CN105900559A - 一种促进刺五加种子萌发的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进刺五加种子萌发的方法。它包括如下步骤：(1)种子的处理：将采集的刺五加种子消毒，然后用清水冲洗；(2)种子解除形态休眠：在避光条件下，将步骤(1)处理的刺五加种子与珍珠岩混合后层积至种胚发育成熟，得到解除形态休眠的种子；(3)种子解除生理休眠：在避光条件下，将步骤(2)处理的所述解除形态休眠的种子的变温处理，解除其生理休眠，至其萌发。本发明方法简单可行，能够有效打破刺五加种子休眠，解决刺五加种子休眠时间长、发芽率低的问题，且能降低种子的霉变率。
Description
技术领域
本发明涉及一种促进刺五加种子萌发的方法。
背景技术
刺五加[Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim.)Harms]，五加科五加属，是国家三级保护药用植物，根、茎、叶、果实均可入药，是我国著名的滋补保健药材，在国际上享有盛誉。刺五加味辛，微苦，性温。具有益气健脾，补肾安神等功效，主治脾肾阳虚，腰膝酸软，体虚乏力，失眠多梦，食欲不振等症，可用于治疗神经衰弱，高血压，低血压，冠心病，白细胞减少等疾病；还可用于日常保健，能提高机体抗疲劳及在特殊工作条件下的反应能力，增强机体对环境的适应性。刺五加根茎含多种甙类(刺五加甙A、B、B1、D、F、G)、多糖、芝麻素等，叶和花中含有黄酮，果实含有水溶多糖，全株均含挥发油。特别是刺五加所含的多糖和甙类正在引起国内外学者的广泛关注，认为多糖类及刺五加甙是理想的干扰素(IFN)促诱生剂，可提高机体内IFN水平，增强机体免疫力。刺五加生长周期缓慢，资源更新需要10年以上，因此，野生资源难以满足日益增加的国际、国内市场需求，需要大力发展人工栽培和种植产业。但由于刺五加种子具有深休眠特性，影响了人工栽培发展。目前，刺五加种子的休眠机理尚不十分清楚，也缺乏高效的休眠解除措施。
发明内容
本发明的目的是提供一种促进刺五加种子萌发的方法。本发明方法简单可行，能够有效打破刺五加种子休眠，能有效解决刺五加种子休眠时间长、发芽率低的问题，且能降低种子的霉变率。
本发明提供的促进刺五加种子萌发的方法，包括如下步骤：(1)种子的处理：将采集的刺五加种子消毒，然后用清水冲洗；
(2)种子解除形态休眠：在避光条件下，将步骤(1)处理的刺五加种子与珍珠岩混合后层积至种胚发育成熟，得到解除形态休眠的种子；
(3)种子解除生理休眠：在避光条件下，将步骤(2)处理的所述解除形态休眠的种子变温处理，解除其生理休眠，至其萌发。
本发明中，所述刺五加种子的采集包括按照如下具体步骤：选择成熟饱满、无病虫害的果实、采集；用揉碾法将核果破损后，在清水中漂洗3-5次，去除果皮，待种皮风干后，再进行手选或风选方法挑选成熟饱满的种子。
上述的方法中，所述消毒的试剂可为多菌灵或高锰酸钾溶液；
步骤(2)之前还包括浸种的步骤：将步骤(1)消毒后的刺五加种子在赤霉素溶液中浸种。
上述的方法中，所述浸种的时间可为4～12h，具体可为12h；
所述赤霉素溶液的质量体积浓度可为10～100μg/L，具体可为50μg/L、50～100μg/L或20～100μg/L。
本发明中，步骤(1)中所述消毒的目的是将所述刺五加种子表面的微生物杀死，防止所述刺五加种子在后续的层积过程中发生霉变；进行所述消毒之后再用清水洗净，以免所述消毒的试剂残留在所述刺五加种子上，对所述刺五加种子活力造成损伤。
上述的方法中，步骤(1)中，所述刺五加种子与所述消毒液的试剂的质量比为1：1～10；
采用多菌灵消毒的时间可为12～24h，具体可为12h或12～20h；
所述多菌灵的质量体积浓度可为100～500μg/ml，具体可为200μg/ml；
所述高锰酸钾溶液消毒的时间可为1～4h，具体可为2h或2～4h；
所述高锰酸钾溶液的质量百分浓度为0.1％～0.5％。
上述的方法中，所述刺五加种子与所述珍珠岩的体积比为1：3～10，具体可为1:10或1：5～10；
所述珍珠岩的含水率为20～100％，具体可为40％、60％、40～60％、80～100％或60～100％，此处含水率指的是按照质量百分含量计算；
所述珍珠岩在使用前经灭菌处理，上述灭菌处理的具体过程如下：将所述珍珠岩用自来水洗3～5遍，控干水分，在烘箱中100～150℃烘干即可；或将清洗过的珍珠岩在高压灭菌锅中120℃灭菌20分钟以上，再移至烘箱烘干。
上述的方法中，步骤(2)中，所述层积的条件如下：
温度可为18～20℃，具体可为18℃，时间可为45～80天，具体可为45天、60天。
上述的方法中，步骤(3)中，所述变温的条件是依次经如下1)-2)两种条件处理：
1)温度可为0～5℃，具体可为5℃，时间可为15～60天，具体可为30天；
2)温度可为6～10℃至种子萌发，具体可为6℃、10℃。
本发明中，通过对步骤(2)和(3)中层积过程条件的控制，具体由高温18～20℃层积，然后低温0～5℃，再到中温6～10℃层积，简称通过高温-低温-中温的变温层积能促进刺五加种子的快速萌发。
上述的方法中，步骤(2)和(3)中均还可包括进行至少一次透气并翻动所述刺五加种子。
上述的方法中，所述透气并翻动进行次数可为3～14次，具体可为3次、8次、14次；
进行所述透气并翻动的时间间隔可为7～10天，具体可为7天、10天。
上述的方法中，步骤(2)和(3)中均还可包括杀菌消毒的步骤。
上述的方法中，步骤(2)和(3)中，采用多菌灵的500～800倍液杀菌消毒；
所述多菌灵的500～800倍液的质量体积浓度可为1.25～2μg/ml，具体制备过程为多菌灵和水的质量比为1：500～800稀释，即1g多菌灵加500～800g水；
所述多菌灵的800倍液每7～10d喷施一次。
本发明中，步骤(3)和(4)中，所述刺五加种子和所述珍珠岩处于混合状态，所述多菌灵的500～800倍液喷洒的量以维持所述珍珠岩的含水率在20～100％。
本发明具有以下优点：
本发明方法简单，通过高温-低温-中温的变温层积能有效打破刺五加种子休眠，促进种子快速萌发，提高种子萌发率，缩短种子萌发时间，使种子的发芽率、发芽势和发芽指数达到最佳状态，同时，大大降低种子霉变率，能使种子发芽潜力达到最大，能够满足生产中刺五加种子的育苗要求，具有很好的市场前景。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、一种促进刺五加种子萌发的方法
(1)种子采集：选择生长健壮、果实饱满、无病虫害的种源采集，核果呈黑褐色时采收；用揉碾法将核果破损后，在清水中漂洗5次，去除果皮，待种皮风干后，再进行手选或风选方法挑选成熟饱满刺五加种子。
(2)种子消毒：将成熟的刺五加种子置于200μg/ml多菌灵中浸泡12h，然后用清水冲洗。
(3)先将珍珠岩在高压灭菌锅中120℃灭菌20分钟以上，再移至烘箱烘干灭菌处理，取其含水率为60％的湿润的珍珠岩备用。
将上述(2)处理的刺五加种子和含水率为60％的湿润的珍珠岩按照体积比为1:10混合，得到混合物。
(4)种子解除形态休眠：在避光条件下，将上述混合物依次在如下条件下层积处理至种胚形成：
在18℃层积60天，层积期间每隔7d时间翻动种子，共翻动8次；
(5)种子解除生理休眠：在避光条件下，将经步骤(4)在5℃低温层积30天，层积期间每隔10天翻动种子，共翻动3次；然后继续在10℃层积，层积期间每隔7天翻动种子，共翻动14次，至种子萌发，刺五加种子的发芽率如表1所示。
本发明实施例1中刺五加种子的发芽率如表1所示。
表1刺五加种子的发芽率
实施例2、
(1)种子采集：选择生长健壮、果实饱满、无病虫害的种源采集，核果呈黑褐色时采收；用揉碾法将核果破损后，在清水中漂洗4次，去除果皮，待种皮风干后，再进行手选或风选方法挑选成熟饱满刺五加种子。
(2)种子消毒：将成熟的刺五加种子置于200μg/ml多菌灵中浸泡12h，然后用清水冲洗。
(3)先将珍珠岩在高压灭菌锅中120℃灭菌20分钟以上，再移至烘箱烘干，取其含水率为40％的湿润的珍珠岩备用。
将上述(2)处理的刺五加种子和含水率为40％的湿润的珍珠岩按照体积比为1:10混合，得到混合物。
(4)种子解除形态休眠：在避光条件下，将上述混合物依次在如下条件下层积处理至种胚形成：
在18℃层积45天，层积期间每隔7d时间翻动种子，共翻动8次；
(5)种子解除生理休眠：在避光条件下，将经步骤(4)在5℃低温层积30天，层积期间每隔10天时间翻动种子，共翻动3次；然后继续在6℃层积，层积期间每隔7时间翻动种子，共翻动14次，至种子萌发，刺五加种子的发芽率如表1所示。
实施例3、
(1)种子采集：选择生长健壮、果实饱满、无病虫害的种源采集，核果呈黑褐色时采收；用揉碾法将核果破损后，在清水中漂洗5次，去除果皮，待种皮风干后，再进行手选或风选方法挑选成熟饱满刺五加种子。
(2)种子消毒：将成熟的刺五加种子置于200μg/ml多菌灵中浸泡12h，然后用清水冲洗。
(3)浸种：消毒后的刺五加种子在50μg/L赤霉素溶液中浸种12h。
(4)先将珍珠岩在高压灭菌锅中120℃灭菌20分钟以上，再移至烘箱烘干，取其含水率为60％的湿润的珍珠岩备用。
将上述(3)处理的刺五加种子和含水率为60％的湿润的珍珠岩按照体积比为1:10混合，得到混合物。
(5)种子解除形态休眠：在避光条件下，将上述混合物依次在如下条件下层积处理至种胚形成：
在18℃层积60天，层积期间每隔7d时间翻动种子，共翻动8次；
(6)种子解除生理休眠：在避光条件下，将经步骤(5)在5℃低温层积30天，层积期间每隔10天时间翻动种子，共翻动3次；然后继续在10℃层积，层积期间每隔7天时间翻动种子，共翻动14次，至种子萌发，刺五加种子的发芽率如表1所示。
实施例4、
(1)种子采集：选择生长健壮、果实饱满、无病虫害的种源采集，核果呈黑褐色时采收；用揉碾法将核果破损后，在清水中漂洗5次，去除果皮，待种皮风干后，再进行手选或风选方法挑选成熟饱满刺五加种子。
(2)种子消毒：将成熟的刺五加种子置于200μg/ml多菌灵中浸泡12h，然后用清水冲洗。
(3)先将珍珠岩在高压灭菌锅中120℃灭菌20分钟以上，再移至烘箱烘干，取其含水率为60％的湿润的珍珠岩备用。
将上述(2)处理的刺五加种子和含水率为60％的湿润的珍珠岩按照体积比为1:10混合，得到混合物。
(4)种子解除形态休眠：在避光条件下，将上述混合物依次在如下条件下层积处理至种胚形成：
在18℃层积60天，层积期间每隔7d时间翻动种子，共翻动8次，每次翻动喷多菌灵的800倍液(浓度是1.25μg/ml)，喷施量以保持珍珠岩含水率为60％；
(5)种子解除生理休眠：在避光条件下，将经步骤(5)在5℃低温层积30天，层积期间每隔10天时间翻动种子，共翻动3次，每次翻动喷多菌灵的800倍液，喷施量以保持珍珠岩含水率为60％；然后继续在10℃层积，层积期间每隔7天时间翻动种子，共翻动14次，每次翻动喷多菌灵的800倍液，喷施量以保持珍珠岩含水率为60％，至种子萌发，刺五加种子的发芽率如表1所示。
实施例5、
(1)种子采集：选择生长健壮、果实饱满、无病虫害的种源采集，核果呈黑褐色时采收；用揉碾法将核果破损后，在清水中漂洗5次，去除果皮，待种皮风干后，再进行手选或风选方法挑选成熟饱满刺五加种子。
(2)种子消毒：将成熟的刺五加种子置于200μg/ml多菌灵中浸泡12h，然后用清水冲洗。
(3)浸种：消毒后的刺五加种子在50μg/L赤霉素溶液中浸种12h。
(4)先将珍珠岩在高压灭菌锅中120℃灭菌20分钟以上，再移至烘箱烘干，取其含水率为60％的湿润的珍珠岩备用。
将上述(3)处理的刺五加种子和含水率为60％的湿润的珍珠岩按照体积比为1:10混合，得到混合物。
(5)种子解除形态休眠：在避光条件下，将上述混合物依次在如下条件下层积处理至种胚形成：
在18℃层积60天，层积期间每隔7d时间翻动种子，共翻动8次，每次翻动喷多菌灵的800倍液，喷施量以保持珍珠岩含水率为60％；
(6)种子解除生理休眠：在避光条件下，将经步骤(5)在5℃低温层积30天，层积期间每隔10天时间翻动种子，共翻动3次，每次翻动喷多菌灵的800倍液(浓度1.25μg/ml)，喷施量以保持珍珠岩含水率为60％；然后继续在10℃层积，层积期间每隔7天时间翻动种子，共翻动14次，每次翻动喷多菌灵的800倍液，喷施量以保持珍珠岩含水率为60％，至种子萌发，刺五加种子的发芽率如表1所示。
由表1可知，本发明方法与对比相比能显著增加刺五加种子的发芽率，说明本发明能够有效打破刺五加种子休眠，能有效解决刺五加种子休眠时间长的问题。
对比例1、
(1)种子采集：选择生长健壮、果实饱满、无病虫害的种源采集，核果呈黑褐色时采收；用揉碾法将核果破损后，在清水中漂洗5次，去除果皮，待种皮风干后，再进行手选或风选方法挑选成熟饱满刺五加种子。
(2)种子消毒：将成熟的刺五加种子置于200μg/ml多菌灵中浸泡12h，然后用清水冲洗。
(3)浸种：消毒后的刺五加种子在50μg/L赤霉素溶液中浸种12h。
(4)先将珍珠岩在高压灭菌锅中120℃灭菌20分钟以上，再移至烘箱烘干，取其含水率为60％的湿润的珍珠岩备用。
将上述处理的刺五加种子和含水率为60％的湿润的珍珠岩按照体积比为1:10混合，得到混合物。
(5)在避光条件下，将上述混合物依次在如下条件下层积处理至种胚形成：
在18℃层积100天，层积期间每隔7d时间翻动种子，共翻动14次；
(6)在避光条件下，将经步骤(5)处理的混合物在5℃低温层积90天，层积期间每隔10时间翻动种子，共翻动9次，至种子萌发，刺五加种子的发芽率如表1所示。
对比例2、
(1)种子采集：选择生长健壮、果实饱满、无病虫害的种源采集，核果呈黑褐色时采收；用揉碾法将核果破损后，在清水中漂洗5次，去除果皮，待种皮风干后，再进行手选或风选方法挑选成熟饱满刺五加种子。
(2)种子消毒：将成熟的刺五加种子置于200μg/ml多菌灵中浸泡12h，然后用清水冲洗。
(3)浸种：消毒后的刺五加种子在50μg/L赤霉素溶液中浸种12h。
(3)先将珍珠岩在高压灭菌锅中120℃灭菌20分钟以上，再移至烘箱烘干，取其含水率为60％的湿润的珍珠岩备用。
将上述处理的刺五加种子和含水率为60％的湿润的珍珠岩按照体积比为1:10混合，得到混合物。
(4)在避光条件下，将上述混合物依次在如下条件下层积处理至种胚形成：
1)在15℃层积60天，层积期间每隔7d时间翻动种子，共翻动8次；
2)在25℃高温层积30天，层积期间每隔7时间翻动种子，共翻动5次。
(5)在避光条件下，将经步骤(2)处理的混合物在5℃层积120天，层积期间每隔7时间翻动种子，共翻动17次，至种子萌发，刺五加种子的发芽率如表1所示。
Claims (10)
1.一种促进刺五加萌发的方法，包括如下步骤：(1)种子的处理：将采集的刺五加种子消毒，然后用清水冲洗；
(2)种子解除形态休眠：在避光条件下，将步骤(1)处理的刺五加种子与珍珠岩混合后层积至种胚发育成熟，得到解除形态休眠的种子；
(3)种子解除生理休眠：在避光条件下，将步骤(2)处理的所述解除形态休眠的种子的变温处理，解除其生理休眠，至其萌发。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述消毒的试剂包括多菌灵或高锰酸钾溶液；
步骤(2)之前还包括浸种的步骤：将步骤(1)消毒后的刺五加种子在赤霉素溶液中浸种。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述浸种的时间为4～12h；
所述赤霉素溶液的质量体积浓度为10～100μg/L。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述刺五加种子与所述消毒液的试剂的质量比为1：1～10；
采用多菌灵消毒的时间为12～24h；
所述多菌灵的质量体积浓度为100～500μg/ml；
所述高锰酸钾溶液消毒的时间为1～4h；
所述高锰酸钾溶液的质量百分浓度为0.1％～0.5％。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于：所述刺五加种子与所述湿润的珍珠岩的体积比为1：3～10；
所述湿润的珍珠岩的含水率为20～100％；
所述湿润的珍珠岩在使用前经灭菌处理；
步骤(2)中，所述层积的条件如下：
温度为18～20℃，时间为45～80天。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述变温的条件是依次经如下1)-2)两种条件处理：
1)温度为0～5℃，时间为15～60天；
2)温度为6～10℃至种子萌发。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中均还包括进行至少一次透气并翻动所述刺五加种子。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述透气并翻动进行次数为3～14次；
进行所述透气并翻动的时间间隔为7～10天。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中均还包括杀菌消毒的步骤。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中，采用多菌灵的500～800倍液杀菌消毒；
所述多菌灵的500～800倍液的质量体积浓度可为1.25～2μg/ml；
所述多菌灵的800倍液每7～10d喷施一次。
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