤1中配制好的优化后的PDA培养基放入灭菌锅在120～121℃温度下灭菌20～30min，同时放入培养皿与装入培养基的试管，灭菌完成后，趁热将培养基倒入培养皿中；
3）将冷藏的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199取出活化10～15min，用接种针挑取活化后的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199表面菌丝，在步骤2)中装有PDA平板培养基的培养皿表面进行划线培养，在28～30℃恒温培养箱中倒置培养2～3d；
4)将步骤1)中配制好的PDA液体培养基放入灭菌锅在120～121℃温度下灭菌20～30min,接种5～10%步骤3)中得到的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199平板培养菌体,在温度28～30℃、转速120～180rpm条件下摇瓶培养2～3d；
5)将步骤1)中配制好的PDA液体培养基放入发酵罐，120～121℃温度下灭菌20～30min，接种5～10%步骤4)中得到的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199菌液，发酵温度28～30℃，每4小时间歇补充PDA液体培养基200ml，控制溶解氧8～10%培养7d，得到微生物调剖菌剂。
所述的步骤1中制备PDA优化培养基是按20%马铃薯、3%葡萄糖、0.2% MgSO4、0.25%KH2PO4以及1%蛋白胨，PDA平板培养基:在PDA液体培养基中添加1.5～2%琼脂。
所述的微生物调剖菌剂制备的复合微生物调剖菌剂，按质量百分比组成如下：微生物调剖菌剂5～10%；玉米颗粒0.2～0.3%；高分子聚合物0.2～0.5%；助剂0～0.2%；余量的水。
所述高分子聚合物为聚丙烯酰胺中的一种，分子量200～2200万，固含量≥88%。
所述助剂为铵盐、磷盐、氮盐、膨胀淀粉、羧甲基纤维素钠中的一种或几种的组合。
所述的复合微生物调剖菌剂的制备方法，包括如下步骤：
1)按量称取高分子聚合物，加入水中，充分搅拌，静置熟化90～120min，备用；
2)按量称取助剂，加入水中，充分搅拌，备用；
3)按量称取微生物调剖菌剂和玉米颗粒，加入所述高分子聚合物溶液中，搅拌；之后加入助剂溶液，搅拌；补足水量，得到复合微生物调剖菌剂成品。
所述的复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用，将所述复合微生物调剖菌剂注入油藏地层，其中注入速度为1～2.0倍配注，
总注入量Q = πR2HΦ；
式中：
π为圆周率；
Q为复合微生物调剖菌剂的用量，单位是m3；
R为调剖半径；
H为油层有效厚度；
Φ是孔隙度）。
本发明的有益效果：
(1)本发明提供的这种复合微生物调剖菌剂富含微生物生长繁殖过程中自然形成的菌球体及多糖类代谢产物，应用到低渗透非裂缝性油藏，能够在高分子聚合物的悬浮作用下进入低渗透油藏深部，利用缓释营养成分——玉米颗粒及助剂进行生长繁殖，或将玉米颗粒作为载体附着生长，对孔渗型高渗带、微裂缝等进行有效封堵，注入黏度低，注入性好，工艺简单，施工安全。
(2)本发明提供的这种低渗透非裂缝性油藏复合微生物调剖菌剂不含交联剂等有毒成分，对人体及环境无害，符合“绿色油田”建设需求。
以下将结合附图对本发明做进一步详细说明。
附图说明
图1是可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199 PDA液体培养照片。
图2是可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199注入岩心后的扫描电镜照片。
具体实施方式
实施例1
首先进行菌株的选择
可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）不同菌株间存在着差异，因此首先进行菌株的选择，按照调剖剂的一般要求，对各可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）各不同菌株的菌球直径、多糖类代谢产物含量及发酵液粘度进行考察。
配制PDA培养基，配方为：马铃薯提取液1.0L、葡萄糖20.0g，接种各可可毛色二孢菌菌株，28℃、120rpm条件下摇瓶培养3d。培养结束后，测量菌球平均直径，发酵液8000rpm离心作用30min，收集上层液体，按GB/T10247-2008旋转法测定发酵液粘度；收集下层沉淀，加入6mol/L氢氧化钠浸提2次，每次2h，8000rpm离心20min，收集上清，用85%乙醇醇析24h，8000rpm离心20min沉淀即为多糖，称重多糖含量。
各菌株结果见表1：
Figure 326148DEST_PATH_IMAGE001
表1
由表1结果可以看出，CFCC 85199菌株的菌球平均直径、多糖含量及发酵液粘度的检测结果均高于其他各菌株，说明CFCC 85199菌株成球性能较强、其发酵液粘度也较大，在实际应用中更具有优势，其原因是：（1）能够依靠菌球的空间体积对低渗透非裂缝性油藏的大孔道进行有效封堵，并且微生物形成的菌球体均为粘弹性球体，对于小于自身球体直径的孔隙可以通过压缩形变而进入、进而封堵，所以在实际应用中可以封堵菌球平均直径及以下的孔隙或微裂缝，应用范围更广；（2）由其发酵液为主要成分制备的调剖菌剂粘度较大，更适合作为微生物调剖剂。其他各菌株在实际应用中不具优势的原因是：（1）菌球平均直径较小，对低渗透非裂缝性油藏的封堵能力较小、封堵范围较窄；（2）其发酵液粘度较低，封堵性能较差，不适合作为微生物调剖剂。因此选择可可毛色二孢菌CFCC 85199作为调剖用菌株。
微生物调剖菌剂
微生物调剖菌剂是调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）保藏登记号为：CFCC 85199，在优化后的PDA培养基中发酵培养得到的发酵液，微生物调剖菌剂如图1和图2所示。
所述的优化后的PDA培养基至少包括20%马铃薯、3%葡萄糖、0.2% MgSO4、0.25%KH2PO4以及1%蛋白胨，该PDA培养基的pH值无需调节。
所述的发酵液中调剖用可可毛色二孢菌的活菌数为1×109CFU/ml及以上。
该微生物调剖菌剂是调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC85199在马铃薯葡萄糖琼脂(即PDA)优化培养基中发酵培养得到的发酵液，优化步骤如下：
1、培养基添加组分筛选
在PDA培养基基础上，添加其他氮源或微量元素，使菌体生长更佳。
Figure 319512DEST_PATH_IMAGE002
表2
经表2实验现象观察及菌体生长情况比较，3号与6号相对其他组别，生长较好，瓶内菌丝较多，有挂壁现象，摇床培养中3号瓶经过1天培养即出现少量菌球，到第二天菌球数量增多，最后布满整个摇瓶，6号瓶中经1天培养，瓶内较为浑浊，在静置数分钟后，可明显的看见瓶内菌丝，生长情况良好，经试验，选择3号与6号培养基为基本培养基继续优化。
2、正交优化
经试验，选取的3号与6号作为调剖用可可毛色二孢菌生长的基本培养基进行继续优化。分别改变其碳源、氮源及其他微量元素（如表3正交实验）观察菌丝（菌球）的生长状况。
表3
Figure 73841DEST_PATH_IMAGE003
经观察，如表3所示，3（1）号药瓶中调剖用可可毛色二孢菌的菌丝生长与时间最好，其中3（6）号药瓶中菌丝生长过快，极易自溶，由于加入硫酸亚铁的6号三角瓶待菌生长后比较浑浊，所以最终选取3（1）号作为菌体生长的基本培养基。
实施例2
上述实施例中的微生物调剖菌剂的培养方法，该方法包括如下步骤：
1）制备PDA优化培养基；
2）将步骤1中配制好的优化后的PDA培养基放入灭菌锅在120～121℃温度下灭菌20～30min，同时放入一定数量的培养皿与装入培养基的试管，灭菌完成后，趁热将培养基倒入培养皿中，以免凝固；
3）将冷藏的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199取出活化10～15min，用接种针挑取活化后的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199表面菌丝，在步骤2)中装有PDA平板培养基的培养皿表面进行划线培养，在28～30℃恒温培养箱中倒置培养2～3d；
在PDA平板培养基上，其中温度28～35℃、相对湿度RH65～75%，菌落初为灰白色，后变为灰褐至褐黑色，培养基为黑色，日生长量为4.0cm；在全光条件下，15～20d产生黑色近球状子实体，子座表面附满菌丝。一个子座内有多个分生孢子器，近球形，180.0～318.9×157～436.0μm；孔口周緣细胞深褐色，未成熟分生孢子单细胞、无色，未成熟孢子壁比成熟的分生孢子壁更厚，平均1.4μm；成熟的分生孢子双细胞褐色至黑色，表面有黑白相间的纵条纹，平均22.1×12.9μm；长宽比（L/W）为1.7～1.8。
4)将步骤1)中配制好的PDA液体培养基放入灭菌锅在120～121℃温度下灭菌20～30min,接种5～10%步骤3)中得到的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199平板培养菌体,在温度28～30℃、转速120～180rpm条件下摇瓶培养2～3d；
在PDA液体培养基中（温度28～30℃、转速120～180rpm），菌体生长繁殖过程中自然形成菌球体，平均2.5～3.0mm。
5)将步骤1)中配制好的PDA液体培养基放入发酵罐，120～121℃温度下灭菌20～30min，接种5～10%步骤4)中得到的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199菌液，发酵温度28～30℃，每4小时间歇补充PDA液体培养基200ml，控制溶解氧8～10%培养7d，得到微生物调剖菌剂。
本实施例使用的发酵罐为Biostat®C全自动发酵罐（德国贝朗）。
所述的步骤1中制备PDA优化培养基是按20%马铃薯、3%葡萄糖、0.2% MgSO4、0.25%KH2PO4以及1%蛋白胨，pH值为自然状态下pH值无需调节；PDA平板培养基:在PDA液体培养基中添加1.5～2%琼脂。
实施例3
将实施例1中的微生物调剖菌剂制备成为复合微生物调剖菌剂，按质量百分比组成如下：微生物调剖菌剂5～10%；玉米颗粒0.2～0.3%；高分子聚合物0.2～0.5%；助剂0～0.2%；余量的水。
该微生物调剖菌剂富含微生物生长繁殖过程中自然形成的菌球体及多糖类代谢产物，是该复合微生物调剖菌剂的主体物质，发挥主要调剖功效。
实施例4
实施例3中的高分子聚合物为阴离子型、阳离子型、非离子型或两性离子型聚丙烯酰胺中的一种，分子量200～2200万，固含量≥88%，对微生物调剖菌剂及玉米颗粒的注入起悬浮作用。
助剂为铵盐、磷盐、氮盐、膨胀淀粉、羧甲基纤维素钠中的一种或几种的组合。
玉米颗粒直径0.5～1mm，为微生物调剖菌剂提供长效营养成分，及附着生长介质。
实施例5
在实施例3中所述的复合微生物调剖菌剂的制备方法，包括如下步骤：
1)按量称取高分子聚合物，加入水中，充分搅拌，静置熟化90～120min，备用；
2)按量称取助剂，加入水中，充分搅拌，备用；
3)按量称取微生物调剖菌剂和玉米颗粒，加入所述高分子聚合物溶液中，搅拌；之后加入助剂溶液，搅拌；补足水量，得到复合微生物调剖菌剂成品。
实施例6
为了克服现有低渗透非裂缝性油藏中化学调剖剂的缺陷，本实施例提供了将实施例3中制备的复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用，将所述复合微生物调剖菌剂注入油藏地层，其中注入速度为1～2.0倍配注，
总注入量Q = πR2HΦ；
式中：
π为圆周率；
Q为复合微生物调剖菌剂的用量，单位是m3；
R为调剖半径；
H为油层有效厚度；
Φ是孔隙度）。
本实施例提供的这种将复合微生物调剖菌剂应用在低渗透非裂缝性油藏，复合微生物调剖菌剂富含微生物生长繁殖过程中自然形成的菌球体及多糖类代谢产物，能够在高分子聚合物的悬浮作用下进入低渗透油藏深部，利用缓释营养成分——玉米颗粒及助剂进行生长繁殖，或将玉米颗粒作为载体附着生长，对孔渗型高渗带、微裂缝等进行有效封堵，注入黏度低，注入性好，工艺简单，施工安全；而且，该微生物调剖菌剂不含交联剂等有毒成分，对人体及环境无害，符合“绿色油田”建设需求。
实施例7：室内模拟实验
在实施例6的基础上，本实施例利用LDY-2型高温高压多功能岩心驱替实验装置（江苏海安）,50℃条件下，按照如下程序进行复合微生物调剖菌剂岩心模拟实验：①3000mD人工填砂模型饱和水、饱和油；②水驱3PV，记录注入压力，计算驱油效率；③将复合微生物调剖菌剂稀释20倍，注入0.1、0.2、0.3PV，记录对应注入压力，计算驱油效率；④后续水驱1、2、3PV，记录对应注入压力，计算驱油效率；⑤计算复合微生物调剖菌剂注入前后压力上升值、总体驱油效率提高值。实验结果如表4所示。
Figure 873170DEST_PATH_IMAGE004
表4
由表4可以看出，复合微生物调剖菌剂注入后，可以进入人工填砂岩心模型深部，提升注入压力，对高渗区进行有效封堵，提高水驱波及体积，提高驱油效率，有利于后续水驱或驱油剂发挥作用。复合微生物调剖菌剂注入前后压力上升0.5～1.4Mpa，总体采驱油效率提高了7.42～8.89%。
综上所述，本发明提供的这种微生物调剖菌剂应用到低渗透非裂缝性油藏以绿色环保的方式解决低渗透非裂缝性油藏深部调剖问题，扩大水驱波及体积，提高了原油采收率。
以上例举仅仅是对本发明的举例说明，并不构成对本发明的保护范围的限制，凡是与本发明相同或相似的设计均属于本发明的保护范围之内。
实施例8：现场试验
在实施例6的基础上，本实施例在现场某低渗透非裂缝性油藏进行了现场试验。总注入量Q = πR2HΦ，其中π是圆周率，取3.14，Q是调剖剂用量，m3；R是调剖半径，8m ；H是油层有效厚度，20.4m；Φ是孔隙度，16.58%）注入速度为1～2.0倍配注。
注入后该井调剖效果显著，油压、套压上升3MPa,有效期内累增油96.62吨。

Claims (6)

1.复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用，将所述复合微生物调剖菌剂注入油藏地层，其中注入速度为1～2.0倍配注，
总注入量Q = πR2HΦ；
式中：
π为圆周率；
Q为复合微生物调剖菌剂的用量，单位是m3；
R为调剖半径；
H为油层有效厚度；
Φ是孔隙度；
所述复合微生物调剖菌剂，按质量百分比组成如下：微生物调剖菌剂5～10%；玉米颗粒0.2～0.3%；高分子聚合物0.2～0.5%；助剂0～0.2%；余量的水；
所述的微生物调剖菌剂是调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）在PDA优化培养基中发酵培养得到的发酵液, 调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）的保藏登记号为：CFCC 85199；
制备的PDA优化培养基至少包括重量百分比的20%马铃薯、3%葡萄糖、0.2% MgSO4、0.25%KH2PO4以及1%蛋白胨。
2.根据权利要求1所述的复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用，其特征是：所述的发酵液中调剖用可可毛色二孢菌的活菌数为1×109CFU/ml及以上。
3.如权利要求1或2所述的复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用，所述的微生物调剖菌剂的培养方法包括如下步骤：
1）制备PDA优化培养基；
2）将步骤1)中配制好的PDA优化培养基放入灭菌锅在120～121℃温度下灭菌20～30min，同时放入培养皿与装入培养基的试管，灭菌完成后，趁热将培养基倒入培养皿中；
3）将冷藏的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199取出活化10～15min，用接种针挑取活化后的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199表面菌丝，在步骤2)中装有PDA平板培养基的培养皿表面进行划线培养，在28～30℃恒温培养箱中倒置培养2～3d，PDA平板培养基是在PDA优化培养基中添加1.5～2%琼脂；
4)将步骤1)中配制好的PDA优化培养基放入灭菌锅在120～121℃温度下灭菌20～30min,接种5～10%步骤3)中得到的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199平板培养菌体,在温度28～30℃、转速120～180rpm条件下摇瓶培养2～3d；
5)将步骤1)中配制好的PDA优化培养基放入发酵罐，120～121℃温度下灭菌20～30min，接种5～10%步骤4)中得到的调剖用可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）CFCC 85199菌液，发酵温度28～30℃，每4小时间歇补充PDA优化培养基200ml，控制溶解氧8～10%培养7d，得到微生物调剖菌剂。
4.根据权利要求1所述的复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用，其特征是：所述高分子聚合物为聚丙烯酰胺中的一种，分子量200～2200万，固含量≥88%。
5.根据权利要求1所述的复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用，其特征是：所述助剂为铵盐、磷盐、氮盐、膨胀淀粉、羧甲基纤维素钠中的一种或几种的组合。
6.如权利要求1或2所述的复合微生物调剖菌剂在低渗透非裂缝性油藏的应用，所述的复合微生物调剖菌剂的制备方法包括如下步骤：
1)按量称取高分子聚合物，加入水中，充分搅拌，静置熟化90～120min，备用；
2)按量称取助剂，加入水中，充分搅拌，备用；
3)按量称取微生物调剖菌剂和玉米颗粒，加入所述高分子聚合物溶液中，搅拌；之后加入助剂溶液，搅拌；补足水量，得到复合微生物调剖菌剂成品。
CN201610603082.8A 2016-07-28 2016-07-28 一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用 Active CN106047728B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610603082.8A CN106047728B (zh) 2016-07-28 2016-07-28 一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610603082.8A CN106047728B (zh) 2016-07-28 2016-07-28 一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106047728A CN106047728A (zh) 2016-10-26
CN106047728B true CN106047728B (zh) 2020-01-07

Family

ID=57417184

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610603082.8A Active CN106047728B (zh) 2016-07-28 2016-07-28 一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106047728B (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111119816A (zh) * 2018-10-30 2020-05-08 中国石油化工股份有限公司 一种内外源功能微生物复合吞吐的方法
CN111119817A (zh) * 2018-10-30 2020-05-08 中国石油化工股份有限公司 一种内外源功能微生物复合驱油的方法
CN111088292A (zh) * 2019-12-30 2020-05-01 北京林业大学 一种可提高可可球二孢菌色素产量和生长速度的分段式培养方法
CN114058352B (zh) * 2021-10-14 2023-01-31 陕西瑞捷生物科技有限公司 一种长庆油田侏罗系微生物调驱技术体系及其专用设备
CN114573390A (zh) * 2022-02-16 2022-06-03 吉林农业大学 一种环保型缓释补菌制剂的制作方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102852497A (zh) * 2012-08-07 2013-01-02 陕西延长石油(集团)有限责任公司研究院 一种低渗透油田复合微生物采油方法
CN104373094A (zh) * 2014-12-05 2015-02-25 中国石油天然气股份有限公司 一种低渗透油藏微生物采油复合制剂及其使用方法
CN104498008A (zh) * 2014-12-31 2015-04-08 安捷宇（北京）油田技术服务有限公司 一种油田开采用耐中高温的生物调剖堵水剂

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102852497A (zh) * 2012-08-07 2013-01-02 陕西延长石油(集团)有限责任公司研究院 一种低渗透油田复合微生物采油方法
CN104373094A (zh) * 2014-12-05 2015-02-25 中国石油天然气股份有限公司 一种低渗透油藏微生物采油复合制剂及其使用方法
CN104498008A (zh) * 2014-12-31 2015-04-08 安捷宇（北京）油田技术服务有限公司 一种油田开采用耐中高温的生物调剖堵水剂

Also Published As

Publication number Publication date
CN106047728A (zh) 2016-10-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106047728B (zh) 一种复合微生物调剖菌剂及其制备方法与应用
CN102409016B (zh) 一株铜绿假单胞菌及其培养方法与应用
CN102852497B (zh) 一种低渗透油田复合微生物采油方法
CN104109516B (zh) 一种强乳化性微生物清防蜡菌剂及其应用
CN107558968B (zh) 一种油井微生物复合吞吐采油的方法
CN101451062B (zh) 生物洗油剂及其生产方法与它们的用途
CN104373094B (zh) 一种低渗透油藏微生物采油复合制剂及其使用方法
CN101177696A (zh) 一种鼠李糖脂生物发酵液的工业化制备方法
CN108384723B (zh) 一种复合微生物菌剂制备方法及其应用
CN104371940B (zh) 一种铜绿假单胞菌及其应用
CN107286941B (zh) 一种海涂土壤增加降水入渗和减少地表蒸发的生物基覆盖材料及其制备方法
CN103232966B (zh) 耐中高温产胞外水不溶性多糖原生质体融合工程菌及其应用
CN102409017B (zh) 一株枯草芽孢杆菌及其培养方法与应用
CN103789242A (zh) 铁氧菌及利用其改良粉土液化特性的方法
CN115095305B (zh) 一种基于微生物的调剖驱油方法
CN103614127A (zh) 一种微生物与脂肽组合低温油藏采油与清防蜡技术
CN105567204A (zh) 一种利用微生物菌群提高白云岩储层中原油采收率的方法
CN114836186A (zh) 一种生物稠油降黏剂及其应用
CN102168049A (zh) 一种生产破胶酶的菌株及其应用
CN112796720A (zh) 一种应用微生物提高低渗透油藏采收率的方法
CN107794285A (zh) 一种驱油用生物聚合物的制备方法及应用
CN102127519B (zh) 耐高温产胞外水不溶性多糖基因工程菌及其应用
CN115163014B (zh) 巨大芽孢杆菌yc1-9-1及其在裂缝性油藏水驱调控方面的应用
CN111500480B (zh) 驱油用复合微生物菌剂及其应用
CN110761758B (zh) 一种利用硅酸盐菌改造油气储层的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant