CN105985950A - 一种唾液dna保存方法 - Google Patents

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胡陈超
张华能
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    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
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    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA

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Abstract

本发明公开了一种唾液DNA保存方法，包括如下步骤：(1)制作唾液DNA固体保存剂；(2)将上述唾液DNA固体保存剂置于唾液采集保存管中；(3)唾液样本通过采集部进入保存部中，盖上上盖，使唾液样本与唾液DNA固体保存剂充分接触，进而溶解唾液DNA固体保存剂，即完成唾液DNA的保存。本发明的方法将固体唾液DNA保存剂置于唾液采集保存管中，简化了运输条件，且易于保存。

Description

一种唾液DNA保存方法
技术领域
本发明属于医学生物技术领域，具体涉及一种唾液DNA保存方法。
背景技术
唾液DNA样本采集相对于传统的抽取血液采集DNA的方式来说，是一种对人体无伤害、无痛苦的获取DNA的方法，不易引起被采集者的不适和畏惧心理，该法不会对被收集者造成任何不适，容易被接受，因而能最大限度的扩大基因研究的取样范围，特别适合分子流行病学大规模人群调查。现有技术中，唾液DNA样本的采集主要采用棉签获取口腔黏膜上皮细胞的方式来进行，该方法所采集的DNA量少，保存时需要置于低温下，且该保存时间短。
CN102676501A公开了一种唾液DNA保存剂，包括如下质量体积比的组分：三羟甲基氨基甲烷5～10g/100mL、乙二胺四乙酸二钠10～25g/100mL、糖7～17g/100mL、氯化钠1～10g/100mL和表面活性剂0.5～5g/100mL，其溶剂为水，pH值为7.0～9.5，在室温下就能够有效且长时间的对唾液样本中的DNA进行保存，有效解决了现有技术采集唾液样本DNA保存时间短，且需要低温保存的缺陷。但该保存剂仍然为液体状，对运输过程的要求仍然较高。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种唾液DNA保存方法。
本发明的具体技术方案如下：
一种唾液DNA保存方法，包括如下步骤：
(1)制作唾液DNA固体保存剂，其由如下重量份的组分制成：
其中，所述表面活性剂为吐温20、Triton X-100、十二烷基硫酸钠和十二烷基肌氨酸钠中的至少一种；
(2)将上述唾液DNA固体保存剂置于唾液采集保存管中，该唾液采集保存管包括一采集部和一保存部；采集部为一上下贯通的腔体并具有一采集上开口和一采集下开口，一上盖盖设在采集上开口上；保存部具有一保存上开口，该保存上开口与本体的采集下开口相连，上述唾液DNA固体保存剂通过一限位机构容置于保存部中而无法进入采集部；
(3)唾液样本通过采集部进入保存部中，盖上上盖，使唾液样本与唾液DNA固体保存剂充分接触，进而溶解唾液DNA固体保存剂，即完成唾液DNA的保存。
在本发明的一个优选实施方案中，所述唾液DNA固体保存剂的形式为片剂、药丸或冻干粉。
在本发明的一个优选实施方案中，所述采集部的材质为硬质塑料材质、可折叠的软质塑料材质或纸质。
在本发明的一个优选实施方案中，所述限位机构为一设于采集下开口的栅栏结构。
进一步优选的，还包括一用以封闭采集下开口的胶塞，该胶塞通过一连接杆与上盖相固接。
在本发明的一个优选实施方案中，所述保存部的中部具有一横隔片以将保存部分为相互隔绝的第一腔体和第二腔体，所述保存上开口位于第一腔体，第二腔体具有一保存下开口，一保存下盖盖设于该保存下开口，所述限位机构为一设于该保存下盖且伸入所述第二腔体内的一具有若干通孔的药品保存管，所述唾液DNA固体保存剂置于该药品保存管中。
在本发明的一个优选实施方案中，所述采集下开口具有若干唾液出口，所述限位机构为一分别与采集下开口和保存上开口相连的的连接件，该连接件具有适配上述若干唾液出口的若干阻挡片，采集下开口与该连接件旋转相连，使得所述若干阻挡片开启或封闭上述若干唾液出口。
进一步优选的，所述连接件与保存上开口通过螺纹连接相连。
在本发明的一个优选实施方案中，所述唾液DNA固体保存剂的质量为55～65mg。
在本发明的一个优选实施方案中，所述采集上开口的直径大于采集下开口的直径。
本发明的有益效果是：
1、本发明的方法将固体唾液DNA保存剂置于唾液采集保存管中，简化了运输条件，且易于保存；
2、本发明的方法的唾液DNA固体保存剂的质量为55～65mg，与现有技术相比，在实现了相同的保存效果和保存时间的同时，大大降低了唾液DNA保存剂的用量。
3、本发明采用限位机构使得唾液DNA固体保存剂置于保存部中，而不能进入采集部，避免了固体保存剂的浪费及不必要的反应。
附图说明
图1为本发明的实施例1的唾液采集保存管的立体结构示意图。
图2为本发明的实施例1的唾液采集保存管的剖视分解示意图。
图3为本发明实施例1的唾液采集保存管的采集部的立体结构示意图。
图4为本发明实施例2的唾液采集保存管的立体分解示意图。
图5为本发明实施例2的唾液采集保存管的采集部的立体结构示意图。
图6为本发明实施例3的唾液采集保存管的分解结构示意图。
图7为本发明实施例3的唾液采集保存管的分解剖视图。
图8为本发明实施例3的唾液采集保存管的装配状态剖视图。
图9为本发明实施例4的实验结果图之一。
图10为本发明实施例4的实验结果图之二。
具体实施方式
以下通过具体实施方式结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
下述实施例中，采集部1的材质为硬质塑料材质、可折叠的软质塑料材质或纸质。
实施例1
一种唾液DNA保存方法，包括如下步骤：
(1)制作唾液DNA固体保存剂，其由如下重量份的组分制成，质量为60mg：
其中，所述表面活性剂为吐温20、Triton X-100、十二烷基硫酸钠和十二烷基肌氨酸钠中的至少一种；唾液DNA固体保存剂的形式为片剂、药丸或冻干粉；
(2)将上述唾液DNA固体保存剂置于唾液采集保存管中，如图1至3所示，该唾液采集保存管包括一采集部1和一保存部2；采集部1为一上下贯通的腔体并具有一采集上开口11和一采集下开口12，采集上开口11的直径大于采集下开口12的直径，一上盖13盖设在采集上开口11上；保存部2具有一保存上开口21，该保存上开口21与本体的采集下开口12相连，上述唾液DNA固体保存剂通过一限位机构容置于保存部2中而无法进入采集部1；具体的所述采集下开口12具有三对称分布的唾液出口120，所述限位机构为一分别与采集下开口12和保存上开口21相连的的连接件3，该连接件3具有适配上述三唾液出口120的三阻挡片31，采集下开口12的外周具有若干凸起(图中未示出)，连接件3的内壁面具有一滑动适配上述若干凸起的环形滑槽(图中未示出)，使得采集下开口12与该连接件3旋转相连，进而使得所述三阻挡片31开启或封闭上述三唾液出口120；连接件3与保存上开口21通过螺纹连接相连。
(3)打开上盖13，旋转采集部1使三唾液出口120与三阻挡片31相错开以开启唾液出口120，唾液样本通过采集部1的唾液出口120进入保存部2中，盖上上盖13，再次旋转采集部1，以关闭唾液出口120，使唾液样本与唾液DNA固体保存剂充分接触，进而溶解唾液DNA固体保存剂，即完成唾液DNA的保存。
实施例2
一种唾液DNA保存方法，包括如下步骤：
(1)制作唾液DNA固体保存剂，其由如下重量份的组分制成，质量为60mg：
其中，所述表面活性剂为吐温20、Triton X-100、十二烷基硫酸钠和十二烷基肌氨酸钠中的至少一种；唾液DNA固体保存剂的形式为片剂、药丸或冻干粉；
(2)将上述唾液DNA固体保存剂置于唾液采集保存管中，如图4和图5所示，该唾液采集保存管包括一采集部1和一保存部2；采集部1为一上下贯通的腔体并具有一采集上开口11和一采集下开口12，采集上开口11的直径大于采集下开口12的直径，一上盖13盖设在采集上开口11上；保存部2具有一保存上开口21，该保存上开口21与本体的采集下开口12相连，上述唾液DNA固体保存剂通过一限位机构容置于保存部2中而无法进入采集部1；所述限位机构为一设于采集下开口12的栅栏结构4(防止唾液DNA固体保存剂的大块碎屑进入采集部1)，还包括一用以封闭采集下开口12的胶塞131，该胶塞131通过一连接杆132与上盖13相固接；
(3)打开上盖13，使胶塞131脱离采集下开口12，唾液样本通过采集部1的采集下开口12进入保存部2中，盖上上盖13，胶塞131再次封闭采集下开口12，使唾液样本与唾液DNA固体保存剂充分接触，进而溶解唾液DNA固体保存剂，即完成唾液DNA的保存。
实施例3
一种唾液DNA保存方法，包括如下步骤：
(1)制作唾液DNA固体保存剂，其由如下重量份的组分制成，质量为60mg：
其中，所述表面活性剂为吐温20、Triton X-100、十二烷基硫酸钠和十二烷基肌氨酸钠中的至少一种；唾液DNA固体保存剂的形式为片剂、药丸或冻干粉；
(2)将上述唾液DNA固体保存剂置于唾液采集保存管中，如图6至图8所示，该唾液采集保存管包括一采集部1和一保存部2；采集部1为一上下贯通的腔体并具有一采集上开口11和一采集下开口12，采集上开口11的直径大于采集下开口12的直径，一上盖13盖设在采集上开口11上；保存部2具有一保存上开口21，该保存上开口21与本体的采集下开口12相连，上述唾液DNA固体保存剂通过一限位机构容置于保存部2中而无法进入采集部1；具体的，所述保存部2的中部具有一横隔片20以将保存部2分为相互隔绝的第一腔体25和第二腔体26，所述保存上开口21位于第一腔体25，第二腔体26具有一保存下开口22，一保存下盖23盖设于该保存下开口22，所述限位机构为一设于该保存下盖23且伸入所述第二腔体26内的一具有若干通孔240的药品保存管24，所述唾液DNA固体保存剂置于该药品保存管24中；
(3)打开上盖13，唾液样本通过采集部1进入保存部2的第一腔体25中，取下采集部1，将保存下盖23从第二腔体26取下，盖设于保存上开口21上，使药品保存管24伸入第一腔体25中，第一腔体25中的唾液样本通过通孔240进入药品保存管24，与唾液DNA固体保存剂充分接触，进而溶解唾液DNA固体保存剂，即完成唾液DNA的保存。
实施例4
将上述实施例中的唾液DNA固体保存剂(记为片剂)与CN102676501A公开的唾液DNA保存剂(记为液体保存液)进行保存效果对比试验，样本收集及保存方案如下表所示：
具体实验如下：
1、样本
片剂保存唾液样本5份；
液体保存液保存唾液样本5份。
2、实验方法
(1)每份片剂保存的唾液样本取250μL进行实验；
(2)每份液体保存液保存唾液样本取500μL进行实验。
(3)提取的人基因组DNA溶解于100μL的洗脱液中。
3、实验结果
(1)以上提取的样本，吸光值检测结果如下：
(2)以上提取的样本，琼脂糖凝胶电泳检测结果如图9所示
(3)以上两种方法保存的唾液样本，保存不同时间后，进行核酸提取，提取结果如下表和图10所示：
以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。

Claims (10)

1.一种唾液DNA保存方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)制作唾液DNA固体保存剂，其由如下重量份的组分制成：
其中，所述表面活性剂为吐温20、Triton X-100、十二烷基硫酸钠和十二烷基肌氨酸钠中的至少一种；
(2)将上述唾液DNA固体保存剂置于唾液采集保存管中，该唾液采集保存管包括一采集部和一保存部；采集部为一上下贯通的腔体并具有一采集上开口和一采集下开口，一上盖盖设在采集上开口上；保存部具有一保存上开口，该保存上开口与本体的采集下开口相连，上述唾液DNA固体保存剂通过一限位机构容置于保存部中而无法进入采集部；
(3)唾液样本通过采集部进入保存部中，盖上上盖，使唾液样本与唾液DNA固体保存剂充分接触，进而溶解唾液DNA固体保存剂，即完成唾液DNA的保存。
2.如权利要求1所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：所述唾液DNA固体保存剂的形式为片剂、药丸或冻干粉。
3.如权利要求1所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：所述采集部的材质为硬质塑料材质、可折叠的软质塑料材质或纸质。
4.如权利要求1所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：所述限位机构为一设于采集下开口的栅栏结构。
5.如权利要求4所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：还包括一用以封闭采集下开口的胶塞，该胶塞通过一连接杆与上盖相固接。
6.如权利要求1所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：所述保存部的中部具有一横隔片以将保存部分为相互隔绝的第一腔体和第二腔体，所述保存上开口位于第一腔体，第二腔体具有一保存下开口，一保存下盖盖设于该保存下开口，所述限位机构为一设于该保存下盖且伸入所述第二腔体内的一具有若干通孔的药品保存管，所述唾液DNA固体保存剂置于该药品保存管中。
7.如权利要求1所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：所述采集下开口具有若干唾液出口，所述限位机构为一分别与采集下开口和保存上开口相连的的连接件，该连接件具有适配上述若干唾液出口的若干阻挡片，采集下开口与该连接件旋转相连，使得所述若干阻挡片开启或封闭上述若干唾液出口。
8.如权利要求7所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：所述连接件与保存上开口通过螺纹连接相连。
9.如权利要求1所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：所述唾液DNA固体保存剂的质量为55～65mg。
10.如权利要求1所述的一种唾液DNA的保存方法，其特征在于：所述采集上开口的直径大于采集下开口的直径。
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