CN105746518A - 一种应用杀菌剂提高除草剂对杂草防效的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种应用杀菌剂提高除草剂对杂草防效的方法，其步骤为，先用杀菌剂杀灭杂草内对除草剂有降解能力的内生菌，再施用或同时施用所述除草剂防治杂草。本发明所述的方法，通过准确地确定抗性内生菌，进一步选择适宜的广谱内吸性杀菌剂，在适当的时机施用可有效地杀灭杂草内生菌，提高杂草对除草剂的敏感性，减少除草剂的使用量，既可降低除草剂的使用成本，还可减少除草剂对环境的污染。

Description

一种应用杀菌剂提高除草剂对杂草防效的方法
技术领域
本发明涉及植物保护领域，具体涉及一种防治农田杂草的方法。
背景技术
随着除草剂的广泛使用，杂草抗(耐)药性日益严重。杂草对除草剂的抗(耐)性通常认为由除草剂作用靶标对除草剂的敏感性降低和杂草对除草剂的解毒代谢能力增强引起，对抗(性)杂草的防治通常只能轮换除草剂或加大除草剂用量。然而，现在越来越多的证据表明，植物内生菌是植物微生态系统的重要组成部分,在长期的协同进化过程中,与植物形成了互惠互利的关系，内生菌能促进植物生长，可以促进其他类型的非生物和生物胁迫。目前没有通过破坏杂草内生菌来提高除草剂对杂草防治的方法。
发明内容
(一)要解决的技术问题
针对现有技术中存在的杂草抗药性强，无法对其进行有效地防治的缺陷，本发明提出一种先应用杀菌剂杀灭植物内生菌再施用除草剂或同时施用杀菌剂和除草剂的除草方法。
(二)技术方案
本发明所述的方法，包括如下步骤：先用杀菌剂杀灭杂草内对除草剂有抗性的内生菌，再施用所述除草剂或同时施用杀菌剂和除草剂防治杂草。
本发明中，确定对除草剂有降解特性的内生菌，具体步骤为：
A、将经过表面消毒的杂草进行破碎，得汁液；
B、将所述汁液置于平板培养基上进行培养，至得到多个单菌落；
C、将所述多个单菌落分别接种于以除草剂为营养物质的平板培养基中，得到可稳定生长的菌株；
D、将所述可稳定生长的菌株接种于仅含除草剂的无机盐液体培养基中，计算所述可稳定生长的菌株对除草剂的利用率，确定对除草剂有抗性的内生菌。
本发明中，所述杀菌剂选择广谱内吸性杀菌剂，如春雷霉素、链霉素、多菌灵、嘧菌酯等。
本发明中，所述杀菌剂的施用时机为杂草生长的幼苗期，一般为1～4叶期，在这个时期，杂草内的内生菌也处于生长初期，施用较少的杀菌剂即可达到较明显的效果。
本发明中，所述除草剂的施用时机为杀菌剂施用后0～8天，杂草内的内生菌被破坏后，杂草对除草剂变得更加敏感，在施用杀菌剂后的0～8天，杂草依然处理较敏感的状态，这时施用除草剂可达到更好的效果。
本发明中，所述杀菌剂的施用量为田间推荐剂量的1/20-2倍，所述除草剂的施用剂量为田间推荐剂量的1/10-2倍。
本发明中，所述除草剂根据杂草种类选用登记的除草剂。
优选的，本发明提供利用精喹禾灵防治棒头草的具体操作方法，在棒头草生长到2～3叶时，施用春雷霉素或井冈霉素，之后0～6天，施用精喹禾灵，所述春雷霉素的用量为3.2-128ga.i./ha，井冈霉素的用量为2-80ga.i./ha，精喹禾灵的用量为6.5～194.5ga.i./ha。
进一步优选，本发明提供利用精喹禾灵防治棒头草的具体操作方法，在棒头草生长到2～3叶时，施用春雷霉素或井冈霉素，之后0～6天，施用精喹禾灵，所述春雷霉素的用量为55～75ga.i./ha，井冈毒素的用量为30～50ga.i./ha，精喹禾灵的用量为24.3～97.2ga.i./ha。
更进一步优选的，本发明提供利用精喹禾灵防治棒头草的具体操作方法，在棒头草生长到2～3叶时，施用春雷霉素或井冈霉素，之后2～5天，施用精喹禾灵，所述春雷霉素的用量为62～66ga.i./ha，所述井冈霉素的用量为38～42ga.i./ha，精喹禾灵的用量为24.3～48.6ga.i./ha。
最优的，本发明提供利用精喹禾灵防治棒头草的具体操作方法，在棒头草生长到2～3叶时，施用春雷霉素或井冈霉素，之后2～5天，施用精喹禾灵，所述春雷霉素的用量为64ga.i./ha，所述井冈霉素的用量为40ga.i./ha，精喹禾灵的用量为48.6ga.i./ha。
优选的，本发明提供五氟磺草胺防治稗草的具体操作方法，在稗草生长1-2叶期，施用春雷霉素和嘧菌酯的混合物，之后0～6天，施用五氟磺草胺，所述春雷霉素的用量为3.2-128ga.i./ha，嘧菌酯的用量为6.4-128ga.i./ha，五氟磺草胺的用量为1.6-32ga.i./ha。
进一步优选，本发明提供五氟磺草胺防治稗草的具体操作方法，在稗草生长1-2叶期，施用春雷霉素和嘧菌酯的混合物，0-6天后施用五氟磺草胺，所述春雷霉素的用量为55～75ga.i./ha，嘧菌酯的用量为120～135ga.i./ha五氟磺草胺的用量为12～20ga.i./ha。
更进一步优选，本发明提供五氟磺草胺防治稗草的具体操作方法，在稗草生长1-2叶期，施用春雷霉素和嘧菌酯的混合物，2-5天后施用五氟磺草胺，所述春雷霉素的用量为62～66ga.i./ha，嘧菌酯的用量为126～130ga.i./ha，五氟磺草胺的用量为14～18ga.i./ha。
最优的，本发明提供五氟磺草胺防治稗草的具体操作方法，在稗草生长1-2叶期，施用春雷霉素和嘧菌酯的混合物，2-5天后施用五氟磺草胺，所述春雷霉素的浓度为64ga.i./ha，嘧菌酯的用量为128ga.i./ha，五氟磺草胺的用量为16ga.i./ha。
(三)有益效果
本发明所述的方法，具有如下有益效果：
1)确定杂草的内生菌的种类，为选择适宜的杀菌剂提供指导；
2)选择广谱内吸性杀菌剂，可实现对杂草中的内生菌有效地防治，提高杂草对除草剂的敏感性。
3)选择合适合的杀菌剂施用时机和除草剂施用时机，可有效地提高杂草对除草剂的敏感性，有效地防治杂草。
总之，本发明所述的方法，通过准确地确定抗性内生菌，进一步选择适宜的广谱内吸性杀菌剂，在适当的时机施用，可有效地杀灭杂草内的抗性内生菌，提高杂草对除草剂的敏感性，减少除草剂的使用量，既可降低除草剂的使用成本，还可减少对环境的污染。
具体实施方式
本发明所述的除草方法，可适用于任何种类的杂草，以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
本实施例涉及一种利用杀菌剂减弱棒头草对精喹禾灵的抗性的方法，包括如下步骤：
1)抗性微生物的确定：
A、分别将抗性棒头草的茎、叶、种子用自来水冲洗干净，放在灭菌滤纸上自然风干后进行表面消毒。消毒步骤:先用75％的酒精分别浸泡叶约2min，茎约3min，种子浸泡约4min，再用无菌水冲洗3次，然后用2.5％的NaClO2溶液分别漂洗叶1min、茎2min、种子3min，然后用无菌水清洗5次，再用75％的酒精浸泡30s，无菌水冲洗3次；将经表面消毒的植物样品于已灭菌研钵内研磨，得研磨后的汁液；
B、将所述汁液分别稀释至10、100和1000倍，分别取200uL稀释液均匀涂布于牛肉膏培养基平板上，于30℃条件下避光培养，待长出菌落后挑取单菌落进一步划线培养保存，至得到多个单菌落；同时取最后一次无菌水200uL清洗液分别涂布于牛肉膏培养基和PDA土豆培养基上作对照，以确定表面消毒是否完全；若不完全，重新进行步骤A的操作；
C、将所述单菌落接种到以精喹禾灵为唯一碳源的无机盐培养基上培养，选取能连续5次在以精喹禾灵为唯一碳源的无机盐培养基上生长的菌株，斜面保存；
D、将保存的菌株活化后接种到精喹禾灵原药的浓度为100mg/L的液体培养基中，培养4天后检测其中精喹禾灵浓度，重复3次。
检测样品处理方法：用30mL色谱纯乙腈对样品进行充分溶解，摇匀倒入100mL离心管中，在10000r/min，20℃条件下离心10min。然后取1mL上清液，用针筒式微孔滤膜过滤器过滤到棕色进样瓶，待测。
检测方法：高效液相色谱仪检测
流动相：乙腈：水＝85：15，流速1ml/min，进样量10微升，温度20℃，出峰时间约为6.989min。
检测结果计算：降解率的计算方法,由高效液相色谱仪软件根据标准曲线计算样品中精喹禾灵的残留量,再求出其降解率。
精喹禾灵降解率(％)＝[1—(实测残留量/对照样实测残留量)]x100％
经检测，最终得到的的七种抗性内生菌对精喹禾灵的降解率见表1：
表1：七种抗性微生物对精喹禾灵的降解率
对抑制率在50％以上的内生菌进行鉴定，其结果见表2：
表2对精喹禾灵降解率在50％以上的内生菌鉴定结果
由此可知，在棒头草中，主要的抗性微生物为鞘氨醇单胞菌属、短小杆菌属、产黄杆菌属和和弯孢聚壳属的四种微生物。
2)杀菌剂的选择：根据以上菌种，选择具有广谱抗菌性的春雷霉素作为杀菌剂；
3)杀菌剂的施用：将催芽后的种子均匀播种于高5cm直径10cm的塑料盆中，置于恒温培养箱中，培养周期和温度设为白天14h、25℃，晚上10h、20℃，定时浇水，待植株长到2-3叶期，保留长势基本一致的棒头草10株。将2％春雷霉素可湿性粉剂按照64ga.i./ha的用量，采用3WPSH-500D型生测喷雾塔对茎叶喷雾。
4)除草剂的施用：春雷霉素施用4天后，用15.8％的精喹禾灵乳油根据194.4、97.2、48.6、24.3、12.15、6.075ga.i.ha-1的剂量，采用3WPSH-500D型生测喷雾塔对茎叶喷雾。喷药15d后，剪取地上部分，称量杂草地上部分鲜重，计算杂草鲜重防效。试验重复3次，测试结果见表3。
实施例2
同实施例1相比，其区别在于，步骤2)中，将春雷霉素替换为井冈霉素，将5％井冈霉素水剂根据40ga.i./ha的剂量，采用3WPSH-500D型生测喷雾塔对茎叶喷雾，其他同实例1，所得结果见表3。
表3精喹禾灵对棒头草鲜重防效(％)
由以上数据可知，在精喹禾灵施用剂量相同的情况下，先进行施用杀菌剂，可明显提高精喹禾灵对棒头草的防效，因此在实际的应用中可减少精喹禾灵的用量，降低生产成本，减少对环境的污染。
实施例3
同实施例1相比，其区别在于，步骤2)中，杂草为稗草，杀菌剂为春雷霉素、嘧菌酯及春雷霉素+嘧菌酯三种处理，采用3WPSH-500D型生测喷雾塔对茎叶喷雾，培养周期和温度设为白天14h、30℃，晚上10h、26℃，定时浇水，待植株长到2-3叶期，保留长势基本一致的稗草15株。其他同实例1，所得结果见表4。2％春雷霉素可湿性粉剂用量为64ga.i./ha，16％嘧菌酯悬浮剂128ga.i./ha，25g/L的五氟磺草胺用量为16ga.i./ha。
表4杀菌剂处理后五氟磺草胺对稗草的防效
由以上数据可知，用杀菌剂对稗草进行处理后，可明显提高五氟磺草胺对稗草的防效，当用嘧菌酯和春雷霉素复合处理后，对五氟磺草胺的防效提高最明显。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种应用杀菌剂提高除草剂对杂草防效的方法，其特征在于，先用杀菌剂杀灭杂草内对除草剂有降解特性的内生菌，再施用所述除草剂；或同时施用杀菌剂和除草剂。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述杀菌剂为广谱内吸性杀菌剂。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述杀菌剂的施用时机为杂草生长的幼苗期。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述除草剂的施用时机为杀菌剂施用后0～8天。
5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述杀菌剂的施用量为田间推荐剂量的1/20-2倍，所述除草剂的施用剂量为田间推荐剂量的1/10-2倍。
6.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，在棒头草生长到2～3叶时，施用春雷霉素或井冈霉素，之后0～6天，施用精喹禾灵，所述春雷霉素的用量为3.2-128ga.i./ha，井冈霉素的用量为2-80ga.i./ha，精喹禾灵的用量为6.5～194.5ga.i./ha。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在棒头草生长到2～3叶时，施用春雷霉素或井冈霉素，之后0～6天，施用精喹禾灵，所述春雷霉素的用量为55～75ga.i./ha，井冈毒素的用量为30～50ga.i./ha，精喹禾灵的用量为24.3～97.2ga.i./ha。
8.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，在稗草生长1-2叶期，施用春雷霉素和嘧菌酯的混合物，之后0～6天，施用五氟磺草胺，所述春雷霉素的用量为3.2-128ga.i./ha，嘧菌酯的用量为6.4-128ga.i./ha，五氟磺草胺的用量为1.6-32ga.i./ha。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，在稗草生长1-2叶期，施用春雷霉素和嘧菌酯的混合物，0-6天后施用五氟磺草胺防治，所述春雷霉素的浓度为55～75ga.i./ha，嘧菌酯的用量为120～135ga.i./ha五氟磺草胺的用量为12～20ga.i./ha。
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