CN105954271A - 一种检测体质的溶液及检测方法 - Google Patents
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Abstract
一种检测体质的溶液及检测方法，其配制包括以下组分：Tris‑HCl pH 7.6：60‑150mM；皮质醇：120‑250ug/L；超氧化物歧化酶：380‑550IU/L；色原物质：0.12‑0.4％；抗氧化剂：600‑1500IU/L。其评估方法包括：1)、采集唾液；2)、将唾液与所述溶液混合；3)、根据唾液与溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定体质。本发明通过采用一种与唾液反应后产生颜色深浅的溶液来检测确定体质，解决中医望闻问切方法存在的质疑以及寒度量化问题；而且这种评估方法直观、方便快捷、效率高、准确度高；同时在此溶液中添加抗氧化剂以达到延长此溶液的使用寿命，避免浪费，节约成本。
Description
技术领域
本发明涉及生物学、兽医学和医学研究技术领域，尤其涉及一种检测体质的溶液及检测方法。
背景技术
身体的体质分属于寒、凉、温、热，确定机体的寒凉温热对于养生、保健和医学干预具有重要意义。在中医学领域内，机体的寒、凉、温、热的确定往往通过望闻问切等方法确定，但该方法的科学性一直受到现代科学的质疑。
而科学研究表明唾液可用于人体抗体的检测，病原的检测，机体活度、寒度、糖度、尿酸以及肌酸等生化指标的检测。唾液中的几种酶(如皮质醇氧化酶等)的活性与机体的体质有着直接的关系，通过检测这几种酶的活性来确定机体的寒、凉、温、热具有重要的医学指导作用。但是唾液中酶的活性受到唾液分泌状态的影响而变动较大，加之酶的活性还受到唾液pH值、唾液中矿物质及食物残渣的影响而不断波动，所以测定唾液中的酶活性具有很强的不确定性；所以如何通过测试唾液中酶的活性来确定机体寒、凉、温、热具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提出通过配制特殊的颜色反应液选择性作用于唾液中的特异性酶，通过颜色改变来确定特定的酶活性，而其中某些酶的活性与机体的体质有直接的关系，进而检测体质的一种检测体质的溶液及检测方法。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
一种检测体质的溶液，其配制包括以下组分：
Tris-HCl pH 7.6：60-150mM；
皮质醇：120-250ug/L；
超氧化物歧化酶：380-550IU/L；
色原物质：0.12-0.4％；
抗氧化剂：600-1500IU/L。
优选的，所述色原物质为2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸和4-氨基安替比林的混合物。
优选的，所述2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.06-0.2％；所述4-氨基安替比林：0.06-0.2％。
优选的，所述抗氧化剂为谷胱甘肽。
优选的，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：200ug/L；
超氧化物歧化酶：500IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.1％；
4-氨基安替比林：0.1％；
谷胱甘肽：1000IU/L。
上述所述的一种检测体质的溶液的检测方法，：其包括以下步骤：
1)、采集唾液；
2)、将唾液与所述溶液混合；
3)、根据唾液与溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定体质；蓝色越深表示寒度越大；蓝色越深表示寒度越小。
优选的，所述唾液与所述溶液的混合体积比为1：15。
优选的，所述唾液与所述溶液置于试验瓶中混合反应。
本发明通过采用一种与唾液反应后产生颜色深浅的溶液来检测确定体质，解决中医望闻问切方法存在的质疑以及寒度量化问题；而且这种评估方法直观、方便快捷、效率高、准确度高；同时在此溶液中添加抗氧化剂以达到延长此溶液的使用寿命，避免浪费，节约成本。
具体实施方式
下面并通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。
在此需要说明，本申请除了可以选择蓝色色原物质作为颜色变化确定体质，也可以通过黄色色原物质作为颜色变化确定体质，但是在现有的一些文献中记载唾液中含有部分黄色物质，尤其是口腔出血的病人，黄色物质更多，这样就会影响检测结果的准确性；而唾液中一般不会有蓝色物质的存在，所以本申请选用蓝色色原物质，就不会受到唾液中的其他颜色的影响，保证检测结果的准确性；同时在溶液中添加抗氧化剂，延长溶液的储存寿命，避免了浪费，节约成本。当然本申请不仅可以通过唾液与此溶液混合反应后产生的颜色深浅确定体质，还可以通过分光光度计测定唾液与此溶液混合后混合液的光密度值作为体质(寒度)的绝对值，但是这种方法复杂，没有观察颜色深浅更加直观，而且方便快捷效率高。
而唾液与本溶液的混合后反应原理：唾液中的皮质醇氧化酶氧化皮质醇，产生超氧离子；超氧离子在超氧化物歧化酶的作用下，产生新生态氧，这个新生态氧在有4-氨基安替比林存在情况下，导致无色的2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸变成蓝色，从而使得整个混合液变成蓝色；进而通过蓝色深浅评估机体寒度情况，蓝色越深，说明唾液中含有的皮质醇氧化酶浓度越高，皮质醇氧化酶浓度越高则寒度越大；蓝色越浅表示唾液中含有的皮质醇氧化酶浓度越低，皮质醇氧化酶浓度越低则寒度越小。
实施例1
一种检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：80mM；
皮质醇：180ug/L；
超氧化物歧化酶：400IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.07％；
4-氨基安替比林：0.07％；
谷胱甘肽：1100IU/L。
使用此溶液检测体质的方法，其包括以下步骤：
1)、分别采集十人的唾液；
2)、将十人的唾液分别与所述溶液混合；其中所述唾液与所述溶液的混合体积比为1：15；
3)、根据唾液与溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定机体体质；蓝色越深表示寒度越大；蓝色越深表示寒度越小。如表1所示，十人体质检测结果，序号1-10分别表示抽取的10人，其中颜色从深到浅分为5级，深蓝为1级，湛蓝为2级，天蓝3级，浅蓝为4级，接近无色为5级。
表1 十人体质检测结果
| 序号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
| 颜色深浅 | 3级 | 2级 | 5级 | 1级 | 2级 | 4级 | 3级 | 1级 | 2级 | 5级 |
从表1可知，3号和10号的体质处于正常状态；而4号和8号的体质属于最寒状态；2号、5号和9号的体质属于极寒状态；1号和7号的体质属于较寒状态；6号处于寒度较小状态。
以上只通过颜色深浅就能检测确定体质，方法简单，结果观看直观，快捷，效率高；对测试唾液中酶的活性来确定机体寒、凉、温、热具有重要的意义；同时对人类平时注重自身体质的调理有着重要的意义。
实施例组2
一种检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：200ug/L；
超氧化物歧化酶：500IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：(按下表2的添加量来添加)
4-氨基安替比林：0.1％；
谷胱甘肽：1000IU/L。
使用此溶液检测体质的方法，其包括以下步骤：
1)、分别采集1人的唾液；
2)、将唾液与本实施例组的溶液混合；所述唾液与所述溶液的混合体积比为1：15；
3)、根据唾液与本实施例组的溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定机体的葡萄糖代谢水平。如表2所示，2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸添加量对检测结果的影响，其中颜色从深到浅分为5级，深蓝为1级，湛蓝为2级，天蓝3级，浅蓝为4级，接近无色为5级。
表2 2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸添加量对检测结果的影响
由表2可知，当2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸的添加量超过0.1％后，颜色跟添加量为0.1％时一样的，而添加量小于0.1％时，颜色深浅是不一致的。由此得出检测体质的准确性较高，而且考虑成本的情况下，需要2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸的添加量为0.1％时检测的准确性会提高很多。
实施例组3
一种检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：200ug/L；
超氧化物歧化酶：500IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.1％
4-氨基安替比林：(按下表3的添加量来添加)
谷胱甘肽：1000IU/L。
使用此溶液检测的方法，其包括以下步骤：
1)、分别采集1人的唾液；
2)、将唾液与本实施例组的溶液混合；所述唾液与所述溶液的混合体积比为1：15；
3)、根据唾液与本实施例组的溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定机体的葡萄糖代谢水平。如表3所示，4-氨基安替比林添加量对检测结果的影响，其中颜色从深到浅分为5级，深蓝为1级，湛蓝为2级，天蓝3级，浅蓝为4级，接近无色为5级。
表3 4-氨基安替比林添加量对检测结果的影响
由表3可知，当4-氨基安替比林的添加量超过0.1％后，颜色跟添加量为0.1％时一样的，而添加量小于0.1％时，颜色深浅是不一致的。由此得出检测体质的准确性较高，而且考虑成本的情况下，需要4-氨基安替比林的添加量为0.1％时评估的准确性会提高很多。
实施例组4
一种检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：200ug/L；
超氧化物歧化酶：500IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.1％
4-氨基安替比林：0.1％
抗氧化剂(按下表4的抗氧化剂添加)：1000IU/L。
见表4，不同抗氧化剂对溶液的储存寿命影响。
表4 不同抗氧化剂对溶液的储存寿命影响
| 实施例 | 抗氧化剂 | 储存时间 |
| 对比组4-1 | BHA(丁基羟基茴香醚) | 2周 |
| 对比组4-2 | BHT(二丁基羟基甲苯) | 2周 |
| 对比组4-3 | PG(没食子酸丙酯) | 1个月 |
| 对比组4-4 | TBHQ(特丁基对苯二酚) | 1个月 |
| 对比组4-5 | 生育酚 | 1个月 |
| 对比组4-6 | 维生素C | 1个月 |
| 对比组4-7 | 谷胱甘肽 | 2年以上 |
由于溶液中的2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸和4-氨基安替比林在存储过程中会被空气中的氧氧化成蓝色的其他物质，因此为了阻止2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸和4-氨基安替比林被氧化，在溶液中添加了抗氧化剂。从表4可知，使用BHA、BHT、PG、TBHQ、生育酚和和维生素C作为抗氧化剂，此溶液的储存时间不超过一个月，最短的有两个周，而使用谷胱甘肽此溶液的储存寿命达到两年以上，由此可见使用谷胱甘肽作为抗氧化剂是最好的选择。
实施例组5
一种检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：200ug/L；
超氧化物歧化酶：500IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.1％
4-氨基安替比林：0.1％
谷胱甘肽：(按下表5的添加量添加)。
见表5，谷胱甘肽不同添加量对溶液的储存寿命影响。
表5 谷胱甘肽添加量对溶液的储存寿命影响
| 实施例 | 谷胱甘肽添加量/IU/L | 储存时间 |
| 对比组5-1 | 600 | 1年半 |
| 对比组5-2 | 800 | 接近两年 |
| 对比组5-3 | 900 | 2年 |
| 对比组5-4 | 1000 | 2年以上 |
| 对比组5-5 | 1100 | 跟对比组5-4一样 |
| 对比组5-6 | 1300 | 跟对比组5-4一样 |
| 对比组5-7 | 1500 | 跟对比组5-4一样 |
从表5可知，随着谷胱甘肽添加量的添加，溶液的存储寿命在延长，而成本也会添加；但是当添加量超过1000IU/L后，溶液的存储寿命跟使用1000IU/L的存储寿命是一样的，因此既要考虑溶液存储寿命问题，也要考虑成本问题，所以谷胱甘肽的最佳添加量为1000IU/L。
实施例组6
一种检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：(按下表6的添加量来添加)；
超氧化物歧化酶：500IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.1％
4-氨基安替比林：0.1％；
谷胱甘肽：1000IU/L。
使用此溶液检测体质的方法，其包括以下步骤：
1)、分别采集1人的唾液；
2)、将唾液与本实施例组的溶液混合；所述唾液与所述溶液的混合体积比为1：15；
3)、根据唾液与本实施例组的溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定机体的葡萄糖代谢水平。如表6所示，皮质醇添加量对检测结果的影响，其中颜色从深到浅分为5级，深蓝为1级，湛蓝为2级，天蓝3级，浅蓝为4级，接近无色为5级。
表6 皮质醇添加量对检测结果的影响
由表6可知，当皮质醇的添加量超过200ug/L后，颜色跟添加量为200ug/L时一样的，而添加量小于200ug/L时，颜色深浅是不一致的。由此得出检测的准确性较高，而且考虑成本的情况下，需要皮质醇的添加量为200ug/L时评估的准确性会提高很多。
实施例组7
一种检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：200ug/L；
超氧化物歧化酶：(按下表7的添加量来添加)；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.1％；
4-氨基安替比林：0.1％；
谷胱甘肽：1000IU/L。
使用此溶液检测体质的方法，其包括以下步骤：
1)、分别采集1人的唾液；
2)、将唾液与本实施例组的溶液混合；所述唾液与所述溶液的混合体积比为1：15；
3)、根据唾液与本实施例组的溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定机体的体质。如表7所示，超氧化物歧化酶添加量对检测结果的影响，其中颜色从深到浅分为5级，深蓝为1级，湛蓝为2级，天蓝3级，浅蓝为4级，接近无色为5级。
表7 超氧化物歧化酶添加量对检测结果的影响
| 实施例 | 添加量/IU/L | 反应颜色深浅 |
| 对比组7-1 | 380 | 5级 |
| 对比组7-2 | 400 | 5级 |
| 对比组7-3 | 480 | 4级 |
| 对比组7-4 | 490 | 3级 |
| 对比组7-5 | 500 | 2级 |
| 对比组7-6 | 510 | 2级 |
| 对比组7-7 | 520 | 2级 |
| 对比组7-8 | 540 | 2级 |
| 对比组7-9 | 550 | 2级 |
由表7可知，当超氧化物歧化酶的添加量超过500IU/L后，颜色跟添加量为500IU/L时一样的，而添加量小于500IU/L时，颜色深浅是不一致的。由此得出检测体质的准确性较高，而且考虑成本的情况下，需要超氧化物歧化酶的添加量为500IU/L时评估的准确性会提高很多。
综上所述，既要考虑检测结果的准确性，又要考虑成本，由此得出一种最优的检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：200ug/L；
超氧化物歧化酶：500IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.1％
4-氨基安替比林：0.1％
谷胱甘肽：1000IU/L。
实施例组8
一种检测体质的溶液，其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：80mM；
皮质醇：180ug/L；
超氧化物歧化酶：400IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.07％；
4-氨基安替比林：0.07％；
谷胱甘肽：1100IU/L。
选择实施例1中的1号唾液作为检测唾液，将此唾液与本实施例的溶液混合；所述唾液与所述溶液的混合体积比见表8；根据唾液与溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定机体的体质；蓝色越深表示寒性越大；蓝色越浅表示寒性越小。见表8所示，唾液与溶液的混合比例对检测结果的影响。颜色从深到浅分为5级，深蓝为1级，湛蓝为2级，天蓝3级，浅蓝为4级，接近无色为5级。
表8 唾液与溶液的混合比例对检测结果的影响
| 实施例 | 唾液与溶液的混合比例(微升：微升) | 颜色深浅 |
| 对比组8-1 | 1:6 | 5级 |
| 对比组8-2 | 1:10 | 4级 |
| 对比组8-3 | 1:15 | 3级 |
| 对比组8-4 | 1:16 | 3级 |
| 对比组8-5 | 1:20 | 3级 |
从表8可知，随着唾液与溶液的混合比例的增加，混合液的颜色是由浅至深变化，而且随着溶液添加量的添加，成本也会添加；但是当唾液与溶液的混合比例的比例超过1：15后，混合液颜色跟唾液与溶液的混合比例为1:15是一样的，因此既要考虑检测准确性，也要考虑成本问题，所以唾液与溶液的混合最佳比例1:15。在这个比例中，溶液中含有的皮质醇与唾液中含有的皮质醇氧化酶充分反应，得到的检测结果会更为准确。
在此说明，以上的颜色的级别可以根据颜色深浅程度进行分级，以上只是举例说明不仅局限于以上颜色的分级。
以上结合具体实施例描述了本发明的技术原理。这些描述只是为了解释本发明的原理，而不能以任何方式解释为对本发明保护范围的限制。基于此处的解释，本领域的技术人员不需要付出创造性的劳动即可联想到本发明的其它具体实施方式，这些方式都将落入本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种检测体质的溶液，其特征在于：其配制包括以下组分：
Tris-HCl pH 7.6：60-150mM；
皮质醇：120-250ug/L；
超氧化物歧化酶：380-550IU/L；
色原物质：0.12-0.4％；
抗氧化剂：600-1500IU/L。
2.根据权利要求1所述的一种检测体质的溶液，其特征在于：所述色原物质为2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸和4-氨基安替比林的混合物。
3.根据权利要求2所述的一种检测体质的溶液，其特征在于：所述2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.06-0.2％；所述4-氨基安替比林：0.06-0.2％。
4.根据权利要求3所述的一种检测体质的溶液，其特征在于：所述抗氧化剂为谷胱甘肽。
5.根据权利要求4所述的一种检测体质的溶液，其特征在于：其由以下组分配制而成：
Tris-HCl pH 7.6：100mM；
皮质醇：200ug/L；
超氧化物歧化酶：500IU/L；
2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸：0.1％；
4-氨基安替比林：0.1％；
谷胱甘肽：1000IU/L。
6.如权利要求1-5任意一项所述的一种检测体质的溶液的检测方法，其特征在于：其包括以下步骤：
1)、采集唾液；
2)、将唾液与所述溶液混合；
3)、根据唾液与溶液混合后得到混合液的颜色深浅确定体质；蓝色越深表示寒度越大；蓝色越浅表示寒度越小。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于：所述唾液与所述溶液的混合体积比为1：15。
8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于：所述唾液与所述溶液置于试验瓶中混合反应。
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| CN107576624B (zh) * | 2017-08-31 | 2019-06-25 | 中国人民解放军第三军医大学 | 一种唾液中皮质醇的检测方法 |
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