CN105580778A - 一种基于豆渣培养蝇蛆制备高活性蝇蛆蛋白的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种基于豆渣培养蝇蛆制备高活性蝇蛆蛋白的方法，属于蝇蛆蛋白制备技术领域。本发明通过取豆渣进行预处理，与酒糟、蒸馏水等混合碾磨后，添加酵母粉得蝇蛆培养物，对蝇蛆进行培养，收集幼虫冷冻碾磨后，与水、脂肪酶混合，经超声振荡处理、透析过夜、喷雾干燥制得高活性蝇蛆蛋白。本发明的有益效果是：本发明制备步骤简单，制备过程中对蛋白中的含硫氨基酸无破坏性，产品灰分含量低；所得蝇蛆蛋白品质好，活性低高于其他产品22%以上，提取率高于其他方法12%以上。
Description
技术领域
本发明涉及一种基于豆渣培养蝇蛆制备高活性蝇蛆蛋白的方法，属于蝇蛆蛋白制备技术领域。
背景技术
蝇蛆活性蛋白，不仅富含人体不可缺少的蛋白质、游离氨基酸、维生素、矿物质元素、不饱和脂肪酸，还含有大量的、独特的、宝贵的、其他任何产品没有的、对人体非常有益的几丁质、抗菌肽、防御素、外源性凝集素等多种宝贵物质。蛋白质能制造酶；帮助食物转化为能量；能够帮助机体生成新的组织细胞替代坏死的组织细胞；增加机体活性动力；为免疫系统制造抗体、抵御病毒和细菌的感染。几丁质被科学家誉为“人体生命第六要素”，它能够通便润肠，促进消化，缩短有毒物质在肠道内的停留时间，排除消化道内废毒物质。抗菌肽抑制某些肿瘤细胞的核酸代谢及其生长，而对人体的正常细胞则无害；能在24小时内杀死多种病原菌，增强人体免疫能力；可抑制肝炎病毒DNA的复制，对肝、肾起到保健疗效作用。外源性凝集素可促进细胞相互粘接并有抑制其增殖的功能。它能有效防御和治疗癌症，还有助于防止肠道炎及感染性疾病的发生。防御素属于小分子多肽，对细菌、病毒、真菌等病原微生物能产生较强的杀灭作用，可有效地防止病毒引起的多种传染性疾病。氨基酸是构成蛋白质的基本单位，蝇蛆活性蛋白含有18种以上的人体必需氨基酸，比所有动物蛋白高，对改善儿童智力发育，有着很好的作用。维生素是维持生命健康所必需的物质，其中脂溶性维生素A、D的含量和水溶性维生素B族的含量极为丰富，特别是谷物中缺乏的B2和B12含量更高。目前蝇蛆蛋白的制取方法有有机溶剂萃取法、碱提法、盐提法等。有机溶剂萃取法虽蛋白产量高，但溶剂对蛋白中的含硫氨基酸破坏性强，产品灰分含量高，品质差。碱提法、盐提法提取的蝇蛆蛋白活性低，提取率不高。因此研究出一种蝇蛆蛋白活性高、提取率高的方法，在相关领域具有重要的意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：针对目前方法提取蝇蛆蛋白由于制备过程中对蛋白中的含硫氨基酸破坏性强，产品灰分含量高，导致所得蝇蛆蛋白活性低和提取率低，品质差的弊端，提供了一种通过取豆渣进行预处理，与酒糟、蒸馏水等混合碾磨后，添加酵母粉得蝇蛆培养物，对蝇蛆进行培养，收集幼虫冷冻碾磨后，与水、脂肪酶混合，经超声振荡处理、透析过夜、喷雾干燥制得高活性蝇蛆蛋白的方法，以达到提高蝇蛆蛋白活性和品质的目的。本发明制备步骤简单，提取率高，所得产品灰分含量低。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
（1）取800～1200g豆渣放入2L的烧杯中，向烧杯中加入200～300mL质量分数为10%的盐酸溶液，将烧杯移至加热磁力搅拌器上进行加热，加热温度设定为70～80℃，加热时间为20～30min，待加热完成后过滤，收集过滤物放入烘箱中，在温度为80℃下，干燥10～15min，得预处理豆渣；
（2）按重量份数计，取60～70份上述制得的预处理豆渣、5～10份碳酸钠、10～14份酒糟及15～16份蒸馏水，放入球磨机中研磨10～25min，将所得的研磨物放入烧杯中，随后把烧杯置于紫外灯下杀菌消毒，再向杀菌消毒后的烧杯中加入研磨物质量2～4%的酵母粉，混合均匀后，得蝇蛆培养物；
（3）将上述所得的蝇蛆培养物均匀铺撒在玻璃板上，铺撒厚度为4～6cm，取铺撒的蝇蛆培养物质量的5～8%的蝇卵，均匀接种于铺撒后的蝇蛆培养物表面，再使用蝇蛆培养物对蝇卵进行覆盖，覆盖厚度为2～3cm；
（4）将上述覆盖后的玻璃板移至温室中，保持温室内的温度为25～30℃，温室内的湿度为60～65%，培养直至有幼虫出现后继续培养3～5天，然后将玻璃板从温室取出放在无光处，直至无幼虫从蝇蛆培养物内爬出后，收集幼虫；
（5）将上述收集后的幼虫放入烧瓶中，把烧瓶移入冰箱中，设定温度为0～5℃，将幼虫冷冻20～25min后，将冷冻后的幼虫放入研磨机中进行研磨，把所得的研磨物与水按质量比1:1混合均匀后放入广口瓶中，再向广口瓶中加入研磨物质量5～8%的脂肪酶，使用质量分数为10%的盐酸溶液调节广口瓶中混合物pH至6.0～6.5；
（6）待上述pH调节完成后，将广口瓶移至20KHz超声振荡器中，在35℃下振荡1～2h后，向振荡后的广口瓶中加入广口瓶中混合物质量6～10%的无水乙醇，搅拌均匀后，将广口瓶中的混合物倒入透析袋中透析过夜，然后将过夜后透析袋中的浓缩物放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到高活性蝇蛆蛋白。
本发明制得的高活性蝇蛆蛋白含量高达59～69%、脂肪9～11%、灰分3～5%、糖类2.4～2.6%，必需氨基酸总量达42.6～43.9%。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明制备步骤简单，制备过程中对蛋白中的含硫氨基酸无破坏性，产品灰分含量低；
（2）所得蝇蛆蛋白品质好，活性低高于其他产品22%以上，提取率高于其他方法12%以上。
具体实施方式
首先取800～1200g豆渣放入2L的烧杯中，向烧杯中加入200～300mL质量分数为10%的盐酸溶液，将烧杯移至加热磁力搅拌器上进行加热，加热温度设定为70～80℃，加热时间为20～30min，待加热完成后过滤，收集过滤物放入烘箱中，在温度为80℃下，干燥10～15min，得预处理豆渣；然后按重量份数计，取60～70份上述制得的预处理豆渣、5～10份碳酸钠、10～14份酒糟及15～16份蒸馏水，放入球磨机中研磨10～25min，将所得的研磨物放入烧杯中，随后把烧杯置于紫外灯下杀菌消毒，再向杀菌消毒后的烧杯中加入研磨物质量2～4%的酵母粉，混合均匀后，得蝇蛆培养物；将上述所得的蝇蛆培养物均匀铺撒在玻璃板上，铺撒厚度为4～6cm，取铺撒的蝇蛆培养物质量的5～8%的蝇卵，均匀接种于铺撒后的蝇蛆培养物表面，再使用蝇蛆培养物对蝇卵进行覆盖，覆盖厚度为2～3cm；再将上述覆盖后的玻璃板移至温室中，保持温室内的温度为25～30℃，温室内的湿度为60～65%，培养直至有幼虫出现后继续培养3～5天，然后将玻璃板从温室取出放在无光处，直至无幼虫从蝇蛆培养物内爬出后，收集幼虫；将上述收集后的幼虫放入烧瓶中，把烧瓶移入冰箱中，设定温度为0～5℃，将幼虫冷冻20～25min后，将冷冻后的幼虫放入研磨机中进行研磨，把所得的研磨物与水按质量比1:1混合均匀后放入广口瓶中，再向广口瓶中加入研磨物质量5～8%的脂肪酶，使用质量分数为10%的盐酸溶液调节广口瓶中混合物pH至6.0～6.5；最后待上述pH调节完成后，将广口瓶移至20KHz超声振荡器中，在35℃下振荡1～2h后，向振荡后的广口瓶中加入广口瓶中混合物质量6～10%的无水乙醇，搅拌均匀后，将广口瓶中的混合物倒入透析袋中透析过夜，然后将过夜后透析袋中的浓缩物放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到高活性蝇蛆蛋白。
实例1
首先取800g豆渣放入2L的烧杯中，向烧杯中加入200mL质量分数为10%的盐酸溶液，将烧杯移至加热磁力搅拌器上进行加热，加热温度设定为70℃，加热时间为20min，待加热完成后过滤，收集过滤物放入烘箱中，在温度为80℃下，干燥10min，得预处理豆渣；然后按重量份数计，取60份上述制得的预处理豆渣、10份碳酸钠、14份酒糟及16份蒸馏水，放入球磨机中研磨10min，将所得的研磨物放入烧杯中，随后把烧杯置于紫外灯下杀菌消毒，再向杀菌消毒后的烧杯中加入研磨物质量2%的酵母粉，混合均匀后，得蝇蛆培养物；将上述所得的蝇蛆培养物均匀铺撒在玻璃板上，铺撒厚度为4cm，取铺撒的蝇蛆培养物质量的5%的蝇卵，均匀接种于铺撒后的蝇蛆培养物表面，再使用蝇蛆培养物对蝇卵进行覆盖，覆盖厚度为2cm；再将上述覆盖后的玻璃板移至温室中，保持温室内的温度为25℃，温室内的湿度为60%，培养直至有幼虫出现后继续培养3天，然后将玻璃板从温室取出放在无光处，直至无幼虫从蝇蛆培养物内爬出后，收集幼虫；将上述收集后的幼虫放入烧瓶中，把烧瓶移入冰箱中，设定温度为0℃，将幼虫冷冻20min后，将冷冻后的幼虫放入研磨机中进行研磨，把所得的研磨物与水按质量比1:1混合均匀后放入广口瓶中，再向广口瓶中加入研磨物质量5%的脂肪酶，使用质量分数为10%的盐酸溶液调节广口瓶中混合物pH至6.0；最后待上述pH调节完成后，将广口瓶移至20KHz超声振荡器中，在35℃下振荡1h后，向振荡后的广口瓶中加入广口瓶中混合物质量6%的无水乙醇，搅拌均匀后，将广口瓶中的混合物倒入透析袋中透析过夜，然后将过夜后透析袋中的浓缩物放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到高活性蝇蛆蛋白。本发明制备步骤简单，制备过程中对蛋白中的含硫氨基酸无破坏性，产品灰分含量低；所得蝇蛆蛋白品质好，活性低高于其他产品22.3%，提取率高于其他方法12.2%；制得的高活性蝇蛆蛋白含量高达59%%、脂肪9%、灰分3%、糖类2.4%，必需氨基酸总量达42.6%。
实例2
首先取1000g豆渣放入2L的烧杯中，向烧杯中加入250mL质量分数为10%的盐酸溶液，将烧杯移至加热磁力搅拌器上进行加热，加热温度设定为75℃，加热时间为25min，待加热完成后过滤，收集过滤物放入烘箱中，在温度为80℃下，干燥13min，得预处理豆渣；然后按重量份数计，取65份上述制得的预处理豆渣、7份碳酸钠、12份酒糟及16份蒸馏水，放入球磨机中研磨17min，将所得的研磨物放入烧杯中，随后把烧杯置于紫外灯下杀菌消毒，再向杀菌消毒后的烧杯中加入研磨物质量3%的酵母粉，混合均匀后，得蝇蛆培养物；将上述所得的蝇蛆培养物均匀铺撒在玻璃板上，铺撒厚度为5cm，取铺撒的蝇蛆培养物质量的7%的蝇卵，均匀接种于铺撒后的蝇蛆培养物表面，再使用蝇蛆培养物对蝇卵进行覆盖，覆盖厚度为2cm；再将上述覆盖后的玻璃板移至温室中，保持温室内的温度为28℃，温室内的湿度为63%，培养直至有幼虫出现后继续培养4天，然后将玻璃板从温室取出放在无光处，直至无幼虫从蝇蛆培养物内爬出后，收集幼虫；将上述收集后的幼虫放入烧瓶中，把烧瓶移入冰箱中，设定温度为3℃，将幼虫冷冻23min后，将冷冻后的幼虫放入研磨机中进行研磨，把所得的研磨物与水按质量比1:1混合均匀后放入广口瓶中，再向广口瓶中加入研磨物质量6%的脂肪酶，使用质量分数为10%的盐酸溶液调节广口瓶中混合物pH至6.3；最后待上述pH调节完成后，将广口瓶移至20KHz超声振荡器中，在35℃下振荡2h后，向振荡后的广口瓶中加入广口瓶中混合物质量8%的无水乙醇，搅拌均匀后，将广口瓶中的混合物倒入透析袋中透析过夜，然后将过夜后透析袋中的浓缩物放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到高活性蝇蛆蛋白。本发明制备步骤简单，制备过程中对蛋白中的含硫氨基酸无破坏性，产品灰分含量低；所得蝇蛆蛋白品质好，活性低高于其他产品22.9%，提取率高于其他方法12.8%；制得的高活性蝇蛆蛋白含量高达64%、脂肪10%、灰分4%、糖类2.5%，必需氨基酸总量达43.2%。
实例3
首先取1200g豆渣放入2L的烧杯中，向烧杯中加入300mL质量分数为10%的盐酸溶液，将烧杯移至加热磁力搅拌器上进行加热，加热温度设定为80℃，加热时间为30min，待加热完成后过滤，收集过滤物放入烘箱中，在温度为80℃下，干燥15min，得预处理豆渣；然后按重量份数计，取70份上述制得的预处理豆渣、5份碳酸钠、10份酒糟及15份蒸馏水，放入球磨机中研磨25min，将所得的研磨物放入烧杯中，随后把烧杯置于紫外灯下杀菌消毒，再向杀菌消毒后的烧杯中加入研磨物质量4%的酵母粉，混合均匀后，得蝇蛆培养物；将上述所得的蝇蛆培养物均匀铺撒在玻璃板上，铺撒厚度为6cm，取铺撒的蝇蛆培养物质量的8%的蝇卵，均匀接种于铺撒后的蝇蛆培养物表面，再使用蝇蛆培养物对蝇卵进行覆盖，覆盖厚度为3cm；再将上述覆盖后的玻璃板移至温室中，保持温室内的温度为30℃，温室内的湿度为65%，培养直至有幼虫出现后继续培养5天，然后将玻璃板从温室取出放在无光处，直至无幼虫从蝇蛆培养物内爬出后，收集幼虫；将上述收集后的幼虫放入烧瓶中，把烧瓶移入冰箱中，设定温度为5℃，将幼虫冷冻25min后，将冷冻后的幼虫放入研磨机中进行研磨，把所得的研磨物与水按质量比1:1混合均匀后放入广口瓶中，再向广口瓶中加入研磨物质量8%的脂肪酶，使用质量分数为10%的盐酸溶液调节广口瓶中混合物pH至6.5；最后待上述pH调节完成后，将广口瓶移至20KHz超声振荡器中，在35℃下振荡2h后，向振荡后的广口瓶中加入广口瓶中混合物质量10%的无水乙醇，搅拌均匀后，将广口瓶中的混合物倒入透析袋中透析过夜，然后将过夜后透析袋中的浓缩物放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到高活性蝇蛆蛋白。本发明制备步骤简单，制备过程中对蛋白中的含硫氨基酸无破坏性，产品灰分含量低；所得蝇蛆蛋白品质好，活性低高于其他产品23.5%，提取率高于其他方法13.7%；制得的高活性蝇蛆蛋白含量高达69%、脂肪11%、灰分5%、糖类2.6%，必需氨基酸总量达43.9%。
Claims (1)
1.一种基于豆渣培养蝇蛆制备高活性蝇蛆蛋白的方法，其特征在于具体制备步骤为：
（1）取800～1200g豆渣放入2L的烧杯中，向烧杯中加入200～300mL质量分数为10%的盐酸溶液，将烧杯移至加热磁力搅拌器上进行加热，加热温度设定为70～80℃，加热时间为20～30min，待加热完成后过滤，收集过滤物放入烘箱中，在温度为80℃下，干燥10～15min，得预处理豆渣；
（2）按重量份数计，取60～70份上述制得的预处理豆渣、5～10份碳酸钠、10～14份酒糟及15～16份蒸馏水，放入球磨机中研磨10～25min，将所得的研磨物放入烧杯中，随后把烧杯置于紫外灯下杀菌消毒，再向杀菌消毒后的烧杯中加入研磨物质量2～4%的酵母粉，混合均匀后，得蝇蛆培养物；
（3）将上述所得的蝇蛆培养物均匀铺撒在玻璃板上，铺撒厚度为4～6cm，取铺撒的蝇蛆培养物质量的5～8%的蝇卵，均匀接种于铺撒后的蝇蛆培养物表面，再使用蝇蛆培养物对蝇卵进行覆盖，覆盖厚度为2～3cm；
（4）将上述覆盖后的玻璃板移至温室中，保持温室内的温度为25～30℃，温室内的湿度为60～65%，培养直至有幼虫出现后继续培养3～5天，然后将玻璃板从温室取出放在无光处，直至无幼虫从蝇蛆培养物内爬出后，收集幼虫；
（5）将上述收集后的幼虫放入烧瓶中，把烧瓶移入冰箱中，设定温度为0～5℃，将幼虫冷冻20～25min后，将冷冻后的幼虫放入研磨机中进行研磨，把所得的研磨物与水按质量比1:1混合均匀后放入广口瓶中，再向广口瓶中加入研磨物质量5～8%的脂肪酶，使用质量分数为10%的盐酸溶液调节广口瓶中混合物pH至6.0～6.5；
（6）待上述pH调节完成后，将广口瓶移至20KHz超声振荡器中，在35℃下振荡1～2h后，向振荡后的广口瓶中加入广口瓶中混合物质量6～10%的无水乙醇，搅拌均匀后，将广口瓶中的混合物倒入透析袋中透析过夜，然后将过夜后透析袋中的浓缩物放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到高活性蝇蛆蛋白。
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|---|---|---|---|
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Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106973862A (zh) * | 2017-04-13 | 2017-07-25 | 广东人为峰健康管理有限公司 | 一种利用水果废弃物进行蝇蛆养殖的方法 |
| CN106973863A (zh) * | 2017-04-18 | 2017-07-25 | 广东人为峰健康管理有限公司 | 一种以食用菌培养基废料进行蝇蛆培养的方法 |
| CN107047481A (zh) * | 2017-03-22 | 2017-08-18 | 广东人为峰健康管理有限公司 | 一种基于高营养性培养基制备高活性果蝇蛋白质的方法 |
| CN107736309A (zh) * | 2017-11-16 | 2018-02-27 | 罗乌支 | 一种含高脂肪蝇蛆的养殖方法 |
| CN112790160A (zh) * | 2020-12-24 | 2021-05-14 | 周君荣 | 一种新型动物饲料 |
| CN114847402A (zh) * | 2022-06-07 | 2022-08-05 | 上海博弘环境科技有限公司 | 一种蝇蛆粉的制备方法 |
-
2016
- 2016-02-04 CN CN201610078575.4A patent/CN105580778A/zh not_active Withdrawn
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