CN105578890B - 人类膳食等效物动物饲料 - Google Patents

Abstract

本发明提供用于形成用于动物饲料中的人类膳食等效物的方法、包含人类膳食等效物的动物饲料组合物以及用于将人类食物加工成动物饲料口粮的方法。

Description

人类膳食等效物动物饲料

相关申请的交叉引用

本申请要求2013年7月1日提交的美国临时申请号61/841,786和2013年8月22日提交的美国临时申请号61/869,047的优先权，这些临时申请各自以引用的方式整体并入本文中。

发明领域

本发明提供包含人类膳食等效物的动物饲料组合物，以及用于将人类食物加工成动物饲料口粮(animal feed ration)的方法。

发明背景

当动物模型用于人类疾病研究中时，它们经常被选择，因为它们在遗传学、解剖学以及生理学方面与人类具相似性。另外，在实验疾病研究中动物模型往往是优选的，因为它们易于操纵。举例来说，为获得科学有效的研究，必须严格控制与实验相关的条件。这往往意味着仅操纵一个变量，同时保持其他变量恒定，并且然后观测变化的结果。此外，为检验关于疾病如何发展的假设，必须使用足够数目的受试者来在统计学上测试实验结果。因此，科学工作者不能仅仅对一种动物或人类进行研究，并且科学工作者更容易使用足够大量的动物(而不是人)来获得显著结果。

膳食和营养状态属于人体健康的极其可变的决定因素。食物的营养价值部分受人肠道微生物群落(微生物群)和其组分基因(微生物组)的影响。人类环境暴露、微生物生态以及基因型的变化使阐明膳食、肠道微生物群的结构和操作以及收获营养素和能量之间的相互关系是困难的。人类肠道生态系统的动物模型有助于提高我们对这些复杂关系的理解。在动物膳食中也需要类似提高。

历史上，设法理解膳食的作用的研究一直是依赖于补充有一种或多种营养素的传统动物食物或餐厅膳食途径(Free Radical Biology and Medicine(2013)65：254-261；Physiology and Behavior(1977)18：1021-1026；Obesity(2011)19：1109-1117)。两种途径均未能反映人类消耗模式，它们也不严格确保营养充足并且一致。因此，本领域中仍需要以允许动物得到等效于特定人类亚群体的代表性膳食的控制量和比率的食物的形式更密切反映人类食物消耗模式的动物饲料口粮。

发明概述

在一个方面中，本公开涵盖一种动物饲料组合物。动物饲料组合物包含人类膳食等效物。人类膳食等效物由以湿重计45-53％碳水化合物、以湿重计1-4％总膳食纤维、以湿重计20-25％脂肪、7-9％总饱和脂肪酸、83-88mg胆固醇/100g总膳食(TD)、以湿重计19-23％蛋白质、800-1000mg钠/100gTD、300-500mg钾/100g TD、以湿重计4-8％水分以及4.6-4.9千卡/g TD组成。人类膳食等效物由确定比率的八个食物组制成。八个食物组由如表A中所呈现的八位数字食物编码的头三位或四位数字识别的食物项目组成。奶和奶制品的食物编码第一位数字是1并且以湿重计是5-25％。肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类的食物编码第一位数字选自由2、3以及4组成的组并且以湿重计是10-25％。谷物制品的食物编码第一位数字是5并且以湿重计是10-20％。水果的食物编码第一位数字是6并且以湿重计是0-1％。蔬菜的食物编码第一位数字是7并且以湿重计是0-1％。脂肪和油的食物编码第一位数字是8并且以湿重计是0.5-5.0％。糖和甜食的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是1，并且以湿重计是0.5-5.0％。饮料的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是2或3，并且以湿重计是0.5-5.0％。

在另一个方面中，本公开涵盖一种动物饲料组合物。动物饲料组合物包含人类膳食等效物。人类膳食等效物由以湿重计57-64％碳水化合物、以湿重计3-7％总膳食纤维、以湿重计10-15％脂肪、2.0-3.5％总饱和脂肪酸、35-40mg胆固醇/100g TD、以湿重计13-17％蛋白质、300-500mg钠/100g TD、500-700mg钾/100g TD、以湿重计4-8％水分以及4.0-4.4千卡/g TD组成。人类膳食等效物由确定比率的八个食物组制成。八个食物组由如表A中所呈现的八位数字食物编码的头三位或四位数字识别的食物项目组成。奶和奶制品的食物编码第一位数字是1并且以湿重计是5-25％。肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类的食物编码第一位数字选自由2、3以及4组成的组并且以湿重计是10-25％。谷物制品的食物编码第一位数字是5并且以湿重计是10-20％。水果的食物编码第一位数字是6并且以湿重计是10-25％水果。蔬菜的食物编码第一位数字是7并且以湿重计是10-25％。脂肪和油的食物编码第一位数字是8并且以湿重计是0.5-5％。糖和甜食的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是1并且以湿重计是0.5-5％糖和甜食。饮料的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是2或3，并且以湿重计是10-60％饮料。

在另一个方面中，本公开涵盖一种制备球粒化动物饲料的方法。该方法包括(i)将两种或更多种独立地选自由冷冻食物项目、冷藏食物项目以及室温食物项目组成的组的食物项目引入第一混合器并且掺混食物项目，其中第一混合器是高剪切液体混合器；(ii)将经掺混食物项目传送和/或再循环至第二混合器中以形成均质复合物，其中第二混合器是转子-定子混合器并且均质化混合通过视觉检查是均匀掺混的；(iii)将均质复合物冷冻干燥并且将脱水复合物研磨至20目大小，其中脱水复合物的水分含量低于5％；以及(iv)添加水至经研磨复合物中并且挤压成球粒，其中在挤压工艺结束时复合物的水分含量低于10％。

在另一个方面中，本公开涵盖一种确定至少一种膳食补充剂对受试者的影响的方法。该方法包括向受试者施用或饲喂本文所描述的进一步包含至少一种膳食补充剂的组合物中的任一种组合物，以及确定在施用包含膳食补充剂的组合物之后在受试者中存在或不存在差异。在受试者中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。

在另一个方面中，本公开涵盖一种确定至少一种膳食补充剂对受试者的影响的方法。该方法包括(1)在第一段时间内向受试者施用或饲喂第一组合物，其中第一组合物是本文所公开的组合物，(2)在第二段时间内向受试者施用或饲喂第二组合物，其中第二组合物由第一组合物和至少一种膳食补充剂组成，以及(3)确定在施用或饲喂第二组合物之后在受试者中存在或不存在差异。在受试者中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。

在另一个方面中，本公开涵盖一种确定至少一种膳食补充剂对受试者的影响的方法。该方法包括(1)在第一段时间内向受试者施用或饲喂第一组合物，其中第一组合物是本文所公开的组合物和至少一种膳食补充剂，(2)在第二段时间内向受试者施用或饲喂第二组合物，其中第二组合物由不具有至少一种膳食补充剂的第一组合物组成，以及(3)确定在施用或饲喂第二组合物之后在受试者中存在或不存在差异。在受试者中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。

附图简述

申请文件含有至少一个以彩色显示的附图。在有要求并且支付必要费用后，办公室将提供此具有彩色附图的专利申请公布的副本

图1示出生产工艺流程图。

发明详述

本发明涵盖用于产生用于动物饲料中的人类膳食等效物的方法、包含人类膳食等效物的动物饲料组合物以及用于将人类食物加工成均质动物饲料口粮的方法。关键是，将人类食物转化成均质动物饲料口粮的本发明方法在保留营养素的同时提供呈合适定量份的食物的均匀混合物。此方法还通过产生对动物来说可口的食物均质复合物克服与进食特定苦味和酸味食物有关的任何味道问题。因此，动物饲料组合物精确地模仿人类膳食，递送已知量和比率的营养素，并且可加工成结构上稳定的形式。可使用一个或多个食物项目的量不同的动物饲料组合物来测试膳食对小鼠模型的各个方面的影响，并且其尤其非常适合于测试肠道微生物如何适合于膳食扰动。下文进一步详细描述用于由人类膳食衍生动物饲料组合物的方法、包含人类膳食等效物的动物饲料组合物以及用于产生组合物的方法。

I.用于制备用于动物饲料中的人类膳食等效物的方法

本发明涵盖用于产生用于动物饲料口粮中的人类膳食等效物的方法。一般说来，人类膳食等效物由一种或多种表现特定人类膳食的特征的食物构建。换言之，人类膳食等效物包含至少一种典型地由人类消耗的食物项目。术语“食物”和“食物项目”定义于下文中。用于产生人类膳食等效物的方法典型地包括(i)收集关于人吃什么的信息，(ii)分析数据以识别一个或多个亚群，(iii)识别一种或多种表现亚群特征的食物，以及(iv)确定有待包括于人类膳食等效物中的各特征性食物项目的比例。

在一个方面中，本发明使用多种方法来收集关于人吃什么的信息。此类信息是为确定人典型地所吃的食物所需要的。适合用于收集关于人吃什么的信息的方法是本领域中已知的，并且可包括但不限于24小时回顾和由个体记录的食物日记。本领域技术人员可进行食物调查或可依靠先前进行的食物调查。此类调查是本领域技术人员熟知的并且可包括但不限于作为国家健康和营养检验调查(National Health and Nutrition ExaminationSurvey，NHANES)的膳食摄入访问组成部分的在美国我们吃什么(What We Eat inAmerica，WWEIA)、美国农业部(United States Department of Agriculture，USDA)全国性食物调查以及由联合国粮农组织(Food and Agricultural Organization of the UnitedNations)进行的世界食物调查。

在数据收集之后，本领域技术人员需要一种途径来将食物摄入数据转化成可用于分析的形式。在一些实施方案中，使用USDA膳食研究食物和营养素数据库(Food andNutrient Database for Dietary Studies，FNDDS)。USDA FNDDS是用于编码膳食摄入量并且计算WWEIA和其他食物调查的营养素的资源。FNDDS是基于USDA国家营养素标准参考数据库第22次发行版本(National Nutrient Database for Standard Reference，Release22)(农业研究局，营养数据实验室，2009)中的营养素值。可使用其他适合的食物编码方案，前提条件是该方案提供典型食物部分和食物项目的营养素值和重量。

USDA FNDDS提供关于特定食物的独特的八位数字食物编码。此食物编码方案通过食物编码的头1至4位数字提供对主要食物组和亚组的概述。编码方案呈现于表A中。食物编码中的第一位数字识别九个主要食物组中的一种：(1)奶和奶制品，(2)肉、禽、鱼以及混合物，(3)蛋，(4)豆类、坚果以及籽粒，(5)谷物制品，(6)水果，(7)蔬菜，(8)脂肪、油以及色拉调味汁，以及(9)糖、甜食以及饮料。食物编码的第二、第三以及(有时)第四位数字识别九个主要食物组内的日益增多的特定亚组。大多数字亚组由头三位数字识别，除了肉、禽、鱼以及混合物和糖、甜食以及饮料部分中的一些亚组。如本文所用，“食物项目”是指由完整的八位数字FNDDS编码表示的食物或其等效物。如本文所用，术语“食物”可指食物项目、食物亚组(即八位数字FNDDS食物编码的第二、第三或第四位数字，或其等效物)或主要食物组(即八位数字FNDDS食物编码的第一位数字，或其等效物)。术语“食物”包括食物与饮料两者。关于USDA FNDDS的其他细节可见于以全文引用的方式并入本文中的The USDA Food andNutrient Database for Dietary Studies，4.1-Documentation and User Guide(2010.Beltsville，MD：U.S.Department of Agriculture，Agricultural ResearchService，Food Surveys Research Group)中。

在一个方面中，本发明使用通过将群体的一种或多种膳食模式特征化来识别总群体内的一个或多个亚群的方法。可基于对总每日食物摄取量的消耗的分析来识别亚群。举例来说，可基于对所消耗的所有食物的分析、对所消耗食物类型的量的分析、对由所消耗的一种或多种食物类型得到的卡路里或其组合来识别亚群。其他适合用于分析的亚群对本领域技术人员来说也将是显而易见的并且由本发明涵盖。在一些实施方案中，可基于对至少一种食物的消耗的分析来识别亚群。在其他实施方案中，可基于对至少两种食物的消耗的分析来识别亚群。在其他实施方案中，可基于对至少三种食物的消耗的分析来识别亚群。在其他实施方案中，可基于对至少四种食物的消耗的分析来识别亚群。在不同实施方案中，可基于对至少五种食物的消耗的分析来识别亚群。在各个以上实施方案中，可在主要食物组水平(即八位数字FNDDS食物编码的第一位数字，或其等效物)、在食物亚组水平(即八位数字FNDDS食物编码的第二、第三或第四位数字，或其等效物)或在食物项目水平(即完整的八位数字FNDDS编码，或其等效物)进行分析。

还可以基于对所消耗食物的营养分析来识别亚群。适合的营养素和食物相关化合物可包括但不限于总脂肪、饱和脂肪、单不饱和脂肪、多不饱和脂肪、反式饱和脂肪、胆固醇、碳水化合物、总糖、膳食纤维、维生素A、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K1、硫胺素、核黄素、烟酸、叶酸盐、泛酸、钙、磷、镁、锰、铁、锌、铜、硒、钠、钾、果糖、蔗糖、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、脂肪酸分布、氨基酸分布、β胡萝卜素、视黄醇、α生育酚、β生育酚、γ生育酚、δ生育酚、α生育三烯酚、β生育三烯酚、γ生育三烯酚、δ生育三烯酚、阿朴-8-胡萝卜素醛、反-番茄红素、顺-番茄红素、反-β-胡萝卜素、顺-β-胡萝卜素、咖啡因以及其组合。在一些实施方案中，可基于对至少一种营养素的消耗的分析来识别亚群。在其他实施方案中，可基于对至少两种营养素的消耗的分析来识别亚群。在其他实施方案中，可基于对至少三种营养素的消耗的分析来识别亚群。在其他实施方案中，可基于对至少四种营养素的消耗的分析来识别亚群。在不同实施方案中，可基于对至少五种营养素的消耗的分析来识别亚群。

在优选实施方案中，可基于饱和脂肪摄入量来识别亚群。在其他优选实施方案中，可基于总水果摄入量来识别亚群。在其他优选实施方案中，可基于总蔬菜摄入量来识别亚群。在其他优选实施方案中，可基于总水果和蔬菜摄入量来识别亚群。在其他优选实施方案中，可基于饱和脂肪摄入量和总蔬菜摄入量或总水果摄入量来识别亚群。在其他优选实施方案中，可基于饱和脂肪摄入量和总水果和蔬菜摄入量来识别亚群。

一旦已如以上所描述确定了各分组的基础，即可将总样本分成两个或更多个亚群。举例来说，总样本可分成两个一组、三个一组、四个一组、五个一组、六个一组、七个一组、八个一组、九个一组或十个或更多个一组。或者，总样本可分成10、20、30、40、50、60、70、80、90或100个或更多个一组。各组可能或可能不是同样地划分，这取决于所进行的统计分析的类型。适合的方法是本领域中熟知的。术语“高”和“低”可表示分布中的最高和最低组，或分布中的最低组和最高组的一些组合。在一些实施方案中，总样本可划分成五分位组(quintile)。在优选实施方案中，总样本可划分成三分位组(tertile)。

在优选实施方案中，第一亚群包含最高五分位饱和脂肪摄入量和最低五分位水果和蔬菜摄入量，并且第二亚群包含最低五分位饱和脂肪摄入量和最高五分位水果和蔬菜摄入量。在另一示例性实施方案中，第一亚群由最高五分位饱和脂肪摄入量和最低五分位水果和蔬菜摄入量组成，并且第二亚群由最低五分位饱和脂肪摄入量和最高五分位水果和蔬菜摄入量组成。在一个示例性实施方案中，五分位是三分位。

在另一个方面中，本发明提供用于识别表现亚群的膳食特征的食物的方法。该方法包括识别表现亚群的膳食特征的食物组和亚组(即“主要食物组”或“主要食物亚组”)，并且然后选择一种或多种表现主要食物组或主要食物亚组的特征的食物项目。

一般说来，对于各亚群，可通过测定主要食物组和食物亚组的相对能量摄取和消耗单个食物亚组内的食物的亚群的比例来识别主要食物亚组。优选地，使用以下准则来识别主要食物亚组：(1)每1000千卡总膳食提供低于20千卡(即低于2.0％的能量)的食物亚组不在考虑范围之内；(2)在每1000千卡总膳食提供20至50千卡(即2.0至5.0％的能量)的各食物亚组内，代表最大能量来源的单个食物亚组被选择作为主要食物亚组；(3)在每1000千卡总膳食提供超过50千卡(即超过总能量的5.0％)的各食物组内，满足遵循以下两个准则中的至少一种的所有食物亚组均视为主要食物亚组：(a)对于食物组来说每1000千卡贡献至少10％千卡数字并且被至少10％的亚群消耗，或(b)被20％或更大比例的亚群消耗。最后，一旦已识别各主要食物组或主要食物亚组，就将报导回顾当天的消耗的最大权重比例的亚群成员情况下的食物编码选择为表现整个食物组或主要食物亚组的特征的主要食物项目。

在另一个方面中，本发明使用多种方法来测定有待包括于动物饲料组合物中的各特征食物的比例。该方法包括测定主要食物亚组对食物组的总能量摄入量(每1000千卡总膳食)的相对能量贡献，并且然后测定每1000千卡总膳食需要由相关食物组递送所计算的能量贡献的食物项目的重量(g)。

II.包含由一种或多种表现HISF-LOFV膳食或LOSF-HIFV膳食的特征的食物构建的 人类膳食等效物的动物饲料组合物

在另一个方面中，本发明涵盖一种包含人类膳食等效物的动物饲料组合物，该人类膳食等效物由一种或多种表现高饱和脂肪、低水果和蔬菜膳食(HiSF-LoFV膳食)或低饱和脂肪、高水果和蔬菜膳食(LoSF-HiFV膳食)的特征的食物构建。构建人类膳食等效物的方法描述于上文中。

由一种或多种表现HiSF-LoFV膳食或LoSF-HiFV膳食的特征食物构建的人类膳食等效物针对各特定膳食具有合适比例的营养素。在一些实施方案中，人类膳食等效物由以湿重计45-53％碳水化合物、以湿重计1-10％总膳食纤维、以湿重计20-25％脂肪、7-9％总饱和脂肪酸、83-88mg胆固醇/100g总膳食(TD)、以湿重计19-23％蛋白质、800-1000mg钠/100g TD、300-500mg钾/100g TD、以湿重计4-8％水分及4.6-4.9千卡/g TD组成。在其他实施方案中，人类膳食等效物由以湿重计45-53％碳水化合物、以湿重计1-4％总膳食纤维、以湿重计20-25％脂肪、7-9％总饱和脂肪酸、83-88mg胆固醇/100g TD、以湿重计19-23％蛋白质、800-1000mg钠/100g TD、300-500mg钾/100gTD、以湿重计4-8％水分及4.6-4.9千卡/gTD组成。在其他实施方案中，人类膳食等效物由以湿重计57-64％碳水化合物、以湿重计1-10％总膳食纤维、以湿重计10-15％脂肪、2.0-3.5％总饱和脂肪酸、35-40mg胆固醇/100gTD、以湿重计13-17％蛋白质、300-500mg钠/100g TD、500-700mg钾/100g TD、以重量计4-8％水分以及4.0-4.4千卡/g TD组成。在其他实施方案中，人类膳食等效物由以湿重计57-64％碳水化合物、以湿重计3-7％总膳食纤维、以湿重计10-15％脂肪、2.0-3.5％总饱和脂肪酸、35-40mg胆固醇/100g TD、以湿重计13-17％蛋白质、300-500mg钠/100g TD、500-700mg钾/100g TD、以重量计4-8％水分以及4.0-4.4千卡/g TD组成。

优选地，本发明的人类膳食等效物由确定比率的八个食物组制成，该八个食物组选自(i)奶和奶制品，(ii)肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类，(iii)谷物制品，(iv)水果，(v)蔬菜，(vi)脂肪和油，(vii)糖和甜食，以及(viii)饮料。在一些实施方案中，八个食物组由由如表A中所呈现的八位数字食物编码的头三位或四位数字识别的食物项目组成，其中(i)奶和奶制品的食物编码第一位数字是1，(ii)肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类的食物编码第一位数字选自由2、3以及4组成的组，(iii)谷物制品的食物编码第一位数字是5，(iv)水果的食物编码第一位数字是6，(v)蔬菜的食物编码第一位数字是7，(vi)脂肪和油的食物编码第一位数字是8，(vi)糖和甜食的第一食物编码第一位数字是9并且第二位数字是1，并且(h)饮料的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是2或3。在其他实施方案中，八个食物组由根据不同食物方案确定的食物项目组成。

由确定比率的八个食物组构建人类膳食等效物确保存在于动物饲料中的营养素反映等效人类膳食中营养素的比例。在人类膳食等效物由一种或多种表现HiSF-LoFV膳食的特征的食物构建的实施方案中，八个食物组的比率可以是以湿重计约5-25％奶和奶制品；以湿重计约10-25％肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类；以湿重计约10-20％谷物制品；以湿重计约0-1％水果；以湿重计约0-1％蔬菜；以湿重计约0.5-5.0％脂肪和油；以湿重计约0.5-5.0％糖和甜食；以及以湿重计约10-60％饮料。在一个优选实施方案中，八个食物组的比率可以是以湿重计约18.9％奶和奶制品，(b)以湿重计约18.0％肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类，(c)以湿重计约16.3％谷物制品，(d)以湿重计约0.0％水果，(e)以湿重计约0.8％蔬菜，(f)以湿重计约0.6％脂肪和油，(g)以湿重计约1.2％糖和甜食，以及(h)以湿重计约44.2％饮料。

在人类膳食等效物由一种或多种表现LoSF-HiFV膳食的特征的食物构建的实施方案中，八个食物组的比率可以是以湿重计约5-25％奶和奶制品，(b)以湿重计约10-25％肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类，(c)以湿重计1约0-20％谷物制品，(d)以湿重计约10-25％水果，(e)以湿重计1约0-25％蔬菜，(f)以湿重计约0.5-5％脂肪和油，(g)以湿重计约0.5-5％糖和甜食，以及(h)以湿重计约10-60％饮料。在一个优选实施方案中，八个食物组的比率可以是以湿重计约10.2％奶和奶制品，(b)以湿重计约15.7％肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类，(c)以湿重计约12.7％谷物制品，(d)以湿重计约19.5％水果，(e)以湿重计约18％蔬菜，(f)以湿重计约0.9％脂肪和油，(g)以湿重计约0.6％糖和甜食，以及(h)以湿重计约22.2％饮料。

包含人类膳食等效物的食物项目的数量可不同，前提条件是人类膳食等效物具有合适比例的营养素和/或恰当比率的八个食物组。一般说来，人类膳食等效物由至少6个食物项目组成。举例来说，人类膳食等效物可包含至少6、至少7、至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20、至少21、至少22、至少23、至少24、至少25、至少26、至少27、至少28、至少29或至少30个食物项目。

在一个优选实施方案中，动物饲料组合物包含人类膳食等效物，人类膳食等效物由以湿重计45-53％碳水化合物、以湿重计1-4％总膳食纤维、以湿重计20-25％脂肪、7-9％总饱和脂肪酸、83-88mg胆固醇/100g TD、以湿重计19-23％蛋白质、800-1000mg钠/100gTD、300-500mg钾/100g TD、以湿重计4-8％水分及4.6-4.9千卡/g TD组成；其中人类膳食等效物由确定比率的八个食物组制成，八个食物组由如表A中所呈现的八位数字食物编码的头三位或四位数字识别的食物项目组成，其中(a)奶和奶制品的食物编码第一位数字是1，并且以湿重计是5-25％；(b)肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类的食物编码第一位数字选自由2、3以及4组成的组，并且以湿重计是10-25％；(c)谷物制品的食物编码第一位数字是5，并且以湿重计是10-20％；(d)水果的食物编码第一位数字是6，并且以湿重计是0-1％；(e)蔬菜的食物编码第一位数字是7，并且以湿重计是0-1％；(f)脂肪和油的食物编码第一位数字是8，并且以湿重计是0.5-5.0％；(g)糖和甜食的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是1，并且以湿重计是0.5-5.0％；并且(h)饮料的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是2或3，并且以湿重计是0.5-5.0％。

在另一优选实施方案中，动物饲料组合物包含人类膳食等效物，人类膳食等效物由以湿重计57-64％碳水化合物、以湿重计3-7％总膳食纤维、以湿重计10-15％脂肪、2.0-3.5％总饱和脂肪酸、35-40mg胆固醇/100g TD、13-17％以湿重计蛋白质、300-500mg钠/100g TD、500-700mg钾/100g TD、以湿重计4-8％水分以及4.0-4.4千卡/g TD组成；其中人类膳食等效物由确定比率的八个食物组制成，八个食物组由如表A中所呈现的八位数字食物编码的头三位或四位数字识别的食物项目组成，其中(a)奶和奶制品的食物编码第一位数字是1，并且以湿重计是5-25％，(b)肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒以及豆类的食物编码第一位数字选自由2、3以及4组成的组，并且以湿重计是10-25％，(c)谷物制品的食物编码第一位数字是5，并且以湿重计是10-20％，(d)水果的食物编码第一位数字是6，并且以湿重计是10-25％水果，(e)蔬菜的食物编码第一位数字是7，并且以湿重计是10-25％，(f)脂肪和油的食物编码第一位数字是8，并且以湿重计是0.5-5％，(g)糖和甜食的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是1，并且以湿重计是0.5-5％糖和甜食，并且(h)饮料的食物编码第一位数字是9并且第二位数字是2或3，并且以湿重计是10-60％饮料。

在一个实施方案中，组合物可进一步包含膳食补充剂。如本文所用，“膳食补充剂”是添加至本文所描述的组合物中的任何组分。膳食补充剂可以是一定量的如本文所定义的食物或食物项目。膳食补充剂的非限制性实例可以是奶或奶制品、肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒、豆类、谷物、水果、蔬菜、脂肪、油、糖、甜食、饮料、维生素、矿物质、草药、药材以及氨基酸。举例来说，膳食补充剂可以是阿萨伊、真芦荟、合成代谢类固醇、黄芪、越桔、苦橙、黑升麻、款冬、钙、肉毒碱、软骨(牛和鲨鱼)、猫爪、甘菊、圣洁莓、软骨素、铬、肉桂、辅酶Q10、胶态银、蔓越莓、维生素C、蒲公英、紫锥菊、麻黄、依西亚克/富萝精华茶(essiac/flor-essence)、欧洲接骨木、月见草油、胡芦巴、小白菊、鱼油、亚麻籽、叶酸盐、大蒜、姜、银杏、人参、葡糖胺、白毛茛、葡萄籽提取物、绿茶、山楂、蝴蝶亚、七叶树、碘、铁、卡瓦胡椒、熏衣草、甘草、镁、褪黑激素、水飞蓟、槲寄生、诺丽、ω-3脂肪酸、PC-SPES、薄荷油、红三叶草、鼠尾草、SAMe(S-腺苷基-L-甲硫胺酸)、锯叶棕、硒、大豆、圣约翰草、茶、雷公藤、姜黄、缬草、维生素A、维生素B12、维生素B6、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、育亨宾以及锌。另外，膳食补充剂可源自于食物或食物项目。举例来说，膳食补充剂可源自于谷粒、豆类、坚果、籽粒、水果和/或蔬菜。膳食补充剂可以是不易消化碳水化合物和抗氧化剂含量高的。不易消化碳水化合物和抗氧化剂含量高的膳食补充剂的适合的实例可包括龙舌兰、菊苣、香焦、大麦、荞麦、加那利籽、奇亚(chia)、可可、咖啡、玉米、福尼奥米、葡萄、瓜耳豆、薏仁、粟、粟籽、燕麦、奎奴亚藜(quinoa)、稻米、黑麦、蜀粟、大豆、斯佩耳特小麦、苔麸(teff)、油莎豆、黑小麦、小麦麸、金合欢以及柑桔类水果。膳食补充剂以湿重计可以是上文所描述的组合物的约0-10％。举例来说，膳食补充剂以湿重计可以是上文所描述的组合物的约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1％。或者，膳食补充剂以湿重计可以是上文所描述的组合物的约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10％。对于是奶或奶制品、肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒、豆类、谷物、水果、蔬菜、脂肪、油、糖、甜食以及/或者饮料的膳食补充剂，膳食补充剂以湿重计可以是上文所描述的组合物的约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10％。对于是维生素、矿物质、草药、药材以及/或者氨基酸的膳食补充剂，膳食补充剂以湿重计可以是上文所描述的组合物的约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1％。

在以上各个实施方案中，本发明的组合物可被加工成供动物消耗的形式。在优选实施方案中，本发明的组合物被调配成实验室动物的食物的形式。实验室动物的非限制性实例可包括啮齿动物、犬、猫以及非人类灵长类动物。在一些实施方案中，动物是小鼠。在其他实施方案中，动物是大鼠。在其他实施方案中，动物是豚鼠。在其他实施方案中，动物是仓鼠。将人类食物加工成动物饲料口粮的方法描述于下文第III部分中并且在实例中进一步详述。

III.用于产生包含人类膳食等效物的动物饲料组合物的方法

在另一个方面中，本发明涵盖用于产生包含人类膳食等效物的动物饲料组合物的方法。适合的人类膳食等效物和动物饲料组合物描述于上文第I和II部分中。该方法典型地包括(i)将一种或多种选自由冷冻食物项目、冷藏食物项目、室温食物项目以及其组合组成的组的食物项目引入第一混合器并且掺混食物项目，(ii)将掺混的食物项目传送至第二混合器中以形成均质复合物，(iii)将均质复合物脱水并且将脱水复合物研磨至20目大小，以及(iv)将经研磨的复合物加工成其最终形式。可任选将步骤(ii)通过再循环回路并入步骤(i)中，即连接至执行第一混合步骤的容器。在某些实施方案中，可然后将呈最终形式的组合物包装和/或通过γ辐照灭菌。通过γ辐照杀菌可在包装之前或之后进行，或其组合。

本发明的方法通常以冷冻、冷藏以及/或者室温食物项目为起始物质。一般来说，食物项目将表现亚群膳食的特征，并且总地来说将针对各特定膳食提供合适比例的营养素。食物项目或用于制备食物项目的成分可购自杂货店、农贸市场或出售食物项目或用于制备它们的成分的任何其他供应商。食物项目可如制备自或可制备自成分一般加以使用。典型制备方法可包括但不限于剥皮、取芯、切割、切碎、切丁、搓碎、铡短、剁碎、去籽、揉捏、研磨、混合、掺混、解冻、沸腾、漂白、焖、煨，泡制、炖、蒸、浸渍、炖、烤、烧、炸、煎、微波、焙烧、烤焦、腌、撒盐、风干、醋渍、盐浸以及干燥。用于制备需要制备的食物项目的配方是本领域中已知的。需要制备的食物项目可按需要制备，或者可提前数天、数周或数月制备，任选称取数批，并且冷冻直至需要。

本发明的方法的步骤(i)和(ii)包括精细混合。如本文所用，精细混合是指诸如通过均质器、声波处理或通过超声波处理进行高剪切混合均质化。精细混合使食物项目(以液体、固体以及/或者气体形式存在)分散至将通常与其不混溶的主要连续液相中。转子或叶轮单独或与称为定子的静止组件一起或一系列转子和定子被用于含有所要混合的溶液的罐体或用于传送溶液的管道中以产生剪切力。步骤(i)和(ii)的最终结果是均质复合物混合物。如本文所用，术语“均质复合物混合物”或“均质复合物”是指是乳液、悬浮液或乳液以及悬浮液的混合物。精细混合可能或可能不与其他种类的混合(例如静态混合)组合进行。精细混合器的非限制性实例包括转子-定子型均质器或混合器、高压均质器、高剪切造粒机、分批高剪切混和器以及叶轮混合器(包括轴流式叶轮与径流式叶轮两者)。在一些实施方案中，混合是由高剪切混合器提供。在其他实施方案中，混合是由转子-定子混合器提供。在其他实施方案中，混合是由均质器提供。在替代实施方案中，混合是由超过一种混合器提供。在优选实施方案中，混合是由第一混合器和第二混合器提供，其中第一混合器是高剪切混合器，并且第二混合器是转子-定子型混合器。在一个示例性实施方案中，第一混合器是Breddo混合器，并且第二混合器是Silverson混合器/泵。

在一些实施方案中，本发明的方法包括将一种或多种选自由冷冻食物项目、冷藏食物项目、室温食物项目或其组合组成的组的食物项目引入第一混合器。举例来说，本发明的方法可包括将1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35或更多个食物项目引入第一混合器。在添加超过一个食物项目至第一混合器中的实施方案中，每个食物项目独立地选自由冷冻食物项目、冷藏食物项目以及室温食物项目组成的组。

食物项目可能或可能不以特定顺序添加至第一混合器中。在一些实施方案中，食物项目以特定顺序添加至第一混合器中。在其他实施方案中，食物项目以随机顺序添加至第一混合器中。对于HiSF-LoFV和LoSF-HiFV膳食来说，适合用于添加食物项目至第一掺混器中的顺序提供于实例中。然而，根据本公开，本领域技术人员应了解，可对所公开的顺序作出改变并且仍获得相同或类似结果，而不会背离本发明的精神和范围。

在一个优选实施方案中，第一混合器是高剪切混合器。举例来说，第一混合器可以是叶轮混合器。叶轮的类型可不同，前提条件是叶轮类型在掺混过程中产生足以实现均质乳液和/或悬浮液的剪切力。叶轮的尺寸可以并且将视其他参数而不同。在一些实施方案中，叶轮直径是约5至约36英寸。举例来说，叶轮直径可以是约5英寸、约6英寸、约7英寸、约8英寸、约9英寸、约10英寸、约11英寸、约12英寸、约14英寸、约15英寸、约16英寸、约17英寸、约18英寸、约19英寸、约20英寸、约21英寸、约22英寸、约23英寸、约24英寸、约25英寸、约26英寸、约27英寸、约28英寸、约29英寸、约30英寸、约31英寸、约32英寸、约33英寸、约34英寸、约35英寸或约36英寸。在其他实施方案中，叶轮直径是约5至约10英寸。在其他实施方案中，叶轮直径是约10至约15英寸。在不同实施方案中，叶轮直径是约15至约20英寸。在更不同的实施方案中，叶轮直径是约20至约25英寸。在替代实施方案中，叶轮直径是约35至约30英寸。在其他实施方案中，叶轮直径是约30至约36英寸。在各个以上实施方案中，叶轮的每分钟转数(rpm)可不同。在一些实施方案中，速度范围是约1500rpm至约3500rpm。在某些实施方案中，速度是1500rpm、1600rpm、1700rpm、1800rpm、1900rpm、2000rpm、2100rpm、2200rpm、2300rpm、2400rpm、2500rpm、2600rpm、2700rpm、2800rpm、2900rpm、3000rpm、3100rpm、3200rpm、3300rpm、3400rpm或3500rpm。在优选实施方案中，速度不超过2000rpm。

为促进掺混，添加至第一混合器中的食物项目可任选再循环或穿过第二混合器直至通过视觉检查均匀掺混。在一个优选实施方案中，第二混合器是转子-定子型混合器。转子的尺寸可以并且将视其他参数而不同。在一些实施方案中，转子直径是约1至约24英寸。举例来说，转子直径可以是约1英寸、约2英寸、约3英寸、约4英寸、约5英寸、约6英寸、约7英寸、约8英寸、约9英寸、约10英寸、约11英寸、约12英寸、约14英寸、约15英寸、约16英寸、约17英寸、约18英寸、约19英寸、约20英寸、约21英寸、约22英寸、约23英寸或约24英寸。在其他实施方案中，转子直径是约1至约5英寸。在其他实施方案中，转子直径是约5至约10英寸。在其他实施方案中，转子直径是约10至约15英寸。在不同实施方案中，转子直径是约15至约20英寸。在更不同的实施方案中，转子直径是约20至约24英寸。在各个以上实施方案中，转子的每分钟转数(rpm)可不同。在一些实施方案中，速度范围是约1500rpm至约3500rpm。在某些实施方案中，速度是1500rpm、1600rpm、1700rpm、1800rpm、1900rpm、2000rpm、2100rpm、2200rpm、2300rpm、2400rpm、2500rpm、2600rpm、2700rpm、2800rpm、2900rpm、3000rpm、3100rpm、3200rpm、3300rpm、3400rpm或3500rpm。在优选实施方案中，速度不超过2000rpm。

在一个优选实施方案中，第一混合器是通过再循环回路连接至串联的第二混合器。再循环回路可选自任何适合的材料，包括但不限于管子或管道。当在用第一混合器掺混之后，混合物包含可视粒度分布时，可任选使用第二混合器以产生均匀粒度分布。

还可以在混合期间控制温度。混合物的温度通常维持尽可能冷，同时维持混合物呈液相。优选地，步骤(i)和(ii)期间的最高温度是约60°F。

从引入食物项目到步骤(ii)结束的停留时间可在约10分钟至约120分钟范围内，并且依赖于与工艺设计有关的多个因素。在一些实施方案中，停留时间是约10分钟、约15分钟、约20分钟、约25分钟、约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟、约60分钟、约65分钟、约70分钟、约75分钟、约80分钟、约85分钟、约90分钟、约95分钟、约100分钟、约105分钟、约110分钟、约115分钟或约120分钟。在其他实施方案中，停留时间是约10至约40分钟。在其他实施方案中，停留时间是约20至约50分钟。在其他实施方案中，停留时间是约30至约60分钟。在其他实施方案中，停留时间是约40至约70分钟。在其他实施方案中，停留时间是约50至约80分钟。在其他实施方案中，停留时间是约60至约90分钟。在其他实施方案中，停留时间是约70至约100分钟。在其他实施方案中，停留时间是约80至约110分钟。在其他实施方案中，停留时间是约90至约120分钟。在一个优选实施方案中，停留时间不超过2小时。

将通过本发明方法产生的均质复合物收集并且脱水。在某些实施方案中，在脱水之前可任选将均质复合物冷冻和/或储存。适合的脱水方法是本领域中已知的。在一些实施方案中，将均质复合物冷冻干燥。简言之，将均质复合物冷冻于适当的容器中，精细地铡短并且放置于真空室中直至有效水分减少。经冷冻干燥的复合物的水分含量通常降至低于10％。举例来说，经冷冻干燥的复合物的水分含量可降至低于10％、低于9％、低于8％、低于7％、低于6％、低于5％、低于4％、低于3％、低于2％或低于1％。在一些实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约1％至约5％。在其他实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约5％至约10％。在不同实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约1％至约3％。在更不同的实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约3％至约6％。在替代实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约6％至约9％。

冷冻干燥的温度和压力可以并且将不同，以实现所描述的水分含量。在一些实施方案中，温度是约-20℃至约-60℃。举例来说，温度可以是约-20℃、约-21℃、约-22℃、约-23℃、约-24℃、约-25℃、约-26℃、约-27℃、约-28℃、约-29℃、约-30℃、约-31℃、约-32℃、约-33℃、约-34℃、约-35℃、约-36℃、约-37℃、约-38℃、约-39℃、约-40℃、约-41℃、约-42℃、约-44℃、约-44℃、约-45℃、约-46℃、约-47℃、约-48℃、约-49℃、约-50℃、约-51℃、约-52℃、约-53℃、约-54℃、约-55℃、约-56℃、约-57℃、约-58℃、约-59℃或约-60℃。在一些实施方案中，真空室的压力是约0.001毫巴至约30毫巴。举例来说，真空室的压力可以是约0.001毫巴至约0.010毫巴、约0.010毫巴至约0.100毫巴、约0.100毫巴至约1.000毫巴、约1.000毫巴至约10.000毫巴或约10.000毫巴至约30.000毫巴。在另一个实例中，真空室的压力可以是约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18、约19、约20、约21、约22、约23、约24、约25、约26、约27、约28、约29、约30毫巴。

可然后将脱水复合物研磨至适合用于加工至最终形式的尺寸。‘研磨’的类型(即粗糙、中等或精细)在压力输出和最终形式的质量中起重要作用。非常粗糙的研磨增加了在方块或球粒中提供断裂点的缺点。中等和精细研磨与粗糙研磨相比通常将产生更高球粒化能力。在一些实施方案中，脱水复合物是研磨至均匀尺寸。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至不同精细度的研磨物的混合物。本发明的脱水复合物通常是研磨至约5至约100目大小。在一些实施方案中，脱水复合物是研磨至约5目大小至约20目大小。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至约15目大小至约30目大小。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至约25目大小至约40目大小。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至约35目大小至约50目大小。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至约45目大小至约60目大小。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至约55目大小至约70目大小。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至约65目大小至约80目大小。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至约75目大小至约90目大小。在其他实施方案中，脱水复合物是研磨至约85目大小至约100目大小。在不同实施方案中，脱水复合物是研磨至至少40目大小。在替代实施方案中，脱水复合物是研磨至至少30目大小。在一个优选实施方案中，脱水复合物是研磨至至少20目大小。在另一优选实施方案中，脱水复合物是研磨至至少20目大小。用于研磨的方法是本领域中熟知的。

然后，将经研磨复合物加工成最终形式。在一些实施方案中，经研磨复合物是加工成液体。在其他实施方案中，经研磨复合物是加工成干燥形式。适合的干燥形式的非限制性实例包括粉末、凝聚物、颗粒以及球粒。在一个优选实施方案中，经研磨复合物是加工成颗粒。在另一优选实施方案中，经研磨复合物是加工成球粒。当加工成干燥形式时，可添加水分至经研磨复合物中以促进加工。一般来说，最终形式的水分含量通常低于10％。举例来说，水分含量可低于10％、低于9％、低于8％、低于7％、低于6％、低于5％、低于4％、低于3％、低于2％或低于1％。在一些实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约1％至约5％。在其他实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约5％至约10％。在不同实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约1％至约3％。在更不同的实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约3％至约6％。在替代实施方案中，经冷冻干燥的复合物的水分含量是约6％至约9％。在一个优选实施方案中，经研磨复合物是加工成球粒并且挤压工艺结束时的水分含量低于7％。用于将动物饲料口粮制成粉末、颗粒以及球粒的方法是本领域中已知的。

在一些实施方案中，可在加工组合物期间添加膳食补充剂。在一个实施方案中，可在步骤(i)或(ii)期间添加膳食补充剂。在另一个实施方案中，可在步骤(iii)之后步骤(iv)之前添加膳食补充剂。举例来说，可在加工成最终形式之前将膳食补充剂添加至经研磨复合物中。在将膳食补充剂添加至经研磨复合物中的实施方案中，可将膳食补充剂脱水。将膳食补充剂脱水可使膳食补充剂和经研磨复合物能够均质分布。在一个优选实施方案中，可将膳食补充剂添加至已加工成干燥形式的经研磨复合物中。在其他优选实施方案中，可将膳食补充剂添加至已加工成粉末的经研磨复合物中。然后，可将包含膳食补充剂的经研磨复合物加工成球粒。在将膳食补充剂添加至已加工成粉末的经研磨复合物中的实施方案中，膳食补充剂可被脱水，并且具有等效于粉末的粒子的粒度。然后，可将包含膳食补充剂的经研磨复合物加工成球粒。

IV.方法

在另一个方面中，本发明涵盖一种用于测定至少一种膳食补充剂对受试者的影响的方法。更具体地说，本发明涵盖一种用于测定至少一种膳食补充剂对受试者的肠道微生物群的影响的方法。方法通常包括在消耗至少一种膳食补充剂之前和之后对受试者进行评估，其中在受试者中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。更具体地说，方法通常包括在消耗至少一种膳食补充剂之前和之后对受试者的肠道微生物群进行评估，其中在肠道微生物群中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的肠道微生物群的影响。

举例来说，方法可包括向受试者施用或饲喂包含至少一种膳食补充剂的本发明组合物，以及确定在施用或饲喂包含膳食补充剂的组合物之后在受试者中存在或不存在差异，其中在受试者中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。或者，方法可包括(1)在第一段时间内向受试者施用或饲喂第一本发明组合物，(2)在第二段时间内向受试者施用或饲喂第二组合物，其中第二组合物由第一组合物和至少一种膳食补充剂组成，以及(3)确定在施用或饲喂第二组合物之后在受试者中存在或不存在差异，其中在受试者中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。在另一个替代方案中，方法可包括(1)在第一段时间内向受试者施用或饲喂第一组合物，其中第一组合物是进一步包含至少一种膳食补充剂的本发明组合物，(2)在第二段时间内向受试者施用或饲喂第二组合物，其中第二组合物由不具有至少一种膳食补充剂的第一组合物组成，以及(3)确定在施用或饲喂第二组合物之后在受试者中存在或不存在差异，其中在受试者中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。作为一个非限制性实例，方法可包括将在投与或饲喂两种组合物之前以及之后的受试者的肠道微生物群加以比较，以确定存在或不存在差异，其中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。

或者，方法可包括(1)向第一受试者或第一组受试者施用或饲喂包含至少一种膳食补充剂的组合物，并且向第二受试者或第二组受试者施用或饲喂不具有膳食补充剂的相同组合物，(2)将第一受试者或受试者群组与第二受试者或受试者群组相比较，以及(3)确定在第一与第二受试者或受试者群组之间存在或不存在差异，其中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者或受试者群组的影响。作为一个非限制性实例，方法可包括将第一受试者或受试者群组与第二受试者或受试者群组的肠道微生物群相比较，以及确定在第一与第二受试者或受试者群组之间存在或不存在差异，其中存在或不存在差异代表膳食补充剂对受试者的影响。

膳食补充剂或超过一种膳食补充剂的组合(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多种补充剂)对受试者的影响可通过定量受试者中的任何可测量变化来确定。在不希望受理论限制的情况下，一种或多种膳食补充剂对受试者的影响可通过测量以下变化来确定：肠道微生物群变化、重量变化、体脂变化、能量消耗变化、健康变化、炎症变化、免疫功能变化、代谢变化或其组合。健康指标的非限制性实例可包括出生体重低、肥胖症、关节炎、糖尿病、哮喘、变应性、高血压、自体免疫疾病、心脏病、呼吸道疾病、癌症发病率、抗病性、疾病易感性、病原体脱落、慢性疼痛、抑郁、因损伤而进入医院、食物源性疾病、情绪、心理健康、抽烟习惯、酒精消耗、体育锻炼习惯以及母乳喂养。测量健康指标的方法是本领域中已知的。另外，测量能量消耗、重量、体脂、炎症、免疫功能以及代谢的方法是本领域中已知的。炎症或发炎反应是通过血浆和白细胞从血液到所关注区域的移动增多来实现。炎症可以是急性或慢性的。急性炎症的迹象可包括但不限于疼痛、发热、发红、膨胀以及功能损失。慢性炎症的迹象可包括但不限于变应性、枯草热、哮喘、牙周炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎以及癌症。因此，炎症的变化可以是一种或多种急性炎症迹象的变化或一种或多种慢性炎症迹象的变化。或者，可通过红细胞沉降率或C-反应蛋白来测量炎症。测量炎症的其他方法是本领域中已知的并且也可以使用。免疫功能是指免疫系统的功能。免疫系统防止发生疾病。免疫系统紊乱可导致自体免疫疾病、发炎疾病以及癌症。因此，免疫功能变化可经测量为疾病易感性的变化或与免疫系统紊乱相关的迹象或症状的变化。或者，可通过定量细胞介导的免疫来测量免疫功能。测量免疫功能的其他方法是本领域中已知的并且也可以使用。代谢允许有机体生长和再生、维持其结构并且对其环境作出反应的酶催化反应。代谢可包括消化和向不同细胞中以及在不同细胞之间运输物质。代谢可以代谢速率形式加以测量。代谢速率是由受试者产生的能量消耗速率。因此，代谢变化可通过消化变化、代谢速率变化、能量消耗(energy consumption)变化或能量耗费(energy expenditure)变化来测量。或者，测量代谢的其他方法是本领域中已知的并且可使用。

膳食补充剂对肠道微生物群的影响可经测量为任何分类水平的微生物的相对和/或绝对丰度的变化，或代谢产物型态的变化。用于确定微生物的相对或绝对丰度的方法是本领域中已知的并且可包括培养或定序。如本文所用的术语“种系组合物”，是指如种系型所定义的肠道微生物群的组合物。种系型是通过有机体与其他有机体的种系发生(例如进化)关系来归类有机体的生物类型。术语种系型是类群中性的(taxon-neutral)，并且因此，可指物种组成、属组成、类组成等。用于测定核酸的表达的方法是本领域中已知的并且可包括RNA印迹法、PCR、RT-PCR、qRT-PCR、阵列或微阵列。用于测定核酸产物的表达的方法是本领域中已知的并且可包括西方墨点法、阵列、微阵列、基于抗体结合剂或抗原决定基结合剂的方法、质谱法或肽定序。测量代谢产物型态变化的方法也是本领域中已知的并且是代谢组学领域中常用的。

如本文所用，“变化”意指受试者在消耗膳食补充剂之前与之后之间的差异超过约30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1％。如本文所用，“变化”意味着消耗膳食补充剂的受试者与不消耗膳食补充剂的受试者之间相比的差异超过约30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1％。变化可以是阳性或阴性(例如增加或减小)。

在以上实施方案中，受试者可是实验室动物。实验室动物的非限制性实例可包括啮齿动物、犬、猫以及非人类灵长类动物。在一些实施方案中，动物是小鼠。在其他实施方案中，动物是大鼠。在其他实施方案中，动物是豚鼠。在其他实施方案中，动物是仓鼠。可使用膳食补充剂对受试者的影响作为替代物来测定膳食补充剂对人类的影响。

表A.USDA膳食研究食物和营养素数据库食物编码方案(The USDA Food andNutrient Database for Dietary Studies，4.1-Documentation and User Guide(2010)Beltsville，MD：U.S.Department of Agriculture，Agricultural Research Service，Food Surveys Research Group)

注：X表示占位符，并且可以是1-9的任何数字。

实施例

以下实施例说明本发明的多个迭代。

实施例1.基于在饱和脂肪和水果/蔬菜消耗方面不同的两种“典型”美国成人膳食研制基于人类食物的膳食

使用在2003年-2004年、2005年至2006年以及2007年至2008年间实施的国家健康和营养检验调查(NHANES)的第1天收集的膳食回顾：1)以识别年龄为20-65岁的健康、未怀孕、不泌乳美国成人，其关于膳食指导的两个方面(尤其是饱和脂肪以及水果和蔬菜摄入量)高度不同，并且2)将这两个群体的膳食中的主要食物特征化。在较大数据集内识别到的两个亚群是HiSF-LoFV和LoSF-HiFV(表1)。HiSF-LoFV(高饱和脂肪，低水果和蔬菜)组包括在饱和脂肪的最高三分位组以及水果和蔬菜摄入量的最低三分位组中的个体。相比之下，LoSF-HiFV组包括饱和脂肪的最低三分位组以及水果和蔬菜摄入量的最高三分位组中的个体。然后，使用以每1000千卡总膳食中的食物千卡数为基础表述的八个宽食物组和63个食物亚组以两步法识别HiSF-LoFV和LoSF-HiFV亚群所消耗的主要特征食物(表2)。以下提供对方法的详细描述。

表1.在2003年至2008年之间进行的国家健康和营养检验调查(NHANES)中的年龄20-65岁的健康成人(n＝10,190个未怀孕、不泌乳)之中的HiSF-LoFV和LoSF-HiFV亚群.

表2.HiSF-LoFV(A)和LoSF-HiFV(B)亚群所消耗的特征食物。

(A)HiSF-LoFV特征食物

(B)LoSF-HiFV特征食物

数据源和样本NHANES利用使用自动化多通道方法的本人24小时膳食回顾法。此方法不止一次在膳食摄入期指导回答者，并且因此提供多个识别食物和关于在回顾期期间所消耗的食物的具体细节的机会(Raper等人J Food Compos Anal 2004；17(3-4)：545-555)。由美国农业部(USDA)食物调查科研小组(FSRG)对膳食回顾进行分析，以估计由各回答者消耗的食物的类型和量以及其营养素组成(CDC 2007，2008，2010)。关于由NHANES回答者在24小时回顾中所报导的食物的其他信息已由USDA-FSRG提供于其膳食研究食物和营养数据库(FNDDS)中；FNDDS数据包括食物编码方案、衍生营养素组合物数据时所用的“配方”以及关于通过特定食物编码分类的食物的其他细节。USDA-FSRG已研发一种针对调查食物编码的分组方案以帮助报导食物摄入量估计值。在USDA定义的食物分组系统中，NHANES食物编码(排除普通水)典型地划分成71个食物组或亚组。

在2003年至2004年和2005年至2006年间实施的NHANES食物频率问卷(FFQ)的所选数据也用于分析，以收集关于热量饮料的消耗频率的其他信息。由国家癌症协会(NationalCancer Institute，NCI)发起的FFQ是基于NCI膳食历史问卷(一种广泛用于营养流行病学研究的124项食物频率文件)(Subar等人Am J Epidemiol 2001；154：1089-99)。

食物类别USDA定义的71个食物组和亚组表示宽食物类别内的食物编码的等级分组，并且因此USDA等级提供可用于识别类似食物群组内的主要特征食物的食物编码方案。此食物分组方案用于识别由HiSF-LoFV和LoSF-HiFV亚群消耗的主要食物。在分析中，肉、禽以及鱼；蛋；坚果和籽粒；以及豆类组被组合成一个主要食物组。总流体奶亚组用于评估所有流体奶摄入量，并且“总果汁饮品和水果调味饮品”和“总碳酸软饮品”的单独的亚组用于评估这些饮料的总摄入量。在修改之后，食物分组系统包括八个宽食物组内的63个食物亚组。

基于饱和脂肪以及总水果和蔬菜消耗量的亚群在总样本(n＝10,190)之中，基于每1000千卡中的饱和脂肪克数和每1000千卡中的水果+蔬菜(NHANES食物编码中水果以6开头，而蔬菜则以7开头)克数来确定三分位组，其中每1000千卡中饱和脂肪＞14.1g和每1000千卡中饱和脂肪＜10.3g分别界定顶部和底部三分位组。对于水果和蔬菜组合摄入量，每1000千卡中水果+蔬菜≤65g界定最低三分位组，并且每1000千卡中水果+蔬菜＞181g界定顶部三分位组。使用这些三分位组分割点，11.8％的个体属于HiSF-LoFV组(n＝1203)，并且14.7％属于低饱和脂肪、高水果和蔬菜(LoSF-HiFV)组(n＝1503)。

表现HiSF-LoFV和LoSF-HiFV膳食的特征的食物使用以每1000千卡总膳食中的食物千卡数为基础表述的八个宽食物组和63个食物亚组以两步法识别HiSF-LoFV和LoSF-HiFV亚群所消耗的主要特征食物。

在第一步中，识别主要食物子类。使用主要食物组和食物亚组的相对能量摄入量以及消耗单个食物亚组内的食物的亚群的比例来识别由HiSF-LoFV亚群和分开地由LoSF-HiFV亚群消耗的主要食物亚组。所用的具体准则如下：

·每1000千卡总膳食提供低于20千卡的食物亚组(即低于2.0％的能量)不在考虑范围之内。

·在每1000千卡总膳食提供20至50千卡(即2.0至5.0％的能量)的各食物亚组内，选择代表最大能量来源的单个食物亚组作为主要食物亚组。

·在每1000千卡总膳食提供超过50千卡(即超过5.0％的总能量)的各食物组内，满足以下两个准则中的至少一个的所有食物亚组被视为主要食物亚组：1)在食物组中每1000千卡贡献至少10％的千卡数并且被至少10％的亚群消耗；2)被20％或更大比例的亚群消耗。

排除咖啡和茶，因为小鼠对咖啡因敏感，并且因为这些饮料几乎不对能量摄入有贡献。

在第二步中，选择更佳表现各个经识别主要食物组/亚组的特征的食物。对于各个经识别的主要食物组/亚组，将在报导回顾当天的消耗的亚群中每1000千卡所消耗的最高重量食物情况下的食物编码选择为表现整个食物组/亚组的特征的主要食物。

HiSF-LoFV和LoSF-HiFV膳食中主要食物的比例要包括于小鼠膳食中的主要食物的比例(湿重)是如下计算：首先确定主要食物亚组对基于USDA的食物组的总能量摄入量(每1000千卡总膳食)的相对能量贡献，并且然后确定每1000千卡总膳食由相关食物组递送所计算的能量贡献所需要的食物重量(g)(表1)。一旦识别到两种膳食的特征食物，就将所计算的营养素摄入量与24h回顾数据相比较作为特征食物多好地反映所报导的摄入的指示物。结果表明在LoSF-HiFV膳食中胆固醇低并且因此添加蛋至LoSF-HiFV膳食中。表3表明在所得HiSF-LoFV与LoSF-HiFV膳食两者中，由特征食物制成的动物食物的平均营养素含量类似于由24-h回顾所报导的摄入。

表3.基于24小时膳食回顾的摄入量的每1000千卡营养素含量(24h回顾)；所计算的基于主要特征食物的膳食(所计算的膳食)；或对动物食物的化学分析(动物食物)的比较.

实施例2.制备并且加工动物食物

使用多数方法将特征食物加工成干燥动物食物球粒，以得到呈定量比例的食物的均匀混合物并且保留营养素。将所有不同食物项目掺混成一种混合物并且冷冻干燥所得混合物的途径是实验性途径。归因于此混合物的独特性质，冷冻干燥的材料是否将具有恰当物理化学特征以被挤压/模制成结构上稳定的颗粒或球粒形式是未知的。将代表膳食的所有食物项目掺混成均质混合物使水、脂肪、油以及低分子量溶质(糖和矿物质)分布至易于冷冻和冷冻干燥的乳液和悬浮液中。假定经掺混的混合物的冷冻点与单个食物项目中的一些相比有所升高，从而使得均质复合物成为一种冷冻干燥具有低得多的冷冻点并且难以冷冻干燥的食物项目的可行途径。冷冻点低并且潜在地更难以冷冻干燥的食物项目将是单糖、盐以及脂肪含量高的那些(例如色拉调味汁、巧克力、糖果)。水分布于此复杂食物基质中，使得当经由冷冻干燥方法移除时，所得干燥粉末具有对于挤压和模制成适当形式来说恰当的特征。

两种膳食的均质食物复合物是如下制备。每种膳食的特征食物是购自芝加哥地区商店，并且/或者使用USDA FNDDS或标准权威食谱的标准配方制备。在一周时间段内制备混合盘装菜(例如比萨)，称重成多个批次，并且然后冷冻直至在混合之前将其解冻。准备易腐食物(例如剥皮、取芯)，在掺混前一天将其称取出来并且在适当时冷藏或在室温下储存。为混合膳食，将食物以定量比例添加至Breddo Likwifer混合器(模型LOR 25)中，并且通过Silverson高能量混合器再循环，直至单个批次通过视觉检查均匀掺混以确保混合物均匀(表4和5)。将均质化混合物收集于5加仑桶中并且然后在-20℃下冷冻。图1示出膳食制造流程。

将均质复合物调配物维持在-20℃下。将冷冻的各复合物膳食块精细地铡短并且然后放置于设定于1mb的真空室中，直至有效水分被移除(约27小时)。然后将冷冻干燥的材料研磨至20目大小并且包装至40磅袋子中(在室温下储存)。添加水至冷冻干燥调配物中以达到挤压成球粒可接受的视觉粘度。在挤压工艺的开头、中间以及结尾收集样本用于基于AOAC方法的组成分析。数字据的平均值显示于表3和表6中。将球粒用氮气吹扫并且真空包装。将真空包装的膳食经由γ辐照灭菌。

配方：以下配方中的参考数字字是来自USDA Food and Nutrient Database forDietary Studies，4.1.2010.Beltsville，MD；U.S.Department of Agriculture，Agriculture Research Service，Food Surveys Research Group；以及USDA Food andNutrient Database for Dietary Studies，3.0.2008.Beltsville，MD；U.S.Departmentof Agriculture，Agriculture Research Service，Food Surveys Research Group(FNDDS3.0数据仅用于比萨)。薄壳肉比萨：58106520，配方略微修改，使用预制外壳和用番茄酱取代番茄汁和果泥；双层奶酪汉堡：27510330；煎蛋：31105000；金枪鱼色拉：27450060；加番茄酱的意大利面条：58132110；白米：56205010；马铃薯泥：71501000；炒蛋：32105000；烘焙鸡胸：24122120；意大利调味汁配方来自Joy of Cooking(1975；1981年第23次印刷)。

表4.高饱和脂肪低水果蔬菜加工方案

表5.低饱和脂肪高水果蔬菜膳食加工方案

表6.以下加工步骤之后的调配物组合物：(A)起始重量和最终重量，(B)混合，(C)冷冻干燥，(D)球粒挤压

(A)起始重量和最终重量

(B)全部混合之后

(C)冷冻干燥之后

(D)球粒挤压的开头(Beg)、中间(Mid)以及结尾(End)

Claims (21)

1.一种动物饲料组合物，其包含人类膳食等效物，所述人类膳食等效物由多种食物项目组成，所述食物项目由美国农业部用于膳食研究的食物和营养数据库，4.1-文档和用户指南，2010年，即USDA FNDDS 2010食物编码八位数字识别，其中所述多种食物项目为：

a)以湿重计5-25％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为110、111、112、113、114、115、116、117、118、121、122、123，131、132、133、134、140、141、142、143、144、145、146或147，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“奶或奶制品”；

b)以湿重计10-25％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为200、210、211、213、214、215、216、217、220、221、222、223、224、225、226、227、228、230、231、232、233、234、241、242、243，244、247、251、252、261、262、263、271、272、273、274、275、276、281、283、284、285、311、312、321、322、323、324、330、331，332、333、350、411、412、413、414、415、416、418、419、421、422、423、424、425、431、441或442，各食物项目为在USDAFNDDS 2010中的“肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒、或豆类”；

c)以湿重计10-20％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为500、510、511、512、513、514、515、516、518、522、523、524、532、533、534、535、536、538、540、541、542、543、544、551、552，553、554、555、556、557、558、561、562、570、571、572、573、574、576、578、581、582、583、584、585或590，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“谷物制品”；

d)以湿重计0-1％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为611、612、621、631、632、633、634、641、642、644、671、672、673、674、675或676，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“水果”；

e)以湿重计0-1％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为710、711、712、713、714、715、716、717、718、719、721、722、723、731、732、733、734、735、741、742、743、743、744、745、746、747，751、752、753、754、755、756、761、762、764、765、766、771、772、773、775或781，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“蔬菜”；

f)以湿重计0.5-5.0％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为811、812、813、821、831或832，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“脂肪或油”；

g)以湿重计0.5-5.0％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为911、912、913、914、915、916、917或918，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“糖或甜食”；

h)以湿重计10-60％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为921、922、923、924、925、926、927、928、929、931、932、933、934、935、941或942，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“饮料”，

其中上述规定量的(a)-(h)产生具有下述组成的人类膳食等效物：

以湿重计45-53％碳水化合物、

以湿重计1-4％总膳食纤维、

以湿重计20-25％脂肪、

7-9％总饱和脂肪酸、

83-88mg胆固醇/100g总膳食、

以湿重计19-23％蛋白质、

800-1000mg钠/100g总膳食、

300-500mg钾/100g总膳食、

以湿重计4-8％水分、以及

4.6-4.9千卡/g总膳食。

2.如权利要求1所述的组合物，其中奶或奶制品的食物项目以湿重计是18.9％；肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒或豆类的食物项目以湿重计是18.0％；谷物制品以湿重计是16.3％；水果的食物项目以湿重计是0％；蔬菜的食物项目以湿重计是0.8％；脂肪和油的食物项目以湿重计是0.6％；糖和甜食的食物项目以湿重计是1.2％，并且饮料的食物项目以湿重计是44.2％。

3.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述食物项目是掺混成均质混合物。

4.如权利要求1或权利要求2所述的组合物，其中所述组合物是加工成颗粒形式或球粒形式。

5.一种动物饲料组合物，其包含人类膳食等效物，所述人类膳食等效物由多种食物项目组成，所述食物项目由美国农业部用于膳食研究的食物和营养数据库，4.1-文档和用户指南，2010年，即USDA FNDDS 2010食物编码八位数字识别，其中所述多种食物项目为：

a)以湿重计5-25％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为110、111、112、113、114、115、116、117、118、121、122、123，131、132、133、134、140、141、142、143、144、145、146或147，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“奶或奶制品”；

b)以湿重计10-25％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为200、210、211、213、214、215、216、217、220、221、222、223、224、225、226、227、228、230、231、232、233、234、241、242、243，244、247、251、252、261、262、263、271、272、273、274、275、276、281、283、284、285、311、312、321、322、323、324、330、331，332、333、350、411、412、413、414、415、416、418、419、421、422、423、424、425、431、441或442，各食物项目为在USDAFNDDS 2010中的“肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒、或豆类”；

c)以湿重计10-20％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为500、510、511、512、513、514、515、516、518、522、523、524、532、533、534、535、536、538、540、541、542、543、544、551、552，553、554、555、556、557、558、561、562、570、571、572、573、574、576、578、581、582、583、584、585或590，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“谷物制品”；

d)以湿重计10-25％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为611、612、621、631、632、633、634、641、642、644、671、672、673、674、675或676，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“水果”；

e)以湿重计10-25％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为710、711、712、713、714、715、716、717、718、719、721、722、723、731、732、733、734、735、741、742、743、743、744、745、746、747，751、752、753、754、755、756、761、762、764、765、766、771、772、773、775或781，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“蔬菜”；

f)以湿重计0.5-5.0％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为811、812、813、821、831或832，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“脂肪或油”；

g)以湿重计0.5-5.0％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为911、912、913、914、915、916、917或918，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“糖或甜食”；

h)以湿重计10-60％的一种或更多种食物项目，其中USDA FNDDS 2010食物编码的头三位数为921、922、923、924、925、926、927、928、929、931、932、933、934、935、941或942，各食物项目为在USDA FNDDS 2010中的“饮料”，

其中上述规定量的(a)-(h)产生具有下述组成的人类膳食等效物：

以湿重计57-64％碳水化合物、

以湿重计3-7％总膳食纤维、

以湿重计10-15％脂肪、

2.0-3.5％总饱和脂肪酸、

35-40mg胆固醇/100g总膳食、

以湿重计13-17％蛋白质、

300-500mg钠/100g总膳食、

500-700mg钾/100g总膳食、

以湿重计4-8％水分、以及

4.0-4.4千卡/g总膳食。

6.如权利要求5所述的组合物，其中所述奶或奶制品的食物项目以湿重计是10.2％；肉、禽、鱼、蛋、坚果、籽粒或豆类的食物项目以湿重计是15.7％；谷物制品的食物项目以湿重计是12.7％；水果的食物项目以湿重计是19.5％；蔬菜的食物项目以湿重计是18％；脂肪和油的食物项目以湿重计是0.9％；糖和甜食的食物项目以湿重计是0.6％，并且饮料的食物项目以湿重计是22.2％。

7.如权利要求5或权利要求6所述的组合物，其中所述组合物是加工成颗粒形式或球粒形式。

8.如权利要求5或权利要求6所述的组合物，其中所述食物项目是掺混成均质混合物。

9.一种制备如权利要求4或权利要求7所述的球粒化动物饲料的方法，所述方法包括：

(i)将两种或更多种独立地选自由冷冻食物项目、冷藏食物项目以及室温食物项目组成的组的食物项目引入第一混合器中并且掺混所述食物项目，其中所述第一混合器是高剪切液体混合器；

(ii)将所掺混的食物项目传送和/或再循环至第二混合器中，以形成均质复合物，其中所述第二混合器是转子-定子混合器并且所述均质化复合物通过视觉检查是均匀掺混的；

(iii)冷冻干燥所述均质复合物并且将经脱水复合物研磨至20目大小，其中所述经脱水复合物的水分含量低于5％；

(iv)将水添加至经研磨复合物中并且挤压成球粒，其中在所述挤压工艺结束时所述复合物的水分含量低于10％。

10.如权利要求9所述的方法，其中经脱水复合物是水分含量低于2.7％的冻干复合物。

11.如权利要求9或权利要求10所述的方法，其中所述挤压球粒的水分含量低于7％。

12.如权利要求9或权利要求10所述的方法，其中步骤(i)和(ii)的总加工时间不超过两个小时。

13.如权利要求9或权利要求10所述的方法，其中所述球粒被包装并且通过γ辐照灭菌。

14.如权利要求9或权利要求10所述的方法，其中所述球粒通过γ辐照灭菌并且被包装。

15.如权利要求9或权利要求10所述的方法，其进一步包括添加膳食补充剂，其中膳食补充剂可在步骤(i)、步骤(ii)期间、在步骤(iii)之后但在步骤(iv)之前添加。

16.如权利要求9或权利要求10所述的方法，其进一步包括添加膳食补充剂，其中膳食补充剂是在加工成最终形式之前添加至步骤(iii)的经研磨复合物中。

17.一种确定至少一种膳食补充剂对受试者的影响的方法，所述方法包括向受试者施用或饲喂进一步包含至少一种膳食补充剂的如权利要求1至8中任一项所述的组合物，以及确定在施用包含所述膳食补充剂的所述组合物之后在所述受试者中存在或不存在差异，其中所述在所述受试者中存在或不存在差异代表所述膳食补充剂对所述受试者的影响。

18.一种确定至少一种膳食补充剂对受试者的影响的方法，所述方法包括(1)在第一段时间内向受试者施用或饲喂第一组合物，其中所述第一组合物是如权利要求1至8中任一项所述的组合物，(2)在第二段时间内向所述受试者施用或饲喂第二组合物，其中所述第二组合物由所述第一组合物和至少一种膳食补充剂组成，以及(3)确定在施用或饲喂所述第二组合物之后在所述受试者中存在或不存在差异，其中所述在所述受试者中存在或不存在差异代表所述膳食补充剂对所述受试者的影响。

19.一种确定至少一种膳食补充剂对受试者的影响的方法，所述方法包括(1)在第一段时间内向受试者施用或饲喂第一组合物，其中所述第一组合物是如权利要求1至8中任一项所述的组合物和至少一种膳食补充剂，(2)在第二段时间内向所述受试者施用或饲喂第二组合物，其中所述第二组合物由不具有所述至少一种膳食补充剂的所述第一组合物组成，以及(3)确定在施用或饲喂所述第二组合物之后在所述受试者中存在或不存在差异，其中所述在所述受试者中存在或不存在差异代表所述膳食补充剂对所述受试者的影响。

20.如权利要求17、18或19所述的方法，其中所述差异以肠道微生物群变化、炎症变化、免疫功能变化以及/或者代谢变化来测量。

21.如权利要求20所述的方法，其中所述代谢变化以重量变化、体脂变化、和/或能量消耗变化来测量。

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