CN105993861A - 一种提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法。它包括如下步骤：将黄芪的实生苗栽培，控制土壤的相对含水量，然后对所述土壤进行连续控水处理，即能提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量。本发明成本较低，能提高蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量，同时能缓解我国西北部地区缺水的问题。

Description

一种提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法
技术领域
本发明涉及一种提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法，具体涉及一种提高蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法，属于中药材规范化生产领域。
背景技术
黄芪为豆科植物蒙古黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]或膜荚黄芪[A.membranaceus(Fisch.)Bge.]的干燥根，药食兼用，具有补气升阳，敛疫生肌等功效。主要分布在我国西北部干旱和半干旱地区。由于野生资源的缺乏，目前主要依靠人工栽培，栽培黄芪占90％以上。但在栽培过程中由于水分控制不当，常会导致黄芪产量和品质的降低。
黄芪中有多种生物活性成分，有皂苷类、多糖类、黄酮类、氨基酸和微量元素及亚油酸等。其中毛蕊异黄酮葡萄糖苷为中华人民共和国药典2015版规定的评价黄芪质量的主要成分之一，其含量不得低于0.02％。毛蕊异黄酮葡萄糖苷有抗心肌缺血、增强机体免疫力和护肝等重要医疗价值。然而，在正常条件下，黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量较低。
发明内容
本发明的目的是提供一种提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法，本发明成本较低，能提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量，同时能缓解我国西北部地区缺水的问题。
本发明提供的提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法，包括如下步骤：将黄芪的实生苗栽培，控制土壤的相对含水量，然后对所述土壤进行连续控水处理，即能提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量。
上述的方法中，所述黄芪可为蒙古黄芪；
所述黄芪的实生苗可为2～3年生，具体可为3年生。
上述的方法中，所述控水处理的土壤的相对含水量可为40％～45％；
所述控水处理的时间可为30～60天，具体可为30天、60天或30～60天。
本发明中，所述黄芪栽培之后就进行所述控水处理；所述控水处理步骤以后均按照本领域人员公知的步骤进行正常田间管理。
上述的方法中，所述蒙古黄芪的实生苗的苗高为14.6～15.4cm。
上述的方法中，所述蒙古黄芪的栽培时间为3月～9月，具体可为5月～6月或5月～7月。
本发明中，所述蒙古黄芪的根中提取毛蕊异黄酮葡萄糖苷。
本发明中，所述蒙古黄芪的栽种受天气影响不大，主要是其栽培土壤的相对含水量的影响，应用时可适用于大棚内，也同样适用于田间的水分管理。
本发明具有以下优点：
本发明方法易于控制管理，成本较低，能提高蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量，同时能缓解我国西北部地区缺水的问题，使黄芪药材的品质得到提高，适合在黄芪的规范化种植中广泛应用。
附图说明
图1为蒙古黄芪中测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的超高效液相色谱图；其中图1(a)为毛蕊异黄酮葡萄糖苷标准品的超高效液相色谱图(1为)，图1(b)为本发明实施例1中测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷的超高效液相色谱图(1为毛蕊异黄酮葡萄糖苷)；
图1(a)和图1(b)中特征峰标记如下：1为毛蕊异黄酮葡萄糖苷，2为芒柄花苷，3为毛蕊异黄酮，4为芒柄花素。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中，蒙古黄芪的实生苗的培植：
选用的材料蒙古黄芪的种子采自内蒙古武川县，蒙古黄芪苗于2013年3月26日盆栽播种育苗，选取大小均匀、饱满、无病虫的黄芪种子用浓硫酸浸泡8min，在播种前准备好的种子在4℃放置3天。于2013年3月30日，将催芽的种子移入花盆中(盆高25cm、直径17cm)，每盆装3400ml体积粟钙土；
对黄芪进行正常管理2年，每盆定植长势一致的植株5株，其后定期除草浇水。
第三年2015年5月25日开始，选择正常的，平均苗高15.0±0.4cm的黄芪苗进行试验。
下述实施例中，盆栽土壤基本理化性质为：pH 7.5，有机质20.7g/kg，水解性氮114.7mg/kg，有效磷22.8mg/kg，速效钾207mg/kg。
下述实施例中，土壤的相对含水量的控水处理采用称重法，具体为每天下午6:00称各个花盆重量，补充失去的水分。
实施例1、适度干旱胁迫对蒙古黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的影响
将三年生蒙古黄芪的实生苗，栽种在花盆中，移入塑料防雨大棚内。每盆5株，共6盆。
控制各盆土壤的相对含水量40％～45％，连续进行土壤相对含水量40％～45％的控水处理30天后，取黄芪根晒干、粉碎、过筛用于测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷。
毛蕊异黄酮葡萄糖苷采用超高效液相色谱(UPLC)测定，BEH shield RP18色谱柱(2.1×100mm，1.7μm)。流动相为乙腈(A)和0.1％甲酸水(B)梯度洗脱0-4min，25％A～75％B；4-6min，35％A～65％B；6-8min，45％A～55％B；8-10min，55％A～45％B；10-12min，25％A～75％B；流速0.2mL/min；进样体积2μl；注温30℃。如图1所示为本发明方法所得的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定的UPLC图。
本发明方法所得的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.91±0.02mg/g。与对比例1中所得的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.82±0.04mg/g相比，本发明蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量提高了10.97％。
实施例2、适度干旱胁迫对蒙古黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的影响
将三年生蒙古黄芪的实生苗，栽种在花盆中，移入塑料防雨大棚内。每盆5株，共6盆。
控制各盆土壤的相对含水量40％～45％，连续进行土壤相对含水量40％～45％的控水处理60天后，黄芪根晒干、粉碎、过筛用于测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷。毛蕊异黄酮葡萄糖苷采用超高效液相色谱(UPLC)测定，BEH shield RP18色谱柱(2.1×100mm，1.7μm)。流动相为乙腈(A)和0.1％甲酸水(B)梯度洗脱0-4min，25％A～75％B；4-6min，35％A～65％B；6-8min，45％A～55％B；8-10min，55％A～45％B；10-12min，25％A～75％B；流速0.2mL/min；进样体积2μl；注温30℃。
本发明方法所得的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.93±0.01mg/g。与对比例2中所得的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.86±0.02mg/g相比，本发明蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量提高了8.14％。
对比例1、
将三年生蒙古黄芪的实生苗，栽种在花盆中，移入塑料防雨大棚内。每盆5株，共6盆。
控制各盆土壤相对含水量70％～75％，连续进行土壤相对含水量70％～75％的控水处理30天后，黄芪根晒干、粉碎、过筛用于测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷。毛蕊异黄酮葡萄糖苷采用超高效液相色谱(UPLC)测定，BEH shield RP18色谱柱(2.1×100mm，1.7μm)。流动相为乙腈(A)和0.1％甲酸水(B)梯度洗脱0-4min，25％A～75％B；4-6min，35％A～65％B；6-8min，45％A～55％B；8-10min，55％A～45％B；10-12min，25％A～75％B；流速0.2mL/min；进样体积2μl；注温30℃。
该方法所得的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.82±0.04mg/g。
对比例2、
将三年生蒙古黄芪的实生苗，栽种在花盆中，移入塑料防雨大棚内。每盆5株，共6盆。
控制各盆土壤相对含水量70％～75％，连续进行土壤相对含水量70％～75％的控水处理60天后，黄芪根晒干、粉碎、过筛用于测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷。毛蕊异黄酮葡萄糖苷采用超高效液相色谱(UPLC)测定，BEH shield RP18色谱柱(2.1×100mm，1.7μm)。流动相为乙腈(A)和0.1％甲酸水(B)梯度洗脱0-4min，25％A～75％B；4-6min，35％A～65％B；6-8min，45％A～55％B；8-10min，55％A～45％B；10-12min，25％A～75％B；流速0.2mL/min；进样体积2μl；注温30℃。
该方法所得的蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为0.86±0.02mg/g。

Claims (6)

1.一种提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法，包括如下步骤：将黄芪的实生苗栽培，控制土壤的相对含水量，然后对所述土壤进行连续控水处理，即能提高黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述黄芪为蒙古黄芪；
所述黄芪的实生苗为2～3年。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述土壤的相对含水量为40％～45％。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于：所述控水处理的土壤的相对含水量为40％～45％；
所述控水处理的时间为30～60天。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于：所述黄芪的实生苗的苗高为14.6～15.4cm。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于：所述黄芪的栽培时间为3月～9月。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107064386A (zh) * 2017-04-17 2017-08-18 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 一种ase‑hplc法测定黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法
CN111919694A (zh) * 2020-08-21 2020-11-13 内蒙古大学 一种水培溶液及其高品质黄芪的培育方法

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