CN105671053B - 一种普通小麦高千粒重基因及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种普通小麦高千粒重基因及其应用。检测小麦TaGS5‑A1b‑b基因型的特异性引物对为：5’‑TCATACACACATAATCCAGTCGA‑3’和5’‑GATCGTGGGTGTTGCATCTAT‑3’；以待测小麦的基因组DNA为模板，用该引物对进行PCR扩增后再进行测序，若在TaGS5‑A1b基因启动子上游‑1925bp位置有G插入，则具有基因TaGS5‑A1b‑b，反之则不具有。本发明检测引物可应用于鉴定TaGS5‑A1b‑b基因型小麦，并辅助小麦分子育种等方面，可直接在分子水平上进行TaGS5‑A1b‑b基因型的检测，对小麦籽粒大小、产量、其它农艺性状的改良及优良品种的培育起到重要作用。

Description

一种普通小麦高千粒重基因及其应用

技术领域

本发明属于基因工程领域，涉及一种控制小麦籽粒大小的基因，尤其涉及一种普通小麦高千粒重基因（TaGS5-A1b-b）及其应用。

背景技术

小麦是世界上最重要的粮食作物之一，但随着人口数量的快速增长，粮食的产量已经渐渐不能满足人类日益增长的需求。因此，小麦产量的提高已成为解决粮食问题的关键。到目前为止，许多与产量相关的QTL位点，如株高、穗长、每穗粒数、每穗粒重、粒长、粒宽和千粒重等已经从普通小麦中被识别出来。

由于普通小麦基因组庞大(≈17.9 Gb)，因此，直接从小麦中克隆与产量相关的基因是一件很困难的事情。比较基因组学证实了小麦和其它作物之间基因的共线性，因此，有一些与产量相关的基因通过同源克隆的方法逐渐从普通小麦中分离出来，例如，蔗糖合酶2基因TaSus2、细胞分裂素氧化酶TaCKX2.1和 TaCKX2.2、细胞壁转化酶基因TaCwi-A1 和TaCwi-4A、控制小麦粒重的基因TaGW2、小麦体外水解酶w3变异株1-FEH w3 variant和小麦转录延伸因子基因 1-FEH-6B等。其中，控制小麦粒重的基因研究最为深刻，研究表明：控制小麦粒重的基因和千粒重、抽穗期、成熟期密切相关，在种子育种过程中通过控制基因表达负调控粒重。

为了进一步理解普通小麦的基因功能，科研人员对许多与产量相关基因的多态性做了大量的探索，也开发了相应的功能性标记以便用于进一步分子标记辅助育种当中。例如张等利用Westonia和 Kauz两个材料对小麦体外水解酶w3基因启动子进行多态性筛选发现：在小麦体外水解酶w3基因启动子上游279bp的位置有一个SNP位点的差异。进一步的分析发现：该SNP 位点在干旱条件下与茎中的果聚糖的再活化有重要关系，并可以促使籽粒千粒重增加。因此，在极度干旱的条件下，可通过选择一些茎中富含果聚糖再活化能力强的株系来促进小麦育种的进程(Zhang et al. 2015)。另外，控制小麦粒重的基因先后在2011和2014年分别从普通小麦的6A和6B、6D染色体组中被克隆出来（TaGW2-6A、TaGW2-6B 和TaGW2-6D），然后分别对这个三个基因进行多态性筛选，结果发现：TaGW2-6A和TaGW2-6B的启动子区域都发现了多态性，并开发了CAPS、dCAPS和ACAPS功能性标记。更进一步的关联分析发现：TaGW2-6B比 TaGW2-6A和TaGW2-6D对千粒重的影响都大。而TaGW2-6D的编码区和启动子区域没有发现多态性。

最近，产量相关基因TaGS5-A1被报道与籽粒大小、千粒重和株高等有关联(Ma etal. 2015; Wang et al. 2015)。并在该基因的编码区发现了一个SNP的等位变异，分别命名为 TaGS5-A1a 和TaGS5-A1b 两种基因型，在马等的报道中该SNP位点分别被命名为TaGS5-3A1-G和TaGS5-3A-T，进一步的研究发现：含有TaGS5-A1b（或者TaGS5-3A-T，Ma etal. 2015）基因型的材料具有较低的株高和较大的千粒重。可以知晓：TaGS5-A1b是一种较为优质的基因型，可以应用于小麦高产育种中。因此，在上述研究结果的基础上为了更深入的了解TaGS5-A1基因的功能，应该探寻更为优质的基因型将更快的推进高产小麦育种的进程。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种导致小麦粒重增加的基因（TaGS5-A1b-b）、其检测引物及检测方法，可用于检测导致粒重增加的基因型小麦和小麦分子标记辅助选择育种等方面，可直接在籽粒上进行该基因型的检测，对小麦产量基因的改良及优良品种的培育起到重要作用。

为解决上述问题，本发明通过以下技术方案实现：

分离鉴定出了一种普通小麦高千粒重基因（暂定名TaGS5-A1b-b），包括SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列。

设计一种上述导致小麦粒重增加的基因TaGS5-A1b-b的检测引物，包括以下引物对：

上游引物：5’- TCATACACACATAATCCAGTCGA -3’；

下游引物：5’- GATCGTGGGTGTTGCATCTAT -3’。

设计一种普通小麦高千粒重基因TaGS5-A1b-b的检测方法，包括以下步骤：

1）以待测小麦的基因组DNA为模板，用上述检测引物进行PCR扩增；

2）检测所得扩增产物，将条带大小约为800bp的片段进行测序，若在TaGS5-A1b基因启动子的上游-1925bp有G的插入，则该待测小麦具有TaGS5-A1b-b基因，为TaGS5-A1b-b基因型，该小麦的基因组DNA中具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列，其启动子上游-1925bp位点插入的单碱基G，即SEQ ID NO.1的第351bp所示核苷酸序列；检测所得扩增产物，将条带大小约为800bp的片段进行测序，若在该基因启动子的上游-1925bp无G的插入，则该待测小麦不具有TaGS5-A1b-b基因，为非TaGS5-A1b-b基因型小麦，其基因组DNA中具有SEQ IDNO.2所示核苷酸序列。

对于上述的检测方法，所述PCR扩增中的反应体系由以下试剂组成：1.5mmol/L（终浓度）MgCl₂，0.3mmol/L（终浓度）dNTP，上、下游引物各10pmol，模板DNA 200ng，0.5U Taq酶，加1×PCR缓冲液定容至25µL。

对于上述的检测方法，所述PCR扩增中反应程序为：先95℃预变性5min，然后94℃变性30s、55℃退火30s、72℃延伸40s，如此进行35个循环；最后，72℃延伸10 min。

对于上述的检测方法，所述扩增产物的检测方法为：取所得扩增产物10μL进行琼脂糖凝胶电泳，电泳结束后用凝胶成像系统扫描成像并用计算机进行分析后进行测序。

小麦TaGS5-A1b-b基因型的鉴定方法，包括以下步骤：

（1）以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求2所述检测引物进行PCR扩增；

（2）检测所得扩增产物并进行测序，若在该基因启动子上游-1925bp位置有G插入的，则待测小麦为TaGS5-A1b-b基因型小麦，反之，则为非TaGS5-A1b-b基因型小麦。

所述基因TaGS5-A1b-b在小麦育种中的应用。

本发明具有积极有益的技术效果：

1. 本发明公开了一个能导致小麦粒重增加的基因TaGS5-A1b-b及其在小麦产量性状改良中的应用，含有TaGS5-A1b-b基因的小麦品种主要表现在能够促使小麦籽粒较非TaGS5-A1b-b基因的小麦品种的籽粒千粒重增加。例如，在同样栽培管理条件下，与非TaGS5-A1b-b基因的小麦品种晋麦47相比，具有TaGS5-A1b-b基因的小麦品种内乡184籽粒千粒重要增加2～3克左右。因此，TaGS5-A1b-b基因功能的发现能对利用基因工程技术改良小麦农艺性状和培育高产小麦品种起到十分重要作用，同时也有助于产量性状的遗传和分子生物学的进一步研究。

2.本发明提供的检测引物及方法可以应用于高产小麦新品种培育和优异种质资源的创制，实现早期筛选，节省时间和资源。

具体实施方式

以下结合具体实施例进一步阐述本发明，但本发明的保护范围并不局限于下述具体实施例。下述实施例中的试验方法，如无特别说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特别说明，均购自常规生化试剂商店。

实施例1 不同品种小麦性状的调查

发明人于2013-2015每年4～6月对来自黄淮麦区的166份有代表性的当地大规模种植的普通小麦品种和高代品系进行田间调查，每个品种千粒重数据见表1。

表1 不同品种小麦性状调查表

表1续1 不同品种小麦性状调查表

表1续2 不同品种小麦性状调查表

表1续3 不同品种小麦性状调查表

表1续4 不同品种小麦性状调查表

。

实施例 2 应用特异性引物鉴定TaGS5-A1b-b基因型小麦

试验材料为4个小麦品种：内乡184、济麦20、藁城9411和豫麦9号，每个品种的小麦取一粒种子，按照常规方法（Chen等，2011）提取小麦籽粒基因组DNA作为模板，用特异性引物进行PCR扩增。

特异性引物对如下：

上游引物：5’- TCATACACACATAATCCAGTCGA -3’（ SEQ ID NO.3）；

下游引物：5’- GATCGTGGGTGTTGCATCTAT -3’（ SEQ ID NO.4）。

PCR反应体系的组成：1.5mmol/L MgCl₂，0.3mmol/L dNTP，上、下游引物各10pmol，模板DNA 200ng，0.5U Taq酶，加1×PCR缓冲液（含10 mmol/L Tris-HCl，pH9.0，50mmol/LKCl，1.0% Triton X-100）定容至25µL。

PCR反应程序：先95℃预变性5min；然后94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸40s，共35个循环；最后，72℃延伸10 min。

PCR扩增结束后，取上述四种PCR扩增产物各10μL分别进行1.5%琼脂糖凝胶电泳（采用1×TAE缓冲液；溴化乙锭（EB）染色，160V，0.5小时），电泳结束后用凝胶成像系统（MultiGenius Gel Documentation and Analysis System）扫描成像并用计算机进行分析，最后将四种PCR扩增产物进行测序。

测序结果进行分析，结果表明：2个小麦品种（内乡184和济麦20）中TaGS5-A1b基因的启动子上游-1925bp位置有G的插入，则为TaGS5-A1b-b基因型小麦，而小麦品种藁城9411和豫麦9号该基因启动子上游-1925bp位置没有G的插入，则为非TaGS5-A1b-b基因型小麦。从表1可知，内乡184和济麦20的千粒重为47.03g和46.03g，而藁城9411和豫麦9号的千粒重分别为41.37g和39.90g，即TaGS5-A1b-b基因型小麦的籽粒大于非TaGS5-A1b-b基因型小麦的籽粒，因此，检测结果与调查结果相符。

实施例3

采用实施案例2相同方法分别对丰抗13、太空6号、濮麦9号和内江31进行检测，结果表明：丰抗13、濮麦9号和内江31扩增产物测序后在TaGS5-A1b基因启动子上-1925bp位置没有G插入时，为非TaGS5-A1b-b基因型小麦；太空6号扩增产物测序后在该基因启动子上游-1925bp位置有单碱基G插入时，其为TaGS5-A1b-b基因型小麦。从表1可知，太空6号的千粒重分别为50.74g，而丰抗13、濮麦9号和内江31的千粒重分别为43.88g、41.57g和32.56g，即TaGS5-A1b-b基因型小麦的籽粒大于非TaGS5-A1b-b基因型小麦的籽粒，因此，检测结果与调查结果相符。

实施例4

发明人对上述来自黄淮麦区的166份有代表性的当地大规模种植的普通小麦品种和高代品系按照本发明方法进行了基因型的检测，检测结果见表1，对比千粒重数据发现：在田间栽培条件基本一致的情况下，TaGS5-A1b-b基因型小麦籽粒的千粒重普遍高于非TaGS5-A1b-b基因型小麦籽粒的千粒重，因此，TaGS5-A1b-b基因型可以导致小麦籽粒千粒重增加。

SEQUENCE LISTING

<110> 河南农业大学

<120> 一种普通小麦高千粒重基因及其应用

<130> /

<160> 4

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 7490

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 1

tcatacacac ataatccagt cgaccgcctc cgggctccga gacatagggc tattacttcc 60

tccgagaagg gcctgaactc gtaaaccttg tgtgcctaca actactccat agctaagatc 120

ttgcctctcc atactacccc cctaccatta ctgtcagact tagaaccacg acagccgcca 180

gcagctgccg cgcccgcgca gagggttttg acggcgccgt tgcttactct ctgaaccgat 240

cgaacacagt cggggatttt gggtgatctc gccgaagcaa gtcacacctg cgacggtgga 300

tgttaccatt ctagatcaag aggattgcag agcaacgtag gatttttttt gggggggggg 360

gggcaagaat cattggctct gattacgaat tgtcacgccc cgatctggat cgtgggcgac 420

cagattaggc tagggaaatc aggaagtgga tgagcgagac ttggagaagg tggtgagcac 480

aagagtgaag cgagatggga tttcggaatt catcaatata gtctgtccac acacacccta 540

atgggcttaa gtatagatgc aacacccacg atcagctggc cacgcacgca cgaatctctg 600

gtccctggga cccacttgcc agtcacacgg tggtgtcgag cactgccggt gtgacaaagt 660

gccaaaagga tttcaagcct gaattatttt tgctcggcca tactattaag agaaaggcat 720

attccgaatt gcaatcttgg atagaaagat ttgcatactt ctctcaattt tcttgctttt 780

tgtataactg cctttgtaga tgtgcaagca aagacaaaca aaaaaaatgc atgcagtaca 840

attgtatggg acggtatggg aagtcccctc catcaacaga tcgggtccga tacggctcag 900

caggtgacac atgtgtttct ccggagacgt cgagcaatgc ctgtcgccct caagtgaagc 960

cgtcggcgat gcatgccgat ggatgctacg cacggcgtct catgcggagg ggtcaagtca 1020

tgcctgctac cggccggcac gcacggtggc tctggcggag gtgtcatgtt tagcctgttg 1080

ctgctggatc gaaggtggtg cgatagtggc aggaggcagg cggtatggga tttctttgtc 1140

ttccggtatc ttctccggag gtatccggtt atcgaggagt cggtagccgg atatgggatg 1200

taagacttca atgacgagtt tgtgcactcc ggtggaaaca caagatctat gacctggcta 1260

tgtcgatgtg tgcctgcgtc gtgtccttac tgaagatggt ggattgaagc ttcactttag 1320

gaatgagaat acagagttca accttgggtt ggactcacca acatcgacgc acgtgtggca 1380

atttcttttt gaaggcgtag cctagaaatt gtatattttt cattttaatt ttgtcttata 1440

tcatagggtt agttagtggc ggagccaacc tttcaaaaag gtcgggcaaa gtctatgcat 1500

gcatggtgac gttgccagta tttgcaccag agcatcagca attagcatta ctaaccatgt 1560

tctggtaata ttatttaata gagactggcc ggagcagccc gggcagccgc cccaggttgc 1620

cgggaggtag ggttaatgtc tatcagatgg agctactgtc gcgaggcatt cagcctcgaa 1680

ttttaatttt gccttttttt cgggtctggt gttcggctgc tgatttctca tttttaataa 1740

tatatggcta cgcgcatcaa ggctttcgag aaaaagaaca tgtagtacaa tggtactgtt 1800

ttcggtaaaa atgaaaaaga aagagagaaa acagaaactg caaacgccaa tctcacttgt 1860

ctcatgcacg aaggtttcta ctgtatgctc gtccaacttg atgaatcggt acgtgtgacc 1920

gtgtcagcgt ttagtcagtc acaaggcaag ccgccaaaag catcagacgc atacgccaac 1980

aacgcacaga cacgagtcgg agatgccctc ggcaaggctg cggtgccggt gccggtgccg 2040

gtgccgcgca gcaaataaaa ttcgttatcc ctggttcaca tgcagccaag ccggccaatg 2100

gcctcctctc actctcaccc ccacccccac ccccaccccc cagctctgag ctccctccaa 2160

cttcacatga tcttctagtg tgatctcact ctcacacaga ttgacttgcg cccagcccct 2220

gcctctctgc tcttgctgtc ccagccaagc cactcactct cacatttgca cattctcatg 2280

gcggcagcgg cgaaccaaga caagcagcgg cggcagctca tccttgctct ctttctcctc 2340

gtcttggcct cccagagttg gcgctgctgc tctgcaggtt acggtagtgg gcaggaagct 2400

gatagggtgg tcttcctccc cggtcagcca aggagcccgc aggtctctca gttcgccggg 2460

catgtcaccg tgaacaagcg gaatgggagg gcgctcttct actggttctt cgaggctcag 2520

tcacagccct cgcacaaacc tctcctgctc tggctcaatg gaggtttctt actttgcact 2580

tattcacttg tctgttctct ctcttttatt ttacctcact tatttcagga aatgttttgt 2640

agagattatc ttgtgttcct ctcctcgcgg ttcagtaata attcggttgc tacttggggt 2700

gaaaaataaa caactttttt gttccctgca catgcatgca ggaccaggct gctcatcagt 2760

tggatacgga gctgcttctg agctaggacc tctcagggtg agaagatttg cagcagggct 2820

cgagttcaac aagtttgcat ggaacaaagg tgttgcagct tgcaagcatt gcacttgtgc 2880

taacttatta tgaatttatg attatcccaa cggttctacc tacgtaaaaa aatctgaata 2940

ttggtattgt tctcgattga ctcttgccag aagccaacct gctcttcgtg gagtcccctg 3000

ttggggttgg cttctcctac accaacacat cctctgacct caccaacctc aatgatgatt 3060

ttgtaggtaa ctgagtattc ttttcgggaa gtgtgcttgc ttttcataac tgtttgaggc 3120

gttttgaaat gttcatcaat ttccattttc tcttttgtat agctgaggat acatataatt 3180

tcctgattaa ttggttcaag aggtttccgc agtacaagga ccgggaattc tatatctcag 3240

gagagagcta tgcaggtaaa tgtttacatc gacaagacac ttgttcttca ggccttgatt 3300

tccagagttg atcttagtaa cctgcaaact taattttttc aatatagttg tcctacatgt 3360

ctgacaaagt cgtaaaaata ataagtcaat ctggcctttc aaattaggtt ctttaccaat 3420

tcctatttat tttagtgtaa accataaatc attaaattta aaggaattgg gcaataattg 3480

atgttaaagc atagatggga aattttggtg agaaaatttt aaaatattaa tcctggcaag 3540

tcatgatgct cctgtagttc agaggaaact taaaggtggg taatatgctc atctcatttt 3600

ccccacccat tcctgcctac cttctttttg gccaatttta gtgttcgttt gatccccttt 3660

tgtcgaattt tgtgactcat tttctacaac atattatcaa acaagcacac aacacggttc 3720

agcaacctca gattgggcct acattgctat gtgtcttgta acctgggaga acagaggttt 3780

accataccat ggaaacaaag caaagtgaat aacattttgg tggcatggcc ctttagattg 3840

gttccggtat tcctgacatg tccaatggtc atattagact tctgtgatat ttcagacatg 3900

gtggagcaag agatgcgctg caattctatt tttgtagatc actagtgaag aattttaaat 3960

tttatacagg tcattatgtg ccacaactag ctgaccttgt ctatgagagg aacaaagaca 4020

agaaggccag cacatacatc aactttaaag ggttcattgt gagtatataa tttgatagct 4080

tctgttgttt atattgctgg ttcggccagt ggccttgttc attcttgttt gaaaatggga 4140

ttacataatg tattgttttt tatagtttat aacttcgaaa taattcatgt atttcctggg 4200

atgatttaga tgaaaaatat tgcatactta tttctgtgaa aattacaaca atcttgggat 4260

ttgttaacct tccgatgaac ttccattttt ttctataaat gtatatattg cctaggtttt 4320

ctgtggatag tttgaaattt tataacatca taacatttat attggcccaa atgtaggttg 4380

gaaatccatt aactgatgat tattatgact cgaagggact ggccgaatat gcttggagcc 4440

atgcagttgt atcagatgaa gtttatgatc agataaaaaa gaattgtgat tttagagcct 4500

caaactggac cgatgattgc aacaaagcca tgaacaccat ctatggacag taccagttga 4560

tcgacatata caacatttat gggcccaagt gcaatcttgg acaaacatca tcagcatctg 4620

ttgttgacaa agcactcaaa tatagtgacc atgtaaggga cagacagttt aaattagaac 4680

ttctgcttct gaatttctaa gtatgttaat ttctttggca tggtaggaac ctttcaggag 4740

gaggattagg ttgttctcag gatacgatga gtgctactca tcttatgctc aggagtactt 4800

caataaggca gatgtgcaaa gggcacttca tgcaaatgtc aatgggatgt tgcctgggaa 4860

atggcaagtt tgcaggtgat ttctgcagat ctttccattt tttacctatg aaattttaat 4920

ctagtaatta caacactgag ttgaattata tcatgggaca tagtttaaaa taagcgttgc 4980

aatgttaata tagttttgat gtgattctac tttgtgtcat taacattcta tccagggact 5040

ccaaacgaat gtcaaatgga caactgccga ctcaaatttg gaaaatgctc caaagagata 5100

attttacacg tggagaagaa attgaatttg acttatttcc attttcattt accatgcagt 5160

gactccattc tgaagtcgta caacttttcg gtactttcca ttctaccaat atactccaag 5220

ctcatcaaag caggactgag agtctggctc tacaggtgta tttctgcacc ttgtacccta 5280

ccaccatgtg tcagttctca tatgcattaa aagtagacac tgtttgttac ttccatgtac 5340

tgatattatc ctcccaaatt actttctgta agacggtaac cttaaaacac aattttgctg 5400

ttctctgatg gcttaaaaat cttagaatag atgttctttt cattggcatg ttagaatagg 5460

tgctatgttg gtgttccgca atcggcagtg acctataatt ttgtgcatgc agtggagatg 5520

cggatggcag ggtcccagtg atcgggtcac gatattgtgt ggaagcactt ggcttgccta 5580

tcaagtcaca gtggcaacca tggtacctga acaaacaggt cagaaattct gaacaatcaa 5640

gtgaacattc tctggggcta caatgatact gctagttaag ttagtttctg aatgcaatct 5700

agactccact ggccctgacg agagagacat ttgcactgta ggttgctgga agatttgtgg 5760

agtaccatgg tatgaccatg gtgacaataa gaggggctgg ccacttggta cccctcaaca 5820

agcccacaga agggatagcg ctgatcgaca cattccttct tggtaaacag cttcctacac 5880

accgatgatg gttaaatttg ggatcaggtg aaatctacct atgacccaaa atgagttcaa 5940

ggagagttta tgtaggaagc ataacataat gcataatttc ttcaaacatg gtaatgttct 6000

gaattttggg gctgatcctt tccgtggatg aatctgtctt aaaaaaatgt tgatgtccca 6060

tttagaggtg cttggtaaat ttttcattga tcagctggac atgtattgat caaattgagc 6120

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gccaacacat gcttggtgct ataagattag atcttgattt acttagggaa aaaatgcggt 6540

ccttttctca ctatttttta tctgttcgtt tttcgtttct tttccatttt tttgtttttc 6600

ctttttgctt cttttttctt tttgacaaaa atgctatggt ttttaagtat ttgtaaaaaa 6660

atacaaaaga tgttagcttt ttctaatttt gttcaaaaat acaaatattt gcattttaat 6720

ttttttaaca gaaatttaaa gaaaaaatgc atcttttaaa attgctcaga atgtcaaaac 6780

ataaaaaaaa attggaaaac gcttgcgttc tgccggctga tgcgcgcagg acatcatccg 6840

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accctcgtag accgaaagcg aaagcgtttg acaacgcggt tgatgtagtc aaacttcttg 7440

ttccgatcga tcaaataccg aacgtacggc accttcgagt tctacacacg 7490

<210> 2

<211> 7489

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 2

tcatacacac ataatccagt cgaccgcctc cgggctccga gacatagggc tattacttcc 60

tccgagaagg gcctgaactc gtaaaccttg tgtgcctaca actactccat agctaagatc 120

ttgcctctcc atactacccc cctaccatta ctgtcagact tagaaccacg acagccgcca 180

gcagctgccg cgcccgcgca gagggttttg acggcgccgt tgcttactct ctgaaccgat 240

cgaacacagt cggggatttt gggtgatctc gccgaagcaa gtcacacctg cgacggtgga 300

tgttaccatt ctagatcaag aggattgcag agcaacgtag gatttttttt gggggggggg 360

ggcaagaatc attggctctg attacgaatt gtcacgcccc gatctggatc gtgggcgacc 420

agattaggct agggaaatca ggaagtggat gagcgagact tggagaaggt ggtgagcaca 480

agagtgaagc gagatgggat ttcggaattc atcaatatag tctgtccaca cacaccctaa 540

tgggcttaag tatagatgca acacccacga tcagctggcc acgcacgcac gaatctctgg 600

tccctgggac ccacttgcca gtcacacggt ggtgtcgagc actgccggtg tgacaaagtg 660

ccaaaaggat ttcaagcctg aattattttt gctcggccat actattaaga gaaaggcata 720

ttccgaattg caatcttgga tagaaagatt tgcatacttc tctcaatttt cttgcttttt 780

gtataactgc ctttgtagat gtgcaagcaa agacaaacaa aaaaaatgca tgcagtacaa 840

ttgtatggga cggtatggga agtcccctcc atcaacagat cgggtccgat acggctcagc 900

aggtgacaca tgtgtttctc cggagacgtc gagcaatgcc tgtcgccctc aagtgaagcc 960

gtcggcgatg catgccgatg gatgctacgc acggcgtctc atgcggaggg gtcaagtcat 1020

gcctgctacc ggccggcacg cacggtggct ctggcggagg tgtcatgttt agcctgttgc 1080

tgctggatcg aaggtggtgc gatagtggca ggaggcaggc ggtatgggat ttctttgtct 1140

tccggtatct tctccggagg tatccggtta tcgaggagtc ggtagccgga tatgggatgt 1200

aagacttcaa tgacgagttt gtgcactccg gtggaaacac aagatctatg acctggctat 1260

gtcgatgtgt gcctgcgtcg tgtccttact gaagatggtg gattgaagct tcactttagg 1320

aatgagaata cagagttcaa ccttgggttg gactcaccaa catcgacgca cgtgtggcaa 1380

tttctttttg aaggcgtagc ctagaaattg tatatttttc attttaattt tgtcttatat 1440

catagggtta gttagtggcg gagccaacct ttcaaaaagg tcgggcaaag tctatgcatg 1500

catggtgacg ttgccagtat ttgcaccaga gcatcagcaa ttagcattac taaccatgtt 1560

ctggtaatat tatttaatag agactggccg gagcagcccg ggcagccgcc ccaggttgcc 1620

gggaggtagg gttaatgtct atcagatgga gctactgtcg cgaggcattc agcctcgaat 1680

tttaattttg cctttttttc gggtctggtg ttcggctgct gatttctcat ttttaataat 1740

atatggctac gcgcatcaag gctttcgaga aaaagaacat gtagtacaat ggtactgttt 1800

tcggtaaaaa tgaaaaagaa agagagaaaa cagaaactgc aaacgccaat ctcacttgtc 1860

tcatgcacga aggtttctac tgtatgctcg tccaacttga tgaatcggta cgtgtgaccg 1920

tgtcagcgtt tagtcagtca caaggcaagc cgccaaaagc atcagacgca tacgccaaca 1980

acgcacagac acgagtcgga gatgccctcg gcaaggctgc ggtgccggtg ccggtgccgg 2040

tgccgcgcag caaataaaat tcgttatccc tggttcacat gcagccaagc cggccaatgg 2100

cctcctctca ctctcacccc cacccccacc cccacccccc agctctgagc tccctccaac 2160

ttcacatgat cttctagtgt gatctcactc tcacacagat tgacttgcgc ccagcccctg 2220

cctctctgct cttgctgtcc cagccaagcc actcactctc acatttgcac attctcatgg 2280

cggcagcggc gaaccaagac aagcagcggc ggcagctcat ccttgctctc tttctcctcg 2340

tcttggcctc ccagagttgg cgctgctgct ctgcaggtta cggtagtggg caggaagctg 2400

atagggtggt cttcctcccc ggtcagccaa ggagcccgca ggtctctcag ttcgccgggc 2460

atgtcaccgt gaacaagcgg aatgggaggg cgctcttcta ctggttcttc gaggctcagt 2520

cacagccctc gcacaaacct ctcctgctct ggctcaatgg aggtttctta ctttgcactt 2580

attcacttgt ctgttctctc tcttttattt tacctcactt atttcaggaa atgttttgta 2640

gagattatct tgtgttcctc tcctcgcggt tcagtaataa ttcggttgct acttggggtg 2700

aaaaataaac aacttttttg ttccctgcac atgcatgcag gaccaggctg ctcatcagtt 2760

ggatacggag ctgcttctga gctaggacct ctcagggtga gaagatttgc agcagggctc 2820

gagttcaaca agtttgcatg gaacaaaggt gttgcagctt gcaagcattg cacttgtgct 2880

aacttattat gaatttatga ttatcccaac ggttctacct acgtaaaaaa atctgaatat 2940

tggtattgtt ctcgattgac tcttgccaga agccaacctg ctcttcgtgg agtcccctgt 3000

tggggttggc ttctcctaca ccaacacatc ctctgacctc accaacctca atgatgattt 3060

tgtaggtaac tgagtattct tttcgggaag tgtgcttgct tttcataact gtttgaggcg 3120

ttttgaaatg ttcatcaatt tccattttct cttttgtata gctgaggata catataattt 3180

cctgattaat tggttcaaga ggtttccgca gtacaaggac cgggaattct atatctcagg 3240

agagagctat gcaggtaaat gtttacatcg acaagacact tgttcttcag gccttgattt 3300

ccagagttga tcttagtaac ctgcaaactt aattttttca atatagttgt cctacatgtc 3360

tgacaaagtc gtaaaaataa taagtcaatc tggcctttca aattaggttc tttaccaatt 3420

cctatttatt ttagtgtaaa ccataaatca ttaaatttaa aggaattggg caataattga 3480

tgttaaagca tagatgggaa attttggtga gaaaatttta aaatattaat cctggcaagt 3540

catgatgctc ctgtagttca gaggaaactt aaaggtgggt aatatgctca tctcattttc 3600

cccacccatt cctgcctacc ttctttttgg ccaattttag tgttcgtttg atcccctttt 3660

gtcgaatttt gtgactcatt ttctacaaca tattatcaaa caagcacaca acacggttca 3720

gcaacctcag attgggccta cattgctatg tgtcttgtaa cctgggagaa cagaggttta 3780

ccataccatg gaaacaaagc aaagtgaata acattttggt ggcatggccc tttagattgg 3840

ttccggtatt cctgacatgt ccaatggtca tattagactt ctgtgatatt tcagacatgg 3900

tggagcaaga gatgcgctgc aattctattt ttgtagatca ctagtgaaga attttaaatt 3960

ttatacaggt cattatgtgc cacaactagc tgaccttgtc tatgagagga acaaagacaa 4020

gaaggccagc acatacatca actttaaagg gttcattgtg agtatataat ttgatagctt 4080

ctgttgttta tattgctggt tcggccagtg gccttgttca ttcttgtttg aaaatgggat 4140

tacataatgt attgtttttt atagtttata acttcgaaat aattcatgta tttcctggga 4200

tgatttagat gaaaaatatt gcatacttat ttctgtgaaa attacaacaa tcttgggatt 4260

tgttaacctt ccgatgaact tccatttttt tctataaatg tatatattgc ctaggttttc 4320

tgtggatagt ttgaaatttt ataacatcat aacatttata ttggcccaaa tgtaggttgg 4380

aaatccatta actgatgatt attatgactc gaagggactg gccgaatatg cttggagcca 4440

tgcagttgta tcagatgaag tttatgatca gataaaaaag aattgtgatt ttagagcctc 4500

aaactggacc gatgattgca acaaagccat gaacaccatc tatggacagt accagttgat 4560

cgacatatac aacatttatg ggcccaagtg caatcttgga caaacatcat cagcatctgt 4620

tgttgacaaa gcactcaaat atagtgacca tgtaagggac agacagttta aattagaact 4680

tctgcttctg aatttctaag tatgttaatt tctttggcat ggtaggaacc tttcaggagg 4740

aggattaggt tgttctcagg atacgatgag tgctactcat cttatgctca ggagtacttc 4800

aataaggcag atgtgcaaag ggcacttcat gcaaatgtca atgggatgtt gcctgggaaa 4860

tggcaagttt gcaggtgatt tctgcagatc tttccatttt ttacctatga aattttaatc 4920

tagtaattac aacactgagt tgaattatat catgggacat agtttaaaat aagcgttgca 4980

atgttaatat agttttgatg tgattctact ttgtgtcatt aacattctat ccagggactc 5040

caaacgaatg tcaaatggac aactgccgac tcaaatttgg aaaatgctcc aaagagataa 5100

ttttacacgt ggagaagaaa ttgaatttga cttatttcca ttttcattta ccatgcagtg 5160

actccattct gaagtcgtac aacttttcgg tactttccat tctaccaata tactccaagc 5220

tcatcaaagc aggactgaga gtctggctct acaggtgtat ttctgcacct tgtaccctac 5280

caccatgtgt cagttctcat atgcattaaa agtagacact gtttgttact tccatgtact 5340

gatattatcc tcccaaatta ctttctgtaa gacggtaacc ttaaaacaca attttgctgt 5400

tctctgatgg cttaaaaatc ttagaataga tgttcttttc attggcatgt tagaataggt 5460

gctatgttgg tgttccgcaa tcggcagtga cctataattt tgtgcatgca gtggagatgc 5520

ggatggcagg gtcccagtga tcgggtcacg atattgtgtg gaagcacttg gcttgcctat 5580

caagtcacag tggcaaccat ggtacctgaa caaacaggtc agaaattctg aacaatcaag 5640

tgaacattct ctggggctac aatgatactg ctagttaagt tagtttctga atgcaatcta 5700

gactccactg gccctgacga gagagacatt tgcactgtag gttgctggaa gatttgtgga 5760

gtaccatggt atgaccatgg tgacaataag aggggctggc cacttggtac ccctcaacaa 5820

gcccacagaa gggatagcgc tgatcgacac attccttctt ggtaaacagc ttcctacaca 5880

ccgatgatgg ttaaatttgg gatcaggtga aatctaccta tgacccaaaa tgagttcaag 5940

gagagtttat gtaggaagca taacataatg cataatttct tcaaacatgg taatgttctg 6000

aattttgggg ctgatccttt ccgtggatga atctgtctta aaaaaatgtt gatgtcccat 6060

ttagaggtgc ttggtaaatt tttcattgat cagctggaca tgtattgatc aaattgagct 6120

agcgttcaag aaatgacagg tggcacatgc taatcttttt taacagtcaa ggcttaaaag 6180

ttatcttctc actaaacata taaatatata tttaaaggtt taaatggaag gaggaatcga 6240

actcaggtcg ggtaatatag aattaagggc attttttaaa aattccagtg gaatttctcg 6300

gaatcactag aattcgagtg gcatttatag tctgcagtgc catttttcaa agtttggaaa 6360

ttgcagtggc gtttctcaga atcgccagaa ttcgagtggc atttatcaaa ttaaccctaa 6420

aattatggag gaatcgaact caggtatgct agttgctagc aggcactagg aaccaatgag 6480

ccaacacatg cttggtgcta taagattaga tcttgattta cttagggaaa aaatgcggtc 6540

cttttctcac tattttttat ctgttcgttt ttcgtttctt ttccattttt ttgtttttcc 6600

tttttgcttc ttttttcttt ttgacaaaaa tgctatggtt tttaagtatt tgtaaaaaaa 6660

tacaaaagat gttagctttt tctaattttg ttcaaaaata caaatatttg cattttaatt 6720

tttttaacag aaatttaaag aaaaaatgca tcttttaaaa ttgctcagaa tgtcaaaaca 6780

taaaaaaaaa ttggaaaacg cttgcgttct gccggctgat gcgcgcagga catcatccgc 6840

ctgcgctgcc gtctaattaa acatgaccat acggtgcaac aagccacaat gtgtgatcga 6900

gacgtgcccg gattgcaaca tcattggcgt ttctgagaca ttgtcatggt tgcagaggcg 6960

agtttctgaa acatcattgt tgttgcaaag acgcgttttt caaacagatc gcacacgcct 7020

agatcaatgt cactggtgtt tttgaaacat ccccattgtt gcaaaagcat gttcctaaaa 7080

tgttgtcgca gaggcgcgtt tctgaaacat catccttatt gcagagacaa ggatctgtga 7140

gctcacggga ttgtaacatc actcatgttg ctgatatatg gccgatgttg caatgcttac 7200

gccgtcactg atagtggcga gacaaagggg acgttgaggg ccacttgatt atggttgatc 7260

tcacggtggg ggagccggcg gataactcgt agcaggactc aactgaaggg gaacgtagca 7320

tgcaatttca aaaaattcct acactcacgc aagatctatc taggagattg tgtccacgta 7380

ccctcgtaga ccgaaagcga aagcgtttga caacgcggtt gatgtagtca aacttcttgt 7440

tccgatcgat caaataccga acgtacggca ccttcgagtt ctacacacg 7489

<210> 3

<211> 23

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 3

tcatacacac ataatccagt cga 23

<210> 4

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 4

gatcgtgggt gttgcatcta t 21

Claims (2)

1.一种普通小麦高千粒重基因TaGS5-A1b-b，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

2.权利要求1所述普通小麦高千粒重基因TaGS5-A1b-b在小麦育种中的应用。