CN105816511B - 猴耳环提取物在制备抗多重耐药鲍曼不动杆菌药物中的应用 - Google Patents

猴耳环提取物在制备抗多重耐药鲍曼不动杆菌药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了猴耳环提取物在制备抗耐药鲍曼不动杆菌及抗生素抗多重耐药鲍曼不动杆菌增敏药物中的应用。所述的猴耳环提取物由以下方法制备：猴耳环粗粉用水或乙醇水溶液提取，所得的提取液再用乙酸乙酯萃取，所得的萃取物即为目标产品。本专利首次公开了猴耳环提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用及对该类抗生素的增敏作用。经试验证明，猴耳环提取物与亚胺培南或四环素或多粘菌素B或头孢他啶或左氧氟沙星联用可呈协同作用，可较单用减少抗生素用量50％到87％。可作为天然的抗多重耐药鲍曼不动杆菌药物或抗生素增敏剂，应用于由鲍曼不动杆菌引起的疾病治疗。本发明为解决该类抗生素的耐药性问题提供了新的途径和替代药物。

Description

猴耳环提取物在制备抗多重耐药鲍曼不动杆菌药物中的应用
技术领域
本发明涉及猴耳环提取物的新用途，具体是其在制备抗多重耐药菌药物中的应用。
背景技术
21世纪是多重耐药菌的时代，抗生素临床应用60年后，越来越多的院内感染和多重耐药菌感染成为目前临床抗菌治疗的一大难题，1961年Jerons报告第1例临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染患者，目前MRSA感染已逐渐遍及全球；2011年中国细菌耐药性监测临床中主要耐药菌的分布，大肠杆菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)株分别平均为50.7％、38.5％，其耐药性的变迁和现状备受关注。另外据我国卫生部耐药监测协作组2010年度报告，鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌在医院ICU分离的病原菌中居首位，鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别高达60.4％和61.4％。综上所述，在MRSA、产ESBL的各类细菌、多重耐药的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的临床占有率逐年攀升，耐药率不断攀高的压力下，抗生素治疗面临着巨大的挑战。为避免细菌耐药现象的进一步恶化，专家学者力图发现新的抑制细菌生长以及治疗细菌引起疾病的新方法。已有研究报道证明中国传统中药如黄连、黄芩和连翘等对不同耐药细菌有一定的抑制效果，进一步研究中药抑制耐药菌生长的重点在于发现新的抑菌能力更强、耐药抑菌谱更广的中药。
猴耳环(Pithecellobium clypearia Benth)，学名围涎树，是含羞草科猴耳环属植物猴耳环的干燥幼枝和叶，其性味苦涩寒，功效清热解毒、收湿敛疮，是治疗多种热毒症候独特的南方药材。
目前有文献公开猴耳环以及其提取物具有抗病毒作用。中国专利CN103385912A公开了猴耳环的提取物具有抗MRSA作用及抗生素增敏作用，但该专利未提及该猴耳环提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用及与抗生素联用的增敏作用。
发明内容
本发明公开了猴耳环提取物在制备抗耐药鲍曼不动杆菌药物的应用。
并进一步公开了其在制备抗生素抗多重耐药鲍曼不动杆菌增敏药物中的应用。
所述的抗生素涉及亚胺培南或四环素或多粘菌素B或头孢他啶或左氧氟沙星。
所述的猴耳环提取物是猴耳环水提取物或猴耳环乙醇提取物。
所述的猴耳环水提取物水或猴耳环乙醇提取物由以下方法制备：猴耳环粗粉用水或乙醇水溶液提取，所得的提取液再用乙酸乙酯萃取，所得的萃取物即为目标产品。
所述的乙醇水溶液是按体积比计浓度为10％-95％的乙醇水溶液。
所述的乙醇水溶液优选是按体积比计浓度为60％的乙醇水溶液。
本发明的有益效果：本专利首次公开了猴耳环提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用及对该类抗生素的增敏作用。经试验证明，猴耳环提取物与亚胺培南或四环素或多粘菌素B或头孢他啶或左氧氟沙星联用可呈协同作用，可较单用减少抗生素用量50％到87％。可作为天然的抗多重耐药鲍曼不动杆菌药物或抗生素增敏剂，应用于由鲍曼不动杆菌引起的疾病治疗。本发明为解决该类抗生素的耐药性问题提供了新的途径和替代药物。适用于人用药物和其他动物用药物。
具体实施方式
本发明通过下述实施方案对猴耳环水或乙醇提取物的抗多重耐药鲍曼不动杆菌的药理作用进行筛选。
以微量肉汤稀释法测定猴耳环水或乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。
菌株：多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB，编号A1-A20)20株；铜绿假单胞菌质控菌株(PAE，ATCC27853)均由中山大学附属第一医院检验医学部临床微生物检验室提供，经中山大学附属第一医院临床微生物检验室检测确认其耐药性。
MH肉汤培养基：MH肉汤干粉(英国OXOID LTD.)2.1g，定容至100ml，NAOH调节pH至7.0，高压灭菌，置4℃冰箱备用。
方法：参照美国国立临床试验标准化委员会(NCCLS)推荐的微量肉汤稀释法操作。
本发明通过下述方法对猴耳环水或乙醇提取物对亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星抗多重耐药鲍曼不动杆菌的增敏作用进行考察。
菌株：多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB，编号A1-A20)20株；铜绿假单胞菌质控菌株(PAE，ATCC27853)均由中山大学附属第一医院检验医学部临床微生物检验室提供，经中山大学附属第一医院临床微生物检验室检测确认其耐药性。
MH肉汤培养基：MH肉汤干粉(英国OXOID LTD.)2.1g，定容至100ml，NAOH调节pH至7.0，高压灭菌，置4℃冰箱备用。
方法：参照美国国立临床试验标准化委员会(NCCLS)推荐的棋盘稀释法操以下通过具体的实施例进一步说明本发明的技术方案。
实施例1
猴耳环提取物的制备方法
猴耳环(Pithecellobium clypearia Benth)由广州市花城制药厂提供。取适量猴耳环药材打成粗粉，用水或乙醇回流2次，每次2小时，过滤；合并滤液，浓缩得浸膏(水或乙醇提取物)。取浸膏用水混悬后，用乙酸乙酯萃取，萃取三次，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩得乙酸乙酯萃取物。所述的乙醇提取物可由10-95％乙醇回流制得。
实施例2
猴耳环水提取物抗多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌杀菌试验及分别与亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星联合的增敏药效考察。
1.实验方法
1)最低抑菌浓度(MIC)的测定：
猴耳环水提取物、亚胺培南(IMP)、四环素(TE)、多粘菌素B(POLB)、头孢他啶(CAZ)、左氧氟沙星(LVX)分别在MH肉汤培养基中进行一系列倍比稀释，每孔50μl，调节接种菌为1.0×106CFU/ml，每孔加入50μl菌液。35℃培养；24小时，无沉淀出现的最低抗菌药物的浓度为其最低抑菌浓度(MIC)。
2)最低杀菌浓度(MBC)的测定：
采用平板涂布计数法，从1)项无菌生长的孔中吸取50ul菌悬液至血平板上，均匀涂布，35℃培养24小时，菌落计数，使最初的实验活菌数减少99.9％或以上所需要的最低抗菌药物的浓度为其最低杀菌浓度(MBC)。
通过测定药物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)，并对数据进行统计得出MIC50、MIC90、MBC50、MBC90，来评价药物抗多重耐药鲍曼不动杆菌的作用。
3)棋盘稀释法：
棋盘稀释法在96孔无菌培养板中进行，将猴耳环水提取物及亚胺培南(IMP)、四环素(TE)、多粘菌素B(POLB)、头孢他啶(CAZ)分别在MH肉汤培养基中倍比稀释成系列浓度，以两药各自1/4MIC到4MIC分别进行联合，每孔A药B药各加25μL，调整菌悬液的浓度为1.0×106CFU/ml，每孔接种50μL菌液，35℃孵育24h后观察A药B药联合后对多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC)。
通过计算部分抑菌指数(FIC)来评价猴耳环水提取物与抗生素联合抗菌的相互作用，FIC≤0.5为协同作用，0.5﹤FIC≤1为相加作用，1﹤FIC≤2为无关作用，FIC﹥2为拮抗作用；并根据无菌生长孔找出猴耳环水提取物和抗生素的最佳浓度配比，最终评价猴耳环水提取物增强抗生素效力的作用。
2.实验结果
猴耳环水提取物及五种抗生素(亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星)对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验结果见表1。
猴耳环水提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外杀菌试验结果见表2。
经过统计分析，猴耳环水提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌和杀菌的MIC50、MIC90见表3。
经过统计分析，猴耳环水提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀菌的MBC50、MBC90见表4。
猴耳环水提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值及FIC值的分布统计结果见表5、表6。
猴耳环水提取物对五种抗生素的增敏作用及联用后其MIC50、MIC90见表7-表12。
表1猴耳环水提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验结果
表2猴耳环水提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外杀菌试验结果
表3猴耳环水提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌的MIC50、MIC90统计结果
表4猴耳环水提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀菌的MBC50、MBC90
表5猴耳环水提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值
表6猴耳环水提取物与五种抗生素的联合药敏试验FIC值的分布统计
表7猴耳环水提取物对亚胺培南的增敏作用及联用后的MIC
表8猴耳环水提取物对四环素的增敏作用及联用后的MIC
表9猴耳环水提取物对多粘菌素B的增敏作用及联用后的MIC
表10猴耳环水提取物对头孢他啶的增敏作用及联用后的MIC
表11猴耳环水提取物对左氧氟沙星的增敏作用及联用后的MIC
表12联用后五种抗生素的MIC50、MIC90
猴耳环水提取物单用对多重耐药鲍曼不动杆菌的MIC50＝600μg/ml，MI C90＝600μg/ml，MBC50＝1200μg/ml，MBC90＝1200μg/ml；
猴耳环水提取物与亚胺培南联用的FIC均≤1表明两药呈协同作用或部分协同作用，其中有35％FIC值≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环水提取物在浓度≤单用MIC时，使亚胺培南MIC50从单用的32μg/ml降至8μg/ml，降低了75％；MIC90从32μg/ml降至16μg/ml，降低50％；
猴耳环水提取物与四环素联用对20株多重耐药鲍曼不动杆菌FIC均≤1表明两药呈协同作用或部分协同作用，其中35％FIC值≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环水提取物在≤单用MIC时，使四环素MIC50单用256μg/ml降至64μg/ml，降低了75％；MIC90从512μg/ml降至128μg/ml，降低75％；
对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环水提取物与多粘菌素B联用FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中25％FIC≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环水提取物在≤单用MIC时，使多粘菌素BMIC50单用4μg/ml降至1μg/ml，降低了75％，MIC90从16μg/ml降至4μg/ml，降低了75％；
猴耳环水提取物与头孢他啶联用后对20株多重耐药鲍曼不动杆菌FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中20％FIC≤0.5呈协同作用；猴耳环水提取物可在≤单用MIC时，使头孢他啶MIC50从512μg/ml降至128μg/ml，下降了75％；MIC90从512μg/ml降至256μg/ml，下降了50％；
猴耳环水提取物与左氧氟沙星联用抗20株多重耐药鲍曼不动杆菌试验FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中有35％FIC值≤0.5表明两药有一定程度的协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环水提取物在≤单用MIC时，使左氧氟沙星MIC50单用8μg/ml降至2μg/ml，降低了75％，MIC90从32μg/ml降至8μg/ml，降低了75％。
实施例3
猴耳环10％乙醇提取物的抗多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌杀菌试验及分别与亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星联合的增敏药效考察。
按实施例2项下的实验方法，测定猴耳环10％乙醇提取物的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)、与亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶和左氧氟沙星联合用药的最低抑菌浓度(MIC)，并评价联合用药作用。
2.实验结果
猴耳环10％乙醇提取物及五种抗生素(亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星)对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验结果见表13。
猴耳环10％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外杀菌试验结果见表14。
经过统计分析，猴耳环10％乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌和杀菌的MIC50、MIC90见表15。
经过统计分析，猴耳环提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀菌的MBC50、MBC90见表16。
猴耳环10％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值及FIC值的分布统计结果见表17、表18。
猴耳环10％乙醇提取物对五种抗生素的增敏作用及联用后其MIC50、MIC90见表19-表24。
表13猴耳环10％乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验结果
表14猴耳环10％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外杀菌试验结果
表15猴耳环10％乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌的MIC50、MIC90
统计结果
表16猴耳环10％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀菌的MBC50、MBC90
表17猴耳环10％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值
表18猴耳环10％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验FIC值的分布统计
表19猴耳环10％乙醇提取物对亚胺培南的增敏作用及联用后的MIC
表20猴耳环10％乙醇提取物对四环素的增敏作用及联用后的MIC
表21猴耳环10％乙醇提取物对多粘菌素B的增敏作用及联用后的MIC
表22猴耳环10％乙醇提取物对头孢他啶的增敏作用及联用后的MIC
表23猴耳环10％乙醇提取物对左氧氟沙星的增敏作用及联用后的MIC
表24联用后五种抗生素的MIC50、MIC90
猴耳环10％乙醇提取物单用对多重耐药鲍曼不动杆菌的MIC50＝600μg/ml，MIC90＝600μg/ml，MBC50＝1200μg/ml，MBC90＝1200μg/ml；
猴耳环10％乙醇提取物与亚胺培南联用的FIC均≤1表明两药呈协同作用或部分协同作用，其中有45％FIC值≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环10％乙醇提取物在浓度≤1/2单用MIC时，使亚胺培南MIC50从单用的32μg/ml降至8μg/ml，降低了75％；MIC90从32μg/ml降至16μg/ml，降低50％；
猴耳环10％乙醇提取物与四环素联用对20株多重耐药鲍曼不动杆菌FIC均≤1表明两药呈协同作用或部分协同作用，其中45％FIC值≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环10％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物在小于等于1/2单用MIC时，使四环素MIC50单用256μg/ml降至64μg/ml，降低了75％；MIC90从512μg/ml降至256μg/ml，降低50％；
对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环10％乙醇提取物与多粘菌素B联用FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中15％FIC≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环10％乙醇提取物在小于等于单用MIC时，使多粘菌素BMIC50单用4μg/ml降至1μg/ml，降低了75％，MIC90从16μg/ml降至4μg/ml，降低了75％；
猴耳环10％乙醇提取物与头孢他啶联用后对20株多重耐药鲍曼不动杆菌FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中30％FIC≤0.5呈协同作用；猴耳环10％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物可在≤1/2单用MIC时，使头孢他啶MIC50从512μg/ml降至128μg/ml，下降了75％；MIC90从512μg/ml降至256μg/ml，下降了50％；
猴耳环10％乙醇提取物与左氧氟沙星联用抗20株多重耐药鲍曼不动杆菌试验FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中有20％FIC值≤0.5表明两药有一定程度的协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环10％乙醇提取物在小于等于单用MIC时，使左氧氟沙星MIC50单用8μg/ml降至4μg/ml，降低了50％，MIC90从32μg/ml降至8μg/ml，降低了75％。
实施例4
猴耳环60％乙醇提取物抗多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌杀菌试验及分别与亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星联合的增敏药效考察。
按实施例2项下的实验方法，测定猴耳环60％乙醇提取物的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)、与亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶和左氧氟沙星联合用药的最低抑菌浓度(MIC)，并评价联合用药作用。
2.实验结果
猴耳环60％乙醇提取物及五种抗生素(亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星)对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验结果见表25。
猴耳环60％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外杀菌试验结果见表26。
经过统计分析，猴耳环60％乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌和杀菌的MIC50、MIC90见表27。
经过统计分析，猴耳环提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀菌的MBC50、MBC90见表28。
猴耳环60％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值及FIC值的分布统计结果见表29、表30。
猴耳环60％乙醇提取物对五种抗生素的增敏作用及联用后其MIC50、MIC90见表31-表36。
表25猴耳环60％乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验结果
表26猴耳环60％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外杀菌试验结果
表27猴耳环60％乙醇提取物及抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抑菌MIC50、MIC90统计结果
表28猴耳环60％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀菌的MBC50、MBC90
表29猴耳环60％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值
表30猴耳环60％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验FIC值的分布统计
表31猴耳环60％乙醇提取物对亚胺培南的增敏作用及联用后的MIC
表32猴耳环60％乙醇提取物对四环素的增敏作用及联用后的MIC
表33猴耳环60％乙醇提取物对多粘菌素B的增敏作用及联用后的MIC
表34猴耳环60％乙醇提取物对头孢他啶的增敏作用及联用后的MIC
表35猴耳环60％乙醇提取物对左氧氟沙星的增敏作用及联用后的MIC
表36联用后五种抗生素的MIC50、MIC90
猴耳环60％乙醇提取物单用对多重耐药鲍曼不动杆菌的MIC50＝300μg/ml，MIC90＝600μg/ml，MBC50＝600μg/ml，MBC90＝1200μg/ml；
猴耳环60％乙醇提取物与亚胺培南联用的FIC均≤1表明两药呈协同作用或部分协同作用，其中有70％FIC值≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环60％乙醇提取物在浓度≤1/2单用MIC时，使亚胺培南MIC50从单用的32μg/ml降至8μg/ml，降低了75％；MIC90从32μg/ml降至16μg/ml，降低50％；
猴耳环60％乙醇提取物与四环素联用对20株多重耐药鲍曼不动杆菌FIC均≤1表明两药呈协同作用或部分协同作用，其中50％FIC值≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环60％乙醇提取物在小于等于1/2单用MIC时，使四环素MIC50单用256μg/ml降至32μg/ml，降低了87.5％；MIC90从512μg/ml降至128μg/ml，降低75％；
对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环60％乙醇提取物与多粘菌素B联用FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中15％FIC≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环60％乙醇提取物在小于等于单用MIC时，使多粘菌素BMIC50单用4μg/ml降至0.5μg/ml，降低了87.5％，MIC90从16μg/ml降至4μg/ml，降低了75％；
猴耳环60％乙醇提取物与头孢他啶联用后对20株多重耐药鲍曼不动杆菌FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中10％FIC≤0.5呈协同作用；猴耳环60％乙醇提取物可在≤1/2单用MIC时，使头孢他啶MIC50从512μg/ml降至128μg/ml，下降了75％；MIC90从512μg/ml降至256μg/ml，下降了50％；
猴耳环60％乙醇提取物与左氧氟沙星联用抗20株多重耐药鲍曼不动杆菌试验FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中有5％FIC值≤0.5表明两药有一定程度的协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环60％乙醇提取物在小于等于单用MIC时，使左氧氟沙星MIC50单用8μg/ml降至4μg/ml，降低了50％，MIC90从32μg/ml降至8μg/ml，降低了75％。
实施例5
猴耳环95％乙醇提取物抗多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌杀菌试验及分别与亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星联合的增敏药效考察。
1、按实施例2项下的实验方法，测定猴耳环95％乙醇提取物的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)、与亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶和左氧氟沙星联合用药的最低抑菌浓度(MIC)，并评价联合用药作用。
2.实验结果
猴耳环95％乙醇提取物及五种抗生素(亚胺培南、四环素、多粘菌素B、头孢他啶、左氧氟沙星)对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验结果见表37。
猴耳环95％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外杀菌试验结果见表38。
经过统计分析，猴耳环95％乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌和杀菌的MIC50、MIC90见表39。
经过统计分析，猴耳环提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀菌的MBC50、MBC90见表40。
猴耳环95％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值及FIC值的分布统计结果见表41、表42。
猴耳环95％乙醇提取物对五种抗生素的增敏作用及联用后其MIC50、MIC90见表43-表48。
表37猴耳环95％乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌试验结果
表38猴耳环95％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外杀菌试验结果
表39猴耳环95％乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌的MIC50、MIC90统计结果
表40猴耳环95％乙醇提取物对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀菌的MBC50、MBC90
表41猴耳环95％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值
表42猴耳环95％乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验FIC值的分布统计
表43猴耳环95％乙醇提取物对亚胺培南的增敏作用及联用后的MIC
表44猴耳环95％乙醇提取物对四环素的增敏作用及联用后的MIC
表45猴耳环95％乙醇提取物对多粘菌素B的增敏作用及联用后的MIC
表46猴耳环95％乙醇提取物对头孢他啶的增敏作用及联用后的MIC
表47猴耳环95％乙醇提取物对左氧氟沙星的增敏作用及联用后的MIC
表48联用后五种抗生素的MIC50、MIC90
猴耳环95％乙醇提取物单用对多重耐药鲍曼不动杆菌的MIC50＝600μg/ml，MIC90＝600μg/ml，MBC50＝1200μg/ml，MBC90＝1200μg/ml；
猴耳环95％乙醇提取物与亚胺培南联用的FIC均≤1表明两药呈协同作用或部分协同作用，其中有55％FIC值≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环95％乙醇提取物在浓度≤单用MIC时，使亚胺培南MIC50从单用的32μg/ml降至8μg/ml，降低了75％；MIC90从32μg/ml降至16μg/ml，降低50％；
猴耳环95％乙醇提取物与四环素联用对20株多重耐药鲍曼不动杆菌FIC均≤1表明两药呈协同作用或部分协同作用，其中30％FIC值≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环95％乙醇提取物在≤单用MIC时，使四环素MIC50单用256μg/ml降至32μg/ml，降低了87.5％；MIC90从512μg/ml降至128μg/ml，降低75％；
对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环95％乙醇提取物与多粘菌素B联用FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中20％FIC≤0.5呈协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环95％乙醇提取物在≤单用MIC时，使多粘菌素BMIC50单用4μg/ml降至1μg/ml，降低了75％，MIC90从16μg/ml降至4μg/ml，降低了75％；
猴耳环95％乙醇提取物与头孢他啶联用后对20株多重耐药鲍曼不动杆菌FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中10％FIC≤0.5呈协同作用；猴耳环95％乙醇提取物可在≤单用MIC时，使头孢他啶MIC50从512μg/ml降至128μg/ml，下降了75％；MIC90从512μg/ml降至256μg/ml，下降了50％；
猴耳环95％乙醇提取物与左氧氟沙星联用抗20株多重耐药鲍曼不动杆菌试验FIC均≤2表明两药没有拮抗作用，其中有20％FIC值≤0.5表明两药有一定程度的协同作用；对20株多重耐药鲍曼不动杆菌，猴耳环95％乙醇提取物在小于等于单用MIC时，使左氧氟沙星MIC50单用8μg/ml降至4μg/ml，降低了50％，MIC90从32μg/ml降至8μg/ml，降低了75％。

Claims (4)

1.猴耳环提取物在制备抗生素抗多重耐药鲍曼不动杆菌增敏药物中的应用，所述的抗生素是亚胺培南或四环素或多粘菌素B或头孢他啶或左氧氟沙星。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的猴耳环提取物由以下方法制备：猴耳环粗粉用水或乙醇水溶液提取，所得的提取液再用乙酸乙酯萃取，所得的萃取物即为目标产品。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的乙醇水溶液是按体积比计浓度为10％-95％的乙醇水溶液。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的乙醇水溶液是按体积比计浓度为60％的乙醇水溶液。
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