CN105853417A - 乌头碱在治疗红斑狼疮中的应用 - Google Patents
乌头碱在治疗红斑狼疮中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105853417A CN105853417A CN201610340107.XA CN201610340107A CN105853417A CN 105853417 A CN105853417 A CN 105853417A CN 201610340107 A CN201610340107 A CN 201610340107A CN 105853417 A CN105853417 A CN 105853417A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lupus erythematosus
- aconitine
- agent
- group
- sle
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- XFSBVAOIAHNAPC-UHFFFAOYSA-N Aconitin Natural products CCN1CC(C(CC2OC)O)(COC)C3C(OC)C(C(C45)(OC(C)=O)C(O)C6OC)C1C32C4CC6(O)C5OC(=O)C1=CC=CC=C1 XFSBVAOIAHNAPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 74
- 229940039750 aconitine Drugs 0.000 title claims abstract description 74
- STDXGNLCJACLFY-UHFFFAOYSA-N aconitine Natural products CCN1CC2(COC)C(O)CC(O)C34C5CC6(O)C(OC)C(O)C(OC(=O)C)(C5C6OC(=O)c7ccccc7)C(C(OC)C23)C14 STDXGNLCJACLFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 74
- XFSBVAOIAHNAPC-XTHSEXKGSA-N 16-Ethyl-1alpha,6alpha,19beta-trimethoxy-4-(methoxymethyl)-aconitane-3alpha,8,10alpha,11,18alpha-pentol, 8-acetate 10-benzoate Chemical compound O([C@H]1[C@]2(O)C[C@H]3[C@@]45C6[C@@H]([C@@]([C@H]31)(OC(C)=O)[C@@H](O)[C@@H]2OC)[C@H](OC)[C@@H]4[C@]([C@@H](C[C@@H]5OC)O)(COC)CN6CC)C(=O)C1=CC=CC=C1 XFSBVAOIAHNAPC-XTHSEXKGSA-N 0.000 title claims abstract description 66
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 title claims abstract description 51
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims abstract description 41
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 39
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 18
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 15
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 10
- 208000004921 cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 7
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 7
- 208000006802 Lupus erythematosus panniculitis Diseases 0.000 claims description 6
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 6
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 6
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 6
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 5
- 239000006072 paste Substances 0.000 claims description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 5
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 5
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 claims description 4
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 4
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 4
- 239000011505 plaster Substances 0.000 claims description 4
- 231100000019 skin ulcer Toxicity 0.000 claims description 4
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 claims description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 4
- 208000011834 subacute cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 4
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000282461 Canis lupus Species 0.000 claims description 3
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 claims description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 3
- 239000000865 liniment Substances 0.000 claims description 3
- 229940040145 liniment Drugs 0.000 claims description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 3
- 229940098465 tincture Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 claims description 2
- 210000002200 mouth mucosa Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims 2
- 229920001875 Ebonite Polymers 0.000 claims 1
- RRHGJUQNOFWUDK-UHFFFAOYSA-N Isoprene Chemical compound CC(=C)C=C RRHGJUQNOFWUDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 15
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000470 constituent Substances 0.000 abstract 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 abstract 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 abstract 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 22
- XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N pristane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 14
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 12
- LRJOMUJRLNCICJ-JZYPGELDSA-N Prednisolone acetate Chemical group C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(=O)COC(=O)C)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O LRJOMUJRLNCICJ-JZYPGELDSA-N 0.000 description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 125000003896 aconitine group Chemical group 0.000 description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 9
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 8
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 8
- 206010061481 Renal injury Diseases 0.000 description 7
- 208000037806 kidney injury Diseases 0.000 description 7
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 7
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 6
- 208000006926 Discoid Lupus Erythematosus Diseases 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 230000008721 basement membrane thickening Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 5
- 210000000585 glomerular basement membrane Anatomy 0.000 description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 4
- 201000004997 drug-induced lupus erythematosus Diseases 0.000 description 4
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 4
- -1 salt Compound Chemical class 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 3
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 3
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 210000004279 orbit Anatomy 0.000 description 3
- 208000037920 primary disease Diseases 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- RPTUSVTUFVMDQK-UHFFFAOYSA-N Hidralazin Chemical compound C1=CC=C2C(NN)=NN=CC2=C1 RPTUSVTUFVMDQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010048612 Hydrothorax Diseases 0.000 description 2
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 2
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 208000010132 annular erythema Diseases 0.000 description 2
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 2
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 2
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 2
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000000556 factor analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 2
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008676 import Effects 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 206010057887 neonatal lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 229960002800 prednisolone acetate Drugs 0.000 description 2
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 2
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 2
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROKHBFMPJXMSKD-UHFFFAOYSA-N 2,4,10,14-tetramethylpentadecane Chemical class CC(C)CCCC(C)CCCCCC(C)CC(C)C ROKHBFMPJXMSKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 3,3'-diaminobenzidine Chemical compound C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010063409 Acarodermatitis Diseases 0.000 description 1
- 241000227129 Aconitum Species 0.000 description 1
- 241000173529 Aconitum napellus Species 0.000 description 1
- 206010001580 Albuminuria Diseases 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 208000037845 Cutaneous squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000010228 Erectile Dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000007117 Oral Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 235000007199 Panicum miliaceum Nutrition 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 241000218201 Ranunculaceae Species 0.000 description 1
- 241000447727 Scabies Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010041497 Spermatorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000018614 Uromodulin Human genes 0.000 description 1
- 108010027007 Uromodulin Proteins 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 229940023019 aconite Drugs 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002583 anti-histone Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 description 1
- 208000002399 aphthous stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 150000004982 aromatic amines Chemical group 0.000 description 1
- 229930191701 arteannuin Natural products 0.000 description 1
- BLUAFEHZUWYNDE-NNWCWBAJSA-N artemisinin Chemical compound C([C@](OO1)(C)O2)C[C@H]3[C@H](C)CC[C@@H]4[C@@]31[C@@H]2OC(=O)[C@@H]4C BLUAFEHZUWYNDE-NNWCWBAJSA-N 0.000 description 1
- 229960004191 artemisinin Drugs 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 244000022185 broomcorn panic Species 0.000 description 1
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 1
- 210000001736 capillary Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 208000019902 chronic diarrheal disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- MOVRKLZUVNCBIP-RFZYENFJSA-N cortancyl Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(=O)COC(=O)C)(O)[C@@]1(C)CC2=O MOVRKLZUVNCBIP-RFZYENFJSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 230000009266 disease activity Effects 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000000245 forearm Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 210000005086 glomerual capillary Anatomy 0.000 description 1
- 210000002601 glomerular mesangium Anatomy 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 239000000745 gonadal hormone Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003760 hair shine Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 210000003677 hemocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940000351 hemocyte Drugs 0.000 description 1
- 229960002474 hydralazine Drugs 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 201000001881 impotence Diseases 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229940029329 intrinsic factor Drugs 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000088 lip Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 208000030208 low-grade fever Diseases 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 1
- 229940005654 nitrite ion Drugs 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 208000005687 scabies Diseases 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 201000010106 skin squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000036561 sun exposure Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明涉及乌头碱在治疗红斑狼疮中的应用。具体而言,本发明涉及乌头碱或其药学上可接受的盐或含有其的药物组合物在制备用于预防和/或治疗红斑狼疮特别是系统性红斑狼疮的药物中的用途。本发明所述乌头碱是多种常用中药的有效成分,经药效学研究表明,乌头碱是治疗红斑狼疮的有效药物,具有高效、安全、无毒副作用的特点。
Description
技术领域
本发明涉及源于中药的化合物乌头碱的新用途。具体而言,本发明涉及乌头碱在治疗红斑狼疮中的应用。
背景技术
红斑狼疮(LE)是一种典型的自身免疫性结缔组织病,多见于15~40岁女性。红斑狼疮是一种疾病谱性疾病,可分为盘状红斑狼疮(DLE)、亚急性皮肤型红斑狼疮(SCLE)、深在性红斑狼疮(LEP)、新生儿红斑狼疮(NLE)、药物性红斑狼疮(DIL)、系统性红斑狼疮(SLE)等亚型。
盘状红斑狼疮,主要侵犯皮肤,是红斑狼疮中最轻的类型。少数可有轻度内脏损害,少数病例可转变为系统性红斑狼疮。皮肤损害初起时为一片或数片鲜红色斑,绿豆至黄豆大,表面有粘着性鳞屑,以后逐渐扩大,呈圆形或不规则形,边缘色素明显加深,略高于中心。损害主要分布于日光照射部位,如面部、耳轮及头皮,少数可累及上胸、手背、前臂、口唇及口腔黏膜也可受累。多数患者皮损无自觉症状,但很难完全消退。新损害可逐渐增多或多年不变。盘状皮损在日光暴晒或劳累后加重。头皮上的损害可引起永久性脱发。陈旧性损害偶尔可发展成皮肤鳞状细胞癌。
亚急性皮肤型红斑狼疮,临床上较少见,是一种特殊的中间类型。皮肤损害有两种,一种是环状红斑型,另一个类型是丘疹鳞屑型。两种皮损多数病例单独存在,少数可同时存在。皮损常反复发作,绝大多数患者均有内脏损害,但严重者很少,主要症状为关节痛、肌肉痛、反复低热,少数有肾炎、血液系统改变。
深在性红斑狼疮又称狼疮性脂膜炎,同样是中间类型的红斑狼疮。皮肤损害为结节或斑块,位于真皮深层或皮下脂肪组织,其大小、数目不定,表面肤色正常或淡红色,质地坚实,无移动性。损害可发生于任何部位,最常见于颊部、臀部、臂部,其次为小腿和胸部。深在性红斑狼疮性质不稳定,可单独存在,以后即可转化为盘状红斑狼疮,也可转化为系统性红斑狼疮,或与它们同时存在。
新生儿红斑狼疮,表现为皮肤环形红斑和先天性心脏传导阻滞,有自陷性,一般在生后4~6个月内自行消退,心脏病变常持续存在。
药物性红斑狼疮主要表现为发热、关节痛、肌肉痛、面部蝶形红斑、口腔溃疡,可有浆膜炎。ANA、抗组蛋白抗体、抗ss-DNA抗体等可为阳性。停药后逐渐好转,病情较重者可给予适量糖皮质激素。
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE),是一种较常见的累及多器官系统的自身免疫性疾病,临床表现多种多样,病情呈反复发作与缓解交替过程1。血清中出现以抗核抗体为代表的多种自身抗体和多系统累及是SLE的两个主要临床特征2。几乎各种自身免疫性疾病的临床表现均有可能发生在SLE。因此,许多学者称之为自身免疫性疾病的原型。
SLE在发病年龄、性别、种族、地区上差异较大。本病好发于青壮年,多见于15~45岁年龄段,男:女为1:7~1:9。近年来世界范围内报道的病例有增多的趋势。美国多地区的流行病学调查报告,SLE的患病率为14.6~122/10万;我国大样本的一次性调查(>3万人)显示SLE的患病率为70/10万人,妇女中则高达113/10万人3。另据一项最新流行病调查报告,在1995至2013年间,我国SLE患者在5年内的存活率是94%,10年内存活率是89%,主要死亡原因比例是感染(33.2%)、狼疮肾炎(18.7%)、狼疮脑病(13.8%)和心血管疾病(11.5%)4。
SLE的病因和发病机制尚未完全明确,目前研究认为,SLE的发病既有遗传、性激素等内在因素,也与环境因素、药物等有关。SLE在同卵双胎的共患率25%,而异卵双胎的共患率则为2%;5%~13%的SLE患者可在一级或二级亲属中找到另一SLE患者;SLE患者的子女中,SLE的发病率为5%,表明SLE存在遗传的易感性。紫外线是与SLE最具有显著相关性的环境因素之一,紫外线照射可激发或加重SLE皮疹,可能与其损害角质形成细胞,使DNA发生改变或“隐蔽抗原”释放或新抗原表达致机体产生相应抗体,从而形成免疫复合物引起损伤有关。含有芳香族胺基团的药物(如普鲁卡因、肼苯哒嗪等)可以诱发药物性狼疮。虽然药物性狼疮不等同于SLE,目前还缺乏有力的证据说明引起药物性狼疮的药物会使SLE病情加重,但药物性狼疮的临床表现和部分血清学特征类似SLE。此外,某些感染如链球菌、EB病毒等也可诱发或加重本病5。
目前已有研究出多种自发性红斑狼疮鼠模型,其中包括NZB、NZB×NZWF1、BXSB、MRL/lpr等6。长链烃类化合物可以诱导小鼠自身抗体的产生,而降植烷(Pristane,2,4,10,14-四甲基十五烷)是研究较多且最成功的一种。降植烷诱导雌性BALB/c小鼠出现病变,包括蛋白尿、免疫复合物性肾小球肾炎、关节炎,包括抗RNP/Sm抗体、抗ds-DNA抗体等多种自身抗体,具备SLE的重要特征,符合美国风湿病学会推荐的SLE诊断标准,成为国内外认可的诱导型SLE模型7-9。
虽然近年来SLE的治疗方面有许多新进展,但目前还没有根治的办法。对于中度和重度SLE目前仍以糖皮质激素加免疫抑制剂为主,以上药物虽能有效控制疾病活动、改善病情,但此类药物主要针对抗SLE的免疫亢进的表现,而非矫正其免疫失衡,常影响免疫系统以外的机体其他系统。尤其是长期使用增加了患者发生肿瘤和感染扩散的危险10。尽管新出现的生物制剂对SLE患者疗效良好,但其不良反应仍较多,部分患者不敏感或容易复发11。因此,积极探寻新的治疗方法、治疗药物刻不容缓。
中医中药在SLE治疗中的作用逐渐引起人们的重视。中医古代文献中虽没有与SLE相应的病名,但有与之相类似的症状描述,如根据皮疹特征出发称之为“蝴蝶丹”、“阴阳毒”;根据本病可累及周身的特点,称为“周痹”;有肾功损害者,属“水肿”;有胸水者属“悬饮”等等12。大量临床研究亦表明中医药或中西医结合对SLE有较好的疗效,可减少药物长期应用带来的毒副作,代表中药如雷公藤、红藤、青蒿素等。
乌头碱是一种双酯型生物碱,广泛存在于川乌、草乌、附子、雪上一支蒿等传统中药材及其各种炮制品中。乌头属(毛茛科)中药材具有回阳救逆、补火助阳、祛风除湿和温经散寒等功能,传统中医学临床用于治疗气喘咳嗽、心腹疼痛、慢性腹泻、阳痿滑精、各种风湿疼痛、心衰、顽癣、带状疱疹、疥疮等病症,而乌头碱作为此类中药材的主要有效成分,在强心、镇痛、抗炎、抗肿瘤、调节免疫等方面己显现了良好的疗效13。由于乌头碱是此类中药材的主要有毒成分,所以现代医学对其的开发应用并不多见。现代药理学对乌头碱的毒性有了深入的研究。乌头碱小鼠皮下LD50为0.295~0.32mg/kg。日本学者认为小鼠皮下、腹腔、静脉注射及灌胃LD50为0.27mg/kg、0.38mg/kg、0.12mg/kg及1.8mg/kg14。乌头碱口服0.2mg即可发生中毒反应,3~5mg可致死亡。亦有报道其致死量为2.5mg。
现有技术中尚未有乌头碱用于治疗红斑狼疮的相关报道。
发明内容
本发明人通过具体实验证明乌头碱对于红斑狼疮具有很好的治疗效果,可以作为一种高效、安全且无毒副作用的治疗红斑狼疮的新型药物。
因此,本发明一方面提供乌头碱或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗红斑狼疮的药物中的用途。
本发明另一方面提供含有乌头碱或其药学上可接受的盐的药物组合物在制备用于预防和/或治疗红斑狼疮的药物中的用途。
本发明所述的红斑狼疮可以是盘状红斑狼疮、亚急性皮肤型红斑狼疮、深在性红斑狼疮、新生儿红斑狼疮、药物性红斑狼疮、或系统性红斑狼疮,优选药物性红斑狼疮或系统性红斑狼疮,特别优选系统性红斑狼疮。
本发明的乌头碱可进一步与药学上可接受的、可广泛使用本领域公知的各种载体组合使用,所述的载体如稀释剂、粘合剂、吸收剂、崩解剂、分散剂、湿润剂、助溶剂、缓冲剂、表面活化剂等。本发明的组合物可以利用本领域任何已知方法制成,以使病人用药后能提供快速、持久或缓慢释放的活性成分。
本领域技术人员能够理解,本发明的药物组合物可以根据具体的施用方式被配制成各种本领域熟知的制剂形式,例如口服剂型(粉剂、片剂、胶囊、软胶囊、口服溶液、糖浆、酏丸、散剂、囊剂、颗粒剂等),或局部施用制剂(霜剂、乳膏、软膏、洗剂、凝胶、香脂、膏药、糊剂、喷雾剂、气雾剂等),或注射制剂(溶液、悬浮剂、乳剂)。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
本发明活性成分乌头碱的给药剂量可以根据个体的情况和重量、病情的严重程度、药物形式、给药途径以及给药周期的不同而不同,其也可以由本领域技术人员进行选择。为了获得需要的作用,通常建议每日有效剂量为1~10μg/kg(远远低于毒性剂量)。剂量可以是每天单次给药或每天分多次给药。
本发明的乌头碱可以通过各种途径施用至个体动物如哺乳动物(大鼠、小鼠、驯化动物或人类),所有的给药方式均是预期的,例如,给药可以是口服、直肠给药或经静脉、肌肉内、皮下、皮内、鞘膜内、硬膜外或脑室内注射。可通过注射、喷射、滴鼻、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织;或是被其它物质混合或包裹后导入机体。
本发明进一步提供一种用于预防和/或治疗红斑狼疮的药物组合物,其含有乌头碱作为活性成分以及一种或多种药学上可接受的载体,所述的载体可以包括稀释剂、粘合剂、吸收剂、崩解剂、分散剂、湿润剂、助溶剂、缓冲剂、和表面活性剂中的一种或多种。
本发明的药物组合物可以为固体、液体或气体形式,其中所述固体形式可以为粉末剂、片剂、颗粒剂、丸剂、硬胶囊或软胶囊、乳膏剂、软膏剂、硬膏剂、凝胶剂、糊剂、散剂或贴剂;所述液体形式可以为溶液剂、混悬剂、注射剂、糖浆剂、搽剂、乳剂、酊剂或酏剂;所述气体形式可以为气雾剂、喷雾剂。
以下将结合附图和具体实施例进一步阐明本发明,但应理解其仅是举例说明的作用,并不以任何方式限制本发明的范围。
附图说明
图1为本发明乌头碱对狼疮小鼠尿蛋白影响的尿蛋白评分图。
图2为本发明乌头碱对狼疮小鼠自身抗体影响的血清抗双链DNA(ds-DNA)自身抗体水平变化图。其中图2A为治疗3周,图2B为治疗6周,图2C为治疗9周。
图3为本发明乌头碱对狼疮小鼠肾脏损伤影响的HE染色显微镜照片(400×)。其中图3A为正常对照组,图3B为模型对照组,图3C为醋酸泼尼松组,图3D为乌头碱低剂量组,图3E为乌头碱高剂量组。
图4为本发明乌头碱对狼疮小鼠肾脏损伤影响的Masson染色显微镜照片(400×)。其中图4A为正常对照组,图4B为模型对照组,图4C为醋酸泼尼松组,图4D为乌头碱高剂量组,图4E为乌头碱低剂量组。
图5为本发明乌头碱对狼疮小鼠肾脏损伤影响的PAS染色显微镜照片(400×)。其中图5A为正常对照组,图5B为模型对照组,图5C为醋酸泼尼松组,图5D为乌头碱高剂量组,图5E为乌头碱低剂量组。
图6为本发明乌头碱对狼疮小鼠肾脏免疫球蛋白沉积影响的显微镜照片(400×)。其中图6A为正常对照组,图6B为模型对照组,图6C为醋酸泼尼松组,图6D为乌头碱低剂量组,图6E为乌头碱高剂量组。
图7为本发明乌头碱对炎症因子PGE2影响的柱状图。
具体实施方式
化合物的获取和处置:
乌头碱(Aconitine,AC)(C34H47NO11,分子量645.74),购自中国食品药品检定研究院,纯度≥99.5%。按需配制成所需浓度(μg·mL-1)。
造模剂降植烷(Pristane)购自Sigma公司,批号:SHBF3678V,CAS:1921-70-6,≥98%GC。
醋酸泼尼松片购自河南天方药业有限公司,批号:150111191。
实施例1乌头碱对降植烷诱导狼疮小鼠尿蛋白的影响
试验材料:
BALB/c小鼠,雌性,购自北京维通利华实验动物有限公司。
尿蛋白试纸购自广州市珠江生化试剂有限公司。
试验方法:
模型的建立:BALB/c小鼠(一共66只小鼠,正常组、模型组各15只,给药组各12只)于SPF级屏障系统适应饲养5天后,腹部用75%酒精棉消毒,除正常对照组腹腔注射0.5ml生理盐水外,其余小鼠腹腔直接注射降植烷0.5ml/只。继续饲养,于造模后4周、8周、12周、16周、20周检测尿蛋白,于成模(尿蛋白++)后开始分组给药。
实验分组及给药:分为正常对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组(6.3mg/kg)、乌头碱低、高剂量组(25μg/kg和75μg/kg)。
受试物配制:
⑴溶剂0.5%CMC-Na,称取5g CMC-Na溶解在双蒸水中,定容至1000ml,备用。
⑵醋酸泼尼松(剂量6.3mg/kg),规格5mg/片,取3片(15mg)研磨,用0.5%CMC-Na稀释至47.6ml,备用。
⑶乌头碱配制浓度依次为:3.75μg/ml(高剂量组)、1.25μg/ml(低剂量组)。
称取乌头碱2.1mg,用0.1M醋酸钠(pH 5.0)溶于10ml,取2ml用0.5%CMC-Na定容至112ml,配成3.75μg/ml备用;取27ml,用0.5%CMC-Na定容至81ml,配成1.25μg/ml备用。
造模5个半月开始灌胃给予醋酸泼尼松和乌头碱,正常对照组和模型对照组分别给予等量溶剂,给药体积为0.2ml/10g,连续9周。每3周眼眶取血,在实验结束后脱椎处死小鼠。
尿蛋白的检测:压迫膀胱法取鼠尿,以尿蛋白试纸测试读取尿蛋白含量并分级(-:0;±:10;+:30;++:100;+++:300;单位:mg/100mL)。按疗效等级评分,-,记0分;±,记1分;+,记2分;++,记3分;+++,记4分。
试验结果:
如图1所示,分组给药后3周开始乌头碱即显示出降低尿蛋白的效果,与模型对照组比较具有明显差异;较之模型对照组和醋酸泼尼松组,用药6~9周后,乌头碱各剂量组均显示良好的降低尿蛋白的效应,与正常对照组尿蛋白水平相当。
实施例2乌头碱对狼疮小鼠ds-DNA的影响
试验材料:
ds-DNA检测用ELISA试剂盒购自武汉华美科技有限公司,产品号:CSB-E11194m。
试验方法:
模型的建立以及实验分组及给药同实施例1。
抗核抗体(ds-DNA)的检测:分组给药后每3周眼眶采集抗凝血液约0.2mL,取血清-80℃保存待用。抗ds-DNA检测按照试剂盒说明书操作,具体方法如下:
1)每个标准品、待测样品和空白组做2个复孔。按说明书采用倍比稀释法用样品稀释液稀释标准品,待测样品不稀释。
2)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育2小时。
3)甩去孔内液体,立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加250ul洗涤液,用MM-1微量振荡器(江苏国宇仪器)振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。
5)每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)重复步骤4。
7)每孔加入TMB底物50ul,轻轻在振荡器上振荡混匀,37℃温育15分钟,避光。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)采用酶标仪RT-6000(Rayto,USA)在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制标准曲线并算得待测组ds-DNA的含量(ng/ml)。与模型组比较,#,P<0.05;##,P<0.01。
试验结果:
如图2所示,给药3周后(图2A),乌头碱治疗组血清ds-DNA水平显著降低,具有统计学意义(P<0.01);给药6周后(图2B),乌头碱组尤其是低剂量组表现出降低ds-DNA水平的效应(P<0.01);给药9周后(图2C),乌头碱组也显示了降低ds-DNA水平的趋势,其中大剂量组降幅约为20%。
实施例3乌头碱对狼疮小鼠肾脏损伤的病理检查
试验方法:
模型的建立以及实验分组及给药同实施例1。
肾脏损伤的病理检查:脱椎处死小鼠后,解剖。用10%的中性福尔马林将肾脏组织固定备用。送检组织经甲醛充分固定后,逐级乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,常规制备3μm石蜡切片。分别用HE、Masson、PAS染色,光学显微镜(DP71型,OLYMPUS,放大400倍)检查组织损伤情况。
试验结果:
如图3所示,肾脏HE染色结果显示,乌头碱对降植烷诱导的狼疮小鼠的肾脏有良好的保护作用,可以完全缓解肾脏损伤。
图3A正常对照组,显示肾小球组织结构正常。图3B模型对照组,显示肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾小球毛细血管基底膜增厚。图3C醋酸泼尼松组,显示肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾小球毛细血管基底膜增厚,肾小管蛋白管型。图3D乌头碱低剂量组,显示肾脏组织结构正常。图3E乌头碱高剂量组,显示肾脏组织结构正常。
同时做了Masson和PAS染色,结果也表明乌头碱可以完全缓解狼疮小鼠的肾脏损伤。可以减少肾脏胶原纤维的沉积,降低蛋白的沉积水平。结果见图4和图5。
图4A为正常对照组,显示肾小球组织结构正常。图4B为模型对照组,显示肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾小球毛细血管基底膜增厚。图4C为醋酸泼尼松组,显示肾小球系膜基质增多,肾小球毛细血管基底膜增厚。图4D为乌头碱高剂量组,显示肾脏组织结构正常。图4E为乌头碱低剂量组,显示肾脏组织结构正常。
图5A为正常对照组,显示肾脏组织结构正常。图5B为模型对照组,显示肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾小球毛细血管基底膜增厚。图5C为醋酸泼尼松组,显示肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾小球毛细血管基底膜增厚。图5D为乌头碱高剂量组,显示肾脏组织结构正常。图5E为乌头碱低剂量组,显示肾小球组织结构正常
实施例4乌头碱对狼疮小鼠肾脏免疫球蛋白沉积的影响
试验材料:
抗鼠IgG抗体和HRP标记的羊抗兔二抗均购自Abcam公司
试验方法:
模型的建立以及实验分组及给药同实施例1。
肾脏免疫球蛋白沉积的检测:脱椎处死小鼠后,解剖。用10%的中性福尔马林将肾脏组织固定备用。送检组织经甲醛充分固定后,逐级乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,常规制备3μm石蜡切片。切片加入兔抗鼠IgG抗体(1:1000),37℃孵育2小时后,用PBS洗去多余抗体。再加入HRP标记的山羊抗兔IgG抗体(1:2000),37℃孵育1小时,用PBS洗去多余抗体。加入3,3-二氨基联苯胺(DAB,Abcam)显色液显色,封片。阴性对照以PBS替代抗鼠IgG抗体。肾脏免疫组织化学方法检测IgG免疫复合物的沉积。
试验结果:
如图6所示,给予乌头碱后,狼疮小鼠肾脏IgG沉积明显减少(肾小球及肾小管间质可见棕黄色沉积物),提示乌头碱可以减少免疫球蛋白沉积对肾脏造成的损伤,具有保护肾脏的作用。
图6A为正常对照组,未见阳性信号;图6B为模型对照组,肾小球及肾小管间质可见棕黄色沉积物;图6C为醋酸泼尼松组,肾小球及肾小管间质可见棕黄色沉积物;图6D为乌头碱低剂量组,个别动物肾小球及肾小管间质可见棕黄色沉积物;图6E为乌头碱高剂量组,个别动物肾小球及肾小管间质可见棕黄色沉积物。
实施例5乌头碱对炎症因子前列腺素E2(PGE2)的影响
试验材料:
小鼠PGE2检测试剂盒为泛柯(上海)生物科技有限公司产品
RPMI-1640培养基为Gibco公司产品
ConA为北京索莱宝生物技术有限公司产品
酶标仪RT-6000为Rayto公司制造
试验方法:
模型的建立以及实验分组及给药同实施例1。
PGE2的检测:脱椎处死小鼠后,无菌解剖得到脾脏,取脾脏(半个)在无菌条件下放在200目的小网上剪碎,加入1ml无菌RPMI无血清1640培养基,用玻璃棒将剪碎的脾脏研磨成单个细胞,再用1~2mlRPMI无血清1640培养基将皿洗净,将收集到的脾细胞液放入离心管中,以1500转/分钟离心5分钟,然后用红细胞裂解液将红细胞裂解,取10倍稀释液在Countstar细胞计数仪上计数,调整细胞至1×107/ml,铺板,每孔200μl,分为正常组,ConA刺激组,每组4复孔,正常组加入5μl无血清RPMI1640液,ConA组每孔加入ConA 5μl(终浓度5μg/ml),将板摇匀,放入37℃、5%CO2培养箱中培养68h,然后将板取出,收集上清,备用。
按照试剂盒说明书操作,具体方法如下:
1)每个标准品、待测上清和空白组做2个复孔。按说明书采用倍比稀释法用样品稀释液稀释标准品,待测上清5倍稀释。
2)加入稀释好后的标准品或待测上清50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加250ul洗涤液,用MM-1微量振荡器(江苏国宇仪器)振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。
5)每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)重复步骤4)。
7)每孔加入显色剂各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟,避光。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)采用酶标仪RT-6000(Rayto,USA)在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果实验数据采用SPSS13.0统计软件分析处理,用均数±标准差(Mean±SD)表示;采用单因素方差分析进行统计分析,组间两两比较,采用学生t检验。
试验结果:
各种免疫活性细胞参与系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病,病程中细胞因子网络失衡并产生大量的验证介质。前列腺素E2(PGE2)作为花生四烯酸的代谢产物,是相当重要的致炎因子。如图7所示,乌头碱可以降低典型炎症因子PGE2的表达,具有明显的抑制炎症作用。
实施例6乌头碱对血常规的影响
试验材料:
全自动血液分析仪SYSMEX-XS800i为日本Sysmex公司产品
试验方法:
模型的建立以及实验分组及给药同实施例1。
血常规检测:于解剖前眼眶采集血液0.2mL左右,EDTA-K2抗凝,血液分析仪检测血细胞分类。实验数据采用SPSS13.0统计软件分析处理,用均数±标准差(Mean±SD)表示;采用单因素方差分析进行统计分析,组间两两比较,采用学生t检验。
试验结果:
乌头碱对降植烷诱导狼疮小鼠血细胞的影响见表1。
与模型组比较,乌头碱组在白细胞数(WBC)、中性粒细胞(NEUT)、淋巴细胞(LYMPH)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)均显著降低。提示本发明乌头碱具有抑制免疫的作用。
下文将列出本发明组合物的构成方法和辅料的种类,但本发明不限于它们。代表性的制备实施例叙述如下。
注射剂的制备
乌头碱1000微克
偏亚硫酸氢钠3.0毫克
对羟基苯甲酸甲酯0.8毫克
对羟基苯甲酸丙酯0.1毫克
注射用蒸馏水适量
注射剂的制备如下:溶解活性组分,控制pH值至约7.5,然后将所有组分填充至2毫升安瓿中,并用常规的注射剂制备方法灭菌。
粉末剂的制备
乌头碱200微克
玉米淀粉100毫克
乳糖100毫克
滑石粉10毫克
粉末剂制备方法如下:将上述组分混合,装入密封包装中。
片剂的制备
乌头碱100微克
玉米淀粉100毫克
乳糖100毫克
硬脂酸镁适量
片剂是通过将上述组分混合和压片制得。
胶囊剂的制备
乌头碱50微克
乳糖50毫克
玉米淀粉50毫克
滑石粉2毫克
硬脂酸镁适量
胶囊剂制备是通过将上述组分混合装入按照常规的明胶制备方法制备的明胶胶囊中制得。
工业适用性
如在本发明中所描述的,本发明通过具体实验证明了乌头碱对于尿蛋白、ds-DNA、肾脏、炎症因子等的影响,并提示具有抑制免疫的作用,因此可以被开发为用于预防或治疗红斑狼疮的药物。
参考文献
1.Rahman,A.;Isenberg,D.A.N Engl J Med2008,358,929.
2.Liu,C.C.;Kao,A.H.;Manzi,S.;Ahearn,J.M.Ther AdvMusculoskelet Dis2013,5,210.
3.中华医学会风湿病学分会中华风湿病学杂志2010,14,342.
4.Ziqian,W.;Yanhong,W.;Rongrong,Z.;Xinping,T.;Dong,X.;Qian,W.;Chanyuan,W.;Shangzhu,Z.;Jiuliang,Z.;Yan,Z.Medicine2015,94.
5.邹红云中国优生与遗传杂志2010,144.
6.金小康;李卫东中国药理学通报2013,1342.
7.Perry,D.;Sang,A.;Yin,Y.;Zheng,Y.Y.;Morel,L.J BiomedBiotechnol2011,2011,271694.
8.Pawar,R.D.;Goilav,B.;Xia,Y.;Zhuang,H.;Herlitz,L.;Reeves,W.H.;Putterman,C.Clin Immunol2014,154,49.
9.Satoh,M.;Reeves,W.H.J Exp Med1994,180,2341.
10.李桉栋;张娟;王旻药物生物技术2012,364.
11.Hui-Yuen,J.S.;Li,X.Q.;Askanase,A.D.Ther AdvMusculoskelet Dis2015,7,115.
12.邵杰辽宁中医药大学学报2009,20.
13.Voss,L.J.;Voss,J.M.;McLeay,L.;Sleigh,J.W.Eur JPharmacol2008,584,291.
14.Wada,K.;Nihira,M.;Hayakawa,H.;Tomita,Y.;Hayashida,M.;Ohno,Y.Forensic Sci Int2005,148,21.
Claims (9)
1.乌头碱或其药学上可接受的盐在制备用于预防和/或治疗红斑狼疮的药物中的用途。
2.含有乌头碱或其药学上可接受的盐的药物组合物在制备用于预防和/或治疗红斑狼疮的药物中的用途。
3.根据权利要求1或2所述的用途,其中所述红斑狼疮选自盘状红斑狼疮、亚急性皮肤型红斑狼疮、深在性红斑狼疮、新生儿红斑狼疮、药物性红斑狼疮、系统性红斑狼疮,优选药物性红斑狼疮或系统性红斑狼疮,更优选系统性红斑狼疮。
4.根据权利要求2或3所述的用途,其特征在于,所述药物组合物进一步含有一种或多种药学上可接受的载体,例如稀释剂、粘合剂、吸收剂、崩解剂、分散剂、湿润剂、助溶剂、缓冲剂、或表面活性剂。
5.根据权利要求2至4任一项所述的用途,其特征在于,通过口服、舌下、口腔粘膜、静脉内、肌肉内、腹腔内、皮下、经皮、鼻腔、直肠途径施用所述药物组合物,优选通过口服、静脉内施用。
6.根据权利要求2至5任一项所述的用途,其特征在于,所述药物组合物为固体、液体或气体形式,其中所述固体形式优选粉末剂、片剂、颗粒剂、丸剂、硬胶囊或软胶囊、乳膏剂、软膏剂、硬膏剂、凝胶剂、糊剂、散剂或贴剂;所述液体形式优选溶液剂、混悬剂、注射剂、糖浆剂、搽剂、乳剂、酊剂或酏剂;所述气体形式优选气雾剂、喷雾剂。
7.一种用于预防和/或治疗红斑狼疮的药物组合物,其含有乌头碱作为活性成分以及一种或多种药学上可接受的载体。
8.根据权利要求7所述的药物组合物,其中所述的载体包括稀释剂、粘合剂、吸收剂、崩解剂、分散剂、湿润剂、助溶剂、缓冲剂、和表面活性剂中的一种或多种。
9.根据权利要求7或8所述的药物组合物,其为固体、液体或气体形式,其中所述固体形式优选粉末剂、片剂、颗粒剂、丸剂、硬胶囊或软胶囊、乳膏剂、软膏剂、硬膏剂、凝胶剂、糊剂、散剂或贴剂;所述液体形式优选溶液剂、混悬剂、注射剂、糖浆剂、搽剂、乳剂、酊剂或酏剂;所述气体形式优选气雾剂、喷雾剂。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610340107.XA CN105853417B (zh) | 2016-05-20 | 2016-05-20 | 乌头碱在治疗红斑狼疮中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610340107.XA CN105853417B (zh) | 2016-05-20 | 2016-05-20 | 乌头碱在治疗红斑狼疮中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105853417A true CN105853417A (zh) | 2016-08-17 |
CN105853417B CN105853417B (zh) | 2018-08-21 |
Family
ID=56635541
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610340107.XA Expired - Fee Related CN105853417B (zh) | 2016-05-20 | 2016-05-20 | 乌头碱在治疗红斑狼疮中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105853417B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112603954A (zh) * | 2020-12-29 | 2021-04-06 | 禾门生物(广东)有限公司 | 一种清热凉血消痞丸及制备方法 |
CN112931398A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-06-11 | 中国医科大学附属第一医院 | 一种狼疮脑病动物模型的构建方法及其应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012162732A1 (en) * | 2011-06-02 | 2012-12-06 | The University Of Queensland | Assays for sodium ion channel modulators and uses thereof |
CN104873527A (zh) * | 2015-05-19 | 2015-09-02 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种用于治疗心血管疾病的天然药物组合物 |
-
2016
- 2016-05-20 CN CN201610340107.XA patent/CN105853417B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012162732A1 (en) * | 2011-06-02 | 2012-12-06 | The University Of Queensland | Assays for sodium ion channel modulators and uses thereof |
CN104873527A (zh) * | 2015-05-19 | 2015-09-02 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种用于治疗心血管疾病的天然药物组合物 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
冯玉环等: "中药的抗炎免疫抑制作用", 《实用医学杂志》 * |
缪建春等: "天然药物抗类风湿关节炎作用的研究进展", 《医药导报》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112603954A (zh) * | 2020-12-29 | 2021-04-06 | 禾门生物(广东)有限公司 | 一种清热凉血消痞丸及制备方法 |
CN112931398A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-06-11 | 中国医科大学附属第一医院 | 一种狼疮脑病动物模型的构建方法及其应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN105853417B (zh) | 2018-08-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Lin et al. | Inhibitory effects of the root extract of Litsea cubeba (lour.) pers. on adjuvant arthritis in rats | |
Yu et al. | Effect of Aloe vera polysaccharides on immunity and antioxidant activities in oral ulcer animal models | |
Chen et al. | Glycyrrhizin ameliorates experimental colitis through attenuating interleukin-17-producing T cell responses via regulating antigen-presenting cells | |
JPH06172183A (ja) | 医薬組成物 | |
Shi et al. | Gegen qinlian decoction downregulates the TLR7 signalling pathway to control influenza A virus infection | |
Shou et al. | Total glucosides of peony improve ovalbumin-induced allergic asthma by inhibiting mast cell degranulation | |
Yan et al. | Soufeng Yuchuan decoction mitigates the ovalbumin-induced lung damage in a rat model of asthma | |
Guo et al. | Electroacupuncture at He-Mu points reduces P2X4 receptor expression in visceral hypersensitivity | |
Cai et al. | Salidroside suppresses group 2 innate lymphoid cell-mediated allergic airway inflammation by targeting IL-33/ST2 axis | |
CN108888713A (zh) | 金钗石斛总碱在制备动脉粥样硬化药物中的应用 | |
Ravikumar et al. | Immunomodulatory effect of Quercetin on dysregulated Th1/Th2 cytokine balance in mice with both type 1 diabetes and allergic asthma | |
Qiao et al. | Effects of icariin on asthma mouse model are associated with regulation of prostaglandin D2 level | |
Ma et al. | Vitamin D has an effect on airway inflammation and Th17/Treg balance in asthmatic mice | |
CN105853417A (zh) | 乌头碱在治疗红斑狼疮中的应用 | |
TWI619507B (zh) | 治療或預防過敏性疾病的有效成分 | |
KR20030007243A (ko) | 의이인, 상백피, 어성초, 길경, 생지황, 금은화, 삼백초, 생강, 진피, 적작을 주성분으로 함유하는 의약 조성물 | |
He et al. | Amygdalin ameliorates alopecia areata on C3H/HeJ mice by inhibiting inflammation through JAK2/STAT3 pathway | |
Zhang et al. | Daphnetin contributes to allergen-induced Th2 cytokine expression and type 2-immune responses in atopic dermatitis and asthma | |
CN103517709B (zh) | 治疗自身免疫失调的组合物及其制备方法 | |
TWI333857B (en) | Intranasal pharmaceutical composition for treating non-viral induced airway inflammation or allergic diseases and uses thereof | |
Yang et al. | Herbal Formula-3 inhibits food allergy in rats by stabilizing mast cells through modulating calcium mobilization | |
Gao et al. | Guishaozichuan granules can attenuate asthma in rats via the MUC5AC/EGFR signaling pathway | |
Shan et al. | Jiangqi Pingxiao formula regulates dendritic cell apoptosis in an autophagy-dependent manner through the AMPK/mTOR pathway in a murine model of OVA-induced asthma | |
Hu et al. | 7′-(3′, 4′-dihydroxyphenyl)-N-[(4-methoxyphenyl) ethyl] propenamide (Z23), an effective compound from the Chinese herb medicine Fissistigma oldhamii (Hemsl.) Merr, suppresses T cell-mediated immunity in vitro and in vivo | |
Zhou et al. | Liangxue Tongyu prescription alleviates brain damage in acute intracerebral hemorrhage rats by regulating intestinal mucosal barrier function |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20180821 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |