CN105535516A - 一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物和制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物和制备方法，中药组合物包括以下原料药材：橙皮、白前、香附、旋覆花、栝楼皮、延胡索、苦杏仁、天浆壳、紫菀、吉祥草、猪仔笠、明党参、石米、连翘、铁马鞭、寄生黄、素兴花、夏枯草、海藻、老君须、黄毛榕、刺五加、太白参、地瓜藤、母草、六月雪和合萌。本发明的有益效果是：本发明的中药组合物，用于防治鸡曲霉菌病可增强鸡免疫力，治愈率高，不易复发，纯天然、无毒副作用，成本价格低廉。

Description

一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物和制备方法

技术领域

本发明涉及兽药技术领域，特别涉及一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物和制备方法。

背景技术

鸡曲霉菌病是由致病性曲霉菌引起的一种传染病,一年四季均可发生,在夏秋季节最易发生,不同日龄的鸡均可发生,主要以1～4周龄的雏鸡较为多发,临床上主要表现为严重的呼吸困难，张口喘气，无罗音，很少采食，急性暴发时死亡率可达50%，曲霉菌侵入眼部时眼皮下蓄有豆渣样物质，眼皮鼓起，角膜溃疡，像“白眼珠”。剖检可见，肺部和气管变为黑紫、灰白色，质地变硬，切面坏死，气囊混浊，有霉菌结节。

自然感染的潜伏期2～7天，人工感染24h。1-20日龄雏鸡常呈急性经过，成年禽呈慢性经过。雏鸡开始减食或不食，精神不振，不爱走动，翅膀下垂，羽毛松乱，呆立一隅，闭目、嗜睡状，对外界反应淡漠，接着就出现呼吸困难，呼吸次数增加，喘气，病鸡头颈直伸，张口呼吸，如将小鸡放于耳旁，可听到沙哑的水泡声响，有时摇头，甩鼻，打喷嚏，有时发出咯咯声。少数病鸡，还从眼、鼻流出分泌物。后期，还可出现下痢病状。最后倒地，头向后弯曲，昏睡死亡。病程在1周左右。如不及时采取措施，或发病严重时，死亡率可达50%以上。

西医药治疗鸡曲霉菌病，多用制霉菌素，病治后易复发，制霉菌素价格昂贵，并且由此而来的抗应激、抗疾病等生理功能和食肉质量(品质)已大大下降，而药物残留则不断升高。

中医药不仅具有西药的优势，并且治愈率高，无污染，可增强鸡免疫力，治愈后不易复发，成本价格低廉。因此，中草药在治疗鸡曲霉菌病疾方面具有十分重要的现实意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是在于提供一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，能够克服现有技术中西药和中药的缺陷，治愈后不易复发，成本价格低廉，疗程较短，疗效较好，长期应用无耐药性，无药物残留

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，所述中药组合物包括以下原料药材：橙皮、白前、香附、旋覆花、栝楼皮、延胡索、苦杏仁、天浆壳、紫菀、吉祥草、猪仔笠、明党参、石米、连翘、铁马鞭、寄生黄、素兴花、夏枯草、海藻、老君须、黄毛榕、刺五加、太白参、地瓜藤、母草、六月雪和合萌。

所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮22-38重量份、白前8-22重量份、香附14-27重量份、旋覆花12-28重量份、栝楼皮24-39重量份、延胡索15-32重量份、苦杏仁1-5重量份、天浆壳11-25重量份、紫菀21-35重量份、吉祥草14-26重量份、猪仔笠22-36重量份、明党参13-29重量份、石米15-35重量份、连翘14-37重量份、铁马鞭12-25重量份、寄生黄10-25重量份、素兴花11-23重量份、夏枯草12-26重量份、海藻11-25重量份、老君须10-23重量份、黄毛榕14-26重量份、刺五加21-35重量份、太白参15-35重量份、地瓜藤12-26重量份、母草11-25重量份、六月雪13-26重量份和合萌11-24重量份。

所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮25-32重量份、白前12-19重量份、香附17-24重量份、旋覆花15-25重量份、栝楼皮26-35重量份、延胡索18-27重量份、苦杏仁2-4重量份、天浆壳14-22重量份、紫菀24-30重量份、吉祥草17-22重量份、猪仔笠25-32重量份、明党参16-25重量份、石米19-30重量份、连翘18-32重量份、铁马鞭16-21重量份、寄生黄13-21重量份、素兴花15-20重量份、夏枯草15-22重量份、海藻14-21重量份、老君须14-20重量份、黄毛榕18-22重量份、刺五加25-30重量份、太白参20-30重量份、地瓜藤17-21重量份、母草15-20重量份、六月雪16-21重量份和合萌14-20重量份。

所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮29重量份、白前12重量份、香附19重量份、旋覆花25重量份、栝楼皮29重量份、延胡索18重量份、苦杏仁3重量份、天浆壳22重量份、紫菀24重量份、吉祥草19重量份、猪仔笠25重量份、明党参21重量份、石米30重量份、连翘26重量份、铁马鞭21重量份、寄生黄17重量份、素兴花17重量份、夏枯草22重量份、海藻17重量份、老君须18重量份、黄毛榕22重量份、刺五加28重量份、太白参25重量份、地瓜藤19重量份、母草18重量份、六月雪17重量份和合萌16重量份。

所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮32重量份、白前15重量份、香附24重量份、旋覆花15重量份、栝楼皮35重量份、延胡索27重量份、苦杏仁2重量份、天浆壳14重量份、紫菀28重量份、吉祥草22重量份、猪仔笠29重量份、明党参25重量份、石米25重量份、连翘18重量份、铁马鞭16重量份、寄生黄21重量份、素兴花15重量份、夏枯草18重量份、海藻21重量份、老君须14重量份、黄毛榕20重量份、刺五加25重量份、太白参20重量份、地瓜藤17重量份、母草15重量份、六月雪16重量份和合萌14重量份。

所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮25重量份、白前19重量份、香附17重量份、旋覆花20重量份、栝楼皮26重量份、延胡索21重量份、苦杏仁4重量份、天浆壳18重量份、紫菀30重量份、吉祥草17重量份、猪仔笠32重量份、明党参16重量份、石米19重量份、连翘32重量份、铁马鞭18重量份、寄生黄13重量份、素兴花20重量份、夏枯草15重量份、海藻14重量份、老君须20重量份、黄毛榕18重量份、刺五加30重量份、太白参30重量份、地瓜藤21重量份、母草20重量份、六月雪21重量份和合萌20重量份。

为了更好地实现发明目的，本发明还提供一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物的制备方法，当中药组合物的剂型为粉针剂时，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述原料药材按比例混合，放入超微粉碎机中粉碎成0.1～10μm体积平均粒径的微米级颗粒和粒径小于0.1μm体积平均粒径的纳米级颗粒组成的混合粉料，所述混合粉料的得粉率至少为95%；

第二步，在第一步获得的混合粉料中加入相对于所述混合粉料的质量3～5倍的醇浓度为85%～95%的乙醇，搅拌溶解获得乙醇溶液，将乙醇溶液在5℃～10℃的条件下静置24～36小时，采用渗漉法以每分钟1～2ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，浓缩并干燥，并在此放入超微粉碎机中粉碎40～60分钟，获得0.1～10μm体积平均粒径的微米级颗粒和粒径小于0.1μm体积平均粒径的纳米级颗粒组成的混合粉料，所述混合粉料的得粉率至少为95%；

第三步，取第二步获得的混合粉料10g～20g，加入丙二醇30g～50g，加200ml注射用水，搅拌使其溶解，进一步加注射用水至1000ml，再加入1g～1.5g针用活性炭，充分搅拌30～50分钟；脱炭过滤；用0.22～0.24μm微孔滤膜过滤；冷冻干燥得无菌粉末，分装灌封。

为了更好地实现发明目的，本发明还提供一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物的制备方法，当中药组合物的剂型为散剂，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述中药组合物中的各组分按比例混合，投入粉碎机进行粉碎或直接切碎，装入煎煮容器中，加入适量水使其浸没药材，浸泡10-25分钟后，加热至沸腾40-70分钟后，分离煎出液，药渣再次加水进行煎煮2-3次，分离收集每次的煎出液，再经过过滤后，取滤液弃滤渣；

第二步，待滤液冷却后，加入相对于浓缩后液体重量1-2倍的醇浓度为80-90%乙醇，充分混合均匀，放置过夜，使其沉淀，次日取其上清液过滤后得到滤液，沉淀物用醇浓度为50-60%的乙醇洗净，收集洗液并与滤液合并，减压收回乙醇后，移置放冷处，静置0.5-1小时，使沉淀完全，过滤，滤液低温蒸发，获得膏状物；

第三步：将膏状物放入喷雾干燥机中干燥，保证进风温度在180℃-200℃，出风温度70℃-90℃，随后粉碎成300目-400目，获得粉末状中药组合物散剂。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本发明的药物组合物能克服现有技术中的中药和西药的各种缺陷，用于防治鸡曲霉菌病可提高患病鸡的机体免疫力，疗程较短，疗效较好，治愈后不易复发，无耐药性，长期应用无耐药性，无药物残留，成本价格低廉。

具体实施方式

本发明提供了一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，中药组合物包括以下原料药材：橙皮、白前、香附、旋覆花、栝楼皮、延胡索、苦杏仁、天浆壳、紫菀、吉祥草、猪仔笠、明党参、石米、连翘、铁马鞭、寄生黄、素兴花、夏枯草、海藻、老君须、黄毛榕、刺五加、太白参、地瓜藤、母草、六月雪和合萌。

各原料药材的药理如下：

橙皮：黄果皮、理陈皮。为芸香科植物甜橙的果皮。冬季或春初，收集剥下的果皮，晒干或烘干。性温，味甘苦，无毒。理气，化痰，健脾，导滞。

白前：鹅管白前、竹叶白前，本品为萝藦科植物柳叶白前或芫花叶白前的干燥根茎及根。秋季采挖，洗净，晒干。辛、苦，微温。归肺经，降气，消痰，止咳。

香附：莎草、香附子、雷公头、三棱草、香头草、回头青、雀头香，辛、微苦、微甘，平。归肝、脾、三焦经。行气解郁，调经止痛。

旋覆花：金沸草、六月菊、鼓子花、滴滴金、小黄花子、金钱花、驴儿菜，本品为菊科植物旋覆花或欧亚旋覆花的干燥头状花序。夏、秋二季花开放时采收，除去杂质，阴干或晒干。苦，辛、咸，微温。归肺、脾、胃、大肠经。降气，消痰，行水，止呕。

栝楼皮：栝楼壳，瓜壳。为葫芦科植物栝楼或双边栝楼等的果皮。9～10月采收果实。对半切开，取出果肉和种子，将果皮洗净，先翻出里面晾晒，后晒外面。如遇雨天，应烘干，以免霉烂，烘时勿使火力过旺，并应依次翻动，以免烘熟。甘苦，微凉。入肺、胃经。润肺化痰，利气宽胸。

延胡索：玄胡素、元胡。本品为罂粟科植物延胡索的干燥块茎。夏初茎叶枯萎时采挖，除去须根，洗净，置沸水中煮至恰无白心时，取出，晒干。辛、苦，温。归肝、脾经。活血，利气，止痛。

苦杏仁：本品为蔷薇科植物山杏（苦杏）、西伯利亚杏（山杏）、东北杏或杏的干燥成熟种子。夏季采收成熟果实，除去果肉及核壳，取出种子，晒干。苦，微温。归肺、大肠经。降气止咳平喘，润肠通便。

天浆壳：天将壳，萝藦荚。为萝藦科植物萝藦的果壳。秋季采收成熟果实，剥取果壳晒干。咸，平。清肺化痰。

紫菀：紫苑、小辫儿、夹板菜、驴耳朵菜、软紫菀，本品为菊科植物紫菀的干燥根及根茎。春、秋二季采挖，除去有节的根茎（习称“母根”）和泥沙，编成辫状晒干，或直接晒干。辛，苦，温。归肺经。润肺下气，消痰止咳。

吉祥草：小青胆、小叶万年青、玉带草、观音草，为百合科吉祥草属植物吉祥草，以全草入药。全年可采，洗净，鲜用或切段晒干。甘，平。润肺止咳，祛风。

猪仔笠：地草果、毛瓣花、岗菊、雀脷珠、山葛。豆科毛瓣花属植物猪仔笠，以块根入药。秋季采，洗净晒干。甘、微涩，平。清热解毒，生津止渴，止咳化痰。甘，平。

明党参：明沙参、粉沙参、山花。本品为伞形科植物明党参的干燥根。4～5月采挖，除去须根，洗净，置沸水中煮至无白心，取出，刮去外皮，漂洗，干燥。甘、微苦，微寒。归肺、脾、肝经。润肺化痰，养阴和胃。

石米：小石枣子、小羊耳蒜。兰科羊耳蒜属植物石米，以全草入药。全年可采，晒干。甘，微寒。清热，润肺止咳。

连翘：连壳、黄花条、黄链条花、黄奇丹、青翘、落翘。本品为木犀科植物连翘的干燥果实。秋季果实初熟尚带绿色时采收，除去杂质，蒸熟，晒干，习称“青翘”；果实熟透时采收,晒干，除去杂质，习称“老翘”。苦，微寒。归肺、心、小肠经。清热解毒，消肿散结。

铁马鞭：野花生。豆科胡枝子属植物铁马鞭，以根及全株入药。夏秋采，晒干。苦、辛，平。清热散结，活血止痛，行水消肿。

寄生黄：为蛇菇科植物筒鞘蛇菇的全草。秋季采收。辛，平。理气健胃，清热利湿。

素兴花：野素馨、鸡爪花、素馨花，为木犀科植物多花素馨的全株及花。苦；微辛；性凉。行气；活血；止痛；清热散结。

夏枯草：棒槌草、铁色草、大头花、夏枯头，本品为唇形科植物夏枯草的干燥果穗。夏季果穗呈棕红色时采收，除去杂质，晒干。辛、苦，寒。归肝、胆经。清火，明目，散结，消肿。

海藻：本品为马尾藻科植物海蒿子或羊栖菜的干燥藻体。前者习称“大叶海藻”，后者习称“小叶海藻”。夏、秋二季采捞，除去杂质，洗净，晒干。苦、咸，寒。归肝、胃、肾经。软坚散结，消痰，利水。

老君须：婆婆针线包，正骨草、婆婆衣、绒针，白薇、竹灵消，恶牛皮消、牛角风，九连台。为萝藦科植物雪里蟠桃的根及根茎（亦有用全株者）。夏、秋采挖，除去地上部分，晒干。辛，平。补肾，健脾，化毒。

黄毛榕：老虎掌、老鸦风、大赦婆树、毛棵。桑科黄毛榕，以根皮入药。甘，平。健脾益气，活血祛风。

刺五加：本品为五加科植物刺五加的干燥、根及根茎或茎。春、秋二季采收，洗净，干燥。辛、微苦，温。归脾、肾、心经。益气健脾，补肾安神。

太白参：太白洋参、黑洋参。甘微苦，温。补虚，健脾胃，消炎止痛。

地瓜藤：地石榴，过江龙、土瓜，野地瓜，地蜈蚣，牛马藤、过石龙，地枇杷、过山龙。为桑科植物地瓜的茎、叶。9～10月采收，晒干。苦，寒。清热，利湿，活血，解毒。

母草：四方草、小叶蛇针草、铺地莲，四方拳草、蛇通管、气痛草。为玄参科植物母草的全草。夏、秋采收。微苦淡，凉。清热利湿，解毒。

六月雪：白马骨、满天星、路边姜、天星木、路边荆、鸡骨柴。为茜草科六月雪属植物六月雪，以全株入药。全年可采。洗净鲜用或切段晒干。淡、微辛，凉。疏风解表，清热利湿，舒筋活络。

合萌：水茸角，合明草，水皂角，木排豆、木稗，独木根、野皂角、大样夜合草，禾镰树子、梳子树，野含羞草、蜈蚣杨柳、野槐树、夜关门，禾镰草、野兰，野鸭树草、野寒豆、野豆萁，海柳、拉田草。为豆种植物田皂角的全草。甘淡，寒。清热，去风，利湿，消肿，解毒。

以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。

实施例1中药组合物1

本发明实施例提供了一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，由以下重量的原料药材制成：橙皮29g、白前12g、香附19g、旋覆花25g、栝楼皮29g、延胡索18g、苦杏仁3g、天浆壳22g、紫菀24g、吉祥草19g、猪仔笠25g、明党参21g、石米30g、连翘26g、铁马鞭21g、寄生黄17g、素兴花17g、夏枯草22g、海藻17g、老君须18g、黄毛榕22g、刺五加28g、太白参25g、地瓜藤19g、母草18g、六月雪17g和合萌16g。

中药组合物的剂型为粉针剂，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述原料药材按比例混合，放入超微粉碎机中粉碎成3μm体积平均粒径的微米级颗粒和粒径小于0.1μm体积平均粒径的纳米级颗粒组成的混合粉料，所述混合粉料的得粉率至少为95%；

第二步，在第一步获得的混合粉料中加入相对于所述混合粉料的质量4倍的醇浓度为90%的乙醇，搅拌溶解获得乙醇溶液，将乙醇溶液在9℃的条件下静置30小时，采用渗漉法以每分钟2ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，浓缩并干燥，并在此放入超微粉碎机中粉碎50分钟，获得4μm体积平均粒径的微米级颗粒和粒径小于0.1μm体积平均粒径的纳米级颗粒组成的混合粉料，所述混合粉料的得粉率至少为95%；

第三步，取第二步获得的混合粉料15g，加入丙二醇40g，加200ml注射用水，搅拌使其溶解，进一步加注射用水至1000ml，再加入1.5g针用活性炭，充分搅拌40分钟；脱炭过滤；用0.23μm微孔滤膜过滤；冷冻干燥得无菌粉末，分装灌封。

实施例2中药组合物2

本发明实施例提供了用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，由以下重量份数的原料药材制成：橙皮32g、白前15g、香附24g、旋覆花15g、栝楼皮35g、延胡索27g、苦杏仁2g、天浆壳14g、紫菀28g、吉祥草22g、猪仔笠29g、明党参25g、石米25g、连翘18g、铁马鞭16g、寄生黄21g、素兴花15g、夏枯草18g、海藻21g、老君须14g、黄毛榕20g、刺五加25g、太白参20g、地瓜藤17g、母草15g、六月雪16g和合萌14g。

中药组合物的剂型为散剂，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述中药组合物中的各组分按比例混合，投入粉碎机进行粉碎或直接切碎，装入煎煮容器中，加入适量水使其浸没药材，浸泡10分钟后，加热至沸腾40分钟后，分离煎出液，药渣再次加水进行煎煮3次，分离收集每次的煎出液，再经过过滤后，取滤液弃滤渣；

第二步，待滤液冷却后，加入相对于浓缩后液体重量1倍的醇浓度为80%乙醇，充分混合均匀，放置过夜，使其沉淀，次日取其上清液过滤后得到滤液，沉淀物用醇浓度为60%的乙醇洗净，收集洗液并与滤液合并，减压收回乙醇后，移置放冷处，静置0.5小时，使沉淀完全，过滤，滤液低温蒸发，获得膏状物；

第三步：将膏状物放入喷雾干燥机中干燥，保证进风温度在180℃，出风温度70℃，随后粉碎成300目，获得粉末状中药组合物散剂。

实施例3中药组合物3

本发明实施例提供了用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，由以下重量份数的原料药材制成：橙皮25g、白前19g、香附17g、旋覆花20g、栝楼皮26g、延胡索21g、苦杏仁4g、天浆壳18g、紫菀30g、吉祥草17g、猪仔笠32g、明党参16g、石米19g、连翘32g、铁马鞭18g、寄生黄13g、素兴花20g、夏枯草15g、海藻14g、老君须20g、黄毛榕18g、刺五加30g、太白参30g、地瓜藤21g、母草20g、六月雪21g和合萌20g。

中药组合物的剂型为散剂，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述中药组合物中的各组分按比例混合，投入粉碎机进行粉碎或直接切碎，装入煎煮容器中，加入适量水使其浸没药材，浸泡10分钟后，加热至沸腾40分钟后，分离煎出液，药渣再次加水进行煎煮3次，分离收集每次的煎出液，再经过过滤后，取滤液弃滤渣；

第二步，待滤液冷却后，加入相对于浓缩后液体重量1倍的醇浓度为80%乙醇，充分混合均匀，放置过夜，使其沉淀，次日取其上清液过滤后得到滤液，沉淀物用醇浓度为60%的乙醇洗净，收集洗液并与滤液合并，减压收回乙醇后，移置放冷处，静置0.5小时，使沉淀完全，过滤，滤液低温蒸发，获得膏状物；

第三步：将膏状物放入喷雾干燥机中干燥，保证进风温度在180℃，出风温度70℃，随后粉碎成300目，获得粉末状中药组合物散剂。

中药组合物的毒性试验：

1、试验药物

选取橙皮29g、白前12g、香附19g、旋覆花25g、栝楼皮29g、延胡索18g、苦杏仁3g、天浆壳22g、紫菀24g、吉祥草19g、猪仔笠25g、明党参21g、石米30g、连翘26g、铁马鞭21g、寄生黄17g、素兴花17g、夏枯草22g、海藻17g、老君须18g、黄毛榕22g、刺五加28g、太白参25g、地瓜藤19g、母草18g、六月雪17g和合萌16g混合，粉碎成粉末；将获得粉末加入1400g冷水中浸泡25小时，以文火煎煮，煎煮时间为1.5小时，将煎煮液过滤，获得第一滤液，收集滤渣；将过滤获得的滤渣再次加入1400g冷水中，以文火煎煮3次，每次煎煮1小时，过滤并合并过滤液，获得第二滤液；合并两次滤液，减压浓缩除去部分水，获得汤剂，汤剂的生药浓度为3g/ml。

2、试验方法：选用SD大鼠，给予不同浓度(18.0、6.0、2.0g生药/kg)的本发明的中药组合物的汤剂，每天灌胃一次，连续90天，末次给药后24小时各组活杀1/2动物(雌雄各半)，其余1/2动物继续观察2周后活杀。试验期间观察动物的外观、一般行为、摄食量、体重变化，给药后90天和停药2周进行血液学(RBC、HB、网织红细胞、PLT、CT、WBC及分类)和血液生化(AST、ALT、ALP、Glu、BUN、Crca、TP、T.BIL、ALB、CHOL)、尿液生化、脏器系数、病理组织学等指标检查。试验结果表明：本发明的中药添加剂在高、中、低剂量组动物一般状态良好，外观体征、行为活动、进食量和体重增长均无异常变化；三个剂量组及对照组血液学检查、血液生化学、尿液生化检查均在正常范围，组间无显著差异；各组主要脏器组织病理学检查未见明显异常。上述指标停药2周后也未见改变。本试验用药剂量分别为临床用药剂量的180、60、20倍，根据试验结果本发明的中药制剂在高、中、低三个剂量(18.0、6.0、2.0g生药/kg)连续90天给药对大鼠无明显影响，无明确的毒性靶器官和敏感指标，恢复期观察也未见延迟性毒性反应，提示本发明的中药制剂临床应用的剂量安全性较高。

中药组合物的毒性试验：

1、试验药物

选取橙皮32g、白前15g、香附24g、旋覆花15g、栝楼皮35g、延胡索27g、苦杏仁2g、天浆壳14g、紫菀28g、吉祥草22g、猪仔笠29g、明党参25g、石米25g、连翘18g、铁马鞭16g、寄生黄21g、素兴花15g、夏枯草18g、海藻21g、老君须14g、黄毛榕20g、刺五加25g、太白参20g、地瓜藤17g、母草15g、六月雪16g和合萌14g混合，粉碎成粉末；将获得粉末加入1400g冷水中浸泡25小时，以文火煎煮，煎煮时间为1.5小时，将煎煮液过滤，获得第一滤液，收集滤渣；将过滤获得的滤渣再次加入1400g冷水中，以文火煎煮3次，每次煎煮1小时，过滤并合并过滤液，获得第二滤液；合并两次滤液，减压浓缩除去部分水，获得汤剂，汤剂的生药浓度为3g/ml。

2、试验方法：选用SD大鼠，给予不同浓度(18.0、6.0、2.0g生药/kg)的本发明的中药组合物的汤剂，每天灌胃一次，连续90天，末次给药后24小时各组活杀1/2动物(雌雄各半)，其余1/2动物继续观察2周后活杀。试验期间观察动物的外观、一般行为、摄食量、体重变化，给药后90天和停药2周进行血液学(RBC、HB、网织红细胞、PLT、CT、WBC及分类)和血液生化(AST、ALT、ALP、Glu、BUN、Crca、TP、T.BIL、ALB、CHOL)、尿液生化、脏器系数、病理组织学等指标检查。试验结果表明：本发明的中药添加剂在高、中、低剂量组动物一般状态良好，外观体征、行为活动、进食量和体重增长均无异常变化；三个剂量组及对照组血液学检查、血液生化学、尿液生化检查均在正常范围，组间无显著差异；各组主要脏器组织病理学检查未见明显异常。上述指标停药2周后也未见改变。本试验用药剂量分别为临床用药剂量的180、60、20倍，根据试验结果本发明的中药制剂在高、中、低三个剂量(18.0、6.0、2.0g生药/kg)连续90天给药对大鼠无明显影响，无明确的毒性靶器官和敏感指标，恢复期观察也未见延迟性毒性反应，提示本发明的中药制剂临床应用的剂量安全性较高。

中药组合物的毒性试验：

1、试验药物

选取橙皮25g、白前19g、香附17g、旋覆花20g、栝楼皮26g、延胡索21g、苦杏仁4g、天浆壳18g、紫菀30g、吉祥草17g、猪仔笠32g、明党参16g、石米19g、连翘32g、铁马鞭18g、寄生黄13g、素兴花20g、夏枯草15g、海藻14g、老君须20g、黄毛榕18g、刺五加30g、太白参30g、地瓜藤21g、母草20g、六月雪21g和合萌20g混合，粉碎成粉末；将获得粉末加入1400g冷水中浸泡25小时，以文火煎煮，煎煮时间为1.5小时，将煎煮液过滤，获得第一滤液，收集滤渣；将过滤获得的滤渣再次加入1400g冷水中，以文火煎煮3次，每次煎煮1小时，过滤并合并过滤液，获得第二滤液；合并两次滤液，减压浓缩除去部分水，获得汤剂，汤剂的生药浓度为3g/ml。

2、试验方法：选用SD大鼠，给予不同浓度(18.0、6.0、2.0g生药/kg)的本发明的中药组合物的汤剂，每天灌胃一次，连续90天，末次给药后24小时各组活杀1/2动物(雌雄各半)，其余1/2动物继续观察2周后活杀。试验期间观察动物的外观、一般行为、摄食量、体重变化，给药后90天和停药2周进行血液学(RBC、HB、网织红细胞、PLT、CT、WBC及分类)和血液生化(AST、ALT、ALP、Glu、BUN、Crca、TP、T.BIL、ALB、CHOL)、尿液生化、脏器系数、病理组织学等指标检查。试验结果表明：本发明的中药添加剂在高、中、低剂量组动物一般状态良好，外观体征、行为活动、进食量和体重增长均无异常变化；三个剂量组及对照组血液学检查、血液生化学、尿液生化检查均在正常范围，组间无显著差异；各组主要脏器组织病理学检查未见明显异常。上述指标停药2周后也未见改变。本试验用药剂量分别为临床用药剂量的180、60、20倍，根据试验结果本发明的中药制剂在高、中、低三个剂量(18.0、6.0、2.0g生药/kg)连续90天给药对大鼠无明显影响，无明确的毒性靶器官和敏感指标，恢复期观察也未见延迟性毒性反应，提示本发明的中药制剂临床应用的剂量安全性较高。

临床试验

（1）材料准备

四川乐山市某养鸡场,其中三个鸡舍的雏鸡出现不同程度的曲霉菌病症状，随机挑选已确诊的患病鸡320只，作为治疗对比试验对象；另随机抓取健康的雏鸡600只,作为预防对比试验对象。

（2）检测结果：

对50只病死鸡进行剖检，剖检可见气囊和肺部的变化较突出。在肺脏、胸腹部气囊、胸腹腔浆膜、心外膜、肝脏上有米粒大至黄豆粒大的黄白色结节,呈球型,易剥离,质地坚硬呈橡皮样。胸腹部气囊膜增厚,呈云雾状混浊。严重者气囊膜上出现一层白色的渗出物,亦可见整个气囊增厚、混浊,呈皮革样。有的病鸡可发生肺水肿,整个肺脏成为黄白色干酪样物质,切面可见大小不等的圆形黄色结节。

镜检：取病死鸡肝、脾作触片，经革兰氏染色和瑞氏染色，镜检，未见到致病菌。取病鸡肺结节少许于载玻片上加生理盐水一滴，盖上盖玻片，轻压后镜检，见到霉菌孢子及多个菌丝形成的菌丝体。

细菌培养：无菌操作取病料接种于马铃薯琼脂培养基上培养，37℃48h培养，即可见有白色绒毛状菌落，镜检，可见菌丝。72h后菌落增大，颜色变深，镜检可见孢子。

（3）预防对比试验

将随机挑选的600只健康雏鸡随机分成4组（实施例组1、实施例组2、实施例组3和对照组），其中，对照组使用传统鸡饲料饲喂肉鸡。

实施例组1喂传统鸡饲料，并注射实施例1的粉针剂，粉针剂采用皮下注射，每次2g，每天一次，连续注射5天；

实施例组2在传统饲料中添加本发明实施例2中的中药组合物，按照1:100的重量比例添加在饲料中，喂养5天；

实施例组3在传统饲料中添加本发明实施例3中的中药组合物，按照1:100的重量比例添加在饲料中，喂养5天；

对对照组和实施例组1、实施例组2、实施例组3的雏鸡，进行人工感染，观察记录各组鸡的发病率及死亡率，结果如表1所示。

表1预防效果对照表

组别	总数	人工感染数	发病率	死亡数	死亡率	保护率8 -->
							实施例组1	150	150	1.3%	0	0%	100%
实施例组2	150	150	2.7%	0	0%	100%
							实施例组3	150	150	3.3%	1	0.7%	99.3%
对照组	150	150	100%	34	22.7%	77.3%

从表1的数据可知：本发明含有中药组合物的饲料对鸡曲霉菌病有明显的预防效果。

（4）治疗对比试验：

将随机选取的320只患病鸡随机分成4组（中药治疗组1、中药治疗组2、中药治疗组3和西药治疗组），用不同药进行治疗，

其中，中药治疗组1注射实施例1的粉针剂，粉针剂采用皮下注射，每次2g，每天一次，连续注射3天；

中药治疗组2选用实施例2的中药组合物2，按照2:100的重量比例添加在饲料中，喂养3天；

中药治疗组3选用实施例3的中药组合物3，按照2:100的重量比例添加在饲料中，喂养3天；

西药治疗组内服制霉菌素,每100只鸡用50万IU,拌入少量饲料中饲喂,2次/d,连喂3d。在饲料中加喂维生素C粉,每100kg饲料加维生素C100g。

表2治疗效果对照表

组别	发病数	死亡数	死亡率	治愈数	治愈率
						中药治疗组1	80	0	0%	80	100%
中药治疗组2	80	0	0%	80	100%
						中药治疗组3	80	1	1.3%	79	98.7%
西药治疗组	80	15	18.7%	65	81.3%

从表2的数据可知：本发明中药组合物对鸡曲霉菌病的治疗效果明显优于西药治疗组，降低死亡率，提高治愈率。

跟踪病后治愈的鸡，观察其生长状况，结果见表3：

表3各组雏鸡平均体重对照表

组别	总数	治疗前平均体重	治疗开始后56日平均体重	平均日增重
					中药治疗组1	80只	55g	820g	13.7 g/d
中药治疗组2	80只	54g	816g	13.6 g/d
					中药治疗组3	79只	55g	809g	13.5 g/d
西药治疗组	65只	56g	585g	9.4 g/d

从表3的数据可知：与对照组相比，使用本发明药物组合物治疗的雏鸡，受影响小，其平均体重比传统药物治疗的雏鸡分别高出235g、231g和224g，平均日增重高出4.3g/d、4.2g/d和4.1g/d。

典型病例：

李某饲养的15日龄三黄鸡2000羽，咳嗽，精神不振，张口吸气，食欲减少，眼闭合，呈昏睡状，气喘，流鼻汗，甩鼻。经疹断为曲霉菌病。选用实施例1的粉针剂，皮下注射，每次2g，每天一次，注射1天后，病鸡症状明显好转，连续注射3天，痊愈。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物包括以下原料药材：橙皮、白前、香附、旋覆花、栝楼皮、延胡索、苦杏仁、天浆壳、紫菀、吉祥草、猪仔笠、明党参、石米、连翘、铁马鞭、寄生黄、素兴花、夏枯草、海藻、老君须、黄毛榕、刺五加、太白参、地瓜藤、母草、六月雪和合萌。

2.根据权利要求1所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮22-38重量份、白前8-22重量份、香附14-27重量份、旋覆花12-28重量份、栝楼皮24-39重量份、延胡索15-32重量份、苦杏仁1-5重量份、天浆壳11-25重量份、紫菀21-35重量份、吉祥草14-26重量份、猪仔笠22-36重量份、明党参13-29重量份、石米15-35重量份、连翘14-37重量份、铁马鞭12-25重量份、寄生黄10-25重量份、素兴花11-23重量份、夏枯草12-26重量份、海藻11-25重量份、老君须10-23重量份、黄毛榕14-26重量份、刺五加21-35重量份、太白参15-35重量份、地瓜藤12-26重量份、母草11-25重量份、六月雪13-26重量份和合萌11-24重量份。

3.根据权利要求1或2所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮25-32重量份、白前12-19重量份、香附17-24重量份、旋覆花15-25重量份、栝楼皮26-35重量份、延胡索18-27重量份、苦杏仁2-4重量份、天浆壳14-22重量份、紫菀24-30重量份、吉祥草17-22重量份、猪仔笠25-32重量份、明党参16-25重量份、石米19-30重量份、连翘18-32重量份、铁马鞭16-21重量份、寄生黄13-21重量份、素兴花15-20重量份、夏枯草15-22重量份、海藻14-21重量份、老君须14-20重量份、黄毛榕18-22重量份、刺五加25-30重量份、太白参20-30重量份、地瓜藤17-21重量份、母草15-20重量份、六月雪16-21重量份和合萌14-20重量份。

4.根据权利要求1-3任一所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮29重量份、白前12重量份、香附19重量份、旋覆花25重量份、栝楼皮29重量份、延胡索18重量份、苦杏仁3重量份、天浆壳22重量份、紫菀24重量份、吉祥草19重量份、猪仔笠25重量份、明党参21重量份、石米30重量份、连翘26重量份、铁马鞭21重量份、寄生黄17重量份、素兴花17重量份、夏枯草22重量份、海藻17重量份、老君须18重量份、黄毛榕22重量份、刺五加28重量份、太白参25重量份、地瓜藤19重量份、母草18重量份、六月雪17重量份和合萌16重量份。

5.根据权利要求1-3任一所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮32重量份、白前15重量份、香附24重量份、旋覆花15重量份、栝楼皮35重量份、延胡索27重量份、苦杏仁2重量份、天浆壳14重量份、紫菀28重量份、吉祥草22重量份、猪仔笠29重量份、明党参25重量份、石米25重量份、连翘18重量份、铁马鞭16重量份、寄生黄21重量份、素兴花15重量份、夏枯草18重量份、海藻21重量份、老君须14重量份、黄毛榕20重量份、刺五加25重量份、太白参20重量份、地瓜藤17重量份、母草15重量份、六月雪16重量份和合萌14重量份。

6.根据权利要求1-3任一所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中各原料药材的重量份数为：橙皮25重量份、白前19重量份、香附17重量份、旋覆花20重量份、栝楼皮26重量份、延胡索21重量份、苦杏仁4重量份、天浆壳18重量份、紫菀30重量份、吉祥草17重量份、猪仔笠32重量份、明党参16重量份、石米19重量份、连翘32重量份、铁马鞭18重量份、寄生黄13重量份、素兴花20重量份、夏枯草15重量份、海藻14重量份、老君须20重量份、黄毛榕18重量份、刺五加30重量份、太白参30重量份、地瓜藤21重量份、母草20重量份、六月雪21重量份和合萌20重量份。

7.根据权利要求1-6任一项所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的剂型为粉针剂，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述原料药材按比例混合，放入超微粉碎机中粉碎成0.1～10μm体积平均粒径的微米级颗粒和粒径小于0.1μm体积平均粒径的纳米级颗粒组成的混合粉料，所述混合粉料的得粉率至少为95%；

第二步，在第一步获得的混合粉料中加入相对于所述混合粉料的质量3～5倍的醇浓度为85%～95%的乙醇，搅拌溶解获得乙醇溶液，将乙醇溶液在5℃～10℃的条件下静置24～36小时，采用渗漉法以每分钟1～2ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，浓缩并干燥，并在此放入超微粉碎机中粉碎40～60分钟，获得0.1～10μm体积平均粒径的微米级颗粒和粒径小于0.1μm体积平均粒径的纳米级颗粒组成的混合粉料，所述混合粉料的得粉率至少为95%；

第三步，取第二步获得的混合粉料10g～20g，加入丙二醇30g～50g，加200ml注射用水，搅拌使其溶解，进一步加注射用水至1000ml，再加入1g～1.5g针用活性炭，充分搅拌30～50分钟；脱炭过滤；用0.22～0.24μm微孔滤膜过滤；冷冻干燥得无菌粉末，分装灌封。

8.根据权利要求1-6任一项所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的剂型为散剂，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述中药组合物中的各组分按比例混合，投入粉碎机进行粉碎或直接切碎，装入煎煮容器中，加入适量水使其浸没药材，浸泡10-25分钟后，加热至沸腾40-70分钟后，分离煎出液，药渣再次加水进行煎煮2-3次，分离收集每次的煎出液，再经过过滤后，取滤液弃滤渣；

第二步，待滤液冷却后，加入相对于浓缩后液体重量1-2倍的醇浓度为80-90%乙醇，充分混合均匀，放置过夜，使其沉淀，次日取其上清液过滤后得到滤液，沉淀物用醇浓度为50-60%的乙醇洗净，收集洗液并与滤液合并，减压收回乙醇后，移置放冷处，静置0.5-1小时，使沉淀完全，过滤，滤液低温蒸发，获得膏状物；

第三步：将膏状物放入喷雾干燥机中干燥，保证进风温度在180℃-200℃，出风温度70℃-90℃，随后粉碎成300目-400目，获得粉末状中药组合物散剂。

9.一种根据权利要求1-8任一项所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述中药组合物的剂型为粉针剂，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述原料药材按比例混合，放入超微粉碎机中粉碎成0.1～10μm体积平均粒径的微米级颗粒和粒径小于0.1μm体积平均粒径的纳米级颗粒组成的混合粉料，所述混合粉料的得粉率至少为95%；

第二步，在第一步获得的混合粉料中加入相对于所述混合粉料的质量3～5倍的醇浓度为85%～95%的乙醇，搅拌溶解获得乙醇溶液，将乙醇溶液在5℃～10℃的条件下静置24～36小时，采用渗漉法以每分钟1～2ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，浓缩并干燥，并在此放入超微粉碎机中粉碎40～60分钟，获得0.1～10μm体积平均粒径的微米级颗粒和粒径小于0.1μm体积平均粒径的纳米级颗粒组成的混合粉料，所述混合粉料的得粉率至少为95%；

第三步，取第二步获得的混合粉料10g～20g，加入丙二醇30g～50g，加200ml注射用水，搅拌使其溶解，进一步加注射用水至1000ml，再加入1g～1.5g针用活性炭，充分搅拌30～50分钟；脱炭过滤；用0.22～0.24μm微孔滤膜过滤；冷冻干燥得无菌粉末，分装灌封。

10.一种根据权利要求1-8任一项所述的用于防治鸡曲霉菌病的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述中药组合物的剂型为散剂，其制备方法包括以下步骤：

第一步，将所述中药组合物中的各组分按比例混合，投入粉碎机进行粉碎或直接切碎，装入煎煮容器中，加入适量水使其浸没药材，浸泡10-25分钟后，加热至沸腾40-70分钟后，分离煎出液，药渣再次加水进行煎煮2-3次，分离收集每次的煎出液，再经过过滤后，取滤液弃滤渣；

第二步，待滤液冷却后，加入相对于浓缩后液体重量1-2倍的醇浓度为80-90%乙醇，充分混合均匀，放置过夜，使其沉淀，次日取其上清液过滤后得到滤液，沉淀物用醇浓度为50-60%的乙醇洗净，收集洗液并与滤液合并，减压收回乙醇后，移置放冷处，静置0.5-1小时，使沉淀完全，过滤，滤液低温蒸发，获得膏状物；

第三步：将膏状物放入喷雾干燥机中干燥，保证进风温度在180℃-200℃，出风温度70℃-90℃，随后粉碎成300目-400目，获得粉末状中药组合物散剂。