CN105687026A - 一种祛斑组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种祛斑组合物及其制备方法,该祛斑组合物包括桑叶、葡萄叶、菟丝子和当归制成,其制备方法包括以下步骤:1)将桑叶和葡萄叶的新鲜叶破碎,滤出汁液备用;2)调节汁液pH至7.2~7.6,静置分层,取上清液a备用;3)调节上清液pH至3.4~3.6,静置分层,取上清液b备用;4)将菟丝子和当归以乙醇为溶媒,得到乙醇提取物;5)将乙醇提取物和上清液b混合,浓缩,干燥,即得。本发明还提供了上述祛斑组合物在护肤品中的应用。本发明的祛斑组合物不仅能有效抑制酪氨酸酶活性,对黑色素生成有明显抑制作用,还能还原已生成黑色素,同时还能抑制黑色素转移至角质细胞,全方位祛斑,祛斑能力远远强于曲酸。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域,具体涉及一种祛斑组合物及其制备方法与应用。
背景技术
黑色素(melanin)是决定人体肤色的重要因素,它在表皮基底层黑色素细胞中的黑色素体中生物合成。正常生理状态下,皮肤中黑色素可以保护皮肤免受紫外线伤害。当外部侵害、激素失调、老化或其他因素造成黑色素合成代谢机制障碍时,易使表皮基底层的黑色素增多,部分或全身皮肤色泽加深,引起雀斑、黄褐斑、妊娠斑、老年斑、黑色素瘤等色素沉着类皮肤病,影响了人的容貌。黑色素的生物合成步骤为:存在于黑色素细胞组织中的酪氨酸在酪氨酸酶的作用下转化为多巴,多巴继续在酪氨酸酶的催化下转化为多巴醌,多巴醌继续转化为多巴色素、5,6-二羟基吲哚、5,6-吲哚醌,最后转变为黑色素。黑色素颗粒合成后被树状突起传送至角质细胞中。
目前的祛斑产品以酪氨酸酶为靶标的手段主要是抑制酪氨酸酶的生成和活性,从而相应地减少黑色素的产生,酪氨酸酶是黑色素生物合成过程中的关键酶,它是一种含铜离子的糖蛋白,主要催化酪氨酸转化为多巴,再转化为多巴胺的反应,它是减少皮肤黑色素沉着的重要靶标。市场上以抑制酪氨酸酶活性的产品主要有对苯二酚(氢醌)及其衍生物、曲酸及其衍生物、熊果苷等。对苯二酚及其衍生物可以完全抑制酪氨酸酶活性,但对黑色素细胞具有刺激性和细胞毒性,长期使用或与光会引起外源性色斑,现已禁止在护肤品中使用。曲酸具有很高的稳定性,能够通过螯合铜离子、降低酪氨酸酶活性,祛斑效果明显,但长期使用曲酸可能导致细胞毒化,引起发皮肤病变。熊果苷被认为副作用很低的美白祛斑剂,但具有高度的光敏感性,产品中往往要添加大量防晒剂,容易对皮肤造成负担,加快皮肤老化。上述产品的靶标单一,祛斑效果不明显,且副作用较大这些缺陷都对他们在美白祛斑市场上的广泛应用造成一定的不利影响。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种祛斑组合物及其制备方法与应用。
本发明提供的技术方案是一种祛斑组合物,包含以下重量份的组分制成:桑叶1~15份、葡萄叶1~10份、菟丝子2~15份、当归2~10份。
桑叶,学名:FoliumMori,是桑科植物桑的叶子。
葡萄,学名:VitisviniferaL.,是葡萄科葡萄属木质藤本植物的叶子。
菟丝子,学名:Cuscutachinensis,为旋花科菟丝子属植物菟丝子的种子。
当归,学名:Angelicasinensis,为伞形科植物当归Angelicasinensis(Oliv、)Diels的干燥根。
作为优选,桑叶3~5份、葡萄叶3~5份、菟丝子10~12份、当归6~8份。
本发明还提供了上述祛斑组合物的制备方法,包括以下步骤:
1)将桑叶和葡萄叶的新鲜叶破碎,滤出汁液备用;
2)调节汁液pH至7.2~7.6,静置分层,取上清液a备用;
3)调节上清液apH至3.4~3.6,静置分层,取上清液b备用;
4)将菟丝子和当归以乙醇为溶媒,得到乙醇提取物;
5)将乙醇提取物和上清液b混合,浓缩,干燥,即得。
步骤1)中,本发明采用新鲜的桑叶和葡萄叶,细胞壁完好,避免发生水解、氧化、聚合、美拉德反应,能完好保留细胞内活性物质的活性。
步骤2)、3)中,调节汁液pH至7.2~7.6,再调节上清液apH至3.4~3.6,可有效去除汁液中的色素和蛋白质。
步骤4)中,菟丝子和当归以乙醇为溶媒,乙醇的加入量为菟丝子和当归总重的8~10倍为宜,煎煮1~3次,每次煎煮1~3h,合并煎煮液,过滤,滤液即为乙醇提取物。作为优选,所述乙醇的体积浓度为70~95%。
步骤5)中,所述浓缩是指将混合液减压浓缩60℃时相对密度为1.1~1.3的浸膏。所述干燥为低温干燥,温度控制在60℃以下为宜,最优选为冷冻干燥。
本发明还公开了上述祛斑组合物在制备护肤品中的应用。所述祛斑组合物在护肤品中的重量占比为0.002~0.003%。作为优选,所述祛斑组合物在护肤品中的重量占比为0.002%。
所述护肤品为乳霜、乳液。乳霜和乳液的配方及工艺均为本领域技术人员公知技术。
本发明的祛斑组合物不仅能有效抑制酪氨酸酶活性,对黑色素生成有明显抑制作用,还能还原已生成黑色素,同时还能抑制黑色素转移至角质细胞,全方位祛斑,祛斑能力远远强于同浓度的曲酸。不仅如此,本发明的祛斑组合物为纯天然中药提取物对人体无刺激,无副作用,可长期使用。
具体实施方式
以下具体实施例对本发明作进一步阐述,但不作为对本发明的限定。
实施例1
配方:桑叶1kg、葡萄叶1kg、菟丝子2kg、当归2kg。
制备方法:
1)将桑叶和葡萄叶的新鲜叶破碎,滤出汁液备用;
2)调节汁液pH至7.2,静置分层,取上清液a备用;
3)调节上清液pH至3.4,静置分层,取上清液b备用;
4)将菟丝子和当归以70v%乙醇为溶媒,乙醇的用量为菟丝子和当归总重的8倍,煎煮1h,将煎煮液过滤,滤液即为乙醇提取物;
5)将乙醇提取物和上清液b混合,减压浓缩60℃时相对密度为1.1的浸膏,低温(温度低于60℃)干燥,即得。
将上述祛斑组合物制成乳霜的配方如下(按质量百分比计):
祛斑乳霜的制作工艺如下:
1)在油相锅中加入油相A中的霍霍巴油、牛油果树果脂、环聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、甘油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、辛酸/甘油三酯、PEG-20甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、甲基葡糖倍半硬脂酸酯和四-(二丁基羟基氢化肉桂酸)季戊四醇酯,边搅拌边加热至85℃;
2)在水相锅中加入水相B中的去离子水、卡波姆、泛醇、甘油和EDTA二钠,边搅拌边加热至85℃;
3)对乳化锅进行抽真空后分别抽油相和水相到乳化锅均质搅拌;
4)待温度降至65℃后加入C相三乙醇胺再均质,冷却至45℃加入D相中的香精、甲基异噻唑啉酮,在搅拌状态下加入E相祛斑组合物。
5)待温度降至36℃后停止搅拌,出料,即得。
实施例2
配方:桑叶15kg、葡萄叶10kg、菟丝子15kg、当归10kg。
制备方法:
1)将桑叶和葡萄叶的新鲜叶破碎,滤出汁液备用;
2)调节汁液pH至7.6,静置分层,取上清液a备用;
3)调节上清液pH至3.6,静置分层,取上清液b备用;
4)将菟丝子和当归以95v%乙醇为溶媒,乙醇的用量为菟丝子和当归总重的10倍,煎煮3次,每次煎煮3h,合并煎煮液,过滤,滤液即为乙醇提取物;
5)将乙醇提取物和上清液b混合,减压浓缩60℃时相对密度为1.3的浸膏,低温(温度低于60℃)干燥,即得。
本实施例的祛斑乳霜配方及工艺同实施例1,仅祛斑组合物的质量比百分比为0.004%,相应的去离子水的质量百分比为71.366%。
实施例3
配方:桑叶5kg、葡萄叶5kg、菟丝子12kg、当归8kg。
制备方法:
1)将桑叶和葡萄叶的新鲜叶破碎,滤出汁液备用;
2)调节汁液pH至7.5,静置分层,取上清液a备用;
3)调节上清液pH至3.5,静置分层,取上清液b备用;
4)将菟丝子和当归以85v%乙醇为溶媒,乙醇的用量为菟丝子和当归总重的9倍,煎煮2次,每次煎煮2h,合并煎煮液,过滤,滤液即为乙醇提取物;
5)将乙醇提取物和上清液b混合,减压浓缩60℃时相对密度为1.2的浸膏,冷冻干燥,即得。
本实施例的祛斑乳霜配方及工艺同实施例1。
实施例4
配方:桑叶1kg、葡萄叶10kg、菟丝子2kg、当归10kg。
制备方法:
1)将桑叶和葡萄叶的新鲜叶破碎,滤出汁液备用;
2)调节汁液pH至7.2,静置分层,取上清液a备用;
3)调节上清液pH至3.6,静置分层,取上清液b备用;
4)将菟丝子和当归以70v%乙醇为溶媒,乙醇的用量为菟丝子和当归总重的10倍,煎煮3h,将煎煮液过滤,滤液即为乙醇提取物;
5)将乙醇提取物和上清液b混合,减压浓缩60℃时相对密度为1.2的浸膏,冷冻干燥,即得。
本实施例的祛斑乳霜配方及工艺同实施例2。
实验例1
1、安全性实验
选取皮肤健康的志愿者组成受试人群60人,年龄在20~40岁之间,其中男性35人,女性25人,随机分为4组,每组15人,分别为实验组1~4,分别涂抹实施例1~4的祛斑乳霜。将受试者左右手臂内侧距手掌基部5cm处,各确定4×4cm的面积作为受试部位。受试者在涂抹乳霜前,先将受试部位洗净,擦开水分后,涂抹于左右两臂内侧。每天早晚各涂抹一次,连续测试1个月。观察受试者皮肤是否出现局部发红或剥落现象。
2、实验结果
经观察,实验组1~4的受试者均无皮肤局部发红、无刺激和皮肤剥落现象。
实验例2本发明对酪氨酸酶的抑制作用
1、实验方法
将酪氨酸酶溶解于1/15mol/L的pH6.8磷酸缓冲液,使酶溶液的浓度为368U/ml。作为底物,在1/15mol/L的pH6.8磷酸缓冲液中溶解左旋多巴(L-DOPA),使L-DOPA浓度为5mmol/L。将实施例1~4制备的祛斑组合物用蒸馏水配制成浓度为20μg/ml和30μg/ml的受试物,以上溶液均为现用现配。
在25℃,依次向试管中加入5mmol/ml的左旋多巴(L-DOPA)0.8/ml、1/15mol/L的pH6.8磷酸缓冲液1.2ml以及0.1ml的受试物,阴性对照组加入等量蒸馏水,37℃孵育5min,再加入368U/ml的酪氨酸酶0.2ml,调节紫外分光光度计的波长475nm,测定反应0.5min和2min后的吸光度,用L-DOPA的自身氧化作参比。使用曲酸作为参考对照,用蒸馏水将曲酸配制成6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml。平行实验三次,求其平均值。实验结果如表1。
根据以下公式计算抑制率:
式中,A:阴性对照组2min时475nm处吸光度;
B:阴性对照组0.5min时475nm处吸光度;
C:受试物2min时475nm处吸光度;
D:受试物0.5min时475nm处吸光度。
2、实验结果
表1祛斑组合物对酪氨酸酶的抑制率
实验例3黑色素还原实验
1、实验原理
体外实验,通过实验对已形成的黑色素细胞进行还原作用,然后观察黑色素瘤细胞颜色变化,从而确定祛斑组合物的还原黑色素功效。
2、实验方法
将实施例1~4的祛斑组合物加入蒸馏水配制成浓度为20μg/ml的受试物。将B16黑色素瘤细胞在培养液中培养24h,然后加入1,3-二甲基嘌呤继续恒温培养24h。分别取各组受试物5ml加入到含有B16黑色素瘤的MEM试管培养基中(含有10%FBS)培养,恒温37℃培养28h,最后用TCA溶解细胞,并测量细胞内黑色素含量,阴性对照组加入等量蒸馏水。将未处理细胞的黑色素合成率作为100%计算。
3、实验结果
实验例4抑制已形成的黑色素转移到表皮细胞实验
1、实验原理
黑色素细胞能够产生黑色素,黑色素颗粒通过黑色素细胞枝状突起向角朊细胞转移,转移至角朊细胞的黑色素颗粒随表皮细胞上行至角质层,从而在皮肤上形成色斑。因此,通过抑制黑色素颗粒向表皮细胞传递,来解决黑色素转移。
2、实验方法
将实施例1~4的祛斑组合物加入蒸馏水配制成浓度为20μg/ml、30μg/ml的受试物。
将角朊细胞和黑色素细胞共同培养,在培养物中分别加入5ml受试物恒温培养6天。阴性对照组仅为角朊细胞和黑色素细胞共同培养。
3、实验结果
Claims (9)
1.一种祛斑组合物,其特征在于:包括以下重量份的原料制成:桑叶1~15份、葡萄叶1~10份、菟丝子2~15份、当归2~10份。
2.根据权利要求1所述的祛斑组合物,其特征在于:所述原料的重量份为:桑叶3~5份、葡萄叶3~5份、菟丝子10~12份、当归6~8份。
3.权利要求1或2所述祛斑组合物的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)将桑叶和葡萄叶的新鲜叶破碎,滤出汁液备用;
2)调节汁液pH至7.2~7.6,静置分层,取上清液a备用;
3)调节上清液pH至3.4~3.6,静置分层,取上清液b备用;
4)将菟丝子和当归以乙醇为溶媒,得到乙醇提取物;
5)将乙醇提取物和上清液b混合,浓缩,干燥,即得。
4.根据权利要求3所述的祛斑组合物的制备方法,其特征在于:步骤4)中,所述乙醇的体积浓度为70~95%。
5.根据权利要求3所述的祛斑组合物的制备方法,其特征在于:所述浓缩是指将混合液减压浓缩60℃时相对密度为1.1~1.3的浸膏。
6.权利要求1或2所述的祛斑组合物在制备护肤品中的应用。
7.根据权利要求5所述的祛斑组合物在制备护肤品中的应用,其特征在于:所述祛斑组合物在护肤品中的重量占比为0.002~0.003%。
8.根据权利要求6所述的祛斑组合物在制备护肤品中的应用,其特征在于:所述祛斑组合物在护肤品中的重量占比为0.002%。
9.根据权利要求5或6所述的祛斑组合物在制备护肤品中的应用,其特征在于:所述护肤品为乳霜或乳液。
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